DE29515990U1 - Lid for closing vessels - Google Patents

Lid for closing vessels

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Description

BOEHRINGER MANNHEIM GMBH 4136/OHZDEBOEHRINGER MANNHEIM GMBH 4136/OHZDE

Deckel zum Verschluß von GefäßenLids for closing containers

Gegenstand der Erfindung ist ein Deckel zum Verschluß einer Öffnung eines Gefäßes.The invention relates to a lid for closing an opening of a vessel.

Deckel werden üblicherweise zum Verschluß von Gefäßen verwendet, um ein Eindringen von Einflüssen aus der Umgebung in das Gefäß zu reduzieren bzw. das Austreten des Inhalts eines Gefäßes in die Umgebung zu vermeiden. Insbesondere, wenn das Gefäß zur Aufnahme einer Probe gedacht ist, deren Bestandteile später weiter verarbeitet oder analysiert werden sollen, ist in vielen Fällen ein Deckel obligatorisch. Dies gilt in erhöhtem Maße auf dem Gebiet der Analytik im Gesundheitswesen, der Lebensmittelanalytik, der Umweltanalytik und der Molekularbiologie. Insbesondere bei besonders niedrig konzentrierten Analyten und Analyten, die eine hohe Ähnlichkeit mit anderen Analyten haben, wirken sich Verschmutzungen der Proben aus der Umgebung nachhaltig auf das Analyseergebnis aus. In besonderem Maße betroffen ist hier die Nukleinsäureanalytik. Die Vermeidung von Kontaminationen sowohl in ihrer Entstehung (aktive Vermeidung) als auch in ihrem Eintrag in die Probe (passive Vermeidung) hat sich als ein zentrales Erfordernis für die Nukleinsäurediagnostik herausgestellt.Lids are usually used to close vessels in order to reduce the penetration of environmental influences into the vessel or to prevent the contents of a vessel from escaping into the environment. In particular, if the vessel is intended to hold a sample whose components are to be further processed or analyzed later, a lid is mandatory in many cases. This applies to a greater extent in the field of analytics in the healthcare sector, food analysis, environmental analysis and molecular biology. In particular, in the case of particularly low-concentration analytes and analytes that are very similar to other analytes, contamination of the samples from the environment has a lasting effect on the analysis result. Nucleic acid analysis is particularly affected here. Avoiding contamination, both in its formation (active avoidance) and in its entry into the sample (passive avoidance), has proven to be a key requirement for nucleic acid diagnostics.

Nukleinsäurediagnostische Tests werden derzeit insbesondere in Gefäßen ausgeführt, die entweder auf der generellen Konstruktion von Eppendorf-Gefäßen (Einzelgefäße) beruhen oder aber auf der Form von Mikrotiterplatten (Mehrfachvertiefungen) aufbauen. Sie sind im allgemeinen rund und mit Hilfe eines Deckels verschließbar. Die bisher vorgeschlagenen Deckel für solche Gefäße sind entweder fest an den Probengefaßkörper gebunden oder mit Deckeln für benachbarte Gefäße fest verbunden. Dies erleichtert die manuelle Handhabbarkeit der Deckel für Vorgänge beim Öffnen und Schließen des Gefäßes. Man muß sich hierbei auch vor Augen führen, daß die Gefäße wegen der geringen zur Verfügung stehenden Probenmengen recht klein sind. Dies gilt insbesondere für Formate, bei denen eine Vielzahl von Reaktionsgefäßen nebeneinander auf kleinstem Raum untergebracht sind, wie beim 96 well Mikrotiterplattenformat. Die bisher vorgeschlagenen Deckelkonstruktionen waren somit nicht oder nur schwer automatengängig, d. h. ein Öffnen und Schließen mit Hilfe von Geräten war schwierig, wenn nicht sogar ausgeschlossen.Nucleic acid diagnostic tests are currently carried out in particular in vessels that are based either on the general design of Eppendorf vessels (single vessels) or on the shape of microtiter plates (multiple wells). They are generally round and can be closed with a lid. The lids proposed so far for such vessels are either firmly attached to the sample vessel body or firmly connected to lids for neighboring vessels. This makes it easier to handle the lids manually when opening and closing the vessel. It must also be borne in mind that the vessels are quite small due to the small sample quantities available. This is particularly true for formats in which a large number of reaction vessels are housed next to one another in a very small space, such as the 96-well microtiter plate format. The lid designs proposed so far were therefore not or only with difficulty suitable for automated use, i.e. opening and closing using devices was difficult, if not impossible.

Gegenstand der Erfindung ist nun ein Deckel zum Verschluß einer Öffnung eines Probengefäßes enthaltend ein Bauelement, das der zu verschließenden Öffnung des Probengefäßes angepaßt ist, und ein Bauelement zum Ergreifen eines in das Probengefaß einfuhrbaren Formkörpers.The subject matter of the invention is now a lid for closing an opening of a sample vessel containing a component which is adapted to the opening of the sample vessel to be closed, and a component for gripping a shaped body which can be inserted into the sample vessel.

Unabhängig von dem Vorhandensein des Bauelements zum Ergreifen des Formkörpers wurde gefunden, daß das Ergreifen von Deckeln auf besonders kleinen Raum besonders günstig durch Vorsehen eines sich im wesentlichen senkrecht zu der Öflhung des Gefäßes erstreckenden Bauteils erreicht werden kann. Dieses Bauteil ragt bevorzugt nicht über die seitliche Außenwand des Gefäßes hinaus. Die bisher verwendeten Deckel besitzen horizontal (seitlich) weit über die Außenwände des Gefäßes hinausragende Bauteile.Regardless of the presence of the component for gripping the molded body, it was found that gripping lids in a particularly small space can be achieved particularly favorably by providing a component that extends essentially perpendicular to the opening of the vessel. This component preferably does not protrude beyond the lateral outer wall of the vessel. The lids used to date have components that protrude horizontally (laterally) far beyond the outer walls of the vessel.

Bevorzugt handelt es sich bei dem Deckel um einen Einzelverschluß, der reversibel vollständig von dem Gefäß getrennt werden kann.Preferably, the lid is a single closure that can be completely and reversibly separated from the vessel.

Gefäße, die durch den erfindungsgemäßen Deckel verschlossen werden können, sind ihrer Art nach nur durch das Vorhandensein einer verschließbaren Öffnung (AlO) beschränkt. Diese Öffnung ist zweckmäßigerweise an einer gut zugänglichen Stelle positioniert.Vessels that can be closed by the lid according to the invention are limited in their nature only by the presence of a closable opening (AlO). This opening is expediently positioned in an easily accessible location.

Die erfindungsgemäßen Vorteile des erfindungsgemäßen Deckels werden insbesondere in Gefäßen zum Tragen kommen, die in der Analytik von Inhaltsstoffen in Proben, wie z. B. Körperflüssigkeiten, verwendet werden. Daher ist das zu verschließende Gefäß bevorzugt ein Probengefäß A.The advantages of the lid according to the invention will be particularly evident in vessels that are used in the analysis of ingredients in samples, such as body fluids. Therefore, the vessel to be closed is preferably a sample vessel A.

Probengefäße (A) im Sinne der Erfindung sind Gefäße, in denen Proben, insbesondere in flüssiger Form, aber auch in an eine feste Matrix gebundene Form, aufbewahrt werden können, jedoch auch Gefäße, in denen Proben in originaler oder bereits aufgereinigter Form, bearbeitet werden können. Sie haben mindestens eine Öffnung (AlO), können jedoch auch weitere Öffnungen aufweisen. Eine weitere Öffnung kann beispielsweise eine Auslaßöffhung (Al 1) sein. Die Auslaßöffhung (Al 1) kann bevorzugt ebenfalls verschlossen werden. Bei der Öffnung (AlO) handelt es sich bevorzugt um eine Öffnung, durch welche eine Probe in das Gefäß eingeführt werden kann.Sample vessels (A) within the meaning of the invention are vessels in which samples can be stored, in particular in liquid form, but also in a form bound to a solid matrix, but also vessels in which samples can be processed in their original or already purified form. They have at least one opening (AlO), but can also have further openings. A further opening can be, for example, an outlet opening (Al 1). The outlet opening (Al 1) can preferably also be closed. The opening (AlO) is preferably an opening through which a sample can be introduced into the vessel.

