DK144568B - Fremgangsmaade til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier - Google Patents

Fremgangsmaade til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier Download PDF

Info

Publication number
DK144568B
DK144568B DK215275AA DK215275A DK144568B DK 144568 B DK144568 B DK 144568B DK 215275A A DK215275A A DK 215275AA DK 215275 A DK215275 A DK 215275A DK 144568 B DK144568 B DK 144568B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
radiation
preparation
medium
bacto
sterilization
Prior art date
Application number
DK215275AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK144568C (da
DK215275A (da
Inventor
E Eisenberg
G Altmann
B Bogokovsky
M Lapidot
Original Assignee
Atomic Energy Commission
Isorad Isotopes & Radiation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Atomic Energy Commission, Isorad Isotopes & Radiation filed Critical Atomic Energy Commission
Publication of DK215275A publication Critical patent/DK215275A/da
Publication of DK144568B publication Critical patent/DK144568B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK144568C publication Critical patent/DK144568C/da

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/02—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
    • A61L2/08—Radiation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/26—Conditioning fluids entering or exiting the reaction vessel
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/04—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by injection or suction, e.g. using pipettes, syringes, needles
    • C12M33/07—Dosage or metering devices therefore
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/848—Escherichia
    • Y10S435/849—Escherichia coli
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/873—Proteus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/874—Pseudomonas
    • Y10S435/875—Pseudomonas aeruginosa
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/879—Salmonella
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/88—Serratia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

