DE3635599A1 - Method for the treatment of tissue samples and apparatus for carrying out the method - Google Patents
Method for the treatment of tissue samples and apparatus for carrying out the methodInfo
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren sowie eine Vorrichtung zur Behandlung von Proben aus menschlichem oder tierischem Gewebe, aus denen nachfolgend Schnitte für die mikroskopi sche Untersuchung angefertigt werden sollen, bei welchem die Gewebeproben in einer flüssigen Fixierlösung fixiert und/oder in durch Erwärmung verflüssigtem Paraffin mit Paraffin getränkt werden.The invention relates to a method and an apparatus for the treatment of samples from human or animal Tissue, from which subsequent sections for microscopy which examination should be made fix the tissue samples in a liquid fixative and / or in paraffin liquefied by heating To be soaked in paraffin.
Um Gewebeproben beispielsweise in der histopathologischen Diagnostik einer mikroskopischen Untersuchung unterziehen zu können, muß das zu untersuchende Gewebe in sehr dünne Schnitte zerlegt werden, die dann gefärbt werden. Da sich von frischem unbehandeltem Gewebe derart dünne Schnitte nicht anfertigen lassen, muß das Gewebe durch eine ent sprechende Behandlung eine bestimmte Konsistenz erhalten, die in der Regel durch Einbettung in Paraffin - oder alter nativ auch in Runststoff - erreicht wird. Da Paraffin aber wasserunlöslich ist, sind Vorbehandlungen, wie die Ent wässerung und Fixierung erforderlich, bevor die Paraffinie rung erfolgen kann.In order to be able to subject tissue samples to a microscopic examination, for example in histopathological diagnosis, the tissue to be examined must be broken down into very thin sections, which are then stained. Since not let make fresh untreated tissue such thin sections, the tissue must get through out a suitable treatment, a certain consistency, usually by embedding in paraffin - is achieved - or alter natively in Runststoff. However, since paraffin is insoluble in water, pretreatments such as dewatering and fixation are required before paraffining can take place.
Die Erfindung befaßt sich mit der Behandlung von Gewebe proben, soweit diese die Fixierung und Einbettung in Paraf fin betrifft und hat sich die Aufgabe gestellt, die erfor derlichen Behandlungszeiten wesentlich zu reduzieren.The invention is concerned with the treatment of tissue rehearse as far as this fixation and embedding in paraf fin concerns and has set itself the task of expl significantly reduce treatment times.
Ausgehend von einem Verfahren der eingangs erwähnten Art wird diese Aufgabe erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß die Gewebeproben in ein druckdicht abschließbares, mit Fixier lösung oder flüssigem Paraffin teilweise gefülltes Behand lungsgefäß eingebracht werden, und das Behandlungsgefäß druckdicht verschlossen wird, und daß im Behandlungs gefäßinnern dann während einer vorgegebenen Behandlungs dauer zumindest zeitweise durch alternierende Absaugung der über der Fixierlösung bzw. dem Paraffinbad befindlichen Luft und Zufuhr von Umgebungsatmosphäre Druckpulsationen erzeugt werden. Diese Druckpulsationen führen zu einer ab gekürzten Behandlungsdauer, weil einerseits in den Gewebe proben noch enthaltene Flüssigkeitsreste von vorausgehenden Behandlungsstufen (z.B. Entwässerungsflüssigkeiten, wie Alkohol, Azeton o.dgl.) aus dem Gewebe ausgetrieben und andererseits die Fixierlösung (z.B. 4%-iges Formalin) bzw. das durch Erwärmung auf etwa 60°C verflüssigte Paraffin das Gewebe schneller durchdringt.Based on a method of the type mentioned at the beginning This object is achieved in that the Tissue samples in a pressure-tight lockable, with fixation solution or liquid paraffin partially filled treatment be introduced and the treatment vessel is closed pressure-tight, and that in treatment then inside the vessel during a given treatment lasts at least temporarily by alternating suction of the over the fixing solution or the paraffin bath Air and supply of ambient atmosphere pressure pulsations be generated. These pressure pulsations lead to one shortened treatment time because, on the one hand, in the tissue samples of liquid residues from previous ones Treatment stages (e.g. drainage liquids, such as Alcohol, acetone or the like) are expelled from the tissue and on the other hand the fixing solution (e.g. 4% formalin) or the paraffin liquefied by heating to about 60 ° C Tissue penetrates faster.