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Probengefäße im Sinne der Erfindung können praktisch jede äußere Form aufweisen. Besonders bevorzugt sind jedoch Probengefäße mit hohlzylindrischer Gestalt, wie sie z. B. in Mikrotiterplatten anzutrefFen sind. Bevorzugte Probengefäße haben eine im wesentlichen zylindrische Form mit einer Gesamtlänge von zwischen 100 und 10 mm, besonders bevorzugt von ca. 50 mm, einem Außendurchmesser von zwischen 20 und 5 ram, besonders bevorzugt von ca. 9 mm und einem Innendurchmesser von 5-1 mm weniger als der Außendurchmesser, besonders bevorzugt von ca. 7 mm. Die Öffnung (AlO), welche durch den erfindungsgemäßen Deckel verschlossen werden kann, befindet sich bevorzugt an einem Ende dieses Hohlzylinders, besonders bevorzugt am oberen Ende.Sample vessels in the sense of the invention can have practically any external shape. However, sample vessels with a hollow cylindrical shape, such as those found in microtiter plates, are particularly preferred. Preferred sample vessels have an essentially cylindrical shape with a total length of between 100 and 10 mm, particularly preferably of about 50 mm, an external diameter of between 20 and 5 ram, particularly preferably of about 9 mm and an internal diameter of 5-1 mm less than the external diameter, particularly preferably of about 7 mm. The opening (AlO), which can be closed by the lid according to the invention, is preferably located at one end of this hollow cylinder, particularly preferably at the upper end.

Das Bauelement (BIO) ist, um einen möglichst dichten Verschluß des Gefäßes zu gewährleisten, so gestaltet, daß es entweder den Teil des Gefäßes, der die Öffnung umgibt (z. B. den Rand), von außen eng umfaßt, oder aber, im bevorzugten Falle, den die Öffnung (AlO) im Innern des Gefäßes umgebenden Teil des Gefäßes schlüssig angepaßt ist. Bauelement (BIO) ist hierzu beispielsweise bevorzugt ein in das Probengefäß hineinragender umlaufender Steg, d. h. ein Ring, ausgehend von dem horizontalen, die Öffnung überdeckenden Teil (B 17) des Deckels. An diesem Steg können außerdem Dichtlippen (B 16) vorgesehen sein, die eine weitere Verbesserung der Abdichtung zum Probengefäß hin gewährleisten. Bevorzugt wird die Dimensionierung des Bauelements (BIO) so gewählt, daß der Deckel nach einer gewünschten Zeit wieder von dem Probengefaß zu entfernen ist, ohne daß das Probengefäß oder der Deckel zerstört werden. Der Deckel weist am Teil, das aus dem Gefäß herausschaut, bevorzugt einen umlaufenden Rand (Überhang B19) auf, der als Anschlag für das Einschieben des Deckels in das Gefäß und als zusätzlicher Kontaminationsschutz dienen kann.In order to ensure that the vessel is sealed as tightly as possible, the component (BIO) is designed so that it either tightly encloses the part of the vessel that surrounds the opening (e.g. the edge) from the outside, or, in the preferred case, is tightly fitted to the part of the vessel that surrounds the opening (AlO) inside the vessel. For this purpose, the component (BIO) is preferably a circumferential web that protrudes into the sample vessel, i.e. a ring, starting from the horizontal part (B 17) of the lid that covers the opening. Sealing lips (B 16) can also be provided on this web, which ensure a further improvement in the seal towards the sample vessel. The dimensions of the component (BIO) are preferably selected so that the lid can be removed from the sample vessel again after a desired time without the sample vessel or the lid being destroyed. The lid preferably has a peripheral edge (overhang B19) on the part that protrudes from the vessel, which can serve as a stop for inserting the lid into the vessel and as additional protection against contamination.

Das Bauelement (Bl 1) befindet sich bevorzugt innerhalb des vom Bauelement (BIO) umgebenen Raumes. Wie das Bauelement (B 10) ist auch das Bauelement (B 11) bevorzugt so gestaltet, daß es an die innere Kontur (C 16) des Formkörpers (C) so angepaßt ist, daß der Formkörper nach Aufdrücken des Bauelements auf eine Öffnung des Formkörpers von selbst auf dem Bauelement verbleibt. Auch hier handelt es sich bevorzugt um einen ringförmig umlaufenden Steg, der von innen oder außen an den die Öffnung des Formkörpers umgebenden Teil des Formkörpers schlüssig angepaßt ist. Bevorzugt ist die äußere Fläche des umlaufenden Stegs leicht konisch ausgebildet, so daß die Konizität das Ergreifen undThe component (B1 1) is preferably located within the space surrounded by the component (BIO). Like the component (B 10), the component (B 11) is preferably designed in such a way that it is adapted to the inner contour (C 16) of the molded body (C) in such a way that the molded body remains on the component after the component is pressed onto an opening in the molded body. Here, too, it is preferably a ring-shaped, circumferential web that is tightly adapted from the inside or outside to the part of the molded body surrounding the opening of the molded body. The outer surface of the circumferential web is preferably slightly conical, so that the conicity facilitates gripping and

Festhalten des Formkörpers bewirkt. Die Öffnung des Formkörpers wird daher ebenfalls durch den erfindungsgemäßen Deckel verschlossen.The opening of the molded body is therefore also closed by the lid according to the invention.

Eine Erkenntnis der Erfindung ist, daß gerade das Öffnen und Verschließen von Probengefäßen mit einer besonderen Gefahr für den Ein- und Austrag von Kontaminationen behaftet ist. Außerdem hat es sich als nachteilig erwiesen, daß bei Vorgängen, welche die Entfernung von Flüssigkeiten oder Gasen aus dem Probengefäß mit sich bringen, der Deckel entfernt werden muß. Während dieser Zeit ist die Kontaminationsgefahr besonders hoch. Ein Vorteil einer besonderen Ausfuhrungsform des erfindungsgemäßen Deckels ist, daß der Deckel auch während der Vorgänge, die einen Gasaustausch mit der Umgebung mit sich bringen, z. B. Absaug- und Abkühl-ZHeizvorgängen, auf dem Probengefäß verbleiben kann. Hierzu sind in dem Deckel, insbesondere an seiner Oberseite Luftdurchtrittsöffhungen (B 13) vorgesehen. Es hat sich als besonders zweckmäßig erwiesen, diese Belüftungskanäle durch ein Filterelement (B 14) im Innenraum des Deckels gegen den Innenraum des Probengefäßes bzw. den Innenraum des Formkörpers abzudecken. Diese Filter sind bevorzugt aus einem Kunststoff-Sintermaterial aus Polyethylen, Polypropylen oder Polyethersulfon bzw. PoIysulfön aufgebaut. Solche Filter sind beispielsweise als Sterilfilter erhältlich. Der Filter dient insbesondere dazu, eventuell bei Be- und Entlüftungsvorgängen während eines Probenbearbeitungsprozesses, z. B. eines Probenvorbereitungsprozesses, (beim Heizen, Mischen und Absaugen sowie Eindrücken von Flüssigkeiten in den Innenraum des Formkörpers) entstehende Aerosole am Austritt in die Umgebung zu hindern. Gleichzeitig wird das Einschleppen von unerwünschten Aerosolen/Bestandteilen der Umgebungsluft in das Probengefäß verhindert. Der Einbau des Filters in den Deckel wird besonders zweckmäßig so realisiert, daß die Querschnitte der Belüftungskanäle nur maximal 10 % der gesamten Nutzfläche des Filters beanspruchen. Besonders bevorzugt liegt das Filtermaterial nicht vollflächig auf dem die Öffnung überdeckenden Teil (B 17) des Deckels auf, sodaß zwischen der die Öffnungen (B 13) aufweisenden Fläche des Deckels und der Oberseite (Nutzfläche) des Filters ein Zwischenraum verbleibt. Hierzu können beispielsweise Abstandshalter (B 18) an der Fläche befertigt sein. Hierdurch kommt es nicht zu einem zu großen Druckverlust und dennoch kann die gesamte Fläche des Sintermaterials zur Durchströmung genutzt werden.One finding of the invention is that the opening and closing of sample vessels is particularly dangerous for the introduction and removal of contamination. It has also proven to be disadvantageous that the lid must be removed during processes that involve the removal of liquids or gases from the sample vessel. During this time, the risk of contamination is particularly high. An advantage of a special embodiment of the lid according to the invention is that the lid can remain on the sample vessel even during processes that involve gas exchange with the environment, e.g. suction and cooling/heating processes. For this purpose, air passage openings (B 13) are provided in the lid, in particular on its upper side. It has proven to be particularly useful to cover these ventilation channels with a filter element (B 14) in the interior of the lid from the interior of the sample vessel or the interior of the molded body. These filters are preferably made of a plastic sintered material made of polyethylene, polypropylene or polyethersulfone or polysulfide. Such filters are available, for example, as sterile filters. The filter is used in particular to prevent any aerosols that may arise during ventilation and deaeration processes during a sample processing process, e.g. a sample preparation process (during heating, mixing and suctioning as well as forcing liquids into the interior of the molded body) from escaping into the environment. At the same time, the introduction of undesirable aerosols/components of the ambient air into the sample vessel is prevented. The installation of the filter in the lid is particularly practical in such a way that the cross-sections of the ventilation channels only take up a maximum of 10% of the total usable area of the filter. It is particularly preferred that the filter material does not lie completely on the part of the lid covering the opening (B 17), so that a gap remains between the surface of the lid that has the openings (B 13) and the top (usable surface) of the filter. For this purpose, spacers (B 18) can be made on the surface, for example. This does not lead to too great a pressure loss and the entire surface of the sintered material can still be used for flow.

