DE68906794T2

DE68906794T2 - PREPARATIONS FOR TREATING LEISHMANIASIS.

Info

Publication number: DE68906794T2
Application number: DE8989910641T
Authority: DE
Inventors: Anthony Gabriel Murphy; Ralph Arthur Neal
Original assignee: Carlo Erba SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1988-09-20
Filing date: 1989-09-19
Publication date: 1993-09-02
Anticipated expiration: 2009-09-20
Also published as: DE68906794D1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Zusammensetzungen zur topischen Behandlung von Haut-Leishmaniose.The present invention relates to compositions for the topical treatment of cutaneous leishmaniasis.

Leishmaniose, eine Krankheit, die durch Infektion mit begeisselten Protozoen der Gattung Leishmania verursacht wird, ist in vielen Teilen der Welt endemisch. Die klinische Form der Krankheit hängt von der beteiligten Leishmaniaspezies ab und kann visceral, mucokutan oder kutan sein. Kutane Leishmaniose (Haut-Leishmaniose) manifestiert sich in Hautverletzungen und kann Morbidität und Mortalität ebenso verursachen, wie zu beträchtlichen Entstellungen und Narbenbildung führen.Leishmaniasis, a disease caused by infection with flagellated protozoa of the genus Leishmania, is endemic in many parts of the world. The clinical form of the disease depends on the Leishmania species involved and can be visceral, mucocutaneous or cutaneous. Cutaneous leishmaniasis (cutaneous leishmaniasis) manifests itself as skin lesions and can cause morbidity and mortality as well as significant disfigurement and scarring.

Keine vollständig befriedigende Behandlung von Haut- Leishmaniose steht gegenwärtig zur Verfügung; diejenigen Arzneimittel, welche seit einiger Zeit zur systemischen Behandlung von Leishmaniose bekannt sind, wie etwa die 5-wertigen Antimonverbindungen, haben die Nachteile, eine variable Aktivität zu haben und eine längere parenterale Verabreichung zu erfordern, was Toxizität entstehen lassen kann.No completely satisfactory treatment for cutaneous leishmaniasis is currently available; those drugs that have been known for some time for the systemic treatment of leishmaniasis, such as the pentavalent antimony compounds, have the disadvantages of having variable activity and requiring prolonged parenteral administration, which may give rise to toxicity.

In neuerer Zeit wurde das Aminoglycosid-Antibiotikum Paromomycin, O-2,6-Diamino-2,6-dideoxy-β-L-idopyranosyl- (1T3)-O-β-D-ribofuranosyl-(1T5)-O-[2-amino-2-deoxy-α-D- glucopyranosyl-(1T4)]-2-deoxystreptamin, parenteral mit segensreichen Wirkungen bei der systemischen Behandlung von sowohl experimenteller wie natürlich auftretender Haut-Leishmaniose verabreicht. Jedoch sind Arbeiten auf diesem Gebiet bisher hauptsächlich experimenteller Art gewesen. GB-A-2 117 237 offenbart eine synergistische Zusammensetzung für die topische Behandlung von Haut- Leishmaniose, die Paromomycin zusammen mit einer zweiten Verbindung umfasst, welche selbst eine topische Antiinfektionswirkung hat. Die als die zweite Komponente verwendeten Verbindungen waren quaternäre Ammoniumverbindungen, insbesondere Methylbenzethoniumchlorid und Dimethylsulfoxid (DMSO). GB-A-2 117 237 berichtet, dass, obwohl Paromomycin und das zweite verwendete Antiinfektionsmittel jeweils individuell unwirksam waren, wenn sie topisch auf Leishmaniose- Verletzungen angewandt wurden, eine Kombination der beiden sowohl bei der topischen Behandlung von BALB/c-Mäusen wie auch in nachfolgenden klinischen Studien bei menschlichen Patienten wirksam war.More recently, the aminoglycoside antibiotic paromomycin, O-2,6-diamino-2,6-dideoxy-β-L-idopyranosyl- (1T3)-O-β-D-ribofuranosyl-(1T5)-O-[2-amino-2-deoxy-α-D-glucopyranosyl-(1T4)]-2-deoxystreptamine administered parenterally with beneficial effects in the systemic treatment of both experimental and naturally occurring cutaneous leishmaniasis. However, work in this field has so far been mainly experimental in nature. GB-A-2 117 237 discloses a synergistic composition for the topical treatment of cutaneous leishmaniasis comprising paromomycin together with a second compound which itself has a topical anti-infective effect. The compounds used as the second component were quaternary ammonium compounds, in particular methylbenzethonium chloride and dimethyl sulphoxide (DMSO). GB-A-2 117 237 reports that although paromomycin and the second anti-infective agent used were individually ineffective when applied topically to leishmaniasis lesions, a combination of the two was effective both in topical treatment of BALB/c mice and in subsequent clinical trials in human patients.