Bei der Tränkung der Gewebeproben mit Paraffin wird vor zugsweise so verfahren, daß der Druck im Innern des Behand lungsgefäßes während der vorbestimmten Behandlungsdauer durch Absaugung der über dem Paraffinbad befindlichen Luft allmählich auf einen Minimaldruck im Bereich von 0,05 bis 0,2 Torr abgesenkt wird, und daß das Innere des Behand lungsgefäßes während des Absaugvorgangs teilweise pulsie rend zur Umgebungsatmosphäre entlüftet und wieder gegen die Umgebungsatmosphäre abgeschlossen wird.When impregnating the tissue samples with paraffin preferably move so that the pressure inside the treatment lungs vessel during the predetermined treatment period by extracting the air above the paraffin bath gradually to a minimum pressure in the range of 0.05 to 0.2 Torr is lowered, and that the inside of the treat lungs vessel during the suction process partially pulsie vented to the surrounding atmosphere and again against the Ambient atmosphere is completed.
Bei der Fixierung von Gewebeproben in einer flüssigen Fixierlösung kann andererseits das Innere des Behandlungs gefäßes während der Behandlungsdauer zumindest zeitweise alternierend an eine Vakuum- und eine Druckquelle ange schlossen werden, so daß also bezüglich des Atmosphären drucks abwechselnd ein Überdruck und ein Unterdruck ein wirkt. Dem sich alternierend im Behandlungsgefäß aufbauen den Druck und Vakuum werden dann in einer bevorzugten Wei terbildung des Verfahrens jeweils in der Aufbauphase Druck pulstaionen überlagert.When fixing tissue samples in a liquid Fixing solution, on the other hand, can affect the interior of the treatment vessel at least temporarily during the treatment period alternating between a vacuum and a pressure source be closed, so with respect to the atmosphere alternately overpressure and underpressure works. Build up alternately in the treatment vessel the pressure and vacuum are then in a preferred Wei Training of the process in the pressure build-up phase pulse ions superimposed.
Der Fixiervorgang kann zusätzlich dadurch verkürzt werden, daß die Fixierlösung während des Fixiervorgangs zusätzlich auf einer gegenüber der Raumtemperatur erhöhten Temperatur - beispielsweise auf etwa 40°C - gehalten wird.The fixing process can also be shortened by that the fixing solution additionally during the fixing process at a temperature that is higher than room temperature - For example, at about 40 ° C - is kept.
Die zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens vor gesehene Vorrichtung umfaßt grundsätzlich ein druckdicht abschließbares Behandlungsgefäß zur Aufnahme der zu behan delnden Gewebeproben, eine über eine Leitung mit dem Innern des geschlossenen Behandlungsgefäßes verbindbare elektro motorisch antreibbare Vakuumpumpe und wenigstens ein an der das Behandlungsgefäß und die Vakuumpumpe verbindenden Lei tung angeschlossenes bzw. in die Leitung eingeschaltetes, von einer elektrischen oder elektronischen Steuerschaltung alternierend ansteuerbars Steuerventil. Über Zeitschalt glieder in der Steuerschaltung kann die Behandlungsdauer vorgegeben und die Ansteuerung des Steuerventils bzw. der Steuerventile zur Erzeugung der Druckpulsationen während der Behandlungsdauer ausgelöst werden.The above to carry out the method according to the invention seen device basically includes a pressure-tight lockable treatment vessel to hold the to treat Deleting tissue samples, one via a line to the inside of the closed treatment vessel connectable electro motor-driven vacuum pump and at least one on the Lei connecting the treatment vessel and the vacuum pump connected or switched on in the line, from an electrical or electronic control circuit alternately controllable control valve. Via timer links in the control circuit can be the duration of treatment predetermined and the control of the control valve or Control valves for generating the pressure pulsations during the duration of treatment.