In einer zweiten Ausfuhrungsform ergreift und verschließt der Deckel als Formkörper (C) einen Stempel (E), der ebenfalls einen Innenraum (E12) hat. Hierbei sind, da bei Gebrauch des Stempels (E) keine Heiz-ZBekühlvorgänge/Absaugvorgänge durchgeführt werden, keineIn a second embodiment, the lid as a molded body (C) grips and closes a stamp (E), which also has an interior (E12). Since no heating/cooling/extraction processes are carried out when using the stamp (E), no

durch Aerosolfilter verschlossenen Luftdurchöffhungen erforderlich. Somit kann das Bauteil (Bl 1) auch von außen über die Entnahmeöfihung (E14) des Stempels schließen. Der Stempel (E) ist für ein Verfahren zur Isolierung von Nukleinsäuren aus einer porösen, komprimierbaren Matrix so konstruiert, daß er in ein Gefäß hineinragt, welches die poröse, komprimierbare Matrix enthält. Das Gefäß wird in diesem Fall Elutionsgefäß (D) genannt. Die Matrix ist bevorzugt Teil eines Formkörpers (C), in dessen Innenraum der Stempel hineinragt. Durch Druck auf den Deckel (B) wird der Stempel gegen die Matrix gepreßt, und die Flüssigkeit mit den darin befindlichen Nukleinsäuren dringen in den Innenraum des Stempels ein.air openings closed by aerosol filters. The component (Bl 1) can therefore also be closed from the outside via the removal opening (E14) of the stamp. The stamp (E) is designed for a process for isolating nucleic acids from a porous, compressible matrix in such a way that it protrudes into a vessel containing the porous, compressible matrix. In this case, the vessel is called an elution vessel (D). The matrix is preferably part of a molded body (C), into the interior of which the stamp protrudes. By pressing on the lid (B), the stamp is pressed against the matrix, and the liquid with the nucleic acids contained therein penetrates into the interior of the stamp.

Der Verschluß und das Ergreifen der Gefäße mit dem erfindungsgemäßen Deckel ist bevorzugt reversibel. Sofern zwei verschiedene Gefäße gleichzeitig verschlossen werden sollen, sind die Kraftschlüsse zu jedem Gefäß bevorzugt verschieden. In der oben genannten ersten Ausfuhrungsform ist der Kraftschluß zu dem Formkörper (C) größer als zu dem Probengefäß (A). In der zweiten Ausfuhrungsform ist der Kraftschluß zu dem Elutionsgefäß (D) und dem Stempel (E) so gering, daß sich der Deckel von beiden löst, bevor sich der Stempel aus dem Elutionsgefäß löst.The closure and gripping of the vessels with the lid according to the invention is preferably reversible. If two different vessels are to be closed at the same time, the frictional connections to each vessel are preferably different. In the above-mentioned first embodiment, the frictional connection to the molded body (C) is greater than to the sample vessel (A). In the second embodiment, the frictional connection to the elution vessel (D) and the stamp (E) is so small that the lid detaches from both before the stamp detaches from the elution vessel.

In einer besonders bevorzugten Ausfuhrungsform befindet sich an dem Teil eines Deckels, welcher dem Probengefäß abgewandt ist (Außenseite) ein sich im wesentlichen senkrecht zu der Verschlußöffiiung erstreckendes Bauteil (B 12) zum Ergreifen des Deckels. Der Begriff "im wesentlichen senkrecht" soll im Sinne der Erfindung bedeuten, daß das Bauteil (B 12) eine Symmetrieachse oder Ebene aufweist, die zu einer über die Verschlußöffiiung gedachten Ebene einen Winkel zwischen 85 und 90 ° aufweist. Besonders bevorzugt ragt das Bauteil exakt senkrecht (mit Ausnahme der Fertigungstoleranzen) von der gedachten Ebene weg. Das Bauteil (B 12) kann hierbei im verschlossenen Zustand des Gefäßes (A) außerhalb des zu verschließenden Gefäßes liegen, bevorzugt ist es aber innerhalb des zu verschließenden Gefäßes positioniert. Bevorzugt ist das Bauteil rotationssymmetrisch, insbesondere zylindrisch, wobei die Länge des Zylinders größer ist als sein Durchmesser. Bevorzugt wird der Durchmesser dieses Zylinders möglichst klein gewählt. Insbesondere ist der Durchmesser des Zylinders kleiner als die Hälfte des Durchmessers des die Öffnung (AlO) abdeckenden Teils des Deckels. Dies gewährleistet die sichere Aufnahme des Deckels über das Bauelement (B 12) durch eine Greifzange in Form eines sogenannten Deckelhändlers. Diese Greifzange kann z. B. die Konstruktion der üblicherweise verwendeten DruckbleistifteIn a particularly preferred embodiment, a component (B 12) extending essentially perpendicular to the closure opening for gripping the lid is located on the part of a lid facing away from the sample vessel (outside). The term "essentially perpendicular" in the sense of the invention is intended to mean that the component (B 12) has an axis of symmetry or plane that has an angle of between 85 and 90 ° to an imaginary plane above the closure opening. The component particularly preferably protrudes exactly perpendicularly (with the exception of manufacturing tolerances) from the imaginary plane. The component (B 12) can lie outside the vessel to be closed when the vessel (A) is closed, but it is preferably positioned inside the vessel to be closed. The component is preferably rotationally symmetrical, in particular cylindrical, with the length of the cylinder being greater than its diameter. The diameter of this cylinder is preferably chosen to be as small as possible. In particular, the diameter of the cylinder is smaller than half the diameter of the part of the lid covering the opening (AlO). This ensures that the lid is securely held over the component (B 12) by a gripping pliers in the form of a so-called lid handler. This gripping pliers can, for example, replace the design of the mechanical pencils commonly used

haben, bei denen sich die Zange bei Druck auf einen hierfür vorgesehenen mechanischen Teil zur Aufnahme des Bauteils öffnet und sich bei Reduzierung des Druckes von außen um den Zylinder schließt. Es hat sich erwiesen, daß diese Art des Ergreifens von Bauelementen für die Verwendung des Deckels zum Verschluß von Probengefaßen besonders einfach ist und sich sogar auf kleinstem Raum, wie er in 96 well Mkrotiterplattenformaten gegeben ist, realisieren läßt. Für die zuverlässige Funktion (Festhalten, Positionieren) ist es besonders zweckmäßig, wenn das Bauelement (B 12) eine vergleichsweise lange Führung in der Greifzange aufweist. Das Bauelement (B 12) kann Rillen aufweisen, welche ein Abrutschen der Greifzange an dem Bauteil (B 12) verhindert und eine zuverlässige Haltefunktion gewährleistet.in which the tongs open when pressure is applied to a mechanical part provided for this purpose to pick up the component and close around the cylinder when the pressure is reduced from the outside. It has been proven that this type of gripping of components for using the lid to close sample vessels is particularly simple and can even be implemented in the smallest of spaces, such as in 96-well microtiter plate formats. For reliable function (holding, positioning), it is particularly useful if the component (B 12) has a comparatively long guide in the gripping tongs. The component (B 12) can have grooves which prevent the gripping tongs from slipping on the component (B 12) and ensure a reliable holding function.

Eine besonders bevorzugte Ausführungsform 1 des Deckels, welche in Figur 1 im Längsschnitt gezeigt ist, besteht aus einer zylinderförmigen Kappe (B) mit aufgesetztem zylinderförmigem Stift (B 12) und mehreren Belüftungskanälen (B 13), welche von innen mit einem Aerosolfilter (B 14) abgedichtet sind. Die ringförmigen Stege (Bl 1) dienen außerdem zum Befestigen des Filters (B 14). Die Wände eines Probegefaßes (A) mit einer inneren Form (Al 7) und einer äußeren Form (Al 9) und eines Formkörpers (C) mit einer inneren Kontur (C 16) und einer äußeren Kontur (C 12) sind angedeutet.A particularly preferred embodiment 1 of the lid, which is shown in longitudinal section in Figure 1, consists of a cylindrical cap (B) with a cylindrical pin (B 12) attached and several ventilation channels (B 13), which are sealed from the inside with an aerosol filter (B 14). The ring-shaped webs (Bl 1) also serve to attach the filter (B 14). The walls of a sample vessel (A) with an inner shape (Al 7) and an outer shape (Al 9) and a molded body (C) with an inner contour (C 16) and an outer contour (C 12) are indicated.

