DE934230C

DE934230C - Process for the separation of deoxycholic acid from a cholic acid-deoxycholic acid mixture

Info

Publication number: DE934230C
Application number: DEA16010A
Authority: DE
Inventors: Robert Harris Sifferd; Jerry Joseph Svarz
Original assignee: Armour and Co
Current assignee: Armour and Co
Priority date: 1951-06-19
Filing date: 1952-06-20
Publication date: 1955-11-17

Description

Verfahren zur Abtrennung von Desoxycholsäure aus einem Cholsäure-Desoxycholsäuregemisch Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Abtrennung von Desoxycholsäure aus einem Cholsäure-Desoxycholsäuregemisch.Process for the separation of deoxycholic acid from a cholic acid-deoxycholic acid mixture The invention relates to a method for separating deoxycholic acid from a Cholic acid-deoxycholic acid mixture.

Es ist bekannt, daß bei der Reinigung von Desoxycholsäure durch Umkristallisieren aus organischen Lösungsmitteln gewöhnlich nur geringe Ausbeuten der gereinigten Säure erzielt werden, oder wiederholte Umkristallisationen erforderlich sind, um ein Produkt zu erzielen, das für die Weiterverarbeitung genügend rein ist.It is known that in the purification of deoxycholic acid by recrystallization from organic solvents usually only low yields of the purified Acid can be achieved, or repeated recrystallizations are required to achieve a product that is sufficiently pure for further processing.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren können die genannten Gallensäuren unter Vermeidung der den bekannten Verfahren anhaftenden Nachteile in einfacher Weise und mit zufriedenstellender Ausbeute an reiner Desoxycholsäure getrennt werden.According to the process according to the invention, the bile acids mentioned can while avoiding the disadvantages inherent in the known processes in a simple manner Manner and with a satisfactory yield of pure deoxycholic acid.

Dies wird erfindungsgemäß dadurch erreicht, daß das Cholsäure-Desoxycholsäuregemisch in einer Mischung aus Methyläthylketon und Wasser gelöst und dieser eine solche Menge Wasser zugesetzt wird, daß eine ketonreiche Schicht entsteht, in welcher die Cholsäure gelöst ist. Die Desoxycholsäure wird dann z. B. durch Abkühlen auskristallisiert.This is achieved according to the invention in that the cholic acid-deoxycholic acid mixture dissolved in a mixture of methyl ethyl ketone and water and this one such Amount of water is added that a ketone-rich layer is formed in which the Cholic acid is dissolved. The deoxycholic acid is then z. B. crystallized by cooling.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren kann man vorzugsweise Desoxycholsäure von der diese verunreinigenden Cholsäure abtrennen. Man hat beispielsweise gefunden, daß es bei Verwendung des erfindungsgemäßen Verfahrens möglich ist, den Gehalt von Cholsäure in der Desoxycholsäure von ao°/o auf 1,51/o zu vermindern. Dabei werden mehr als go °/o der im Ausgangsmaterial befindlichen Desoxycholsäure erhalten.Desoxycholic acid can preferably be used in the process of the invention from the cholic acid which contaminates them. For example, it has been found that it is possible when using the method according to the invention, the content of To reduce cholic acid in deoxycholic acid from ao per cent to 1.5 per cent. Be there more than 100% of the deoxycholic acid in the starting material was obtained.