Zweckmäßig wird an bzw. in die Leitung zwischen dem Behand lungsgefäß und der Vakuumpumpe zusätzlich ein von der elek trischen bzw. elektronischen Steuerschaltung elektrisch an steuerbares Entlüftungsventil an- bzw. eingeschaltet, wel ches im nicht angesteuerten Ausgangszustand, d.h. also auch bei ausgeschalteter oder - infolge von Stromausfalles - ausgefallener Steuerschaltung in der Öffnungsstellung gehalten ist, während des Betriebs jedoch geschlossen ist. Nach dem Abschalten der Vorrichtung bzw. einem Stromausfall wird dadurch automatisch ein im Behandlungsgefäß gegebenen falls vorhandener Unterdruck ausgeglichen, so daß das Öff nen des Behandlungsgefäßes und die Entnahme der Proben nicht behindert werden.Appropriately on or in the line between the treatment vessel and the vacuum pump one of the elec trical or electronic control circuit electrically controllable vent valve on or on, wel ches in the uncontrolled initial state, ie also when switched off or - as a result of power failure - the failed control circuit is held in the open position, but is closed during operation. After switching off the device or a power failure, a vacuum which may be present in the treatment vessel is automatically compensated for, so that the opening of the treatment vessel and the removal of the samples are not impeded.
Das wenigstens eine Steuerventil ist zweckmäßig ein an der das Behandlungsgefäß mit der Vakuumpumpe verbindende Lei tung angeschlossenes, im nicht angeteuerten Ausgangszustand in der Schließstellung gehaltenes Entlüftungsventil. Wenn dieses normalerweise geschlossene Belüftungsventil während der Behandlungszeit von der Steuerschaltung alternierend geöffnet und geschlossen wird, wird - je nach im Behand lungsgefäß herrschendem Druckniveau - im Rhythmus der Um schaltung Umgebungsluft angesaugt, d.h. das Vakuum kurz zeitig verringert, oder es wird Überdruck zur Umgebung ab geblasen, d.h. es treten Druckpulsationen auf. Je nachdem, ob ein oder mehrere solcher Entlüftungsventile vorgesehen sind, kann dabei dann noch die Charakteristik der Druck pulsation verändert werden.The at least one control valve is expediently connected to the line connecting the treatment vessel to the vacuum pump and held in the closed position in the closed position vent valve. When this normally closed vent valve is opened alternately during the treatment time of the control circuit and closed, - depending on lung vascular prevailing in the treatmen pressure level - in the rhythm of the order circuit ambient air sucked in, the vacuum that is briefly reduced, or is excess pressure to the atmosphere from blown , ie pressure pulsations occur. Depending on whether one or more such vent valves are provided, the characteristic of the pressure pulsation can then be changed.
In der Anschlußleitung des Entlüftungsventils bzw. der Ent lüftungsventile an der das Behandlungsgefäß mit der Vakuum pumpe verbindenen Leitung ist zweckmäßig ein Drosselorgan vorgesehen, oder die Anschlußleitung selbst ist durch ent sprechend geringe Bemessung ihres Durchlaßquerschnitts als Drosselorgan ausgebildet, um eine zu plötzliche Ent- bzw. Belüftung mit zu starken Druckunterschieden zu vermeiden.In the connection line of the vent valve or Ent ventilation valves on the treatment vessel with the vacuum Pump connecting line is expediently a throttle device provided, or the connecting line itself is through ent speaking small dimensioning of its passage cross section as Throttle device designed to prevent or unexpectedly Avoid ventilation with excessive pressure differences.
