DE2926833A1 - METHOD FOR PRODUCING A LIQUID CONTROL WHICH SIMULATES THE PRESENCE OF UROBILINOGEN, AND THE LIQUID CONTROL OBTAINED AND THE USE THEREOF FOR MONITORING REACTIONS - Google Patents
METHOD FOR PRODUCING A LIQUID CONTROL WHICH SIMULATES THE PRESENCE OF UROBILINOGEN, AND THE LIQUID CONTROL OBTAINED AND THE USE THEREOF FOR MONITORING REACTIONSInfo
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Description
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DR. ING. E. HOFFMANN (1930-1976) . DIPL.-ING. W.EITLE · DR. RER. NAT. K. HOFFMANN . DIPL.-I NG. W. LEHNDR. ING. E. HOFFMANN (1930-1976). DIPL.-ING. W.EITLE DR. RER. NAT. K. HOFFMANN. DIPL.-I NG. W. LEHN
DIPl.-ING. K. FOCHSlE · DR. RER. NAT. B. HANSEN ARABELLASTRASSE 4 (STERN HAUS) · D-8000 MONCH EN 81 · TELEFON (089) 911087 · TELEX 05-29i19 (PATHE)DIPl.-ING. K. FOCHSLE DR. RER. NAT. B. HANSEN ARABELLASTRASSE 4 (STERN HAUS) D-8000 MONCH EN 81 TELEFON (089) 911087 TELEX 05-29i19 (PATHE)
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Miles Laboratories, Inc., Elkhart,Indiana / USAMiles Laboratories, Inc., Elkhart, Indiana / USA
Verfahren zur Herstellung einer flüssigen Kontrolle, mit welcher die Anwesenheit von ürobilinogen simuliert wird sowie die so erhaltene flüssige Kontrolle und deren Verwendung für ÜberwachungsreaktionenProcess for the production of a liquid control, with which the presence of urobilinogen is simulated as well as the liquid control thus obtained and its use for monitoring reactions
Die Erfindung betrifft allgemein das Gebiet der Überwachungszubereitungen und insbesondere Zubereitungen zur überwachung von Ürobilinogen in Kontroll- und Demonstrationsproben.The invention relates generally to the field of surveillance preparations and in particular to preparations for surveillance of Ürobilinogen in control and demonstration samples.
Die Verwendung von physiologischen flüssigen Kontrollen-in der Laboratoriumspraxis ist allgemein bekannt und spielt eine Rolle in der Routine der klinischen chemischen Laboratorien. Z.B. haben Kontrollen in jüngerer Zeit bei Urinanalysen an Bedeutung zugenommen und ihr wesentlicher Einfluss, die Qualität bei der Untersuchung von Körperflüssigkeiten zu verbessern,The use of physiological liquid controls-in laboratory practice is well known and plays a role in the routine of clinical chemistry laboratories. For example, controls have recently become more important in urine analyzes and their main influence, quality improve in the examination of body fluids,
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wird jetzt voll verstanden. In den USA wird durch die "Clinical Laboratories Improvement Act" von 1967 (42 U.S.C. 263a)und die dazu gehörenden Ausführungsvorschriften bestimmt, dass Laboratorien, die vom Department of Health, Education and WeIfare anerkannt werden wollen, für die qualitative Ur inanalyse täglich Kontrollversuche mit Urin vornehmen müssen. Die Verwendung von Kontroll- oder Standardlösungen ist auch von Bedeutung für die Ausbildung und Überwachung bzw. Bewertung von dem Laboratoriumspersonal.is now fully understood. In the USA, the "Clinical Laboratories Improvement Act" of 1967 (42 U.S.C. 263a) and the associated implementing regulations determine that laboratories appointed by the Department of Health, Education and WeIfare want to be recognized for the qualitative original analysis have to carry out daily control tests with urine. The use of control or standard solutions is also possible of importance for the training and monitoring or evaluation of the laboratory personnel.
Daher ist eine einfache Zubereitung einer verlässlichen gleichmassigen Kontroll- und Demonstrationslösung zunehmend bedeutungsvoll. Solche Lösungen sind für häufige Vergleiche, die zur Sicherstellung der richtigen Verfahrensweise erforderlich sind, zur Überwachung der Reagensqualität und dergleichen geeignet.Hence, a simple preparation is a reliable, uniform one Control and demonstration solution increasingly important. Such solutions are for frequent comparisons that are necessary to make sure proper procedure, reagent quality monitoring, and the like.
Es sind verschiedene natürliche und künstliche Körperflüssigkeiten und Überwachungs-Zusammensetzungen entwickelt worden, einschliesslich Überwachungsstandards für das Gebiet der Urinchemie. Dazu gehören Tek-Check -1-4 Kontrollen (Kombination von natürlichen und künstlichen Bestandteilen in lyophylisierten Humanurinproben, hergestellt von Arnes Company, Division of Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Indiana 46515/USA). Auch in der US-PS 3 9o1 655 werden lycphilisierte Humanurinkontrollen, hergestellt aus gesammsltem normalem Humanurin beschrieben.There are various natural and artificial body fluids and monitoring compositions have been developed, including monitoring standards for the field of Urine chemistry. This includes Tek-Check -1-4 controls (combination of natural and artificial ingredients in lyophilized Human urine samples manufactured by Arnes Company, Division of Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Indiana 46515 / USA). Even in US-PS 3,9o1,655 lycphilized human urine controls, made from total normal human urine.
