DE2936294A1

DE2936294A1 - Enclosed culture plate for raising and investigating bacteria - is easily transportable and provides adequate nutrient for growth

Info

Publication number: DE2936294A1
Application number: DE19792936294
Authority: DE
Inventors: Annikka Dipl Ing Rantama; Markus Sivonen
Original assignee: Orion Yhtyma Oy
Current assignee: Orion Oyj
Priority date: 1978-11-27
Filing date: 1979-09-07
Publication date: 1980-06-12

Abstract

A culture plate held inside a tightly sealed container, has on one or both surfaces, side walls of differing height, which allow the plate to be covered with a nutrient to a desired thickness, so that the plate can be used for the propagation of micro-organisms which make great demands on the nutrient. Provide an easily transportable device for the cultivation and investigation of micro-organisms. It is partic. valuable for transferring samples from where they are taken, to the laboratory. The invention combines the advantages of the Petri-shell with those of "dip-slide" devices. A thicker layer of nutrient and agar solns. of lower concn. can be used. Pref. the side walls of the culture plate are 3 to 10 mm high. The side walls are covered with a nutrient layer which is at least 3mm thick.

Description

Vorrichtung zur ZUchtung und UntersuchungApparatus for breeding and investigation

sowie zum Transport von Mikroorganismen Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine leicht trans portierbare Vorrichtung zur Züchtung und Untersuchung von Mikroorganismen. Diese besteht aus einem Platte mit von eine Nährmedium bedeckten Seitenwänden in einem Behälter mit dicht schließendem Deckel. Diese Vorrichtung eignet sich besonders zur Transport mikrobiologischer Proben vom Ort ihrer Entnahme zum Laboratorium.as well as for the transport of microorganisms The present Invention relates to an easily trans portable device for cultivation and study of microorganisms. This consists of a plate with one Culture medium covered side walls in a container with a tightly fitting lid. This device is particularly suitable for the transport of microbiological samples from Place of their removal to the laboratory.

Die Züchtung von Mikroben in einer ein Nährmedium enthaltenden Petri-Schale ist bekannt. Das Verfahren ist für mikrobiologische Laboratorien geeignet und kann zur Sohaffung günstiger Wachstumsbedingungen fUr unterschiedliche Mikroben stark variiert werden. Die unverwendete oder zur ZUchtung benutzte Petri -Schale ist Jedoch zum Transport nur schwer zu verpacken, weshalb dieses obige Verfahren außerhal mikrobiologischer Laboratorien nur eine recht begrenzte Nutzung findet.The cultivation of microbes in a Petri dish containing a nutrient medium is known. The method is suitable and can be used in microbiological laboratories to create favorable growth conditions for different microbes can be varied. However, the unused or used for cultivation Petri dish is Difficult to pack for transport, which is why this above process is also microbiological Laboratories only find a very limited use.

(dip slide device") Auch die Verwendung einer Tau heibenvo=ichtung/zur zur ZUchtung flüssiger Proben, wie Urin, und zum Transport gezüchteter oder ungezuchteter Nährmedien ist bereits bekannt. Diese Vorrichtung besteht aus einer dUnnen Nährmediumschicht, die auf eine Kunststoffplatte aufgebracht und in ein dicht schließendes Kunststoffrohr eingeschlossen ist. Bei dieser Vorrichtung ist es wesentlich, daß sich die Oberfläche des Nährmediums oberhalb des Randes der Kunststoffplatte befindet, so daß nach Züchtung durch Benetzen in einer FlUssigkeit die Uberschussige flUssige Probe auf der Platte leicht abgetrocknet werden kann. Die Nährmediumschicht muß ziemlich dtlrin sein, um sich auf der Tauchscheibe ohne komplizierte Hilfsmittel zu halten. (dip slide device ") Also the use of a rope heibenvo = ichtung / zur for the cultivation of liquid samples, such as urine, and for the transport of cultured or unbred ones Culture media is already known. This device consists of a thin layer of nutrient medium, which is applied to a plastic plate and in a tightly fitting plastic tube is included. In this device it is essential that the surface of the nutrient medium is located above the edge of the plastic plate, so that after cultivation by wetting the excess liquid sample on the plate in a liquid can be easily dried off. The nutrient medium layer must be fairly thin, to stay on the immersion plate without complicated tools.

