DK148775B

DK148775B - PROCEDURE FOR THE PRODUCTION OF OELURT

Info

Publication number: DK148775B
Application number: DK549577A
Authority: DK
Inventors: Kazuo Yoshioka; Naoki Hashimoto; Hidemasa Hidaka; Toru Oneda
Original assignee: Kirin Brewery; Meiji Seika Co
Priority date: 1976-12-11
Filing date: 1977-12-09
Publication date: 1985-09-23
Also published as: DE2755067B2; GB1540552A; NL189677C; DE2755067A1; FR2378853B1; CA1089381A; DK148775C; NL7713669A; CH628372A5; FR2378853A1; DK549577A; DE2755067C3

Description

i 1487 7 5in 1487 7 5

Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af ølurt ved enzymatisk behandling af stivelse-holdigt materiale.The invention relates to a process for the production of beer wort by enzymatic treatment of starch-containing material.

Ved brygning underkastes som bekendt humiet 5 urt en alkoholforgæring under anvendelse af bryggerigær, og urten fremstilles ved mæskning af bygmalt, og om nødvendigt af yderligere stivelseholdigt materiale, med en gruppe maltenzymer, der er produceret under maltningen. Derfor kræver en almindelig fremstilling 10 af ølurt som en væsentlig foranstaltning en såkaldt maltningsproces til fremstilling af malt ved støbningen og spiringen af byggen og dens behandling på maltkølle.By brewing, as is well known, humi 5 herb is subjected to an alcohol fermentation using brewer's yeast, and the herb is prepared by mixing barley malt and, if necessary, of additional starch-containing material, with a group of malt enzymes produced during malting. Therefore, an ordinary preparation of beer herb as an essential measure requires a so-called malting process for the preparation of malt in the casting and germination of the barley and its treatment on malt.

Under maltningsprocessen modificeres forskellige komponenter af byggen, som f.eks. stivelse, og der 15 dannes en gruppe enzymer, der er nødvendige for mæskningen.During the malting process, various components of the barley are modified, e.g. starch and a group of enzymes necessary for the mixing is formed.

Under mæskningsprocessen ekstraheres de opløselige materialer, der er til stede i malten, og et yderligere stivelseholdigt materiale, og de uopløselige 20 materialer opløses og nedbrydes af maltenzymerne.During the mixing process, the soluble materials present in the malt are extracted and a further starch-containing material, and the insoluble materials are dissolved and degraded by the malt enzymes.

Hovedformålet med maltningen er at få dannet en gruppe enzymer, der er nødvendige for mæskningen. Denne maltningsproces er imidlertid tidsrøvende, kræver mange faciliteter og medfører en kompliceret proceskontrol.The main purpose of malting is to form a group of enzymes necessary for the mixing. However, this malting process is time consuming, requires many facilities and involves complicated process control.

25 Derfor har undgåelsen af maltningsprocessen, hvor malten er erstattet med umaltet byg og externe enzymer, været foreslået tidligt i USA-patent nr.25 Therefore, the avoidance of the malting process, in which the malt has been replaced by unmalted barley and external enzymes, has been proposed early in United States Pat.

3.081,172 (1963), og siden da har man gjort mange forsøg i denne retning. For at brygge øl, der har en god 30 smag, er det nødvendigt at fremstille urt, hvis specielle komponenter er inden for et særligt område. Først og fremmest er det ved stivelsenedbrydningen, der er det vigtigste ved brygningen, vigtigt at fremstille for-gærbare sukkerarter og dextriner på et vist trin i 35 urten under mæskningsprocessen.3,081,172 (1963), and since then many attempts have been made in this direction. To brew beer that has a good 30 flavors, it is necessary to produce herb whose special components are within a particular range. First of all, in the starch degradation, which is most important in brewing, it is important to prepare fermentable sugars and dextrins at a certain stage in the herb during the mixing process.

De forgærbare sukkerarter er nødvendige som hovednæringsmiddel for bryggerigæren. Dersom disse sukkerarter mangler, sker der dårlig fremadskriden af 148775 2 forgæringen, hvilket resulterer i en uafbalanceret smag af det endelige øl. Dextrinerne bidrager til kolloidegenskaben og sitiagsrigdommen ved øl. Det er meget vigtigt at kontrollere dannelsen af forgær-5 bare sukkerarter og dextriner i urten på et ønsket niveau afhængig af den type øl, der skal brygges, for derved at frembringe øl med god smag. Imidlertid er umaltet byg besværligere at nedbryde end malt, fordi enzymdannelsen og modificeringen af stivelsen 10 i bygkornene ikke ér tilfredsstillende. Det synes som om den enzymatiske nedbrydning af bygstivelse til fremstilling af ølurt indtil dato ikke har været særlig succesrig. Når malt erstattes fuldstændig af umaltet byg og et externt enzym, har det været 15 umuligt at opnå den tilstrækkelige nedbrydning af bygstivelse under mæskningen således som anført ovenfor, og således at fremstille forgærbare sukkerarter i tilstrækkelig mængde. Den tilsyneladende slutforgæringsgrad af urt, fra byg og enzymer, er lavere, end den 20 der fås fra den konventionelle urt fra malt.The fermentable sugars are needed as the main food for the brewer's yeast. If these sugars are missing, poor progress is made by the fermentation, which results in an unbalanced taste of the final beer. The dextrins contribute to the colloidal property and the richness of beer in beer. It is very important to control the formation of fermentable sugars and dextrins in the herb at a desired level, depending on the type of beer to be brewed, thereby producing good-tasting beers. However, unmalted barley is more difficult to decompose than malt because the enzyme formation and modification of the starch 10 in the barley grains is not satisfactory. It seems that the enzymatic degradation of barley starch for the production of beer herb has so far not been very successful. When malt is completely replaced by unmalted barley and an external enzyme, it has been impossible to achieve the sufficient degradation of barley starch during the mashing as set forth above, and thus to produce digestible sugars in sufficient quantity. The apparent final fermentation rate of herb, from barley and enzymes, is lower than the 20 obtained from the conventional herb from malt.

Derfor er det stadigvæk nødvendigt at anvende malt, når det drejer sig om mæskning af byg med eksterne enzymer. I denne forbindelse skal f.eks. henvises til Eur, Brew. Conv., Proc., 149 (1971); 25 j. Inst. Brewing, 80, 206 (1974); MB AA, TECHNICAL QUATERLY, 9, 12 (1972); BREWER' DIGEST, July, 56 (1969} og britisk patentbeskrivelse nr. 1,303,644.Therefore, it is still necessary to use malt when it comes to mixing barley with external enzymes. In this connection, e.g. refer to Eur, Brew. Conv., Proc., 149 (1971); 25 j. Inst. Brewing, 80, 206 (1974); MB AA, TECHNICAL QUATERLY, 9, 12 (1972); BREWER 'DIGEST, July, 56 (1969} and British Patent Specification No. 1,303,644.

Den almindelige fremgangsmåde ved urtfremstilling i byg-externenzymbrygning er som følger: Byg, som 30 hovedråmaterialet, anbringes i et mæskningskar med vand, malt og et externt enzym. Opslæmningen holdes ved en temperatur på 45 til 50°C især af hensyn til proteinnedbrydningen, opvarmes til 60 til 65°C og holdes ved denne temperatur især for dannelsen af 35 forgærbare sukkerarter, Mæskningsdiagrammet er ikke væsentligt forskelligt fra mæskningsdiagrammet ved konventionel mæskning af malt.The usual process for herb preparation in barley external enzyme brewing is as follows: Barley, like the main raw material, is placed in a water-malt mixing vessel, malt and an external enzyme. The slurry is kept at a temperature of 45 to 50 ° C especially for the sake of protein degradation, heated to 60 to 65 ° C and kept at this temperature especially for the formation of 35 fermentable sugars. The mesh diagram is not significantly different from the mesh diagram of conventional malt malting.

