DE4010523A1 - Anaerobes fermentationsverfahren - Google Patents
Anaerobes fermentationsverfahrenInfo
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Description
Die Erfindung betrifft die Durchführung eines anaeroben Fermenta
tionsverfahrens mit Hilfe von Gasblasendurchmischten turmartigen
Reaktoren.
Turmartige pneumatische Reaktoren sind in der Fermentationstechnik
seit vielen Jahren bekannt. Einfachere Ausführungsformen sind zy
linderförmige Behälter, die von unten begast werden. Derartige Vor
richtungen werden üblicherweise als Blasensäulen-Reaktoren bezeich
net. Zur Verbesserung des Sauerstoffaustausches bei aeroben Prozes
sen wurden derartige Blasensäulenfermenter mit Einbauten versehen,
die die Gasblasen ablenken und damit deren Weg durch das Fermenta
tionsmedium verlängern. Derartige Reaktoren mit Leitrohren zur
Strömungsstabilisierung werden im allgemeinen Airlift-Reaktoren ge
nannt. Zu einer ausführlichen Abhandlung über Reaktionstechnik in
Blasensäulen siehe Wolf-Dieter Deckwer in "Grundlagen der chemischen
Technik", Herausgeber: Prof. Dr. Kurt Dialer, Dr. Juri Pawlowski und
Dr. Wolfgang Springe Verlage: Otto Salle Frankfurt und Sauerlän
der, Aarau, Seiten 13 bis 25. In der wissenschaftlichen Literatur
finden sich zahlreiche Hinweise auf die Verwendung von Blasensäulen
fermentern bzw. Airlift-Reaktoren. Verwiesen sei beispielsweise auf
die folgenden Literaturstellen:
- 1. Bauer, G., Paar, H., Nussbaumer, M., Moser, A., Prep. Ger. Jap. Symp. Bubble Columns, June, 13-15, 1988, Schwerte, GVC, Düsseldorf 1988, 173-178.
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- 3. Schäfer, H., Deger, H. M., Biotechnologie Forum 6 (1989) 3, 162-166.
- 4. Blenke, H., Adv. Biochem. Eng. 13 (1979) 122-214.
- 5. Adler, I., Fiechter, A., Swiss Biotech 1 (1983) 2, 17-24.
- 6. Fröhlich, S., Charakterisierung von Turmreaktoren im Labor- und Pilotmaßstab, VDI-Verlag, Düsseldorf 1987.
- 7. Moo-Young, M., Halard, R., Biotech. Bioeng 30 (1987) 746-753.
- 8. Lesniak, W., Podgorski, W., Pietkiewicz, J., Chemical Abstracts 104 (1986) 427.
- 9. Richmond, C., BioEngineering 1 (1986) 62-63.
- 10. Birch, J. R., Trends in Biotechn. 3 (1985) 7, 162-166.
- 11. Rhodes, M., Birch, J. R., Biotechnology 6 (1988) 518-523.
- 12. Blenke, H., Biotechnologie Forum 5 (1988) 1, 6-23.
- 13. Westlake, R., Chem.-Ing.-Techn. 58 (1986) 12, 934-937.
- 14. Kanawasa, M., in Tannenbaum, S. R., Wang, D.I.C. (Eds), Single Cell Protein II, MIT-Press, Cambridge 1975, 438-453.
- 15. Cooper, P. G., Silver, R. S., in Tannenbaum, S. R., Wang, D.I.C. (Eds), Single Cell Protein II, MIT-Press, Cambridge 1975, 454-466.
- 16. Blenke, H., in Rehm, H. J., Reed, G. (Eds), Biotechnology Volume 2 VCH, Weinheim 1985, 465 ff.
- 17. Leistner, G., Müller, G., Chem.-Ing.-Tech. 51 (1979) 4, 288-294.
- 18. Zlokarnik, M., in Rehm, H. J., Reed, G. (Eds), Biotechnology Volume 2, VCH, Weinheim 1985, 537 ff.
- 19. Deckwer, W.-D.: Reaktionstechnik in Blasensäulen, Sauerländer + Salle, Frankfurt, 1985.
- 20. Deckwer, W.-D.: Bubble Column Reactors, in Biotechnology Vol. 2 Eds. H.-J. Rehm and G. Reed, VCH, Weinheim 1985.