Bei Verwendung der Vorrichtung zur Fixierbehandlung ist das Steuerventil bzw. wenigstens eines der Steuerventile zweck mäßig als 2-Wege-Wechselventil ausgebildet, welches so an das Behandlungsgefäß, den Saug- und den Druckanschluß der Vakuumpumpe und die Umgebungsatmosphäre angeschlossen ist, daß in einer Schaltungstellung der Sauganschluß der Vakuum pumpe mit dem Behandlungsgefäß und ihr Druckanschluß mit der Umgebungsatmosphäre und in der anderen Schaltstellung der Druckanschluß mit dem Behandlungsgefäß und der Saug anschluß mit der Umgebungsatmosphäre verbunden ist. Durch Umsteuern dieses Wechselventils kann das Behandlungsgefäß also abwechselnd evakuiert und unter Überdruck gesetzt wer den, wobei durch zusätzliche getaktete Ansteuerung des oben erwähnten Entlüftungsventils bzw. - im Falle des Vorhanden seins - der Entlüftungsventile das sich aufbauende Vakuum bzw. der entstehende Überdruck im Behandlungsgefäß durch Druckpulsationen überlagert werden kann.When using the device for fixation treatment, the control valve or at least one of the control valves is expediently designed as a 2-way shuttle valve, which is connected to the treatment vessel, the suction and pressure connection of the vacuum pump and the ambient atmosphere in such a way that the Suction connection of the vacuum pump with the treatment vessel and its pressure connection with the ambient atmosphere and in the other switching position the pressure connection with the treatment vessel and the suction connection with the ambient atmosphere is connected. By reversing this change-over valve, the treatment vessel can alternately be evacuated and pressurized, with additional clocked activation of the above-mentioned vent valve or - if there is one - the vent valves, the vacuum that builds up or the pressure in the treatment vessel that arises due to pressure pulsations can be overlaid.
Die Erfindung ist in der folgenden Beschreibung von zwei Ausführungsbeispielen der erfindungsgemäßen Vorrichtung näher erläutert, und zwar zeigt:The invention is in the following description of two Embodiments of the device according to the invention explained in more detail, namely:
Fig. 1 einen schematischen Schaltplan eines zur Einbettung von Gewebeproben in Paraffin bestimmten Ausführungsbeispiels der erfin dungsgemäßen Vorrichtung; Figure 1 is a schematic circuit diagram of an embodiment of the inventive device for embedding tissue samples in paraffin.
Fig. 2 ein schematisches Diagramm des Druck verlaufs im Behandlungsgefäß der Vorrich tung gemäß Fig. 1 während der Behandlungs dauer; Fig. 2 is a schematic diagram of the pressure profile in the treatment vessel of the device according to FIG. 1 during the treatment period;
Fig. 3 ein schematisches Schaltbild eines zweiten, zur Fixierung von Gewebeproben vorgesehenen Ausführungsbeispiels der erfindungsgemäßen Vorrichtung; und Fig. 3 is a schematic diagram of a second, intended for the fixation of tissue samples embodiment of the device according to the invention; and
Fig. 4 ein schematisches Diagramm des Druckver laufs im Behandlungsgefäß der Vorrichtung gemäß Fig. 3 während der Behandlungsdauer. Fig. 4 is a schematic diagram of the Druckver course in the treatment vessel of the device of FIG. 3 during the treatment period.
Fig. 1 zeigt das Schaltschema eines zum Einbetten von Gewebeproben in Paraffin mittels des erfindungsgemäßen Ver fahrens bestimmten Ausführungsbeispiels der erfindungs gemäßen Vorrichtung und weist ein Behandlungsgefäß 10 auf, in welches das Behandlungsmedium, d.h. das Paraffin, ein gefüllt und dann mittels einer - zweckmäßig im Boden des Gefäßes 10 integrierten - Widerstands-Heizspirale 12 auf geschmolzen und auf eine Temperatur von etwa 60°C erwärmt wird. Durch einen, die Stromzufuhr beim Übersteigen der vorgeschriebenen Temperatur abschaltenden (nicht gezeigten) einstellbaren Thermostatfühler kann die Behandlungstempera tur im flüssigen Paraffin auf der vorgeschriebenen Höhe ge halten werden. Nach Einbringung der zu paraffinierenden Ge webeproben in das Paraffinbad wird das Behandlungsgefäß mittels eines Deckels 14 druckdicht verschlossen. An einem im Deckel vorgesehenen Anschluß 16 ist das eine Ende einer Leitung 18 angeschlossen, deren anderes Ende am Saug anschluß einer Vakuumpumpe 20 angeschlossen ist. Die Vaku umpumpe 20 ist von einem Elektromotor 22 angetrieben. An der das Behandlungsgefäß 10 mit der Vakuumpumpe 20 verbin denden Leitung 18 sind über kurze Zweigleitungen 24, 26 elektromagnetisch betätigbare Steuerventile angeschlossen, von denen das an der Zweigleitung 24 angeschlossene Ventil ein Entlüftungsventil 26 ist, welches so ausgebildet ist, daß es im Ausgangszustand, d.h. bei nicht