På den anden side har man også foreslået og 148775 3 udført ikke alene undersøgelser for at udvælge externe enzymer, der er velegnet til byg-enzymbrygning, men også forsøg på at modificere egenskaberne ved bygkornene på en sådan måde, at deres komponenter, som 5 f.eks. stivelse, nedbrydes lige så let som i malt.On the other hand, it has also been proposed and carried out not only studies to select external enzymes suitable for barley enzyme brewing, but also attempts to modify the properties of barley grains in such a way that their components such as 5 .g. starch, decomposes as easily as in malt.

F.eks. har man foreslået en foropvarmning af byg for at opløseliggøre den. I dette tilfælde udføres forsukringen af den opløseliggjorte byg under tilsætning af malt som en β-amylasekilde, fordi forbehandlingen 10 af bygkornene ved høje temperaturer inaktiverer den latente β-amylase i kornene. Der henvises til USA-patentbeskrivelserne nr. 3.712.820, 3.713.840 og 3.719.500.Eg. a preheating of barley has been proposed to dissolve it. In this case, the solubilization of the solubilized barley is carried out with the addition of malt as a β-amylase source, because pretreatment 10 of the barley grains at high temperatures inactivates the latent β-amylase in the grains. Reference is made to U.S. Patent Nos. 3,712,820, 3,713,840, and 3,719,500.

Et forsøg på at fremstille ølurt uden an-15 vendelse af malt i det hele taget ved at koge byg og en yderligere mængde stivelseholdigt materiale efterfulgt af enzymatisk behandling er velkendt. I dette tilfælde, da sukkersirup tilsættes i en mængde på 3 gange byggens mængde (således som beskrevet i 20 japansk offentliggjort patentansøgning nr. 4428/65), beskrives denne proces ikke helt som en fuldstændig erstatning af malt med byg og enzymer.An attempt to make beer herb without the use of malt at all by boiling barley and a further amount of starchy material followed by enzymatic treatment is well known. In this case, since sugar syrup is added in an amount of 3 times the amount of barley (as described in Japanese Patent Application Laid-Open No. 4428/65), this process is not fully described as a complete replacement of malt with barley and enzymes.

Skønt det som beskrevet ovenfor ved produktionen af ølurt ved enzymatisk behandling af byg først og 25 fremmst er et meget vigtigt krav, at den tilsyneladende slutforgæringsgrad af urten ud fra byg og enzymer kan sammenlignes med den almindelige urts ud fra malt, er det også vigtigt, at sammensætningen af de nitrogen-holdige forbindelser i urt fra byg og enzymer kan 30 sammenlignes med sammensætningen i urten fra malt.Although as described above in the production of beer herb by enzymatic treatment of barley first and foremost 25 is a very important requirement that the apparent final fermentation rate of the herb from barley and enzymes can be compared with the regular herb from malt, it is also important, that the composition of the nitrogen-containing compounds in herbs from barley and enzymes can be compared with the composition in the herb from malt.

Med hensyn til nitrogenholdige forbindelser, som er vigtige komponenter sammen med kulhydraterne, er det nødvendigt, at tilstrækkelige mængder aminosyrer fremstilles, og at peptider også forefindes i passende 35 omfang.In the case of nitrogenous compounds which are important components together with the carbohydrates, it is necessary that sufficient amounts of amino acids be prepared and that peptides are also present to the appropriate extent.

Lavmolekylære nitrogenholdige forbindelser herunder aminosyrer er nødvendige som hovednæringsmiddel for bryggerigær. Dersom der mangler disse 148775 4 nitrogenholdige forbindelse, foregår forgæringen af urten ikke på normal måde, og smagsegenskabernes afbalancering i det derved fremkomne øl er ikke normalt. På den anden side bidrager 5 højmolekylære nitrogenholdige forbindelser til de kolloidale egenskaber og smagsfylden ved øl. Følgelig er det ved fremstilling af ølurt også et vigtigt krav ved fremstillingen af øl, der har en god smag, at indholdet af lavmolekylære nitrogenholdige forbindelser 10 og højmolekylære nitrogenholdige forbindelser indstilles på et niveau inden for det ønskede område.Low molecular weight nitrogenous compounds including amino acids are needed as the main food for brewer's yeast. If these nitrogenous compounds are lacking, the fermentation of the herb does not take place in the normal way, and the balancing of the flavors in the resulting beer is not normal. On the other hand, 5 high molecular weight nitrogenous compounds contribute to the colloidal properties and flavor of beer. Accordingly, in the production of beer herb, it is also an important requirement in the production of beer having a good taste that the content of low molecular weight nitrogenous compounds 10 and high molecular weight nitrogenous compounds be set at a level within the desired range.

Ved den hidtil kendte teknik i forbindelse med enzymatisk behandling af byg, har fuldstændig erstatning af malt med byg og externe enzymer resulteret i 15 en sammensætning af nitrogenholdige forbindelser i den fremkomne urt, der er forskellig fra den, der fås i konventionel urt fra malt. I konventionel urt fremstillet ud fra malt er forholdet mellem formol-nitrogen, der angiver mængden af lavmolekylære nitrogen-20 holdige forbindelser, og det totale nitrogenindhold ca. 1:3, medens forholdet i urt, fremstillet når man fuldstændig erstatter malt med byg og et externt enzym, er ca. 1:4. Der henvises til Inst. Brew. Australia og New Zealand Sec. Ill (1966).By the prior art in the enzymatic treatment of barley, complete replacement of malt with barley and external enzymes has resulted in a composition of nitrogenous compounds in the resulting herb different from that obtained in conventional herb from malt. In conventional herb prepared from malt, the ratio of formol nitrogen indicating the amount of low molecular weight nitrogen-containing compounds to the total nitrogen content is approx. 1: 3, while the ratio in herb produced when completely replaced by malt with barley and an external enzyme is approx. 1: 4. Please refer to Inst. Brew. Australia and New Zealand Sec. Ill (1966).

25 Ved den enzymatiske behandling af byg har lavmolekylære nitrogenholdige forbindelser i urten en almindelig tendens til at være i underskud, når man sammenligner med konventionel urt, således som vist i Eur. Brew. Conv. Proc. Congr. 283 (1967), og selv 30 om den enzymatiske behandling udføres sammen med ca.25 In the enzymatic treatment of barley, low molecular weight nitrogenous compounds in the herb have a general tendency to be in deficit when compared with conventional herb, as shown in Eur. Brew. Conv. Proc. Congr. 283 (1967), and even 30 on the enzymatic treatment are carried out together with ca.

20% malt, forbliver denne tendens uforandret. Der henvises til USA-patentbeskrivelse nr. 3.713.840,20% painted, this trend remains unchanged. Reference is made to U.S. Patent Specification No. 3,713,840,

Brewers' Digest. Juli, 56 (1969) og Process Biochemistry,Brewers' Digest. July, 56 (1969) and Process Biochemistry,

August, 46 (1970). Derfor vil, dersom der ved enzymatisk 35 behandling af byg gøres et forsøg på at tilpasse niveauet af total nitrogen'i urten med niveauet i konventionel urt fra malt, lavmolekylære nitrogenforbindelser være utilstrækkelig som næringsmiddel for 148775 5 bryggerigær.August, 46 (1970). Therefore, if enzymatic treatment of barley is attempted to adjust the level of total nitrogen in the herb with the level of conventional herb from malt, low molecular weight nitrogen compounds would be insufficient as a nutrient for brewer's yeast.

Hvis man derimod på den anden side forsøger at tilpasse niveauet af lavmolekylære nitrogenholdige forbindelser som næringskilde for bryggerigær med 5 niveauet for konventionel urt fra malt, vil mængden af total nitrogen være i overskud. Det er meget vanskeligt at brygge øl, der har en god smag ud fra disse urter, hvis sammensætning af nitrogenholdige forbindelser er forskellig fra sammensætningen af konventionel urt.On the other hand, if one tries to adjust the level of low molecular weight nitrogenous compounds as a source of brewing yeast nutrient with the level of conventional herb from malt, the amount of total nitrogen will be in excess. It is very difficult to brew beer that has a good taste from these herbs whose composition of nitrogenous compounds is different from the composition of conventional herb.

