DE3022527A1 - METHOD FOR CARRYING OUT AN ELECTROPHORESIS AND DEVICE THEREFOR - Google Patents
METHOD FOR CARRYING OUT AN ELECTROPHORESIS AND DEVICE THEREFORInfo
- Publication number
- DE3022527A1 DE3022527A1 DE19803022527 DE3022527A DE3022527A1 DE 3022527 A1 DE3022527 A1 DE 3022527A1 DE 19803022527 DE19803022527 DE 19803022527 DE 3022527 A DE3022527 A DE 3022527A DE 3022527 A1 DE3022527 A1 DE 3022527A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- gel
- conveyor belt
- receiving surface
- molecules
- belt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D57/00—Separation, other than separation of solids, not fully covered by a single other group or subclass, e.g. B03C
- B01D57/02—Separation, other than separation of solids, not fully covered by a single other group or subclass, e.g. B03C by electrophoresis
Description
PATENTANWALTPATENT ADVOCATE
PROFESSIONAL REPRESENTATIVE BEFORE THE EUROPEAN PATENT OFFICE MANDATAIRE AGREE PRES LOFFICE EUROPEEN DES BREVETSPROFESSIONAL REPRESENTATIVE BEFORE THE EUROPEAN PATENT OFFICE MANDATAIRE AGREE PRES LOFFICE EUROPEEN DES BREVETS
D-7700 SINGEN Prof. Dr. Fritz Pohl Erzbergerstr. 5aD-7700 SINGEN Prof. Dr. Fritz Pohl Erzbergerstr. 5a
==================== Telegr./Cables:===================== Telegr./Cables:
Bodenseepatent Telex 793850Lake Constance patent Telex 793850
Zähringer Platz 21 Telefon (07731)63075Zähringer Platz 21 Telephone (07731) 63075
7750 Konstanz ZZZZ-. P_lo8 7750 Constance ZZZZ-. P _ lo8
I/haI / ha
Datum/DateDate
Verfahren zur Durchführung einer Elektrophorese sowie Vorrichtung dazuMethod for carrying out an electrophoresis and device therefor
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Durchführung einer Elektrophorese in einem elektrischen Feld, wobei Moleküle od. dgl. in einem porösen Stoff, beispielsweise in einem Gel, bewegt und — beispielsweise optisch — erfaßbar gemacht werden. Darüber hinaus bezieht sich die Erfindung avf eine Vorrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens.The invention relates to a method for performing electrophoresis in an electric field, with molecules or the like. Moved in a porous substance, for example in a gel, and made detectable - for example optically will. The invention also relates to a device for carrying out this method.
Die als Elektrophorese bezeichnete elektrokinetxsche Erscheinung wird vor allem in der analytischen und in der klinischen Chemie zur Analyse von Stoffgemischen verwendet, wozu man die verschiedenen Wandergeschwindigkeiten von Ionen im elektrischen Feld bestimmt. Zu dem hat sich die Elektrophorese in porösen Medien — beispielsweise in Polyacrylamid - und Agarose- Gelen — zu einer wichtigen analytischen und auch präparativen Methode in Biochemie und Medizin entwickelt, um beispielsweise komplexe Gemische von Nucleinsäuren oder Proteinen in einzelne Bestandteile zu trennen.The electrokinetic phenomenon known as electrophoresis is mainly used in the analytical and in used in clinical chemistry for the analysis of mixtures of substances, including the various migration speeds determined by ions in the electric field. In addition, electrophoresis in porous media - for example in polyacrylamide - and agarose gels - an important analytical and preparative one Method developed in biochemistry and medicine, for example, to produce complex mixtures of nucleic acids or Separate proteins into individual components.
130051/0368 - 2 -130051/0368 - 2 -
P-108 - 2 -P-108 - 2 -
Hierbei wandern nach Anlegen eines elektrischen Feldes verschiedene Moleküle entsprechend ihrer Beweglichkeit unterschiedlich weit in jenes — hier alle dazu anwendbaren Stoffe begrifflich umfassende — Gel und werden dadurch räumlich getrennt. Anschließend kann durch spezifisches Einfärben dieser Moleküle die Verteilung des Gemisches sichtbar gemacht und analysiert werden. Nachteilig bleibt hierbei, daß das Gelmaterial aus der Elektrophoresevorrichtung entfernt wird und nur einmal verwendet werden vermag. Um eine befriedigende Auflösung sehr vieler Komponenten — beispielsweise bei der Sequenzanalyse von DNS bis zu mehrere hundert verschieden lange Moleküle — zu erreichen, v/erden dabei heute bis zu einem Meter lange Gele verwendet, welche eine sehr hohe Spannung voraussetzen, um einen genügend großen Spannungsgradienten zur Verfügung zu haben, welcher eine Trennung in annehmbarer Zeit erlaubt .This migrates after applying an electric field different molecules according to their mobility at different distances into that - all applicable here Conceptually comprehensive substances - gel and are thus spatially separated. Then through specific coloring of these molecules, the distribution of the mixture can be visualized and analyzed. The disadvantage here is that the gel material is removed from the electrophoresis device and only once can be used. To achieve a satisfactory resolution of a large number of components - for example in the sequence analysis of DNA up to several hundred molecules of different lengths - to achieve, v / ground Today, gels up to one meter long are used, which require a very high tension in order to get a to have sufficiently large voltage gradients available, which allows separation in a reasonable time .