Diese Urinkontrollen sind somit in den entsprechenden Zubereitungen bisher hauptsächlich aus echtem Urin gewonnen worden, und dies macht das Sammeln und Verarbeiten von grossen Volumina an Spenderurin erforderlich. Eine künstliche Simulierung von Urobilinogen ist bei keiner der bekannten Kontrollen vorhanden.These urine controls are therefore in the corresponding preparations so far mainly obtained from real urine, and this requires the collection and processing of large volumes of donor urine. An artificial simulation of Urobilinogen is not present in any of the known controls.
Der Nachweis von Urobilinogen ist seit Jahren durch die Ehrlich-Reaktion durchgeführt worden unter Verwendung von p-Dimethylaminobenzaldehyd unter Ausbildung einer Farbreaktion mit demEvidence of urobilinogen has been through the Ehrlich reaction for years carried out using p-dimethylaminobenzaldehyde with the formation of a color reaction with the
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Urobilinogen. Andere Substanzen, die mit Ehrlich-Reagens in einem flüssigen System reagieren und die dabei gebildeten Farben sind die folgenden: Eine rote Farbe ergeben Porphobilinogen, Opsopyrrol-dicarbonsäure, Opsopyrrol-carbonsäure, Melanogen (5,6-Dihydroxyindil) Melagin, Ausscheidungsprodukte von Allyl-Urobilinogen. Other substances that work with Ehrlich's reagent in one liquid system react and the colors formed are the following: A red color results in porphobilinogen, opsopyrrole dicarboxylic acid, Opsopyrrole carboxylic acid, melanogen (5,6-dihydroxyindil) melagin, excretion products of allyl
ß
sioproylacetamid oder Sedormid (Roche Inc., Mutley, N.J./USA),
Indol-3-essigsäure, Phylloerytrhinogen, Indol und Indolderivaten
Urorosein und Indirubin; Harnstoff und Indican ergeben eine gelbe Farbe; Tryptohpan bewirkt eine Orangefärbung; Indoxylsulfat eine
orange-braune Farbe; Bilirubin eine grüne Farbe und Skatol eine blaue Farbe. Auch Sulfonamide, Phenotiazine und Meprobamatmetabolite,
Procain, Indolessigsäure und 5-Hydroxyindolessigsäure sollen mit Ehrlich-Reagens reagieren.ß
sioproylacetamide or Sedormid (Roche Inc., Mutley, NJ / USA), indole-3-acetic acid, phylloerytrhinogen, indole and indole derivatives urorose and indirubin; Urea and indican make a yellow color; Tryptohpan causes an orange color; Indoxyl sulfate an orange-brown color; Bilirubin a green color and skatole a blue color. Sulfonamides, phenotiazines and meprobamate metabolites, procaine, indole acetic acid and 5-hydroxyindole acetic acid are also said to react with Ehrlich's reagent.
Die Kontrollen des Standes der Technik zur Bestimmung der Gegenwart von urobilinogen sind bisher auf solche beschränkt gewesen, bei denen Urobilinogen selbst verwendet wurde. Bei Versuchen zum Nachweis von Urobilinogen in Lösungen wurde p-Dimethylaminobenzaldehyd verwendet, wobei man feststellte, dass er mit verschiedenen anderen Verbindungen reagiert.The prior art controls to determine the present of urobilinogen have heretofore been limited to those in which urobilinogen itself has been used. When trying p-Dimethylaminobenzaldehyde was used to detect urobilinogen in solutions used, which has been found to react with various other compounds.
Es ist ein Ziel der Erfindung, ein Verfahren zum Simulieren der Gegenwart von Urobilinogen und eine Uribilinogen-Kontrollzusammensetzung zu zeigen.It is an object of the invention to provide a method for simulating the presence of urobilinogen and a uribilinogen control composition to show.
Ein weiteres Ziel der Erfindung ist es, eine Kontrolle zu zeigen,, welche Urobilinogen simuliert und die über lange Zeiten lagerungsfähig ist und zwar auch, wenn sie als Lösung vorliegt.Another object of the invention is to show a control, which simulates urobilinogen and which can be stored for a long time, even if it is available as a solution.
Noch sin Ziel der Erfindung ist es, eine Kontrolle zu zeigen, durch welche Urobilinogen simuliert wird, und die besonders geeignet ist zur Umsetzung mit p-Dimethylaminobenzaldehyd in einem im Handel erhältlichen Eintauch- und -ablese-Test, wobei man einen hohen Grad von Farbübereinstimmung mit der durch Urobilinogen selbst gebildeten Farbreaktion erhält.Another aim of the invention is to show a control by which urobilinogen is simulated and which is particularly suitable is for reaction with p-dimethylaminobenzaldehyde in one commercially available immersion and reading test using a a high degree of color match with the color reaction formed by urobilinogen itself.
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Weitere Ziele und Einzelheiten der Erfindung werden nachfolgend gezeigt, ebenso wie die bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung. Further objects and details of the invention are shown below, as are the preferred embodiments of the invention.
Fig. 1 ist eine grafische Darstellung von Daten, wie sie in Beispiel 2 für erfindungsgemässe Zusammensetzungen im Zusammenhang mit Urobilinogen-Lösungen von 2 Ehrlich-Einheiten, Farbstandards für 2 Ehrlich-Einheiten und andere Substanzen, die mit Ehrlich-Reagens reaktiv sind, gezeigt werdne.Fig. 1 is a graphical representation of data as shown in Example 2 for compositions according to the invention in connection with urobilinogen solutions of 2 Ehrlich units, color standards for 2 Ehrlich units and other substances that are reactive with Ehrlich's reagent.
