DK146555B - Antikonceptionelt middel - Google Patents

Description

(19) DANMARK

|j| (12) FREMLÆGGELSESSKRIFT od 146555 B

DIREKTORATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Patentansøgning nr.: 2032/77 (51) Int.CI.3: A 61 K 31/565 (22) Indleveringsdag: 09 maj 1977 (41) Aim. tilgængelig: 11 nov 1977 (44) Fremlagt: 07 nov 1983 (86) International ansøgning nr.: -(30) Prioritet: 10 maj 1976 US 684943 (71) Ansøger: ‘RICHARDSON-MERRELL INC.; Wilton, US.

(72) Opfinder: Harvey Douglas ‘Benson; US, Joyce Francis ‘Grunwell; US, John O’Neal ‘Johnston; US,

Vladimir‘Petrow; US.

(74) Fuldmægtig: Ingeniørfirmaet Budde, Schou & Co_ (54) Antikonceptionelt middel

Den foreliggende opfindelse angår et antikonceptionelt middel, der er egnet til oral indgivning.

Det er kendt, at progestogene steroider, enten hver for sig, eller i kombination, kan anvendes til regulering af fertiliteten hos varmblodede dyr, og for øjeblikket anvendes der forskellige produkter 0 og tre primære behandlingsmåder, nemlig følgende:

Kombinationsbehandlinger omfattende et østrogen og et progesto- O gen, der almindeligvis indtages fra 5. dagen i en menstruationscyclus

O

ί i 20 eller 21 dage.

Sekvens/serie-behandlinger hvor der almindeligvis indtages et £ ^ østrogen fra 5. dagen i en cyclus efterfulgt serievis af en østrogen/- progestogen-kombination, og hvor der er foreslået forskelligebehandlings- 2 146555 måder.

Kontinuerlig progestogen-behandling (eller indgivning af minipiller), hvor der dagligt indtages et progestogen.

Kombinationsbehandlingen og sekvens/serie-behandlingen hæmmer ovuleringen med stor effektivitet. Til kontinuerlig progestogen-behandling anvendes en dosis af steroidt progestogen, der er så lille, at den ikke fremkalder ovuleringshæmning hos størstedelen af brugerne, som fortsætter med af ovulere og have i hovedsagen samme cyclus, som de ville have uden progestogen. Som det er velkendt er imidlertid anvendelse af denne behandling ledsaget af en så stor hyppighed af uteruspletning og forlængede blødninger, at denne metode til anti-konception og som instrument til befolkningsregulering får kendeligt nedsat nytte og attraktivitet. Til nedsættelse af hyppigheden af plet-ning og forlænget blødning er der fremkommet forskellige forslag, f.eks. tilsætning af østrogen til progestogenet i de sidste få dage af hver cyclus.

Selv om østrogener har vist sig at udgøre et effektivt middel til antikonception, er det kendt, at deres anvendelse kan have visse uønskede bivirkninger. Ethinyl-østradiol og mestranol, som er repræsentanter for de østrogene komponenter, der indgår i de for øjeblikket anvendte orale antikonceptionsmidler, vides således at være indblandet i visse alvorlige, med orale antikonceptionsmidler forbundne bivirkninger, inklusive depression (Nature 243, 58 (1973)), hypertension (Am. J. Obstet. Gynecol., 112, 912 (1972)), carbonhydrat- og lipid--anormaliteter (Lancet, 1969, 11. oktober, 783), indgriben i blodkoaguleringsmekanismer, resulterende i thromboser og slagtilfælde (Ann. Intern Med., 72, 111 (1970)), og gulsot (Am. J. Obstet. Gynecol. 119, 165 (1974)). Der er derfor virkelig behov for et forbedret antikonceptionelt middel.

Gennem den foreliggende opfindelse er der tilvejebragt et antikonceptionelt middel, hvormed man undgår mange af de uønskede bivirkninger, der kan forekomme ved anvendelse af østrogener.

Nogle af de forbindelser, der indgår i midlet ifølge opfindelsen, f.eks. 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion og 19-oxo-derivatet deraf, har indgået i talrige in vitro-undersøgelser, hvor der er undersøgt androgens rolle i metabolismen. Yderligere har det været rapporteret, at 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion har været givet til to sunde mænd på 21 år (J. Clin. Endocrinol. Metab. 28, 1401 (1968)). Endelig har 3-oxo-17£3-hydroxyandrost-4-en-19-al været omtalt i 146555 3 USA patentskrifterne nr. 3.235.573 og 3.449.381/ hvori der for denne forbindelse er nævnt anabolisk-androgen aktivitet, hæmning af pituitære gonadotropiner og adrenocorticotropin, antiøstrogene blod-, lever- og andrenal-cholesterol-nedsættende egenskaber, fertilitetsregulering og psykotiske tilstande, samt appetitstimulering. Såvidt vides har der imidlertid ikke tidligere været nævnt eller foreslået anvendelse af de i midlerne ifølge opfindelsen indgående forbindelser som antikonceptionelle midler ved forhindring af ovulering.

Det antikonceptionelle middel ifølge opfindelsen, der er egnet til oral indtagelse, er ejendommeligt ved, at det indeholder en forbindelse af den almene formel 0-R2

/ί^χΙ/ΐτ'Ν R I

11 13 16 R _15.