In Figur 2 ist ein Deckel in einem Zustand gezeigt, in dem er ein Probengefäß (A) und einen Formkörper (C) verschließt (Ausführungsform 1).In Figure 2, a lid is shown in a state in which it closes a sample vessel (A) and a molded body (C) (embodiment 1).

In Figur 3 sind schematisch die Zwischenstufen eines Nukleinsäureisolierungsverfahrens gezeigt. Figure 3 shows schematically the intermediate steps of a nucleic acid isolation process.

In Figur 4 ist ein erfindungsgemäßer Deckel in einem Zustand gezeigt, in dem er einen Formkörper (C) und ein Elutionsgefäß (D) verschließt (Ausführungsform 2). Der Zustand, in dem auch noch der Stempel (E) verschlossen und ergriffen ist, ist in Figur 3 (zweitletzte Teilzeichnung) bzw. Figur 8 zu sehen.In Figure 4, a lid according to the invention is shown in a state in which it closes a molded body (C) and an elution vessel (D) (embodiment 2). The state in which the stamp (E) is also closed and gripped can be seen in Figure 3 (second to last partial drawing) or Figure 8.

In Figur 5 ist ein Deckel gezeigt, bei dem das Bauteil (B 12) innerhalb des Probengefäßes liegt.Figure 5 shows a lid in which the component (B 12) is located inside the sample vessel.

In Figur 6 ist ein Gerät zum Ergreifen der erfindungsgemäßen Deckel schematisch gezeigt. Schematisch sind auch Bauteile zum Einrasten des jeweiligen Betriebszustandes (leer, Position B; greifen, Position A) gezeigt.Figure 6 shows a device for gripping the lid according to the invention schematically. Components for locking the respective operating state (empty, position B; gripping, position A) are also shown schematically.

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In Figur 7 ist ein Längsschnitt eines weiter fortentwickelten Geräts zum Ergreifen des Deckels gezeigt. Es funktioniert auf dem Prinzip eines Druckbleistifts.Figure 7 shows a longitudinal section of a more advanced device for gripping the lid. It works on the principle of a mechanical pencil.

In Figur 9 ist ein weiterer Deckel gezeigt, bei dem das Bauteil (B 12) innerhalb des Probengefäßes liegt. Auch dieser Deckel enthält einen Überhang und eine Dichtlippe.Figure 9 shows another lid in which the component (B 12) is located inside the sample vessel. This lid also contains an overhang and a sealing lip.

In Figur 10 ist der untere Teil des in Figur 7 gezeigten Gerätes zum Ergreifen des Deckels abgebildet, jedoch ist hier eine Feder (Fl) vorgesehen, die an ihrem dem Deckel zugewandten Ende ein Bauteil enthält, das auf den ergriffenen Deckel (B) drücken kann. Dies kann z. B. ein Ring sein. In entspanntem Zustand ragt das Bauteil (F2) über die Unterseite des Greifinechanismus (F3) hinaus. Die Feder (Fl) wird durch Ergreifen des Deckels und Zurückschieben des Bauteils (F2) gespannt, so daß auf den Deckel in ergriffenem Zustand ein ständiger Druck in Richtung aus dem Greifinechanismus heraus ausgeübt wird, der jedoch nicht so groß ist, daß der Deckel im ergriffenen Zustand aus dem Greifinechanismus herausgeschoben wird. Die Feder (Fl) ist daher bevorzugt sehr leicht. Die Feder (Fl) in Zusammenwirkung mit dem Bauteil (F2) hat die Funktion, den Deckel, wenn er von dem Greifinechanismus freigegeben wurde, aus dem Greifinechanismus zu schieben. Dies ist vorteilhaft, da es sich herausgestellt hat, daß der Deckel manchmal nicht verläßlich nur aufgrund der Schwerkraft aus dem Greifinechanismus herausfällt.Figure 10 shows the lower part of the device shown in Figure 7 for gripping the lid, but here a spring (Fl) is provided which contains a component at its end facing the lid which can press on the gripped lid (B). This can be a ring, for example. In the relaxed state, the component (F2) protrudes beyond the underside of the gripping mechanism (F3). The spring (Fl) is tensioned by gripping the lid and pushing back the component (F2), so that a constant pressure is exerted on the lid in the gripped state in the direction out of the gripping mechanism, but this pressure is not so great that the lid is pushed out of the gripping mechanism in the gripped state. The spring (Fl) is therefore preferably very light. The spring (Fl) in cooperation with the component (F2) has the function of pushing the cover out of the gripping mechanism when it has been released from the gripping mechanism. This is advantageous since it has been found that the cover sometimes does not fall out of the gripping mechanism reliably due to gravity alone.

In Figur 11 ist ein Deckelbearbeitungsgerät gezeigt, welches ein Bauteil enthält, das das Bauteil (B 12) des Deckels festklemmen kann, und darüber hinaus ein Bauteil, mit dem der Deckel aus dem oben genannten Bauteil herausgedrückt werden kann. Dieses Deckelbearbeitungsgerät kann in vorteilhafter Weise mit einer Vorrichtung zum Pipettieren von Flüssigkeiten kombiniert werden. Als eine Vorrichtung zum Pipettieren der Flüssigkeit kann eine kommerziell erhältliche Kolbenhubpipette (&zgr;. B. Firma Eppendorf, BRD) eingesetzt werden. Als besonders bevorzugt hat es sich erwiesen, wenn die Längsachsen der beiden Vorrichtungen einen Winkel von weniger als 90°, besonders bevorzugt weniger als 45° bilden. Mit einem solchen Gerät können zeitsparenderweise die beiden wesentlichen Vorgänge in Analyseverfahren, nämlich Pipettierungen und Öffnen von Gefäßen abgearbeitet werden.Figure 11 shows a lid processing device which contains a component which can clamp the component (B 12) of the lid and, in addition, a component with which the lid can be pressed out of the above-mentioned component. This lid processing device can be advantageously combined with a device for pipetting liquids. A commercially available piston-stroke pipette (ζ, e.g. from Eppendorf, Germany) can be used as a device for pipetting the liquid. It has proven particularly preferred if the longitudinal axes of the two devices form an angle of less than 90°, particularly preferably less than 45°. With such a device, the two essential processes in analysis processes, namely pipetting and opening of vessels, can be carried out in a time-saving manner.

Im Folgenden werden Abmessungen angegeben, wie sie sich als zweckmäßig für den erfindungsgemäßen Deckel nach der ersten Ausfuhrungsform erwiesen haben.In the following, dimensions are given which have proven to be useful for the cover according to the invention in the first embodiment.

Außendurchmesser des Deckels: 8,8 mmOuter diameter of the lid: 8.8 mm

Innendurchmesser des Deckels: 7,2 mmInner diameter of the lid: 7.2 mm

Höhe des Deckels inklusive Bauteil (B 12): 14,6 mmHeight of the cover including component (B 12): 14.6 mm

Durchmesser der B elüftungskanäle (B 13): 0,8 mmDiameter of ventilation channels (B 13): 0.8 mm

Höhe der Belüftungskanäle (B 13): 0,315 mmHeight of ventilation channels (B 13): 0.315 mm

Dicke des Filters (B 14): 1,6 mmThickness of the filter (B 14): 1.6 mm

Radius des Bauelements (B 11): 2,5 mmRadius of the component (B 11): 2.5 mm

Wandstärke des Bauteils (B 11): 0,4 mmWall thickness of the component (B 11): 0.4 mm

Höhe des Bauteils (B 12): 7,0 mmHeight of component (B 12): 7.0 mm

Durchmesser des Bauteils (B12): 1,9 mmDiameter of the component (B12): 1.9 mm

Die entsprechenden Innenmaße des Probengefäßes (A) und des Formkörpers (C) sind auf die genannten Maße angepaßt.The corresponding internal dimensions of the sample vessel (A) and the molded body (C) are adapted to the dimensions mentioned.

