DE695046C

DE695046C - Process for the production of permanent bacteria preparations

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Publication number: DE695046C
Application number: DE1935W0097422
Authority: DE
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1935-10-31
Filing date: 1935-10-31
Publication date: 1940-08-14

Description

Verfahren zur Herstellung von Bakterien-Dauerpräparaten Für technisch industrielle Zwecke sind bisher Bakterien in Gestalt von reinen Bakterienkonzentraten in großem Maßstabe nicht gezüchtet worden. Dieses lag daran, daß die Herstellung vorn praktisch reinen Konzentraten auf große Schwierigkeiten stieß. Für die Wirtschaftlichkeit :einer isolchen industriellen Verwertung der Bakterien ruß neben der Reinheit und der Gewinnung großer Mengen auch eine wirtschaftliche Ausbeute erzielt werden. Die Bakterien müssten demnach unter optimalen Bedingungen gezüchtet werden. Je nach den Gewinnungsverfahren, .die für die Bakterien zwecks Absonderung von den Nährflüssigkeiten gewählt werden, erhalten wiederum die ioptimalen Züchtungsbedingungen leine Einschränkung. Es wind alisoi das Züchtuggs.verfahren bedingt durch das Gewinnungsverfahren der Bakterien aus den Nährlösungen, und gleichzeitig sellen die Nährlösungen .optimale Lebensbedingungen filr die Bakterien selbst geben. Hinzu kommt ferner, daß ;an die Konzentrate hinsichtlich der Haltbax'kei:t bei einer technisch industriellen Herstellung und Weiterver werteng sehr große Anforderungen gestellt werden müssen. Die Haltbarkeit hängt ab von der Reinheiit der Kulturen. Die Gewinnungsmethoden für die Absonderung der Bakterien vorn dien Nährlösungen müssen also ihrerseits wiederum darauf Rücksicht nehmen, daß eine Verunreinigung der Bakteidenkonzentrate möglichst vermieden wird. Es ,ist hekannt, daß die Stoff- . wechsielprodukte der Bakterien eine sohädigende Einwirkung auf diese ausüben und, wenn sie in :den Konzentraten enthalten sind, die Lagerb-eständigkeit.der Konzenwatewesentlich herabsetzen. Bisher war ies übliidh, die Stoffweichsielproidukte, beispielsweise die Säure, durch geeignete Mittel zu neutralisieren. Für die technisch industrielle Verwertung von Bakterien war :es wiinschenswert, die Balzteriien überhaupt .ohne ' .die Stoffwechselprodukte in reiner Form zu gewinnen.Process for the production of permanent preparations for bacteria For technical So far, industrial purposes have been bacteria in the form of pure bacterial concentrates has not been bred on a large scale. This was because the manufacture encountered great difficulties with practically pure concentrates. For economy : an isolated industrial recovery of bacteria in addition to purity and soot the recovery of large quantities an economic yield can also be achieved. the Bacteria must therefore be grown under optimal conditions. Depending on the recovery process, .that for the bacteria for the purpose of secreting them from the nutrient fluids are chosen, the ioptimal cultivation conditions are again not subject to any restriction. There is alisoi the breeding process due to the extraction process of the Bacteria from the nutrient solutions, and at the same time the nutrient solutions provide .optimal Provide living conditions for the bacteria themselves. In addition, to the Concentrates with regard to the stability in a technical industrial production and further processing very high demands have to be made. The durability depends on the purity of the cultures. Extraction methods for a secretion the bacteria in front of the nutrient solutions must, in turn, take this into account take that contamination of the bacterial concentrates is avoided as much as possible. It is known that the fabric. alternate products of the bacteria a so-damaging Exert an influence on them and, if they are contained in: the concentrates, significantly reduce the shelf life of the concentrate. So far it was bad, the fabric soft products, for example the acid, by suitable means neutralize. For the technical industrial utilization of bacteria: it was It is desirable that courtship generally "without" the metabolic products in pure form To gain shape.