0AAA H

hvor R er -CHO eller -C^OR1, hvor R1 er hydrogen, alkylcarbonyl med 1-20 carbonatomer i. en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe 2 eller adamantancarbonyl, og hvor R er hydrogen, alkylcarbonyl med 1-20 carbonatomer i en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe eller 3 2 3 tetrahydropyranyl, og R er hydrogen, eller R og R tilsammen danner en dobbeltbinding mellem carbonatomet i 17-stillingen og oxy-· genatomet, sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer og eventuelt et progestogen.

I forbindelserne af formlen I menes der med alkylcarbonyl en

O

II

gruppe af strukturen alkyl-C-, hvor alkylgruppen indeholder 1-20 carbonatomer og kan have en lige eller forgrenet kæde. Eksempler på alkylgruppen i alkylcarbonyl-substituenten er methyl, ethyl, n-pro-pyl, isopropyl, n-butyl, sek.butyl, tert.butyl, n-pentyl, neopentyl, hexyl, heptyl, octyl, 2,4-dimethyloctyl, undecyl, 9-methylundecyl, pentadecyl, hexadecyl, dodecyl, 2,4,6-trimethyldecyl, heptadecyl, decyl, octadecyl, nonadecyl og eicosyl.

4 146555

Som det fremgår af formlen I, er de i midlet ifølge opfindelsen indgående forbindelser androst-4-en~3,17-dioner med gruppen -CH^OR"^ eller -CHO i Ιθβ-stillingen, således som det er vist ved de nedenfor anførte formler II og III, eller de er 17£-hy- droxy-androst-4-en-on-derivater eller estere deraf som defineret 2 1 génnem R med gruppen -CI^OR eller -CHO i ΙΟβ-stillingen som gengivet ved henholdsvis formlerne IV og V nedenfor.

H=c [ J_J n ..

°-CH I]

OR

H

HaC I ] J_I iv OR2

rrY

0=CH I _I V

»03* 5 146555 I formlerne II og IV er R1 hydrogen, alkylcarbonyl som defineret ovenfor eller adamantancarbonyl.

I formlerne IV og V findes det hydrogenatom, der er bundet til 2 17-stillingen, i α-stilling, og R er hydrogen eller alkylcarbonyl som defineret ovenfor eller tetrahydropyranyl.

Som det er nævnt ovenfor kan forbindelserne af formlen I være de eneste aktive forbindelser i midler ifølge opfindelsen, eller de kan indgå sammen med progestogener. Eksempler på progestogener, der kan anvendes til oral eller parenteral indgivning, er følgende: norethindron 17-hydroxy-19-nor-17 α-pregn-4-en-20-yn- -3-on norethindron-acetat 17-hydroxy-19-nor-17a-pregn-4-en-20-yn- -3-on-acetat norethynodrel 17-hydroxy-19-nor-17a-pregn-5(10)-en- -20-yn-3-on lynøstrenol 17-hydroxy-19-nor-17a-pregn-4-en-20-yn e thynodioIdiacetat 19-nor-17a-pregn-4-en-20-yn-30,17-diol- -di-acetat quingestanol 3-cyclopentyloxy-19-nor-17a-pregna-3,5- -dien-20-yn-l7-ol-acetat algeston-acetophenid 16a(R),17-[(1-phenylethyliden)bis(oxy)]- -pregn-4-en-3,20-dion medroxyprogesteron-acetat 17-hydroxy-6a-methyl-pregn-4-en-3,20- -dion-acetat megestrol-acetat 17a-hydroxy-6-methyl-pregna-4,6-dien-3,20- -dion-acetat melengestrol-acetat 17a-hydroxy-6-methyl-16-methylen-pregna-4,6- -dien-3,20-dion-acetat dimethisteron 173rhydroxy-6a-methyl-17-(1-propynyl)- androst-4-en-3-on-monohydrat norgestrel 13-ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17a-pregn- -4-en-20-yn-3-on

Forbindelserne af formlen I er anvendelige som antikonceptionelle midler, idet de forhindrer ovulering, hvilket vil sige, at forbindelserne af formlen I er ovuleringsinhibitorer. Når forbindelserne af formlen I anvendes i kombination med et progestogen, er de effektive som ovuleringsinhibitorer, og progestogenet anvendes til fremkaldelse af en regelmæssig tilbagevendende blødning, der ligner den tilbagevendende raenstruationsblødning, og desuden til at synergetise-re virkningen af forbindelserne af formlen I. Forbindelserne af form- 6 146555 len I kan derfor indgives enten alene eller i kombination med et progestogen til antikonceptionelle formål, enten alene eller i form af et farmaceutisk præparat til fertile hunpattedyr, f.eks. fertile kvinder, får, køer, søer og hopper, samt hunhunde, -katte, -mus og -rotter.

Den mængde af hver type forbindelse, dvs. forbindelserne af formlen I og progestogenet, der indgives, varierer. Ved anvendelse alene eller i kombination med et progestogen er den indgivne mængde af forbindelsen af formlen I en hvilken som helst mængde, der er antikonceptionelt effektiv eller effektiv til ovuleringsinhibering- fra 0,01 og op til 3,0 mg/kg, og fortrinsvis på 0,1-1,0 mg/kg. Til parenteral indgivning, dvs. subcutan eller intramusculær indgivning, er det at foretrække, at den indgivne mængde af forbindelsen af formlen. I er fra 0,01 op til 1,0 mg/kg og fortrinsvis på 0,1-0,5 mg/kg.