10 Det er også kendt, at visse mikroorganismer, der hører til Streptomyces-slægten, danner en amylase, der har en særlig enzymatisk aktivitet således som beskrevet i japansk offentliggjort patentansøgning nr. 1871/74; USA-patentbeskrivelse nr. 3.804.717; engelsk patentbe-15 skrivelse nr. 1.377.223; canadisk patentbeskrivelse nr.It is also known that certain microorganisms belonging to the Streptomyces genus form an amylase having a particular enzymatic activity as described in Japanese Patent Application Publication No. 1871/74; U.S. Patent Specification No. 3,804,717; English Patent Specification No. 1,377,223; Canadian patent specification no.

973.492, dansk fremlæggelsesskrift nr. 143.906 og fransk offentliggjort patentansøgning nr. 7.138.545 (offentliggørelse nr. 2.110.070). Denne amylase er varmestabil og har en høj evne til dannelse af maltose såvel som en 20 flydendegørende evne. Hvis denne amylase imidlertid får lov at virke direkte på rå byg, vil den tilsyneladende slutforgæringsgrad og sammensætningen af de nitrogenholdige forbindelser i den herved fremkomne urt ikke være sammenlignelig med, hvad man opnår fra den urt, der kom-25 mer fra malt.973,492, Danish Patent Publication No. 143,906 and French Patent Application No. 7,138,545 (Publication No. 2,110,070). This amylase is heat stable and has a high ability to form maltose as well as a liquid rendering ability. However, if this amylase is allowed to act directly on raw barley, the apparent final fermentation rate and the composition of the nitrogenous compounds in the resulting herb will not be comparable to that obtained from the herb derived from malt.

Dette kan imidlertid opnås ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, som er ejendommelig ved: 1) at man forklistrer et stivelseholdigt 30 materiale, der som·hovedbestanddel indeholder byg og yderligere fra 0-80 vægt%, baseret på vægten af byggen, af et stivelseholdigt materiale forskelligt fra byg, og 2) at man lader en amylase indvirke på det forklistrede stivelseholdige materiale for at for- 35 sukre dette, hvilken amylase er frembragt ved aerob dyrkning af Streptomyces hygroscopicus ATCC nr.However, this can be achieved by the method of the present invention, which is characterized by: 1) prescribing a starch-containing material containing, as a main ingredient, barley and further from 0-80% by weight, based on the weight of the barley, and 2) allowing an amylase to act on the pristine starchy material to assure this, which amylase is produced by aerobically culturing Streptomyces hygroscopicus ATCC no.

21722, Streptomyces viridochromogenes ATCC nr, 21724, Streptomyces albus ATCC nr. 21725, Streptomyces 148775 6 tosaensis ATCC nr. 21723, Streptomyces aureo-faciens ATCC 31379, Streptomyces flavus ATCC 31378 eller Streptomyces hygroscopicus var. angustomyceticus ATCC 31380, og hvilken amylase under anvendelse af 5 stivelse som substrat har optimum-pH i området 4,5- 5,0, en minimal stivelsehydrolysegrad på ikke mindre end 75% af den teoretiske maltosemængde, medens forholdet mellem glucose og maltose produceret ud fra stivelsen ved den hydrolytiske virkning af amylasen 10 ikke er større end 0,06:1 udtrykt på vægtbasis.21722, Streptomyces viridochromogenes ATCC No. 21724, Streptomyces albus ATCC No. 21725, Streptomyces 148775 6 tosaensis ATCC No. 21723, Streptomyces aureo-faciens ATCC 31379, Streptomyces flavus ATCC 31378 or Streptomyces hygroscopicus var. angustomyceticus ATCC 31380, and which amylase using 5 starch as a substrate has optimum pH in the range of 4.5 to 5.0, a minimum starch hydrolysis rate of not less than 75% of the theoretical maltose amount, while the ratio of glucose to maltose produced from the starch by the hydrolytic action of amylase 10 is not greater than 0.06: 1 by weight.

Den anvendte amylase omtales i den følgende beskrivelse med krav som Streptomyces-amylase.The amylase used is described in the following description with claims such as Streptomyces amylase.

Ved denne fremgangsmåde kan man opnå en ølurt, som har tilstrækkelig mængde forgærbare sukkerarter 15 sammenlignet med mængden i konventionel urt, der stammer fra malt,By this method, one can obtain a beer herb which has a sufficient amount of fermentable sugars 15 compared to the amount in conventional herb derived from malt.

Specielt kan man let ved at anvende Streptomyces-amyla-sen frembringe en urt, der viser en tilsyneladende slutforgæringsgrad så høj som f.eks. 87%, således som 20 beskrevet i det efterfølgende eksempel 7.In particular, by using the Streptomyces amyla, one can easily produce a herb which shows an apparent final fermentation rate as high as e.g. 87%, as described in the following Example 7.

Denne egenskab ved Streptomyces-amylasen kan siges at være enestående, fordi forklistringen af byggen som angivet ovenfor forårsager inaktivering af β-amylasen i bygkornene, hvilket, når man anvender 25 andre enzymer end Streptomyces-amylasen, forårsager nedgang i den tilsyneladende slutforgæringsgrad som vist i det efterfølgende eksempel 7. Yderligere resulterer forklistringsbehandlingen i en forbedring af smagen af det fremstillede øl som vist i eksemplerne 30 1-4. Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse gør det således muligt at fremstille ølurt ved behandling af byg kun med Streptomyces-amylase uden malt. 1This property of the Streptomyces amylase can be said to be unique because the barley precursor as indicated above causes inactivation of the β-amylase in the barley, which, when using 25 enzymes other than the Streptomyces amylase, causes a decrease in the apparent final fermentation rate as shown in Figs. The following example 7. Further, the pre-treating treatment results in an improvement in the taste of the beer produced as shown in Examples 30 1-4. Thus, the process of the present invention makes it possible to make beer herb by treating barley only with Streptomyces amylase without malt. 1

Streptomyces-amylase.Streptomyces amylase.

Angående fremstilling og egenskaber af den 7 U 8775 ved den foreliggende fremgangsmåde anvendte Strepto-myces-amylase henvises til ovennævnte trykskrifter.For the preparation and properties of the 7 U 8775 Streptomyces amylase used in the present process, reference is made to the above-mentioned prints.

Om de ovenfor nævnte amylase-producerende Streptomyces-stammer skal yderligere bemærkes følgende: 5 1) Streptomyces aureofaciensstammer er også de- tø poneret i FERM under nr. P606.Further, regarding the above-mentioned amylase-producing Streptomyces strains, note the following: 5 1) Streptomyces aureofaciens strains are also deposited in FERM under No. P606.

2) Streptomyces flavusstammen er også deponeret i FERM under nr. P605.2) The Streptomyces flavus strain is also deposited in FERM under No. P605.

10 3) Streptomyces hygroscopicus var. angusto- myceticusstammen er også deponeret i FERM under nr. P607.3) Streptomyces hygroscopicus var. the angustomycetic strain is also deposited in FERM under No. P607.

4) Streptomyces hygroscopicusstammen er også deponeret i FERM under nr. P.602.4) Streptomyces hygroscopicus strain is also deposited in FERM under No. P.602.

15 Denne stamme er beskrevet i Waksman: "The Actinomycetes", Vol. 2(1961) og "Applied Microbiology", Vol. 10, side 258-263 (1962). Dette er en af de foretrukne stammer, der kan anvendes til fremgangsmåden 20 ifølge opfindelsen.This strain is described in Waksman: "The Actinomycetes", Vol. 2 (1961) and "Applied Microbiology", Vol. 10, pp. 258-263 (1962). This is one of the preferred strains that can be used for the method 20 of the invention.

5) Streptomyces viridochromogenesstammen er også deponeret i FERM under nr. P603.5) The Streptomyces viridochromogenes strain is also deposited in FERM under No. P603.