Vom Standpunkt des Bakterienwachstums ist eine Nährmediumschicht von 3 bis 5 mm Dicke zweckmäßig, weil sie eine reichliche Nährstoffzufuhr ergibt und die Nachteile beim Trocknen nicht so groß sind.From the standpoint of bacterial growth, a nutrient medium layer is from 3 to 5 mm thick is useful because it provides an abundant supply of nutrients and the disadvantages of drying are not so great.

In der vorliegenden Erfindung werden die Eigenschaften des Petri -Schale-Verfahrens mit der praktischen Form der Tauchscheibe (dip slide") kombiniert, indem man die Ränder der Kulturplatte so hoch macht, daß man eine ausreichend dicke Schicht des Nährmedium erhalten kann, wie dies in der Petri-Schale der Fall ist. Die hochränderige erfindungsgemäße Platte ermöglicht die Verwendung von Nährschichten günstiger Dicke vom Standpunkt des mikrobialen Wachstums aus, Jedoch ohne Neigung zum Herabfallen. Weiter erlaubt dieses Verfahren die Verwendung von Nährmedien mit niedrigeren Agarkonzentrationen als die auf einer Kulturscheibe bzw. einem -träger ohne Seitenwände möglich ist. Diese neue Art von Kulturplatte eignet sich besonders zur Züchtung von Bakterien, die große Anforderungen an das Kulturmedium stellen, wie Gonococcen und ß-hämolytische Streptococcen. Ihre ZUchtung nach einem Routine-Verfahren erfordert die Kapazität eines gut ausgestatteten mikrobiologischen Laboratoriums. Andererseits besteht ein großer Bedarf nach einem Testverfahren für diese Bakterien, das in Gesundheitszentren und ähnlichen Einrichtungen verwendbar ist. Die Verwendung eines einfachen und praktischen Trägerverfahrens in diesen mühsame, Jedoch allgemein notwendigen bakteriellen Tests scheint daher sinnvoll.In the present invention, the characteristics of the Petri dish method combined with the practical form of the dip slide, by using the Makes the edges of the culture plate so high that a sufficiently thick layer of the Can receive nutrient medium, as is the case in the Petri dish. The high-edged one Plate according to the invention enables the use of nutrient layers of favorable thickness from the point of view of microbial growth, but with no tendency to fall. This method also allows the use of nutrient media with lower agar concentrations than is possible on a culture disc or a support without side walls. This new type of culture plate is particularly suitable for growing bacteria, which place great demands on the culture medium, such as gonococci and ß-hemolytic Streptococci. Their cultivation according to a routine process requires capacity a well-equipped microbiological laboratory. On the other hand, there is a there is a great need for a test method for these bacteria to be used in health centers and similar devices can be used. The use of a simple and practical Carrier method in these tedious, but generally necessary bacterial tests therefore seems reasonable.

Die Vorrichtung hat den weiteren Vorteil, leicht transportierbar zu sein, so daß die 6ßere berufliche Erfahrung er-fordernden Phasen des Testes, wie Erfassung der Ergebnisse und fortgesetzte Studien, in einem mikrobiologischen Laboratorium erfolgen können.The device has the further advantage of being easy to transport so that the professional experience required phases of the test, such as Recording of results and continued studies in a microbiological laboratory can be done.

Die erfindungsgemäße Vorrichtung besteht aus einem Behälter mit dicht schließendem Deckel, der eine Kulturplatte enthält, die durch den Träger und/oder den Behälter gehalten wird. Entscheidend ist, daß die Platte auf einer oder beiden Seiten Seitenwände hat. Die Platte und ihr Behälter sind steril.The device according to the invention consists of a container with tight closing lid containing a culture plate, which is supported by the carrier and / or the container is held. It is crucial that the plate be on one or both Sides has sidewalls. The plate and its container are sterile.

Fig. 1 bis 3 zeigen die Vorrichtung aus der Kulturplatte 1 mit einem Stöpsel 2, um sie an ihrem durch den Deckel 3 und den Behälter 4 gehaltenen Platz zu halten. Die Plattenränder von 3 bis 5 mm Höhe sind wesentlich und können die Platte auf beiden Seiten (Fig. 2) oder nur auf einer Seite (Fig. 3) umgeben.Fig. 1 to 3 show the device from the culture plate 1 with a Plug 2 to keep them in place by the lid 3 and the container 4 to keep. The plate edges 3 to 5 mm in height are essential and can the plate on both sides (Fig. 2) or only on one side (Fig. 3) surrounded.