Når der anvendes et progestogen, er den indgivne mængde af dette en -hvilken som helst ikke-ovuleringsinhiberende mængde på mellem 0,005 og 0,5 mg/kg. Enhedsdoser af forbindelserne af formlen I kan f.eks. være 50-150 mg og af progestogenet f.eks. 1,5-25 mg. Den anvendte mæng-,dé af forbindelsen af formlen I vil variere efter indgivningsmetoden, idet det er kendt, at inden for antikonceptionsområdet kræves der lavere doser pr. dag ved indgivning gennem implantater, polymere indsætninger' eller intrauterine anordninger end f.eks. ved oral indgivning. Et implantat eller en indsætning anvendes kun, når androste-nerne, dvs. forbindelserne af formlen I, anvendes alene.

- De i midlet ifølge opfindelsen indgående forbindelser kan anvendes efter forskellige systemer. Når forbindelserne af formlen I anvendes alene, kan de indgives kontinuerligt fra den 5. til 21. dag i en cyclus, og når der anvendes et progestogen, kan dette og forbindelserne af formlen I indgives tilsammen kontinuerligt fra den 5. til den 21. dag af en cyclus, eller forbindelserne af formlen I kan indgives fra den 5. til 21. dag og progestogenet fra den 16. til den 21. dag i en cyclus.

7 146555

De foretrukne og sikreste former af det her omhandlede middel indeholder ifølge opfindelsen en forbindelse af formlen i, hvor-2 3 i R er -CHO, og R og R tilsammen betegner en dobbeltbinding mellem carbonatomet i 17-stillingen og oxygenatomet, dvs. forbindelsen 3,17-dioxoandrost-4-en-19-al af formlen III, eller en forbindelse 1 2 3 af formlen I, hvori R er -CE^OR , og R og R tilsammen udgør en dobbeltbinding mellem carbonatomet i 17-stillingen og oxygenatomet, dvs. en forbindelse af formlen II, og heraf ifølge opfindelsen især forbindelsen 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion, dvs. en forbindelse af formlen II, hvor R^ er hydrogen. Der fås dog gode resultater ved anvendelse af forbindelserne af formlerne IV og V, især for- 1 2 bindeiser af formlen IV, hvori R og R hver er hydrogen, og for-bindeiser af formlen V, hvori R er hydrogen. Når der indgår et progestogen i midlet ifølge opfindelsen, er de foretrukne progestoge-ner norethindron-acetat, lynøstrenol, ethynoldiol-diacetat og nor-gestrel.

Til oral indgivelse eller indtagelse kan de aktive forbindelser inkorporeres i faste eller flydende præparater såsom kapsler, piller, tabletter, dragéer, pulvere, opløsninger, suspensioner eller emulsioner, og forbindelserne kan også anvendes i form af en aerosol indeholdende findelte partikler af den aktive bestanddel eller en opløsning, suspension eller emulsion af den aktive bestanddel. De faste enhedsdosisformer kan være kapsler, der kan være af den sædvanlige gelatine-type, indeholdende en forbindelse af formlen I og en bærer, f.eks. smøremidler og et indifferent fyldstof såsom lactose, saccharose og majsstivelse.

Ved en anden udførelsesform kan forbindelserne af formlen I

inkorporeres i tabletter sammen med sædvanlige tablet-grundlag såsom lactose, saccharose og majsstivelse, sammen med bindemidler såsom acacia, majsstivelse eller gelatine, henfaldningsmidler såsom kartoffelstivelse eller alginsyre, og et glidemiddel såsom stearinsyre eller magnesiumstearat.

Til parenteral indgivelse kan forbindelserne gives som inji-cerbare doser af en opløsning eller suspension af forbindelsen i et fysiologisk acceptabelt fortyndingsmiddel sammen med en farmaceutisk bærer, der kan være en steril væske såsom vand eller olie med eller uden tilsætning af et overfladeaktivt middel og andre farmaceutisk 8 146555 acceptable tilsætninger. Eksempler på olier, der kan anvendes i disse præparater, er olier fra jordolie eller af animalsk, vegetabilsk eller syntetisk oprindelse, f.eks. jordnøddeolie, sojabønneolie og mineralolie. Almindeligvis er vand, saltopløsning, vandig dextrose og lignende sukkeropløsninger, samt ethanoler og glycoler såsom pro-pylenglycol eller polyethylenglycol de foretrukne flydende bærere, især til injicerbare opløsninger.

Forbindelserne kan også indgives i form af en depot-injektion eller et implantationspræparat, der kan være sammensat på en sådan måde, at der tillades en vedvarende frigørelse af den aktive bestanddel . Den aktive bestanddel kan være komprimeret til pellets eller små cylindre og implanteres subcutant eller intramuskulært som depot-injektioner eller -implantater. Implantater kan indeholde indifferente materialer såsom biosønderdelelige polymere eller syntetiske siliconer, f.eks. "Silastic”, der er en siliconekautsjuk fra Dow-Corning Corporation.

Nedenfor er anført eksempler på farmaceutiske præparater indeholdende de her omhandlede aktive forbindelser.