Dem Einsatz von Blasensäulenfermentern bzw. Airlift-Reaktoren lagen
bisher Überlegungen zugrunde, den bei aeroben Fermentationen benö
tigten Sauerstoff gleichzeitig zum Durchmischen des Reaktorinhaltes
zu verwenden. Für den Fermentationsfachmann verbot sich daher der
Einsatz von Blasensäulen-Reaktoren und insbesondere von Airlift-Re
aktoren bei anaeroben Prozessen. Anaerobe Fermentationen benötigen
bekanntlich keinen Sauerstoff.
Für anaerobe Fermentationen wurden bisher in erster Linie Rühr- oder
Rieselbettreaktoren vorgeschlagen. Verglichen mit einem pneumati
schen Reaktor wird beim Rührreaktor ein höherer Energieeintrag wäh
rend der Fermentation benötigt und es können entlang der Rührerwelle
Abdichtungs- und Sterilitätsprobleme auftreten. Andere Vorschläge
für die Durchführung anaerober Fermentationen beziehen sich auf
Wirbelschicht-Reaktoren mit immobilisierten Mikroorganismen, so
beispielsweise Qureshi, N., Maddox, I.S., Bioprocess Eng.3 (1988)
69-72. Eine derartige Wirbelschichttechnik ist für großtechnische
Anwendungen sehr aufwendig und bedarf hoher Energien zur Umwälzung
des Mediums, um ein optimales Wirbelbett zu erzeugen. Häufig wird
dabei auch ein Trägermaterial wie etwa Sand zur Immobilisierung der
Mikroorganismen benötigt, so daß sich die Frage der Fixierung der
Mikroorganismen auf dem Trägermaterial stellt bzw. dafür gesonderter
Aufwand nötig wird.
Die Erfindung bricht mit diesem Vorurteil. Es hat sich nunmehr ge
zeigt, daß Blasensäulenreaktoren mit besonderem Vorteil auch bei
anaeroben Fermentationen eingesetzt werden können. Mit besonderem
Erfolg können solche Reaktoren bei der Umsetzung von Glycerin zu
1,3-Propandiol mit Hilfe von anaeroben Mikroorganismen verwendet
werden.
Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur mikrobiellen
Umsetzung eines Substrats zu einem Metaboliten unter anaeroben Be
dingungen in einem Fermenter, dadurch gekennzeichnet, daß
- - als Fermenter ein Blasensäulenreaktor ohne mechanisch bewegte Einbauten eingesetzt wird und daß
- - zur Durchführung des Fermentationsansatzes während der Fermen tation durch Einpressen eines sauerstofffreien Gases im unteren Bereich des Reaktors Gasblasen erzeugt werden.
Geeignete Blasensäulenfermenter sind senkrecht stehende Zylinder mit
Gaseinleitungsmöglichkeiten im unteren Raum, einem Gasabzug im
oberen Raum und Zu- und Ableitungsmöglichkeiten für das
Fermentationsmedium.
Weiterhin geeignet für das erfindungsgemäße Verfahren sind Airlift-
Reaktoren, die gegenüber den Blasensäulenfermentern noch Leitrohre
enthalten können. Bei äußerer Flüssigkeitsabströmung und Begasung im
Inneren des Leitrohres beträgt der Durchmesser des Leitrohres 60 bis
90%, vorzugsweise 65 bis 75%, des Durchmessers des Fermenters.
Wird dagegen der Ringraum zwischen zentral angeordnetem Leitrohr und
der Fermenter-Innenwand begast, so wird der Leitrohrdurchmesser 40
bis 60%, vorzugsweise 45 bis 55% des Fermenter-Durchmessers, ge
wählt.
Zur Durchmischung wird nach dem erfindungsgemäßen Verfahren vorge
schlagen, ein sauerstofffreies Gas in den unteren Bereich des Reak
tors einzupressen. Als sauerstofffreie Gase eignen sich in erster
Linie Gärgase. Diese können allein oder in Abmischung mit geeigneten
Inertgasen eingesetzt werden. Als Inertgase kommen hier Stickstoff,
Kohlendioxid oder Edelgase wie Argon in Frage. Der Begriff sauer
stofffreie Gase umfaßt auch Gase mit einem Restsauerstoffgehalt, der
so bemessen ist, daß er die Fermentation nicht stört; so z. B. tech
nischen, nicht nachgereinigten Stickstoff. Die Begasungsrate liegt
vorzugsweise zwischen 0,001 vvm bis 0,2 vvm, insbesondere zwischen
0,03 und 0,07 vvm.