Fig. 2 ist eine grafische Darstellung für die im Beispiel 2 gezeigten Daten und zwar für Zusammensetzungen gemäss der Erfindung im Vergleich zu Urobilinogen-Lösungen von ^Ehrlich-Einheiten Λ Farbstandards von 4 Ehrlich-Einheiten und anderen Substanzen, die mit Ehrlich-Reagens reaktiv sind.Fig. 2 is a graph for the results shown in Example 2 data and that for compositions according to the invention compared to urobilinogen solutions ^ Ehrlich units Λ color standards of 4 Ehrlich's units and other substances which are reactive with Ehrlich's reagent .
Fig. 3 ist eine grafische Darstellung für die in Beispiel 2 gezeigten Daten und Zusammensetzungen gemäss der Erfindung im Vergleich mit ürobilinogen-Lösungen von · 8 Ehrlich-Einheiten, Farbstandards von 8 Ehrlich-Einheiten und anderen Substanzen, die reaktiv mit Ehrlich-Reagens sind.FIG. 3 is a graph for those shown in Example 2. FIG Data and compositions according to the invention in comparison with urobilinogen solutions of 8 Ehrlich units, Color standards of 8 Ehrlich units and other substances reactive with Ehrlich reagent.
Fig. 4 ist eine grafische Darstellung der in Beispiel 2 angegebenen Daten für Zusammensetzungen gemäss der Erfindung im Vergleich zu Urobilinogen-Lösungen von 12 . Ehrlich-Einheiten, Farbstandards für 12 Ehrlich-Einheiten und anderen Substanzen, die. reaktiv mit Ehrlich-Reagens sind.FIG. 4 is a graphical representation of that given in Example 2. FIG Data for compositions according to the invention compared to urobilinogen solutions from FIG. 12. Honest units, Color standards for 12 Ehrlich units and other substances that. are reactive with Ehrlich's reagent.
Erfindungsgemäss wird eine Urobilinogen-Kontrollzusammensetzung, eine Vorrichtung für die Kontrollzubereitung und ein Verfahren zur Herstellung einer flüssigen Kontrolle, in welcher die Gegenwart von Urobilinogen simuliert wird, gezeigt. Auch ein Verfahren zum Simulieren der Anwesenheit von Urobilinogen in einerAccording to the invention, a urobilinogen control composition, an apparatus for the control preparation and a method for preparing a liquid control in which the presence is simulated by urobilinogen. Also a method of simulating the presence of urobilinogen in a
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Flüssigkeit und eine Flüssigkontrolle,in welcher die Gegenwart von Urobilinogen simuliert wird, wird gezeigt. Die Urobilinogen-Kontrollzusaminensetzung enthält wenigstens eine Verbindung, die mit p-Dimethylaminobenzaldehyd unter Bildung einer die Anwesenheit von Urobilinogen simulierenden Farbänderung reagierbar ist und welche die folgende Formel hat:Liquid and a liquid control in which the present simulated by urobilinogen is shown. The urobilinogen control composition contains at least one compound that reacts with p-dimethylaminobenzaldehyde to form the presence is responsive to urobilinogen simulating color change and which has the following formula:
worin R1 und R„, die gleich oder verschieden sind, H oder ein substituiertes oder unsubstituiertes Cj-C^-Alkyl und R3 H, ein substituiertes oder unsubstituiertes C-,-C.-Alkyl, Alkoxy oder Halogen bedeuten, mit dem Proviso, dass R.., R2 und R, nicht gleichzeitig Wasserstoff sein können. Bevorzugt unter diesen substituierten Indolen sind 5-Methoxyindol und 2-Methyl-5-methoxyindol. Die Kontrollzusammensetzung wird vorteilhaft auf einen Träger gebracht, z.B. eine Matrix oder eine Tablette, um so eine Kontrollvorrichtung zu ergeben. Das Verfahren befasst die Zugabe einer vorbestimmten Menge der erfindungsgemässen Zusammensetzung zu einer vorbestimmten Menge einer geeigneten Lösung, z.B. einer physiologischen oder Körperflüssigkeit.wherein R 1 and R ", which are identical or different, are H or a substituted or unsubstituted Cj-C ^ -alkyl and R 3 is H, a substituted or unsubstituted C -, - C.-alkyl, alkoxy or halogen, with the Proviso that R .., R 2 and R cannot be hydrogen at the same time. Preferred among these substituted indoles are 5-methoxyindole and 2-methyl-5-methoxyindole. The control composition is advantageously applied to a carrier, such as a matrix or tablet, so as to provide a control device. The method deals with the addition of a predetermined amount of the composition according to the invention to a predetermined amount of a suitable solution, for example a physiological or body fluid.
Die vorher definierten Verbindungen werden in die Zusaiilmensetzung in einer Menge eingegeben, die ausreicht, um einen Kontrollkonzentrationsbereich von etwa o,oo1 g/dl bis etwa o,1 g/dl zu ergeben und similieren infolge dessen einen Urobilinogen-Konzentrationsbereich von etwa 2 bis etwa 12 .Ehrlich-Einheiten. The previously defined connections are included in the composition entered in an amount sufficient to establish a control concentration range of about 0.01 g / dl to about 0.1 g / dl and as a result simulate a urobilinogen concentration range from about 2 to about 12 Ehrlich units.
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Die Verwendung dieser substituierten Indole hat eine Reihe von unerwarteten überraschenden Eigenschaften zur Folge.The use of these substituted indoles results in a number of unexpected, surprising properties.