Aerosol_ sicTum 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 1,0 g

Propylenglycol 96,0 g "Emplsifying Wax NF XIV" 3,0 g

Dichlordifluormethan-cryofluoran (20:80) 6,9 g

Den aktive forbindelse opløses i propylenglycolen, hvorefter der tilsættes den emulgerende voks, opvarmes til ca. 70°C og køles til stuetemperatur under omrøring. Dette koncentrat kommes i en passende aerosol-enhed sammen med 6,9 g dichlordifluormethan-cryofluoran (20:80).

Tabletter___________________ til_15^000 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 75 g (som fint pulver)

Lactose 1,216 kg

Majsstivelse 0,3 kg 9 U6555

Den aktive bestanddel, lactosen og majsstivelsen sammenblandes ensartet og granuleres med en 10%'s stivelsespasta, hvorefter der tørres til et fugtighedsindhold på ca. 2,5% og sigtes gennem en sigte nr. 12. Derefter tilsættes og iblandes.

magnesiumstearat 0,015 kg majsstivelse 1,725 kg og det hele komprimeres på en passende tabletmaskine til en vægt på 0, 225 g/tablet.

3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 0,25 kg "Polysorbate 80" 0,25 kg

Majsolie qs ad 25,0 kg

Efter gennemblanding fyldes denne blanding på 50.000 bløde gelatinekapsler.

Intramusculær^depot-injektion Hver ml indeholder følgende: 3.17- dioxoandrost-4-en~19-al 5,0 mg vandfri chlorbutanol 5,0 mg aluminiummonostearat 50,0 mg

Jordnøddeolie qs ad 1,0 ml

De forskellige bestanddele opløses eller dispergeres i jord-nøddeolien.

2§E2t-implantat 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al, mikroniseret 5 mg

Dimethylsiloxan 240 mg

Katalysator qs

Den aktive bestanddel dispergeres i den flydende dimethylsiloxan, katalysatoren tilsættes, og produktet støbes til en passende monolytisk konstruktion.

10 146556

Alternativt kan den aktive bestanddel indesluttes i et i forvejen støbt polydimethylsiloxan-hylster, og den aktive bestanddel kan også dispergeres i en passende mængde hydroxyethylacrylat, der derefter polymeriseres og tværbindes ved tilsætning af ethylendimethacrylat og et oxidationsmiddel til dannelse af en tredimensional, formbar ethylen-glycolmethacrylat-gel ("Hydron").

Intramuskulære_injektioner A. Olietypen: 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 25 mg Butyleret hydroxyanisol/butyleret hydroxy- toluen-1:1 0,01% vægt/rumfang

Jordnøddeolie eller sesamolie qs 1,0 ml B. Suspensionstypen: 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 25 mg (mikroniseret)

Natriumcarboxymethylcellulose 0,5 % vægt/rumfang

Natriumbisulfit 0,02% vægt/rumfang

Vand til injektion qs 1,0 ml

Aerogol-skum 3.17- Dioxoandrost-4-en-19-al 1,0 g

Norethindron 0,05 g

Propylenglycol 96 g "Emulsifying Wax NF XIV" 3,0 g

Dichlordifluormethan:cryofluoran (20:80) 6,9 g

Den aktive bestanddel opløses i propylenglycolen, hvorefter der tilsættes den emulgerende voks, opvarmes til ca. 70°C og afkøles til stuetemperatur under omrøring. Den fremkomne blanding kommes i en passende aerosol-enhed sammen med 6,9 g dichlorfluorme than: cryofluor an (20:80).

li T46555

Intramuskulær_degot-in2ektion Hver ml indeholder følgende: 3,17-dioxoandrost-4-en-19-al 5,0 mg norethindron 0,05 mg vandfri chlorbutanol 5,0 mg aluminiummonostearat 50,0 mg jordnøddeolie qs ad 1,0 ml I efterfølgende tabel er anført eksempler på præparater, der som aktive bestanddele indeholder et progestogen og en forbindelse af formlen I, der enten er 3,17-dioxoandrost-4-en-19-al eller 3-oxo--173-hydroxyandrost~4-en-19-al, betegnet som henholdsvis forbindelse 1 og 2. Til fremstilling af disse tabletpræparater forenes de aktive bestanddele med fyldstoffet og det interne henfaldningsmiddel og sammenblandes grundigt, og bindemidlet granuleres og passeres gennem en sigte nr. 6, hvorefter det tørres til et fugtighedsindhold på ca. 2,5%. De tørre granulater sigtes gennem en sigte nr. 12, hvorefter der tilsættes smøremidlet og det externe henfaldningsmiddel og sammenblandes grundigt. Tabletterne presses på en passende tabletmaskine til en vægt på 0,250 g/tablet.

12 τ 146555 Ρ 01 cxminminininin m nJ c— c— r~- r— r— r~- t Γ" )4 I > <. ·. ·. * V » S "» G tn ή) 0) ro oo ro oo oo oo oo oo P 0) το in _ _ _ — ø +> (d H Td Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό 4J CS ο Λ id (d (d id id (d (d X Ή ^ ω η ή οι in in in tn in ιη m Η Ρ Ο1 Ο1 θ' Ο1 θ' θ’ Ο1 Ο* Ό ιη 1 01 e a; Ρ Ο G Η »· ιη ιοί in ιθ) ιοί ίο ιοί ίο» (d ιη ρ γ* r- r* r-> ι-' ρ» υ 0) id to oo oo oo oo oo oo oo Η G Ρ Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο ρ Cn <d - ·» *· - ' - - - G! (d 0) Ο ο ο ο ο ο ο ο ρ a ρ

PI ιη I

ϋΐ ω gi 0) ι Η ιη Οι Ο) Η tn mi Ό 0) Α< 0Μ| τί > I ·Η ·Η * /(di gPidintnininintntn tn ι (umPD’tdtJ'tdtncj'd1 tn

Pi nd in 0)1 c in (d

Pi h - o.

