DE923941C

DE923941C - Attachment of cover glasses on microscope slides with colored pieces of tissue for microscopic preparations

Info

Publication number: DE923941C
Application number: DET8213A
Authority: DE
Inventors: Andres Ferrari Jun
Original assignee: Technicon Chemical Co Inc
Current assignee: Technicon Chemical Co Inc
Priority date: 1953-08-07
Filing date: 1953-08-07
Publication date: 1955-02-24

Description

Anbringung von Deckgläsern auf Objektträgern mit gefärbten Gewebestücken für mikroskopische Präparate Die Erfindung betrifft die Präparation von histologischen Ge""heteilen für mikroskopische Untersuchungen und insbesondere das Anbringen des Deckglases für das gefärbte Gewebestück auf dem Objektträger.Attachment of cover slips to microscope slides with colored tissue pieces for microscopic specimens The invention relates to the preparation of histological specimens Ge "" heal for microscopic examinations and especially the attachment of the Cover slip for the stained piece of tissue on the slide.

Bei der Präparierung von Gewebe zur Vornahme einer mikroskopischen Prüfung desselben ist es üblich, ein Deckglas über dem gefärbten Gewebestück auf dem Objektträger durch Verbindung des Deckglases mit dem Objektträger mittels eines Harzes anzubringen. Das Harz wird in Form einer Lösung verwendet; nach Verdampfung des Lösungsmittels bindet das Harz das Deckglas mit dem Objektträger. Bisher für diese Zwecke benutzte Harze sind: Canadabalsam, Damarharz und synthetisches Harz, wie z. B. Cycloparaffin oder Naphthalin-Polymere. Harze der bisher verwendeten Art sind aus einer Reihe von Gründen nicht einwandfrei, unter welchen folgende hervorzuheben sind: i. Sie sind nicht genügend transparent, d. h., sie haben einen verhältnismäßig niedrigen Brechungsindex ; 2. sie dunkeln mit dem Alter; 3. sie entwickeln beim Altern einen Säuregrad, welches besonders in Verbindung mit Naturharzen der Fall ist, wie z. B. bei Canadabalsam, der beim Altern Säure bildet und dadurch ein Verblassen der Farbe oder eine schädliche Beeinträchtigung der Gewebestücke verursacht; q.. sie sind nicht genügend träge gegenüber dem Gewebe, oder sie bleiben nicht während der Alterung träge; 5. sie werden durch Härten brüchig und bewirken, daß die Objektträger leichter zerbrechen; 6. sie neigen zur Bildung einer Kristallisation unter Bildung eines unansehnlichen Schaumrandes um das Deckglas; 7. sie erweichen unter Temperaturverhältnissen, bei welchen die Objektträger benutzt werden, beispielsweise bei der Mikroprojektionsarbeit, welche die Verwendung von Kohlebogenlampen zur Projizierung der Objektträger erfordert.When dissecting tissue for making a microscopic Examining the same, it is common to place a coverslip over the stained piece of tissue the slide by connecting the cover glass to the slide by means of a To apply resin. The resin is used in the form of a solution; after evaporation of the solvent, the resin binds the coverslip to the slide. So far for Resins used for these purposes are: Canada balsam, damar resin and synthetic resin, such as B. cycloparaffin or naphthalene polymers. Resins of the type previously used are not flawless for a number of reasons, among which the following should be emphasized are: i. They are not sufficiently transparent, i. i.e., they have a proportionate low refractive index; 2. they darken with age; 3. They develop at the Aging a degree of acidity, which is particularly the case in connection with natural resins is, such as B. with Canada balsam, which forms acid with aging and thereby fades the color or harmful deterioration of the tissue; q .. they are not sufficiently inert to the tissue, or they do not stay during slow to aging; 5. They become brittle on hardening and cause the microscope slide break easier; 6. They tend to form crystallization with formation an unsightly foam rim around the coverslip; 7. they soften under temperature conditions, in which the slides are used, for example in microprojection work, which requires the use of carbon arc lamps to project the slides.

Die Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, eine neue Methode zur Anbringung des Deckglases auf dem Objektträger unter Anwendung eines Harzes, welches im wesentlichen frei von den erwähnten Beanstandungen ist, vorzusehen. Aus der folgenden näheren Beschreibung ergeben sich weitere Zwecke und Vorteile der Erfindung.The main object of the present invention is to provide a new Method of attaching the coverslip to the slide using a Resin, which is essentially free of the complaints mentioned, to be provided. Further purposes and advantages emerge from the following detailed description the invention.