Bei präparativen Elektrophoresen wird üblicherweise am Ende des Gels eine stationäre Auffangkammer vorgesehen, in welche die Moleküle wandern. Diese Kammer wird von Zeit zu Zeit geleert und dann wieder neu gefüllt, wodurch eine stufenweise Auftrennung des Gemisches in seine Komponenten erreicht werden kann.In the case of preparative electrophoresis, a stationary collection chamber is usually provided at the end of the gel, into which the molecules migrate. This chamber is emptied from time to time and then refilled, whereby a gradual separation of the mixture into its components can be achieved.
Angesichts dieser Gegebenheiten hat sich der Erfinder das Ziel gesetzt, ein Verfahren und eine Vorrichtung der eingangs erwähnten Art so zu verbessern, daß die Handhabung erleichtert, die Gelgröße .reduziert und der Vorgang insgesamt gegebenenfalls automatisiert durchgeführt werden kann.In view of these circumstances, the inventor set himself the goal of a method and an apparatus of the type mentioned so that handling is easier, the gel size .reduziert and the process as a whole can optionally be carried out automatically.
130051/0383130051/0383
P-108 1·. - 3 -P-108 1 ·. - 3 -
Zur Lösung dieser Aufgabe führt, daß an dem porösen Stoff, beispielsweise dem Gel, etwa an dessen in Wanderrichtung der Moleküle liegendem Ende wenigstens eine bewegte Aufnahmefläche vorbeigeführt wird, welche bevorzugtermaßen kontinuierlich läuft.jedoch im Rahmen der Erfindung auch schrittweise betrieben werden kann. Nach einem weiteren Merkmal des erfindungsgemäßen Verfahrens werden die Moleküle auf der Aufnahmefläche — kontinuierlich — durch Ionenaustausch angesiedelt oder an reaktive chemische Gruppen gebunden.To solve this problem leads that on the porous substance, for example the gel, about its in At least one moving receiving surface is moved past the end of the molecules lying in the direction of travel, which preferably runs continuously, but can also be operated step-by-step within the scope of the invention. According to a further feature of the method according to the invention, the molecules are on the receiving surface - continuously - settled by ion exchange or bound to reactive chemical groups.
Im Rahmen der Erfindung liegt eine Vorrichtung, innerhalb deren jener poröse Stoff, beispielsweise das Gel, an der Bewegungsbahn zumindest einer etwa bandartig ausgebildeten und von einem Antrieb bewegbaren Aufnahmefläche angeordnet ist, welche als kontinuierlich laufendes oder umlaufendes Förderband gestaltet sein sollte.Within the scope of the invention is a device within which that porous substance, for example the gel, on the trajectory of at least one receiving surface which is approximately strip-like and which can be moved by a drive is arranged, which can be designed as a continuously running or revolving conveyor belt should.
Vorteilhafterweise ist das Förderband mehrschichtig ausgebildet, wobei die dem Gel od. dgl. zugekehrte Schicht zur Aufnahme der Moleküle und die andere Schicht als Träger für diese Aufnahmeschicht dient, was es beispielsweise erlaubt, mechanisch wenig strapazierfähige Aufnahmeschichten zu verwenden, welche etwa auf einem als Träger dienenden Kunststoffnetz ruhen und über dieses vom Antrieb bewegt werden.Advantageously, the conveyor belt has a multilayer design, with those facing the gel or the like Layer for the absorption of the molecules and the other layer serves as a carrier for this absorption layer, which makes it possible, for example, to use recording layers that are mechanically less durable, which rest on a plastic net serving as a carrier and are moved over this by the drive will.
Als besonders günstig haben sich Aufnahmeschichten aus Papier, Folie od. dgl. mit einer zur Ladung der Ionenmolekülfc entgegengesetzten Oberflächenladung erwiesen oder auch Aufnahmeschichten mit reaktiven chemischen Gruppen zur kovalenten oder nichtkovalenten Bindung der MoleküleRecording layers have proven to be particularly favorable made of paper, foil or the like with a surface charge opposite to the charge of the ion molecules proven or recording layers with reactive chemical groups for covalent or non-covalent bonding of the molecules
130051/0368130051/0368
ffff
P- 108 . - A - P- 108. - A -
In einer relativ kurzen und festen porösen Phase, welche hier als Gel — etwa Polyccrylamidgel, Agarosegel, Papier, Folie od. dgl. — bezeichnet und.an die eine Gleichspannung angelegt wird, bewegen sich die geladenen Moleküle oder Teilchen des Gemisches entsprechend ihrer Beweglichkeit zum Ende des Gels und werden dort an das bewegliche Band gebunden, d.h. an dessen geladene Oberfläche (Ionenaustauscher-Papier) oder an seine peaktiven chemischen Gruppen. Anschließend kann das Band nach einem v/eiteren Merkmal der Erfindung durch ein Fixier- oder ein Färbebad geführt werden; die Komponeten werden sichtbar gemacht und können registriert werden. Auch ist es erfindungsgemäß möglich, unter Bedingungen,bei denen die Wechselwirkung "Teilchen/Band" aufgehoben ist, die Komponenten einzeln VOIr1 Band zu eluieren und zu sammeln.In a relatively short and solid porous phase, which is referred to here as a gel - such as polyacrylamide gel, agarose gel, paper, foil or the like - and to which a direct voltage is applied, the charged molecules or particles of the mixture move according to their mobility End of the gel and are there bound to the moving belt, ie to its charged surface (ion exchange paper) or to its reactive chemical groups. According to a further feature of the invention, the tape can then be passed through a fixing bath or a dye bath; the components are made visible and can be registered. It is also possible according to the invention, under conditions in which the “particle / band” interaction is canceled, to elute and collect the components individually for 1 band.