144568
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier, der er egnet til dyrkning af bakterier.
Det er kendt at sterilisere ved hjælp af ioniserende stråler. Det foretrækkes normalt at foretage en sådan sterilisering med gammastråler.
Det er dog også muligt at anvende andre slags ioniserende stråler såsom røntgenstråler og elektronstråler af passende intensitet.
Ved strålesterilisering må der drages omsorg for at benytte sådanne stråler, at der ikke sker en dannelse af radioaktive eller toxiske produkter i materialet, som steriliseres.
Man har tidligere udført forsøg med henblik på at undersøge virkningen af gammastråling på dyrkningsmedier, og i de fleste tilfælde har man iagttaget skadelige virkninger. Resultatet har generelt været, at sådanne bestrålede mediers evne til at opretholde bakterievækst var alvorligt forringet sammenlignet med varmesteriliserede dyrkningsmedier med samme begyndelsessammensætning. Virkningen af gammastråling på dyrkningsmedier er bl.a. undersøgt af: a. H.E. Frey et al, Radiation Research, 28. 668-672 (1966); b. H.E. Frey et al, Radiation Research, 36, 59-67 (1968); c. V.L. Chopra, Mutation Res., 8, 25-33 (1969); d. I.H. Blank et al, J. Bac., 30, 21-32 (1935); e. E.C. Pollard et al, Radiation Res. Supp., 6, 194-200 (1966); f. J.H. Becking, Misc. Papers, 9 (1971) Landbouwhogschool
Wageningen, Netherlands.
g. P.C. Kesawan, Radiation Botany 11, 253-281 (1971).
I lyset af ovenstående er det generelt blevet antaget, at gammastråling ikke på effektiv måde kan anvendes til sterilisering af emballerede dyrkningsmedier. Den skadelige virkning af en sådan bestråling skyldes almindeligvis dannelsen af visse nedbrydningsprodukter og også koncentrationsfaldet af visse nødvendige bestanddele i dyrkningsmediet.
I visse tilfælde dannes toxiske produkter, og disse hæmmer eller endog hindrer væksten af mikroorganismer. Redox-potentialer forandres, og visse almindeligt anvendte indikatorer ødelægges ved denne bestråling.
Det har nu vist sig muligt at tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af sterile dyrkningsmedier, som er egnet til dyrkning af bakterier, ved hvilken fremgangsmåde sterilisationen gennemføres ved hjælp af ioniserende stråler.
2 144568
Dette opnås med fremgangsmåden ifølge opfindelsen, som er ejendommelig ved, at der til dyrkningsmediet sættes et eller flere sådanne stoffer valgt blandt katalase, thioglycollat, cystein, cysteamin, vitaminer og oxiderbare organiske indikatorer, som virker strålingsbeskyttende ved helt eller delvis at dekomponeres ved bestråling eller ved at hæmme dannelsen eller fremme nedbrydningen af toxiske produkter, hvorefter det således modificerede dyrkningsmedium steriliseres ved behandling med ioniserende stråler.
På trods af den almindeligt akcepterede antagelse, at ioniserende stråling ikke kan anvendes på effektiv vis til den påtænkte sterilisation, overvindes førnævnte ulemper, når fremgangsmåden ifølge opfindelsen benyttes. Fremgangsmåden er anvendelig overfor kulturmedier, som bredt kan grupperes i faste medier og væskeformige medier. Dyrkningsmedier kan grupperes efter disses karakteristiske bestanddele. Manglerne ved gammabestrålede dyrkningsmedier undgås ifølge opfindelsen ved visse ændringer af dyrkningsmediernes begyndelsessammensætning, idet ændringens art afhænger af mediets sammensætning. For eksempel undgås nedbrydningen af visse kritiske bestanddele ved tilsætning af passende mængder af strålingsbeskyttere, dvs. kemisk labile forbindelser, som, når de er tilstede i mediet, nedbrydes før andre af mediets bestanddele, og derved - så længe de er tilstede i mediet - beskytter disse andre bestanddele mod nedbrydning forvoldt af den ioniserende stråling. Sådanne kemisk labile stoffer omfatter cysteamin, der er en mercaptoholdig amin, cystein og glutathion, der er mercaptoholdige aminosyrer, thioglycolsyre, der er en mercaptoholdig carboxylsyre eller de respektive salte heraf samt vitaminer, såsom vitamin C, og oxiderbare organiske indikatorer, såsom neutralrødt, phenolrødt og brom-thymolblåt. Visse bestanddele, såsom vitaminer eller indikatorer, forøges, således at der bliver en passende koncentration tilbage efter bestråling. Dannelsen af visse toxiske produkter, f.eks. peroxider, hæmmes eller nedbrydes ved at tilsætte enzymer, f.eks. katalase. Visse indikatorer holdes på virksomt niveau ved tilsætning af strålingsbeskyttere og/eller ved at begynde med en i sammenligning med koncentrationen i sædvandige dyrkningsmedier højere begyndelses koncentration, når indikatorerne i sig selv er strålingsbeskyttere.