In unabhängigen experimentellen Untersuchungen über die kombinierten Paromomycin- und quaternären Ammoniumverbindungs-Formulierungen wurde nun überraschenderweise gefunden, dass eine lokale Toxizität mit der Applikation einer kombinierten Zusammensetzung aus Paromomycin und quaternärer Ammoniumverbindung auf Haut- Leishmaniose-Verletzungen verbunden ist, welche so schwerwiegend ist, dass die Behandlung nicht fortgesetzt werden kann. Bei einem speziellen Test führte die Applikation einer Paromomycinsalbe, die 12 % Methylbenzethoniumchlorid umfasste, auf Läsionen bei BALB/c-Mäusen zu heftigen Qualen bei den Mäusen während bis zu 30 Minuten nach der Applikation, und man beobachtete, das sie hyperaktiv wurden, wobei sie nur ihre Vorderfüsse gebrauchten und mit ihren Hinterbeinen ausschlugen.In independent experimental studies on the combined paromomycin and quaternary ammonium compound formulations, it has now surprisingly been found that local toxicity is associated with the application of a combined composition of paromomycin and quaternary ammonium compound to skin leishmaniasis lesions, which is so severe that treatment cannot be continued. In one particular test, the application of a paromomycin ointment containing 12% methylbenzethonium chloride to lesions in BALB/c mice resulted in severe distress in the mice for up to 30 minutes after application, and observed that they became hyperactive, using only their front feet and kicking with their hind legs.

Wir haben gefunden, dass die Applikation einer Zusammensetzung, umfassend Paromomycin in einem geeigneten Träger, in Abwesenheit von sowohl einer quaternären Ammoniumverbindung wie auch DMSO effektive Ergebnisse gegen Leishmaniose-Verletzungen bei BALB/c-Mäusen ergab, ohne eine lokale Toxizität zu verursachen.We have found that the application of a composition comprising paromomycin in a suitable vehicle in the absence of both a quaternary ammonium compound and DMSO gave effective results against leishmaniasis lesions in BALB/c mice without causing local toxicity.

Paromomycin ist ein grosses Molekül und dringt nicht leicht durch die Haut durch. Es wird in der Praxis allgemein in Form eines säureadditionssalzes oder eines Esters verwendet, typischerweise als Paromomycinsulfat. Im allgemeinen gibt es eine Reihe von Wegen, welche eingeschlagen werden können, um die Absorption eines aktiven Bestandteils durch die Haut zu unterstützen. Ein Weg ist, eine Lösung des aktiven Bestandteils zu emulgieren, wodurch eine Creme oder Salbe entsteht, wozu typischerweise ein Emulgiermittel verwendet wird.Paromomycin is a large molecule and does not easily penetrate the skin. It is generally used in practice in the form of an acid addition salt or an ester, typically as paromomycin sulfate. In general, there are a number of ways that can be taken to assist the absorption of an active ingredient through the skin. One way is to emulsify a solution of the active ingredient, creating a cream or ointment, typically using an emulsifying agent.

Wollfett (Lanolin) ist ein Beispiel eines allgemein verwendeten Emulgiermittels und wurde anfänglich zur Verwendung mit Paromomycin ausgewählt. Zusammensetzungen, die aus Paromomycin und Wollfett in einem inerten Träger bestanden, wurden mit verschiedenen Mengen der zwei Bestandteile formuliert und an Läsionen getestet, die durch Leishmaniasis major in Mäusen verursacht wurden. Die erreichten Ergebnisse schienen vielversprechend, doch als die Zusammensetzungen später in klinischen Versuchen verwendet wurden, fand man, dass sie wenig Wirkung haben.Lanolin is an example of a commonly used emulsifier and was initially selected for use with paromomycin. Compositions consisting of paromomycin and lanolin in an inert carrier were formulated with various amounts of the two ingredients and tested on lesions caused by Leishmaniasis major in mice. The results obtained seemed promising, but when the compositions were later used in clinical trials, they were found to have little effect.

Dies dürfte wahrscheinlich in der unterschiedlichen Hautstruktur zwischen Mäusen und Menschen begründet sein.This is probably due to the different skin structure between mice and humans.