Dazu gehört die Stabilität in Lösungen, verglichen zu Urobilinogen selbst, das sehr labil ist. Darüber hinaus reagieren die erfindungsgemäss hergestellten Kontrollen mit handelsüblichen Testvorrichtungen zum Nachweisen von ürobilinogen und ergeben eine überlegene Farbübereinstiminung mit der Farbe, die durch die Reaktion von Ürobilinogen selbst gebildet wird.This includes stability in solutions compared to urobilinogen itself that is very unstable. In addition, the controls produced according to the invention react with commercially available controls Test devices for the detection of urobilinogen and give a superior color match with the color produced by the reaction is formed by Ürobilinogen itself.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung besteht darin, ein Verfahren zur Herstellung der Kontrollzubereitungsvorrichtung zu zeigen, und dieses Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass man ablösbar einen Träger mit einer vorbestimmten Konzentration der Kontrollzusammensetzung imprägniert.Another aspect of the invention is to show a method of making the control preparation device, and this process is characterized by being detachable impregnating a carrier with a predetermined concentration of the control composition.
Es ist ersichtlich, dass die vorliegende Erfindung zur Herstellung einer Kontrolle gedacht ist und nicht zum Prüfen einer Probe, Die Kontrolle kommt nicht in Berührung oder irgendwie zusammen mit einer zu prüfenden Probe.It can be seen that the present invention is intended for the preparation of a control and not for testing a sample, The control does not come into contact or in any way with a sample to be tested.
Die nachfolgend verwendeten spezifischen Ausdrücke beziehen sich nur auf die jeweilige Ausführungsfonu der Erfindung und dienen der Beschreibung, ohne den Umfang der Erfindung zu beschränken.The specific terms used below relate to each other only on the respective embodiment of the invention and serve the description without restricting the scope of the invention.
Die verwendeten Reagentien sind im Handel erhältlich von Eastman Kodak Co., Organic Chemicals Dep», Rochester, New York 1465o/üSA, und auch weiteren Lieferanten.The reagents used are commercially available from Eastman Kodak Co., Organic Chemicals Dep., Rochester, New York 1465o / USA, and also other suppliers.
Die Lösungen, weiche die Zusammensetzung gemäss der Erfindung enthalten, können verwendet werden, um eine Probe einer Körperflüssigkeit, wie Urin,, welche ürobilinogen enthält, zu simulieren. Die Bildung eines chromophoren Komplexes mit der sich ergebenden Farbänderung wird dann bei der Untersuchung bewirkt.The solutions that make up the composition according to the invention may be used to obtain a sample of a body fluid, how to simulate urine, which contains urobilinogen. The formation of a chromophoric complex with the resulting color change is then effected upon examination.
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Die Zusammensetzung wird jedoch vorteilhaft in eine feste Zubereitung einverleibt, mit welcher man dann später die flüssige Kontrolle (Überwachungslösung) herstellen kann.However, the composition is advantageously incorporated into a solid preparation, with which you can then later can produce liquid control (monitoring solution).
Feste Zubereitungen, wie sie nachfolgend beschrieben werden, ■ werden vorzugsweise auf eine Trägermatrix im Streifenformat aufgebracht. Der Ausdruck "Trägermatrix" soll hier Flüssigkeiten aufnehmende und keine Flüssigkeiten aufnehmende Matrices bedeuten, die unlöslich sind und ihre strukturelle Integrität beibehalten, wenn man sie Wasser oder physiologischen Flüssigkeiten aussetzt. Geeignete Wasser aufnehmende Matrices sind Papier, Cellulose, Holz, synthetische Harzvliese, gewebte und nichtgewebte Stoffe und dergleichen. Nicht Feuchtigkeit aufnehmende Matrices schliessen organoplastische Stoffe, wie Polystyrol, Polypropylen und dergleichen ein. Wird eine Feuchtigkeit aufnehmende Matrix verwendet, so wird diese Matrix vorzugsweise, z.B. durch ein doppelseitiges Klebeband an einen unlöslichen Träger, wie einen organoplastischen Streifen, für die einfache Handhabung angebracht.Solid preparations as described below, ■ are preferably applied to a carrier matrix in strip format. The term "carrier matrix" is used here to refer to liquids mean imbibing and non-liquid absorbing matrices that are insoluble and their structural integrity retained when exposed to water or physiological fluids. Suitable water-absorbing matrices are Paper, cellulose, wood, synthetic resinous nonwovens, woven and nonwoven fabrics, and the like. Not moisture absorbent Matrices include organoplastic materials such as polystyrene, polypropylene, and the like. Becomes a moisture absorbing matrix is used, this matrix is preferably e.g. by double-sided adhesive tape to an insoluble support such as an organoplastic strip for the easy handling attached.
Alternativ können die erfindungsgemässen Zusammensetzungen auch in einen Träger einverleibt werden in Form einer verpressten oder verformten Tablette, welche die üblichen Trägerstoffe enthält.Alternatively, the compositions according to the invention can also are incorporated into a carrier in the form of a compressed or molded tablet which contains the usual carrier substances.
Gezeigt wird auch ein Verfahren zur Herstellung einer solchen Vorrichtung, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man einen Träger, wie eine Matrix oder ein Tablettierungsmittel, damit in Berührung bringt. Erfolgt das in Berührungbringen durch Imprägnieren mit einer Lösung der erfindungsgemässen Zusammensetzung, so wird der so in Berührung gebrachte Träger getrocknet. Ausser einer Imprägnierung kann die Vorrichtung gemäss der Erfindung aber auch durch andere geeignete Verfahren, wie Drucken oder Sprühen, der Zusammensetzung auf ein Substrat oder eine matrix hergestellt werden. Das bei der Herstellung von LösungenAlso shown is a method for producing such a device, which is characterized in that one Brings carrier, such as a matrix or a tabletting agent, into contact therewith. This is done by bringing into contact Impregnating with a solution of the composition according to the invention, the carrier thus brought into contact is dried. In addition to impregnation, the device according to the invention but also by other suitable methods, such as printing or spraying, the composition on a substrate or a matrix can be produced. That in the production of solutions
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bei diesem Verfahren verwendete Lösungsmittel kann Wasser, eine physiologische Lösung, organische Lösungsmittel und Mischungen davon sein.Solvents used in this method can be water, a physiological solution, organic solvents, and mixtures be of it.