erregtem Betäti gungsmagnet, in die in Fig. 1 dargestellte Öffnungs stellung vorgespannt ist. Das bedeutet also, daß die Lei tung 18 und somit auch das Innere des Behandlungsgefäßes 10 normalerweise über das Entlüftungsventil 26 Verbindung zur Umgebungsatmosphäre hat. Die über die beiden Zweigleitungen 26 ebenfalls an der Leitung 18 angeschlossenen gleich artigen Steuerventil sind ebenfalls als Entlüftungsventile 30 ausgebildet, die jedoch - wie in der Zeichnung gezeigt - im Ausgangszustand in der Schließstellung stehen. Ihre Betätigungsmagneten werden - ebenso wie der Betätigungs magnet des Entlüftungsventils 28 sowie der Betätigungs magnet eines elektromagnetisch betätigbaren Schalters 32 für den Antriebsmotor 22 der Vakuumpumpe 20 von einer gemeinsamen elektrischen oder elektronischen Steuerschal tung 34 aus angesteuert, die ihrerseits über einen von Hand betätigbaren Schalter 36 mit dem elektrischen Netz verbun den ist. Fig. 1 shows the circuit diagram of one for embedding tissue samples in paraffin by means of the method according to the invention certain embodiment of the device according to the Invention and has a treatment vessel 10 in which the treatment medium, ie the paraffin, is filled and then by means of a - expediently in the soil of the vessel 10 integrated - resistance heating coil 12 is melted and heated to a temperature of about 60 ° C. The treatment temperature in the liquid paraffin can be kept at the prescribed level by an adjustable thermostat sensor (not shown) which switches off the power supply when the prescribed temperature is exceeded. After introducing the tissue samples to be paraffinized into the paraffin bath, the treatment vessel is closed in a pressure-tight manner by means of a lid 14 . At a connection 16 provided in the cover, one end of a line 18 is connected, the other end of which is connected to the suction connection of a vacuum pump 20 . The vacuum umpump 20 is driven by an electric motor 22 . At the treatment vessel 10 with the vacuum pump 20 connecting line 18 are connected via short branch lines 24 , 26 electromagnetically actuated control valves, of which the valve connected to the branch line 24 is a vent valve 26 , which is designed so that it is in the initial state, ie when the actuator is not energized, the supply position is biased into the opening position shown in FIG. 1. So this means that the Lei device 18 and thus also the interior of the treatment vessel 10 normally has a connection to the ambient atmosphere via the vent valve 26 . The similar control valve also connected to the line 18 via the two branch lines 26 are also designed as ventilation valves 30 , which, however - as shown in the drawing - are in the closed position in the initial state. Your actuating magnets - as well as the actuating magnet of the vent valve 28 and the actuating magnet of an electromagnetically actuated switch 32 for the drive motor 22 of the vacuum pump 20 are controlled by a common electrical or electronic control circuit 34 , which in turn is actuated by a manually operable switch 36 the electrical network is connected.
Die beschriebene Vorrichtung arbeitet wie folgt:
Die vorbehandelten einzubettenden Gewebeproben werden in
das durch die Widerstandsheizspirale 12 aufgeschmolzene und
auf 60°C erwärmte Paraffinbad im Behandlungsgefäß 10 einge
legt und das Gefäß dann mittels des Deckels 14 dicht ver
schlossen. Durch Betätigung des Schalters 36 der Steuer
schaltung 34 wird die Vorrichtung dann in Gang gesetzt. Von
der Steuerschaltung 34 wird der Schalter 32 für den Motor
22 der Vakuumpumpe 20 geschlossen, d.h. die Vakuumpumpe be
ginnt mit der Absaugung von Luft aus der Leitung 18.
Zugleich mit dem Schalter 32 wurde von der Steuerschaltung
34 auch der Magnet des Entlüftungsventils 28 angesteuert,
so daß sich also in dem über dem Paraffinbad befindlichen
Luftraum innerhalb des Behandlungsgefäßes 10 allmählich ein
zunehmend stärkeres Vakuum aufbaut.The described device works as follows:
The pretreated tissue samples to be embedded are placed in the paraffin bath melted by the resistance heating coil 12 and heated to 60 ° C. in the treatment vessel 10 and the vessel is then sealed by means of the lid 14 . By actuating the switch 36 of the control circuit 34 , the device is then started. From the control circuit 34 , the switch 32 for the motor 22 of the vacuum pump 20 is closed, that is, the vacuum pump starts with the extraction of air from the line 18th At the same time as the switch 32 , the control circuit 34 also actuated the magnet of the vent valve 28 , so that an increasingly stronger vacuum gradually builds up in the air space above the paraffin bath within the treatment vessel 10 .