Steriliserede dyrkningsmedier blev fremstillet ifølge opfindelsen og prøvet med en lang række mikroorganismer. Der opnåedes tilfredsstillende resultater sammenlignet med medier steriliseret på sædvanlig måde.
144568 3
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres ved indledningsvis at tilsætte den eller de valgte strålingsbeskyttere til dyrkningsmediet.
Mediet fyldes derpå i passende beholdere, og beholderne med indhold steriliseres ved hjælp af ioniserende stråling. Sterilisationen gennemføres med fordel ved en dosering på omkring 0,5 til 2,5 Mrad.
Yderligere aspekter ved opfindelsen vil fremgå af nedenstående eksempler.
EKSEMPEL 1 Triple sukker-jern-agar.
Sædvanlig sammensætning af dette dyrkningsmedium er: "Bacto"-oksekødekstrakt 3 g 11 Bacto"-gærekstrakt 3 g MBacto"-peptone 15 g
Proteasepepton "Difco" 5 g "Bacto"-lactose 10 g
Saccharose "Difco" 10 g "Bacto"-dextrose 1 g
Ferrosulfat 0,2 g
Natriumchlorid 5 g
Natriumthiosulfat 0,3 g "Bacto"-agar 12 g "Bacto"-phenolrødt 0,024 g
Vand op til 1 liter.
En blanding med sædvanlig sammensætning blev fremstillet med den ændring, at phenolrødt-indholdet blev forøget til 60 mg pr. liter. En del af dette phenolrødt dekomponeres ved bestråling. 65 Gram tørt kulturmedium blev kogt i 1000 ml vand, afkølet til 60°C og hældt på rør til opnåelse af nødvendig skråflade og en tyk endedel. Efter afkøling og dannelse af gelen blev rørene tilstoppet og steriliseret ved hjælp af gammastråling på 1,0 Mrad. Det således fremkomne dyrkningsmedium var sterilt. Det blev opbevaret i et antal uger og afprøvet efter steriliseringen og efter opbevaringen. Dette dyrkningsmediums anvendelighed blev afprøvet med følgende bakterier: Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella haifa og andre serotyper tilhørende Salmonella-grupperne C, G + E. Shigella flexneri 2, Shigella flexneri 4, Shigella flexneri 5, Shigella flexneri 6, Shigella sonnei, Pseudomonas aeruginosa, Pasteurella pseudo-tuberculosis, Vibrio cholerae biotype El Tor, E. coli OSS, Proteus morgani, Proteus vulgaris, Proteus rettgeri, Providence, Citrobacter, Serratia, E. hafniae, E. cloaceae.
4 14Å568 I alle tilfælde opnåedes samme vækst som med tilsvarende dyrkningsmedier, der var blevet varmesteriliseret på sædvanlig måde.
Der opnåedes tilsvarende resultater ved røntgenbestråling af tilsvarende enheder.
Ved anvendelse af bestråling til steriliseringen er det muligt at benytte beholdere af materialer, f.eks. plast, som ikke tåler opvarming til de ved varmesteriliseringen forekommende temperaturer.
EKSEMPEL 2 Mueller-Hinton-agar.
Sædvanlig sammensætning af dette dyrkningsmedium er:
Oksekødsinfusionsvæske 300 g X ) "Bacto Casaminosyrer" , teknisk kvalitet 17,5 g
Stivelse 1,5 g II Bacto"-agar 17 g
Vand op til 1 liter X ^ 'aminosyrer fremstillet ved syre-hydrolyse af casein (DIFCO Manual, 9. udg. 1953, trykkeår 1971, side 265).
Et sædvanligt præparat blev fremstillet med den ændring, at agar-indholdet blev forøget med 25%. Der tilsattes katalase til et indhold på 10 keil enheder pr. liter. En keil enhed katalaseaktivitet defineres som den enzymmængde, der vil dekomponere 1 g 100% hydrogenperoxid i 10 minutter ved 25°C under betingelserne for analyseproceduren. Tilsætningen og koncentrationsforandringen af disse stoffer blev foretaget for at opnå den ønskede gelstyrke og undgå toxiske virkninger forårsaget af gammastråling. En mængde på 38 g af dette præparat (tilsat agar indbefattet) blev kogt i 1000 ml destilleret vand, og efter afkøling til 50°C blev ka-talasen tilsat, plader blev udhældt, og disse blev pakket i polyethylen-hylstre, som blev hermetisk lukket.
De lukkede hylstre indeholdende agar-pladerne blev steriliseret ved en dosis på 1-2 Mrad. De steriliserede plader blev opbevaret i 6 uger og undersøgt såvel efter sterilisationen som efter opbevaringen.
De til undersøgelsen benyttede mikroorganismer var:
Streptococcus faecalis, N. meningitidis, Pasteurella pseudotuberculo-sis, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella boydii, Staphylococcus aureus, Shigella flexneri, Serratia, Vibrio cholerae biotype El Tor, Klebsiella, Proteus, E. coli 055, Pseudomonas aeruginosa.
Med alle stammer fremkom tilfredsstillende vækst på dette medium.
