DE608414C

DE608414C - Method of obtaining hormones and lipoids

Info

Publication number: DE608414C
Application number: DEB127955D
Authority: DE
Original assignee: CARL BRAHM DR
Current assignee: CARL BRAHM DR
Priority date: 1926-10-24
Filing date: 1926-10-24
Publication date: 1935-01-23

Description

Verfahren zur Gewinnung von Hormonen und Lipoiden Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von Hormonen und Lipoiden aus innersekretorischen Drüsen und hormonhaltigen Flüssigkeiten, wie Blust, Fruchtwasser, in denen die Hormone und Lipoide bekanntlich als Eiweiß-Lipoid-Hormon-Komplex vorliegen.Methods for Obtaining Hormones and Lipoids The invention relates to a process for obtaining hormones and lipoids from internal secretory glands and fluids containing hormones, such as blood, amniotic fluid, in which the hormones and lipoids are known to be in the form of a protein-lipoid-hormone complex.

Nach den bisherigen Verfahren wurden diese Komplexe mit Hilfe organischer Flüssigkeiten oder durch verdünnte organische Säuren aufgespalten und in der Hauptsache Lipoide, Hormone und noch gewisse Eiweißstoffe enthaltende Lösungen erhalten, aus denen dann durch Eindampfen Präparate gewonnen wurden, die nicht die reinen Hormone, sondern ein Gemisch von Hormonen und Lipoiden mit Ballaststoffen vermischt darstellten.According to previous methods, these complexes were made with the help of organic Liquids or split by dilute organic acids and in the main Lipoids, hormones and solutions containing certain proteins are obtained from from which preparations were then obtained by evaporation which do not contain the pure hormones, they were a mixture of hormones and lipoids mixed with fiber.

Es war also nach den bisher bekannten Methoden nur in verschiedenen Arbeitsgängen möglich, aus innersekretorischen Drüsen reine Lipoide und reine Hormone getrennt voneinander zu erhalten. Außer der geringeren Wirksamkeit bezüglich der Hormonei,genschaften haben jene lipoidhaltigen Hormonpräparate noch den Nachteil, daß sie nicht in Wasser löslich sind, sondern hierin nur emulgiert werden können.So it was only in different ways according to the previously known methods Work steps possible, pure lipoids and pure hormones from internal secretory glands get separated from each other. Besides the lower effectiveness in terms of Hormone properties, those lipoid-containing hormone preparations still have the disadvantage that they are not soluble in water, but can only be emulsified therein.

Nach dem Verfahren der -vorliegenden Erfindung gelingt es nun, die Lipoide und Hormone m einem Arbeitsgang in verhältniamäBig reiner Form getrennt voneinander zu erhalten. Das Verfahren besteht darin, daß die lipoid'haltigen Flüssigkeiten, die aus Drüsen, Drüsensäften, Drüsentrockenpräparaten oder Drüsenextrakten, ferner aus Blut, Fruchtwasser und Follikelsaft gewonnen worden sind, unter Zugabe zweckmäßig nur eines die Eiweiß-Lipoid-Hormon-Komplexe aufspaltenden organischen Lösungsmittels, wie Athylalkohol, Methylalkohol oder höherer Alkohole, mit Hilfe geeigneter selektiver Adsorptionsmittel, wie stark aktiver Tonerde oder aktiver Kohle, behandelt werden, wobei die Eiweißstoffe gefällt und die Lipoide auf die. Adsorptionsmittel niedergeschlagen und damit entfernt werden können. Die lipoidfreie Lösung enthält dann noch die Hormone und gewisse, trotz der Anwendung des Alkohols in die Lösung übergegangene Ballaststoffe, so insbesondere .eiweißartige Verunreirnigungen o. dgl. Um ein ganz reines Präparat zu erhalten, wird die Lösung zweckmäßig im Vakuum eingeengt und darauf eine Ausfällung der restlichen Ballaststoffe (Eiweiß(-stoffe usw.) durch geeignete Fällungsmittel, wie z. B. Aceton, absoluten Alkohöl usw., vorgenommen. Nach Abzentrifugieren oder Abfiltrieren des Fällungsmittels läßt sich durch weitere Konzentration der Hormon-Lösung ein Rückstand von intensiver Wirksamkeit erhalten, der in Wasser, physiologischier Kochsalzlösung oder in verdünntem Alkohol löslich ist.According to the method of the present invention it is now possible to achieve the Lipoids and hormones separated in a relatively pure form in one operation to get from each other. The method consists in that the lipoid-containing liquids, those from glands, glandular juices, glandular dry preparations or glandular extracts, furthermore have been obtained from blood, amniotic fluid and follicle juice, with the addition of appropriate only one organic solvent that breaks down the protein-lipoid-hormone complexes, such as ethyl alcohol, methyl alcohol or higher alcohols, with the help of suitable selective Adsorbents, such as highly active alumina or active charcoal, are treated, whereby the proteins like and the lipoids on the. Deposited adsorbent and can thus be removed. The lipoid-free solution then still contains the hormones and certain dietary fibers that have passed into the solution despite the use of alcohol, so in particular. protein-like impurities or the like. A completely pure preparation to obtain, the solution is expediently concentrated in vacuo and then a precipitate the remaining dietary fiber (protein (s), etc.) through suitable precipitating agents, such as B. acetone, absolute alcohol, etc. made. After centrifugation or The precipitant can be filtered off by further concentration of the hormone solution a residue of intense activity obtained, which in water, physiological Is soluble in saline or in dilute alcohol.