In dem in Fig. 2 gezeigten, den Druckverlauf im Behand lungsgefäß 10 während einer Behandlungsdauer schematisch veranschaulichenden Diagramm ist dieser anfängliche allmäh liche Anstieg des Vakuums (= Abfall des Drucks vom Atmosphärendruck p atm aus) im Abschnitt a der Diagrammkurve veranschaulicht. Nach Erreichen eines gewissen Teilvakuums p -a zum Zeitpunkt ta werden von der Steuerschaltung 34 die Betätigungsmagneten der Entlüftungsventile 30 für eine be stimmte Zeitdauer jeweils abwechselnd kurzzeitig geöffnet, d.h. das erreichte Vakuum p -a kann sich über die Zweig leitungen 26 jeweils in der Öffnungsstellung der Ent lüftungsventile 30 kurzzeitig etwas abbauen. Sogleich nach dem Schließen der Entlüftungsventile 30 bewirkt aber die weiterlaufende Vakuumpume 20 wieder eine Erhöhung des Vaku ums bzw. ein Absinken des Drucks im Behandlungsgefäß. Es stellt sich also die im Abschnitt b im Diagramm veranschau lichte pulsierende Druckcharakteristik ein, die durch ein in der Steuerschaltung vorgesehenes (nicht gezeigtes) Zeit glied zum Zeitpunkt tb wieder beendet wird. Da im folgen den, durch den Kurvenabschnitt c veranschaulichten Behand lungsabschnitt die Entlüftungsventile 30 geschlossen blei ben, tritt wieder ein stetiger Abfall des Drucks, d.h. ein Anstieg des Vakuums im Behandlungsgefäß 10 ein, bis zum Zeitpunkt tc ein Druck p -c erreicht wird. Von der Steuer schaltung wird dann wieder eine Druckpulsationsphase d er zeugt, indem - in dieser Phase nur eines - der Entlüftungs ventile 30 alternierend geöffnet und geschlossen wird. Nach einem vorgegebenen Zeitraum wird dann dieses Entlüftungs ventil 30 wiederum geschlossen und die Evakuierung bis zum geforderten Endvakuum p -e im Bereich zwischen 0,05 und 0,2 Torr fortgesetzt. In the diagram shown in FIG. 2, which schematically illustrates the pressure curve in the treatment vessel 10 during a treatment period, this initial gradual increase in the vacuum (= drop in pressure from the atmospheric pressure p atm ) is illustrated in section a of the diagram curve. After reaching a certain partial vacuum p -a at time ta , the actuating magnets of the venting valves 30 are each opened briefly for a certain period of time by the control circuit 34 , ie the vacuum p -a that is reached can be reached via the branch lines 26 in the open position of the Briefly dismantle vent valves 30 . Immediately after the ventilation valves 30 are closed , the continuing vacuum pump 20 again causes an increase in the vacuum or a decrease in the pressure in the treatment vessel. The pulsating pressure characteristic illustrated in section b in the diagram thus arises, which is terminated again at time tb by a time element (not shown) provided in the control circuit. Since in the treatment section illustrated by the curve section c , the vent valves 30 remain closed, a steady drop in the pressure occurs again, ie an increase in the vacuum in the treatment vessel 10 , until a pressure p -c is reached by the time tc . A Druckpulsationsphase is wiring of the control then d he testifies by - at this stage only one - the bleed valves is alternately opened and closed 30. After a predetermined period of time, this vent valve 30 is then closed again and the evacuation to the required final vacuum p -e continues in the range between 0.05 and 0.2 torr.