Die Erfindung gründet sich auf die Erkenntnis, daß Methyläthylketon ein organisches Lösungsmittel ist, welches bei Temperaturen unterhalb seines Siedepunktes und bei Atmosphärendruck nur teilweise mit Wasser mischbar ist und mit Wasser Gleichgewichtsmischungen bildet, deren Zusammen- setzung von der Temperatur abhängig ist. Eine solche Mischung aus Methyläthylketon und Wasser kann aus einer oberen methyläthylleetonreichen Schicht und einer unteren wäßrigen Schicht be- stehen. Die ketonreiche Schicht vermag die Chol- säure größtenteils zu lösen, während die Desoxy- cholsäure in wesentlich geringerem Maße darin gelöst wird. Andererseits ist die ketonarme Schicht ein schlechtes Lösungsmittel für die Desoxychol- säure. Auf diese Weise wird es möglich,. die beiden Schichten so einzustellen, daß die Deso-xycholsäure selektiv aus der ketonreichen Schicht entfernt und z. B. durch Abkühlen- in die ketonarme Schicht übergeführt wird, wodurch die Desoxycholsäure direkt abgetrennt und in praktisch reiner und kristalliner Form gewonnen wird. Die Einstellung der Schichten kann erfindungs- gemäß in verschiedener Weise, z. B. durch Ver- minderung des Ketongehaltes der ketonreichen Schicht durch Verdampfung erzielt werden. Vorzugsweise wird Wasser zur Vergrößerung des Volumens der wäßrigen Schicht zugesetzt, wo- durch gleichzeitig ein Teil des Ketons aus der oberen Schicht in die untere Schicht geht, und zwar beläßt man eine solche Ketonmenge in der oberen Schicht, die zur Lösung der vorhandenen Cholsäure ausreicht. Es ist jedoch auch möglich, die Mengen von Wasser und Methyläthylketon so vorauszubestim- men, daß ohne Zusatz dieser Lösungsmittel, eine obere Schicht produziert wird, die zur Lösung der Cholsäure ausreicht, weil die Desoxycholsäure aus der unteren Sehicht herausfällt. Zur Durchführung des erfindungsgemäßen Ver- fahrens wird rohe Desoxycholsäure z. B. unter Er- wärmen in einer im Gleichgewicht befindlichen Mischung aus Methyläthylketon und Wasser gelöst, wobei die Menge der ketonreichen Schicht in einem bestimmten Verhältnis zu der Menge- der zu ent- fernenden Cholsäure steht. Dieses wird erreicht durch Erwärmen der rohen Desoxycholsäure in einer genügenden Menge der ketonreichen Mischung, um beim Sieden die Lösung. der rohen Desoxychol- säure zu erreichen. Dann wird Wasser hinzugefügt, wodurch die Mischung bis zu dem gewünschten Verhältnis der zweiphasigen im Gleichgewicht befindlichen Mischung verdünnt wird. Beim Abkühlen kristalli- siert im wesentlichen die gesamte Desoxycholsäure aus, während der verhältnismäßig kleine Anteil der obenschwimmenden ketonreichen Schicht im wesent- lichen die ganze verunreinigende Cholsäure in Lösung enthält. Man kann auch ein Desoxycholsäure-Cholsäure- gemisch in einer gesättigten Lösung von Methyl- äthylketon in Wasser auflösen, worauf Methyläthylketon im Verhältnis zu der Menge der Cholsäure in die Mischung eingebracht und diese zur Abscheidung der Desoxycholsäure abgekühlt wird. Die Kristalle können dann durch Zentrifugieren, Filtrieren oder andere bekannte Verfahren abgetrennt werden.The invention is based on the knowledge that methyl ethyl ketone is an organic solvent, which at temperatures below its boiling point and at atmospheric pressure only is partially miscible with water and with water Forms equilibrium mixtures, the settlement depends on the temperature. One such a mixture of methyl ethyl ketone and water can reach from an upper methylethylleeton Layer and a lower aqueous layer stand. The ketone-rich layer is able to acid, while the deoxy- cholic acid to a much lesser extent is resolved. On the other hand is the low-ketone layer a bad solvent for the deoxychol- acid. In this way it becomes possible. the two Adjust layers so that the deoxycholic acid selectively removed from the ketone-rich layer and z. B. by cooling in the low-ketone layer is converted, whereby the deoxycholic acid separated directly and in practically pure and crystalline form is obtained. The setting of the layers can be according to in various ways, e.g. B. by reduction in the ketone content of those rich in ketones Layer can be achieved by evaporation. Preferably water is used for enlargement of the volume of the aqueous layer added, where- by at the same time part of the ketone from the upper layer goes into the lower layer, namely one leaves such an amount of ketone in the upper one Layer that is used to dissolve the cholic acid present sufficient. However, it is also possible to change the amounts of Water and methyl ethyl ketone to be determined in advance men that without the addition of these solvents, a upper layer is produced, which is used to dissolve the Cholic acid is sufficient because the deoxycholic acid is made up the lower layer falls out. To carry out the inventive method Driving is crude deoxycholic acid z. B. under warm in an equilibrium Dissolved mixture of methyl ethyl ketone and water, being the amount of the ketone rich layer in one specific relationship to the amount of distant cholic acid. This is achieved by heating the crude deoxycholic acid in a sufficient amount of the ketone-rich mixture, around the solution when it boils. the raw deoxychol to achieve acidity. Then water is added, which makes the Mix to the desired ratio the two-phase in equilibrium Mixture is diluted. When cooling down crystalline sates essentially all of the deoxycholic acid off, while the relatively small proportion of the upper ketone-rich layer is essentially lichen all the polluting cholic acid in Solution contains. One can also use a deoxycholic acid-cholic acid mixture in a saturated solution of methyl Dissolve ethyl ketone in water, whereupon methyl ethyl ketone is introduced into the mixture in proportion to the amount of cholic acid and this is cooled to separate out the deoxycholic acid. The crystals can then be separated by centrifugation, filtration, or other known methods.