Als organische Lösungsmittel, die geeignet sind, die Eiweiß-LipoidrHormon-Komplexe zu spalten, können außer Äthyl- und Methylalkohol auch höhere Alkohole, Aceton und andere Lösungsmittel dienen.Suitable organic solvents are the protein-lipoid hormone complexes to split, except ethyl and Methyl alcohol also higher alcohols, Acetone and other solvents are used.

Als Adsorbentien können außer hochaktiver Tonerde auch hochaktive Kohle, Kieselgut, Kaolin und Bleicherden aller Art ver= wendet werden.In addition to highly active clay, highly active alumina can also be used as adsorbents Coal, silica, kaolin and bleaching earth of all kinds can be used.

Die von den Adsorptionsmitteln adsorbierten Lipoide kann man mixt geeigneten Lipoidlösungsmitteln, wie Äther, Chloroform, Petroläther, Aceton usw., ausziehen und aus der Lösung durch Abdampfen des Lösungsmittels die reinen Lipoide erhalten.The lipoids adsorbed by the adsorbents can be mixed suitable lipoid solvents, such as ether, chloroform, petroleum ether, acetone, etc., Take off and remove the pure lipoids from the solution by evaporating the solvent obtain.

Beispiel i i 1 Follikelsaft aus den Eierstöcken wird mit 1 1 98 °/oigem. Alkohol vermischt und etwa i oo g .eines stark aktiven Tonerdepräparates zugegeben. Die erhaltene Mischung wird gut durchgerührt und i2 bis 2¢ Stunden bei etwa 35° C atehengelassen: Dann wird die Flüssigkeit abzentrifugiert, der Rückstand erneut mit Alkohol angerielxen und wieder zentrifugiert. Die alkoholische Lösung wird im luftverdünnten Raum auf die Hälfte eingeengt und mit Aceton versetzt, bis keine Fällung mehr eintritt. Der Niederschlag wird abfiltriert, das Filtrat zur Trockne verdampft und. der Rückstand in physiologischer Koch: sahlösung gelöst.Example i i 1 follicle juice from the ovaries is 1 1 98%. Alcohol mixed and about 100 g of a strongly active alumina preparation added. The mixture obtained is stirred thoroughly and at about 35 ° for 12 to 2 hours Allowed to stand: Then the liquid is centrifuged off, the residue again angerielxen with alcohol and centrifuged again. The alcoholic solution is im air-diluted space is reduced by half and acetone is added until none More precipitation occurs. The precipitate is filtered off, the filtrate to dryness evaporated and. the residue dissolved in physiological boiling solution.

Durch Behandeln des Zentrifugentückstandes mit Lösungsmitteln, wie Äther, Chloroform,. Petroläther, Aceton usw., lassen. sich die Lipoide in -reinem Zustand quantitativ gewinnen.By treating the centrifuge residue with solvents such as Ether, chloroform ,. Petroleum ether, acetone, etc., leave. the lipoids in pure Quantitatively gain state.