Erwähnt soll noch werden, daß die Abzweigleitungen 26 einen relativ geringen Querschnitt haben, so daß die Entlüftung der Leitung 18 und somit des Behandlungsgefäßes 10 beim Öffnen der Entlüftungsventile 30 nicht schlagartig bis auf den Atmosphärendruck erfolgt, sondern eine gewisse Drosselwirkung gegeben ist, welche in Fig. 1 auch durch die schematisch eingezeichneten Drosselstellungen veran schaulicht sind.It should also be mentioned that the branch lines 26 have a relatively small cross-section, so that the venting of the line 18 and thus of the treatment vessel 10 does not occur abruptly up to the atmospheric pressure when the venting valves 30 are opened, but a certain throttling effect is given, which is shown in FIG also by the schematically drawn throttle positions veran. 1 are illustrated.
Es hat sich gezeigt, daß durch die beschriebene Behand lungsweise die Paraffinierung von Gewebeproben erheblich beschleunigt wird, wobei insbesondere durch die während der Behandlungsdauer zeitversetzt auftretenden Pulsationen auch Reste von in den Proben noch enthaltenen Entwässerungs mitteln (Azeton oder Alkohol) ausgetrieben werden.It has been shown that the treatment described the paraffination of tissue samples is considerable is accelerated, in particular by the during Treatment duration of delayed pulsations also Remnants of drainage still present in the samples agents (acetone or alcohol).
In Fig. 3 ist ein abgewandeltes, zur Fixierung von Gewebe proben in einer Fixierflüssigkeit, z.B. 4%-igem Formalin, vorgesehenes Ausführungsbeispiels der erfindungsgemäßen Vorrichtung und in Fig. 4 in schematischer Form das zuge hörige Diagramm des Druckverlaufs im Behandlungsgefäß 10 während der Behandlungsdauer gezeigt.In Fig. 3 is a modified, for fixing tissue samples in a fixing liquid, for example 4% formalin, intended embodiment of the device according to the invention and in Fig. 4 in schematic form the associated diagram of the pressure curve in the treatment vessel 10 is shown during the treatment period .
Das Ausführungsbeispiel unterscheidet sich von dem vorste hend beschriebenen Ausführungsbeispiel gemäß Fig. 1 dadurch, daß in die Leitung 18 ein 2-Wege-Wechselventil 38 eingeschaltet ist, an welches pumpenseitig sowohl der Saug wie auch der Druckanschluß der Vakuumpumpe 20 angeschlossen sind. Von der Steuerschaltung 34 kann das Ventil 38 so an gesteuert werden, daß abwechselnd die Saug- und die Druck seite der Vakuumpumpe 20 mit dem Behandlungsgefäß 10 ver bunden ist, wobei der jeweils gerade nicht mit dem Behand lungsgefäß verbundene Pumpenanschluß mit der Umgebungs atmosphäre kommuniziert. Im gezeigten Fall ist das 2-Wege Wechselventil 38 als 3-Stellungsventil ausgebildet, welches in einer bei Nichterregung von der Steuerschaltung 34 aus automatisch eingenommenen zusätzlichen Ausgangsschalt stellung die Saug- und die Druckseite der Vakuumpumpe 20 kurzschließt und das Behandlungsgefäß 10 entlüftet. Das beim Ausführungsbeispiel gemäß Fig. 1 vorgesehene geson derte Entlüftungsventil 28 ist hier also in das Ventil 38 integriert. Selbstverständlich könnte statt dessen aber auch in diesem Falle ein gesondertes, dem Entlüftungsventil 28 entsprechendes Entlüftungsventil vorgesehen sein. Das Ventil 38 würde dann - wegen des Wegfalls der Ausgangs schaltstellung - zu einem 2-Stellungsventil vereinfacht. In Fig. 3 ist nur ein Entlüftungsventil 30 dargestellt, was aber nicht bedeuten soll, daß nicht auch zwei oder mehrere solcher Entlüftungsventile vorgesehen sein können.The embodiment differs from the previously described embodiment according to FIG. 1 in that a 2-way shuttle valve 38 is switched on in line 18 , to which both the suction and the pressure connection of the vacuum pump 20 are connected on the pump side. From the control circuit 34 , the valve 38 can be controlled so that alternately the suction and the pressure side of the vacuum pump 20 is connected to the treatment vessel 10 , the respective pump connection not currently connected to the treatment vessel communicating with the ambient atmosphere. In the case shown, the 2-way shuttle valve 38 is designed as a 3-position valve, which short-circuits the suction and pressure sides of the vacuum pump 20 and de-aerates the treatment vessel 10 in an additional output switching position automatically assumed when the control circuit 34 is not energized. The procedure provided in the embodiment of Fig. 1 geson-made ventilation valve 28 is thus integrated here in the valve 38. Of course, instead of this, a separate vent valve corresponding to the vent valve 28 could also be provided in this case. The valve 38 would then - because of the omission of the output switch position - simplified to a 2-position valve. In Fig. 3 only one vent valve 30 is shown, but this should not mean that two or more such vent valves cannot be provided.