Erfindungsgemäße Deckel (B) können auf einfache Weise durch Spritzgrußverfahren aus thermoplastischen Kunststoffen, bevorzugt Polypropylen (Typ Novolen® 1100 U. CX) hergestellt werden. Auch die hier erwähnten Gefäße können so hergestellt werden. Eventuell eingesetzte Filtermaterialien können an die vorgesehenen Stellen eingepreßt oder/und geklebt oder verschweißt werden.Lids (B) according to the invention can be manufactured in a simple manner by injection molding from thermoplastics, preferably polypropylene (type Novolen® 1100 U. CX). The vessels mentioned here can also be manufactured in this way. Any filter materials used can be pressed into the designated places and/or glued or welded.

Der erfindungsgemäße Deckel kann bevorzugt in Verfahren zur Isolierung von Nukleinsäuren eingesetzt werden. Ein solches Verfahren ist im folgenden unter Bezugnahme auf FIG 3 beschrieben. Erfindungsgemäße Deckel können hier sogar zweimal eingesetzt werden, nämlich zum Verschluß und der Handhabung des Probengefaßes (A) und des Formkörpers (C) (Ausführungsform 1) sowie des Elutionsgefäße (D) und des Stempels (E) (Ausfuhrungsform 2).The lid according to the invention can preferably be used in processes for isolating nucleic acids. Such a process is described below with reference to FIG. 3. Lids according to the invention can even be used twice here, namely for closing and handling the sample vessel (A) and the molded body (C) (embodiment 1) as well as the elution vessel (D) and the stamp (E) (embodiment 2).

In der besonderen Ausführungsform für die Aufarbeitung nukleinsäurehaltiger Probenlösungen, werden folgende Arbeitsschritte durchgeführt. In einem ersten Schritt (I) wird eine zellhaltige Probenflüssigkeit in einem Probegefäß (A) mit einem Material inkubiert, an welches die Zellen gebunden werden, aus denen Nukleinsäuren gewonnen werden sollen. Hierzu kann dieses Material entweder spezifische Bindeeigenschaften für die Oberfläche der Zellen aufweisen, z. B. durch Immobilisierung von Antikörpern gegen Oberflächenantigene oder ein Absorbermaterial (Al 6), es kann jedoch auch ein Material mit FiltereigenschaftenIn the special embodiment for the processing of sample solutions containing nucleic acids, the following work steps are carried out. In a first step (I), a sample liquid containing cells is incubated in a sample vessel (A) with a material to which the cells from which nucleic acids are to be obtained are bound. For this purpose, this material can either have specific binding properties for the surface of the cells, e.g. by immobilizing antibodies against surface antigens or an absorber material (Al 6), but it can also be a material with filter properties

(Al 5) vorgesehen sein, durch welches die Zellen zurückgehalten werden, wenn die Flüssigkeit durch das Material durchtritt, z. B. aus dem Probengefaß entfernt wird. Bedingungen für die Immobilisierung von Zellen an Oberflächen sind dem Fachmann bekannt, z. B. aus Methods in Enzymology Vol. 171, Biomembranes / Part R Transport Theory: Cell and Model Membranes, Edited by Sidney Fleischer, Becca Fleischer, Department of Molecular Biology, Vanderbilt University, Nashville, Tennessee.(Al 5) by which the cells are retained when the liquid passes through the material, e.g. when it is removed from the sample vessel. Conditions for the immobilization of cells on surfaces are known to the person skilled in the art, e.g. from Methods in Enzymology Vol. 171, Biomembranes / Part R Transport Theory: Cell and Model Membranes, Edited by Sidney Fleischer, Becca Fleischer, Department of Molecular Biology, Vanderbilt University, Nashville, Tennessee.

Während der Inkubation ist das Probengefaß bevorzugt durch einen erfindungsgemäßen Deckel (B) verschlossen, um aktiven bzw. passiven Kontaminationsschutz zu gewährleisten. Dieser Deckel entspricht in seiner Konstruktion FIG 1. Er weist LuftdurchtrittsöfBiungen (B 13) auf, die beim Aufsetzen und Andrücken des Deckels den Austritt von Luft erlauben, sodaß der entstehende Überdruck keine Flüssigkeit aus dem Probengefaß (A) (z. B. über eine untenliegende Austrittsöffhung) herausdrückt.During incubation, the sample vessel is preferably closed by a lid (B) according to the invention in order to ensure active or passive protection against contamination. The design of this lid corresponds to that shown in FIG. 1. It has air passage openings (B 13) which allow air to escape when the lid is placed and pressed down, so that the resulting excess pressure does not force any liquid out of the sample vessel (A) (e.g. via an outlet opening below).

In einem weiteren Schritt wird die Flüssigkeit aus dem Probengefäß entfernt, während Zellen, deren Nukleinsäuren isoliert werden sollen, in an das Material gebundenem Zustand im Probengefaß zurückbleiben. Sofern es sich bei dem zellbindenden Material um partikuläre Materialien handelt, kann ein Zurückhalten auch dadurch erreicht werden, daß das Material magnetisch ist und ein Magnetfeld von außen an das Probengefaß angelegt wird, welches so stark ist, daß das partikuläre Material im Probengefaß zurückbleibt, wenn die Flüssigkeit entfernt wird. Das Entfernen der Flüssigkeit kann auf verschiedenste Weise geschehen. Beispielsweise kann die Flüssigkeit durch eine räumlich von der Einlaßöffnung (AlO) getrennte Auslaßöfihung (Al 2) entfernt werden. Sofern die Auslaßöffhung im unteren Teil des Probengefäßes und unterhalb der zurückgehaltenen Zellen gelegen ist, kann die Flüssigkeit, z. B. unter Anlegen eines leichten Vakuums, abgesaugt werden. Hierzu kann beispielsweise an der Auslaßöffiiung ein Ventil vorgesehen sein, welches sich durch Anlegen von Unterdruck öffnet. Beim Absaugen der Flüssigkeit durch das Ventil kann der Deckel (B) aufgrund der Lufdurchtrittsöffhungen (B 13) auf dem Gefäß verbleiben. Die Luft, die durch die Öffnungen in das Gefäß hinein bzw. durchgesaugt wird, wird von Kontaminationen weitgehend durch den Filter (B 14) befreit. Die Stege (B 18) halten den Druckverlust gering.In a further step, the liquid is removed from the sample vessel, while cells whose nucleic acids are to be isolated remain in the sample vessel in a state bound to the material. If the cell-binding material is a particulate material, retention can also be achieved by the material being magnetic and a magnetic field being applied to the sample vessel from the outside, which is so strong that the particulate material remains in the sample vessel when the liquid is removed. The liquid can be removed in a variety of ways. For example, the liquid can be removed through an outlet opening (Al 2) that is spatially separated from the inlet opening (AlO). If the outlet opening is located in the lower part of the sample vessel and below the retained cells, the liquid can be sucked out, e.g. by applying a slight vacuum. For this purpose, a valve can be provided on the outlet opening, for example, which opens when negative pressure is applied. When the liquid is sucked out through the valve, the lid (B) can remain on the vessel due to the air passage openings (B 13). The air that is sucked into or through the vessel through the openings is largely freed of contamination by the filter (B 14). The webs (B 18) keep the pressure loss low.

Zur weitgehenden Entfernung eventuell störender Probenbestandteile von den Zellen können ein oder mehrere Waschschritte vorgesehen werden. Hierzu wird der Deckel (B)To remove as much of the sample components as possible from the cells, one or more washing steps can be carried out. To do this, the lid (B)

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entfernt und in das Probengefäß eine Waschflüssigkeit eingefüllt, in der sich eventuelle Verunreinigungen lösen, die jedoch die Bindung der Zellen an die Oberfläche des zellbindenden Materials nicht wesentlich beeinträchtigen. Solche Waschlösungen sind dem Fachmann z. B. aus den Zellseparationsprotokollen bzw. aus entsprechenden Reinigungskitsprotokollen für Nukleinsäuren bekannt. Sie richten sich im wesentlichen nach der Art der Bindung der Zellen an das Material.removed and a washing liquid is poured into the sample vessel in which any impurities are dissolved, but which do not significantly impair the binding of the cells to the surface of the cell-binding material. Such washing solutions are known to the expert, for example, from cell separation protocols or from corresponding cleaning kit protocols for nucleic acids. They essentially depend on the type of binding of the cells to the material.

