DE2734660C3 - Myxomatosis vaccine and its manufacture - Google Patents
Myxomatosis vaccine and its manufactureInfo
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Description
Die Erfindung betrifft einen Myxomatoseimpfstoff zum Schutz von Kaninchen und Hasen gegen Myxomatose und seine Herstellung.The invention relates to a myxomatosis vaccine for protecting rabbits and hares against Myxomatosis and its manufacture.
Es ist bereits ein als fibromatöser Impfstoff bezeichneter Impfstoff gegen Myxomatose bekannt, der das Virus des Shope-Fibroms, also ein natürliches Virus, enthält. Dieser Impfstoff ist zwar unschädlich, hat jedoch den Nachteil, daß er zu einer im Hinblick auf die Stärke, Zuverlässigkeit wie auch Dauer nicht gänzlich zufriedenstellenden Immunisierung führt; man weiß, daß dieser Impfstoff zu einer etwa 70- bis 75°/oigen Schutzwirkung bei den geimpften Tieren führt, wobei 25 bis 30% von Myxomatose befallen werden, die bei einem bedeutenden Anteil dieses Prozentsatzes tödlich verläuft.A vaccine against myxomatosis known as the fibromatous vaccine is already known, the Contains the shope fibroma virus, a natural virus. Although this vaccine is harmless, it has however, the disadvantage that it is not entirely effective in terms of strength, reliability and duration leads to satisfactory immunization; this vaccine is known to be about 70 to 75 per cent Protective effect in the vaccinated animals leads, with 25 to 30% of myxomatosis are attacked, which in a significant proportion of that percentage is fatal.
Auch andere Impfstoffe wurden bereits angegeben, jedoch wurden sie aufgrund ihrer nur unzureichenden Wirksamkeit entweder wieder fallengelassen oder nicht in größerer Serie hergestellt.Other vaccines have also been given, but they have been inadequate because of them Effectiveness either dropped again or not mass-produced.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, unter Vermeidung der genannten Nachteile einen neuen Impfstoff gegen Myxomatose anzugeben, der erheblich verbesserte Wirksamkeit besitzt.The invention is based on the object of a new one while avoiding the disadvantages mentioned To indicate vaccine against myxomatosis, which has significantly improved effectiveness.
Die Aufgabe wird anspruchsgemäß gelöst.The problem is solved according to the claims.
Der erfindungsgemäße Myxomatoseimpfstoff ist erhältlich durchThe myxomatosis vaccine of the present invention is available from
(a) Herstellung einer Zellkultur des in der collection nationale de cultures de microorganismes des Institut Pasteur, Paris, unter Nr. 1028 hinterlegten Maxomatosevirusstamms auf Kaninchennierenzellen oder Hühnerembryonalzellen und(a) Production of a cell culture of the in the collection nationale de cultures de microorganismes des Institut Pasteur, Paris, maxomatosis virus strain deposited under No. 1028 on rabbit kidney cells or chicken embryonic cells and
(b) Gehaltseinstellung sowie ggf.(b) Adjustment of salary and, if applicable,
(c) Gefriertrocknung.(c) freeze drying.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist entsprechend durch die obigen Verfahrensschritte (a) bis (c) gekennzeichnetThe process according to the invention is correspondingly carried out by the above process steps (a) to (c) marked
Der erfindungsgemäß verwendete neue Stamm resultiert aus einer Mutation eines spontanen Myxomatose-Virusstamms, die nicht Gegenstand der Anmeldung ist, und weist folgende charakteristischen Eigenschaften auf:The new strain used according to the invention results from a mutation of a spontaneous myxomatosis virus strain, which is not the subject of the application and has the following characteristic properties on:
— Er entwickelt sich auf Hühnerembryonalzellen bei einer Temperatur von 33° C unter Bildung einer Gesamtkultur mit einem Titer zwischen IO5 und 107 cytopathogenen Dosen pro Milliliter für Kaninchennierenzellen; - It develops on chicken embryonic cells at a temperature of 33 ° C with formation of a total culture with a titer between 10 5 and 10 7 cytopathogenic doses per milliliter for rabbit kidney cells;
— er weist nur schwache Pathogenität auf, was sich beim Kaninchen durch einfache Entwicklung einer lokalen Läsion an der Impfstelle zeigt, die unter 3 cm Durchmesser aufweist, sich nicht ausbreitet, Regression zeigt und spätestens im Verlauf der dritten Woche verschwindet;- it shows only weak pathogenicity, which is evident in rabbits by simply developing a shows local lesion at vaccination site that is less than 3 cm in diameter, does not spread, regression shows and disappears at the latest in the course of the third week;
— er besitzt eine hohe Immunisierungswirkung aufgrund eines Virulenztests, der in der Impfung von 1000 bis 10 000 infizierenden Minimaldosen eines Myxomatose-Virus der Virulenz 1 bestand, die in der dritten Woche nach der Schutzimpfung verabreicht wurden;- it has a high immunization effect due to virulence, of a myxomatosis virus virulence 1 consisted of the inoculation of 1000 to 10,000 infecting minimum doses were administered during the third week after vaccination;
— er unterliegt keinen durch Antigenreaktionen hervorgerufenen Veränderungen unabhängig von der Anzahl aufeinanderfolgender Übertragungen auf Kaninchennierenzellen und Hühnerembryonalzcllen und kann permanent als Antigen gegenüber einem positiven Serum bei einer Komplementbindungsreaktion dienen;- it is not subject to any changes caused by antigen reactions regardless of the number of consecutive transfers to rabbit kidney cells and chick embryonic cells and can be used permanently as an antigen to a positive serum in a complement fixation reaction to serve;
— er behält seine Entwicklungsfähigkeit auf Chorioallantoismembranen bei;- it retains its ability to develop on chorioallantoic membranes at;
— damit geimpfte Kaninchen besitzen durch Komplementbindung, Neutralisation oder Immunfluoreszenz nachweisbare Antikörper.- rabbits vaccinated with it have complement fixation, Neutralization or immunofluorescence detectable antibodies.