Die Breite einer eluierten Komponente auf dem Band oder Förderband wird um so kleiner, je dünner das Gel ist, so daß bei analytischen Problemen die Verwendung möglichst dünner Gele angebracht scheint. Es kann aber nach einem weiteren Merkmal der Erfindung durch die Wahl eines Winkels zwischen der Elutions- oder Wanderrichtung der .Teilchen und der Bewegungsbahn des Bandes eine Konzentrierung der Komponenten erreicht werden, da hierbei das Förderband — in Förderrichtung gesehen — das Gel zuerst an einer Berührungslinie trifft, während die innerhalb des Gels von dieser Berührungslinie weiter weg liegenden Teilchen etwas später auf das bereits Moleküle tragende Band auftreffen. Dies kann bei Analysen, insbesondere bei präparativen Vorgängen, von Bedeutung sein.The width of an eluted component on the belt or conveyor belt becomes smaller, the thinner it is Gel is, so that the use of gels as thin as possible seems appropriate for analytical problems. However, according to a further feature of the invention, by choosing an angle between the elution or the direction of travel of the .Teilchen and the path of movement of the tape, a concentration of the components can be achieved, since here the conveyor belt - seen in the conveying direction - the gel first at a contact line while the particles within the gel are further away from this line of contact hit the tape, which is already carrying the molecules, a little later. This can be done with analyzes, in particular in preparative processes.
— 5 —- 5 -
130051/036S130051 / 036S
P-108 . - 5 -P-108. - 5 -
Andererseits ist es möglich, durch hohe Bandgeschwindigkeiten eine Komponente über eine große Fläche zu verteilen und damit eine mögliche Begrenzung durch Bindunaskapazität des Bandes zu vermeiden.On the other hand, it is possible to use high belt speeds to distribute a component over a large area and thus avoid a possible limitation due to the binding capacity of the tape.
Die Verwendung eines beweglichen Bandes, auf dem die Teilchen oder Molekühle beim Verlassen des Gels gebunden werden, ergibt eine zusätzliche Dimension bei der elektrophoretischen Trennung. So kann der Abstand zwischen Komponenten auf dem Band durch Änderung der Bandgeschwindigkeit erfindungsgemäß leicht variiert werden. Darüber hinaus ist die Programmierung der Bandgeschwindigkeit des Spannungsgradienten oder der Temperatur im Hinblick auf die relative Lage der Komponenten auf dem Band möglich.The use of a moving belt on which the particles or molecules are bound as they exit the gel adds an extra dimension to electrophoretic separation. So can the distance between components can be easily varied according to the invention on the belt by changing the belt speed. Furthermore is the programming of the belt speed of the tension gradient or the temperature in terms of the relative Components can be positioned on the belt.
Im Rahmen der Erfindung liegt auch die Verwendung verschiedener Werkstoffe und Materialien für das — erfindungsgemäß gegebenenfalls mehrschichtige — Förderband. So sind Nachweismethoden — etwa durch Färbung, Radioaktivität od. dgl. — nicht mehr an das Gelmaterial gebunden, wodurch eine größere Flexibilität erreicht wird.The scope of the invention also includes the use of various materials and materials for the - according to the invention possibly multilayer - conveyor belt. Detection methods - for example by coloring, Radioactivity or the like - no longer bound to the gel material, thereby achieving greater flexibility will.
Von besonderer Bedeutung für die Erfindung ist, daß die Trennung von Elektrophorese und dem Nachweis auf dem Band es ermöglicht, reaktive Gruppen kurz vorher zu aktivieren bzw. das Färben oder sonstige Analysenvorbereitungen, aber auch die Elution der gebundenen Moleküle oder Teilchen nach der Elektrophorese in einem kontinuierlichen, automatischen Arbeitsgang in verschiedenen Bädern oder Vorrichtungen durchzuführen.Of particular importance for the invention is that the separation of electrophoresis and the detection on the tape it enables reactive groups to be activated shortly beforehand, staining or other analysis preparations, but also the elution of the bound molecules or particles after electrophoresis in a continuous, to carry out an automatic operation in different baths or fixtures.
— 6 —- 6 -
130051/0383130051/0383
P-108 4V - 6 -P-108 4V - 6 -
Durch ein Waschen des Bandes nach der Analyse oder EIution kann dieses wieder verwendet werden, was eine Materialersparnis mit sich bringt.By washing the tape after analysis or elution this can be used again, which saves material.
Nachdem alle Komponenten eines Gemisches aus dem Gel entfernt sind, kann letzteres wieder mit einem neuen Gemisch beladen und in die Vorrichtung eingebracht werden; Arbeits- und Materialkostenersparnisse bei der Gelherstellung sind evident, die P.eproduzierbarkeit der Trennung wird erhöht. Die bereits erwähnte Verwendung kurzer Gele führt ebenfalls zu einer Materialersparnis und bietet darüber hinaus noch den Vorzug, daß die Zeit, welche etwa schnell wandernde Molekühle im Gel verbringen, entsprechend verkürzt werden kann, wodurch die Diffusion vermindert und die Trennschärfe erhöht wird. Die Gesamtspannung bei der Elektrophorese, die zur Erzielung eines bestimmten Spannungsgradienten benötigt wird, kann bei kurzen Gelen entsprechend verkleinert werden, was die Betriebssicherheit erhöht, die Energiekosten senkt und ein einfaches Abführen entstehender Wärme erlaubt.After all components of a mixture have been removed from the gel, the latter can be reused with a new mixture loaded and placed in the device; Labor and material cost savings in gel production are evident, the reproducibility of the separation is increased. The previously mentioned use of short gels also leads to material savings and also has the advantage that the time, which is about Spending rapidly migrating molecules in the gel, can be shortened accordingly, reducing the diffusion and the selectivity is increased. The overall tension in electrophoresis, which is required to achieve a certain voltage gradient, can be reduced accordingly for short gels, which increases operational reliability and energy costs lowers and allows a simple dissipation of emerging heat.
Eine geometrische Konzentrierung am Kontaktbereich zwischen Gel und Band, wie sie in Unteransprüchen beschrieben ist, ermöglicht es, auf dem Band Moleküle einer Zone zu konzentrieren, deren Breite geringer ist als die Stärke des Gels. Hierdurch kann eine Erhöhung der Empfindlichkeit bei der Analyse oder eine bessere Auflösung bei präparativen Trennungen erreicht werden# A geometric concentration at the contact area between gel and band, as described in the dependent claims, makes it possible to concentrate molecules of a zone on the band, the width of which is less than the thickness of the gel. This can increase the sensitivity in the analysis or a better resolution in the case of preparative separations #
Von besonderem Vorteil ist die Anbringung des Gels in einem etwa vertikalen Schacht mit einer am Förderband vorgesehenen Mündung. Diese Mündung kann so lang gewählt werden, daß mehrere Förderbänder nebeneinander anzuordnen sind, die auch gegebenenfalls mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten laufen.The application of the gel in an approximately vertical shaft with an opening provided on the conveyor belt. This mouth can be chosen as long be that several conveyor belts are to be arranged side by side, which may also be with different Running speeds.
130051/0368 " 7 '130051/0368 " 7 '
P-108 A% ~ - 7 -P-108 A% ~ - 7 -
Hierzu kann auch vorteilhaft sein, den Grundriß der Mündung beispielsweise dreieckförmig auszubilden, so daß über einem der Bänder oder an einer Seite des Bandes die Mündung von geringerer Breite ist als auf der anderen Seite bzw. dem benachbarten Band,eine Konfiguration, die vor allein bei Verwendung mehrerer Bänder nebeneinander neue Möglichkeiten erschließt. Darüber hinaus hat sich bei der Bearbeitung unterschiedlicher Gele nebeneinander eine Auflagefläche für die Gele mit mehreren zueinander parallel eingeformten Gelnuten als günstig erwiesen.For this purpose, it can also be advantageous to make the floor plan of the mouth, for example, triangular, so that over one of the bands or on one side of the band the mouth is of smaller width than on the other side or the adjacent band, a configuration that is prior to being used alone multiple belts next to each other opens up new possibilities. In addition, the Processing of different gels next to each other a support surface for the gels with several to each other parallel molded gel grooves proved to be favorable.
In der Praxis hat es sich gezeigt, daß die erfindungsgemäße Vorrichtung und das Verfahren sowohl für analytische Vorgänge als auch für präparative Trennungen eingesetzt werden kann, was das Anwendungsgebiet erheblich erweitert.In practice it has been shown that the device according to the invention and the method for both analytical Processes as well as for preparative separations can be used, which the field of application considerably expanded.
130051/Ώ368130051 / Ώ368
■ (■ (
Weitere Vorteile, Merkmale und Einzelheiten der Erfindung ergeben sich aus der nachfolgenden Beschreibung bevorzugter Ausführungsbeispiele sowie anhand der Zeichnung; diese zeigt inFurther advantages, features and details of the invention emerge from the following description in a preferred manner Embodiments and based on the drawing; this shows in
Fig. 1: den schematisierten Querschnitt durch eine erfindungsgemäße Vorrichtung;1: the schematic cross section through a device according to the invention;
Fig. 2: die Draufsicht auf ein vergrößertes Detail eines anderen Ausführungsbeispiels, geschnitten etwa nach Linie II - II in Fig. 1;Fig. 2: the plan view of an enlarged detail of another embodiment, cut approximately along line II - II in Fig. 1;
Fig. 3: den vergrößerten Querschnitt eines Teiles einer erfindungsgemäßen Vorrichtung;3: the enlarged cross section of part of a device according to the invention;
Fig. 4: ein anderes Detail einer erfindungsgemäßen Vorrichtung; 4: another detail of a device according to the invention;
Fig. 5: ein anderes Ausführungsbeispiel der Vorrichtung. Fig. 6: eine Schrägsicht auf öin Detail einer weiteren Ausführung.
In einem Puffergefäß 1 einer Vorrichtung E zur Durchführung der Elektrophorese ist in dessen Achse A eine Elektrode 2
vorgesehen, die mit einer darunter im Abstand h vorhandenen Gegenelektrode 3 ein nicht dargestelltes elektrisches Feld
erzeugt. In dessen Bereich liegt ein vertikaler Austragsschacht 4 der Breite b und der Höhe i für ein darin befindliches
Gel G.Fig. 5: another embodiment of the device. 6: an oblique view of a detail of a further embodiment.
In a buffer vessel 1 of a device E for carrying out the electrophoresis, an electrode 2 is provided in its axis A, which generates an electric field (not shown) with a counter-electrode 3 below it at a distance h. In its area there is a vertical discharge chute 4 of width b and height i for a gel G located therein.
Beidseits des nach oben hin im Gefäßboden 5 endenden Austragsschachtes 4 sind Kammern 6 für thermische Elemente zur Tempera turbeeiriflus sung vorgesehen. Die Gefäßwände 7 verlaufen in Fig. 1 parallel zu den Schachtwänden 8 und sind mit deren unteren Enden durch die querschnittlich gekrümmten Kammeraußenwände 9 verbunden.On both sides of the discharge shaft ending upwards in the vessel bottom 5 4 chambers 6 are provided for thermal elements for Tempera turbeeiriflus solution. The vessel walls 7 run in Fig. 1 parallel to the shaft walls 8 and are with their lower ends through the cross-sectionally curved chamber outer walls 9 connected.
13QÜS1/036813QÜS1 / 0368
P-108 ■ - 9 -P-108 ■ - 9 -
Unterhalb der Schachtmündung 10 ist ein Band 11 angeordnet, das an Rollen 12 in Pfeilrichtung χ horizontal die Schachtmündung 10 unterfährt. Letztere und das Band 11 sind in eine Flüssigkeit 13 getaucht, welche sich in einer Wanne 14 befindet.A belt 11 is arranged below the manhole mouth 10, which moves under the shaft mouth 10 horizontally on rollers 12 in the direction of arrow χ. The latter and the tape 11 are immersed in a liquid 13, which is in a tub 14 is located.
Das über eine Umlenkrolle 15 aus der Flüssigkeit 13 aufwärtsgeführte Band 11 wird durch eine Antriebsrolle an einer Druckrolle 17 gesteuert bewegt.The guided upward from the liquid 13 via a pulley 15 Belt 11 is moved in a controlled manner by a drive roller on a pressure roller 17.
Die aus dem Gel G austretenden Ionen werden von einer Filterschicht 20, beispielsweise einem Filterpapier, des Bandes 11 aufgenommen und über der Flüssigkeit 13 horizontal ausgetragen. Die Filterschicht 20 ruht auf einem Traggewebe 21.The ions emerging from the gel G are filtered by a filter layer 20, for example a filter paper, of the tape 11 and discharged horizontally over the liquid 13. The filter layer 20 rests a supporting fabric 21.
Während die Breite b des Austragsschachtes 4 bei der Vorrichtung E der Fig. 1 konstant ist, zeigt Fig. 2 eine Schachtmündung 10, deren Breite b1 nach einer Gefäßseite hin zunimmt und welche von mehreren Bändern 11 , 11, ,While the width b of the discharge chute 4 is constant in the device E of FIG. 1, FIG. 2 shows a chute mouth 10, the width b 1 of which increases towards one side of the vessel and which is made up of several belts 11, 11,,
abcABC
unterfahren wird.is underrun.
Das einschichtige Band 11 nach Fig. 3 ist unter einem Austragsschacht 4 mit sich zur Schachtmündung 10 hin verjüngendem Querschnitt vorgesehen.The single-layer belt 11 according to FIG. 3 is under a discharge chute 4 is provided with a cross section tapering towards the manhole mouth 10.
Fig. 4 läßt ein zum Gel G in einem Winkel w geneigtes zweischichtiges Band 11 erkennen, welches das Gel G an einer — in Förderrichtung χ vorderen — Berührungslinie 23 erreicht. Die Ionen des in Abstand b dazu stehenden Gelbereiches erreichen das Band 11 erkennbar später und zwar in Abhängigkeit von ihrer Austrittsgeschwindigkeit V1 und der Bandgeschwindigkeit v«.4 shows a two-layer band 11 inclined to the gel G at an angle w, which the gel G reaches at a contact line 23 - at the front in the conveying direction χ. The ions of the gel area at a distance b from this reach the belt 11 noticeably later, depending on their exit speed V 1 and the belt speed v «.
- 10 -- 10 -
130051/0368130051/0368
P-108 - 10 -P-108 - 10 -
Bei dem Ausführungsbeispiel der Fig. 5 trägt des Band 11 vertikal aus; es durchfährt ein Fixier- oder ein Waschbad 24 und berührt anschließend das auf einem Tunnel 25 ruhende Gel G entlang einer Vertikalfläche 26. Bei dieser Vorrichtung E1 wird das Gelgemisch über eine Schurre 27 zugeführt.In the embodiment of Figure 5, the belt 11 carries out vertically; it passes through a fixing bath or a washing bath 24 and then touches the gel G resting on a tunnel 25 along a vertical surface 26. In this device E 1 , the gel mixture is fed in via a chute 27.
Gemäß Fig. 6 können in die Auflagefläche 28 des Tunnels 25 mehrere nutartige Rinnen 29 zur Aufnahme verschiedenartiger Gele Gw G , G_ eingeformt sein.According to FIG. 6, several groove-like channels 29 for receiving different types of grooves can be placed in the support surface 28 of the tunnel 25 Gels Gw G, G_ be molded.
130051/0368130051/0368
- 4t· - 4t
LeerseiteBlank page
Claims (30)
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE3022527A DE3022527C2 (en) | 1980-06-16 | 1980-06-16 | Method for electrophoretic separation and device therefor |
US06/273,116 US4631120A (en) | 1980-06-16 | 1981-06-12 | Method in which elemental particles electrophoretically migrate through a gel onto a collecting surface of a moving belt |
US06/779,689 US4631122A (en) | 1980-06-16 | 1985-09-24 | Electrophoretic apparatus employing a collecting belt moving in contact with a gel |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE3022527A DE3022527C2 (en) | 1980-06-16 | 1980-06-16 | Method for electrophoretic separation and device therefor |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3022527A1 true DE3022527A1 (en) | 1981-12-17 |
DE3022527C2 DE3022527C2 (en) | 1985-01-31 |
Family
ID=6104742
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE3022527A Expired DE3022527C2 (en) | 1980-06-16 | 1980-06-16 | Method for electrophoretic separation and device therefor |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US4631120A (en) |
DE (1) | DE3022527C2 (en) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4631122A (en) * | 1980-06-16 | 1986-12-23 | Fritz Pohl | Electrophoretic apparatus employing a collecting belt moving in contact with a gel |
US4729947A (en) * | 1984-03-29 | 1988-03-08 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | DNA sequencing |
EP0477541A2 (en) * | 1990-08-30 | 1992-04-01 | Waters Investments Limited | Apparatus for effecting capillary electrophoresis fraction collection on a membrane |
DE102005053262A1 (en) * | 2005-11-08 | 2007-05-10 | Weinert, Hilmar, Dipl.-Ing. | Strip-form material with porous coating, useful e.g. as catalyst or in electrophoresis, is obtained by evaporating mixed layer of insoluble and soluble materials onto substrate and dissolving out soluble material |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH655672B (en) * | 1984-02-22 | 1986-05-15 | ||
US4872965A (en) * | 1988-02-10 | 1989-10-10 | Pankow Mark L | Contact lens cleaning apparatus |
CA2012379C (en) * | 1989-04-24 | 2000-01-25 | Gary W. Slater | Processes for the preparation and separation of macromolecules |
US5120414A (en) * | 1990-08-30 | 1992-06-09 | Millipore Corporation | Method and apparatus for effecting capillary sample injection into electrophoresis apparatus |
JPH04213056A (en) * | 1990-12-06 | 1992-08-04 | Sumitomo Electric Ind Ltd | Method and apparatus for material fractionating |
US5439572A (en) * | 1991-12-02 | 1995-08-08 | Isoclear, Inc. | Lens protective encasement packet |
US5368708A (en) * | 1991-12-02 | 1994-11-29 | Isoclear, Inc. | Lens decontamination system |
US5234559A (en) * | 1991-12-31 | 1993-08-10 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Apparatus for direct blotting and automated electrophoresis, transfer and detection and processes utilizing the apparatus thereof |
US5344534A (en) * | 1993-03-05 | 1994-09-06 | Danziger Robert S | Gel electrophoresis measurement of dynamic reaction product by continuous sampling |
US5474663A (en) * | 1993-08-27 | 1995-12-12 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Bowed framed membrane, processes for the preparation thereof, and uses therefor |
US5433837A (en) * | 1993-08-27 | 1995-07-18 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Gel cassette for enhanced electrophoretic separation and processes for the preparation thereof |
US5514256A (en) * | 1994-10-28 | 1996-05-07 | Battelle Memorial Institute | Apparatus for improved DNA sequencing |
US5580434A (en) * | 1996-02-29 | 1996-12-03 | Hewlett-Packard Company | Interface apparatus for capillary electrophoresis to a matrix-assisted-laser-desorption-ionization mass spectrometer |
US6248239B1 (en) * | 1996-07-08 | 2001-06-19 | The Perkin-Elmer Corporation | Effluent collection apparatus and method |
US5916429A (en) * | 1997-08-01 | 1999-06-29 | Qualicon Inc. | Direct blot electrophoresis apparatus and method |
US6758953B2 (en) | 1999-10-28 | 2004-07-06 | Nathan A. Thomas | Multistage electrophoresis apparatus and method of use for the separation and purification of cells, particles and solutes |
WO2013038474A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | シャープ株式会社 | Sample separation/adsorption appliance |
JPWO2015151768A1 (en) * | 2014-03-31 | 2017-04-13 | シャープ株式会社 | Separation medium cassette for sample separation and adsorption and analyzer for sample separation and adsorption |
US10126264B2 (en) | 2014-07-14 | 2018-11-13 | Li-Cor, Inc. | Analyte separator with electrohydrodynamic Taylor cone jet blotter |
JP5952379B2 (en) | 2014-11-20 | 2016-07-13 | シャープ株式会社 | Biomolecule analyzer |
JP6030681B2 (en) * | 2015-02-24 | 2016-11-24 | シャープ株式会社 | Biomolecule analyzer |
JP6025813B2 (en) * | 2014-12-17 | 2016-11-16 | シャープ株式会社 | Biomolecule analyzer |
US10401322B2 (en) * | 2014-12-17 | 2019-09-03 | Merck Ltd. | Biomolecule analyzer |
JP6030691B1 (en) * | 2015-04-10 | 2016-11-24 | シャープ株式会社 | Sample separation transfer apparatus and sample analysis method |
EP3411896A4 (en) | 2016-02-01 | 2019-09-04 | Li-Cor, Inc. | Capillary electrophoresis inkjet dispensing |
WO2017150259A1 (en) * | 2016-03-04 | 2017-09-08 | シャープライフサイエンス株式会社 | Sample separating implement and sample analyzing device |
JP6461046B2 (en) * | 2016-06-07 | 2019-01-30 | シャープライフサイエンス株式会社 | Transfer membrane holding device and separation transfer device |
JP6353869B2 (en) * | 2016-06-07 | 2018-07-04 | シャープライフサイエンス株式会社 | Biomolecule analyzer |
AU2017311105A1 (en) | 2016-08-08 | 2019-02-21 | Li-Cor, Inc. | Multi-sheath flow and on-chip terminating electrode for microfluidic direct-blotting |
US11241689B2 (en) | 2016-08-08 | 2022-02-08 | Li-Cor, Inc. | Microchip electrophoresis inkjet dispensing |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2254257A1 (en) * | 1971-11-08 | 1973-05-10 | Univ California | ELECTROPHORESIS DEVICE WITH FLOWING TAPE |
US3896021A (en) * | 1974-10-22 | 1975-07-22 | Univ Missouri | Automated electrophoresis instrument |
DE2916756A1 (en) * | 1978-04-27 | 1979-10-31 | Olympus Optical Co | ELECTROPHORIC DEVICE |
DE2840614A1 (en) * | 1978-09-18 | 1980-03-27 | Lammel Bernd Dr | METHOD AND DEVICE FOR CONTINUOUSLY PREPARATIVE SEPARATION OF MOLECULES AND THE LIKE PARTICLES |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3767560A (en) * | 1966-09-13 | 1973-10-23 | F Elevitch | Method and apparatus for forming electrophoresis apparatus and the like |
US3533933A (en) * | 1967-03-31 | 1970-10-13 | Hannig Kurt | Process and device for the isolation of fractions of a substance mixture electrophoretically separated in a carrier gel |
US3497441A (en) * | 1967-05-16 | 1970-02-24 | Joseph Paksi | Electrophoresis system and method |
DE2221242C3 (en) * | 1972-04-29 | 1974-09-26 | Stephan 8520 Erlangen Nees | Apparatus for preparative electrophoresis and procedures for carrying it out with this apparatus |
US3764513A (en) * | 1972-05-04 | 1973-10-09 | Marine Colloids Inc | Electrophoresis chamber |
NL182822C (en) * | 1976-05-18 | 1988-05-16 | Roskam Willem Gerrit | PREPARATIVE ELECTROFORESE DEVICE. |
US4059501A (en) * | 1976-08-16 | 1977-11-22 | Beckman Instruments, Inc. | Automated electrophoresis unit |
DE3022527C2 (en) * | 1980-06-16 | 1985-01-31 | Fritz Prof. Dr. 7750 Konstanz Pohl | Method for electrophoretic separation and device therefor |
-
1980
- 1980-06-16 DE DE3022527A patent/DE3022527C2/en not_active Expired
-
1981
- 1981-06-12 US US06/273,116 patent/US4631120A/en not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-09-24 US US06/779,689 patent/US4631122A/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2254257A1 (en) * | 1971-11-08 | 1973-05-10 | Univ California | ELECTROPHORESIS DEVICE WITH FLOWING TAPE |
US3896021A (en) * | 1974-10-22 | 1975-07-22 | Univ Missouri | Automated electrophoresis instrument |
DE2916756A1 (en) * | 1978-04-27 | 1979-10-31 | Olympus Optical Co | ELECTROPHORIC DEVICE |
DE2840614A1 (en) * | 1978-09-18 | 1980-03-27 | Lammel Bernd Dr | METHOD AND DEVICE FOR CONTINUOUSLY PREPARATIVE SEPARATION OF MOLECULES AND THE LIKE PARTICLES |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4631122A (en) * | 1980-06-16 | 1986-12-23 | Fritz Pohl | Electrophoretic apparatus employing a collecting belt moving in contact with a gel |
US4631120A (en) * | 1980-06-16 | 1986-12-23 | Fritz Pohl | Method in which elemental particles electrophoretically migrate through a gel onto a collecting surface of a moving belt |
US4729947A (en) * | 1984-03-29 | 1988-03-08 | The Board Of Regents Of The University Of Nebraska | DNA sequencing |
EP0477541A2 (en) * | 1990-08-30 | 1992-04-01 | Waters Investments Limited | Apparatus for effecting capillary electrophoresis fraction collection on a membrane |
EP0477541A3 (en) * | 1990-08-30 | 1994-07-20 | Millipore Corp | Method and apparatus for effecting capillary electrophoresis fraction collection on a membrane |
DE102005053262A1 (en) * | 2005-11-08 | 2007-05-10 | Weinert, Hilmar, Dipl.-Ing. | Strip-form material with porous coating, useful e.g. as catalyst or in electrophoresis, is obtained by evaporating mixed layer of insoluble and soluble materials onto substrate and dissolving out soluble material |
DE102005053262B4 (en) * | 2005-11-08 | 2008-09-04 | Weinert, Hilmar, Dipl.-Ing. | Carrier with porous vacuum coating and process for its preparation |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4631122A (en) | 1986-12-23 |
DE3022527C2 (en) | 1985-01-31 |
US4631120A (en) | 1986-12-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3022527C2 (en) | Method for electrophoretic separation and device therefor | |
DE2454105C3 (en) | ||
DE4230837A1 (en) | MULTI-POSITION PROCESS FOR ELECTROPHORESIS AND CHROMATOGRAPHY IN CAPILLARY | |
EP1370858B1 (en) | Electrophoresis device and the use thereof | |
EP0968417B1 (en) | Method for carrier-free deflection electrophoresis | |
DE2926521A1 (en) | METHOD AND DEVICE FOR INCREASING THE THROUGHPUT OF A CHROMATOGRAPHY SYSTEM | |
DE2142628A1 (en) | Electrophoresis device | |
DE102008020428B3 (en) | Apparatus and method and gel system for analytical and preparative electrophoresis | |
DE69535533T2 (en) | YELLOW ASSEMBLY AND METHOD OF USE THEREOF | |
DE69816661T2 (en) | DEVICE FOR ELECTROPHORESIS | |
DE69909148T2 (en) | Separation of liquids selected title differs | |
DE1598110A1 (en) | Device for electrophoresis | |
DE1243647B (en) | Device for vertical gel electrophoresis | |
DE3726403A1 (en) | DEVICE FOR ELECTROPHORESIS | |
DE7304459U (en) | DEVICE FOR ELECTROPHORESIS | |
DE3629394A1 (en) | METHOD AND DEVICE FOR CHROMATOGRAPHIC AND / OR ELECTROPHORETIC EXAMINATIONS OF THE COMPOSITION OF A SUBSTANCE SAMPLE IN A PLANAR SYSTEM WITH IN PARTICULAR CURRENT FLOW OF A CARRIER AGENT | |
DE2044702C3 (en) | Method for expelling the components of a sample mixture from a storage column | |
DE69839186T2 (en) | APPARATUS FOR CAPILLARY ELECTROPHORESIS | |
DE69632974T2 (en) | DNA base sequencer | |
DE3742292C1 (en) | Method and device for two-phase electrophoresis | |
DE2056129B2 (en) | PREPARATIVE ELECTROPHORISM | |
DE2056882A1 (en) | Humid chamber system for electrophoresis | |
DE2402404B2 (en) | Device for the continuous application of a melt on threads | |
DE1154074B (en) | Process for the separation of liquid mixtures in an electric field | |
DE2013844C3 (en) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
D2 | Grant after examination | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
8327 | Change in the person/name/address of the patent owner |
Owner name: POHL, PETER, 78464 KONSTANZ, DE POHL, THOMAS, 7846 |
|
8381 | Inventor (new situation) |
Free format text: POHL, FRITZ, PROF. DR., 78464 KONSTANZ, (VERSTORBEN), DE |