144568 5 EKSEMPEL 3 Væskeformigt thioglycollat-medium.
Sædvanlig sammensætning af dette dyrkningsmedium er: " Bacto"-casitoneXX^ 15 g "BactoM-gærekstrakt 5 g "Bacto"-dextrose 5,5 g
Natriumchlorid 2,5 g L-cystin 0,5 g
Natriumthioglycoflat 0,5 g 11 Bacto"-agar 0,75 g
Resazurin 0,001 g
Vand op til 1 liter.
XX } nedbrydningsprodukt af casein frembragt ved indvirkning af pancreas-enzymer (DIFCO Manual side 264).
Et sædvanligt præparat blev modificeret ved en forøgelse af begyndelsesindholdet af thioglycollat til 1,5 g pr. liter. Denne modifikation er nødvendig for at opretholde det nødvendige redox-potential for væksten af anaerobe bakterier. 29,5 g af præparatet blev kogt i 1000 ml destilleret vand, afkølet til 60°C og hældt i plastrør. Disse blev tilproppet og steriliseret ved hjælp af gammastråling på 1-2 Mrad. Efter sterilisation og efter opbevaring i 6 uger blev kulturmediet afprøvet og viste sig at være egnet til bakteriologisk arbejde.
Clostridium perfringens, Strep/hemolyticus gruppe A, Strep, fae-calis, Strep/viridans og E. coli blev indpodet, og der opnåedes tilfredsstillende vækst, selv med små podemængder.
EKSEMPEL 4 Væskeformigt thioglycollat-medium.
Et medium blev fremstillet som i Eksempel 3, men der anvendtes det normale thioglycollat-indhold, hvortil der blev tilsat 1,00 g cystein pr. liter. Der opnåedes tilsvarende resultater.
EKSEMPEL 5 Agar-Mac Con key.
Sædvanlig sammensætning af dette dyrkningsmedium er følgende: "Bacto"-peptone 17 g
Proteasepeptone 3 g "Bacto"-lactose 10 g "Bacto"-galdesalte nr. 3 1/5 g
Natriumchlorid 5 g 6 U4568 "Bacton-agar 13,5 g "Bacto"-neutralrødt 0,03 g "Bacto"-krystalviolet 0,001 g
Vand op til 1 liter.
Den sædvanlige sammensætning blev forøget til 70 mg neutralrødt pr. liter og thioglycollat eller cystein tifsattes i en mængde på 0,01 M pr. liter. 50 Gram af mediet opløstes i 1000 ml destilleret vand, ud-hældtes i petriskåle, indpakkedes i polyethylenhylstre og steriliseredes med gammastråler ved 0,5-2,0 Mrad. Efter sterilisering og opbevaring i 4 uger blev mediet afprøvet og viste sig at være egnet til dyrkning af gramnegative stavbakterier.
Klebsiella, Herrelea, Serratia, Proteus, Levinea, Pseudomonas aeruginosa, E. coli, Shigella boydii og Salmonella typhimurium dyrkedes, og væksten var på højde med standardvækst.
EKSEMPEL 6 C.L.E.D.
Sædvanlig sammensætning af dette dyrkningsmedium er følgende:
Pepton 4 g
Lab Lemco ® x*x) 3 g
Tryptone 4 g
Lactose 10 g L-cystin 0,128 g -Bromthymolblåt 0,02 g
Agar 15 g
Vand op til 1 liter xxx)Et oksekødsekstrakt fremstillet af "Oxoid Ltd.", England.
Den sædvanlige sammensætning ændredes ved en forøgelse af brom-thymolblåt-indholdet til 40 mg pr. liter og ved tilsætning af 0,01 M thioglycollat eller cysteamin pr. liter. 36,2 Gram opløstes i 1000 ml kogende vand, afkøledes til 50°C og udhældtes i petriskåle af plast og blev forseglet i polyethylenhylstre. Efter sterilisation med 1-2 Mrad gammastråler blev mediet opbevaret i 6 uger og blev afprøvet efter sterilisering og efter opbevaring. Det viste sig at være egnet til alle former for bakteriologisk arbejde.
Nedenstående bakterier blev indpodet og viste sig at give et godt udbytte på dette medium: -•S.
144568 7
Proteus, Levinea, Pseudomonas aeruginosa, E. coli, Salmonella typhimurium, Klebsiella, Herrellea, Serratia, Shigella boydii, Staph, aureus, Strep, faecalis og Candida.
EKSEMPEL 7 Præparatglasudstyr.
Et præparatglasudstyr til dypning (eng.: dip slide kit) blev fremstillet efter Guttmann m.fl., Brit.Med. Journ. 111, 343-345 (1967), og de to sider af plastpræparatglasset blev dækket med henholdsvis C-L.E.D. og med MacConkey-agar. Præparatglasset blev indsat i en tæt, hermetisk tillukket plastbeholder, og denne blev steriliseret ved gammastråling på 2 Mrad. Dyrkningsmedierne blev afprøvet umiddelbart efter sterilisering, og et antal af beholderne blev opbevaret i 8 uger. Der opnåedes tilfredsstillende vækst på begge medier.
De fleste af eksemplerne blev gentaget, og i stedet for gammastråler anvendtes røntgenstråler eller bestråling med elektroner i tilsvarende dosering. Der fremkom tilsvarende resultater.
DK215275A 1974-05-17 1975-05-15 Fremgangsmaade til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier DK144568C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IL4485374 1974-05-17
IL44853A IL44853A (en) 1974-05-17 1974-05-17 Process for the preparation of sterile culture media and culture medium thus obtained