Eine weitere- Beeinträchtigung der Lagerbeständigkeit und damit der Haltbarkeit der Konzentrate folgt aus .den Nährstoffen der Züchtungsflüssigkeit, die in. der Regel eine unerwünschte vorzeitige Lebenstätigkeit der Bakterien und damit eine Beeinträchtigung der Haltbarkeit hervorrufen. Es war :sonüt fernerhin wünschenswert, die Bakteiienkonlzentrate auch möglichst frei vorn Nährstoffen zu igewinnen.Another impairment of the shelf life and thus the The shelf life of the concentrates depends on the nutrients in the cultivation liquid, which is usually an unwanted premature vital activity of bacteria and thus cause an impairment of the shelf life. It was: so from now on It is desirable to keep the Bakteiienkonlzentrate as free from nutrients as possible win.

Erfindungsgemäß erfolgt daher die Züchtung der Bakterien in: klaren Nährlösungen und die Absonderung der Bakterien von diesen durch -eire Reinigungszentrifuge. Die Nährlösungen müssen erfindungsgemäß klar sein, d. h. sie dürfen auch die Nährstoffe nicht in Gestalt von Kollai:den oder sonsrt5gen der Zentrifugalkraft unterworfenen Körpern enthalten. Sie müssien aber auch die Eigenschaft der klaren Nährlösüngen während der Züchtung behalten, d. h. die Zusammensetzung der Nährlösutygen muß so. getroffen sein, daß nicht durch die Wachstumstätigkeit der Bakterien Nährstoffe in Gestalt von Kolloiden ausfallen oder Stoffwechselprodukte in -eine Form geleitet werden, die eineue Angriff der Zentrifugalkraft, wie z. B. der Schleim, unterliegen. Die Ausgangsnährlösung wird erforderlichenfalls steailisiert und durch Filtration von etwa nicht gewünschten Bakteriennährstoftbestandteil:en und anderen kolloidalen oder mechanischen Verunreinigungen gereinigt. Die erfindungsgemäßen Reinzuchtverfahren boten bei ihrer praktischen Ausigestaltung deshalb b@es:ondere Schwierigkeiten, weil die Bakterien infolge ihrer außerordentlich- geringen Größe fast als Kolloide anzusprechen sind. So hat beispielsweise das Thermob.akterium L i n d n e r eine Zellengröße von i bis 2 u. Ähnlich sind die Verhältnisse, um ein weiteres Beispiel zu nennen, beine Bakterium Acidophilum. Vergleichsweise sei erwähnt, daß eine einzelne Hefezelle etwa 3omal-größer als ein Thermo,-bakterium mobile L i n d n e r ist.According to the invention, the bacteria are therefore grown in: clear Nutrient solutions and the secretion of bacteria from them by -eire cleaning centrifuge. According to the invention, the nutrient solutions must be clear; H. they are also allowed to take the nutrients not in the form of Kollai: those or otherwise subject to centrifugal force Bodies included. But they must also have the property of clear Keep nutrient solutions during cultivation, d. H. the composition of the nutrient solution must be like that. Be taken that nutrients are not taken by the growth activity of the bacteria precipitate in the form of colloids or metabolic products are passed into a form that a new attack of centrifugal force, such as. B. the mucus are subject. The starting broth is sterilized, if necessary, and filtered by filtration of any undesired bacterial nutrient components: s and other colloidal ones or mechanical impurities cleaned. The pure breeding methods according to the invention offered in their practical design therefore b @ es: other difficulties, because the bacteria, due to their extraordinarily small size, appear almost as colloids are to be addressed. For example, the thermal bacterium L i n d n e r has one Cell size from i to 2 u. The ratios are similar for another example to name a Bacterium Acidophilum. By way of comparison, it should be mentioned that a single Yeast cell is about 3 ohms larger than a thermo-bacterium mobile L i n d n e r.