Gemäß der Erfindung wird das Deckglas mit dem mit einer gefärbten Gewebeprobe versehenen Objektträger mittels einer Lösung eines Kumaron-Inden-Harzes, welches hell in seiner Farbe, d. h. hellbernsteinfarbig ist und einen Schmelzpunkt von mindestens i5o° C, vorzugsweise von etwa i5o bis etwa i75° C, aufweist; in einem aromatischen Kohlenwasserstoff verbunden, wobei die Lösung etwa 5o bis 6o%- an Gewicht Harz enthält. Die Harzlösung wird auf den ein Gewebestück tragenden Objektträger mittels eines geeigneten Gerätes aufgebracht, wie z. B. ein Glasstab für diese Zwecke verwendet wird, worauf das Deckglas in seine Lage gebracht wird. Die Harzlösung verbreitet sich über das Gewebestück zwischen Objektträger und Deckglas, und das Harz bindet nach Verdampfung des Lösungsmittels das Deckglas mit dem Träger. Der so auf dem Gewebestück gebildete dünne Harzfilm ist im wesentlichen farblos.According to the invention, the cover slip is colored with the one Microscope slide provided with a tissue sample using a solution of a coumarone-indene resin, which is bright in its color, d. H. is light amber and has a melting point of at least 150 ° C, preferably from about 150 to about 175 ° C; in one aromatic hydrocarbon, the solution being about 5o to 6o% - in weight Contains resin. The resin solution is applied to the slide carrying a piece of tissue applied by means of a suitable device, such as. B. a glass rod for these purposes is used, whereupon the coverslip is brought into place. The resin solution spreads through the piece of tissue between the slide and the cover slip, and that After evaporation of the solvent, resin binds the cover slip to the carrier. Of the thin resin film thus formed on the piece of cloth is substantially colorless.

Das Harz gemäß der Erfindung ist ein Kumaron-Inden-Harz, welches durch Polymerisieren von Kumaron- und Indenbestandteilen, welche in einer Kohlenteerfraktion, Koksofenlichtöl- oder Petroleumfraktion vorhanden sind, unter zweckentsprechender Reinigung hergestellt wird, so daß das sich ergebende Harz im wesentlichen farblos oder wasserhell ist. Es hat einen Schmelzpunkt von mindestens 15o° C, vorzugsweise von i5o bis etwa i75° C, einen Refraktionsindex von 1,65o bei 25° C, ein Molekulargewicht von 7oo bis 750 und ist neutral mit einer Säurezahl oder Wert von weniger als i. Das Harz kann durch Hitze oder katalytisch polymerisiert sein, wie es auf dem Gebiet der Herstellung von Kumaron-Inden-Harzen bekannt ist. Das vorteilhafte Beispiel eines solchen Harzes ist dasjenige, welches von der Neville Company unter der Handelsbezeichnung Nevindene R-i hergestellt und vertrieben wird, welches einen Farbwert von 1/2 der Neville Color Rating aufweist. Dieser Farbwert von 1/2 entspricht der Farbe von Hellbernstein bis Wasserweiß der Rosin Standards, deren Harze entsprechend den U. S. Department of Agriculture Standards bereitet sind. Als Lösungsmittel für das Harz kann ein beliebiger aromatischer Kohlenwasserstoff, wie Benzol, Toluol oder Xylol, verwendet werden. Das. zu bevorzugende Lösungsmittel ist ein Petrol-Benzol.The resin according to the invention is a coumarone-indene resin which is prepared by polymerizing coumarone and indene components, which are present in a coal tar fraction, coke oven light oil or petroleum fraction, with appropriate purification so that the resulting resin is substantially colorless or is water-clear. It has a melting point of at least 150 ° C, preferably from 150 to about 175 ° C, a refractive index of 1.65 ° at 25 ° C, a molecular weight of 700 to 750 and is neutral with an acid number or value less than i. The resin can be polymerized by heat or catalytically as is known in the art of making coumarone-indene resins. The advantageous example of such a resin is that manufactured and sold by the Neville Company under the tradename Nevindene Ri, which has a color value of 1/2 the Neville Color Rating. This color value of 1/2 corresponds to the color from light amber to water white of the rosin standards, the resins of which are prepared in accordance with the US Department of Agriculture standards. Any aromatic hydrocarbon such as benzene, toluene or xylene can be used as the solvent for the resin. That. a preferred solvent is a petroleum benzene.

Es wurde überraschenderweise festgestellt, daß die vorstehend beschriebenen Harzlösungen eine ausgeprägte Verbesserung des fertiggestellten Objektträgers ergeben. Die Harzfösung breitet sich glatt in eine fehlerfreie Bindung mit dem Deckglas aus. Sie trocknet rasch und gestattet die Handhabung von frisch präparierten Objektträgern kurz nach der Anbringung des Deckglases. Sie härtet rasch, ohne rückständige Klebrigkeit. Das Harz ist chemisch inert; es verblaßt weder, noch verfärbt es die Schnitte, noch wirkt es schädlich auf die Gewebestücke, selbst nach Alterung, ein. Das Harz bricht nicht, selbst nach einer Alterung, und verbleibt klar wie eine polierte Linse. Auch dunkelt das Harz nach Alterung nicht. Es kristallisiert weder, noch entwickelt es eine Säure bei der Alterung. Die Objektträger können sicher bei hohen Temperaturen von Lichtquellen verwendet werden, wie z. B. bei der Mikroprojektion, ohne Erweichung der Harzbindung zwischen Objektträger und Deckglas. Das Harz hat einen verhältnismäßig hohen Refraktionsindex im Vergleich zu den bisher benutzten Harzen mit entsprechender Verbesserung der Transparenz des fertiggestellten Objektträgers.It has surprisingly been found that the above-described Resin solutions result in a marked improvement in the finished slide. The resin solution spreads smoothly into a flawless bond with the coverslip. It dries quickly and allows freshly prepared slides to be handled shortly after attaching the cover slip. It hardens quickly with no residual stickiness. The resin is chemically inert; it neither fades nor discolor the cuts, nor it has a harmful effect on the pieces of tissue, even after aging. The resin breaks not, even after aging, and remains clear as a polished lens. Even the resin does not darken after aging. It neither crystallizes nor develops an acid in aging. The slides can be used safely at high temperatures used by light sources such as B. in microprojection, without softening the resin bond between slide and cover slip. The resin has a relative high refractive index compared to the resins used so far with a corresponding Improving the transparency of the finished slide.

Im Rahmen des vorstehend beschriebenen Erfindungsgedankens sind natürlich noch verschiedene Änderungen möglich, ohne daß hierdurch eine Beschränkung des Gegenstandes erfolgen soll.Within the scope of the inventive concept described above are of course Various changes are still possible without restricting the subject matter should take place.

Claims

PATENT CLAIMS: i. Means for attaching cover glasses to microscope slides with colored pieces of tissue, consisting mainly of an essentially colorless one Coumarone-indene resin with a melting point of at least 150 ° C, in solution of a aromatic hydrocarbon.

2. Means according to claim i, characterized in that that it consists essentially of about 5o to about 6o% parts by weight of a coumarone-indene resin with a melting point of about 150 to about 175 ° C, an acid number of less as i and a refractive index of about 1.650 at 25 ° C, in solution of an aromatic Hydrocarbons from the group of benzene, toluene and xylene.

3. Medium according to claim i and 2, characterized in that it consists of a benzene solution Coumarone-indene resin having a melting point of about 150 to about 175 ° C, one Acid number less than i and a refractive index of about 1.65o at 25 ° C a resin content of about 5o to about 6o0 / g by weight, where the color of the resin is from light amber to water white. q ..

Microscopic Tissue section on a microscope slide with a cover slip, which is placed over the Fabric with a binding film is arranged, characterized in that that this film consists essentially of a coumarone-indene resin with a melting point from about 15o to about z75 ° C, an acid number less than i, an index of refraction of about 1.65 ° at a5 ° C and that the resin is essentially colorless.

5. Method for producing a preparation with colored pieces of tissue and a cover slip bonded to the same by means, characterized in that the benzene solution of a Coumarone-indene resin from about 150 to about 175 ° C, an acid number of slightly less as i and a refractive index of about 1.65o at a5 ° C, this being this Solution contains about 50% to about 60% by weight of the resin, and that after that the cover slip in contact with the slide in its position to cover the tissue pieces is pressed so that after evaporation of the solvent, the resin covers the glass connects with the carrier.

6. Method of making a preparation with colored Tissue pieces and a cover glass connected to the same by a means, thereby characterized in that in solution of an aromatic hydrocarbon one essentially colorless coumarone-indene resin with a melting point of about 150 to about 75 ° C, a refractive index of about 1.65o at a5 ° C, with a content of the solution of about So up to about 60%, based on weight, of at least one of the following, namely the cover glass and / or the surface of the slide which is in contact with this cover slip comes, applied and that then under pressure the cover slip in contact is brought with the slide to cover the piece of tissue, so that after Evaporation of the aromatic hydrocarbon the resin covers the coverslip with the microscope slide connects.