Denne stamme er beskrevet i Waksmann: "The Actinomycetes", Vol. 2 (1961) og 25 "Journal of Bacteriology", Vol. 85, side 676-690 (1963).This strain is described in Waksmann: "The Actinomycetes", Vol. 2 (1961) and 25 "Journal of Bacteriology", Vol. 85, pp. 676-690 (1963).

Dette er en af de foretrukne stammer, der kan anvendes ved den omhandlede fremgangsmåde.This is one of the preferred strains that can be used in the process of the present invention.

30 6) Streptomyces albusstammen er også deponeret i FERM under nr. P604.30 6) Streptomyces albus strain is also deposited in FERM under No. P604.

Denne stamme er beskrevet i Waksman: "The Actinomycetes", Vol. 2 (1961).This strain is described in Waksman: "The Actinomycetes", Vol. 2 (1961).

Dette er en af de foretrukne stammer, der 35 kan anvendes ved den omhandlede fremgangs måde.This is one of the preferred strains that can be used in the method of the present invention.

148775 8 7) Streptomyces tosaensisstammen er også deponeret i FERM under nr. P601.7) Streptomyces tosaensis strain is also deposited in FERM under No. P601.

Denne stamme er en af de foretrukne stammer, der er anvendelig ved fremgangsmåden ifølge 5 opfindelsen.This strain is one of the preferred strains useful in the method of the invention.

* FERM nummer er et depotnummer i the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology of the Ministry of International 10 Trade and Industry, Japan, Inage, Chiba-Shi,* FERM number is a depository number in the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology of the Ministry of International Trade and Industry, Japan, Inage, Chiba-Shi,

Japan.Japan.

Dyrkningen af disse stammer under aerobe be-1 5 tingelser og opsamlingen og rensningen af den dannede og ophobede amylase i dyrkningsmediet kan udføres ved en hvilken som helst almindelig kendt fremgangsmåde således som det er almindeligt at anvende for Actinomyceter som vist f.eks. i den ovenfor beskrevne 20 japanske patentpublikation nr. 1871/74 og andre litteraturhenvisninger. F.eks. udsås Streptomyces hygroscopicus (ATCC nr. 21722) i et dyrkningsmedium, der består af 2% majsmel, 1% hvedekim og 0,5% Fermamedium (leveret af Trader's Oil Mill Co., Texas, USA), og som 25 har en pH-værdi på 7,0 ved en temperatur på 28°C i 24 timer for at fremstille en udsåningskultur.The cultivation of these strains under aerobic conditions and the collection and purification of the formed and accumulated amylase in the culture medium can be carried out by any commonly known method such as is commonly used for Actinomyceter as shown e.g. in the above-described Japanese Patent Publication No. 1871/74 and other references to literature. Eg. Streptomyces hygroscopicus (ATCC No. 21722) was seeded in a culture medium consisting of 2% maize flour, 1% wheat germ and 0.5% Fermamedium (supplied by Trader's Oil Mill Co., Texas, USA) and having a pH value of 7.0 at a temperature of 28 ° C for 24 hours to produce a seed culture.

Herefter overføres udsåningskulturen til et dyrkningsmedium, der indeholder 12% opløselig stivelse, 3% sojabønnekage og 0,2% kaliumdihydrogenphosphat, og 30 som har en pH-værdi på 7,0, og dyrkningen udføres ved en temperatur på 35°C i 90 timer. Den herved fremkomne kulturbouillon filtreres, og filtratet koncentreres til et væskevolumen på ca. 1/5 af det oprindelige volumen.Then, the seed culture is transferred to a culture medium containing 12% soluble starch, 3% soybean cake and 0.2% potassium dihydrogen phosphate, and 30 having a pH of 7.0, and the culture is carried out at a temperature of 35 ° C for 90 hours. . The resulting culture broth is filtered and the filtrate is concentrated to a volume of liquid of approx. 1/5 of the original volume.

Herefter tilsættes kold ethanol til den koncentrerede 35 opløsning i en mængde på to gange opløsningens for at udfælde amylasen. Den udfældede amylase tørres, hvorved man opnår et råt enzym.Then cold ethanol is added to the concentrated solution in an amount of twice that of the solution to precipitate the amylase. The precipitated amylase is dried to give a crude enzyme.

148775 9148775 9

Et vigtigt træk ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse består i, at den yderligere anvendelse af malt er gjort unødvendig ved at behandle den forklistrede byg med Streptomyces-amylase. Hvis 5 det er nødvendigt, kan malt imidlertid også anvendes i kombination med dette materiale. I stedet for den yderligere anvendelse af malt selv, vil anvendelsen af en ringe mængde af diastase ekstraheret fra malt eller anvendelsen af andre amylaser, proteaser, cellulaser, 10 glucanaser og lignende sammen med Streptomyces-amylasen også være mulig.An important feature of the process of the present invention is that the further use of malt is rendered unnecessary by treating the pre-barley with Streptomyces amylase. However, if necessary, malt may also be used in combination with this material. Instead of the further use of malt itself, the use of a small amount of diastasis extracted from malt or the use of other amylases, proteases, cellulases, glucanases and the like together with the Streptomyces amylase will also be possible.

Stivelsesholdige materialer.Starchy materials.

Det stivelsesholdige materiale, der behandles 15 med Streptomyces-amylase, indeholder som nævnt byg og fra 0 til 80 vægt% baseret på vægten af byggen, af et stivelsesholdigt materiale, der er forskellig fra byg, som f.eks. stivelse, ris, majs, kaoliang, kartoffel, især stivelse af uspirede kornsorter.The starchy material treated with Streptomyces amylase contains, as mentioned, barley and from 0 to 80% by weight based on barley weight, of a starchy material other than barley, such as e.g. starch, rice, maize, kaoliang, potato, especially starch of germinated cereals.

20 Det yderligere stivelsesholdige materiale for skellig fra byg kan eventuelt være forklistret forud.20 The additional starchy material for different from barley may be pre-labeled.

Når det yderligere stivelsesholdige materiale er forklistret, kan forklistringsbehandlingen af dette udføres samtidig med eller adskilt fra forklistringen af byggen.When the additional starch-containing material is prefabricated, the prefabrication treatment thereof may be performed concurrently with or separate from the prefabrication of the barley.

25 Forklistringsbehandlingen i den foreliggende fremgangsmåde kan udføres på en hvilken som helst måde, der er anvendelig til forklistring af stivelse-holdige materialer, Eksempelvis kan man koge byggen i form af korn eller maltskrå. Kogningen omfatter opvarm-30 ning af byggen i nærværelse af vand i en mængde på mindst halvdelen af byggens vægt under tryk ved en temperatur på mindst 1Q0°C, fortrinsvis 110-130°C, i mindst 20 minutter, fortrinsvis 30 til 60 minutter. Kogningen kan også udføres ved gennemledning af damp. Et andet 35 eksempel på forklistringsbehandling er en behandling i en ekstruder under forhøjet tryk og temperatur.The pre-adhesive treatment of the present process may be carried out in any manner useful for the pre-staining of starch-containing materials. For example, the barley may be cooked in the form of grain or malt. The boiling comprises heating the barley in the presence of water in an amount of at least half the weight of the barley under pressure at a temperature of at least 10 ° C, preferably 110-130 ° C, for at least 20 minutes, preferably 30 to 60 minutes. The boiling can also be carried out by steam evaporation. Another example of pre-treatment is a treatment in an extruder under elevated pressure and temperature.

Ekstruderen omfatter som dens hoveddele en opvarmnings- 148775 10 indretning til opvarmning og blødgøring af det materiale, der skal behandles, og et snekkeorgan til fremførsel af det blødgjorte materiale under tryk (se Ind. Eng.The extruder comprises, as its main parts, a heating device for heating and softening the material to be treated, and a screw means for conveying the softened material under pressure (see Ind. Eng.