Eine Alternative zur Bildung einer Emulsion als Mittel der Unterstützung der Absorption eines aktiven Bestandteils durch die Haut hindurch ist, den aktiven Bestandteil mit einem transdermalen Penetrations-verstärkenden Mittel zu formulieren. Daher wurde ein solches Mittel zur Verwendung mit Paromomycin gesucht, wobei gefordert wurde, dass das Mittel nicht die Toxizität von quaternären Ammoniumverbindungen aufweisen darf. Harnstoff ist eine der vielen verfügbaren Optionen, und als dieser mit Paromomycin in einem inerten Träger kombiniert wurde, fand man, dass dies eine Zusammensetzung mit einer überraschend hohen klinischen Wirksamkeit ergab. Dies war insbesondere im Hinblick auf die schlechten Ergebnisse, die mit Wollfett erreicht worden waren, unerwartet.An alternative to forming an emulsion as a means of assisting the absorption of an active ingredient through the skin is to formulate the active ingredient with a transdermal penetration enhancing agent. Therefore, such an agent was sought for use with paromomycin, with the requirement that the agent must not have the toxicity of quaternary ammonium compounds. Urea is one of the many options available and when this was combined with paromomycin in an inert carrier, it was found that this gave a composition with a surprisingly high clinical efficacy. This was particularly unexpected in view of the poor results that had been achieved with wool fat.

Demgemäss stellt die vorliegende Erfindung eine Zusammensetzung zur Verfügung, die geeignet ist zur topischen Verabreichung bei der Behandlung von Haut- Leishmaniose, welche im wesentlichen aus einem nicht- toxischen Träger, Harnstoff und, als einzigem therapeutischen oder prophylaktischen Mittel, Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Säureadditionssalze oder Ester besteht.Accordingly, the present invention provides a composition suitable for topical administration in the treatment of cutaneous leishmaniasis, which consists essentially of a non-toxic carrier, urea and, as the sole therapeutic or prophylactic agent, paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters.

Speziell ist die Zusammensetzung frei von quaternären Ammoniumverbindungen, wie Methylbenzethoniumchlorid, das eine topische Antiinfektionswirkung hat.Specifically, the composition is free of quaternary ammonium compounds, such as methylbenzethonium chloride, which has a topical anti-infective effect.

Die Erfindung stellt weiterhin eine Zusammensetzung zur Verwendung bei einem Verfahren zur topischen Behandlung von Haut-Leishmaniose zur Verfügung, welche im wesentlichen aus einem nicht-toxischen Träger, Harnstoff und, als einzigem therapeutischen oder prophylaktischen Mittel, Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Säureadditionssalze oder Ester besteht.The invention further provides a composition for use in a method for topical treatment of cutaneous leishmaniasis, which consists essentially of a non-toxic carrier, urea and, as the sole therapeutic or prophylactic agent, paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters.

Ausserdem stellt die Erfindung die Verwendung von Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Additionssalze oder Ester zur Herstellung einer Zusammensetzung für die topische Behandlung von Haut- Leishmaniose zur Verfügung, wobei die Zusammensetzung im wesentlichen aus einem nicht-toxischen Träger, Harnstoff und, als einzigem therapeutischen oder prophylaktischen Mittel, Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Säureadditionssalze besteht.Furthermore, the invention provides the use of paromomycin or one of its non-toxic addition salts or esters for the manufacture of a composition for the topical treatment of cutaneous leishmaniasis, the composition consisting essentially of a non-toxic carrier, urea and, as the sole therapeutic or prophylactic agent, paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts.

Demgemäss ist es nun möglich, ein Mittel zur Behandlung von Haut-Leishmaniose zur Verfügung zu stellen, das sehr wirksam ist, jedoch keine lokale Toxizität impliziert, wie sie mit den Paromomycinformulierungen des Standes der Technik von GB-A-2 117 237 verbunden war. Dies ist daher eine wichtige Entwicklung im Bereich der Behandlung von topischer Leishmaniose.Accordingly, it is now possible to provide an agent for the treatment of cutaneous leishmaniasis which is very effective but does not imply local toxicity as was associated with the prior art paromomycin formulations of GB-A-2 117 237. This is therefore an important development in the field of the treatment of topical leishmaniasis.

Stoffe auf Kohlenwasserstoff-Grundlage, wie Hartparaffin oder weisses Weichparaffin, sind besonders geeignet als inerte Träger, doch andere Träger oder Kombinationen von Trägern können verwendet werden. Beispiele schliessen ein: emulgierende Grundstoffe, nicht-toxische Lösungsmittel und wasserlösliche Grundstoffe. Insbesondere in Gebieten, wo Haut-Leishmaniose endemisch ist, sind die Umgebungstemperaturen häufig hoch, beispielsweise 40ºC oder darüber, und dies sollte bei der Auswahl eines Trägers, der gut an die Haut anhaftet, in Rechnung gestellt werden. Typischerweise bilden der oder die Träger das Gleichgewicht der Zusammensetzung, und der Gesamtgewichtsanteil von Träger oder Trägern in der Zusammensetzung reicht von 99 bis 50 %, beispielsweise 94 bis 50 %, oder 85 bis 60 %. Ein Anteil von 80 oder 75 % ist besonders geeignet.Hydrocarbon-based materials such as hard paraffin or white soft paraffin are particularly suitable as inert carriers, but other carriers or combinations of carriers may be used. Examples include emulsifying bases, non-toxic solvents and water-soluble bases. Particularly in areas where cutaneous leishmaniasis is endemic, ambient temperatures are often high, for example 40ºC or more, and this should be taken into account when selecting a The presence of a carrier which adheres well to the skin should be taken into account. Typically, the carrier or carriers will form the balance of the composition and the total weight proportion of carrier or carriers in the composition will range from 99 to 50%, for example 94 to 50%, or 85 to 60%. A proportion of 80 or 75% is particularly suitable.