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK215275A DK215275A (da) 1975-11-18
DK144568B true DK144568B (da) 1982-03-29
DK144568C DK144568C (da) 1982-09-13

Family

ID=11047682

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK215275A DK144568C (da) 1974-05-17 1975-05-15 Fremgangsmaade til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier

Country Status (6)

Country Link
US (1) US4071412A (da)
CA (1) CA1029523A (da)
DE (1) DE2519685A1 (da)
DK (1) DK144568C (da)
GB (1) GB1478238A (da)
IL (1) IL44853A (da)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179338A (en) * 1977-09-19 1979-12-18 Gordon Maurice R Microbiological medium suitable for sterilization by ionizing radiation
US4241186A (en) * 1978-12-18 1980-12-23 Conviron, Inc. Pectin culture media and method
JPS62502262A (ja) * 1985-03-27 1987-09-03 ブロンコスタット・プロプライアタリー・リミテツド アジユバントを含有しないワクチン
US5658790A (en) * 1986-09-04 1997-08-19 Bio 101, Inc. Cell culture media formulated in unit dose
US5342752A (en) * 1990-04-16 1994-08-30 Cryopharm Corporation Method of inactivation of viral blood contaminants using acridine deriatives
US5418130A (en) * 1990-04-16 1995-05-23 Cryopharm Corporation Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
WO1991016060A1 (en) * 1990-04-16 1991-10-31 Cryopharm Corporation Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
US6187572B1 (en) 1990-04-16 2001-02-13 Baxter International Inc. Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants
TW201791B (da) * 1991-03-19 1993-03-11 Becton Dickinson Co
US6010896A (en) * 1991-06-24 2000-01-04 Becton, Dickinson And Company Lyophilized ionizing radiation sterilized microorganisms as an additive for nutrient media for growing bacteria
AU687819B2 (en) * 1993-08-09 1998-03-05 Johnson & Johnson Medical, Inc. Self-contained biological indicator
AU6973096A (en) * 1995-09-18 1997-04-09 Minnesota Mining And Manufacturing Company Thin film culture plate device containing granulated medium particles
US20060003447A1 (en) * 2003-12-30 2006-01-05 Richard Fike Dry powder cells and cell culture reagents and methods of production thereof
US6627426B2 (en) 1997-02-14 2003-09-30 Invitrogen Corporation Methods for reducing adventitious agents and toxins and cell culture reagents produced thereby
US6383810B2 (en) * 1997-02-14 2002-05-07 Invitrogen Corporation Dry powder cells and cell culture reagents and methods of production thereof
US20040022666A1 (en) * 1998-06-30 2004-02-05 Invitrogen Corporation Methods for reducing adventitious agents and toxins and cell culture reagents produced thereby
US6255099B1 (en) 2000-02-17 2001-07-03 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College High-yield dual-buffered bacterial growth medium
WO2002036735A2 (en) * 2000-11-06 2002-05-10 Invitrogen Corporation Dry powder cells and cell culture reagents and methods of production thereof
EP2251417A1 (en) * 2001-11-30 2010-11-17 Life Technologies Corporation Dry powder cell culture medium containing liquid and methods of production thereof
EP2861715B1 (en) * 2012-06-13 2018-09-19 Eucodis Bioscience GmbH Catalase in growth media
WO2014018433A1 (en) 2012-07-25 2014-01-30 3M Innovative Properties Company Agglomerated microbiological media
KR102144710B1 (ko) * 2018-10-15 2020-08-14 주식회사 노블바이오 감마선 조사에 의한 변성이 저감되는 배지 조성물
CN111896533A (zh) * 2020-08-06 2020-11-06 无锡科智达科技有限公司 一种耐受辐照的酚红试剂及其应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3346464A (en) * 1965-10-23 1967-10-10 Ritter Pfaudler Corp Biological sterility indicator and method for making and using same
US3838013A (en) * 1971-04-01 1974-09-24 Gen Electric Combined sampling and bacteriological culturing device