Fig. 1 zeigt einen Schraubdeckel, wobei Jedoch auch ein Steckdeckel ("thrust cover") möglich ist. Der in Fig. 1 gezeigte Behälter ist nrörinig, kann Jedoch auch andere Formen haben. In Abhängigkeit von der Form der Platte kann der Behälter z.B. quadratisch oder rechteckig im Querschnitt sein. Die Kulturplatte kann im Behälter mittels eines Stöpsel an Ort und Stelle gehalten oder einfach durch Behälter und Deckel getragen werden.Fig. 1 shows a screw cap, but also a plug-in cover ("thrust cover") is possible. The container shown in Fig. 1 is nutty, can However, they also have other forms. Depending on the shape of the plate, the Container e.g. square or rectangular in cross-section. The culture plate can be held in place in the container by means of a stopper or simply through Container and lid are carried.

Durch Variieren der Höhe der Plattenränder kann die Dicke des Nährmediums nach Bedarf modifiziert werden, wobei die Seitenwände der Platte außerdem das Nährmedium während des Transportes an Ort und Stelle halten. Gewöhnlich ist eine Nährschicht von etwa 4 mm Dicke von Standpunkt des mikrobialen Wachstums aus zweckmäßig. Auf einer derartigen Platte können auch solche bezüglich des Nährmediums anspruchsvolle Mikroorganismen, wie Gonococcen und ß-hämolytische Streptococcen, gezüchtet werden. Durch Verwendung von Platten mit Seitenwänden auf beiden Seiten kann man auf eine Platte zwei unterschiedliche Nährmedien aufbringen,uum so mehr Informations über die Probe zu erhalten. Durch Verwendung desselben Nährmediums auf beiden Seiten der Platte erhält man wiederum eine größere Kulturfläche, was die Untersuchung von Proben mit sehr hoher oder niedrige mikrobialer Konzentration erleichtert. Die Plattenoberfläche kann auch unterschiedliche Erhöhungen, z.B. ein netzartiges Muster, haben, was dazu beiträgt, das Nährmedium auf der Platte festzuhalten und auch das Ablesen der Ergebnisse erleichtert.By varying the height of the plate edges, the thickness of the nutrient medium be modified as necessary, the side walls of the plate also the nutrient medium Hold in place during transport. Usually there is a nutrient layer about 4 mm thick is appropriate from the standpoint of microbial growth. on Such a plate can also be demanding in terms of the nutrient medium Microorganisms such as gonococci and β-hemolytic streptococci can be cultured. By using panels with side walls on both sides, one can access one Apply two different nutrient media to the plate, and all the more information about to receive the sample. By using the same culture medium on both sides the plate one gets in turn a larger culture area, what the investigation of Samples with very high or low microbial concentrations are facilitated. The plate surface can also have different elevations, e.g. a net-like pattern, what to do with it helps to hold the nutrient medium on the plate and also to read the results relieved.

Die mit Nährmedium bedeckte Platte mit Seitenwänden auf einer oder beiten Seiten wird zur Verwendung aus ihrem Behälter genommen und die Probe, gewöhnlich mittels eines Wattestäbchens auf die Nährmediumoberfläche(n) aufgebracht.The plate covered with culture medium with side walls on an or Both sides are removed from their container for use and the sample, usually applied to the nutrient medium surface (s) using a cotton swab.

Dazu sind alle üblicherweise mit Petri-Schalen verwendeten Verfahren der OberflächenzUchtung anwendbar. Das Nährmedium kann auch mit einer flüssigen Probe benetzt werden, dann muß Jedoch die überschüssige Flüssigkeit möglichst sorgfältig von den Oberflächen entfernt werden. Nach Aufbringung der Probe wird die Platte in ihr Schutzrohr eingeschlossen und nach Bedarf bebrütet. In diesem Stadium können die Röhrchen zur Bebrütung in ein Laboratorium geschickt werden. Dem Röhrchen können Mittel zur Veränderung der BebrUtungsbedingungen, z.B C02 Tabletten für die Züchtung von Gonococcen, zugefügt werden.They are all commonly used with Petri dishes procedure of surface breeding applicable. The nutrient medium can also be mixed with a liquid Sample to be wetted, but then the excess liquid must be as carefully as possible removed from the surfaces. After applying the sample, the plate is enclosed in their protective tube and incubated as required. At this stage you can the tubes are sent to a laboratory for incubation. The tube can Means for changing the incubation conditions, e.g. C02 tablets for breeding of gonococci.