Zusätzlich zu Salben und Cremes schliessen andere geeignete pharmazeutische Darreichungsformen für die erfindungsgemässe Zusammensetzung Lotionen und Anstriche ein. Ausserdem ist sie geeignet für einen medizinischen Verband, der mit der erfindungsgemässen Zusammensetzung imprägniert wird.In addition to ointments and creams, other suitable pharmaceutical dosage forms for the composition of the invention include lotions and paints. It is also suitable for a medical dressing impregnated with the composition of the invention.

Ein praktischer Bereich für den Gehalt von Paromomycin oder dessen Salz oder Ester in der Zusammensetzung ist von 1 bis 20 Gew.%, beispielsweise 3 bis 20 % oder von 5 bis 20 %. 8 bis 16 %, beispielsweise 9 bis 15 % oder 10 bis 14 % sind besonders geeignet. Wie oben erwähnt, ist das nicht-toxische Salz von Paromomycin typischerweise das Sulfat. Der Ester ist typischerweise ein Alkylester, beispielsweise ein C&sub1;-C&sub4;-Alkylester.A practical range for the content of paromomycin or its salt or ester in the composition is from 1 to 20% by weight, for example 3 to 20% or from 5 to 20%. 8 to 16%, for example 9 to 15% or 10 to 14% is particularly suitable. As mentioned above, the non-toxic salt of paromomycin is typically the sulfate. The ester is typically an alkyl ester, for example a C₁-C₄ alkyl ester.

Das Paromomycin kann in die Zusammensetzung, beispielsweise wenn diese eine Salbe ist, als sehr feines Pulver eingebracht werden (British Pharmacopoeia). Die Partikelgrösse beträgt im allgemeinen 125 um oder weniger und ist ein Parameter, der das Ausmass der transdermalen Penetration des Arzneimittels beeinflussen kann. Demgemäss sollte die Feinstzerkleinerung des Paromomycins vor seiner Zugabe zu der Salbe zu einer Verringerung der Paromomycinmenge führen, die zu einem effektiven Ergebnis erforderlich ist.The paromomycin may be incorporated into the composition, for example when it is an ointment, as a very fine powder (British Pharmacopoeia). The particle size is generally 125 µm or less and is a parameter that can affect the extent of transdermal penetration of the drug. Accordingly, the micronisation of the paromomycin before its addition to the ointment should result in a reduction in the amount of paromomycin required to produce an effective result.

Der Harnstoff wird im allgemeinen in die Zusammensetzung als feines Pulver eingebracht, das typischerweise eine Partikelgrösse von 125 um oder weniger hat. Er wird geeigneterweise in einer Menge von 5 bis 30 %, beispielsweise von 8 bis 25 % oder 10 bis 20 Gew.% eingesetzt. Eine Menge von 10 Gew.% ist besonders geeignet.The urea is generally incorporated into the composition as a fine powder, typically having a particle size of 125 µm or less. It is suitably used in an amount of from 5 to 30%, for example from 8 to 25% or 10 to 20% by weight. An amount of 10% by weight is particularly suitable.

Die erfindungsgemässe Zusammensetzung wird hergestellt, indem das Paromomycin oder eines seiner nicht-toxischen Säureadditionssalze oder Ester mit dem Harnstoff und dem Träger gemischt werden. Standardverfahren werden geeigneterweise zur Herstellung von pharmazeutischen Darreichungsformen verwendet. Wenn die Zusammensetzung beispielsweise in Form einer Salbe dargeboten wird, wird diese geeigneterweise hergestellt, indem man ein feines Pulver aus Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Salze oder Ester mit Harnstoff in einer Salbengrundlage bei Raumtemperatur dispergiert. Wenn die Zusammensetzung die Form einer Creme annehmen soll, wird diese geeigneterweise hergestellt, indem man den Harnstoff und das Paromomycin oder eines seiner nicht-toxischen Salze oder Ester in Wasser löst und die resultierende Lösung mit einer Creme-Basis bei einer Temperatur von 50 bis 70ºC mischt.The composition of the invention is prepared by mixing the paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters with the urea and the carrier. Standard procedures are suitably used for preparing pharmaceutical dosage forms. For example, if the composition is presented in the form of an ointment, this is suitably prepared by dispersing a fine powder of paromomycin or one of its non-toxic salts or esters with urea in an ointment base at room temperature. If the composition is to take the form of a cream, this is suitably prepared by dissolving the urea and the paromomycin or one of its non-toxic salts or esters in water and mixing the resulting solution with a cream base at a temperature of 50 to 70°C.

