Verfahren zur Isolierung des männlichen Keimdrüsenhormons In dem Patent
68q.573 ist ein Verfahren der Isolierung des männlichen Keimdrüsenhormons aus Rohhormonextrakten
beschrieben, das darin besteht, daß man diese mit Ketonreagenzien umsetzt, die erhaltenen
Reaktionsprodukte isoliert und aus ihnen in,üblicher Weise das Hormon abspaltet,
wobei es in -weitgehend gereinigter Form anfällt.Method of Isolation of Male Gland Hormone In the patent
68q.573 is a method of isolating male gonadal hormone from raw hormone extracts
described, which consists in reacting these with ketone reagents, the obtained
Reaction products are isolated and the hormone is split off from them in the usual way,
whereby it is obtained in a largely purified form.
Es wurde nun gefunden, daß sich dieses Verfahren auch ° zur Isolierung
des Hormons aus synthetisch erhaltenen Gemischen verwenden läßt. Solche Gemische
sind z. B. Rohprodukte, wie sie erhalten werden :a) durch Umwandlung von. Pregnanolonen
durch Einwirkung metallorganischer Verbindungen in selkundäre-tertiäre Dialkohole,
Abspaltung von Wasser, gegebenenfalls unter gleichzeitiger Acylierung und Oxydation
der dadurch in das Molekül hineingelegten semicyclischen Doppelbindung, b) durch
Umsetzung der ungesättigten Pregnanolone mit metallorganischen Verbindungen, Wasserabspaltung
und Oxydation, wobei die Doppelbindung im Rings und die Hydroxylgruppe im Ring i
durch intermediäre Bl'oc'kierung geschützt sein können oder c) durch Oxydation von
Sterinen o. dgl. oder nach anderen Verfahren. Es gelingt so in einfacher und bequemer
Weise die synthetisch erhaltenen ketonartigen Verbindungen mit der Wirksamkeit des
männlichere Keimdrüsenhormons oder denen Is3mere in hochgereinigter Form zu isolieren.
Beispiel i Das aus Allo-Pregnanolon (Fp. 19q.°) durch Grignardierung, Wasserabspaltung
mit Hilfe von Essigsäureanhydrid und Natriumacetat, Oxydation und anschließende
Verseifung erhaltene 1ietocyclopentanodimethyltetraddkahydrophenanthrol wird in
folgender Weise gereinigt: Man macht die alkoliolisch-alkalische Verseifungslösung
durch Zusatz von Eisessig schwach sauer, setzt i Mol Semicarbazid (be-
rechnet
auf i Mol Ausgangspregnanolon) hinzu und .erhitzt 5 Stunden zum Sieden. Nach dem
Erhalten saugt man das ausgeschiedene Semicarbazon ab, wäscht es mit heißem Wasser
und mit Alkohol und zersetzt es durch Erwärmen mit wäßriger Oxalsäure. Man erhält
so in guter Ausbeute und mit großer Reinheit ein physiologisch hochwirksames Präparat.It has now been found that this process can also be used to isolate the hormone from mixtures obtained synthetically. Such mixtures are e.g. B. Crude products as obtained: a) by converting. Pregnanolones by the action of organometallic compounds in secondary-tertiary dialcohols, elimination of water, optionally with simultaneous acylation and oxidation of the semicyclic double bond thus placed in the molecule, b) by reaction of the unsaturated pregnanolones with organometallic compounds, elimination of water and oxidation, the double bond in the ring and the hydroxyl group in ring i can be protected by intermediate blocking or c) by oxidation of sterols or the like or by other methods. It is thus possible in a simple and convenient manner to isolate the synthetically obtained ketone-like compounds with the effectiveness of the more masculine gonadal hormone or those is3mers in a highly purified form. EXAMPLE i The ethocyclopentanodimethyltetraddkahydrophenanthrol obtained from allo-pregnanolone (melting point 19q , add 1 mole of semicarbazide ( calculated on 1 mole of starting pregnanolone) and heat it to boiling for 5 hours. After this is obtained, the semicarbazone which has separated out is filtered off with suction, washed with hot water and with alcohol and decomposed by heating with aqueous oxalic acid. A physiologically highly effective preparation is thus obtained in good yield and with great purity.