- Die Erfindung wird durch die folgenden Ausführungsbeispiele erläutert. Beispiel z Zoo kg Desoxycholsäure (enthaltend ungefähr 2o% Cholsäure) werden in Soo 1 einer Mischung aus 86% Methyläthylketon und 14% Wasser unter Erhitzen bis zum Siedepunkt gelöst. Die Lösung wird filtriert und das heiße Filtrat durch Zugabe von 1370 1 6o0 heißem Wasser verdünnt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die kristallisierte Desoxycholsäure durch Zentrifugieren abgetrennt, mit einer kleinen Menge 86%igem Methyläthylketon und dann mit' einer kleinen Menge 26%igem Methyläthylketon (74% Wassergehalt) gewaschen. Der Zentrifugenkuchenenthält nach dem Trocknen 1,7% Cholsäure. Beispiel 2 Man arbeitet wie im Beispiel i beschrieben, löst jedoch die Desoxycholsäure, die ungefähr 2o % Cholsäure enthält, in einer gesättigten Lösung von Methyläthylketon im Wasser auf.- The invention is illustrated by the following exemplary embodiments. Example z Zoo kg deoxycholic acid (containing about 20% cholic acid) are dissolved in Soo 1 of a mixture of 86% methyl ethyl ketone and 14% water with heating to the boiling point. The solution is filtered and diluted the hot filtrate by the addition of 1370 1 6o0 hot water. After cooling to room temperature, the crystallized deoxycholic acid is separated off by centrifugation, washed with a small amount of 86% methyl ethyl ketone and then with a small amount of 26% methyl ethyl ketone (74% water content). The centrifuge cake contains 1.7% cholic acid after drying. Example 2 The procedure is as described in Example i, but the deoxycholic acid, which contains about 20% cholic acid, is dissolved in a saturated solution of methyl ethyl ketone in water.

Claims

PATENT CLAIMS-. i. Process for the separation of deoxycholic acid from a cholic acid-deoxycholic acid mixture, characterized in that the Mixture of the two bile acids in a one- or two-phase mixture of little Methyl ethyl ketone and plenty of water with warming or in a one- or two-phase Mixture of a lot of methyl ethyl ketone and a little water dissolves and from these solutions by adding methyl ethyl ketone and cooling, or by adding water or by cooling of the two-phase solution, only the deoxycholic acid from the lower layer is crystalline separates while the cholic acid remains in solution.

2. The method according to claim i, characterized in that the methyl ethyl ketone-water mixture is a saturated solution of methyl ethyl ketone in water or a saturated solution of water in methyl ethyl ketone. Attached pamphlets: W eygand, Organic-chemical Experimentierkunst, 2nd ed., 1949, p. 89; Swiss Patent No. 268 463; French Patent No. 9i 5095; British Patent No. 586439.