Ein geeignetes Verfahren zur Behandlung des menschlichen oder tierischen Körpers unter Verwendung der Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung umfasst, dass man auf die mit Protozoen der Gattung Leishmania infizierte Haut eine therapeutisch wirksame Menge einer Zusammensetzung appliziert, welche im wesentlichen aus einem nicht-toxischen Träger, Harnstoff und, als einzigem therapeutischen oder prophylaktischen Mittel, Paromomycin oder einem seiner nicht-toxischen Säureadditionssalze oder Ester besteht, und zwar topisch.A suitable method for treating the human or animal body using the composition of the present invention comprises applying to the protozoa of the genus Leishmania infected skin is topically administered with a therapeutically effective amount of a composition consisting essentially of a non-toxic carrier, urea and, as the sole therapeutic or prophylactic agent, paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters.

Die Zusammensetzung wird im allgemeinen auf jede Verletzung mehrmals täglich, geeigneterweise zweimal täglich, appliziert. Typischerweise wird die Zusammensetzung aus einem Rohr, das mit einer Düse mit 5 mm innerem Durchmesser ausgestattet ist, appliziert. Die Menge von Paromomycin und Harnstoff, die in einem 1 cm langen Salbenstück enthalten war, das aus einem solchen Rohr herausgedrückt wurde, wurde wie folgt bestimmt.The composition is generally applied to each lesion several times a day, suitably twice a day. Typically, the composition is applied from a tube fitted with a nozzle of 5 mm internal diameter. The amount of paromomycin and urea contained in a 1 cm long piece of ointment squeezed out of such a tube was determined as follows.

Polystyrol-Wägeschiffchen wurden numeriert, und eine Länge von 1 cm wurde mit einem Kugelschreiber markiert. Jedes Schiffchen wurde tariert, und eine Salbe, enthaltend 15 % Paromomycinsulfat und 10 % Harnstoff in einer weissen Weichparaffin-Grundlage, wurde durch eine Düse mit einem inneren Durchmesser von 5 mm, wie oben beschrieben, gedrückt. Die Salbe befand sich direkt an der Düse vor der Extrusion und wurde an der 1 cm-Marke mit einem Skalpell abgeschnitten. Die Schiffchen wurden wieder gewogen, was die Salbenmasse ergab. Die für 15 Messungen erhaltenen Ergebnisse werden nachstehend tabelliert: Schiffchen Nr. Salbenmasse (mg)Polystyrene weighing boats were numbered and a length of 1 cm was marked with a ballpoint pen. Each boat was tared and an ointment containing 15% paromomycin sulfate and 10% urea in a white soft paraffin base was squeezed through a nozzle with an inner diameter of 5 mm as described above. The ointment was located directly at the nozzle before extrusion and was cut off at the 1 cm mark with a scalpel. The boats were weighed again, giving the ointment mass. The results obtained for 15 measurements are tabulated below: Boat No. Ointment mass (mg)

Die mittlere Salbenmasse = 191,8 ± 3,5 mg. Auf dieser Basis beträgt die auf eine Läsion von 1 cm Durchmesser (z.B. bei einer Maus) applizierte Paromomycinmenge etwa 29 mg und die in der Dosis enthaltene Harnstoffmenge etwa 19 mg. Läsionen bei Menschen haben jedoch gewöhnlich einen grösseren Durchmesser und können beispielsweise 3 cm im Querschnitt sein. Die Salbe wird dann vorteilhafterweise durch eine "Kreuz"-Technik appliziert, wobei zwei Salbenstränge quer über die Verletzung in rechtem Winkel zueinander ausgedrückt und dann verstrichen werden. Dies bedeutet effektiv, dass sechs 1 cm-Salbendosen auf eine Verletzung von 3 cm Durchmesser appliziert werden, was etwa 173 mg Paromomycin und etwa 115 mg Harnstoff pro Behandlung ergibt.The mean ointment mass = 191.8 ± 3.5 mg. On this basis, the amount of paromomycin applied to a 1 cm diameter lesion (e.g. in a mouse) is about 29 mg and the amount of urea contained in the dose is about 19 mg. However, lesions in humans are usually larger in diameter and may be, for example, 3 cm in cross section. The ointment is then advantageously applied by a "cross" technique, whereby two lines of ointment are squeezed across the lesion at right angles to each other and then spread. This effectively means that six 1 cm doses of ointment are applied to a 3 cm diameter lesion, giving about 173 mg of paromomycin and about 115 mg of urea per treatment.