Chem. £5 970 (1953)). Byggen i form af korn eller malt-5 skrå forklistres i en ekstruder under forhøjede temperatur- og trykbetingelser. Yderligere stivelsesholdig materiale i en mængde på ikke mere end 80 vægt% af byggen kan også gelatineres med byggen.Chem. £ 5,970 (1953)). The barley or malt-oblique barley is precleaned in an extruder under elevated temperature and pressure conditions. Additional starchy material in an amount of not more than 80% by weight of barley may also be gelatinized with barley.

Forklistringsbehandlingen kan hensigtsmæssigt 10 udføres ved kogning i nærværelse af et flydendegørende enzym, som f.eks. cc-amylase, til dannelse af et forklistret og opløseliggjort stivelsesholdigt materiale.Conveniently, the adhesive treatment can be carried out by boiling in the presence of a liquid enzyme, such as e.g. cc-amylase, to form a precleaned and solubilized starch-containing material.

Efter gelatineringsbehandlingen underkastes byggen i våd tilstand, eller efter at den er tørret (f.eks.After the gelatin treatment, the barley is subjected to wet condition or after drying (e.g.

15 til et fugtighedsindhold på ikke mere end 5 vægt%), den omhandlede enzymatiske behandling.15 to a moisture content of not more than 5% by weight), the subject enzymatic treatment.

I en hensigtsmæssig udførelsesform for den foreliggende opfindelse fremstilles det forklistrede stivelsesholdige materiale ved at koge byg og fra 0 til 20 mindre end 80 vægti, baseret på vægten af byggen, af et stivelsesholdigt materiale .forskelligt fra byg, og Streptomyces-amylasen bringes til at indvirke på det forklistrede stivelsesholdige materiale, medens et andet yderligere, fra byg forskelligt stivelsesholdigt 25 materiale i en sådan mængde, at summen af det første og det andet, yderligere stivelsesholdige materiale udgør indtil 80 vægti af byggen, underkastes en opløselig-. gørende behandling og derefter sættes til det forklistrede stivelsesholdige materiale, på hvilket 30 Streptomyces-amylasen indvirker, hvorpå forsukringsbehandlingen fortsættes. Byggen og det stivelsesholdige materiale kan passende sættes til vand, som udgør 2-4 gange mængden af den faste blanding til dannelse af en opslæmning. a-Amylase kan sættes til opslæmningen, el-35 ler til det nævnte andet, yderligere stivelsesholdige materiale, i en mængde på 0,1 til 0,3% af hele mængden af stivelsesholdigt materiale på tør basis, og den resulterende opslæmning opvarmes ved en temperatur på 148775 11 70-90° C i 5-30 minutter for at opløseliggøre stivelsen. Opslæmningen koges ved en temperatur på 100-120°C i 5-30 minutter for at fuldende, at stivelsen bliver opløselig-gjort.In a convenient embodiment of the present invention, the pre-made starchy material is prepared by boiling barley and from 0 to 20 less than 80% by weight of barley, a starchy material different from barley, and the Streptomyces amylase is made to act. on the precast starchy material, while another further, from barley different from starchy material in an amount such that the sum of the first and second additional starchy materials constitutes up to 80 weight of barley is subjected to a soluble. treatment and then added to the pre-labeled starchy material upon which the Streptomyces amylase acts, upon which the sugar treatment is continued. The barley and the starch-containing material may suitably be added to water which constitutes 2-4 times the amount of the solid mixture to form a slurry. α-Amylase may be added to the slurry, or to said second, additional starch-containing material, in an amount of 0.1 to 0.3% of the entire amount of starch-containing material on a dry basis, and the resulting slurry is heated at temperature at 70-90 ° C for 5-30 minutes to solubilize the starch. The slurry is boiled at a temperature of 100-120 ° C for 5-30 minutes to complete the starch being dissolved.

5 Yderligere "stivelsesholdigt materiale" anvendt i den foreliggende beskrivelse med krav kan være sådant, der er blevet underkastet forskellige behandlinger, især enzymatiske behandlinger, udover forklistringsbehandling.Additional "starchy material" used in the present specification with claims may be those which have been subjected to various treatments, in particular enzymatic treatments, in addition to pretreatment.

P.eks. kan den enzymatiske behandling med a-amylase, 10 cellulase eller protease udføres samtidig med, før eller efter forklistringsbehandlingen.P.eks. For example, the enzymatic treatment with α-amylase, cellulase or protease can be performed simultaneously with, before or after the pretreatment treatment.

Mæskningsproces (enzymatisk behandling af stivelse-holdigt materiale).Meshing process (enzymatic treatment of starch-containing material).

15 For at få Streptomyces-amylase til at indvirke på det således fremstillede stivelseholdige materiale, kan der anvendes en hvilken som helst mæskningsproces, der anvendes i konventionel byg-enzym-brygning eller anden passende fremgangsmåde.In order to cause Streptomyces amylase to act on the starch-containing material thus prepared, any molding process used in conventional barley enzyme brewing or other suitable process can be used.

20 Et eksempel på en sådan fremgangsmåde er in fusionsfremgangsmåden, hvor hele opslæmningen underkastes opvarmning i nærværelse af enzym i et enkelt mæskningskar uden opdeling af opslæmningen. I dette tilfælde udføres opvarmningsprocessen på en sådan 25 måde, at den starter ved den laveste temperatur, og at temperaturen efterhånden hæves, eller på en sådan måde, at den starter ved den højeste temperatur, og temperaturen gradvis nedsættes.An example of such a method is the infusion process where the entire slurry is subjected to heating in the presence of enzyme in a single mesh vessel without splitting the slurry. In this case, the heating process is carried out in such a way that it starts at the lowest temperature and the temperature gradually raises, or in such a way that it starts at the highest temperature and the temperature is gradually reduced.

Man kan også anvende dekoktionsmetoden . Denne frem-30 gangsmåde udføres således, at opslæmningen opvarmes i nærværelse af et enzym i et mæskekar, men en del af opslæmningen fjernes og koges i en mæskekedel.The decoction method can also be used. This procedure is carried out so that the slurry is heated in the presence of an enzyme in a sump, but a portion of the slurry is removed and boiled in a sump.

Herefter sendes opslæmningen i mæskekedelen tilbage til mæskekarret med det resultat, at temperaturen af 35 hele opslæmningen hæves.Thereafter, the slurry in the casing is returned to the casing with the result that the temperature of the entire slurry is raised.

Mere specielt sættes f.eks. Streptomyces-amylasen i en mængde på 1-8 mg pr. g byg til blandingen 148775 12 af varmt vand og det stivelseholdige materiale, der først er blevet forklistret og f-lydendegjort på den ovenfor beskrevne måde. Om nødvendigt sættes 1 til 4 mg pr. g byg af papain som et proteolytisk 5 enzym og 1 til 4 mg pr. g byg af en cellulase til opslæmningen. Den resulterende opslæmning holdes ved 45-55°C i 30 til 90 minutter, og bringes herefter på en temperatur på 60 til 65°C, og holdes ved denne temperatur i 30 til 60 minutter. En del af op-10 slæmningen (ca. 1/3 til 1/2 af hele opslæmningen) fjernes og koges i en mæskekedel i 5 til 10 minutter, hvorefter den sendes tilbage til mæskekarret. Under dette trin holdes den tilbageblevne opslæmning i mæskekarret på en temperatur på 60 til 65°C. På denne 15 måde kan fremstilles ølurt, der er velegnet til brygning af øl med en god smag. Det ovenfor anførte kogetrin kan udføres to gange. F.eks, opvarmes den forenede opslæmning efter den ovenfor anførte operation til en temperatur på 70 til 75°C og her-20 efter fjernes ca. 1/3 til 1/2 af opslæmningen igen for at blive kogt i 5 til 10 minutter. Den tilbageblevne opslæmning holdes på en temperatur på 70 til 75°C i 20 til 40 minutter, hvorefter den forenes med den kogte opslæmning.More specifically, e.g. The streptomyces amylase in an amount of 1-8 mg per g of barley for the mixture of hot water and the starch-containing material which has first been pre-clarified and f-sounded in the manner described above. If necessary, add 1 to 4 mg per day. g of papain as a proteolytic 5 enzyme and 1 to 4 mg per gram. g barley of a cellulase for the slurry. The resulting slurry is kept at 45-55 ° C for 30 to 90 minutes, then brought to a temperature of 60 to 65 ° C and maintained at this temperature for 30 to 60 minutes. A portion of the slurry (about 1/3 to 1/2 of the entire slurry) is removed and boiled in a kettle for 5 to 10 minutes, then sent back to the kettle. During this step, the remaining slurry is kept in the vessel at a temperature of 60 to 65 ° C. In this way, beer herbs can be produced which are suitable for brewing beer with a good taste. The above cooking step can be performed twice. For example, after the above operation, the combined slurry is heated to a temperature of 70 to 75 ° C and thereafter, approx. 1/3 to 1/2 of the slurry again to boil for 5 to 10 minutes. The remaining slurry is kept at a temperature of 70 to 75 ° C for 20 to 40 minutes, after which it is combined with the cooked slurry.

25 Det yderligere stivelseholdige materiale ud over byggen behandles fortrinsvis med Streptomyces-amylase sammen med byggen, der er forklistret.The additional starch-containing material in addition to the barley is preferably treated with Streptomyces amylase together with the barley which is pre-coated.

Imidlertid behøver det. yderligere stivelseholdige materiale i dette tilfælde ikke at være til stede fra 30 begyndelsen af byggens mæskningsproces. Dersom det ønskes, kan det yderligere stivelseholdige materiale først være nedbrudt af α-amylase og/eller cellulase og herefter indføres i byggens mæskningsproces.However, it needs to. additional starchy material in this case not to be present from the beginning of the building's mashing process. If desired, the additional starch-containing material may first be degraded by α-amylase and / or cellulase and then introduced into the build-up process.

Den således producerede mæsk filtreres, og 35 filtratets ekstraktindhold (sød urt) indstilles på det ønskede niveau (f.eks. 10-12° Plato). Herefter tilsættes en passende mængde som f.eks. 2 til 5 g/1 humle til sødurten og koges i 1 til 2 timer. HerefterThe mash thus produced is filtered and the extract content (sweet herb) of the filtrate is adjusted to the desired level (eg 10-12 ° Plato). Then, an appropriate amount such as 2 to 5 g / l hops for the sweet herb and cook for 1 to 2 hours. Then

1 -487 7 B1 -487 7 B

13 underkastes den herved fremkomne humlede urt forgæring med bryggerigær.13 is subjected to the resulting hops herb fermentation with brewer's yeast.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen forklares nærmere i de følgende eksempler.The process according to the invention is explained in more detail in the following examples.

55

Eksempel 1 Rå byg kogtes under tryk sammen med samme vægtmængde vand ved en temperatur på 120°C i 30 minutter.Example 1 Raw barley was boiled under pressure with the same weight of water at a temperature of 120 ° C for 30 minutes.

Herefter tørredes den kogte byg i varm luft ved en 10 temperatur på 85°C i 6 timer. Der opnåedes herved forklistret byg.Then the cooked barley was dried in warm air at a temperature of 85 ° C for 6 hours. Prefilled barley was thereby obtained.

Efter at den fremkomne forklistrede byg var formalet, anbragtes 9 kg af den formalede byg i et mæskekar, til hvilket der var sat 30 liter varmt .After the resulting pre-barley had been ground, 9 kg of the ground barley was placed in a mash pot, to which 30 liters of hot had been added.

15 vand med en temperatur på 50°C, 20 g Streptomyces-amylase, 10 g papain og 10 g cellulase. Opslæmningen omrørtes ved en temperatur på 50°C i 60 minutter.15 water with a temperature of 50 ° C, 20 g Streptomyces amylase, 10 g papain and 10 g cellulase. The slurry was stirred at a temperature of 50 ° C for 60 minutes.

3,5 kg majsstivelse, 15 liter varmt vand med en temperatur på 50°C og 10 g α-amylase anbragtes i 20 en kogebeholder. Indholdet af kogeren opvarmedes til en temperatur på 70°C i 10 minutter, og denne temperatur opretholdes i 10 minutter. Derefter hævedes indholdets temperatur til 100°C i 15 minutter og kogtes i 25 minutter. Under denne proces blev majsstivelsen i stigende 25 grad opløseliggjort.3.5 kg of corn starch, 15 liters of hot water with a temperature of 50 ° C and 10 g of α-amylase were placed in a cooking vessel. The contents of the cooker were heated to a temperature of 70 ° C for 10 minutes, and this temperature was maintained for 10 minutes. Then the contents of the contents were raised to 100 ° C for 15 minutes and cooked for 25 minutes. During this process, the corn starch was increasingly dissolved 25 degrees.

Efter at disse processer var løbet til ende, sloges begge opslæmninger sammen, og den herved fremkomne opslæmning opvarmedes til en temperatur på 65°C og holdtes ved denne temperatur i 30 minutter. Her-30 efter overførtes ca, 50% af opslæmningen til en mæske-kedel og kogtes. Den tilbageblevne opslæmning holdtes ved en temperatur på 65°C i 60 minutter i mæske-karret. Under dette trin foregik størstedelen af dannelsen af de forgærbare stikkerarter.After these processes were completed, both slurries were combined and the resulting slurry was heated to a temperature of 65 ° C and maintained at this temperature for 30 minutes. Thereafter, about 50% of the slurry was transferred to a kettle and boiled. The remaining slurry was kept at a temperature of 65 ° C for 60 minutes in the vessel. During this step, most of the formation of the digestible stick species took place.

35 Efter at mæskningsprocessen var afsluttet, for enedes opslæmningerne fra både mæskekarret og mæske-delen og bragtes til en temperatur på 80°C. Herefter filtreredes opslæmningen, og den resulterende kage 14 148775 eftergydedes med varmt vand. Efter at ekstraktindholdet af den fremkomne sødurt var indstillet, kogtes urten med humle. Den fremkomne humlede urt afkøledes og underkastedes forgæring med bryggerigær. Forgæring, lagring, filtrering og aftapning på flasker udførtes på sædvanlig 5 bryggerimåde til fremstilling af øl.After the mixing process was complete, the slurries from both the mesh vessel and the mesh part agreed and brought to a temperature of 80 ° C. The slurry was then filtered and the resulting cake was rinsed with hot water. After the extract content of the resulting sweet wort was adjusted, the herb was cooked with hops. The resulting hops herb was cooled and subjected to fermentation with brewer's yeast. Fermentation, storage, filtration and bottling were carried out in the usual 5 brewery ways for making beer.

Eksempel 2 9 kg formalet byg, 3,5 kg majsstivelse, 10 g α-amylase og 5 g cellulase sattes til 50 liter varmt 10 vand med en temperatur på 50°C, og den herved fremkomne opslæmning holdtes ved en temperatur på 50°C i 30 minutter, opvarmedes til 90°C i 10 minutter, holdtes ved denne temperatur i 10 minutter, og kogtes herefter i 30 minutter. Opslæmningen afkøledes til en temperatur 15 på 50°C, og til denne opslæmning sattes 20 gEXAMPLE 2 9 kg of ground barley, 3.5 kg of corn starch, 10 g of α-amylase and 5 g of cellulase were added to 50 liters of warm water at a temperature of 50 ° C and the resulting slurry was maintained at a temperature of 50 ° C. for 30 minutes, heated to 90 ° C for 10 minutes, kept at this temperature for 10 minutes, and then cooked for 30 minutes. The slurry was cooled to a temperature of 50 ° C and to this slurry 20 g was added

Streptomyces-amylase, 10 g papain og 10 g cellulase.Streptomyces amylase, 10 g papain and 10 g cellulase.

Herefter holdtes opslæmningen ved en temperatur på 50°C i 3o minutter, og derefter bragtes temperaturen op på 65°C.Then the slurry was kept at a temperature of 50 ° C for 30 minutes and then the temperature was raised to 65 ° C.

20 Herefter gik man frem som beskrevet i eksempel 1.20 Then proceeded as described in Example 1.

Eksempel 3Example 3

Man gentog eksempel 1, bortset fra at der, når 25 Streptomyces-amylasen og de andre enzymer tilsattes, anvendtes 5 g diastase som et hjælpeenzym for Streptomyces-amylasen.Example 1 was repeated except that when 25 Streptomyces amylase and the other enzymes were added, 5 g of diastasis was used as an auxiliary enzyme for the Streptomyces amylase.

Eksempel 4 30 Man gentog eksempel 2, bortset fra at der, nårExample 4 Example 2 was repeated except that when

Streptomyces-amylasen og de andre enzymer tilsattes, anvendtes 5 g diastase som et hjælpeenzym for Streptomyces-amylasen.The Streptomyces amylase and the other enzymes were added, 5 g of diastasis was used as an auxiliary enzyme for the Streptomyces amylase.

35 148775 1535 148775 15

Eksempel 5 Rå byg formaledes groft og forklistredes herefter i en ekstruder. Den forklistrede byg behandledes med enzymer som beskrevet for fremgangsmåden i eksempel 1.Example 5 Raw barley was coarsely ground and then decalcified in an extruder. The pre-barley was treated with enzymes as described for the procedure of Example 1.

55

Eksempel 6 Rå byg og majsgrit forklistredes hver især i en ekstruder. 9 kg forklistret byg og 3,5 kg forklistret majsgrit anbragtes i et mæskekar, og 50 liter varmt 10 vand med en temperatur på 50°C og de i eksempel 1 beskrevne enzymer sattes til mæskekarret. Den herved fremkomne opslæmning holdtes ved en temperatur på 50°C i 60 minutter, hvorefter temperaturen blev bragt til 65°C. Herefter behandledes opslæmningen som beskrevet 15 for fremgangsmåden i eksempel 1. Sammensætningen af den opnåede urt i de ovenfor beskrevne eksempler 1,2,3 og 4 er vist i tabel 1.Example 6 Raw barley and corn grit were each embossed in an extruder. 9 kg of barley barley and 3.5 kg of corn barley are placed in a sump, and 50 liters of warm water at a temperature of 50 ° C and the enzymes described in Example 1 are added to the sump. The resulting slurry was kept at a temperature of 50 ° C for 60 minutes, after which the temperature was brought to 65 ° C. Next, the slurry was treated as described 15 for the procedure of Example 1. The composition of the obtained herb in Examples 1,2,3 and 4 described above is shown in Table 1.

I tabel 1 analyseredes sammensætningen af kulhydraterne ved gelfiltreringsmetoden (Am. Soc. Brew.Table 1 analyzed the composition of the carbohydrates by the gel filtration method (Am. Soc. Brew.

20 Chem. Proc. 154, 1970), og de andre egenskaber bestemtes ved EBC-metoden (Analytica EBC 3. udgave, 1975).Chem. Proc. 154, 1970), and the other properties were determined by the EBC method (Analytica EBC 3rd Edition, 1975).

148775 16 t*· in σι γ-· in in h r» s ^ ^ ^ ^ ^ ^ k •K O *-H *o co O ^ *^r JK OO tH Li*) i—} i—J »—1 03 f—i 1148775 16 t * · in σι γ- · in hr »s ^ ^ ^ ^ ^ k • KO * -H * o co O ^ * ^ r JK OO tH Li *) i—} i — J» —1 03 f — i 1

0 I i I I I I I I0 I I I I I I I I I

MM

+1 M CO N ID fll CM+1 M CO N ID fll CM

fj ^ ^ ^ h >« *> v Ο co co σι tn co co cm vo m co >a< η r" Hr* 'a· i—!fj ^ ^ ^ h> «*> v Ο co co σι tn co co cm vo m co> a <η r" Hr * 'a · i—!

<D<D

Οι Η Ο Ο σ\ cn r- vo g * ~ * - * * - Φ in m H in m π in *a*Οι Η Ο σ \ cn r- vo g * ~ * - * * - Φ in m H in m π in * a *

to eo in h r*· H CDto eo in h r * · H CD

aa

«_ H«_ H

HH

<D<D

co & g , <“ H m qj in η π n η H id co & ^ k v ^ v ** m g co <n O ^ σ> ^ co <D CO m Η f* H CO >rj mco & g, <“H m qj in η π n η H id co & ^ k v ^ v ** m g co <n O ^ σ> ^ co <D CO m Η f * H CO> rj m

.M M.M M

H __<DH __ <D

+> -r g M >i+> -r g M> i

3 CM · N3 CM · N

ft c M-l ,_, Ο 0) a) ci to H oo N n in O “! .ft c M-l, _, Ο 0) a) ci to H oo N n in O “! .

ίΚ ^ V k. k. rn O*ίΚ ^ V k. k. rn O *

“* 5* C (O CO ffl IO 'f ffl Ό H O“* 5 * C (O CO ffl IO 'f ffl Ό H O

Η H B 00 ^ ^ co ω β S >i rQ +> g -P X>Η H B 00 ^^ co ω β S> i rQ +> g -P X>

id fB w Mid fB w M

Eh m p μ A 0 0) --—--- β m i h q> fd H -HO) ω aj xEh m p µ A 0 0) --—--- β m i h q> fd H -HO) ω aj x

& *3* U1 CM CO Ο H I" CM QJOJ& * 3 * U1 CM CO Ο H I "CM QJOJ

g k ^ ^ ^ s v ». β >Pg k ^ ^ ^ s v ». β> P

tu’ -o' co σ in σ in o <u mtu '-o' co σ in σ in o <u m

Dl eo Η Γ* H 00 H,Dl eo Η Γ * H 00 H,

x d ,Hx d, H

W <“ w -Pm ---- „ 0) h * 0 id §» - M g o 0) ^ sW <“w -Pm ----„ 0) h * 0 id § »- M g o 0) ^ s

MH +> S SMH +> S S

P U dP .5 10P U dP .5 10

0 #> (0 &) 4J0 #> (0 &) 4J

H OP H - S LH OP H - S L

W * OP <u n s ΪW * OP <u n s Ϊ

H -.540) - ra IH -.540) - ra I

(1) <D -5-1.¾¾ C t, R(1) <D -5-1.¾¾ C t, R

Ό OHOJS-W 0) 3m βΛ>·τΐα)*αωρ &ι &> P 0) H Ό -H <d o © kj }H ιυ*ΙίτΙ1|Ι1)ΐί|^Η βΗ D ιίΌ i H ® H D +· g 3 m H(dOfd.C(dO-H ,π Ο)!Ηϋ,βθΛ0ββΟ Hg fiiriidoopm-H o (dø >1 £0 03 O (d fH O ?H HH £H Gu m&io (d m cncji-P (d\ η β β m h p h « +J S χΌ OHOJS-W 0) 3m βΛ> · τΐα) * αωρ & ι &> P 0) H Ό -H <do © kj} H ιυ * ΙίτΙ1 | Ι1) ΐί | ^ Η βΗ D ιίΌ i H ® HD + · g 3 m H (dOfd.C (dO-H, π Ο)! Ηϋ, βθΛ0ββΟ Hg fiiriidoopm-H o (die> 1 £ 0 03 O (d fH O? H HH £ H Gu m & io (dm cncji-P (d \ η β β mhph «+ JS χ

HHOHPOHØOCn XXHHOHPOHØOCn XX

__EHiHSQE-iftOQEHg, 148775 17__EHiHSQE-iftOQEHg, 148775 17

Som det vil fremgå af tabel 1 er sammensætningen af kulhydraterne i den resulterende urt, når forklistret byg behandles med Streptomyces-amylasen som beskrevet i eksempel 1 og 2, velegnet til ølbrygning.As will be seen from Table 1, the composition of the carbohydrates in the resulting herb when pre-treated barley is treated with the Streptomyces amylase as described in Examples 1 and 2 is suitable for beer brewing.