Nach einer besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ar
beitet man mit einem Reaktor, der im Kopfbereich über eine Düse ver
fügt, durch die Flüssigstoffe zudosiert werden können. Es hat sich
gezeigt, daß die gezielte Zudosierung von Flüssigstoffen zur Schaum
bekämpfung eingesetzt werden kann, wodurch die störende Mitverwen
dung von Antischaummittel verhindert oder auf ein Minimum begrenzt
werden kann. Das Verfahren sieht dabei vor, am Kopf des Reaktors
Prozeßstoffe oder im Kreislauf geführtes Kulturmedium einzusprühen.
Unter Prozeßstoffen werden hier Zusatzstoffe verstanden, die zur
Aufrechterhaltung der Fermentation benötigt werden, so beispiels
weise Neutralisationsmittel bei Fermentationen, die unter pH-Ver
schiebung stattfinden, Ausgangsprodukte oder besondere Nährstoffe
für die Mikroorganismen. Diese Ausführungsform der Erfindung zeigt
einen besonderen und unerwarteten Vorteil der Vorgehensweise, da die
Fachwelt bei pneumatischen Reaktoren im besonderen Maße mit Schaum
problemen gerechnet hat, die bei den hohen, bei aeroben Prozessen
üblichen Begasungsraten auch auftreten.
Nach einer weiteren Ausführungsform der Erfindung kann mit einem
Reaktor gearbeitet werden, bei dem das Gas am Boden eingeleitet
wird.
Nach einer weiteren Ausführungsform der Erfindung wird vorteilhaf
terweise mit einem Reaktor gearbeitet, bei dem das Gas über einen
Ringbegaser eingeleitet wird. Dabei beträgt der Durchmesser des
Ringbegasers vorzugsweise soviel wie der halbe Reaktordurchmesser
oder weniger. Den gewählten Lochdurchmesser der Begaser paßt der
Fachmann der Höhe der Säule und der Viskosität des Mediums an.
Im Rahmen des erfindungsgemäßen Verfahrens kann der Fachmann den
Schlankheitsgrad des eingesetzten Reaktors in weiten Grenzen wählen.
Unter Schlankheitsgrad wird hier das Verhältnis von Höhe zu Durch
messer verstanden. Dieses Verhältnis soll vorteilhafterweise im Be
reich von 5 bis 20 und insbesondere im Bereich von 5 bis 10 liegen.
Nach einer weiteren Ausführungsform der Erfindung kann mit Reaktoren
gearbeitet werden, die über statische Einbauten verfügen, welche die
Durchmischung fördern. Derartige Einbauten sind insbesondere Leit
rohre, die die Zirkulationsströmung pneumatisch betriebener Turmre
aktoren stabilisieren.
Durch Einbau der Leitrohre kann man in Blasensäulen einen gelenkten
Flüssigkeitsumlauf (Schlaufe) erzeugen, wodurch die Durchmischung
verbessert wird. Im einfachsten Fall wird die Schleppwirkung der
Blasen und der durch den Dichteunterschied zwischen Flüssigkeit und
Gasblasendispersion bedingte Mammuteffekt ausgenutzt und durch ein
Einsteckrohr (Leitrohr) die Zirkulationsströmung stabilisiert
(Schlaufenströmung). Je nach Anordnung der Begasungseinrichtung un
terscheidet man zwischen Mammutschlaufen-Reaktoren mit innerer oder
äußerer Flüssigkeitsabströmung. Die Flüssigkeitsrückführung ist auch
über ein extern angebrachtes Rohr möglich.
Das erfindungsgemäße Verfahren eignet sich in besonderer Weise zu
anaeroben Fermentationsverfahren, bei denen ein Substrat in einen
Metaboliten überführt wird, beispielsweise für die fermentative
Herstellung von 1,3-Propandiol aus Glycerin.
Die fermentative Her
stellung von 1,3-Propandiol aus Glycerin ist beispielsweise in der
deutschen Patentanmeldung Aktenzeichen P 38 29 618.7 beschrieben.