Die Zusammensetzung kann auch durch beliebige andere Mittel appliziert werden und wird gewöhnlich so appliziert, dass sich eine Dosis von 2 bis 60 mg, beispielsweise von 10 bis 30 mg, Paromomycin pro cm Verletzung pro Applikation ergibt.The composition may also be administered by any other means and is usually administered to provide a dose of 2 to 60 mg, for example 10 to 30 mg, of paromomycin per cm2 of injury per application.

Die folgenden Beispiele erläutern die vorliegende Erfindung.The following examples illustrate the present invention.

EXAMPLE 1 - Composition Preparation

Die folgenden beiden Zusammensetzungen wurden als Salben hergestellt, indem Paromomycinsulfatpulver und Harnstoff in weissem Weichparaffin (white soft paraffin - WSP) bei Raumtemperatur dispergiert wurden. Die Paromomycinsulfat- Partikelgrösse betrug 125 um und die Harnstoff-Partikelgrösse betrug weniger als 125 um. Alle Prozentangaben sind gewichtsbezogen.The following two compositions were prepared as ointments by dispersing paromomycin sulfate powder and urea in white soft paraffin (WSP) at room temperature. The paromomycin sulfate particle size was 125 µm and the urea particle size was less than 125 µm. All percentages are by weight.

A: Paromomycinsulfat 15 %A: Paromomycin sulfate 15%

Harnstoff 10 %Urea 10%

WSP Ausgleich (auf 100 %)WSP compensation (to 100%)

B: Paromomycinsulfat 10 %B: Paromomycin sulfate 10%

Harnstoff 10 %Urea 10%

WSP AusgleichWSP compensation

COMPARISON EXAMPLE 1

Die folgenden Zusammensetzungen wurden hergestellt; mit Paromomycin-Partikelgrössen von 125 um.The following compositions were prepared; with paromomycin particle sizes of 125 µm.

C: Paromomycinsulfat 15 %C: Paromomycin sulfate 15%

Wollfett 35 %Wool fat 35%

WSP 25 %WSP 25%

Wasser 25 %Water 25%

D: Paromomycinsulfat 10 %D: Paromomycin sulfate 10%

WSP AusgleichWSP compensation

E: Paromomycinsulfat 10 %E: Paromomycin sulfate 10%

Wollfett 42,8 %Wool fat 42.8%

Wasser 16,7 %Water 16.7%

WSP 30,6 %WSP 30.6%

F: Paromomycinsulfat 5 %F: Paromomycin sulfate 5%

Wollfett 50,5 %Wool fat 50.5%

Wasser 8,5 %Water 8.5%

WSP 36 %WSP 36%

G: Paromomycinsulfat 15 %G: Paromomycin sulfate 15%

WSP AusgleichWSP compensation

H: Paromomycinsulfat 15 %H: Paromomycin sulfate 15%

Methylbenzethoniumchlorid 12 %Methylbenzethonium chloride 12%

WSP AusgleichWSP compensation

I: Wollfett 50 %I: Wool fat 50 %

WSP 25 %WSP 25%

Wasser 25 %Water 25%

Die Zusammensetzungen A, B, D und H waren Salben, die durch Dispergieren von Paromomycinsulfatpulver als sehr feine Partikel in WSP bei Raumtemperatur hergestellt wurden.Compositions A, B, D and H were ointments prepared by dispersing paromomycin sulfate powder as very fine particles in WSP at room temperature.

Die Zusammensetzungen C, E und F waren Cremes, hergestellt durch Auflösen von paromomycinsulfat in Wasser und Mischen dieser Lösung mit WSP und Wollfett bei 60ºC. Die Creme wurde dann gerührt, bis sie kühl war.Compositions C, E and F were creams prepared by dissolving paromomycin sulfate in water and mixing this solution with WSP and wool fat at 60ºC. The cream was then stirred until cool.

Die Zusammensetzung I, eine Creme, wurde hergestellt durch Zusammenmischen von Wollfett und WSP bei 60ºC und Rühren, bis sie kühl war.Composition I, a cream, was prepared by mixing together wool fat and WSP at 60ºC and stirring until cool.

Die Zusammensetzung H ist eine Formulierung, wie in GB-A-2 117 237 offenbart.Composition H is a formulation as disclosed in GB-A-2 117 237.

EXAMPLE 2 - in vivo testing in mice

Die gemäss Beispiel 1 und Vergleichsbeispiel 1 hergestellten Zusammensetzungen wurden wie folgt verwendet.The compositions prepared according to Example 1 and Comparative Example 1 were used as follows.