Gemäss einer v/eiteren Ausführungsform der Erfindung wird ein Verfahren zum Simulieren der Anwesenheit von Urobilinogen in einer flüssigen Kontrollprobe gezeigt, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein vorbestimmten Volumen eines flüssigen Lösungsmittels mit einem Träger in Berührung bringt, auf den in ablösbarer Form eine vorbestimmte Menge einer Kontrollzusammensetzung gemäss der Erfindung aufgebracht worden ist, und dass man die Kontrollzusammensetzung in das Lösungsmittel in einer Menge, die ausreicht, eine Kontroilösung der gewünschten Konzentration zu ergeben, abgeben lässt. Die Menge an Lösungsmittel in der Kontrollzusammensetzung wird so ausgewählt, dass nach der Freigabe der Kontrollzusammensetzung von der Trägermatrix in das Lösungsmittel in einem Masse, dass eine Gleichgewichtskonzentration davon in der Flüssigkeit und in der Matrix vorliegt, die erhaltene Konzentration die gewünschte Kontrollösung ermöglicht.According to a further embodiment of the invention, a A method for simulating the presence of urobilinogen in a liquid control sample is shown, characterized in that is that a predetermined volume of a liquid solvent is brought into contact with a carrier on which in releasable form, a predetermined amount of a control composition has been applied according to the invention, and that the control composition in the solvent in a Amount that is sufficient to give a control solution of the desired concentration can be dispensed. The amount of solvent in the control composition is selected so that after the release of the control composition from the carrier matrix into the Solvent to such an extent that there is an equilibrium concentration thereof in the liquid and in the matrix, the obtained concentration enables the desired control solution.
Im Gegenteil zu den Kontrollzubereitungen des Standes der Technik, bei denen man Urobilinogen selbst verwenden musste, weist die erfindungsgemässe Vorrichtung eine verbesserte Stabilität auf. Diese Stabilität kann noch weiter dadurch verbessert werden, dass man die Komponenten einer Kontrollzusammensetzung getrennt auf ein Substrat aufbringt und durch eine geeignete Verpackung des fertigen Produktes in eine Folie, einen ein Trocknungsmittel enthaltenden Behälter und dergleichen. Die physikalische Trennung der Komponenten kann man erzielen durch Drucken, Einkapseln einer oder mehrerer Komponenten, durch die Verwendung von getrennten Matrices oder Substraten für die verschiedenen Komponenten oder indem man nicht verträgliche Komponenten auf entgegengesetzte Seiten eines Substrates aufbringt.In contrast to the control preparations of the prior art, in which one had to use urobilinogen itself, the invention has Device improved stability. This stability can be further improved by that one applies the components of a control composition separately to a substrate and through suitable packaging the finished product into a film, a container containing a desiccant, and the like. The physical separation One of the components can be achieved by printing, encapsulating one or multiple components, through the use of separate matrices or substrates for the various components or by applying incompatible components to opposite sides of a substrate.
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Für alle Farben innerhalb der Skala des Tristimulos-Farbsystems dienen die Mengen der zu deren Bildung benötigten drei Stimuli (rot, grün und blau) als Mass der gebildeten Farbe. Diese Mengen werden Tristimulus-Werte genannt und die Messung erfolgt mit einem handelsüblichen Tristimulus-Colorimeter. Man beobachtet die Tristimulus-Werte für jeweils rot, grün und blau. Zwei Farben unterscheiden sich durch die relative Gesamtdifferenz in ihren Tristimulus-Werten. Diese Differenz {& £.) wird als der Grad, in dem sie in der Farbskala voneinander getrennt sind, ausgedrückt.For all colors within the scale of the Tristimulos color system, the quantities of the three stimuli (red, green and blue) required for their formation serve as a measure of the color formed. These quantities are called tristimulus values and the measurement is made with a commercially available tristimulus colorimeter. Observe the tristimulus values for red, green and blue, respectively. Two colors differ in the relative total difference in their tristimulus values. This difference {& £.) Is expressed as the degree to which they are separated from each other on the color scale.
Die Gesetze der Farbübereinstimmung durch additive Mischung von Farbstimuli kann durch einfache algebraische Gleichungen ausgedrückt und dreidimensional geometrisch beschrieben werden, wobei man den Tristimulus-Farb-Raum erhält. Die Berechnungen, mittels welcher die in Beispiel II erzielten Farbräume abgeleitet wurden, sind bekannt und werden von Judd et al in Color in Business, Science and Industry, 3. Ausgabe, John Wiley & Sons, N.Y., N.Y. (1975) beschrieben.The laws of color matching through additive mixing of color stimuli can be expressed by simple algebraic equations and are described geometrically in three dimensions, whereby the tristimulus color space is obtained. The calculations, by means of which the color spaces obtained in Example II were derived are known and are described by Judd et al in Color in Business, Science and Industry, 3rd Edition, John Wiley & Sons, N.Y., N.Y. (1975).