Die Kulturplatte kann praktisch mit Jeder Art von festen Nährmedium bedeckt werden. dessen Agar-Agar-Konzentration über 1,2 % liegen kann. Weichere Nährmedium überstehen den Posttransport nicht ohne Herausfallen. Das Verfahren ist Jedoch besonders zweckmäßig in Fällen, wo eine übliche Tauchträgervorrichtung unbefrisdigende Ergebnisse liefert, weil das Nährmedium zu viel Agar-Agar enthält, weil es sich nicht gut in einer dünnen Schicht hält oder weil das bakterielle Wachstum auf der dünnen Schicht des Nährmediums wesentlich schlechter ist als in einer Petri-Schale. Die ZUchtung von Gonococcen und ß-hämolytischen Streptococcen in Pharyngealproben ist ein typisches Anwendungsgebiet.The culture plate can be used with practically any type of solid nutrient medium to be covered. whose agar-agar concentration can be over 1.2%. Softer ones The nutrient medium does not survive the transport of the mail without falling out. The procedure is However, it is particularly useful in cases where a conventional immersion carrier device is unsafe Gives results because the nutrient medium contains too much agar because it is agar does not hold up well in a thin layer or because of bacterial growth on the thin layer of nutrient medium is much worse than in a Petri dish. The cultivation of gonococci and ß-hemolytic streptococci in pharyngeal samples is a typical area of application.

Die folgenden Beispiele zeigen die Verwendung der erfindungsgemäßen Vorrichtung zur Bestimmung von Mikroorganismen in unterschiedlichen mikrobiologischen Proben.The following examples show the use of the inventive Device for the determination of microorganisms in different microbiological Rehearse.

Beispiel 1 Eine Kulturplatte mit 6 mm hohen Seitenwänden auf einer Seite und 20 mm x 70 mm großer Fläche fUr das Nährmedium wurde mit 6,5 ccm Nährmedium bedeckt, was eine 4 mm hohe Schicht ergab. Das Nährmedium kann eine übliche Blutkultur sein, die Peptone, Salz, Agar, Pferde- oder Schafsblut und Inhibitoren zur Vermeidung eines Ubermäßigen Wachstums der verunreinigungen Bakterien enthält. Das Nährmedium kann z.B. die folgende Zusammensetzung haben: Caseinpepton SoJ apepton NaCl Agar Blut Nalidixan Neomycin 15 g/ 5 g/l 5 g/l 15 g/l 60 ccm/l 15 mg/l 30 mg/l Die leicht hergestellten Platten werden zur Bestimmung von ß-hämolytischen Streptococcen der A-Gruppe in Pharyngealkulturen verwendet. Die Platte kann gleichzeitig für einen Bacitracintest verwendet werden, um vorher festzustellen, ob der gefundene, B-hämolytische Streptococcus zur A-Gruppe gehört. Der Bacitracintest erfolgt, indem man eine Papierscheibe mit Bacitracin auf die beimpfte Platte legt und die Platte nach der Züchtung auf einen möglichen Wachstumsinhibierenden Effekt auf den ß-hämolytischen Kolonien in der Nähe der Bacitracinscheibe untersucht.Example 1 A culture plate with 6 mm high side walls on a Side and 20 mm x 70 mm area for the nutrient medium was filled with 6.5 ccm of nutrient medium covered, giving a 4 mm high layer. The nutrient medium can be a normal blood culture be the peptones, salt, agar, horse or sheep blood and inhibitors to avoid an overgrowth of contaminants containing bacteria. The nutrient medium can e.g. have the following composition: Casein peptone SoJ apepton NaCl agar blood Nalidixan Neomycin 15 g / 5 g / l 5 g / l 15 g / l 60 ccm / l 15 mg / l 30 mg / l The easily prepared plates are used for the determination of ß-hemolytic streptococci of the A group used in pharyngeal cultures. The plate can be used for one at the same time Bacitracin test can be used to determine beforehand whether the found, B-hemolytic Streptococcus belongs to the A group. The bacitracin test is done by looking at a paper disk with bacitracin on the inoculated plate and the plate on after cultivation a possible growth-inhibiting effect on the ß-hemolytic colonies in examined near the bacitracin disc.