Diese Anmeldung betrifft ein Verfahren zur Umwandlung von Glycerin
in 1,3-Propandiol durch Mikroorganismen, dadurch gekennzeichnet, daß
man einen Mikroorganismenstamm, ausgewählt aus den Gruppen Clostri
dium, Enterobakterium, Lactobacillus, Bacillus, Citrobacter, Aero
bacter, Klebsiella, der auf einer 5 Gew.-%igen Glycerinlösung als
einziger Kohlenquelle unter Standardfermentationsbedingungen Gly
cerin in 1,3-Propandiol mit einer Raumzeitausbeute von mehr als
0,5 g×h-1×l-1 umsetzt, und diesen auf Glycerin als einziger Koh
lenstoffquelle unter anaeroben Bedingungen zur technischen Umwand
lung von Glycerinlösungen mit einer Konzentration von 5 bis 20
Gew.-% Glycerin unter Konstanthaltung des pH-Wertes einsetzt und
nach weitgehendem Verbrauch des Glycerins die entstandene Biomasse
abtrennt und das Produktgemisch destillativ aufarbeitet.
Ein derartiges Verfahren kann bevorzugt gemäß der hier vorliegenden
Erfindung in einem pneumatischen Reaktor, etwa einem Blasensäulen
fermenter oder einem Airlift-Reaktor durchgeführt werden. Nach einer
bevorzugten Ausführungsform verwendet man dabei als Glycerinlösungen
technisches Glycerin, insbesondere technische Glycerinlösungen aus
der technischen Verarbeitung von Triglyceriden. Bevorzugt sind Gly
cerinlösungen mit geringem Restfettsäureanteil. Die Glycerinkonzen
tration beträgt vorzugsweise 5 bis 20 Gew.-%, insbesondere 10 bis 15
Gew.-%; der pH wird in einem Bereich von 6 bis 9 konstant gehalten,
insbesondere zwischen 6,5 und 8.
Die folgenden anaeroben Mikroorganismen eignen sich für das erfin
dungsgemäße Verfahren: Clostridium perfringens, Clostridium
pasteurianum, Clostridium acetobutylicum, Clostridium butylicum,
Clostridium butyricum, Clostridium beÿerinckii, Clostridium
kantontoi, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri, Citrobacter
freundii, Aerobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Citrobacter
intermedium, Klebsiella aerogenes oder Klebsiella oxytoca.
Für das erfindungsgemäße Verfahren besonders geeignet ist die Um
wandlung von Glycerin in 1,3-Propandiol unter Zuhilfenahme eines
Stammes Clostridium butyricum etwa von C. butyricum DSM 5431 und/
oder dessen zu 1,3-Propandiolbildung befähigten Mutanten oder Va
rianten. Dabei ist es ein besonderer Vorteil des Verfahrens, daß die
geringe Schaumbildung durch Aufsprühen eines Teils des Fermenta
tionsmediums auf den Schaum beherrscht werden kann, wobei auch die
Schlaufenströmung im Airlift-Reaktor zur Schaumbeherrschung bei
trägt, so daß kein Entschäumungsmittel oder nur sehr wenig Ent
schäumungsmittel mitverwendet werden müssen. Die ansonsten auf
wendige Abtrennung des Entschäumungsmittels von den Reaktionspro
dukten entfällt dadurch oder wird vereinfacht.
Nach den Angaben des Beispiels 4 der DE-Patentanmeldung
P 39 24 423.7 wurde Glycerin mit Hilfe eines Stammes Clostri
dium butyricum DSM 5431 im 50-l-Airlift-Fermenter in 1,3-Propandiol
überführt. Die Gesamtglycerinkonzentration betrug 119 g/l. Nach
einem Zeitraum von 21,4 Stunden wurden unter Verbrauch von 92,8 g/l
Glycerin 54,2 g/l 1,3-Propandiol gebildet, was 93% der insgesamt
erzeugten Stoffmenge an 1,3-Propandiol und einer Raumzeitausbeute
von 2,54 g/l h entspricht. Während der Fermentation war eine Menge
an Antischaummittel (Desmophen(R)), die einer Zugaberate von 0,75
g/h entsprach, ausreichend. Eine Schaumbildung war praktisch nicht
vorhanden. In synchron durchgeführten Vergleichsfermentationen im
0,03 m3 Rührreaktor konnte gezeigt werden, daß der im Rührkessel
reaktor auftretende Schaum im Gegensatz zum Betrieb im Airlift-Re
aktor durch Zusatz des Antischaummittels Desmophen nicht zu besei
tigen war. Während der Fermentation betrug die Begasungsrate mit dem
Inertgas Stickstoff 2,5×10-5m3/sec.