PI ffl cV

d)i O

Hl H

ΛΙ (dl

PI

ι P tn

Ol G M

oi (d

Oi Mi'inmininminin m •i G tn tn 0) v£> m ίο i© vo >© ό ό io)i ρ α) ·η in - - * - »· ' -

Hl iJPidH O O O O O O O O

I P G S 0) ΉΙ G H > tdi h in h

I Η P

Di Ό tn GI •Hl

Hl <D

Hiiin oo oo cn O m o ro O

•Hl >d IH O f' r- CN H CN CO

PI Η O P tn cn oo oo ιοί cn ί* σι cn ΙΟΙ >,P OM - ' *· - *· - *·

gi ϋι (0 Id Η H CN CN CN CN H CN

0)1 PI

PI

PI

10) Lfl ιθ) hi tn LDioicNCNmin in in H| \ p CO VOUOH H U0 CN 10) Os) CN H 10) Γ" O'

Bl tn cd 0(0) OP Oco OH O OCN O P'00 oo ^ ·»·* «* ** ·» *» »·. *.·* »* *» ·>» v. ·*.

U OH oo oo oo oo oo o o o o +) m ιοί \ 0) ' tJlH 'S’O'il'O HOHOHOHU0H O H tn 6 Λ o ιθ) cn H oo h in cn (d h

P

P P

(d id

P P

0) H 0) CN H CN H CN H CN

\ O υ G G G G

G g ida)(dO)OQ)oa)oa)OQ)i d)i o) Φ o iiniinpcnpinpinpinHPinHPin

tn H HH HH Ό Η Ό Η Td H tJH O IdH 0 id H

O G P Ofl) OO) GO) GO) GO) G <D -Η P 0) HPO)

Po)(d Pti Pti HTd -H'd h td h >d tlOJid Td 0) nd in tn G pgpg.gg.gg pg .gg o o g oog

0) o -Η W H W -Η P -H PH PH PH G IdH G (dH

tn^p Q)P fl)P Q)P Q)P 0)P 0)P >|Η Ρ >ι·Η P

OP g tnp tn P PP PP PP PP GU M GU P

ptno 0)0 0)0 OO OO OO OOP OP o sip sip a ip sip sip sip h ip s ip 13 U6555 +> ty Ο,ίιοιοιοιοιοιο (O I— Η t— Γ— (— I— ·. * *» *- C ty l 0 n ro ro co ro ro p 0 U) lfl

ø-p-roH T3 Ό Ό Ό ØJ ØJ

+> c 0 ø 0 ø ø (O 0 ø N Ή 2 ^ pq m -H tn to to to to to -rH-Ptj’C^CT'G^tr'tT1 øj to i ty S J4 P 3 G -h - to to to to to to ta to -P r- i— t— r— t- i— O ø ø ro ro ro ro ro ro

^1 -HGPOOOOOO

-Pi p tyø - - - ' ' tdi xiøøoooooo

toi 324J

•PI PI to PI .

ol ω

Bl s —i <-i 8 i ø h ty cn øj <u m gi øj >

I Ή Ή K

Ol g+) (C (Q U) CO w w w toi øtO+itJ'D'tytiD’D’ <N| øj to I C to td

/(di H - A

I ffl dP

PI o

0)1 H

•PI -PI (1)1 Hl XII

tdi -p ty -PI G Jid i (d

Ol P I -

Oi p ty to O) lo to to to lo to

Ol ptD-ntQVOLDLOVDLOLO H

•i ©+»øh------ <d

toi -PCSØOOOOOO I

hi G h > ty I H to Η η

Ip| H -P I

(dl ød to G

i h ø

tyl ttl I

Cl ø I 'd*

•Hl llfl Otnrocororo σι I

HI ød B O roOOOOHVD H-P

hi rHO-Pty<yroHroooio i m

•Hl >1+1 OXi------ CO

-PI pn m 0 H CO Ol Ol O H ØP

mi pi i 'O

gi 7 c Øl I, t? PI 0 to tO -P >1 +ii \ ty i— r-toio tototo lo mx

i ty P O to or- r- to t— oi r- r- to O O

Hl X! ø Ot— Oro O'd1 O oi roto ror- PP

-nj xi d n

Bl U OO OO OO OO OH OO C >i ø X!