Nachdem gegebenenfalls die letzte Waschlösung aus dem Probengefaß (A) entfernt wurde, werden die gereinigten, angereicherten Zellen mit einer geeigneten Lyseflüssigkeit zur Freisetzung der Nukleinsäuren aus den Zellen in Kontakt gebracht. Die Reagenzien dieser Lyselösung richten sich weitgehend nach der Art der immobilisierten Zellen. Sofern es sich bei den Zellen um Bakterien handelt, enthält die Lyselösung bevorzugt Proteinase K zum Abbau der Zellwand. Gewünschtenfalls wird die Lyse durch Erhitzen bzw. Abkühlen sowie Mischen der Reaktionsmischung unterstützt. Sofern es sich bei dem zellbindenden Material um magnetische Partikel handelt, kann die Mischung auch mittels Magneten vorgenommen werden. Außerdem ist eine Mischung durch Schütteln des Probengefaßes möglich. Am Ende dieses Aufschlusses liegen die zu isolierenden Nukleinsäuren frei in der Lösung vor.After the last washing solution has been removed from the sample vessel (A), the cleaned, enriched cells are brought into contact with a suitable lysis liquid to release the nucleic acids from the cells. The reagents in this lysis solution depend largely on the type of immobilized cells. If the cells are bacteria, the lysis solution preferably contains proteinase K to break down the cell wall. If desired, the lysis is supported by heating or cooling and mixing the reaction mixture. If the cell-binding material is magnetic particles, mixing can also be carried out using magnets. Mixing by shaking the sample vessel is also possible. At the end of this digestion, the nucleic acids to be isolated are free in the solution.

Auch während der Lyse ist das Reaktionsgefäß bevorzugt durch einen Deckel verschlossen, um Kontaminationen aus der Umgebung zu verhindern. Nach Ende der Lyse wird der Deckel, bevorzugt mit Hilfe einer entsprechenden mechanischen Vorrichtung, entfernt. Danach wird in das Probengefaß, welches eine Mischung von Abbauprodukten der Zellen sowie die Nukleinsäuren enthält, ein Formkörper (C) eingeführt, dessen äußere Kontur (C 12) auf die innere Kontur (Al 7) des Probengefaßes abgestimmt ist. Dieser Formkörper ist hohl und in Richtung auf das Probengefäß und die Reaktionsmischung hin durch einen Filter (Cl 1) verschlossen. Die Einführung des Formkörpers (C) erfolgt bevorzugt mit Hilfe eines Bauelementes (BIl) des Deckels (B), der außerdem ein Bauelement (BIO) enthält, welches zum Verschluß des Probengefaßes geeignet ist. In diesem Fall wird der Formkörper mit dem Deckel (B) ergriffen (II) und gleichzeitig mit dem Verschließen des Probengefaßes in das Probengefäß eingeführt (III). Während dieses Vorgangs wird außerdem die Reaktionsmischung durch den Filter (Cl 1) in den Hohlraum (C 14) des Formkörpers eindringen (TV). Durch das Vorsehen des Filters können einerseits große Partikel an dem Eintritt in den Hohlraum gehindert werden und andererseits kann, wenn der Filter nukleinsäurebindende Eigenschaften hat, schon während des Durchtritts der Reaktionsmischung eine Bindung derDuring lysis, the reaction vessel is also preferably closed with a lid to prevent contamination from the environment. After lysis, the lid is removed, preferably with the aid of an appropriate mechanical device. A shaped body (C) is then introduced into the sample vessel, which contains a mixture of cell degradation products and the nucleic acids, the outer contour (C 12) of which is matched to the inner contour (Al 7) of the sample vessel. This shaped body is hollow and is closed off by a filter (Cl 1) in the direction of the sample vessel and the reaction mixture. The shaped body (C) is preferably introduced with the aid of a component (BIl) of the lid (B), which also contains a component (BIO) suitable for closing the sample vessel. In this case, the shaped body is grasped with the lid (B) (II) and introduced into the sample vessel at the same time as the sample vessel is closed (III). During this process, the reaction mixture will also penetrate through the filter (Cl 1) into the cavity (C 14) of the molded body (TV). By providing the filter, on the one hand, large particles can be prevented from entering the cavity and, on the other hand, if the filter has nucleic acid binding properties, binding of the

Nukleinsäuren an den Filter erreicht werden. In diesem Fall ist es zweckmäßig, ein glasfaserhaltiges Filtermaterial zu wählen.nucleic acids to the filter. In this case, it is advisable to choose a filter material containing glass fibre.

In einem nächsten Schritt wird die verbleibende Lysereaktionsmischung aus der durch A und C gebildeten Vorrichtung entfernt, z. B. durch Absaugen durch eine untenliegende AuslaßöShung (Al 1) im Probengefaß. Auch die in den Hohlkörper (C 14) des Formkörpers eingedrungene Lösung wird entfernt, so daß der Filter möglichst keine Flüssigkeitsreste mehr enthält. Danach wird der bisher verwendete Deckel (B) entfernt, wobei der Formkörper (C) zunächst im Probengefaß verbleibt (eingerastet) (V).In a next step, the remaining lysis reaction mixture is removed from the device formed by A and C, e.g. by suction through an outlet hole (Al 1) at the bottom of the sample vessel. The solution that has penetrated into the hollow body (C 14) of the molded body is also removed so that the filter contains as few liquid residues as possible. The previously used lid (B) is then removed, with the molded body (C) initially remaining in the sample vessel (snapped in) (V).

Gleichzeitig oder anschließend wird ein Elutionsgefäß (D) zur Aufnahme des Fonnkörpers (C) vorbereitet. Ein gegebenenfalls auf diesem Gefäß befindlicher Deckel (B, Ausführungsform 2) wird entfernt (VI). Bevorzugt wird vor Überführung des Formkörpers (C) in das Elutionsgefäß (D) eine Eiutionslösung in das Elutionsgefäß vorgelegt, z. B. einpipettiert. Sie enthält Reagenzien, unter deren Einwirkung die immobilisierten (gebundenen) Nukleinsäuren von dem Material eluiert, d. h. gelöst, werden. Die Zusammensetzung der Eiutionslösung und die Bedingungen der Elution richten sich nach der Art der Bindung der Nukleinsäuren an das Material im Filter (C). Geeignete Bedingungen sind dem Fachmann bekannt. Der ursprünglich das Elutionsgefäß verschließende Deckel (B) wird auf das Probengefaß (A) mit dem Formkörper (C) aufgesteckt (VII).At the same time or subsequently, an elution vessel (D) is prepared to receive the molded body (C). A lid (B, embodiment 2) that may be on this vessel is removed (VI). Preferably, before the molded body (C) is transferred to the elution vessel (D), an elution solution is placed in the elution vessel, e.g. pipetted in. It contains reagents under the action of which the immobilized (bound) nucleic acids are eluted from the material, i.e. dissolved. The composition of the elution solution and the conditions of the elution depend on the type of binding of the nucleic acids to the material in the filter (C). Suitable conditions are known to the person skilled in the art. The lid (B) that originally closed the elution vessel is placed on the sample vessel (A) with the molded body (C) (VII).

Zur Entnahme des Formkörpers (C) aus dem Probengefaß (A) wird der Formkörper (C) mit dem Deckel (B) entfernt (VIII). Die Kombination aus Deckel und Formkörper wird anschließend in das Elutionsgefäß eingeführt (IX). Bevorzugt enthält der Formkörper (C) Mittel (C 13) zur Fixierung des Formkörpers im Elutionsgefäß (D), die bewirken, daß der Formkörper nur unter Zerstörung des Formkörpers (C) oder des Gefäßes (D) oder mit einer Kraft, die größer ist als die Kraft, die zur Lösung des Deckels (B) vom Formkörper (C) erforderlich ist, aus dem Gefäß (D) entfernt werden kann. Eine Entfernung des Formkörpers aus dem Elutionsgefäß ist nicht beabsichtigt.To remove the shaped body (C) from the sample vessel (A), the shaped body (C) is removed with the lid (B) (VIII). The combination of lid and shaped body is then introduced into the elution vessel (IX). The shaped body (C) preferably contains means (C 13) for fixing the shaped body in the elution vessel (D), which ensure that the shaped body can only be removed from the vessel (D) by destroying the shaped body (C) or the vessel (D) or with a force that is greater than the force required to detach the lid (B) from the shaped body (C). Removal of the shaped body from the elution vessel is not intended.

Während des Eindringens des Formkörpers (C) in das Elutionsgefäß dringt die eventuell vorgelegte Eiutionslösung in den Filter (Cl 1) und löst dabei die immobilisierte Nuldeinsäure von der festen Matrix ab. Je nach Menge der vorgelegten Eiutionslösung wird entweder nur der Filter mit der Eiutionslösung getränkt oder/und dringt die Eiutionslösung mit den wieder gelösten Nukleinsäuren in den Hohlkörper (C 14) ein. Damit die Elution der Nuklein-As the molded body (C) enters the elution vessel, the elution solution that may have been added penetrates into the filter (Cl 1) and thereby dissolves the immobilized nucleic acid from the solid matrix. Depending on the amount of elution solution added, either only the filter is soaked with the elution solution or/and the elution solution with the dissolved nucleic acids penetrates into the hollow body (C 14). In order for the elution of the nucleic acids to be

säuren möglichst vollständig verläuft, sollte die Innenkontur des Elutionsgefäßes möglichst dicht an die Außenkontur des Formkörpers angepaßt sein.acids is as complete as possible, the inner contour of the elution vessel should be adapted as closely as possible to the outer contour of the molded body.