:Ulan kann auch so vorgehen, daß man den nach der Wasserdampfdestillation
der Ozonidl.ösung verbleibenden Rohester in Alkohol löst
und aus
ihm durch Umsetzung mit Semicarbazid und Eisessig das kristallisierte Semicarbazon
isoliert, das dann durch Verseifung in das obengenannte hochwertige Produkt übergeführt
wird.: Ulan can also proceed in such a way that the after steam distillation
dissolves the crude ester remaining in the ozonide solution in alcohol
and from
him the crystallized semicarbazone by reaction with semicarbazide and glacial acetic acid
isolated, which is then converted into the above-mentioned high-quality product by saponification
will.
Beispiel Die Reaktionslösung, wie sie ausPregilenolon durch Grignardierung,
Dehydratation und Ozonierung erhalten `,eird, wird mit Alkohol verdünnt und daraus
durch Umsetzung mit Thiosemicarbazid das entsprechende Thiosemicarbazon ausgefällt.
Man 'kann auch so vorgehen, -daß man z g des aus der eisessighaltigen Reaktionslösung
durch Verdünnen mit Wasser und Ätherextraktion in Form eines zähen, schwach gelb
gefärbten Harzes ge--#vonnenen rohen Ketocyclopentanodimethyldodekahydrophenanthrols
in 3o ccm Alkohol löst, mit 1,5g pulverisiertem Thiosemicarb= azid und = ccin Eisessig
versetzt und a. Stunden zum Sieden erhitzt. -Nach dem Erkalten wird das ausgeschiedene
Kristallisat abgesaugt, mit Wasser ausgekocht und aus Isopropylalkohol umkristallisiert.
Durch Zersetzung mit verdünnter Säure erhält man daraus ein reines Ketocyclopentanodimethyldodekahydrophenanthrol.
Beispiel 3 o,5 g des nach der Entbromierung aus Pregnenolon erhaltenen rohen Acetats
des Ketoc; clopentanodimethyldodekahydropheilanthrol werden mit o,3 g Hydroxylamilichlorhydrat
und 0,359 wasserfreiem Natriumacetat in 5o ccm absolutem Methylalkohol mehrere
Stunden gekocht. Beim Verdünnen mit Wasser erhält man aus der Lösung ein OYim, das
bei der Aufspaltung und Verseifung ein hochwirksames Ketocyclopentanodimethyldodekahydrophenanthrol
ergibt.EXAMPLE The reaction solution, as obtained from pregilenolone by grignardation, dehydration and ozonation, is diluted with alcohol and the corresponding thiosemicarbazone is precipitated therefrom by reaction with thiosemicarbazide. One can also proceed in such a way that one dissolves crude ketocyclopentanodimethyldodecahydrophenanthrols in 30 cc alcohol with 1.5 g of pulverized thiosemic alcohol by diluting with water and extracting ether in the form of a tough, pale yellow colored resin = acidic and = added to glacial acetic acid and a. Heated to the boil for hours. After cooling, the precipitated crystals are filtered off with suction, boiled with water and recrystallized from isopropyl alcohol. A pure ketocyclopentanodimethyldodecahydrophenanthrole is obtained from it by decomposition with dilute acid. Example 3 0.5 g of the crude acetate of ketoc obtained after debromination from pregnenolone; clopentanodimethyldodecahydropheilanthrol are boiled with 0.3 g of hydroxylamilichlorohydrate and 0.359 anhydrous sodium acetate in 50 cc of absolute methyl alcohol for several hours. When diluted with water, an OYim is obtained from the solution, which upon splitting and saponification results in a highly effective ketocyclopentanodimethyldodecahydrophenanthrole.