O I

-P K ffl \ ø LO lo O i—

tyH - - HH

g XI oOOloloOloioloOioo Q I

ø to oi ro Hoiooiio 10

+> H t- K

H O - I ro ro

II II

H OlHHHOlCHCOl HOl \ 0 0 0 0 C C 0 ØPØPØPØPØ 00 ø o HmHmøjmøjmømøm mm

ty-H ØH ØH OH OH -PH -PH HH

OC-P pøpøcøcømømø øø -P ø ø -P Øj -P ød >iød h ød h øj d t)

mtyC mcmcxJCXiCxlGxiC C C

0 O H 0 -H 0 Η -P Η -P ·Η -P Η -P Η Η ·Η

typxi ty XI tyXt 0 XI 0Λ 0 Xt ø XI Xt XI

O -P g PP PP PP PP gP gp PP

pmo OOOOOOOO H OH 0 O O

a-ø-x: a h a lx, a a s a q a q a a a i4 1*6555

Indgivelse af forbindelserne af formlerne I-V i de ovenfor nævnte effektive mængder giver den ønskede antikonceptionelle eller ovuleringsmodvirkende virkning uden forekomst af de forskellige skadelige bivirkninger, der er rapporteret i forbindelse med indgivelse af østrogene midler, indbefattende uterusvækst og throm-botiske virkninger såsom blodkoagulering. Indgivelse af forbindelserne i højere mængder end dem, der ovenfor er angivet som effektive, kan resultere i disse skadelige østrogen-bivirkninger.

Til påvisning af den ovuleringshæmmende virkning af forbindelserne af formlen I er ikke fuldt udviklede rotter (Sprague-Dawley) blevet behandlet dagligt i deres alders 19.-24. dag med forskellige dosis-koncentrationer af en forbindelse af formlen I. På den 24. dag fik hver rotte injiceret 2 internationale enheder af en gonadotropin, f.eks. serum fra drægtige hopper, til inducering af ovulering, og antallet af æg i æggelederen bestemtes om morgenen på den 25. dag. I nedenstående tabel er anført virkningen af 3,17-dioxoandrost-4-en-19-al ved den prøvning.

QY2i§£i23§i}S!?2i22

Dosis Antal % Samlet

Behandling_ (mg/dag) rotter ovulering antal æg Bærer --- 6 83 28

3,17-Dioxoandrost- 1,0 6 33 6X

-4-en-19-al 24 Signifikant difference fra den med bærer behandlede kontrol, P <0,05.

De i nedenstående tabel anførte data indicerer, at 3,17-dioxo- androst-4-en-19-al ikke bindes in vitro til østrogen-receptoren i uterusvæv, der tjener som mål for østrogenet, hvilken binding er det første trin, der er nødvendigt for hormonal virkning. Til opnåelse af disse data blev hunhamstere ovarietomiseret, og der fremstilledes uterin-cytosol 24-48 timer efter indgrebet. Koncentrationer på e10 4 x 10 - 4 x 10 molære blev derefter sammenlignet for konkurrerende bindinger af H3~østradiol-17|3-mærkede cytosolreceptorsæder efter de metoder, der er beskrevet af Leavitt et al. i Endocrin. 94, 1041, 1974, og Korenman, i J. Clin. Endocrin. and Metab. 28, 1927, 1968. Den relative binding sammenlignedes med østradiol, der sattes til 100.

15 146555

Uterin cytosol-affinitet

Relativ Østrogen-

Behandling _bindingsaffinitet Østradiol 100 Østrone 22 Østriol 10 3,17-Dioxoandrost-4-en-19-al . 0,01

Den mangel på østrogen-bindingsaffinitet, som 3,17-dioxoandrost--4-en-19-al udviser, understøtter konstateringen af, at de her omhandlede forbindelser mangler visse af de østrogene bivirkninger.

Det er også konstateret, at de her omhandlede forbindelser ikke har noget thrombotisk potential. Forbindelsen 3,7-dioxoandrost-4-en--19-al blev således givet subcutant til ovarieektomiserede albinorotter i 7 døgn i en mængde på 0,1 eller 3,0 mg/kg. Legemsvægten og uterusvægtene måltes, blodprøver udtoges, og virkningen på det thrombotiske potentiale bestemtes ved målinger af anti-thrombin III-ak-tivitet, ethanolgel-prøver (fibrinmonomer-spejl), protaminsulfat-prøve (fibrinsønderdelingsprodukter), adenosindiphosphat- og collagen-induceret blodpladeaggregering. Anti-thrombinaktiviteten blev ikke påvirket, og ej heller konstateredes forøget mængde af fibrinmonomer eller fibrinsønderdelingsprodukt, og blodpladeaggregeringen var ikke ændret kendeligt.

Dydrogesteron er et andet eksempel på et progestogen, der kan anvendes i midlet ifølge opfindelsen, og som kemisk er 93,10a-pregna--4,6-dien-3,20-dion.

Mange af de forbindelser, der anvendes i midlet ifølge opfindelsen, er kendte forbindelser eller kan fås i handelen. Dette sidste gælder f.eks. for 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion, 17f3,19-dihydroxy-androst-4-en-3-on, 19-hydroxy-173~(1-oxoethoxy)-androst-4-en-3-on, 19-hydroxy-17β-(1-oxobenzyloxy)androst-4-en-3-on og 3-οχο-17β(1-oxo-benzyloxy)androst-4-en-19-al.