Für eine Hautläsion mit 10 mm Durchmesser wurde ein 10 mm langes Stück der Zusammensetzung aus einem Rohr mit einer Düse von 5 mm innerem Durchmesser herausgedrückt. Die mittlere Masse der applizierten Zusammensetzung betrug 203 ± 4,6 mg; da der Anteil des eingesetzten Paromomycins von 5 bis 15 % reichte, betrug die durchschnittliche topische Paromomycindosis daher etwa 10 bis 30 mg pro Applikation.For a 10 mm diameter skin lesion, a 10 mm long piece of the composition was squeezed out of a tube with a 5 mm inner diameter nozzle. The mean mass of the composition applied was 203 ± 4.6 mg; since the proportion of paromomycin used ranged from 5 to 15%, the average topical paromomycin dose was therefore approximately 10 to 30 mg per application.

Das Experimentalsystem waren BALB/c-Mäuse, in deren Rumpf 1 x 10&sup7; Promastigoten eines saudiarabischen Stamms von L. major JISHA 118 Klon 6 eingeimpft wurden. Nachdem sich die Läsionen entwickelt hatten, wurde die topische Behandlung zweimal täglich 10 Tage lang durchgeführt. Der Behandlungseffekt wurde durch wöchentliche Messungen des Durchmessers der Läsion während bis zu 4 Monaten mitverfolgt. Die Läsionen waren meistens Geschwüre, doch lagen bei einigen Tieren zu Beginn der Experimente geschlossene Knötchen vor.The experimental system was BALB/c mice inoculated into the trunk with 1 x 10⁷ promastigotes of a Saudi Arabian strain of L. major JISHA 118 clone 6. After the lesions had developed, topical treatment was twice daily for 10 days. The treatment effect was monitored by weekly measurements of the lesion diameter for up to 4 months. The lesions were mostly ulcers, but some animals had closed nodules at the start of the experiments.

Die Ergebnisse werden in Tabellen 1 und 2 aufgelistet. Abgesehen von der Zusammensetzung, die die quaternäre Ammoniumverbindung enthält, die Zusammensetzung H, beobachtete man wenig Veränderungen der Läsionsgrösse während der 10-tägigen Behandlung. Jedoch war die Zusammensetzung A, die Harnstoff enthielt, relativ erfolgreich. Danach verlor die Läsion ihre erhabenen Ränder, das Geschwür füllte sich mit Granulationsgewebe und Epithel bedeckte die Stelle. Haar wuchs langsam wieder über die Stelle zurück. Die Wirkung war langsam, wobei der Maximaleffekt zuerst 3 bis 4 Wochen nach Ende der Behandlung beobachtet wurde.The results are listed in Tables 1 and 2. Except for the composition containing the quaternary ammonium compound, composition H, little change in lesion size was observed during the 10-day treatment. However, composition A, which contained urea, was relatively successful. After this, the lesion lost its raised edges, the ulcer filled with granulation tissue, and epithelium covered the site. Hair slowly grew back over the site. The effect was slow, with the maximum effect first observed 3 to 4 weeks after the end of treatment.

Mäuse, die mit der Zusammensetzung behandelt worden waren, die die quaternäre Ammoniumverbindung, Methylbenzethoniumchlorid, enthielt, wurden nach der Applikation etwa 30 Minuten lang sehr gequält. Sie waren hyperaktiv, wobei sie nur ihre Vorderfüsse verwendeten, krümmten ihren Rücken zusammen und schlugen mit ihren Hinterbeinen aus. Nach dem siebten Behandlungstag waren die Wunden gross, nekrotisch, von schwarzer Farbe, und die umgebende Haut hatte Haar verloren, mit Erythem und toter und sich abstreifender Haut. Nachdem jedoch die Applikation der Zusammensetzung beendet war, heilten die Läsionen langsam aus. Die Narbenstellen waren grösser und stärker entzündet als mit anderen Behandlungen. TABELLE 1 Topische Anwendungen von Formulierungen, umfassend 15 % Paromomycin an BALB/c-Mäusen mit L. major-Läsionen Mittlerer Läsionsdurchmesser (mm) Mäuse ohne Läsionen Zusammensetzung Behandlung Woche 4 Monat 3 unbehandelt weisses Weichparaffin 10 % Harnstoff in weissem Weichparaffin weisses Weichparaffin, Wasser, wässriges Wollfett Formulierung von GB-A-2 117 237 TABELLE 2 Topische Applikation von Formulierungen, umfassend verschiedene Mengen Paromomycin, an BALB/c-Mäusen mit L. major-Läsionen Mittlerer Läsionsdurchmesser (mm) Mäuse ohne Läsionen Zusammensetzung Paromomycin (%) Woche 3 Monat 3 keinesMice treated with the composition containing the quaternary ammonium compound, methylbenzethonium chloride, experienced severe distress for about 30 minutes after application. They were hyperactive, using only their forefeet, arching their backs, and kicking with their hind legs. After the seventh day of treatment, the wounds were large, necrotic, black in color, and the surrounding skin had lost hair, with erythema and dead and peeling skin. However, after the application of the composition was stopped, the lesions healed slowly. The scar areas were larger and more inflamed than with other treatments. TABLE 1 Topical applications of formulations containing 15% paromomycin to BALB/c mice with L. major lesions Mean lesion diameter (mm) Unlesioned mice Composition Treatment Week 4 Month 3 Untreated White soft paraffin 10% urea in white soft paraffin White soft paraffin, water, aqueous wool fat Formulation of GB-A-2 117 237 TABLE 2 Topical application of formulations containing various amounts of paromomycin to BALB/c mice with L. major lesions Mean lesion diameter (mm) Mice without lesions Composition Paromomycin (%) Week 3 Month 3 None