In den nachfolgenden Beispielen wird die in den Ansprüchen beschriebene Erfindung beschrieben. Für den Fachmann ist ersichtlich, dass er Änderungen, Austausche und dergleichen hinsichtlich der Parameter und der Bestandteile vornehmen kann, sofern dies erforderlich ist, ohne von der Erfindung abzuweichen. The invention described in the claims is described in the following examples. It is evident to the person skilled in the art that he can make changes, replacements and the like with regard to the parameters and the components, insofar as this is necessary without departing from the invention.
Es wurde ein Vergleich durchgeführt hinsichtlich der Fähigkeit gewisser Verbindungen, die Gegenwart von ürobilinogen in einer Flüssigprobe zu simulieren.A comparison was made regarding the ability of certain compounds to detect the presence of urobilinogen in a Simulate liquid sample.
Die verschiedenen in Tabelle I angegebenen Verbindungen wurdenThe various compounds listed in Table I were
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in von Spendern stammenden ürinen, die vorgeprüft worden waren auf Freiheit von üribilinogen oder Bilirubin, in solchen Mengen gelöst, dass sie die angegebenen Konzentrationen ergaben. Diese so hergestellten Lösungen wurden durch kurzes Eintauchen von UROBILISTIX -Reagensteststreifen (Arnes Company, a Division of Miles Laboratories,, Inc., Elkhart, Indiana 46515/USA) geprüft. Die wiedergegebenen Ergebnisse geben die auf dem Reagensstreifen nach 60 Sekunden abgelesene Farbe an, die verglichen wurde gegenüber einer Standardfarbkurve, die den Teststreifen beilag.in donor-derived urines that had been pre-screened on freedom from uribilinogen or bilirubin, in such amounts solved so that they gave the indicated concentrations. These solutions prepared in this way were briefly immersed in UROBILISTIX reagent test strips (Arnes Company, a Division of Miles Laboratories ,, Inc., Elkhart, Indiana 46515 / USA). Results reported indicate the color read on the reagent strip after 60 seconds that were compared was against a standard color curve, which the test strips enclosed.
Verbindung UHDBILISTiX -Connection UHDBILISTiX -
Teststreifen ■ __ (Ehrlich-Einheiten) Test strips ■ __ (Ehrlich units)
2-Chloroindol (orl g/dl) 42-chloroindole (o r lg / dl) 4
2,5-Diiaethylindol (o, 1 g/dl) 122,5-Diiaethylindole (0.1 g / dL) 12
2,5-Dimethylindol (o,oo2 g/dl) 22,5-dimethylindole (0.02 g / dl) 2
2-Methyiiridol (o,1 g/dl) 122-Methyiiridol (0.1 g / dl) 12
2-Methylindol (o,o1 g/dl) 82-methylindole (o, o1 g / dl) 8
2-Methylindol (o,oo1 g/dl) 22-methylindole (o, oo1 g / dl) 2
5-Methöxyindol (o,1 g/dl "" . 125-methoxyindole (0.1 g / dl "". 12
1,2-Dimethy lindes 1 io,1 g/dl 121,2-Dimethy lindes 1 io, 1 g / dl 12
2-Methyl-5-iüethoxyindol (o,1 g/dl 122-methyl-5-iethoxyindole (0.1 g / dl 12
Aus diesen Ergebnifjsen wird ersichtlich, dass die KontrollzusaitiraensetEurig -srirksam ist, einen breiten Bereich von klinisch bedeutsamen Urofcilinogsn-Werteri zu simulieren =From these results it can be seen that the control approval setEurig - is effective a wide range of clinical to simulate significant Urofcilinogsn values =
-0300 1 4/05 80-0300 1 4/05 80
Die Farbübereinstimmung der erf indungsgemässen Kontroll zusammensetzung mit Urobilinogen- und anerkannten Farbstandards wurde gemessen. Die erfindungsgemässe Zusammensetzungen wurden auch mit anderen Verbindungen, von denen bekannt ist, dass sie mit Ehrlich-Reagens reagieren, verglichen hinsichtlich der Übereinstimmung der Farbproduktion mit der von Bilirubin und von Farbstandards.The color match of the control composition according to the invention with urobilinogen and recognized color standards was measured. The compositions of the invention were also compared to other compounds known to react with Ehrlich's reagent for agreement of color production with that of bilirubin and color standards.
Tristimulus-Werte und die Koordinaten im Farbraum wurden für die gedruckten Urobilinogen-Farbstandards, Urobilinogen inTristimulus values and the coordinates in color space were used for the printed urobilinogen color standards, urobilinogen in
fä Lösung umgesetzt mit dem Urobilinogenteil von UROBILISTIX Teststreifen, Kontrollzusammensetzung gemäss der Erfindung, die mit UROBILISTIX -Teststreifen umgesetzt wurden und mitfä solution implemented with the urobilinogen part of UROBILISTIX test strips, Control composition according to the invention, which were implemented with UROBILISTIX test strips and with
(Ei(Egg
anderen Substanzen, die mit UROBILISTIX -Teststreifen reagierten, berechnet. Die geprüften Materialien, ihre Konzentrationen in g/dl, sofern angezeigt, und die Farbraumkoordinaten für diese werden in Tabelle II gezeigt.other substances that reacted with UROBILISTIX test strips. The tested materials, their concentrations in g / dl, if indicated, and the color space coordinates for these are shown in Table II.