De estere af de omhandlede forbindelser, der kan anvendes i midlet ifølge opfindelsen, dvs. forbindelser, hvori den ene eller begge 1 2 grupperne R og R er alkylcarbonyl, hvor alkylgruppen indeholder 1-20 carbonatomer og er lige eller forgrenet, eller R-^er adaman- 16 U6555 tancarbonyl, kan fremstilles som angivet nedenfor, selv om også andre metoder kan anvendes. Ester-derivater af 19-hydroxyandrost--4-en-3,17-dion og bis-esterderivater af 173,19-dihydroxyandrost--4-en-3-on fremstilles ved omsætning af den tilsvarende 19-hydroxy- eller 173,19-dihydroxyforbindelse med det pågældende syreanhydrid 4 4 af formlen (R -C0-)_0 eller syrechlorid af formlen R -C0-C1, hvor 4 ^ R er en alkylgruppe med 1-20 carbonatomer og lige eller forgrenet eller adamantyl, i nærværelse af en base såsom pyridin, qui-nolih eller trialkylamin, f.eks. triethylamin, hvilken base tjener som opløsningsmiddel, i 1-24 timer ved en temperatur mellem ca. 25 og ca. 100°C. De anvendelige syreanhydrider eller syrechlo-rider er kendte forbindelser eller kan fremstilles ud fra de tilsvarende syrer efter kendte metoder.

1 2

Forbindelser, hvori R er hydrogen, og R udgør en estergruppe, fremstilles ud fra de på den ovenfor beskrevne måde opnåede 17β,19-diester-derivater ved opvarmning af diesteren under tilbagesvaling med 1 ækvivalent natrium- eller kaliumbicarbonat eller 0,5 ækvivalent natrium- eller kaliumcarbonat eller fortyndet natrium- eller kaliumhydroxidopløsning i en lavere alkohol som opløsningsmiddel, f.eks. methanol eller ethanol, og vand, i ca.

1 time, idet tilbagesvalingstemperaturen afhænger af det anvendte opløsningsmiddelsys tem.

2

Forbindelser, hvori R er CHO, og R udgør en estergruppe, fremstilles ved opløsning af de på den ovenfor beskrevne måde op- 1 2 nåede forbindelser, hvori R er hydrogen, og R udgør en estergruppe, i acetone afkølet til 0-10°C og behandling af opløsningen med tilstrækkeligt af et Jones-reagens til hidføring af oxidationen. Jones-reagens fremstilles på standardmåde ved anvendelse af 26,72 g chromtrioxid, 23 ml koncentreret svovlsyre og vand til 100 ml, og det tilsættes til opløsningen, indtil den rødbrune farve holder sig. Andre oxidationsmidler kan dog også anvendes, således f.eks. dicyclohexylcarbodiimid i dimethylsulfoxid.

De følgende eksempler skal illustrere, hvorledes de i midlet ifølge opfindelsen indgående forbindelser kan fremstilles.

17 146555

Eksemgel_l i2§ziåz§i®iiz252£E2E25Yi2S^E22t243en-3-on

En opløsning af 10 g 17|3,19-dihydroxyandrost-4-en-3-on, der fås i handelen, og 25 ml propionsyreanhydrid i 200 ml pyridin får lov at henstå natten over, hvorefter der tilsættes 100 ml ethanol, og reaktionsblandingen omrøres i 1 time, hvorefter den hældes ud i 1 liter vand, og det faste produkt samles ved filtrering. Det faste produkt opløses i ether, tørres over magnesiumsulfat, og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Remanensen opløses i varm hexan og får lov at afkøle, og der fås 173,19-bis(l-oxopropoxy)androst-4-en-3-on med smp. 82-84°C.

Eksempel_2 LZ§xi2z5±ilYdrgxyandrost-4-en-3-on

En opløsning af 150 g 19-hydroxyandrost-4-en-3-on i 6 liter ethanol afkøles i et isbad, og til den kolde opløsning sættes 13,5 g kaliumborhydrid, hvorpå reaktionsblandingen omrøres i 2 timer ved ca. 0°C, hvorefter der tilsættes yderligere 13,5 g kaliumborhydrid.

To timer senere sættes der for tredje gang 13,5 g kaliumborhydrid til reaktionsblandingen, som omrøres i yderligere 1 time og derefter hældes ud i 11 liter vand, hvortil der er sat 70 ml eddikesyre. Etha-nolen afdestilleres under formindsket tryk, og den vandige remanens afkøles til 0°C. Det faste stof, som herved udskilles, filtreres fra, tørres og opløses i 25 liter varm chloroform, hvorefter temperaturen indstilles på 25°C. Derpå sættes til chloroform-opløsningen 250 g mangandioxid, og blandingen, omrøres i 2 timer, hvorpå den filtreres, og opløsningsmidlerne fjernes under formindsket tryk. Ved omkrystallisation af den faste remanens fra acetonitril fås 173,19-dihydroxy-androst-4-en-3-on med smp. 205-207°C.

Eksempel_3 19zHydr2xyziZ§iiz252PE2E22Yiå2§E2®£z£z®Dz2l22

En opløsning af 11 g 173,19-bis(1-oxopropoxy)androst-4-en-3-on i 2 liter methanol behandles med 2,5 g natriumcarbonat i 250 ml vand og holdes under tilbagesvaling i 1 time, hvorefter reaktionsblandingen hældes ud i 10 liter vand, og det faste stof samles ved filtrering.

146555 18

Det faste stof opløses i methylenchlorid, tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Ved omkrystallisation af remanensen fra acetone/hexan fås 6 g 19-hydroxy-17&(1-oxopropoxy)--androst-4-en-3-on med smp. 160-162°C.