Man hat im Laboratorium beispielsweise bei der Seraherstellung die Zentrifugalkraft angewandt, um die Bakterienmasse zur Abscheidung zu brislgen. Diese rein laberatoriums:mäßigen Maßnahmen lassen sich in keiner Weise mit der Herstellung des vorliegenden Verfahrens und der hier zur Amvendung kommenden Zentrifuge vergleichen. Bei der Erfindung handelt es -sich darum, daß die Bakterien gewonnen werden und so die Zentrifugalkraft eine möglichst weitgehende Befreiung der Baktei-ienm:asse von Stoffwechsel--produkten und Nährflüssigkeiten bewirkt. Die Ausbeute beträgt beispielsweise beim Thermobakterium mobile Lindnex, auf ioo 1 Nährlösung bezogen, 5oo bis 6oo g reine Bakterienmasse, beim Bakterium Acidophilum auf die gleiche Menge Nährlösung 60o bis 700 g. Das Zentrifugat besteht durchschnittlich aus 9o% Bakterienmasse, .die :etwa 25% Trokkensubstanz enthält. Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren spielt also, die Gewinnung von Stoffwechselprodukten, wie sie bei der 9erahierstellung gewünscht wird, gar keine Rolle, wogegen die Erzielung einer möglichst großen Menge an Bakterienleibern die angestrebte Folge der erfinderischen Maßnahmen ist. Eis ist reinleuchtend, daß die Reinzuchtverfahren in beiden Fällen eine wesentliche Veränderung erfahren müssen. Die Steuerung nach Richtung einer möglichst hohen Ausbeute an Stoffwechselprodukten bei einem Reinzuchtverfahren bedingt andere Voraussetzungen un.d Maßnahmen als bei dem Bemühen, eine möglichst hohe Bakterienmasse zu gewinnen. Als Nährlösung organischer bzw. anorganischer Zusammensetzung haben sich beispielsweise die naclhstehenden Zusammensetzungen bewährt für Thermobakter.ium mobile ioo 1 Wass-ex, i o g Ammoniumsulfat, ioo g Hefedekokt, 100 g Pepton, ioo g Glucose, . i kg Invertzucker, ioo g Saccbarose; für Bakterium Acidophilum ' i.oo 1 Wasser, 2 kg Kreide, i kg Hefedekakt, 2 kg D,extrose, 3 kg Lactos e.In the laboratory, for example, centrifugal force was used in the production of sera in order to break up the bacterial mass for separation. These purely laboratories: moderate measures can in no way be compared with the production of the present process and the centrifuge used here. With the invention it is a question of the fact that the bacteria are obtained and so the centrifugal force brings about the greatest possible liberation of the bacteria from metabolic products and nutrient fluids. For example, with the thermobacterium mobile Lindnex, based on 100 1 nutrient solution, the yield is 500 to 600 g of pure bacterial mass, with the bacterium acidophilum 60 to 700 g of the same amount of nutrient solution. The centrifugate consists on average of 90% bacterial mass, which: contains about 25% dry matter. In the method according to the invention, the production of metabolic products, as is desired in the production process, does not play a role at all, whereas the achievement of the largest possible amount of bacterial bodies is the desired consequence of the inventive measures. Ice is purely luminous that the pure breeding procedures must undergo a substantial change in both cases. The control towards the highest possible yield of metabolic products in a pure breeding process requires different prerequisites and measures than in the effort to obtain the highest possible bacterial mass. As a nutrient solution of organic or inorganic composition, for example, the following compositions have proven themselves for Thermobacter.ium mobile 100 % water, 100% ammonium sulfate, 100 g yeast decoction, 100 g peptone, 100 g glucose,. i kg invert sugar, 100 g sucbarose; for Bacterium Acidophilum '100 1 water, 2 kg chalk, 1 kg yeast decact, 2 kg D, extrose, 3 kg Lactos e.

Diese Lösungen werden in geeigneter Weise, beispielsweise durch Erhitzung, keLZnfrei geinacht und anschließend durch Albschleudern gereinigt.These solutions are suitably prepared, for example by heating, Geinacht free of germs and then cleaned by spinning.