Geprüfter GegenstandTested item
Farbraum-KoordinatenColor space coordinates
Gedruckter Farbstandard 2 Ehrlich-Einheiten 4 Ehrlich-Einheiten 8 Ehrlich-Einheiten 12 Ehrlich-EinheitenPrinted color standard 2 Ehrlich units 4 Ehrlich units 8 Ehrlich units 12 Ehrlich units
76,15 4,81 5o,9776.15 4.81 5o, 97
67,49 1o,91 52,9167.49 1o, 91 52.91
62,62 22,33 39,4862.62 22.33 39.48
54,42 31,87 34,8o54.42 31.87 34.8o
0300U/05800300U / 0580
ürobilinogen in urinurobilinogen in urine
2 Ehrlich-Einheiten 7o,32 3,12 52,932 Ehrlich units 7o, 32 3.12 52.93
4 Ehrlich-Einheiten 64,61 14,74 43,644 Ehrlich units 64.61 14.74 43.64
8 Ehrlich-Einheiten 56,39 26,26 35,668 Ehrlich units 56.39 26.26 35.66
12 Ehrlich-Einheiten 52,48 32,11 31,3612 Ehrlich units 52.48 32.11 31.36
5-Methoxyindol (o,o1 g/dl) 2-Methylindol (o,o1 g/dl) 1,1-Dimethylindol (o,oo1 g/dl) 2,5-Dimethylindol (o,o1 g/dl) 2,5-Dimethylindol (o,oo2 g/dl) 5-Methoxyindol (o,o2 g/dl)5-methoxyindole (o, o1 g / dl) 2-methylindole (o, o1 g / dl) 1,1-dimethylindole (o, oo1 g / dl) 2,5-dimethylindole (o, o1 g / dl) 2,5-dimethylindole (o, oo2 g / dl) 5-methoxyindole (o, o2 g / dl)
Indol-3-Essigsäure (o,1 g/dl 86,9o -2o,o1 76,o3Indole-3-acetic acid (0.1 g / dl 86.9o -2o, o1 76, o3
3-Methylindol (o,1 g/dl 87,44 -22,8o 68,193-methylindole (0.1 g / dl 87.44-22.8o 68.19
Bilirubin (o,1 g/dl . 76,5o 11,12 79,36Bilirubin (0.1 g / dl. 76.5o 11.12 79.36
Sulfathiozol (o,I g/dl) 87,19 -7,32 96,66Sulfathiozole (0.1 g / dl) 87.19 -7.32 96.66
Indoxylsulfat (o,1 g/dl) 88,3 -22,5 76,1Indoxyl sulfate (0.1 g / dl) 88.3 -22.5 76.1
Die Farbdifferenzeinheiten (A ξ.) zwischen den gedruckten ürobilinogen-Farbstandards und Ürobilinogen, den Kontrollzusammensetzungen und den anderen gelösten Substanzen in negativen Urinen werden in Tabelle III gezeigt.The color difference units (A ξ.) Between the printed urobilinogen color standards and urobilinogen, the control compositions, and the other solutes in negative urines are shown in Table III.
0300U/05800300U / 0580
Untersuchter Gegenstand Farbdifferenz-Examined Item Color Difference
Einheitenunits
2 2 Ehrlich-Einheiten, gedruckter StandardEhrlich units, printed standard
Urobilinogen 2 Ehrlich-Einheiten 6,38Urobilinogen 2 Ehrlich units 6.38
2,5-Dimethylindol (o,oo2 g/dl) 3,1 ο2,5-dimethylindole (o, oo2 g / dl) 3.1 o
Indol-3-essigsäure (o,1 g/dl 36,86Indole-3-acetic acid (0.1 g / dl 36.86
Indol (o,o1 g/dl) 31,75Indole (0.01 g / dl) 31.75
Bilirubin (o,a g/dl) 44,84Bilirubin (o, a g / dl) 44.84
4 Ehrlich-Einheiten, gedruckter Standard4 Ehrlich units, printed standard
urobilinogen 4 Ehrlich-Einheiten 1o,21urobilinogen 4 Ehrlich units 1o, 21
5-Methoxy-indol (o,oa g/dl 11,475-methoxy-indole (o, oa g / dl 11.47
Indol-3-essigsäure (o,1 g/dl 44,13Indole-3-acetic acid (0.1 g / dl 44.13
Bilirubin (o,1 g/dl) 43,o5Bilirubin (0.1 g / dL) 43.0 5
8 Ehrlich-Einheiten, gedruckter Standard 8 honest units, printed standard
urobilinogen 8 Ehrlich-Einheiten 8,3ourobilinogen 8 Ehrlich units 8.3o
5-Methoxyindol (o,o2 g/dl) 1o,725-methoxyindole (o, o2 g / dl) 1o, 72
Indol-3-essigsäure (o,1 g/dl 69,96Indole-3-acetic acid (0.1 g / dl 69.96
12 Ehrlich-Einheiten, gedruckter Standard12 Ehrlich units, printed standard
ürobilincgcn 12 Ehrlich-Einheiten 3,96ürobilincgcn 12 Ehrlich units 3.96
2-Methylindol (o,1 g/dl 9,572-methylindole (0.1 g / dl 9.57
Indoxylsulfat (o,1 g/dl) 76,25Indoxyl sulfate (0.1 g / dl) 76.25
Die Ergebnisse in Tabelle III werden grafisch in den Fig. 1-4 hinsichtlich der Simulierung von verschiedenen Ehrlich-Einheits-Niveaus dargestellt. Die gedruckten Farbstandards vonThe results in Table III are graphed in Figures 1-4 in terms of simulating various Ehrlich unit levels shown. The printed color standards of
0300U/05800300U / 0580
_ 17 _ 292S833_ 17 _ 292S833
UROBILISTIX -Teststreifen (A) und einer Lösung mit der angezeigten Ehrlich-Einheit-Konzentration von tatsächlich vorhandenem Urobilinogen (C) werden mit verschiedenen Ausfuhrungsformen der Kontrollzusammensetzung und den anderen Substanzen, von denen bekannt' ist, dass sie mit Ehrlich-Reagens reagieren, verglichen.UROBILISTIX test strips (A) and a solution with the displayed one Ehrlich unit concentrations of urobilinogen (C) actually present are used in different embodiments of the Control composition and the other substances known to react with Ehrlich's reagent.