Eksempel_4

En opløsning af 19-hydroxy-androst-4-en-3,17-dion i eddikesyre-anhydrid og-pyridin får lov at henstå natten over, hvorefter den hældes ud i isvand. Det fremkomne faste stof samles, tørres og omkrystalliseres fra hexan, hvorved der fås 19-acetoxyandrost-4-en-3,17--dion.

Eksemgel_5 i9lå2§i-2£YliZ§lkYdroxYandrost;4-en-3-on

Til en opløsning af 25,6 g 19-acetoxyandrost-4-en-3,17-dion i 4 liter methanol, afkølet til 0°C, sættes 3,1 g natriumborhydrid, og blandingen omrøres ved 0°C i 1 time, hvorefter der tilsættes 30 ml eddikesyre, og methanolen fjernes under formindsket tryk. Remanensen tages op i ethylacetat og vaskes med vand, og det organiske lag tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Den faste remanens opløses i 2 liter chloroform, behandles med 125 g mangandioxid og omrøres i 2 timer, hvorefter reaktionsblandingen filtreres, og opløsningsmidlet fjernes under formindsket tryk. Remanensen chromatograferes på aluminiumoxid under anvendelse af benzen/ether (1:1) som elueringsmidlet. Ved omkrystallisation af produktet fra acetone/hexan fås 19-acetoxy-17β-hydroxyandrost-4-en-3-on med smp. 125-127°C.

Eksemgel_6 i2lHydr2xy;;lZ§i21;tetrahYdr2gyranyl2XYiandr2st;4-en;3-on

Til en opløsning af 10 g 19-acetoxy-173-hydroxyandrost-4-en--3-on i 300 ml dihydropyran sættes en lille krystal p-toluensul-fonsyre, og reaktionsblandingen får lov at henstå natten over, hvorefter den opløses i ether og ekstraheres med fortyndet natriumbi-carbonat-opløsning. Etherlaget tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Remanensen opløses i 2 liter 146556 19 methanol og tilsættes 2,5 g natriumbicarbonat i 250 ml vand. Methanol--opløsningen holdes under tilbagesvaling i 1 time, hvorefter opløsningsmidlet fjernes under formindsket tryk ved 40°C. Remanensen dækkes med vand, og det faste råprodukt samles og omkrystalliseres fra ethylacetat, hvorved der fås 19-hydroxy-173(2'-tetrahydropyranyl--oxy)androst-4-en-3-on med smp. 193-199°C.

Eksempel_7

En opløsning af 7 g 19-hydroxy-17β-(21-tetrahydropyranyloxy)-androst-4-en-3-on i 500 ml acetone køles til 10°C og tilsættes dråbevis 5,3 ml Jones-reagens. Reaktionsblandingen omrøres i yderligere 10 minutter og hældes derefter ud i vand og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetat-ekstrakten tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes under formindsket tryk. Remanensen opløses i 250 ml 95%'s ethanol og tilsættes 2 ml koncentreret saltsyre. Ethanol-opløsningen holdes under tilbagesvaling i 1 time, afkøles derpå til stuetemperatur og neutraliseres med fast natrium-carbonat. Den neutraliserede opløsning fortyndes med vand og ekstraheres med ethylacetat, ekstrakten tørres over magnesiumsulfat og“filtreres, og opløsningsmidlet fjernes, hvorpå remanensen chromatogra-feres på aluminiumoxid under anvendelse af 25% ether i benzen som elueringsmiddel, hvilket giver 3-oxo-173-hydroxyandrost-4-en-19-al med smp. 125-127°C.

Eksemgel_8 lS-^-Adamantanylcarbonyloxy^androst-^-en-B^l^^dion

En opløsning af 22 g 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion, 18 g 1-adamantancarboxylsyrechlorid og 29 ml pyridin i 2,2 liter toluen opvarmes til tilbagesvalingstemperatur natten over, reaktionsblandingen afkøles, toluen-laget vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Omkrystallisation fra methanol af den herved fremkomne remanens giver 19-(l-adamantanyl-carbonyloxy)androst-4-en-3,17-dion med smp. 161-163°C.

146555 20

Eksemgel_9 ^^-Dioxoandrost-^-en-lS-al

Til en opløsning af 30 g 19-hydroxyandrost-4-en-3,17-dion i 3 liter acetone, afkølet i et isbad, sættes 28 ml Jones-reagens i løbet af 1 time, hvorpå reaktionsblandingen omrøres i yderligere 15 minutter og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes under formindsket tryk ved 35°C. Remanensen tages op i et stort rumfang ether og 1,5 liter vand, ether-laget samles, tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Ved krystallisation af remanensen fra acetone/hexan fås 3,17-dioxoandrost-4-en-19-al med smp. 126-129°C.

Eksemgel_10 3-Oxo-17g2lii252EE2B25Zi§S^E2§llål§SliEE§i

Til en opløsning af 14 g 19-hydroxy-17p-(l-oxopropoxy)androst--4-en-3-on i 1 liter acetone, afkølet i et isbad, sættes 13,3 ml Jones-reagens i løbet af 1 time, hvorefter reaktionsblandingen hældes ud i et stort rumfang vand og ekstraheres med ether. Ether-ekstrakten tørres over magnesiumsulfat og filtreres, og opløsningsmidlet fjernes. Ved krystallisation af remanensen fra acetone/hexan fås 3-οχο-17β-(1--oxopropoxy)androst-4-en-19-al med smp. 119-121°C.