Beispiel 2 Die Muskeln werden in passender Form zerkleinert, und der dabei entstehende hormonhaltige Preßsaft mit gleichen Teiaen Alkohol und einer entsprechenden Menge Adsorptionsmaterial, so z. B.. sogenanntes Terrana, versetzt und das Ganze bei mäßiger Temperatur stehengelassen. Nach etwa 2¢ bis 4.8 Stunden -wird der feste Teil abgenutscht und. die alkoholische Flüssigkeit zur Weiter.. verarbeitung benutzt. Am besten wird sie im Häusmannapparat bei niedriger Temperatur im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Wasser aufgenommen.Example 2 The muscles are minced in a suitable shape, and the resulting press juice containing hormones with equal parts of alcohol and a corresponding one Amount of adsorbent material, e.g. B .. so-called Terrana, offset and the whole thing left to stand at moderate temperature. After about 2 ¢ to 4.8 hours - the solid Part sucked and. the alcoholic liquid is used for further processing. It is best to evaporate it in a Häusmann apparatus at a low temperature in a vacuum and the residue taken up with water.

Beispiel 3 Zur Herstellung von Wirksubstanzen und Hormonen aus der gesamten Eierstocksubstanz werden Eierstöcke in passender Form zerkleinert; der dabei entstehende Preßsaft wird zusammen mit der zerkleinerten Substanz mit gleichen Teilen Alkohol und einer entsprechenden Menge Adsorptionsmaterial, wie aktiver Tonerde, versetzt und das Ganze bei mäßiger Temperatur stehengelassen. Nach etwa 24 bis 48 Stunden wird der feste Teil abgenutscht und die alkoholische Flüssigkeit wie nach Beispiel i welterveraxbeitet.Example 3 For the production of active substances and hormones from the entire ovarian substance, ovaries are crushed in a suitable form; the The resulting press juice is combined with the crushed substance with the same Parts of alcohol and a corresponding amount of adsorbent material, such as active clay, added and the whole thing left to stand at a moderate temperature. After about 24 to 48 Hours the solid part is sucked off and the alcoholic liquid as after Example i world-wide processed.

Beispiel ¢ Zur Herstellung von Wirksubstanzen und Hormonen aus der Placenta wird die Placenta in- passender Form zerkleinert, der dabei entstehende Preßsaft zusammen mit der zerkleinerten Substanz mit gleichen Teilen Alkohol und der .entsprechendem Menge eines Adsorptionsmaterials, wie aktiver Tonerde, versetzt und das . Ganze bei mäßiger Temperatur stehengelassen. Nach etwa. 24 bis 48 Stunden wird der feste Teil abgenutscht und die alkoholische Flüssigkeit wie nach Beispiel i weiterverarbeitet.Example ¢ For the production of active substances and hormones from the Placenta, the placenta is comminuted to the appropriate shape, the resulting placenta Press juice together with the crushed substance with equal parts alcohol and the corresponding amount of an adsorbent material, such as active alumina, is added and the . Let the whole stand at a moderate temperature. After about. 24 to 48 hours the solid part is sucked off and the alcoholic liquid as in the example i further processed.

Claims

PATENT CLAIMS: i. Method for obtaining hormones and lipoids " characterized by the fact that in one work step you can find honnonlialtige DT.nozzles, glandular juices, Dried glandular preparations or glandular extracts and. Follicle juice, blood and amniotic fluid under: simultaneous addition, expediently only one of the protein-lipoid-hormone complexes splitting organic solvents, such as ethyl alcohol, with suitable selectively active adsorbents, such as highly active clay, treated and: after precipitation the protein substances and adsorption of the lipoids, the lipoid-free, hormone-containing solution processed further to a water-soluble hormone preparation.

2. ' Method according to claim i, characterized in that one receives the. ten lipoid-free and hormone-containing Solutions, expediently after concentration in vacuo by suitable protein precipitating agents, such as acetone, absolute alcohol, etc., of other pollutants (dietary fiber) freed.

3. Procedure. according to claim i, characterized in that the lipoids from the adsorbents used with suitable ones. Solvents such as ether, chloroform etc., moves out.