Aus dem Diagramm in Fig. 4 ist erkennbar, daß die Fixier- Vorrichtung alternierend mit Vakuum und Überdruck betrieben wird, indem durch eine entsprechende Umschaltung des 2- Wege-Wechselventils 38 jeweils abwechselnd der Saug- und der Druckanschluß der Vakuumpumpe 20 über die Leitung 18 mit dem Behandlungsgefäß verbunden wird. Dieser alternie renden Druck- und Vakuumbeaufschlagung wird dann noch eine pulsierende Arbeitsweise überlagert, indem jeweils während des Einsetzens des Vakuums (= Abfallen unter den Umgebungs druck p atm ) und des Ansteigens des Drucks p über den Umge bungsdruck das Entlüftungsventil von der Steuerschaltung alternierend angesteuert wird. Der hieraus resultierende, in Fig. 4 veranschaulichte Druckverlauf im Innern des Be handlungsgefäßes während der Behandlungsdauer führt zu einer wesentlichen Beschleunigung der Behandlungsdauer, die zusätzlich noch dadurch verkürzt werden kann, indem die Fixierflüssigkeit über die ohnehin vorgesehene Widerstands heizspirale 12 erwärmt wird. Bei Verwendung von 4%-igem Formalin als Fixierflüssigkeit hat sich eine Erwärmung auf 40°C als zweckmäßig erwiesen.It can be seen from the diagram in FIG. 4 that the fixing device is operated alternately with vacuum and overpressure, in that the suction and pressure connections of the vacuum pump 20 are alternately switched over the line 18 by a corresponding switchover of the 2-way shuttle valve 38 is connected to the treatment vessel. This alternating pressure and vacuum is then superimposed on a pulsating mode of operation, in that the vent valve is actuated alternately by the control circuit each time the vacuum is applied (= falling below the ambient pressure p atm ) and the pressure p rises above the ambient pressure . The resulting pressure curve illustrated in FIG. 4 inside the treatment vessel during the treatment period leads to a substantial acceleration of the treatment period, which can additionally be shortened by heating the fixing liquid via the heating coil 12, which is provided in any case. When using 4% formalin as the fixing liquid, heating to 40 ° C. has proven to be expedient.
Es ist ersichtlich, daß die beschriebenen Ausführungs beispiele im Rahmen des Erfindungsgedankens abgewandelt und weitergebildet werden können. Solche Weiterbildungen können sich beispielsweise auf die Zahl und Anordnung der verwen deten Ventile, beispielsweise der Entlüftungsventile 30, beziehen. Die Leitung 18 kann auch im oberen Bereich des Behandlungsgefäßes 10 fest angeschlossen sein, was das Ab nehmen und Aufsetzen des Deckels 14 zum Zweck des Einfüh rens bzw. Entnehmens der Gewebeproben erleichtern kann.It can be seen that the exemplary embodiments described can be modified and further developed within the scope of the inventive concept. Such developments can relate, for example, to the number and arrangement of the valves used, for example the ventilation valves 30 . The line 18 can also be firmly connected in the upper region of the treatment vessel 10 , which can facilitate the taking and fitting of the lid 14 for the purpose of insertion or removal of the tissue samples.
Claims (10)
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| DE19863635599 DE3635599A1 (en) | 1986-10-20 | 1986-10-20 | Method for the treatment of tissue samples and apparatus for carrying out the method |
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| DE3635599A1 true DE3635599A1 (en) | 1988-04-21 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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1986
- 1986-10-20 DE DE19863635599 patent/DE3635599A1/en not_active Withdrawn
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