Die erhaltenen Bakterienmassen können alsdann in einfachster Weise erfindungsgemäß weiter zu Präparaten verarbeitet werden. Es hat .sich gezeigt, daß das Anwachsen der Bakterien aus Trockenpräparaten Schwierigkeiten bereitet, sobald die Präparate weiter Verwendung finden. Es ist bekannt, daß eine allzu gxdßie Entziehung von Zellwasser die Lebensfunktion der Bakterien schädigt. Man hat bereits vorgeschlagen, die Bakterien in üblicher Weise in Nährböden zu züchten und diese Nährböden sodann mit den in ihnen befindlichen Bakterien in Schutzstoffe, die einen begrenzten Wassergehalt haben, einzubetten, wodurch die schädliche Entziehung des Zellwassers vermieden werden soll. Diesem Verfahren haftet jedoch der Übelstand an, daß mit den Nährböden auch die Stoiffwechselproidukte in den Präparaten verbleiben.The bacterial masses obtained can then be used in the simplest possible way according to the invention can be further processed into preparations. It has been shown that the growth of bacteria from dry preparations causes difficulties as soon as the preparations continue to be used. It is known that an all too good withdrawal cell water damages the vital function of the bacteria. It has already been suggested to grow the bacteria in the usual way in culture media and then these culture media with the bacteria in them in protective substances that have a limited water content have to be embedded, thereby avoiding the harmful deprivation of cell water shall be. This process, however, has the disadvantage that with the nutrient media the metabolic products also remain in the preparations.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erfolgt die Einbettung der ausgeschleuderten Bakterienmasse in wasserhaltige kristallinische Saccharose, wofür zweckmäßig die sog, dritte Raffinade Anwendung findet. Diese Methode bietet noch den weiteren Vorteil, daß diese Saccharo e bei der Weitexcenwendung der Bakterien den erforderlichen Nährstoff darstellt. Der geringe Wassergehalt der Saccbärose gestattet jedoch nicht eine vorzeitige unerwünschte Lebenstätigkeit oder Vermehrung der Bakterien im Präparat.According to the method according to the invention, the embedding takes place Bacterial mass in water-containing crystalline sucrose, for which purpose the so-called, third refined product is used. This method has the further advantage of that these saccharides provide the necessary nutrients when the bacteria are used to great extent represents. However, the low water content of the saccaeros does not allow premature unwanted vital activity or multiplication of the bacteria in the preparation.

Ein weiterer Vorteil des erfindungsgeanäßen Verfahrens beisteht darin, d.aß der Gehalt . der Präparate an Bakterien mengenmäßig genau abgestellt werden kann, da :sich die Zahl der Bakterien im Präparat dadurch genau einstellen läßt, wenn bestimmte Mengen Zentrifugenkonzentrats zugegeben werden. Es ist auf diese Weise möglich, eehr stark konzentrierte Präparate anzufertiAen, d. h. den Gehalt an wirksamen Bakterien außerordentÜch horch einzustellen. Hierdurch wird bei der Weiterverwendung der Präparate der große Vorteil. erreicht, daß die an sich voll lebensfähigen Bakterien in so großer Zahl bei der Weiterverwendung vorhanden sind, daß die Anwachsperiode und notwendige Vermehrung indem neuen. Lebensmilieu praktisch keine Rolle mehr spielt, ,so. daß hier ein überwuchern mit !den erwünschten Bakterien in einer Zeit eintritt, in der Fremdbakterien in schädlichem Ausmaß :sich nicht mehr entwickeln können.Another advantage of the inventive method is that d.was the salary. of the preparations on bacteria are precisely set off in terms of quantity can, because: the number of bacteria in the preparation can be precisely adjusted, when certain amounts of centrifuge concentrate be admitted. In this way it is possible to prepare highly concentrated preparations, d. H. to adjust the content of effective bacteria extraordinarily. Through this becomes the great advantage of further use of the preparations. achieved that the in itself fully viable bacteria in such large numbers when re-used there is that the period of growth and necessary increase in the new one. Living environment practically no longer plays a role, so. that here an overgrowth with the desired Bacteria occurs at a time when foreign bacteria are harmful: themselves can no longer develop.

Die erfindungsgemäßen Präparate können für alle technischen, therapeutischen., zahnärztlichen und veterinär medizinischen Zwecke verwendet werden.The preparations according to the invention can be used for all technical, therapeutic., Used for dental and veterinary purposes.

Claims

PATENT CLAIM: Process for the production of. Bak- permanent preparations, especially des Thermobacterium mobile Lindner and des Bacterium acidophilum, thus identified draws that these 'bacteria are initially in fully clarified nutrient solutions with one for: the multiplication of bacteria o @ ptimu-den composition bred and which are known from them under application tew measures won by. Nutritional solution and staff change products exempt ten concentrates in the white for a long time preparations' are processed that for the purpose Achieving an accurate dosage with precisely determinable by weight rak- the bacterial concentrations in Sucrose: to be embedded.