In einem folgenden Schritt -wird der Deckel (B) von der Kombination aus Formkörper (C) und Elutionsgefäß (D) entfernt (X). Er wird benutzt, um einen Stempel (E) aufzunehmen (XI) und in den Hohlraum des Formkörpers (C) einzuführen (XS). Dieser Deckel greift von innen in den Stempel (E). Der Stempel wird so kräftig gegen den Filter (Cl 1) gepreßt, daß Flüssigkeit aus dem Filter durch eine in der Andrucksfläche befindliche Öffiiung in einen Innenraum des Stempels eindringt. Dieser Vorgang ist besonders effektiv, wenn die Andrucksfläche in ihrer äußeren Kontur zumindest in dem Bereich, in dem die Auspressung stattfinden soll, an die innere Kontur des Formkörpers (C) angepaßt ist. Der Stempel (E) kann in dieser Lage, z. B. durch Einrasten, fixiert werden. In der so gebildeten Vorrichtung kann die nukleinsäurehaltige Lösung aufbewahrt werden.In a subsequent step, the lid (B) is removed (X) from the combination of molded body (C) and elution vessel (D). It is used to accommodate a stamp (E) (XI) and to insert it into the cavity of the molded body (C) (XS). This lid engages the stamp (E) from the inside. The stamp is pressed so forcefully against the filter (Cl 1) that liquid from the filter penetrates into the interior of the stamp through an opening in the pressing surface. This process is particularly effective if the pressing surface is adapted in its outer contour to the inner contour of the molded body (C), at least in the area in which the pressing is to take place. The stamp (E) can be fixed in this position, e.g. by snapping it into place. The solution containing nucleic acids can be stored in the device thus formed.

Zur Entnahme einer gewünschten Menge an Nukleinsäurelösung kann der eventuell vorhandener Deckel entfernt (&KHgr;&Pgr;&Igr;) und über eine Öffnung des Innenraums des Stempels die gewünschte Menge an Lösung entnommen werden, z. B. in einem Pipettiervorgang (XIV). Anschließend kann der Deckel wieder aufgesetzt werden.To remove a desired amount of nucleic acid solution, the lid (if present) can be removed and the desired amount of solution can be removed through an opening in the interior of the plunger, e.g. in a pipetting process (XIV). The lid can then be replaced.

Der erfindungsgemäße Deckel ist äußerst vorteilhaft einsetzbar. Er verringert die Kontaminationsgefahr für Proben, die sich in einem durch den Deckel verschlossenen Gefäß befinden und ist in Verfahren, die mit mechanischen Vorrichtungen zum Öffnen und Verschließen der Gefäße arbeiten, einsetzbar. Daneben sind natürlich auch manuelle Verfahren mit Hilfe einfacher Handgeräte zum Öffnen/Verschließen geeignet. Ein sehr günstiger Einsatz ist der Einsatz als Deckel von Gefäßen zur Amplifikation von Nukleinsäuren, z. B. durch PCR.The lid according to the invention can be used extremely advantageously. It reduces the risk of contamination for samples that are in a vessel closed by the lid and can be used in processes that work with mechanical devices for opening and closing the vessels. In addition, manual processes using simple hand-held devices for opening/closing are of course also suitable. A very advantageous use is as a lid for vessels for the amplification of nucleic acids, e.g. by PCR.

Ebenfalls Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zum Verschluß und zur erneuten Öffnung des Gefäßes, gekennzeichnet durchThe invention also relates to a method for closing and reopening the vessel, characterized by

Einführen eines Formkörpers (C), der von einem Deckel (B) ergriffen ist, in das Gefäß, so daß der Deckel das Gefäß verschließt, undInserting a shaped body (C) which is gripped by a lid (B) into the vessel, so that the lid closes the vessel, and

Entfernung des Deckels von dem Gefäß und dem Formkörper (C), wobei der Formkörper in dem Gefäß verbleibt.Removing the lid from the vessel and the molded body (C), leaving the molded body in the vessel.

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Hierzu weist der Formkörper bevorzugt !Mittel auf, die in ein entsprechendes Mittel des Gefäßes einrasten, so daß die für eine Entfernung des Deckels erforderliche Kraft geringer ist als die für die Entfernung des Formkörpers aus dem Gefäß.For this purpose, the molded body preferably has means which engage with a corresponding means of the vessel, so that the force required to remove the lid is less than that required to remove the molded body from the vessel.

Ein besonders bevorzugtes Verfahren beinhaltet die anschließende Entnahme des Formkörpers aus dem Gefäß mit Hilfe eines Deckels, der den Formkörper mit einer Kraft ergreift, die größer ist als die Kraft, mit der der Formkörper von dem Gefäß festgehalten wird.A particularly preferred method involves the subsequent removal of the molded body from the vessel by means of a lid which grips the molded body with a force that is greater than the force with which the molded body is held by the vessel.

Die Bearbeitung eines Deckels mit einem Deckelbearbeitungsgerät der Figur 7 oder 11 kann folgendermaßen vor sich gehen:The processing of a lid with a lid processing device of Figure 7 or 11 can be carried out as follows:

Das Deckelbearbeitungsgerät wird auf den Deckel aufgesetzt, so daß das Bauteil (B 12) in den Klemmechanismus (F3), z. B. in Art eines Kugelschreibermechanismus, hineinragt, The lid processing device is placed on the lid so that the component (B 12) extends into the clamping mechanism (F3), e.g. in the manner of a ballpoint pen mechanism,

bei Nachlassen des Drucks wird das Bauteil (B 12) im Klemmechanismus (F3) festgeklemmt. When the pressure is released, the component (B 12) is clamped in the clamping mechanism (F3).

Durch erneuten Druck des Deckelbearbeitungsgeräts auf den Deckel wird der Klemmechanismus gelöst und das Bauteil (B 12) wird wieder freigegeben.By pressing the cover processing device onto the cover again, the clamping mechanism is released and the component (B 12) is released again.

Diese Vorgänge sind bevorzugt durch Einrasten in den einzelnen Betriebsstellungen (Rastpositionen) abfahrbar. Besonders bevorzugt ist der Fall, daß der Druck auf die äußere Hülle der Vorrichtung ausgeübt wird.These processes can preferably be carried out by locking into the individual operating positions (locking positions). It is particularly preferred that the pressure is exerted on the outer shell of the device.

Das Vorsehen einer Feder (Fl) bewirkt ein aktives Entlassen des Deckels aus der Klemmvorrichtungen und eine sicher Ablage im Probengefäß auch nach eventueller Schrumpfung nach thermischer Belastung.The provision of a spring (Fl) causes an active release of the lid from the clamping device and a safe placement in the sample vessel even after possible shrinkage after thermal stress.

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BeispielExample

Im Folgenden wird unter Hinweis auf FIG 7 beschrieben, wie mit Hilfe eines Deckelhandlers ein Deckel entnommen bzw. aufgesetzt werden kann.In the following, with reference to FIG 7, it is described how a lid can be removed or placed using a lid handler.

A) Öffiien des DeckelsA) Opening the lid

Der Deckelhandler muß in der Stellung mit Kugelschreibermechanismus Rastposition A vorliegen.The lid handler must be in the position with the ballpoint pen mechanism locking position A.

1.) Aufsetzen des Elementes 2003 (äußere Hülle) auf die Stege des Röhrchens.1.) Place element 2003 (outer shell) onto the bars of the tube.

2.) Ausübung einer Kraft nach unten bewirkt die Absenkung des Elementes (2006) auf den Deckel bei gleichzeitiger Anspannung der Feder (2004). Jetzt ist ein erster Druckpunkt erreicht.2.) Applying a downward force causes the element (2006) to be lowered onto the lid while simultaneously tensioning the spring (2004). A first pressure point is now reached.

3.) Ausübung einer größeren Kraft als in Schritt 2.) bewirkt:3.) Applying a greater force than in step 2.) causes:

a.) der Klemmechanismus (F3) schiebt sich über den Dorn (B 12), b.) die Feder (2007) wird zusammengedrückt,a.) the clamping mechanism (F3) slides over the mandrel (B 12), b.) the spring (2007) is compressed,

c.) der Kugelschreibermechanismus (2005) verkürzt die Distanz II und geht in Rastposition B, wobei Feder (2007) in angespanntem Zustand verbleibt.c.) the ballpoint pen mechanism (2005) shortens the distance II and goes into locking position B, whereby spring (2007) remains in a tense state.