Also Published As

Publication number Publication date
GB1478238A (en) 1977-06-29
CA1029523A (en) 1978-04-18
DK144568C (da) 1982-09-13
DE2519685A1 (de) 1975-11-27
IL44853A (en) 1975-11-25
DK215275A (da) 1975-11-18
IL44853A0 (en) 1974-12-31
US4071412A (en) 1978-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK144568B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af sterile enhedsportioner af dyrkningsmedier
Jenkinson Studies on the decomposition of plant material in soil: II. Partial sterilization of soil and the soil biomass
US3198636A (en) Preservation of wine
Bibby et al. The effect of fluorine on mouth bacteria
Subba et al. Antimicrobial action of citrus oils
US4529702A (en) Transport medium for microorganisms
Linke et al. Effective surface sterilization of gutta-percha points
US4438011A (en) Method for sterilizing soft contact lens
GAFFNEY et al. The incidence and role of actinomyces in recurrent acute tonsillitis
Malik Use of activated charcoal for the preservation of anaerobic phototrophic and other sensitive bacteria by freeze-drying
Yamamura et al. Antimicrobial effect of chemical preservatives on enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7
Roberts et al. Inhibition of spores of Clostridium spp. by sodium nitrite
Lynt et al. Effect of delayed germination by heat‐damaged spores on estimates of heat resistance of Clostridium botulinum types E and F
Richards Inactivation of resistant Pseudomonas aeruginosa by antibacterial combinations
Silva et al. Evaluation of ultraviolet radiation to control microorganisms adhering to low-density polyethylene films
US20030148415A1 (en) Method of testing for the presence of microorganisms in a gaseous environment comprising hydrogen peroxide
Wills The resistances of vegetative bacteria to moist heat
Lachica et al. Two improved media for isolating and enumerating enterococci in certain frozen foods
Richards et al. Preservation of fluorescein solutions against contamination with Pseudomonas aeruginosa
Magrini et al. A study of Staphylococcus aureus growth in model systems and processed cheese
Dozier Inhibitive influence of sugars and salt on viability, growth, and toxin production of B. botulinus. XVII
Altmann et al. Radiation sterilization of triple sugar iron agar
Kempe et al. Combined irradiation–heat processing of canned foods: Green peas inoculated with anaerobic bacterial spores
EP0504763A1 (en) Ionizing irradiation sterilizable culture medium suitable for use in environmental sampling devices
Tracy Spoilage of olives by colon bacilli

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed