DE2809598C2

DE2809598C2 -

Info

Publication number: DE2809598C2
Application number: DE2809598A
Authority: DE
Inventors: Sumio Prof. Dr. Umezawa; Hamao Prof. Dr. Umezawa; Kuniaki Prof. Dr. Tokio/Tokyo Jp Tatsuta
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1977-03-09
Filing date: 1978-03-06
Publication date: 1990-07-12
Also published as: CA1119588A; US4196280A; DE2809598A1; GB1587685A

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf neue Makrolactonderivate, die als Zwischenprodukte zur Herstellung neuer Makrolidserienantibiotika verwendbar sind, und auf ein neues Verfahren zur Herstellung der Makrolactonderivate durch Abspalten von Zuckerresten aus Makrolidantibiotika. Makrolidantibiotika, die weit verbreitet für die Behandlung von Erkrankungen verwendet werden, die durch Infektion mit verschiedenen Mikroorganismen verursacht werden, sind aus einem Aglykonrest und Zuckerresten zusammengesetzt. Es ist schon versucht worden, das antimikrobielle Spektrum, die antimikrobielle Aktivität und den medizinischen Effekt der Makrolidantibiotika durch Überführen ihres Zuckerrestes in einen anderen Zuckerrest von anderen Makrolidantibiotika oder ihren Derivaten oder in andere Zuckerreste, die bisher nicht in Makrolidantibiotika oder ihren Derivaten bekannt gewesen sind, oder durch Einführen anderer Substituenten als Zuckern zu verbessern. Jedoch, wenn die Aldehydgruppe und die Hydroxylgruppe in einer sterisch geschlossenen Seite miteinander an dem Aglykon eines Makrolidantibiotikums angeordnet sind, wird ein Acetal in dem Molekül des Aglykons gebildet, um das Aglycon nach der Entfernung des Zuckerrestes zu stabilisieren. Hierdurch ergeben sich Schwierigkeiten, in das Aglykon nach Entfernung des Zuckerrestes einen gewünschten neuen Zuckerrest oder andere Substituenten einzuführen. Daher besteht der Wunsch nach der Entwicklung eines Verfahrens, durch welches es ermöglicht wird, einen Teil oder ganze Zuckerreste aus Makrolidantibiotika abzuspalten, um Zwischenprodukte zu erhalten, die für die Herstellung von neuen Makrolidantibiotika durch die Einführung neuer Zuckerreste oder Substituenten geeignet sind.The present invention relates to new macrolactone derivatives, as intermediates for the production of new macrolide series antibiotics are usable and on a new process for the preparation of the macrolactone derivatives by splitting off Sugar residues from macrolide antibiotics. Macrolide antibiotics, the widely used for the treatment of diseases be caused by infection with various microorganisms are caused by an aglycon residue and sugar residues composed. The antimicrobial has already been tried Spectrum, antimicrobial activity and medical Effect of macrolide antibiotics by transferring their Sugar residues in another sugar residue from other macrolide antibiotics or their derivatives or in other sugar residues that not previously known in macrolide antibiotics or their derivatives or by introducing substituents other than Improve sugars. However, if the aldehyde group and the Hydroxyl group in a sterically closed side with each other on which aglycon of a macrolide antibiotic are arranged an acetal formed in the molecule of the aglycon to the aglycon stabilize after removing the sugar residue. Hereby Difficulties arise in the aglycone after removal of the Sugar residue a desired new sugar residue or other substituents introduce. Therefore there is a desire for development a method by which it is possible to To split off part or all of the sugar residues from macrolide antibiotics, to get intermediates for manufacturing of new macrolide antibiotics by introducing new ones Sugar residues or substituents are suitable.

Als Ergebnis von verschiedenen Untersuchungen, um das vorstehend genannte Problem zu lösen, haben die Erfinder Derivate der Aglykone von Makrolidantibiotika gefunden, an die neue Zucker oder Substituenten sehr leicht - ohne Bildung intramolekularen Acetals - eingeführt werden können.As a result of various studies, the above To solve the problem mentioned, the inventors have derivatives of Aglycones of macrolide antibiotics found to the new sugar or substituents very easily - without intramolecular formation Acetals - can be introduced.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Herstellung des Aglykons einer Makrolidverbindung gemäß Anspruch 1 und Aglykone einer Makrolidverbindung gemäß Anspruch 2. The invention therefore relates to a method for Preparation of the aglycon of a macrolide compound according to claim 1 and Aglycones of a macrolide compound according to claim 2.

Als Ausgangsverbindung, die für die vorliegende Erfindung geeignet sind, können solche Makrolidserienantibiotika benutzt werden wie Leucomycine, Tetrahydroleucomycine, Josamycin, YL-704-Gruppe, SF-837-Gruppe-Espinomycine, Spiramycine, Malidomycine, Carbomycine, Tylosin, Angolamycin, Cirramycine, Rosamicin, M-4365 G₂, von denen ein Teil oder die ganzen Zuckerreste abgespalten worden sind und von denen die Aldehydgruppen durch ein cyclisches Acetal oder ein Thioacetal geschützt worden sind.As a starting compound suitable for the present invention macrolide series antibiotics can be used such as Leucomycine, Tetrahydroleucomycine, Josamycin, YL-704 group, SF-837 Group Espinomycine, Spiramycine, Malidomycine, Carbomycine, Tylosin, angolamycin, cirramycine, rosamicin, M-4365 G₂, some or all of the sugar residues have been split off are and of which the aldehyde groups by a cyclic Acetal or a thioacetal have been protected.

Bisher ist als ein Aglykonrest, welcher sich von Makrolidserienantibiotika ableitet, die Verbindung bekannt, die folgende Formel besitzt (J. Antibiot., 27, 147-149 (1974)) So far, as an aglycon residue, which differs from macrolide series antibiotics derives the compound known the following formula (J. Antibiot., 27, 147-149 (1974))

Wie jedoch bereits vorstehend gezeigt worden ist, treten wegen der Stabilisierung durch die Bildung eines intramolekularen Acetals zwischen der Hydroxylgruppe in der 5-Position und der Aldehydgruppe in der 18-Position Schwierigkeiten auf bei der Herstellung von verschiedenen Derivaten durch Einführen von verschiedenen Substituenten in die Hydroxylgruppe in der 5-Position, die die bedeutendste Position für eine Substitution durch Zuckerreste in allen Makrolidserienantibiotika mit pharmazeutischen Aktivitäten darstellt. Weitere Aglykone sind in der DE-OS 24 44 381 beschrieben.However, as has already been shown above, due to stabilization through the formation of an intramolecular acetal between the 5-position hydroxyl group and the aldehyde group in the 18-position manufacturing difficulties of different derivatives by introducing different ones Substituents in the hydroxyl group in the 5-position, which is the most important position for substitution with sugar residues in all macrolide series antibiotics with pharmaceutical Represents activities. Other aglycons are in the DE-OS 24 44 381 described.

Wenn die Verbindung dieser Erfindung ein Aglykon ist und die Aldehydgruppe in der 18-Position (im Falle eines 16gliedrigen Ringes) oder in der 17-Position (im Falle eines 17gliedrigen Ringes) durch ein cyclisches Acetal oder ein Thioacetal geschützt worden ist, kann die benachbarte Hydroxylgruppe in der 5-Position im freien Zustand existieren und sogar andere Zucker oder Substituenten können leicht in die Hydroxylgruppe eingeführt werden. Ein derartiges Verfahren ist bisher nicht bekannt gewesen und ist zuerst durch die Erfinder aufgefunden worden. Dies bedeutet, daß es die Erfindung ermöglicht, semisynthetische Makrolidserienantibiotika herzustellen und dadurch den Weg eröffnet, viele weitere semisynthetische verwendbare Makrolide anzufertigen.When the compound of this invention is an aglycone and the Aldehyde group in the 18-position (in the case of a 16-membered Ring) or in the 17 position (in the case of a 17-membered Ringes) protected by a cyclic acetal or a thioacetal the neighboring hydroxyl group in the 5-position exist in the free state and even other sugars or substituents can be easily introduced into the hydroxyl group will. Such a method is not yet known and was first found by the inventors. This means that the invention enables it to be semi-synthetic Producing macrolide series antibiotics and thereby opening the way many other semisynthetic macrolides that can be used to make.

Als verwendbare Reaktionsreagenzien zur Bildung cyclischer Acetale oder Thioacetale in dieser Erfindung werden als Diole Äthylenglycol, Propylenglycol, 1,3-Propandiol, 2,3-Butandiol genannt. Als Dithiole sind 1,2-Äthan-dithiol, 2-Methyl-1,3-propandithiol geeignet. Als Mercaptoalkohole mit Hydroxylgruppe und Mercaptogruppe werden Mercaptoäthanol, Mercaptopropanol genannt. Weiterhin werden als die geschützte Aldehydgruppe, die durch Reaktion mit der Aldehydgruppe gebildet wird, die 1,3-Dioxolan-2-ylgruppe, 1,3-Dithiolan-2-ylgruppe, 1,3-Dithian-2-ylgruppe, 1,3-Oxathiolan-2-ylgruppe genannt.As usable reaction reagents for the formation of cyclic Acetals or thioacetals in this invention as diols ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-propanediol, Called 2,3-butanediol. As are dithiols 1,2-ethane dithiol, 2-methyl-1,3-propanedithiol suitable. As Mercapto alcohols with hydroxyl group and mercapto group Mercaptoethanol, called mercaptopropanol. Furthermore, as the protected aldehyde group by Reaction with the aldehyde group is formed, the 1,3-dioxolan-2-yl group, 1,3-dithiolan-2-yl group, 1,3-dithian-2-yl group, 1,3-oxathiolan-2-yl group called.

Die Umsetzungen gemäß der Erfindung werden durch das nachfolgende Reaktionsschema dargestelltThe implementations according to the invention are illustrated by the following Reaction scheme shown

In der vorstehenden Formel bedeutet D ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe; und A, B, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ besitzen die gleiche, schon vorstehend genannte Bedeutung.In the above formula, D represents a hydrogen atom or a hydroxyl group; and have A, B, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ and R⁶ the same meaning already mentioned above.

Die erste Stufe des Verfahrens dieser Erfindung, das heißt der Schutz der Aldehydgruppe, wird durch Umsetzen des Ausgangsmaterials mit der Formel (2) und einem Diol, einem Dithiol oder einem Mercaptoalkohol der im Anspruch 1 genannten Art in Gegenwart einer organischen Säure in einem wasserfreien organischen Lösungsmittel, wie z. B. Acetonitril, Chloroform durchgeführt. Die Umsetzung verläuft glatt bei Zimmertemperatur, ohne zu erhitzen. Beispiele für die in dieser Reaktion benutzte organische Säure sind p-Toluolsulfonsäure, Methansulfonsäure.The first stage of the process of this invention, i.e. the Protection of the aldehyde group is achieved by reacting the starting material with the formula (2) and a diol, a dithiol or a mercapto alcohol of the type mentioned in claim 1 in the presence of an organic acid in an anhydrous organic solvent, such as. B. acetonitrile, Chloroform performed. The implementation is proceeding smooth at room temperature without heating. Examples of that Organic acids used in this reaction are p-toluenesulfonic acid, Methanesulfonic acid.

In der Reaktionsstufe 1, wenn die Gruppe B eine Acylmycarosyloxygruppe ist, wird die Gruppe abgespalten und gleichzeitig in die Gruppe D (=OH) umgewandelt.In reaction stage 1 when group B is an acylmycarosyloxy group the group is split off and at the same time in the group D (= OH) converted.

Die Reaktionsstufe 2 wird durchgeführt durch Umsetzen der Verbindung mit der Formel (3) und Perbenzoesäure, Peressigsäure, vorzugsweise m-Chlorperbenzoesäure, um die entsprechende N-Oxydverbindung zu bilden, und dann wird die N-Oxydverbindung mit Acetanhydrid, Propionanhydrid, Benzoeanhydrid behandelt. Die Reaktion wird in wasserfreien organischen Lösungsmitteln, wie z. B. Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Acetonitril durchgeführt. Es wird bevorzugt, die Umsetzung bei Zimmertemperatur in der ersten Stufe und unter Erhitzen in der darauffolgenden Stufe auszuführen.Reaction stage 2 is carried out by reacting the compound with the formula (3) and Perbenzoic acid, peracetic acid, preferably m-chloroperbenzoic acid to the corresponding N-oxide compound form, and then using the N-oxide compound Acetic anhydride, propionic anhydride, benzoic anhydride treated. The reaction is carried out in anhydrous organic Solvents such as B. chloroform, carbon tetrachloride, Acetonitrile performed. It is preferred that Implementation at room temperature in the first stage and under Perform heating in the subsequent stage.

Das N-Oxydzwischenprodukt, welches in der ersten Stufe der Umsetzung gebildet wird, kann isoliert werden, jedoch kann es ohne Isolierung aus dem Reaktionsgemisch für die darauffolgende Umsetzung Verwendung finden.The N-oxide intermediate, which is in the first stage of the reaction can be isolated, but it can be formed without Isolation from the reaction mixture for the subsequent reaction Find use.

Das gebildete Reaktionsprodukt der Formel (1) wird aus dem Reaktionsgemisch isoliert und nach üblichen Methoden gereinigt wie z. B. Extraktion, Säulenchromatographie, präparative Dünnschichtchromatographie.The reaction product of formula (1) formed is from the reaction mixture isolated and cleaned by usual methods such as B. extraction, column chromatography, preparative thin layer chromatography.

Die Verbindungen der Formel (1) sind neue Verbindungen und werden wirtschaftlich als Zwischenprodukte zur Herstellung verschiedener Makrolidserienantibiotika verwendet. The compounds of formula (1) are new Connections and are used economically as intermediates Manufacture of various macrolide series antibiotics used.

Example 1

In 25 ml wasserfreiem Acetonitril wurde 5,14 g (6,23 Millimole) Carbomycin B aufgelöst. Zu der Lösung wurden 25 ml wasserfreies Äthylenglycol, 1,60 (9,30 Millimole) wasserfreie p-Toluolsulfonsäure unter Rühren des Gemisches bei Zimmertemperatur zugefügt und anschließend für eine Stunde stehen gelassen. Nach beendeter Reaktion wurde das Reaktionsgemisch durch Zugabe von 800 mg (9,52 Millimole) Natriumhydrogencarbonat neutralisiert. Das Reaktionsgemisch wurde dann in 150 ml wässerige gesättigte Natriumhydrogencarbonatlösung gegossen, und das Produkt wurde zweimal mit je 250 ml Äthylacetat extrahiert. Die erhaltenen Äthylacetatschichten wurden vereinigt, dann zweimal mit je 100 ml und dann einmal mit 50 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Dann wurde zur Trockne eingeengt. Das erhaltene Konzentrat wurde einer Säulenchromatographie unterworfen unter Verwendung einer Säule, gefüllt mit 300 g Wako Gel C 200 (Handelsname) und einem 2 : 1 : 1 Gemisch aus Äthylacetat, Aceton und Äthanol als Entwicklungslösungsmittel.5.14 g (6.23 millimoles) was added to 25 ml of anhydrous acetonitrile. Carbomycin B dissolved. 25 ml of anhydrous was added to the solution Ethylene glycol, 1.60 (9.30 millimoles) anhydrous p-toluenesulfonic acid added while stirring the mixture at room temperature and then left for an hour. After finished The reaction mixture became reaction by adding 800 mg (9.52 millimoles) sodium hydrogen carbonate neutralized. The reaction mixture was then poured into 150 ml of saturated sodium hydrogen carbonate aqueous solution poured, and the product was made twice extracted with 250 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate layers obtained were combined, then twice with 100 ml each and then once with 50 ml of saturated aqueous sodium chloride solution washed and dried over anhydrous sodium sulfate. Then it was evaporated to dryness. The concentrate obtained was subjected to column chromatography using a Column filled with 300 g Wako Gel C 200 (trade name) and one 2: 1: 1 mixture of ethyl acetate, acetone and ethanol as the developing solvent.

Die ersten austretenden Fraktionen enthalten 2′-Hydroxyäthyl-4-O-isovalerylmycarosid (Rohproduktgewicht 1,65 g) und dann werden 2,87 g des gewünschten Produktes Demycarosil-Carbomycin B aus der Säule abgegeben. Das Produkt wurde aus einem Gemisch aus Aceton und n-Hexan umgefällt. Es wurden 2,56 g (Ausbeute 64,1%) des farblosen festen, gewünschten Produktes Demycarosyl-carbomycin-B-äthylenacetal erhalten.The first escaping fractions contain 2'-hydroxyethyl-4-O-isovalerylmycarosid (Raw product weight 1.65 g) and then 2.87 g of the desired product Demycarosil-Carbomycin B from delivered to the column. The product was made up of a mixture Acetone and n-hexane fell over. 2.56 g (yield 64.1%) of the colorless solid, desired product Demycarosyl-carbomycin-B-ethylene acetal receive.

Die physikochemischen Eigenschaften des Produktes werden nachfolgend angegeben:The physicochemical properties of the product are as follows specified:

(i) Melting point 102-106 ° C
(ii) [ α ] + 13 ° (C 1.3, chloroform
(iii) RF value
0.35 (silica gel thin layer chromatography) developing solvent: 2: 1: 1 mixture of ethyl acetate, acetone and ethanol)
(iv)
Elemental analysis for C₃₂H₅₁NO₁₂
Calculated: C 59.89%, H 8.01%, N 2.18%;
Found: C 59.84%, H 7.91%, N 2.06%.
(v) UV max 279 nm. (ε 23,000, methanol)
(vi) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
2.02 (s, 3 H, 3-OAc), 2.51 (s, 6 H, -N (CH₃) ₂),

Zusätzlich wurde das im ersten Ablauf erhaltene 2′-Hydroxyäthyl-4-O-isovalerylmycarosid einer Säulenchromatographie unter Verwendung von 165 g Wako Gel C-300 (Handelsname) und eines 3 : 1 Gemisches aus Chloroform unter Aceton als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 1,54 g (85,7%) sirupöser Mycaroserest mit der folgenden Strukturformel erhalten:In addition, the 2'-hydroxyethyl-4-O-isovaleryl mycaroside obtained in the first run using a column chromatography of 165 g of Wako Gel C-300 (trade name) and a 3: 1 mixture from chloroform under acetone as a developing solvent. There were 1.54 g (85.7%) syrupy mycarose residue with of the following structural formula:

Die physikochemischen Eigenschaften des Produktes sind folgende:The physicochemical properties of the product are as follows:

(i) [ α ] -60 ° (c. 1.0, chloroform)
(ii) RF value
0.26 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 3: 1 benzene-acetone mixture)
0.32 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 3: 1 chloroform-acetone mixture)
(iii)
Elemental analysis for C₁₄H₂₆O₆
Calculated: C 57.91%, H 9.03%;
Found: C 58.06%, H 8.83%.

Example 2

In 25 ml wasserfreiem Acetonitril wurden 5,5 g (6,23 Millimole) 10-Propionyljosamycin (Molekulargewicht 883) aufgelöst. Zu der Lösung wurden 25 ml wasserfreies Äthylenglycol, 1,60 g (9,30 Millimole) wasserfreie p-Toluolsulfonsäure zu dem Gemisch unter Rühren bei Zimmertemperatur hinzugefügt. Den Reaktionsansatz ließ man noch eine Stunde stehen. Nach beendeter Reaktion wurde das Reaktionsgemisch durch Zugabe von 800 mg (9,52 Millimole) Natriumhydrogencarbonat neutralisiert und in 150 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung gegossen. Der Ansatz wurde zweimal mit je 250 ml Äthylacetat extrahiert. Die gesammelten Äthylacetatschichten wurden vereinigt und zweimal mit je 100 ml und einmal mit 50 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Es wurde zur Trockne eingeengt. Es wurden 5,9 g Rohprodukt erhalten.5.5 g (6.23 millimoles) were placed in 25 ml of anhydrous acetonitrile. 10-Propionyljosamycin (molecular weight 883) dissolved. To the Solution became 25 ml of anhydrous ethylene glycol, 1.60 g (9.30 Millimoles) of anhydrous p-toluenesulfonic acid to the mixture below Stirring added at room temperature. The reaction approach they were left to stand for an hour. After the reaction was over the reaction mixture by adding 800 mg (9.52 millimoles) Neutralized sodium bicarbonate and saturated in 150 ml poured aqueous sodium bicarbonate solution. The approach was extracted twice with 250 ml of ethyl acetate. The collected Ethyl acetate layers were combined and twice with each 100 ml and once with 50 ml of saturated aqueous sodium chloride solution washed and dried over anhydrous sodium sulfate. It was evaporated to dryness. 5.9 g of crude product were obtained receive.

Dann wurden 3,0 g des so erhaltenen Rohproduktes einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer mit 150 g Wako Gel C-200 (Handelsname) gefüllten Säule und eines 2 : 1 : 1 Gemisches aus Äthylacetat, Aceton und Äthanol als Eluiermittel unterworfen. Zuerst wurde 2′-Hydroxyäthyl-4-O-isovalerylmycarosid abgegeben und dann wurden die Fraktionen, die Demycarosyl-10-propionyl-josamycin-äthylenacetal enthielten, aus der Säule geliefert. Das letzte Produkt wurde durch eine Silikagelsäulenchromatographie (mit einer Füllung aus Wako Gel C-200 (Handelsname) unter Verwendung eines 6 : 1 Gemisches aus Äthylacetat und Methanol als Eluiermittel) unterworfen. Es wurde zur Trockne eingeengt und aus einem Gemisch aus Aceton und Hexan umgefällt. Es wurden 590 mg weißes Pulver aus Demycarosyl-10-propionyljosamycin-äthylenacetal erhalten.Then 3.0 g of the crude product thus obtained was subjected to column chromatography using one with 150 g Wako Gel C-200 (Trade name) filled column and a 2: 1: 1 mixture Subjected to ethyl acetate, acetone and ethanol as eluents. First 2'-hydroxyethyl-4-O-isovaleryl mycaroside was released and then the fractions that were demycarosyl-10-propionyl-josamycin-ethylene acetal contained, delivered from the column. The last product was by silica gel column chromatography (with a filling of Wako Gel C-200 (trade name) using a 6: 1 mixture of ethyl acetate and methanol as Eluent). It was evaporated to dryness and reprecipitated from a mixture of acetone and hexane. There were 590 mg white powder of demycarosyl-10-propionyljosamycin ethylene acetal receive.

Die physikochemischen Eigenschaften des Produktes werden nachstehend angegeben:The physicochemical properties of the product are shown below specified:

(i) RF value
0.22 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 2: 1: 1 ethyl acetate-acetone-ethanol mixture)
(ii) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
(iii) mass spectrum: m / e 699 (M⁺)

Example 3

In 2,5 ml wasserfreiem Acetonitril wurden 525 mg (0,62 Millimole) Spiramycin I aufgelöst. Es wurden zu der Lösung 2,5 ml wasserfreies Äthylenglykol, 160 mg (0,93 Millimole) wasserfreie p-Toluolsulfonsäure zu dem Gemisch unter Rühren bei Zimmertemperatur hinzugefügt. Der Reaktionsansatz wurde eine Stunde stehen gelassen. Nach beendeter Umsetzung wurde das Reaktionsgemisch durch Zugabe von 80 mg (0,95 Millimole) Natriumhydrogencarbonat neutralisiert und in 15 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung gegossen. Die Lösung wurde zweimal mit je 25 ml Äthylacetat extrahiert. Die gesammelten Äthylacetatschichten wurden vereinigt und zweimal mit je 10 ml und einmal mit 5 ml wässeriger gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Die Lösung wurde zur Trockne eingeengt (Rohproduktgewicht 570 mg).In 2.5 ml of anhydrous acetonitrile, 525 mg (0.62 millimoles) Spiramycin I dissolved. 2.5 ml of anhydrous was added to the solution Ethylene glycol, 160 mg (0.93 millimoles) anhydrous p-toluenesulfonic acid to the mixture with stirring at room temperature added. The reaction mixture was left to stand for one hour. After the reaction had ended, the reaction mixture was passed through Addition of 80 mg (0.95 millimoles) of sodium hydrogen carbonate neutralized and in 15 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution poured. The solution was washed twice with 25 ml of ethyl acetate extracted. The ethyl acetate layers were collected combined and twice with 10 ml and once with 5 ml aqueous saturated sodium chloride solution and washed over anhydrous Dried sodium sulfate. The solution was evaporated to dryness (Raw product weight 570 mg).

Dann wurden 570 mg Rohproduktes einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines 2 : 1 : 1 Gemisches aus Äthylacetat, Aceton und Äthanol als Eluiermittel unterworfen.Then 570 mg of crude product was subjected to silica gel column chromatography using a 2: 1: 1 mixture of ethyl acetate, Acetone and ethanol as eluent.

Die ersten abgegebenen Fraktionen enthielten 2′-Hydroxyäthylmycarosid. Dann folgten aus der Säule die Fraktionen, die Demycarosylspiromycin-I-äthylenacetal enthielten. Die letzten Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt und durch eine Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines 6 : 1 Gemisches aus Äthylacetat und Methanol gereinigt. Es wurde umgefällt aus einem Gemisch aus Aceton und Hexan. Es wurde weißes Pulver aus Demycarosylspiramycin-I-äthylenacetal erhalten. Das Produkt besitzt den Rf-Wert 0,18 bei einer Silikageldünnschichtchromatographie (vorbeschichtete Platte (Kieselgel 60 F-254), Entwicklungslösungsmittel: ein 2 : 1 : 1 Äthylacetat-Aceton-Äthanol Gemisch).The first fractions released contained 2'-hydroxyethyl mycaroside. Then the fractions followed from the column, the Demycarosylspiromycin-I-ethylenacetal contained. The last Fractions were pooled and concentrated and by silica gel column chromatography using a 6: 1 mixture purified from ethyl acetate and methanol. It fell over a mixture of acetone and hexane. It became white powder Demycarosylspiramycin-I-ethylene acetal obtained. The product owns the Rf 0.18 in silica gel thin layer chromatography (pre-coated plate (silica gel 60 F-254), developing solvent: a 2: 1: 1 ethyl acetate-acetone-ethanol mixture).

Das kernmagnetische Resonanzspektrum (CDCl₃), δ (ppm) des Produktes zeigt folgende Werte:The nuclear magnetic resonance spectrum (CDCl₃), δ (ppm) of the product shows the following values:

In dem Hydrolysat, erhalten durch Behandlung mit 1%iger Chlorwasserstoffsäure während 10 Stunden, konnte keine Mycarose mittels Dünnschichtchromatographie nachgewiesen werden. Im kernmagnetischen Resonanzspektrum verschwand das Signal 9,86 ppm (1 H, s, -CHO), und das Signal 3,73 ppm (4 H, m, -OCH₂CH₂O) erschien neu.In the hydrolyzate obtained by treatment with 1% hydrochloric acid for 10 hours, no mycarose could be used Thin layer chromatography can be detected. In nuclear magnetic Resonance spectrum, the signal disappeared 9.86 ppm (1 H, s, -CHO), and the signal 3.73 ppm (4 H, m, -OCH₂CH₂O) appeared New.

Example 4

(a) In 30 ml wasserfreiem Chloroform wurden 2,79 g (4,34 Millimole) 3-Acetoxy-5-[3,6-dideoxy-3-dimethylamino-β-D-gluco-pyranosyloxy]-6-(1,3-dioxalan-2-yl)methyl-4-methoxy-8-methy-l-9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olid aufgelöst. Dann wurden 790 mg (1,05 Moläquivalente) m-Chlorperbenzoesäure zu der Lösung unter Rühren hinzugefügt.(a) In 30 ml of anhydrous chloroform, 2.79 g (4.34 millimoles) of 3-acetoxy-5- [3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β -D-glucopyranosyloxy] -6- (1, 3-dioxalan-2-yl) methyl-4-methoxy-8-methy-l-9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olide dissolved. Then 790 mg (1.05 molar equivalents) of m-chloroperbenzoic acid was added to the solution with stirring.

Nach 10 Minuten wurde die Vollständigkeit der Umsetzung durch eine Untersuchung mittels Dünnschichtchromatographie bestätigt. Dann wurde das Reaktionsgemisch zur Trockne eingeengt. Das Konzentrat wurde einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Silikagelsäule und eines 4 : 1 Gemisches aus Chloroform und Methanol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen, um das Reaktionsprodukt zu isolieren. Hierdurch wurden 2,85 g der N-Oxydverbindung erhalten.After 10 minutes the completeness of the implementation was checked an investigation by means of thin layer chromatography confirmed. Then the reaction mixture was evaporated to dryness. The concentrate was subjected to column chromatography using a Silica gel column and a 4: 1 mixture of chloroform and Subject methanol as a developing solvent to the reaction product isolate. This gave 2.85 g of the N-oxide compound receive.

(b) In 25 ml wasserfreiem Choroform wurden 2,85 g der N-Oxydverbindung aufgelöst und 1,35 g (3 Moläquivalente) Acetanhydrid hinzugefügt. Das Gemisch wurde eine Stunde durch Erhitzen unter Rückfluß gehalten.(b) In 25 ml of anhydrous choroform were 2.85 g of the N-oxide compound dissolved and 1.35 g (3 molar equivalents) of acetic anhydride added. The mixture was heated for one hour Kept reflux.

Nach beendeter Umsetzung wurde das Reaktionsgemisch stehen gelassen, um auf Zimmertemperatur abzukühlen. Dann wurden 20 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung zu dem Reaktionsgemisch hinzugefügt, um überschüssiges Acetanhydrid zu zersetzen und zu neutralisieren. Dann wurde das Produkt einmal mit 100 ml und zweimal mit je 50 ml Chloroform extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt und einmal mit 20 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen. Dann wurden die gebildeten Chloroformschichten gesammelt, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingeengt. Das so gebildete Konzentrat wurde einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Silikagelfüllung und eines 2 : 1 Gemisches aus n-Hexan und Aceton als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Die Fraktionen, die das Produkt enthielten, wurden gesammelt und unter vermindertem Druck eingeengt. Hierdurch wurden 712 mg gelbes festes 3-Acetoxy-5-hydroxy-6-(1,3-dioxalan-2-yl)methyl-4-methoxy-8-methyl-9--oxo-10,12-hexadecadien-15-olid erhalten.After the reaction had ended, the reaction mixture was left to stand, to cool down to room temperature. Then 20 ml became saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution to the reaction mixture added to decompose excess acetic anhydride and neutralize. Then the product was once with 100 ml and extracted twice with 50 ml of chloroform. The extracts were combined and once with 20 ml of saturated aqueous sodium chloride solution washed. Then the chloroform layers formed collected, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness. The concentrate so formed was subjected to column chromatography using a silica gel fill and a 2: 1 mixture of n-hexane and acetone as Subjected to developing solvents. The fractions that are Contained product were collected and under reduced Pressure reduced. This gave 712 mg of yellow solid 3-acetoxy-5-hydroxy-6- (1,3-dioxalan-2-yl) methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadecadiene-15- olid receive.

Durch weitere Reinigung des so erhaltenen Produktes durch Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines 4 : 1 Gemisches aus Chloroform und Aceton und eines 1 : 2 Gemisches aus Benzol und Äthylacetat wurde ein weißes gereinigtes Produkt erhalten.By further purification of the product thus obtained by silica gel column chromatography using a 4: 1 mixture from chloroform and acetone and a 1: 2 mixture of benzene and A white purified product was obtained in ethyl acetate.

Die physikochemischen Eigenschaften des Produktes sind die folgenden:The physicochemical properties of the product are the following:

(i) Melting point 72-75 ° C
(ii) [ α ] + 10 ° (c 1.0, chloroform
(iii) RF value
0.4 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 1: 2 benzene / ethyl acetate mixture),
0.35 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 2: 1 hexane-acetone mixture), and
0.4 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 4: 1 chloroform-acetone mixture).
(iv)
Elemental analysis for C₂₄H₃₆O₉
Calculated: C 61.52%, H 7.74%;
Found: C 61.74%, H 7.84%.
(v) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
1.20, 1.28 (d, 3 H × 2, -CH₃ in the 8-position and -CH₃ in the 15-position)
2.02 (s, 3 H, -OCOCH₃ in the 3 position)
3.58 (s, 3 H, -OCH₃ in the 4-position) 6.35 (d, 1H, H in the 10 position).
(vi) UV max.
279 nm (ε , 22 100) (methanol)
(vii) IR (KBr), cm -1
1730 (ester), 1676, 1630 (double bond)

Wenn das vorstehend genannte Produkt mit Essigsäureanhydrid in Pyridin umgesetzt wurde, wurden nadelförmige Kristalle eines Produktes erhalten, indem die Hydroxylgruppe in der 5-Position des Makrolidringes acetyliert war. Die Eigenschaften des acetylierten Produktes sind die folgenden:If the above product with acetic anhydride in Pyridine was reacted, needle-shaped crystals of a product obtained by the hydroxyl group in the 5-position of the Macrolide ring was acetylated. The properties of the acetylated Product are the following:

(i) Melting point 220.5-221.5 ° C
(ii) [ α ] 0 (c. 10, chloroform
(iii) RF value
0.4 (silica gel thin layer chromatography developing solvent: 2: 1 hexane-acetone mixture),
(iv)
Elemental analysis for C₂₆H₃₈O₁₀
Calculated: C 61.16%, H 7.50%;
Found: C 61.18%, H 7.48%.
(v) UV max.
279 nm (ε 21 500) (methanol)

Reference example 1

In 5 ml wasserfreiem Nitromethan wurden 100 mg 3-Acetoxy-5- hydroxy-6-(1,3-dioxolan-2-yl)methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo- 10,12-hexadecadien-15-olid aufgelöst, welches nach Beispiel 4(b) erhalten worden war. Zu der Lösung wurde 303 mg Mercuricyanid und 1 g Drylite (Handelsname) zugegeben. Das Gemisch wurde kräftig durchgeführt. Dann wurde 358 mg (5 Moläquivalente) 2,4-O- Diacetyl-1-brom-1,3,6-trideoxy-3-(dimethylamino)-D-glucose-hydrobrom-id zu dem Gemisch zugegeben, unterteilt in fünf Portionen, im Verlauf von vier Stunden bei Zimmertemperatur. Das erhaltene Gemisch wurde 10 Stunden kräftig durchgerührt. Dann wurde das Reaktionsgemisch in 10 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung gegossen. Die Lösung wurde dreimal mit je 10 ml Äther extrahiert. Die Ätherextrakte wurden vereinigt, mit Wasser gewaschen, getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der erhaltene Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines 2 : 1 Gemisches aus Hexan und Aceton als Eluiermittel unterworfen. Es wurden 78 mg Festkörper erhalten, der das Reaktionsprodukt enthielt. Das Produkt wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines 1 : 3 Gemisches aus Chloroform und Äthylacetat als Eluiermittel unterworfen. Das von der Säule abgegebene Produkt wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung eines Gemisches aus Chloroform und Aceton als Eluiermittel unterworfen. Dann wurde das erhaltene feste Produkt aus einem Gemisch aus Äther und Hexan ausgefällt. Es wurden 24 mg farbloses festes 3-Acet- oxy-5-[2,4-O-diacetyl-1,3,6-trideoxy-3-dimethylamino-β-D-gluco- pyranosyloxy]-6-[1,3-dioxolan-2-yl]methyl-4-methoxy-8-methyl- 9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olid erhalten.In 5 ml of anhydrous nitromethane were 100 mg of 3-acetoxy-5-hydroxy-6- (1,3-dioxolan-2-yl) methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadecadiene-15 solid dissolved, which had been obtained according to Example 4 (b). 303 mg of mercuricyanide and 1 g of drylite (trade name) were added to the solution. The mixture was vigorously carried out. Then, 358 mg (5 mole equivalents) of 2,4-O-diacetyl-1-bromo-1,3,6-trideoxy-3- (dimethylamino) -D-glucose-hydrobromo-id was added to the mixture, divided into five portions , over four hours at room temperature. The resulting mixture was stirred vigorously for 10 hours. Then the reaction mixture was poured into 10 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution. The solution was extracted three times with 10 ml ether each time. The ether extracts were combined, washed with water, dried and concentrated under reduced pressure. The residue obtained was subjected to silica gel column chromatography using a 2: 1 mixture of hexane and acetone as the eluent. 78 mg of solids were obtained, which contained the reaction product. The product was subjected to silica gel column chromatography using a 1: 3 mixture of chloroform and ethyl acetate as the eluent. The product discharged from the column was subjected to silica gel column chromatography using a mixture of chloroform and acetone as an eluent. Then the solid product obtained was precipitated from a mixture of ether and hexane. 24 mg of colorless solid 3-acetoxy-5- [2,4-O-diacetyl-1,3,6-trideoxy-3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy] -6- [1,3 -dioxolan-2-yl] methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olide obtained.

Die physikochemischen Eigenschaften des Produktes sind die folgenden:The physicochemical properties of the product are following:

(i) Melting point 103-110 ° C
(ii) [ α ] - 14 ° (c 1.0, chloroform
(iii) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
1.13, 1.18, 1.29 (each d, 3 H × 3, CH₃ in the 5'-position, CH₃ in the 8-position and CH₃ in the 15-position)
∼2.04 (every s, 3 H × 3, CH₃COO- in the 3-position, CH₃COO in the 2'-position, CH₃COO- in the 4'-position), 3.54 (s, 3 H, CH₃O- in the 4 position)
6.32 (d, 1H, H in the 10 position).
(iv) UV max.
279 nm (ε , 23,000) (methanol)
(v) IR (CHCl₃) cm -1
∼1950 (CH), ∼1740 (ester), 1675, 1640 (double bond)
(iv)
Elemental analysis for C₃₆H₅₅NO₁₄
Calculated: C 59.57%, H 7.64%, N 1.93%;
Found: C 59.34%, H 7.55%, N 1.81%.

Example 5

(a) In 8,2 ml wasserfreiem Chloroform wurde 818 mg (1,28 Millimole) 5-(3,6-Dideoxy-3-dimethylamino-β-D-glucopyranosyloxy)- 6-[1,3-dioxolan-2-yl)methyl-3-hydroxy-14-hydroxymethyl-4,8,12- trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olid aufgelöst. Dann wurden 231 mg (1,34 Millimole) m-Chlorperbenzoesäure unter Rühren und unter Eiskühlung hinzugefügt. Nach 5 Minuten wurde die Temperatur des Reaktionsgemisches ansteigend auf Zimmertemperatur gebraucht, und danach wurde noch 15 Minuten die Reaktion zu Ende geführt. Nach Bestätigung des Endes der Reaktion wurde das Reaktionsgemisch zur Trockne eingeengt. Das Konzentrat wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 80 g Wako Gel C-200 (Handelsname) und eines 5 : 1 Gemisches aus Chloroform und Methanol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 840 mg (Ausbeute 100%) der entsprechenden N-Oxydverbindung erhalten.(a) In 8.2 ml of anhydrous chloroform, 818 mg (1.28 millimoles) of 5- (3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy) - 6- [1,3-dioxolane-2- yl) methyl-3-hydroxy-14-hydroxymethyl-4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olide dissolved. Then 231 mg (1.34 millimoles) of m-chloroperbenzoic acid was added with stirring and with ice cooling. After 5 minutes the temperature of the reaction mixture was increased to room temperature, and then the reaction was continued for 15 minutes. After confirmation of the end of the reaction, the reaction mixture was concentrated to dryness. The concentrate was subjected to silica gel column chromatography using a column filled with 80 g of Wako Gel C-200 (trade name) and a 5: 1 mixture of chloroform and methanol as a developing solvent. 840 mg (yield 100%) of the corresponding N-oxide compound were obtained.

(i) [ α ] + 9 ° (c 1.0, chloroform
(ii) Rf value:
0.29 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 7: 1 chloroform-methanol mixture)
(iii) NMR (CDCl₃, TMS), (ppm)
1.85 (3 H, s, -CH₃ in the 12 position)
3.31 (3 H, s)
3.55 (3H, s) 4.50 (1 H, d, J = 6 Hz), H in the 1′-position)
5.91 (1 H, d, J = 11 Hz), H in the 13 position)
6.17 (1 H, d, J = 16 Hz), H in the 11 position)
7.28 (1 H, d, J = 16 Hz), H in the 10 position).
(iv) UV max.
282 nm (ε , 23,000) (methanol)
(v) IR cm -1
2960 (-CH₃), 2920 (-CH₂-), 1735 (lactone) 1680 (ketone), 1600 (diene), 950 (N → O)
(iv)
Elemental analysis for C₃₃H₅₅NO₁₂
Calculated: C 60.26%, H 8.43%, N 2.13%;
Found: C 60.32%, H 8.54%, N 2.02%.

(b) In 7,5 ml wasserfreiem Chloroform wurden 745 mg (1,13 Millimol) der in der vorstehenden Stufe erhaltenen N-Oxydverbindung aufgelöst. Dann wurde 0,32 ml (3,39 Millimole) Essigsäureanhydrid zugefügt. Das Gemisch wurde auf einem Ölbad auf 80°C erhitzt unter Rückfluß gehalten. Nach 90 Minuten wurde der Verbrauch des Ausgangsmaterials bestätigt. Dann wurden 7 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung zu dem Reaktionsgemisch hinzugefügt, und anschließend wurde eine Stunde bei Zimmertemperatur durchgerührt. Zu dem Gemisch wurden 30 ml Chloroform hinzugefügt. Die gebildete wässerige Schicht wurde abgetrennt, und es wurde zweimal mit je 15 ml Chloroform extrahiert. Die Chloroformextrakte wurden vereinigt und mit 14 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen. Es wurde mit 14 ml Wasser nachgewaschen. Es wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Dann wurde die Lösung zur Trockne eingeengt. Das Konzentrat wurde eine Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 70 g Wako Gel C-200 (Handelsname) und eines 3 : 1 Gemisches aus Benzol und Aceton als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 222 mg (Ausbeute) 42%) 6-(1,3-Dioxolan-2-yl)methyl-3,5-dihydroxy-14-hydroxymethyl- 4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olid erhalten. Nach Umkristallisation des Produktes aus einem Gemisch aus Aceton und Hexan wurden farblose nadelförmige Kristalle erhalten.(b) In 7.5 ml of anhydrous chloroform, 745 mg (1.13 millimoles) the N-oxide compound obtained in the above step dissolved. Then 0.32 ml (3.39 millimoles) of acetic anhydride added. The mixture was brought to 80 ° C on an oil bath heated under reflux. After 90 minutes, the consumption of the source material confirmed. Then 7 ml became saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution to the reaction mixture was added, and then an hour at Stirred at room temperature. To the mixture was added 30 ml of chloroform added. The aqueous layer formed was separated off, and it was extracted twice with 15 ml of chloroform. The chloroform extracts were combined and saturated with 14 ml aqueous sodium chloride solution washed. It was washed with 14 ml of water. It was over anhydrous sodium sulfate dried. Then the solution was evaporated to dryness. The concentrate was subjected to column chromatography a column filled with 70 g Wako Gel C-200 (Trade name) and a 3: 1 mixture of benzene and acetone as Subjected to developing solvents. 222 mg (yield) 42%) 6- (1,3-dioxolan-2-yl) methyl-3,5-dihydroxy-14-hydroxymethyl- 4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olide was obtained. To Recrystallization of the product from a mixture of acetone and Colorless acicular crystals were obtained in hexane.

(i) Melting point 95-96 ° C
(ii) [ α ] -3 ° (c 1.0, chloroform
(iii) Rf value:
0.27 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 3: 1 benzene-acetone mixture)
(iv)
Elemental analysis for C₂₅H₄₀O₈
Calculated: C 64.08%, H 8.60%;
Found: C 64.36%, H 8.35%.
(v) NMR (CDCl₃, TMS), w (ppm)
1.02 (3 H, d, J = 6 Hz), -CH₃ in the 4 position)
1.25 (3 H, d, J = 9 Hz), -CH₃ in the 8 position)
1.99 (3 H, s, -CH₃ in the 12 position) 5.99 (1 H, d, J = 11 Hz), H in the 13 position)
6.40 (1 H, d, J = 16 Hz), H in the 11 position)
7.42 (1 H, d, J = 16 Hz), H in the 10 position).
(vi) UV max.
282 nm (ε , 23,000) (methanol)
(vii) IR (KBr), cm -1
2960 (-CH₃), 2930 (-CH₂-), 1735 (lactone) 1680 (ketone), 1600 (diene).

Production of the starting material

(a) Zu 7,7 g (8,4 Millimole) Tylosin wurde 7,7 ml Wasser zugefügt. Dann wurden zu dem Gemisch 1,5 Moläquivalente (2,4 g; 12,6 Millimole) p-Toluolsulfonsäure hinzugefügt. Das erhaltene Gemisch wurde durch Erhitzen 3,5 Stunden unter Rückfluß gehalten. Nach Bestätigung der vollständigen Umsetzung durch eine Untersuchung mittels Dünnschichtchromatographie wurde teeriges Material abgetrennt, zweimal mit je 60 ml Chloroform gewaschen und verworfen. Die verbliebene wässerige Schicht wurde sorgfältig mit 2,1 g Natriumhydrogencarbonat vermischt. Dann wurde die Lösung zweimal mit je 60 ml Chloroform extrahiert. Das Chloroformwaschmittel und die Chloroformextrakte wurden vereinigt und einmal mit 40 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingeengt.(a) 7.7 ml (8.4 millimoles) of tylosin was added to 7.7 ml of water. Then 1.5 molar equivalents (2.4 g; 12.6 millimoles) of p-toluenesulfonic acid added. The received The mixture was refluxed by heating for 3.5 hours. After confirmation of full implementation by an investigation by means of thin layer chromatography became tarry material separated, washed twice with 60 ml of chloroform and discarded. The remaining aqueous layer was carefully mixed with 2.1 g of sodium hydrogen carbonate. Then the solution extracted twice with 60 ml of chloroform. The chloroform detergent and the chloroform extracts were combined and once washed with 40 ml of water and over anhydrous sodium sulfate dried and evaporated to dryness.

Das erhaltene ölige Material wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 130 g Wako Gel C-200 (Handelsname) und einem 5 : 1 Gemisch aus Chloroform und Methanol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 1,85 g (Ausbeute 40%) 5-(3,6-Dideoxy-3-dimethyl- amino-β-D-glucopyranosyloxy)-6-formylmethyl-3-hydroxy-14-hydroxy- methyl-4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olid als farbloses festes Produkt erhalten.The obtained oily material was subjected to silica gel column chromatography using a column filled with 130 g of Wako Gel C-200 (trade name) and a 5: 1 mixture of chloroform and methanol as a developing solvent. 1.85 g (yield 40%) of 5- (3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy) -6-formylmethyl-3-hydroxy-14-hydroxy-methyl-4,8 Obtained, 12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadien-15-olide as a colorless solid product.

(i) Rf value:
0.31 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 1: 2 chloroform-methanol mixture)
(ii) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
1.83 (3 H, s, -CH₃ in the 12 position)
2.54 (6 H, s, -N (CH₃) ₂ in the 3'-position)
3.77 (2 H, d, J = 6 Hz, -CH₂ in the 14 position)
4.28 (1 H, d, J = 7 Hz, H in the 1′-position)
5.00 (1 H, m, H in the 15 position)
5.90 (1 H, d, J = 11 Hz, H in the 13 position)
6.30 (1 H, d, J = 16 Hz, H in the 11 position)
7.36 (1 H, d, J = 16 Hz, H in the 10 position)
9.75 (1 H, -C H O)
(iii) IR (KBr), cm -1
2960 (-CH₃), 2920 (-CH₂-), 2810, 2770, 2730 (-N (CH₃) ₂), 1735 (lactone), 1680 (ketone), 1600 (diene).

(b) Es wurden 1,14 g (1,92 Millimole) der in der vorstehenden Stufe (a) erhaltenen Verbindung in 5,7 ml Acetonitril aufgelöst. 5,7 ml Äthylenglycol wurden zu der Lösung hinzugefügt. Dann wurden 494 mg (2,87 Millimole) p-Toluolsulfonsäure zu dem Gemisch unter Rühren bei Zimmertemperatur hinzugegeben. Die Umsetzung wurde in 3 Stunden durchgeführt. Nach beendeter Umsetzung wurden 483 mg (5,75 Millimole) Natriumhydrogencarbonat zu dem Gemisch hinzugefügt, und es wurde eine Stunde durchgeführt. Das Reaktionsgemisch wurde in 34 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung entleert. Dann wurde das Reaktionsgemisch zweimal mit je 57 ml Chloroform extrahiert, und die Chloroformextrakte wurden vereinigt mit 14 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung und dann mit 28 ml Wasser gewaschen. Es wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann wurde zur Trockne eingeengt. (b) 1.14 g (1.92 millimoles) of the above Step (a) compound obtained dissolved in 5.7 ml of acetonitrile. 5.7 ml of ethylene glycol was added to the solution. Then 494 mg (2.87 millimoles) of p-toluenesulfonic acid became the Mix in with stirring at room temperature. The implementation was done in 3 hours. After completion of the implementation 483 mg (5.75 millimoles) of sodium hydrogen carbonate were added to the Mixture was added and it was done for one hour. The The reaction mixture was poured into 34 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution emptied. Then the reaction mixture extracted twice with 57 ml of chloroform each, and the chloroform extracts were combined with 14 ml of saturated aqueous sodium chloride solution and then washed with 28 ml of water. It was dried over anhydrous sodium sulfate and then became Dry evaporated.

Das Konzentrat wurde einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 40 g Wako Gel C-200 (Handelsname) und eines 5 : 1 Gemisches aus Chloroform und Methanol unterworfen. Es wurden 1,18 g (Ausbeute 96%) 5-(3,6-Dideoxy-3-dimethylamino- β-D-glucopyranosyloxy)-6-(1,3-dioxolan-2-yl)-methyl- 3-hydroxy-14-hydroxymethyl-4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadie-n- 15-olid in farbloser fester Form erhalten. Durch Umkristallisation aus einem Gemisch aus Aceton und Hexan wurden nadelförmige farblose Kristalle des Produktes erhalten.The concentrate was subjected to column chromatography using a column filled with 40 g of Wako Gel C-200 (trade name) and a 5: 1 mixture of chloroform and methanol. There were 1.18 g (yield 96%) of 5- (3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy) -6- (1,3-dioxolan-2-yl) methyl-3-hydroxy -14-hydroxymethyl-4,8,12-trimethyl-9-oxo-10,12-heptadecadie-n-15-olide obtained in a colorless solid form. Recrystallization from a mixture of acetone and hexane gave acicular, colorless crystals of the product.

(i) Melting point 226-230 ° C
(ii) [ α ] - 7 ° (c 1.0, chloroform
(iii) Rf value:
0.38 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 5: 1 chloroform-methanol mixture)
(iv)
Elemental analysis for C₃₃H₅₅NO₁₁
Calculated: C 61.76%, H 8.64%, N 2.18%;
Found: C 61.51%, H 8.47%, N 2.16%.
(v) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
1.83 (3 H, s, -CH₃ in the 12 position)
2.54 (6 H, s, -N (CH₃) ₂ in the 3'-position) 5.87 (1 H, d, J = 11 Hz, H in the 13 position)
6.27 (1 H, d, J = 16 Hz, H in the 11 position)
7.35 (1 H, d, J = 16 Hz, H in the 10 position)
(vi) UV max.
282 nm (ε , 26,000) (methanol)
(vii) IR (KBr), cm -1
2960 (CH₃), 2920 (-CH₂-), 2810, 2770, 2730 (-N (CH₃) ₂), 1735 (lactone) 1685 (ketone), 1600 (diene).

Example 6

In 9,2 ml wasserfreiem Chloroform wurden 926 mg (1,40 Millimole) 3-Acetoxy-5-(3,6-dideoxy-3-dimethylamino-D-glucopyranosyloxy)-9- hydroxy-4-methoxy-8-methyl-6-(4-methyl-1,3-dioxolan-2-yl)methyl- 15-hexadecanolid aufgelöst. Dann wurde 265 mg (1,54 Millimole) m-Chlorperbenzoesäure zu der Lösung unter Rühren und unter Eiskühlung hinzugefügt. Nach 5 Stunden ließ man die Temperatur des Reaktionsgemisches auf Zimmertemperatur ansteigen. Es wurde noch 30 Minuten bei Zimmertemperatur durchgerührt. Nach beendeter Umsetzung wurde das Reaktionsgemisch zur Trockne eingeengt und einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 50 g Wako Gel C-200 (Handelsname) und eines 7 : 1 Gemisches aus Chloroform und Methanol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 923 mg (Ausbeute 97%) der entsprechenden N-Oxydverbindung erhalten.In 9.2 ml of anhydrous chloroform, 926 mg (1.40 millimoles) 3-acetoxy-5- (3,6-dideoxy-3-dimethylamino-D-glucopyranosyloxy) -9- hydroxy-4-methoxy-8-methyl-6- (4-methyl-1,3-dioxolan-2-yl) methyl 15-hexadecanolide dissolved. Then 265 mg (1.54 millimoles) m-chloroperbenzoic acid to the solution with stirring and cooling with ice added. After 5 hours the temperature of the Reaction mixture rise to room temperature. It was still Stirred for 30 minutes at room temperature. After completion of the implementation the reaction mixture was evaporated to dryness and a column chromatography using a column with a Filling from 50 g Wako Gel C-200 (trade name) and one 7: 1 Mixture of chloroform and methanol as a developing solvent subject. There were 923 mg (yield 97%) of the corresponding Obtain N-oxide compound.

(i) [ α ] + 4 ° (c 1.0, chloroform
(ii) Rf value:
0.37 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 10: 1 chloroform-methanol mixture)
(iii)
Elemental analysis for C₃₃H₅₉NO₁₃
Calculated: C 58.48%, H 8.77%, N 2.07%;
Found: C 58.64%, H 8.53%, N 2.14%.
(iv) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
2.20 (3 H, s, -OCOCH₃ in the 3 position)
3.30 (3H, s)
3.50 (3H, s)
3.61 (3 H, s, -OCH₃ in the 4-position)
4.56 (1 H, d, J = 7 Hz, H in the 1′-position)
5.28 (1H, m, H in the 3 position).
(v) IR (KBr) cm -1 2960 (CH₃), 2925 and 2850 (-CH₂-), 1735 (lactone), 960 (N → O).

(b) In 8,4 ml wasserfreiem Chloroform wurden 841 mg (1,24 Millimole) der in der vorstehenden Stufe erhaltenen N-Oxydverbindung aufgelöst. Zu der Lösung wurden 35 ml (3,7 Millimole) Essigsäureanhydrid zugefügt. Das Gemisch wurde 60 Minuten auf einem Ölbad bei 80°C unter Rückfluß gehalten. Nach Feststellung des Endes der Umsetzung wurden 8,4 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung zu dem Reaktionsgemisch hinzugefügt. Es wurde dann noch 60 Minuten durchgerührt.(b) In 8.4 ml of anhydrous chloroform, 841 mg (1.24 millimoles) the N-oxide compound obtained in the above step dissolved. To the solution was added 35 ml (3.7 millimoles) of acetic anhydride added. The mixture was on an oil bath for 60 minutes kept at 80 ° C under reflux. After determining the end 8.4 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution were added to the reaction added to the reaction mixture. It was then stirred for another 60 minutes.

Die gebildete wässerige Schicht wurde abgetrennt und zuerst mit 25 ml und dann mit 12 ml Chloroform extrahiert. Die Chloroformextrakte wurden vereinigt und mit 17 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen. Es wurde mit Wasser nachgewaschen. Die Lösung wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 80 g Wako Gel C-300 (Handelsname) und einem 4 : 1 Gemisch aus Benzol und Aceton als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 222 mg (Ausbeute 37%) 3-Acetoxy-5,9-dihydroxy-4-methoxy-8-methyl- 6-(4-methyl-1,3-dioxolan-2-yl)methyl-15-hexadecanolid erhalten.The aqueous layer formed was separated and first with 25 ml and then extracted with 12 ml of chloroform. The chloroform extracts were combined and with 17 ml of saturated aqueous Washed sodium chloride solution. It was washed with water. The solution was dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness. The residue was subjected to column chromatography using a column with a filling of 80 g Wako Gel C-300 (trade name) and a 4: 1 mixture of benzene and subjected to acetone as a developing solvent. There were 222 mg (yield 37%) 3-acetoxy-5,9-dihydroxy-4-methoxy-8-methyl- Obtain 6- (4-methyl-1,3-dioxolan-2-yl) methyl-15-hexadecanolide.

(i) [ a ] -19 ° (c 1.0, chloroform
(ii) Rf value:
0.20 (thin layer chromatography, developing solvent: 4: 1 benzene-acetone mixture)
(iii)
Elemental analysis for C₂₅H₄₄O₉
Calculated: C 61.45%, H 9.08%;
Found: C 61.28%, H 8.84%.
(iv) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
0.98 (3 H, d, J = 6 Hz, -CH₃ in the 8-position)
2.20 (3 H, s, OCOCH₃ in the 3 position)
3.66 (3 H, s, -OCH₃ in the 42 position) 5.36 (1 H, m, H in the 3 position)
(v) IR (KBr) cm -1
2960 (CH₃), 2995 and 2850 (-CH₂-), 1735 (lactone).

Das im Verfahren des Beispiels 6 eingesetzte Ausgangsmaterial kann in folgender Weise erhalten werden:The starting material used in the procedure of Example 6 can be obtained in the following ways:

Production of the starting material

Nach dem Auflösen von 1,66 g (2,00 Millimole) 3-Acetoxy-5-[3,6- dideoxy-4-O-(2,6-dideoxy-4-O-isovaleryl-3-C-methyl-α-L-altro- pyranosyl)-3-dimethylamino-β-D-glucopyranosyloxy]-6-formyl- methyl-4-methoxy-8-methyl-9-hydroxy-hexadecanolid in 8,3 ml wasserfreiem Acetonitril wurden 4,2 ml wasserfreies Propylenglycol (1,2-Propandiol) zu der Lösung sowie 516 mg (3,00 Millimole) wasserfreie p-Toluolsulfonsäure zu dem Gemisch unter Rühren bei Zimmertemperatur hinzugefügt. Nach 2 Stunden wurde die Beendigung der Umsetzung festgestellt und 504 mg (6,00 Millimole) Natriumhydrogencarbonat wurden zu dem Reaktionsgemisch gegeben, anschließend wurde noch eine Stunde durchgerührt. Dann wurden 50 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung zu dem Reaktionsgemisch hinzugefügt, und das Produkt wurde zweimal mit je 83 ml Chloroform extrahiert. Die Chloroformschichten wurden vereinigt und zweimal mit je 42 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung und einmal mit 83 ml Wasser gewaschen. Die Lösung wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann zur Trockne eingeengt.After dissolving 1.66 g (2.00 millimoles) of 3-acetoxy-5- [3,6-dideoxy-4-O- (2,6-dideoxy-4-O-isovaleryl-3-C-methyl- α- L-altro-pyranosyl) -3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy] -6-formyl-methyl-4-methoxy-8-methyl-9-hydroxy-hexadecanolide in 8.3 ml of anhydrous acetonitrile were 4.2 ml of anhydrous propylene glycol (1,2-propanediol) was added to the solution and 516 mg (3.00 millimoles) of anhydrous p-toluenesulfonic acid was added to the mixture with stirring at room temperature. After 2 hours, the completion of the reaction was determined, and 504 mg (6.00 millimoles) of sodium hydrogen carbonate was added to the reaction mixture, followed by stirring for another hour. Then 50 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution was added to the reaction mixture, and the product was extracted twice with 83 ml of chloroform each. The chloroform layers were combined and washed twice with 42 ml of saturated aqueous sodium chloride solution and once with 83 ml of water. The solution was dried over anhydrous sodium sulfate and then concentrated to dryness.

80 g des erhaltenen Rückstandes wurden einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus Wako Gel C-200 (Handelsname) und einem 10 : 1 Gemisch aus Chloroform und Methanol als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 1,29 g (Ausbeute 98%) 3-Acetoxy-5-(3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β-D-glucopyranosyloxy)-9-hydroxy-4-methoxy-8-methyl-6-(4-methyl- 1,3-dioxolan-2-yl)methyl-15-hexadecanolid erhalten.80 g of the residue obtained was subjected to column chromatography using a column filled with Wako Gel C-200 (trade name) and a 10: 1 mixture of chloroform and methanol as a developing solvent. 1.29 g (yield 98%) of 3-acetoxy-5- (3,6-dideoxy-3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy) -9-hydroxy-4-methoxy-8-methyl-6- ( 4-methyl-1,3-dioxolan-2-yl) methyl-15-hexadecanolide obtained.

(i) [ α ] - 10 ° (c 0.86, chloroform
(ii) Rf value:
0.37 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 10: 1 chloroform-methanol mixture)
(iii)
Elemental analysis for C₃₃H₅₉NO₁₂
Calculated: C 59.89%, H 8.99%, N 2.12%;
Found: C 60.18%, H 8.70%, N 2.02%.
(iv) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
2.10 (3 H, s, -OCOCH₃ in the 3 position)
2.56 (6 H, s, -N (CH₃) ₂ in the 3'-position)
3.60 (3 H, s, -OCH₃ in the 4-position)
4.53 (1 H, d, J = 7 Hz, H in the 1′-position)
5∼ (1 H, m, H in the 15 position).
5.30 (1 H, m, H in the 3 position).
(v) IR (KBr) cm -1
2960 (CH₃), 2925 and 2850 (-CH₂-), 1735 (lactone).

Examples of the cleavage of the aldehyde protecting group

a) In einem Eisbad wurden 37,9 mg (0,0399 Millimole) des im Beispiel 7 der DE-OS 28 09 598 erhaltenen Produktes 3-Acetoxy-5-[3,6-dideoxy-4-O-(2,6- dideoxy-2-brom-4-O-isovaleryl-3-C-methyl-α-L-altropyranosyl)- 3-dimethylamino-β-D-glucopyranosyloxy]-6-(1,3-dioxolan-2-yl)- methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olid zur Kühlung eingetaucht. Es wurden 0,23 ml 90%ige wässerige, zuvor mit Eiswasser gekühlte Trifluoressigsäure hinzugegeben. Das Gemisch wurde 15 Minuten durchgeführt. Zu dem Gemisch wurden 310 mg (3,69 Millimole) Natriumhydrogencarbonat hinzugegeben, und das erhaltene Gemisch wurde 15 Minuten durchgeführt.a) 37.9 mg (0.0399 millimoles) of the product 3-acetoxy-5- [3,6-dideoxy-4-O- (2.6 - dideoxy-2-bromo-4-O-isovaleryl-3-C-methyl- α -L-altropyranosyl) - 3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy] -6- (1,3-dioxolan-2-yl) - Immersed methyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadecadien-15-olide for cooling. 0.23 ml of 90% aqueous trifluoroacetic acid, previously cooled with ice water, was added. The mixture was carried out for 15 minutes. To the mixture was added 310 mg (3.69 millimoles) of sodium hydrogen carbonate, and the resulting mixture was carried out for 15 minutes.

Das Reaktionsgemisch wurde nacheinander mit 4 ml und 2 ml Chloroform extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt und mit 2 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vacuum eingeengt. Der Rückstand wurde zuerst einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung von 2,5 g Wako Gel C-300 (Handelsname) und eines 1 : 1 Gemisches aus Benzol und Äthylacetat als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurde eine weitere Säulenchromatographie angeschlossen. Hierbei wurde eine Säule mit einer Füllung aus 6 ml Sephadex LH-20 (Handelsname) und ein 1 : 1 Gemisch aus Benzol und Äthylacetat als Entwicklungslösungsmittel verwendet. Durch Umkristallisieren des Reaktionsproduktes aus einem Gemisch aus Äther und n-Hexan wurden 32,5 mg (Ausbeute 90%) rosettenförmige Kristalle aus 3-Acetoxy-5-[3,6-dideoxy-4-O-(2,6-dideoxy-2-bromo- 4-O-isovaleryl-3-C-methyl-α-L-altropyranosyl)-3-dimethylamino- β-D-glucopyranosyloxy]-6-formylmethyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo- 10,12-hexadecadien-15-olid erhalten.The reaction mixture was extracted successively with 4 ml and 2 ml of chloroform. The extracts were combined and washed with 2 ml of water and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated in vacuo. The residue was first subjected to column chromatography using a column filled with 2.5 g of Wako Gel C-300 (trade name) and a 1: 1 mixture of benzene and ethyl acetate as a developing solvent. Another column chromatography was connected. Here, a column filled with 6 ml of Sephadex LH-20 (trade name) and a 1: 1 mixture of benzene and ethyl acetate were used as the developing solvent. By recrystallizing the reaction product from a mixture of ether and n-hexane, 32.5 mg (yield 90%) of rosette-shaped crystals of 3-acetoxy-5- [3,6-dideoxy-4-O- (2,6-dideoxy- 2-bromo-4-O-isovaleryl-3-C-methyl- α -L-altropyranosyl) -3-dimethylamino- β- D-glucopyranosyloxy] -6-formylmethyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo Obtained 10,12-hexadecadien-15-olide.

(i) Melting point 172-174 ° C
(ii) [ a ] -20 ° (c 1.0, chloroform
(iii) Rf value:
0.34 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 1: 1 benzene / ethyl acetate mixture)
(iv)
Elemental analysis for C₄₂H₆₆NO₁₅Br
Calculated: C 55.75%, H 7.35, N 1.54%;
Found: C 55.94%, H 7.38%, N 1.49%.
(v) UV max 279 nm (ε , 23,000), (methanol)
(vi) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
0.98 (d, 6 H, J = 6.0, -CH₂CH (CH₃) ₂)
2.50 (s, 6 H, -N (CH₃) ₂)
3.98 (d, 1 H, J = 0.9, 2 ′ ′ - H)
5.18 (d, 1 H, J = 0.9, 1 ′ ′ - H)
6.29 (d, 1H, J = 8.0, 10-H)
9.56 (s, 1H, -CHO)
(vii) IR (CHCl₃) cm -1

b) Zu 44,4 mg (0,0462 Millimole) des im Beispiel 9 der DE-OS 28 09 598 erhaltenen Reaktionsproduktes wurden 0,27 ml einer 90%igen wässerigen Trifluoressigsäurelösung unter Eiskühlung zugefügt. Das Gemisch wurde 15 Minuten durchgeführt. Durch Zugabe von 358 mg Natriumhydrogencarbonatpulver wurde das Gemisch neutralisiert. Weiterhin wurde das Produkt vollständig durch Zugabe von 2 ml wässeriger Natriumhydrogencarbonatlösung neutralisiert. Die Lösung wurde dreimal mit je 2 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden kombiniert, dreimal mit je einem ml Wasser gewaschen und getrocknet über wasserfreiem Natriumsulfat. Dann wurde unter vermindertem Druck die Lösung eingeengt.b) 44.4 mg (0.0462 millimoles) of the reaction product obtained in Example 9 of DE-OS 28 09 598 were 0.27 ml of a 90% aqueous trifluoroacetic acid solution added under ice cooling. The mixture was carried out for 15 minutes. By adding 358 mg sodium hydrogen carbonate powder the mixture was neutralized. Farther the product became completely aqueous by adding 2 ml Neutralized sodium hydrogen carbonate solution. The solution was extracted three times with 2 ml of ethyl acetate. The extracts were combined, washed three times with one ml of water and dried over anhydrous sodium sulfate. Then it was reduced Pressure the solution concentrated.

Der Rückstand wurde einer Säulenchromatographie unter Verwendung einer Säule mit einer Füllung aus 5 g Wako Gel C-300 und einem 5 : 1 Gemisch aus Chloroform und Aceton als Entwicklungslösungsmittel unterworfen. Es wurden 38,6 mg (Ausbeute 91,0%) 3-Acetoxy- 5-[3,6-dideoxy-4-O-(2,6-dideoxy-2-brom-4-O-isovaleryl-3-O-methyl- 3-C-methyl-α-L-altropyranosyl)-3-dimethylamino-β-D-glucopyrano syloxy]-6-formylmethyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadeca dien-15-olid erhalten.The residue was subjected to column chromatography using a column filled with 5 g of Wako Gel C-300 and a 5: 1 mixture of chloroform and acetone as a developing solvent. 38.6 mg (yield 91.0%) of 3-acetoxy- 5- [3,6-dideoxy-4-O- (2,6-dideoxy-2-bromo-4-O-isovaleryl-3-O) -methyl- 3-C-methyl- α -L-altropyranosyl) -3-dimethylamino- β- D-glucopyrano syloxy] -6-formylmethyl-4-methoxy-8-methyl-9-oxo-10,12-hexadeca diene -15-olide obtained.

Das erhaltene Produkt hat nach Umfällung aus einem Aceton- und Hexan Gemisch die folgenden physikochemischen Eigenschaften:The product obtained after reprecipitation from an acetone and Hexane mixture has the following physicochemical properties:

(i) Melting point 118-122 ° C
(ii) [ a ] - 40.9 ° (c 1.0, chloroform
(iii) Rf value:
0.37 (silica gel thin layer chromatography, developing solvent: 5: 1 chloroform-acetone mixture)
(iv)
Elemental analysis for C₄₃H₆₈NO₁₅Br
Calculated: C 56.20%, H 7.46, N 1.52%;
Found: C 55.97%, H 7.38%, N 1.49%.
(v) UV max 279 nm (ε , 23,000), (methanol)
(vi) NMR (CDCl₃, TMS), δ (ppm)
0.98 (d, 6 H, J = 6.0, CH₂CH (CH₃) ₂)
2.58 (s, 6 H, N (CH₃) ₂), 3.60 (s, 3 H, 4-OCH₃),
4.24∼ (d, 1 H, J = 0.8, 2 ′ ′ - H),
5.16 (d, 1 H, J = 0.8, 1 ′ ′ - H), 6.3 (d, 1 H, J = 8.0, 10-H).
(vii) IR (CHCl₃) cm -1

Claims

1. Process for the preparation of the aglycon of a macrolide compound of the general formula (I) wherein A represents a carbonyl group or RO group; R represents a hydrogen atom, an acetyl group, a propionyl group, a butyryl group, an isobutyryl group, an isovaleryl group or a forosaminyl group; R¹ denotes an aldehyde group, protected as a cyclic acetal by means of ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-propanediol, 2,3-butanediol and 1,3-dioxalan-2-yl group or protected as a thioacetal by means of 1,2-ethanedithiol, 1, 3-propanedithiol 2-methyl-1,3-propanedithiol. Mercaptoethanol, mercaptopropanol, R² represents a hydrogen atom or an acetyl group, a propionyl group, a butyryl group, an isobutyryl group, an isovaleryl group; R³ represents a methyl or ethyl group; R⁴ represents a hydrogen atom, a hydroxymethyl group or a mycinosyloxymethyl group; R⁵ represents a methyl group or a methoxy group; R⁶ represents a hydrogen atom or a methyl group; the symbol means a single or double bond; the symbol - - - - - represents a single or double bond or an oxirane-2,3-diyl group; and the symbol - · - · - means that the macrolactone ring forms a 16-membered ring or a 17-membered ring, characterized in that the macrolide compound of the general formula (II) wherein B is a hydrogen atom, a hydroxyl group or an acylmycanosyl group represents; R⁷ represents an acetyl group, a propionyl group, a butyryl group, an isobutyryl group, an isovaleryl group; and A; R²; R³, R⁴; R⁵; R⁶; ; - - - - -; and - · - · - have the same meaning already mentioned (as in formula (I)),

(a) with a diol selected from ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-propenediol and 2,3-butanediol, a dithiol selected from 1,2-ethanedithiol, 1,3-propanedithiol, 2-methyl-1,3- propanethiol or a mercapto alcohol selected from mercaptoethanol and mercaptopropanol is reacted in the presence of an organic acid;
(b) then sequentially to an anhydrous organic solvent, the reaction product is reacted with an oxidizing agent selected from perbenzoic acid, peracetic acid and m-chloroperbenzoic acid and then with an acylating agent selected from acetic anhydride, propionic anhydride and benzoic anhydride, respectively.

2. Aglycones of a macrolide compound with the general formula (I) wherein A is a carbonyl group or RO-, R represents a hydrogen atom, an acetyl group, a propionyl group, a butyryl group, an isobutyryl group, an isovaleryl group or a forosaminyl group; R¹ denotes an aldehyde group, protected as a cyclic acetal by means of ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-propanediol, 2,3-butanediol and 1,3-dioxalan-2-yl group or protected as a thioacetal by means of 1,2-ethanedithiol, 1, 3-propanedithiol 2-methyl-1,3-propanedithiol. Mercaptoethanol, mercaptopropanol, R² represents a hydrogen atom or an acetyl group, a propionyl group, a butyryl group, an isobutyryl group, an isovaleryl group; R³ represents a methyl or ethyl group; R⁴ represents a hydrogen atom or a hydroxymethyl group or a mycinosyloxymethyl group; R⁵ represents a methyl group or a methoxy group; R⁶ represents a hydrogen atom or a methyl group; the symbol means a single or double bond; the symbol - - - - - represents a single or double bond or an oxirane-2,3-diyl group; and the symbol - · - · - means that the macrolactone ring forms a 16-membered ring or a 17-membered ring.