Ein zweiter Druckpunkt ist erreicht.A second pressure point is reached.

4.) Loslassen des Deckelhandlers (Rücknahme der Kraftausübung nach unten) bewirkt das Abziehen des Deckels vom Tube. Die dazu notwendige Kraft zur Überwindung der Reibung resultiert aus der Entlastung der Feder (2004). Die Kraft wird über Element (2003) und den Klemmechanismus (F3) auf den Deckel und die Stege des Röhrchens übertragen.4.) Releasing the lid handler (removing the downward force) causes the lid to be pulled off the tube. The force required to overcome the friction results from the relief of the spring (2004). The force is transferred via element (2003) and the clamping mechanism (F3) to the lid and the webs of the tube.

5.) Der Deckelhandler mit dem Deckel kann jetzt abgehoben und entfernt werden.5.) The lid handler with the lid can now be lifted and removed.

Der Klemmechanismus (F3) ist durch die Verkürzung von Distanz II jetzt in das Element (2002) zurückgezogen.The clamping mechanism (F3) is now retracted into the element (2002) due to the shortening of distance II.

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Der Deckel ist nun partiell kontaminationsgeschützt durch Element (2003), ragt jedoch funktionsgemäß 1-2 mm über Element (2003) hinaus.The lid is now partially protected from contamination by element (2003), but protrudes 1-2 mm beyond element (2003) for functional purposes.

B) Schließen des DeckelsB) Closing the lid

6.) Aufsetzen des Deckelhandlers mit Deckel auf die Öffiiung des Röhrchens und Ausübung einer Kraft nach unten gerichtet schiebt den Deckel in die Öffnung des Röhrchens.6.) Place the lid handler with lid on the opening of the tube and apply a downward force to push the lid into the opening of the tube.

7.) Verstärkung der Kraft von 6.) bewirkt das vollständige Einschieben des Deckels und Festklemmen über Reibungskräfte. Die Kraft wird über die Elemente 2005, 2009, 2008, 2010 auf den Klemmechanismus (F3) übertragen.7.) Increasing the force from 6.) causes the cover to be pushed in completely and clamped in place using friction forces. The force is transferred to the clamping mechanism (F3) via elements 2005, 2009, 2008, 2010.

Gleichzeitig wird Feder 2004 gespannt.
Ein dritter Druckpunkt ist erreicht.
At the same time, spring 2004 is tensioned.
A third pressure point has been reached.

8.) Verstärkung der Kraft von 7.) schiebt den Klemmechanismus (F3) aus Element (2006). Gleichzeitig spannt sich Feder (2004) weiter an und gleichzeitig rastet der Kugelschreibermechanismus (2005) wieder in die ursprüngliche Rastposition A zurück und verlängert Distanz II.8.) Increasing the force from 7.) pushes the clamping mechanism (F3) out of element (2006). At the same time, spring (2004) tightens further and at the same time the ballpoint mechanism (2005) snaps back into the original locking position A and extends distance II.

9.) Reduzieren der Kraft nach unten (= Loslassen) schiebt den Deckelhandler vollständig nach oben, wobei die gespannte Feder (2004) über Element (2003) das Röhrchen nieder hält. Die Feder entspannt sich bei diesem Prozeß und der Deckelhandler steht für einen weiteren Öffhungsprozeß bereit.9.) Reducing the downward force (= letting go) pushes the lid handler completely upwards, whereby the tensioned spring (2004) holds the tube down via element (2003). The spring relaxes during this process and the lid handler is ready for another opening process.

413iOHDE.KN413iOHDE.KN

Bezugszeichenliste:List of reference symbols: A ProbegefäßA sample vessel

10 EinlaßöfSiung10 Inlet opening

11 Auslaßöffiiung 15 Filtermaterial 17 Innere Form 19 Außenform11 Outlet opening 15 Filter material 17 Inner shape 19 Outer shape

B DeckelB Lid

10 Bauelement zum Verschluß des Probengefaßes A10 Component for closing the sample vessel A

11 Bauelement zum Ergreifen des Formkörpers C11 Component for gripping the molded body C

12 Bauteile zum Ergreifen des Deckels12 components for gripping the lid

13 Luftdurchtrittsöfmung13 Air passage opening

14 Filterelement14 Filter element

15 Element zum Einrasten von B10 in A15 Element for locking B10 into A

16 Dichtlippe16 Sealing lip

17 Teil des Deckels, der die Öffnung überdeckt17 Part of the lid that covers the opening

18 Rillen18 grooves

19 Überhang19 Overhang

C Formkörper C molded body

11 poröse Matrix11 porous matrix

12 äußere Kontur12 outer contour

13 Mittel zur Fixierung des Formkörpers im Elutionsgefaß13 Means for fixing the shaped body in the elution vessel

14 Hohlkörper14 hollow bodies

15 Mittel zur Befestigung eines Deckels15 Means for attaching a lid

16 innere Kontur16 inner contour

D ElutionsgefäßD Elution vessel

413Ä0HDEJCN413Ä0HDEJCN

E StempelE Stamp

12 Innenraum12 Interior

14 Entnahmeöffiiung14 Removal opening

F DeckelbearbeitungsgerätF Lid processing device

1 Feder1 spring

2 Bauteil zum Abstreifen2 Component for stripping

3 Klemmechanismus3 Clamping mechanism

4I3Ü0HDE.KN4I3Ü0HDE.KN

Claims (8)

AnsprücheExpectations 1. Deckel zum Verschluß einer Öffnung eines Gefäßes, gekennzeichnet durch1. Lid for closing an opening of a vessel, characterized by - ein Bauelement (B 10), das der zu verschließenden Öfihung des Gefäßes angepaßt ist und- a component (B 10) which is adapted to the opening of the vessel to be closed and - ein Bauelement (B 11) zum Ergreifen eines in das Gefäß einfuhrbaren Formkörpers- a component (B 11) for gripping a shaped body that can be inserted into the vessel 2. Deckel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Bauelement (B 10) der Öffnung innenseitig angepaßt ist.2. Lid according to claim 1, characterized in that the component (B 10) is adapted to the inside of the opening. 3. Deckel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Deckel ein sich im wesentlichen senkrecht zu der Verschlußöfihung erstreckendes Bauteil (B 12) zum Ergreifen des Deckels aufweist.3. Lid according to claim 1, characterized in that the lid has a component (B 12) extending substantially perpendicular to the closure opening for gripping the lid. 4. Deckel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß er Luftdurchtrittsöffnungen (B 13) enthält, die mittels eines Filterelementes (B 14) verschlossen sind.4. Lid according to claim 1, characterized in that it contains air passage openings (B 13) which are closed by means of a filter element (B 14). 5. Deckel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Bauelement (BIO) ein Element (B 15) enthält, welches im geschlossenen Zustand des Gefäßes in ein entsprechendes Element des Gefäßes einrasten kann.5. Lid according to claim 1, characterized in that the component (BIO) contains an element (B 15) which can snap into a corresponding element of the vessel when the vessel is in the closed state. 6. Deckel gemäß Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß das Bauteil (B12) im wesentlichen lang und zylindrisch ist.6. Lid according to claim 3, characterized in that the component (B12) is essentially long and cylindrical. 7. Deckel gemäß Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß an dem die Öffiiung überdeckenden Teil (B 17) des Deckels, in dem sich die Luftdurchtrittsöffnungen befinden, Abstandshalter (B 18) angebracht sind, sodaß zwischen dem Teil (B 17) und der Oberseite des Filterelements ein Zwischenraum verbleibt.7. Lid according to claim 4, characterized in that spacers (B 18) are attached to the part (B 17) of the lid covering the opening, in which the air passage openings are located, so that a gap remains between the part (B 17) and the top of the filter element. 8. Deckel zum Verschließen einer Öffnung eines Gefäßes, gekennzeichnet durch ein Bauelement (B 10), das der zu verschließenden Öffnung des Gefäßes angepaßt ist, und ein sich im wesentlichen senkrecht zu der Öffiiung erstreckendes Bauteil (B 12) zum Ergreifen des Deckels.8. Lid for closing an opening of a vessel, characterized by a component (B 10) which is adapted to the opening of the vessel to be closed, and a component (B 12) extending essentially perpendicular to the opening for gripping the lid. 413Ä0HDE.KN413Ä0HDE.KN
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