In Fig. 1 werden gedruckte Farbstandards für 2 Ehrlich-Einheiten und Urobilinogen-Lösungen mit einer Konzentration von 2 Ehrlich-Einheiten verglichen mit einer erfindungsgemässen Kontrollzusammensetzung, die so formuliert war, dass sie o,oo2 g/dl 2,5-Dimethylindol (B) enthielt und mit weiteren Substanzen, in diesem Fall mit o,1 g/dl Indol-3-essigsäure (1), o,o1 g/dl Indol (2) und o,1 g/dl Bilirubin (3).Fig. 1 shows printed color standards for 2 Ehrlich units and urobilinogen solutions with a concentration of 2 Ehrlich units compared to a control composition according to the invention, which was formulated in such a way that it contained o, oo2 g / dl 2,5-dimethylindole (B) and with other substances, in this case with 0.1 g / dl indole-3-acetic acid (1), 0.1 g / dl Indole (2) and 0.1 g / dl bilirubin (3).
In Fig. 2 werden gedruckte Farbstandards für 4 Ehrlich-Einheiten und Urobilinogen-Lösungen mit einer Konzentration von 4 Ehrlich-Einheiten mit einer Kontrollzusammensetzung gemäss der Erfindung verglichen, die so formuliert war, dass sie o,1 g/dl 5-Methoxyindol enthielt, und anderen Substanzen, in diesem Fall o,1 g/dl Indol-3-essigsäure (1) und o,1 g/dl Bilirubin (3).In Fig. 2, printed color standards for 4 Ehrlich units and urobilinogen solutions with a concentration of 4 Ehrlich units are shown compared with a control composition according to the invention which was formulated to contain 0.1 g / dl of 5-methoxyindole contained, and other substances, in this case 0.1 g / dl indole-3-acetic acid (1) and 0.1 g / dl bilirubin (3).
In Fig. 3 werden gedruckte Farbstandards für 8 Ehrlich-Einheiten und Urobilinogen-Lösungen mit einer Konzentration von 8 Ehrlich-Einheiten mit einer Kontrollzusammensetzung gemäss der vorliegenden Erfindung verglichen, die so formuliert war, dass sie o,o2 g/dl 5-Methoxyindol (B) enthielt und mit anderen Substanzen, in diesem Fall o,1 g/dl Indol-3-essigsäure (T).In Fig. 3, printed color standards for 8 Ehrlich units and urobilinogen solutions with a concentration of 8 Ehrlich units are shown compared to a control composition according to the present invention formulated to contain Contained o, o2 g / dl of 5-methoxyindole (B) and with other substances, in this case 0.1 g / dl of indole-3-acetic acid (T).
In Fig.- 4 werden gedruckte Farbstandards für 12 Erhlich Einheiten und Urobilinogen-Lösungen mit einer Konzentration von 12 Ehrlich-Einheiten mit einer Kontrollzusammensetzung gemäss der Erfindung verglichen, die so formuliert war, dass sie o,1 g/dl 2-Methylindol (B) enthielt und mit anderen Substanzen, in diesem Fall o,1 g/dl Indoxy!sulfat (4)..'In Fig. 4 there are printed color standards for 12 Erhlich units and urobilinogen solutions with a concentration of 12 Ehrlich units with a control composition according to FIG Invention compared, which was formulated to contain 0.1 g / dl of 2-methylindole (B) and with other substances in in this case 0.1 g / dl indoxy! sulfate (4) .. '
030014/0580030014/0580
— ι ο —- ι ο -
Wie aus den Farbdifferenz-Einheiten, die in den grafischen Darstellungen für die Kontrollzusaitunensetzung gemäss der Erfindung gezeigt werden, hervorgeht, liegen hervorragend übereinstimmende Farbwerte im Vergleich zu anderen Substanzen vor.As from the color difference units that are used in the graphical representations for the control composition according to the invention is shown, there are excellent matching color values compared to other substances.
Es ist ersichtlich, dass die Erfindung hier verhältnismässig genau beschrieben worden ist, dass aber der Fachmann eine Reihe von Änderungen vornehmen kann, ohne vom Umfang der Erfindung abzuweichen.It is evident that the invention has been described here relatively precisely, but that the person skilled in the art is one Can make a number of changes without departing from the scope of the invention.
0300U/05800300U / 0580
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Claims (11)
und Ro H, ein substituiertes oder unsubstituiertes Cj-C.-Alkyl, substituiertes oder unsubstituiertes C-.-C. Alkoxy oder Halogen bedeuten, mit dem Proviso, dass R^, R_ und R3 nicht gleichzeitig Wasserstoff sein können.contains, wherein R ^ and R 3 can be the same or different and H or substituted or unsubstituted C 1 -C 4 -AlJCyI
and Ro H, a substituted or unsubstituted Cj-C.-alkyl, substituted or unsubstituted C-. -C. Alkoxy or halogen mean, with the proviso that R ^, R_ and R 3 cannot be hydrogen at the same time.
enthält.6. The method according to claim 1, characterized in that the composition is 5-methoxyindole
contains.
vorbestimmte iiage einer Zusammensetzung, die wenigstens7. A method for simulating the presence of urobilinogen in a liquid, characterized in that one is added to a predetermined amount of the liquid
predetermined iiage of a composition, the at least
enthält, zugibt.a compound of the general formula according to claim 1
contains, admits.
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
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