In analoger Weise wurde Glycerin mit Clostridium butyricum DSM 5431
im 1500 l Airlift-Fermenter umgesetzt. Die Stickstoffbegasungsrate
betrug 1,0×10-3m3/sec. Bei einer Anfangskonzentration des Glyce
rins von ca. 20/l wurden durch weitere Substratzugaben insgesamt
89,2 g/l Glycerin in den Fermenter eingebracht, die vollständig um
gesetzt werden konnten. Die Endkonzentration an 1,3-Propandiol be
trug 51,3 g/l entsprechend einer Ausbeute von 70 mol-%, bezogen auf
die verbrauchte Substratstoffmenge und einer Raumzeitausbeute von
2,97 g/l×h-1. Zusätzlich wurden ca. 6 g/l Butyrat und Acetat sowie
geringe Mengen Ethanol gebildet.
Eine nennenswerte Schaumbildung trat erst nach einer Kulturzeit von
8,5 h auf, wobei der Schaumteppich sowohl während der Laugezugabe
als auch während der Zufütterung von Substrat vollständig zusammen
brach. Zur besseren Ausnützung der schaumbekämpfenden Wirkung des
Glycerins wurde das Substrat über eine am Reaktordeckel angebrachte
Düse in den Kopfraum des Fermenters geführt. Während der Substrat
zugabe brach die Schaumschicht nahezu völlig zusammen. Nach Beendi
gung der Substratzugabe wurde über dieselbe Düse Kulturmedium, das
über eine Schlauchpumpe abgezogen worden war, eingespritzt. Dabei
wurde ebenfalls eine starke Reduzierung der Schaummenge festge
stellt.
Claims (9)
1. Verfahren zur mikrobiellen Umsetzung eines Substrats zu einem
Metaboliten unter anaeroben Bedingungen in einem Fermenter, da
durch gekennzeichnet, daß
- - als Fermenter ein Blasensäulenreaktor ohne mechanisch bewegte Einbauten eingesetzt wird und daß
- - zur Durchführung des Fermentationsansatzes während der Fer mentation durch Einpressen eines sauerstofffreien Gases im unteren Bereich des Reaktors Gasblasen erzeugt werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß als sau
erstofffreie Gase die am Kopf des Reaktors abgezogenen Gärgase
und/oder Inertgase wie Stickstoff, Kohlendioxid oder Argon ein
gesetzt werden.
3. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 oder 2, dadurch gekenn
zeichnet, daß die Begasungsrate 0,001 bis 0,2 vvm, vorzugsweise
0,03 bis 0,07 vvm, beträgt.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekenn
zeichnet, daß zur Schaumbekämpfung Prozeßstoffe und/oder im
Kreislauf geführtes Kulturmedium durch eine im oberen Reaktor
teil angeordnete Düse auf den Schaum gesprüht werden.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekenn
zeichnet, daß das Gas am Boden des turmartigen Reaktors zentral
- insbesondere axial - über ein Einsteckrohr oder ein Begasungs
ring eingeleitet wird.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekenn
zeichnet, daß das Verhältnis Höhe zu Durchmesser des Reaktors
zwischen 5 bis 20 und 5 bis 10 gewählt wird.
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekenn
zeichnet, daß der Reaktor statische Einbauten enthält, die die
Durchmischung fördern, insbesondere Schlaufen, die vorzugsweise
mittig oder wandgängig angebracht sind und als Trennwand aus
gebildet sein können.
8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekenn
zeichnet, daß als Substrat Glycerin eingesetzt wird und dieses
in Gegenwart anaerober Mikroorganismen in 1,3-Propandiol umge
setzt wird.
9. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekenn
zeichnet, daß als anaerobe Mikroorganismen Stämme der Gattung
Clostridium butyricum eingesetzt werden.
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Country | Link |
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WO (1) | WO1991015590A1 (de) |
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---|---|---|---|---|
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US5686276A (en) * | 1995-05-12 | 1997-11-11 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Bioconversion of a fermentable carbon source to 1,3-propanediol by a single microorganism |
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DE3508274A1 (de) * | 1985-03-08 | 1986-09-11 | Kernforschungsanlage Jülich GmbH, 5170 Jülich | Saeulenreaktor fuer anaerobe abbauprozesse |
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1990
- 1990-04-02 DE DE19904010523 patent/DE4010523A1/de not_active Withdrawn
-
1991
- 1991-03-25 WO PCT/EP1991/000569 patent/WO1991015590A1/de active Application Filing
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8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |