Verfahren zur Darstellung von Pteroinsäure oder Pteroinsäurederivaten,
insbesondere Pteroylglutaminsäure (Folinsäure) Die Pteroylglutaminsäure (Folinsäure)
wurde erstmalig von A n g i e r und Mitarbeitern nach zwei ganz ähnlichen Methoden
erhalten (Science 102, 227 [19451, und 103, 667 [1946].Process for the preparation of pteroic acid or pteroic acid derivatives,
especially pteroylglutamic acid (folinic acid) pteroylglutamic acid (folinic acid)
was used for the first time by angers and employees using two very similar methods
obtained (Science 102, 227 [19451, and 103, 667 [1946].
Nach der ersten Methode wurden 2,.4, 5-Triamino-6-oxypyrimidin, a,
fl-Dibrompropionaldellyd und Aminobenzoylglutaminsäure in Gegenwart eines Acetatpuffers
kondensiert. Nach der zweiten Methode wurde aus a, f,-Dibrompropionaldehyd und Pvridin
diePyridiniumverbindung hergestellt und aus dieser und dem 2, 4, 5-Triamino-6-oxypyrimidin
in Gegenwart von Kaliumbromid der Pteridinring geschlossen. Dann wurde schließlich
mit Aminohenzoylglutaminsäure zur Folinsäure kondensiert. Beide Synthesen verlaufen
unter schlechten Ausbeuten (15°/o). Außerdem ist die Gewinnung einer reinen Folinsäure
aus dem Rohprodukt ein schwieriges Unterfangen. Die Schwierigkeiten bei diesen beiden
Synthesen sind mannigfach. Eine von ihnen ist prinzipieller Art. Bei beiden Synthesen
erfolgt der Ringschluß zum Pteridinderivat in Gegenwart eines alkalischen Puffers.
Da aber nach den Arbeiten von T r a u b e iin 2, 4, 5-Trialnino-6-oxypyrimidin die
Aminogruppe in 5-Stellung basischer und gegen Carbonylgruppen reaktionsfähiger ist
als die in 4-Stellung, so muß nach den Synthesen von Angier die freie Aminogruppe
in 5-Stellung als erste bevorzugt reagieren, worauf dann der Ringschluß über die
Aminogruppe in 4-Stellung erfolgt. Aus diesem Grunde steht die Methylengruppe in
dem Reaktionsgemisch bevorzugt in 9-Stellung und nicht. wie gewünscht, in 8-Stellung.According to the first method, 2, .4, 5-triamino-6-oxypyrimidine, a,
fl-Dibromopropionaldellyd and aminobenzoylglutamic acid in the presence of an acetate buffer
condensed. The second method turned a, f, -dibromopropionaldehyde and pvridine
the pyridinium compound prepared and from this and the 2, 4, 5-triamino-6-oxypyrimidine
the pteridine ring is closed in the presence of potassium bromide. Then it finally became
condensed with aminohenzoylglutamic acid to give folinic acid. Both syntheses are proceeding
with poor yields (15%). In addition, a pure folinic acid is obtained
from the raw product a difficult undertaking. The difficulty with these two
Syntheses are manifold. One of them is of principle. In both syntheses
the ring closure to the pteridine derivative takes place in the presence of an alkaline buffer.
Since, however, according to the work of T r a u b e iin 2, 4, 5-trialnino-6-oxypyrimidine the
Amino group in the 5-position is more basic and more reactive towards carbonyl groups
than that in the 4-position, according to Angier's synthesis, the free amino group must
in the 5-position as the first to react preferentially, whereupon the ring closure via the
Amino group takes place in the 4-position. For this reason the methylene group is in
the reaction mixture preferably in the 9-position and not. as desired, in the 8 position.
Nach dem beanspruchten Verfahren wird nun, da das 2-Amino-6-oxy-8-methylpteridin
sowie weiter das 2-Amino-6-oxy-8-Brommethylpteridin zugänglieh
sind,
die letztere Verbindung init p-Aminobenzoesäure bzw. p-Aminobenzoylglutaminsäure
kondensiert. Auf diese Weise wird bevorzugt das gewünschte 8-Pteridinderivat im
Rohprodukt erhalten, was gegenüber den Methoden von A n g i e r und Mitarbeitern
ein prinzipieller Vorteil ist. Die Anreicherung der gewünschten Substanz aus dem
Rohprodukt ist deshalb viel einfacher als bei den älteren Verfahren. :Ulan braucht
das Rohprodukt nur unter Verwendung von z. B. Natriumcarbonat in viel Wasser zu
lösen und durch Einleiten von Kohlendioxyd bei der Pteroinsäure auf PH 9, bei der
Folinsäure auf 7 zu bringen.According to the claimed process, the 2-amino-6-oxy-8-methylpteridine
and also the 2-amino-6-oxy-8-bromomethylpteridine accessible
are,
the latter compound with p-aminobenzoic acid or p-aminobenzoylglutamic acid
condensed. In this way, the desired 8-pteridine derivative is preferred
Raw product obtained what compared to the methods of angers and co-workers
is a principle advantage. The enrichment of the desired substance from the
The raw product is therefore much simpler than with the older processes. : Ulan needs
the crude product only using z. B. sodium carbonate in plenty of water
dissolve and by introducing carbon dioxide in the pteroic acid to PH 9, in the
To bring folinic acid to 7.
Nach dem Abfiltrieren der Fällung erhält man durch Ansäuern des Filtrats
auf PH 3 ein Produkt, das zu 35% aus den gewünschten Substanzen besteht.After the precipitate has been filtered off, acidification of the filtrate is obtained
on PH 3 a product that consists of 35% of the desired substances.
Beispiele t. Das aus 1,77g 2-Amino-6-oxy-8-inethylhteridin
('/ioo 1-lol) gewonnene 2-Amino-6-oxy-8-lirommethylpteridin wird nach dem Filtrieren
und Waschen mit Alkohol nachgewaschen und dann, ohne zu trocknen, in 4o ccm Alkohol
verteilt. Man fügt 6,8 g kristallwasserhaltiges Natriumacetat (5/ioo 11o1) und 4,4
g p-Aminobenzoylglutaminsäure hinzu. Die Mischung wird 2 Stunden am Rückflußkühler
zum Sieden erhitzt. Dann gießt man in 300 ccm Wasser und bringt durch Zusatz
von Säuren auf pn 3, Nach dem Filtrieren, Waschen und Trocknen erhält man ein Rohprodukt
in einer Ausbeute von 1,9 bis 2,1 g. Zur Reinigung löst man es in i 1 Wasser unter
Zugabe von etwas Natriumcarbonat. Durch Einleiten von Kohlendioxyd bringt man den
pH-Wert auf 7, filtriert durch ein Kieselgurfilter, das anschließend mit verdünnter
Phosphatpufferlösung (PH 7,5) gut ausgewaschen wird. Die vereinigten Filtrate erwärmt
man auf 5o bis 6o° und bringt durch Zugabe von Säuren den PH-Wert auf 3. Es fällt
die Folinsäure, besonders beim Abkühlen, als orangegelbe Fällung aus.Examples t. The 2-amino-6-oxy-8-lirommethylpteridine obtained from 1.77g of 2-amino-6-oxy-8-ynethylhteridine ('/ ioo 1-lol) is washed with alcohol after filtering and washing and then without dry, distributed in 4o cc alcohol. 6.8 g of sodium acetate containing water of crystallization (5/1000 11o1) and 4.4 g of p-aminobenzoylglutamic acid are added. The mixture is heated to boiling in a reflux condenser for 2 hours. It is then poured into 300 cc of water and brought to pn 3 by adding acids. After filtering, washing and drying, a crude product is obtained in a yield of 1.9 to 2.1 g. To clean it, it is dissolved in 1 liter of water with the addition of a little sodium carbonate. The pH value is brought to 7 by introducing carbon dioxide, filtered through a kieselguhr filter, which is then washed out well with dilute phosphate buffer solution (pH 7.5). The combined filtrates are heated to 50 to 60 ° and the pH is brought to 3 by adding acids. Folinic acid precipitates out as an orange-yellow precipitate, especially on cooling.
Dieselbe Kondensation kann mit Natriumacetat als Puffer in Wasser
ausgeführt werden. In Wasser als Lösungsmittel können an Stelle von Natriumacetat
andere Puffer, z. B. Natriumcarbonat, benutzt werden. Auch in Glykolen ist die Reaktion
unter Zusatz säurebildender Substanzen durchführbar. 2. Das aus 1,77
g 2-Amino-6-oxy-8-inetlylpteridin ('/ioo Mol) gewonnene 2-Amino-6-oxy-8-brommethylpteridin
wird nach dem Filtrieren und Waschen mit Alkohol nachgewaschen und ohne Trocknung
in 40 ccm Alkohol verteilt. Hinzu kommen 6,8 g kristallwasserhaltiges Natriumacetat
(5/ioo Mol) und 2,4 g p-Aminobenzoesäure. Die Mischung wird 2 Stunden unter Rückfluß
zum Sieden erhitzt. Dann gießt man in 300 ccm Wasser und bringt durch Zusatz
von Säure auf pH 4. Nach dem Filtrieren, Waschen und Trocknen erhält man ein Rohprodukt
in einer Ausbeute von 1,9 bis 2,1 g. Zur Reinigung löst man es in i 1 Wasser unter
Zugabe von etwas Natriumcarbonat. Durch Einleiten von Kohlendioxyd bringt man den
pH-Wert auf 9, filtriert durch ein Kieselgurfilter, das anschließend mit verdünnter
Phosphatpufferlösung (PH 8) gut ausgewaschen wird. Die vereinigten Filtrate erwärmt
man auf 5o bis 6o° und bringt durch Zugale von Säuren den pH-Wert auf .4. Es fällt
beim Abkühlen die Pteroinsäure als orangegelbe Fällung aus. Dieselbe Kondensation
kann in Wasser ausgeführt werden. Sie ist ferner gut durchführbar in anderen organischen
Lösungsmitteln, besonders in Glykol,The same condensation can be carried out with sodium acetate as a buffer in water. In water as a solvent, instead of sodium acetate, other buffers, e.g. B. sodium carbonate can be used. The reaction can also be carried out in glycols with the addition of acid-forming substances. 2. The 2-amino-6-oxy-8-bromomethylpteridine obtained from 1.77 g of 2-amino-6-oxy-8-inetlylpteridine (1/100 mol) is washed after filtering and washing with alcohol and without drying in 40 cc alcohol distributed. There are also 6.8 g of sodium acetate containing water of crystallization (5/1000 mol) and 2.4 g of p-aminobenzoic acid. The mixture is refluxed for 2 hours. It is then poured into 300 cc of water and brought to pH 4 by adding acid. After filtering, washing and drying, a crude product is obtained in a yield of 1.9 to 2.1 g. To clean it, it is dissolved in 1 liter of water with the addition of a little sodium carbonate. The pH value is brought to 9 by introducing carbon dioxide, filtered through a kieselguhr filter, which is then washed out well with dilute phosphate buffer solution (PH 8). The combined filtrates are heated to 50 to 60 ° and the pH is brought to 4 by adding acids. On cooling, the pteroic acid precipitates out as an orange-yellow precipitate. The same condensation can be carried out in water. It can also be carried out easily in other organic solvents, especially in glycol,