Beispiel 2 Eine 20 mm x 70 mm Platte mit 6 mm hohen Seitenwänden auf beiden Seite wurde auf Jeder Seite mit einer 6 mm dicken Schicht aus medifiziertem Thayer's und Martin's Nährmedium (Thayer, J.D. & Martin, F.E.: Public Health Rep. 81; 559-562 (1966), dem 3 g/l Agar-Agar zugefügt worden waren, bedeckt. Die Nährmediumsmenge betrug auf Jeder Seite der Platte 6 ccm Die licht hergestellten Platten wurden zur Bestimmung von Gonococcen in Urethral-, Cervical-, Rectal- und Pharyngealproben verwendet. Vor der Bebrütung wurde dem Röhrchen eine CO2 Tablette zugefügt. Nach nur 24 stündiger BebrUtung kann man das Gonococcenwachstum durch Zugabe einiger Tropfen von Oxydasereagenz, 1 X Dimethyl- oder Tetramethyl-p-phenylendiaminhydrochlorid, zu den vermuteten Kolonien auf einer Seite der Platte bestimmen. Da dieses Reagenz toxisch für die Bakterien ist, ist eine zweiseitige Platte zweckmäßig, weil die Züchtung notwendigenfalls auf der anderen Seite fortgesetzt werden kann. Wenn weiterhin eine gezüchtete Platte an ein Laboratorium zur Untersuchung geschickt werden soll, kann der Absender zuerst eine Plattenseite auf mögliches Gonococcenwachstum untersuchen, die Platten mit negativem Ergebnise aussortieren und die fraglichen Platten dann mit der anderen intakten Seite an ein Laboratorium zur fortgesetzten Untersuchung schicken.Example 2 A 20 mm x 70 mm board with 6 mm high side walls both side was medicated on each side with a 6 mm thick layer of Thayer's and Martin's nutrient medium (Thayer, J.D. & Martin, F.E .: Public Health Rep. 81; 559-562 (1966) to which 3 g / l agar-agar had been added. the The amount of nutrient medium on each side of the plate was 6 ccm Plates were used for the determination of gonococci in urethral, cervical, rectal and Pharyngeal specimens used. A CO2 tablet was placed in the tube before incubation added. After only 24 hours of incubation, the gonococci can grow through Add a few drops of oxidase reagent, 1 X dimethyl or tetramethyl-p-phenylenediamine hydrochloride, to determine the suspected colonies on one side of the plate. Because this reagent is toxic to the bacteria, a double-sided plate is useful because the Breeding can be continued on the other side if necessary. If continue a bred one Plate sent to a laboratory for examination the sender can first check a plate side for possible gonococcal growth examine, sort out the plates with negative results and the ones in question Plates then with the other intact side to a laboratory for continued Send investigation.

Claims

Claims 1.- device for cultivation, investigation and for Transport of microorganisms, consisting of a container (4) with a tight seal Deodorant (3) and a culture plate (1) enclosed in the container, characterized in that that the plate (1) in the container (4) has side walls (5) on one or both sides has different heights that cover the plate with the nutrient medium allow the desired thickness, so that the plate for growing microorganisms, which place great demands on the nutrient medium, can be used.

2.- Device according to claim 1, characterized in that the side walls (5) the culture plate (1) are 3 to 10 mm high.

3.- Device according to claim 1 to 2, characterized in that the side walls (5) of the culture plate (1) with a nutrient layer of at least 3 mm thick.

4.- Apparatus according to claim 1 to 3, characterized in that the two-sided plate (1) with two different nutrient media on each side of the plate is covered.

5.- Apparatus according to claim 1 to 3, characterized in that the two-sided plate (1) on both sides with the same nutrient medium to achieve a larger culture surface is covered.

6.- Device according to claim 1 to 5, characterized in that the agar-agar concentration of the solid nutrient medium is at least 1.2.

7.- Device according to claim 1 to 6, characterized in that it is used in particular for the cultivation of gonococci and ß-hemolytic streptococci will.