5 Smagen af øllet, der er brygget fra den ved frem gangsmåden ifølge opfindelsen opnåede urt, sammenlignedes med smagen af det kontroløl, der var fremstillet ud fra malt, idet man brugte smagsforsøg (triangelforsøg). Et panel bestående af 20 smagere op-10 fattede ingen signifikante forskelle mellem det øl, der var brygget ud fra den urt, der var opnået ifølge den foreliggende opfindelse, og kontroløllet. Yderligere havde det øl, der var fremstillet ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, en maltet smag og 15 en ølsmag og var fri for lugten af korn og diacetyl.The taste of the beer brewed from the herb obtained by the method according to the invention was compared with the taste of the control beer made from malt, using taste tests (triangular tests). A panel of 20 tasters found no significant differences between the beer brewed from the herb obtained by the present invention and the control beer. Furthermore, the beer produced by the process of the present invention had a malt flavor and a beer flavor and was free of the odor of grain and diacetyl.

01 brygget ud fra urt opnået ved sædvanlig enzymatisk behandling af byg har dårligt nok disse gode smagsegenskaber .01 brewed from herb obtained by usual enzymatic treatment of barley has badly these good taste properties.

20 Eksempel 7Example 7

Byg (kontrol) eller forklistret byg behandledes med et enzym i en mængde, svarende til den sukkerdannende virkning af malt i overensstemmelse med det temperaturskema, der er beskrevet i eksempel 1. Den til-25 syneladende slutforgæringsgrad af den herved fremkomne urt er angivet i tabel 2. 1 148775 18 Η ~ Ο Ρ~ Ή οΡ Μ 00Barley (control) or pre-barley was treated with an enzyme in an amount corresponding to the sugar-forming effect of malt according to the temperature scheme described in Example 1. The apparent final fermentation rate of the resulting herb is given in Table 2. 1 148775 18 Η ~ Ο Ρ ~ Ή οΡ Μ 00

~ . « -μ ι ι ι S~. «-Μ ι ι ι S

+) β «Ν g fi Η Ο '00 g <U π) Λ ^+) β «Ν g fi Η Ο '00 g <U π) Λ ^

-Ρ g'"' S-Ρ g '"' S

s _--§ *{ji dP Η 2, (O w φ σ> 'g fi o +> η οί 2 <D n X Φ ^ fi +> (D 3 01 O) ro S c B g g-g ^ 10 1 m .s _-- § * {ji dP Η 2, (O w φ σ> 'g fi o +> η οί 2 <D n X Φ ^ fi +> (D 3 01 O) ro S c B g gg ^ 10 1 m.

g* * §° g · Mg * * § ° g · M

.H w Μ ο» <H *q +> Π m. _____ -Ρ ω.H w Μ ο »<H * q +> Π m. _____ -Ρ ω

9J ' tn 1-} P9J 'tn 1-} P

I i s 0-¾I i s 0-¾

o P B tn β Ho P B tn β H

cs m o* -H , >i *P _ +) ω u +> λ S1 2 η β tn m K *5 j?cs m o * -H,> i * P _ +) ω u +> λ S1 2 η β tn m K * 5 j?

o)H β <D β rij O n P 3. So) H β <D β row O n P 3. S

,q tn H g ·ΰ co r- I O, q tn H g · ΰ co r- I O

S 0) » oS m§2 'g w B1 w ft $ -3 «ΒS 0) »oS m§2 'g w B1 w ft $ -3« Β

Φ H O ---- !Q MΦ H O ----! Q M

Ό (!) «Η °ί 2 "n β Λ +> 1 -P 5 2Ό (!) «Η ° ί 2" n β Λ +> 1 -P 5 2

H (0 β 0 0) B H SH (0 β 0 0) B H S

ω Eh Η +> I in β in Qiioid *hu2.ω Eh Η +> I in β in Qiioid * hu2.

>1 0) (D H VD r· ,„iu “ (U Jh U >i t" CO I m fl) i, I SI'S £ =. " f__1 *. t d / Sug H / 0) I £ β> 1 0) (D H VD r ·, "iu" (U Jh U> i t "CO I m fl) i, I SI'S £ =." F__1 *. T d / Sug H / 0) I £ β

β / Ul + H 3 φ Iβ / Ul + H 3 φ I

fi / H <D 10 g es >i / 0) pi > .μ >.fi / H <D 10 g es> i / 0) pi> .µ>.

tø / ^ ,Γ^ ι—i N i-! H g / ·Η Λ ·Ρ (rt v, d) •Λ Pi / "P ® g» ty ·ρ ti ti / in -P in t n htø / ^, Γ ^ ι — i N i-! H g / · Η Λ · Ρ (rt v, d) • Λ Pi / "P ® g» ty · ρ ti ti / in -P in t n h

β/ 10 (DH ·ηΟ m & <Uβ / 10 (DH · ηΟ m & <U

W / <D -ηΜΦβΚ ηι,-ιω-ρW / <D -ηΜΦβΚ ηι, -ιω-ρ

/ Η β -Ρ > g ·Ρ φ φ fi O/ Η β −Ρ> g · Ρ φ φ ﬁ O

/β g Β-Η β ,4 η, 13 β /Η Η4->+0 g] g : ή /Μ + Η W ^ φ / QJ ,Μ Β -Ρ^ g φ II Μ /Ρ tjl Μ ·|-| Η ' β >1 Ο β β 0) φ << 13 g ro h g g tn 148775 19/ β g Β-Η β, 4 η, 13 β / Η Η4 -> + 0 g] g: ή / Μ + Η W ^ φ / QJ, Μ Β -Ρ ^ g φ II Μ / Ρ tjl Μ · | - | Η 'β> 1 Ο β β 0) φ << 13 g ro h g g tn 148775 19

Det vil fremgå af tabel 2, at dersom forklistret byg behandles med Streptomyces-materiale som hovedenzymkilden/ er den tilsyneladende slutforgæringsgrad af den herved fremkomne urt sammenlignelig 5 med kontrollens, og denne virkning kan ikke opnås med andre enzymer.It will be seen from Table 2 that if pre-treated barley is treated with Streptomyces material as the main enzyme source / the apparent final fermentation rate of the resulting herb is comparable to that of control and this effect cannot be achieved with other enzymes.

Claims

148775

Process for the production of beer herb by enzymatic treatment of a starchy material, characterized by: 1) prescribing a starchy substance. material containing the main constituent of barley and further from 0 to 80% by weight, based on the weight of barley, of a starch-containing material other than barley, and 2) allowing an amylase to act on the precursed starch-containing material to prevent sugars. this, which amylase is produced by aerobic culture of Streptomyces hygroscopicus ATCC No. 21722, Streptomyces viridochromogenes ATCC No. 21724,

Streptomyces albus ATCC No. 21725, Streptomyces tosaensis. ATCC No. 21723, Streptomyces aureofaciens ATCC 31379, Streptomyces flavus ATCC 31378, or Streptomyces hygroscopicus var. angustomyceticus ATCC 31380, and which amylase using 20 starch as a substrate has optimum pH in the range of 4.5 to 5.0, a minimum starch hydrolysis rate of not less than 75% of theoretical maltose amount, while the ratio of glucose to maltose produced from the starch by the hydrolytic action of amylase 25 is not greater than 0.06: 1 by weight.

2. A process according to claim 1, characterized in that the pre-treatment is carried out by boiling in the presence of a liquid-rendering enzyme to produce a pre-coated and liquefied starch-containing material.

Process according to claim 1 or 2, characterized in that barley is boiled and from 0 to less than 80% by weight, based on the weight of barley, of a starch-containing material different from barley and that the Streptomyces amylase is caused to act on the precast starchy material, while another further, from barley different starchy material in an amount such that the sum of the first and