Verfahren zur Reinigung von Folsäure Bei den üblichen Synthesen der
Folsäure fällt ein Rohprodukt an, dessen Gehalt zwischen io und 30% an reiner Folsäure
schwankt und welches neben dieser zahlreiche alkalilösliche Pteridinderivate verschiedener
Zusammensetzungen enthält. Infolge der chemischen und auch der physikalischen Ähnlichkeit
dieser Nebenprodukte ist eine völlige Reinigung der Folsäure ohne wesentlichen Substanzverlust
sehr erschwert.Process for purifying folic acid In the usual syntheses of the
Folic acid is a crude product, the content of which is between 10 and 30% pure folic acid
varies and which in addition to this numerous alkali-soluble pteridine derivatives different
Contains compositions. As a result of the chemical and also the physical similarity
of these by-products is a complete purification of the folic acid without any substantial loss of substance
very difficult.
Nach dem Stande der Technik (Science, 1946, 668, An g i e r und Mitarbeiter)
wird eine Konzentrierung der Folsäure dadurch erreicht, daß das Rohprodukt in Alkali
gelöst und mit Bariumchlorid versetzt wird, wodurch ein Teil der Nebenprodukte zur
Ausfällung kommt. Beim Neutralisieren bis zum PH 7 fallen weitere Verunreinigungen
aus, während das Bariumsalz der Folsäure in Lösung verbleibt. Auf diese Weise lassen
sich Anreicherungen von etwa 8o % an Folsäure erreichen.According to the state of the art (Science, 1946, 668, An g i e r and employees)
a concentration of folic acid is achieved that the crude product in alkali
is dissolved and treated with barium chloride, whereby some of the by-products to
Precipitation is coming. When neutralizing up to PH 7, further impurities fall
while the barium salt of folic acid remains in solution. Leave that way
Enrichments of around 80% folic acid can be achieved.
Es ist ferner bekannt, daß Folsäure in konzentrierter Salzsäure löslich
ist und beim starken Verdünnen dieser Lösung wieder ausfällt, wobei Verunreinigungen
in Lösung verbleiben (USA..-Patentschrift 2 474 o22). Diese Reinigungsmethode ist
jedoch nicht ohne Verluste durchführbar, da hierbei, wie papierchromatographisch
nachgewiesen werden kann, eine Spaltung in Glutaminsäure, p-Aminobenzoesäure und
den Pteridinrest eintritt. Diese Verluste betragen etwa io bis fast 2o% der vorhandenen
Folsäure.It is also known that folic acid is soluble in concentrated hydrochloric acid
and when this solution is strongly diluted it precipitates again, with impurities
remain in solution (USA ..- Patent 2,474,022). This cleaning method is
however, this cannot be carried out without losses, as this is the case with paper chromatography
can be detected, a cleavage into glutamic acid, and p-aminobenzoic acid
the pteridine residue enters. These losses amount to about 10% to almost 20% of the existing ones
Folic acid.
Man hat auch bereits vorgeschlagen, das bei der Synthese von Folsäure
anfallende Rohprodukt über das Magnesiumsalz (USA.-Patentschrift 2 474184) bzw.
über das Zinksalz der Folsäure (USA.-Patent-
Schriften 2 470 490
und 2 470 491) zu reinigen. Die Verfahren führen aber nicht in einem Arbeitsgang
zu einem therapeutisch verwertbaren reinen Endprodukt, sondern es sind mehrfache
Wiederholungen der gleichen Arbeitsgänge zur Reinigung der Folsäure erforderlich.It has also been suggested to do this in the synthesis of folic acid
accruing crude product via the magnesium salt (USA patent specification 2 474184) or
about the zinc salt of folic acid (USA.-Patent-
Writings 2 470 490
and 2 470 491). However, the procedures do not result in a single operation
to a therapeutically usable pure end product, but there are multiple ones
Repetitions of the same steps required to purify the folic acid.
Aus der Arbeit von J. B. Dick, T. Harrison und H. Farrer (»Austral.
Journ. Expr. Biol. u. Med. Sc.«, 26, 239 [i948]) geht ferner hervor, daß Folsäure
in wäßriger Lösung bei PH 7 bis 8 ohne Zersetzung gekocht werden kann.From the work of J. B. Dick, T. Harrison and H. Farrer (»Austral.
Journ. Expr. Biol. And Med. Sc. «, 26, 239 [1948]) it also emerges that folic acid
can be boiled in aqueous solution at pH 7 to 8 without decomposition.
Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß sich, im Gegensatz
hierzu, die der auf üblichem Wege vorgereinigten Folsäure noch anhaftenden Begleitsubstanzen
durch einstündiges Kochen bei PH 7 bis 8 zersetzen und hierdurch in schwer lösliche
Stoffe übergehen, welche in diesem pH-Bereich durch Tierkohle leicht entfernbar
sind, während die in Lösung verbleibende Folsäure durch die Kohle kaum absorbiert
wird. Beim Ansäuern einer so behandelten Folsäurelösung bis zum PH 3 fällt die Folsäure
rein an und kann nach Auswaschen sofort unter anderem zu pharmazeutischen Zwecken
benutzt werden. Beispiel i io g vorgereinigte Folsäure von einer Reinheit von etwa
8o % werden mit Lauge in 5oo ccm Wasser in Lösung gebracht und diese Lösung auf
PH 7 bis 8 eingestellt. Nach Zusatz von io g Tierkohle wird i Stunde unter Rückfluß
gekocht und erkalten gelassen. Nach Zusatz von weiteren 2 g Kohle wird i Stunde
gerührt oder geschüttelt und anschließend filtriert. Nach dem Ansäuern mit Salzsäure
oder Essigsäure auf PH 3 kommt die Folsäure rein zur Ausfällung. Beispiel e io g
vorgereinigte Folsäure von einem Gehalt von ungefähr 8o0/0 werden in 5oo ccm Wasser
mit Baryt bei PH 7 bis 8 in Lösung gebracht und wie im Beispiel i erhitzt und mit
Kohle behandelt. Nach dem Einrühren des klaren Filtrates in verdünnter Essigsäure
fällt reine Folsäure an.It has now surprisingly been found that, in contrast
on this, the accompanying substances still adhering to the folic acid, which has been pre-purified in the usual way
decompose by boiling for one hour at pH 7 to 8 and thereby into poorly soluble
Substances pass over, which can easily be removed by animal charcoal in this pH range
while the folic acid remaining in solution is hardly absorbed by the charcoal
will. When a folic acid solution treated in this way is acidified to pH 3, the folic acid falls
pure and can be used immediately after washing out, among other things for pharmaceutical purposes
to be used. Example 110 g prepurified folic acid of a purity of about
80% are brought into solution with lye in 5oo ccm of water and this solution is applied
PH 7 to 8 set. After adding 10 g of animal charcoal, the mixture is refluxed for 1 hour
cooked and left to cool. After adding a further 2 g of charcoal, 1 hour
stirred or shaken and then filtered. After acidification with hydrochloric acid
or acetic acid to pH 3, the folic acid is pure to precipitate. Example e io g
Pre-purified folic acid with a content of about 80% is dissolved in 500 cc of water
brought into solution with barite at pH 7 to 8 and heated as in example i and with
Coal treated. After stirring in the clear filtrate in dilute acetic acid
pure folic acid is obtained.