EXAMPLE 3 - clinical trials

Patienten, die an Haut-Leishmaniose aufgrund von L. major, L. infantum oder L. tropica litten, wurden topisch mit Zusammensetzung A von Beispiel 1 und Zusammensetzungen C und H von Vergleichsbeispiel 1 behandelt. Zwei rechtwinklig zueinander stehende Salbenstücke wurden quer über jede Läsion aus einem Rohr mit einem inneren Durchmesser von 5 mm, wie in Beispiel 5 beschrieben, aufgebracht. Die Salbe wurde dann über die Läsion in einer Schicht mit einheitlicher Dicke ausgebreitet.Patients suffering from cutaneous leishmaniasis due to L. major, L. infantum or L. tropica were treated topically with Composition A of Example 1 and Compositions C and H of Comparative Example 1. Two perpendicular pieces of ointment were applied across each lesion from a tube with an inner diameter of 5 mm as described in Example 5. The ointment was then spread over the lesion in a layer of uniform thickness.

Die in Tabelle 3 gezeigten Ergebnisse zeigen, dass, obwohl die Verwendung von Methylbenzethoniumchlorid als Adjuvans mit Paromomycin therapeutische Ergebnisse ergibt, die denen nahekommen, die mit der Verwendung von Harnstoff erreicht werden, die schwerwiegende lokale Toxizität, die damit verbunden ist, die Zusammensetzung unakzeptabel für pharmazeutische Verwendungen macht. Harnstoff wird daher als das wirksamste transdermale Beschleunigungsmittel angesehen. TABELLE 3 Zusammensetzung Adjuvans mit Paromomycin Anzahl der behandelten Patienten Fehlschläge Anzahl von Patienten, bei denen Patienten Toxizität beobachtet wurde Harnstoff Wollfett MethylbenzethoniumchloridThe results shown in Table 3 demonstrate that, although the use of methylbenzethonium chloride as an adjuvant with paromomycin gives therapeutic results close to those achieved with the use of urea, the severe local toxicity associated with it makes the composition unacceptable for pharmaceutical uses. Urea is therefore considered the most effective transdermal accelerator. TABLE 3 Composition Adjuvant with Paromomycin Number of patients treated Failures Number of patients in whom toxicity was observed Urea Lanolin Methylbenzethonium chloride

Footnotes:

* : Parasitenheilung, doch misslungene Läsionsheilung aufgrund von ischämischem Bein* : Parasite healing, but failed lesion healing due to ischemic leg

**: nicht-toxisch bei diesem Patienten bei nochmaliger Applikation**: non-toxic in this patient upon repeated application

Claims

1. Composition suitable for topical application for the treatment of cutaneous leishmaniasis, consisting essentially of a non-toxic carrier, urea and, as the sole therapeutic or prophylactic agent, paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters.

2. A composition according to claim 1, wherein the non-toxic acid addition salt is paromomycin sulfate.

3. Composition according to claim 1, wherein the carrier is white soft paraffin.

4. Composition according to claim 1, comprising paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters in an amount of 8 to 16% by weight.

5. Composition according to claim 1, comprising urea in an amount of 5 to 30 wt.%.

6. Composition according to claim 1, wherein the paromomycin or its salt or ester is in micro-comminuted form.

7. A process for preparing a composition according to claim 1, comprising mixing the paromomycin or its non-toxic addition salt or ester with the urea and the carrier.

8. A method according to claim 7, comprising dispersing a fine powder of paromomycin or its salt or ester with a fine urea powder in an ointment base, or dissolving paromomycin or its salt or ester and urea in water, and mixing the resulting solution with a cream base.

9. Use of paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters for the preparation of a composition for the topical treatment of cutaneous leishmaniasis, the composition consisting essentially of a non-toxic carrier, urea and as the sole therapeutic or prophylactic agent paromomycin or one of its non-toxic acid addition salts or esters.