Im Verlauf der aufeinanderfolgenden Passagen auf Hühnerembryonalzellen ist es von Vorteil, Klonbildungen auf Kaninchennierenzellen einzuschalten.In the course of the successive passages on chicken embryonic cells, it is advantageous to form clones to turn on rabbit kidney cells.
Die Übertragungen auf Kaninchennierenze'len und Hühnerembryonalzellen werden bei tiefer Temperatur, insbesondere zwischen etwa 30 und 35°C und vorzugsweise bei 33° C vorgenommen.The transmissions to rabbit kidney cells and chicken embryonic cells are carried out at low temperatures, in particular made between about 30 and 35 ° C and preferably at 33 ° C.
Die Anzahl der Übertragungen auf Kaninchennierenzellen kann beispielsweise zwischen 60 und 100 liegen,
die Anzahl von Übertragungen auf Hühnerembryonalzellen zwischen 3 und 30.
Die Zellkultur, die den Impfstoff enthält, wird ferner vorteilhaft auf Kaninchenzellen oder Hühnerembryonalzellen
durchgeführtThe number of transfers to rabbit kidney cells can be between 60 and 100, for example, and the number of transfers to chicken embryonic cells between 3 and 30.
The cell culture containing the vaccine is also advantageously carried out on rabbit cells or chicken embryonic cells
Die Einheitsdosis für die Impfung enthält vorzugsweise zwischen 50 und 200 50%-Infektionsdosen des Virusstamms. Die den Impfstoff darstellende Kultur kann in lyophilisierter Form konditioniert werden, die bei Gebrauch rehydratisiert wird.The unit dose for vaccination preferably contains between 50 and 200 50% infectious doses of the Virus strain. The culture constituting the vaccine can be conditioned in lyophilized form which rehydrated in use.
Ein Impfverfahren zum Schutz von Kaninchen gegen Myxomatose besteht insbesondere in der intradermalen Impfung des oben beschriebenen Impfstoffs.In particular, one vaccination method used to protect rabbits against myxomatosis is intradermal Vaccination of the vaccine described above.
Die Erfindung wird im folgenden durch Ausführungsbeispiele näher erläutert. The invention is explained in more detail below by means of exemplary embodiments.
Der im Institut Pasteur, Paris, unter der Nummer 1028 hinterlegte Virusstamm stammt von einem im Gebiet von Toulouse erlegten Wildhasen. Die aufgrund der charakteristischen Läsionen vorgenommene Identifizierung der Myxomatose wurde durch Überimpfen auf zwei Hasen bestätigt, bei denen sich eine klassische Myxomatose mit langsamer Krankheitsausbildung ent-The one at the Pasteur Institute, Paris, under number 1028 The virus strain deposited comes from a wild hare hunted in the Toulouse area. The due to the Identification of the myxomatosis made by vaccinating on characteristic lesions confirmed two rabbits in whom a classic myxomatosis with slow disease development
wickelte. Ein Kaninchen überlebte, das andere starb nach34Tageawrapped. One rabbit survived, the other died after 34 days a
Das Virus wurde aus dem toten Hasen durch Kultur auf Chlorioallantoismembranen von Hühnereiern isoliert, die sich im Stadium eines 10 Tage alten Embryos befanden; das Virus wurde anschließend auf Kaninchennierenzellen (KN-Zellen) in einzelliger Schicht kultiviert, die auf Eagle-MEM-Milieu erhalten worden war, das mit Lactalbumin-Hydrolysat, Kälberserum und üblichen Antibiotika versetzt worden war. Unter diesen Bedingungen wurde die Vermehrung des Stamms aufgrund seiner cytopathogenen Wirkung (Degeneration und Lyse der befallenen Zellen) festgestellt, die in 48 bis 72 h merklich war. Die hintereinander vorgenommenen Übertragungen wurden unter folgenden Bedingungen vorgenommen:The virus was isolated from the dead rabbit by culture on chlorioallantoic membranes of chicken eggs, that were at the 10-day-old embryo stage; the virus was subsequently transmitted to rabbit kidney cells (KN cells) cultivated in a single-cell layer, which was received on Eagle-MEM-Milieu, which had been treated with lactalbumin hydrolyzate, calf serum and common antibiotics. Under these Conditions was the proliferation of the strain due to its cytopathogenic effect (degeneration and lysis of the affected cells) found in Was noticeable for 48 to 72 hours. The sequential transfers were made under the following conditions performed:
5 Übertragungen bei 37° C,
2 Übertragungen bei 35° C und
79 Übertragungen bei 33° C.5 transfers at 37 ° C,
2 transfers at 35 ° C and
79 transfers at 33 ° C.
Zwei Klonbildungen wurden mit den Viren der 36. und 65. Übertragungen bei 33°C vorgenommen: Klonbiidung auf KN-Zellen nach dem Verfahren der nach Impfung des Zellrasens mit Hilfe verschiedener Verdünnungen des Überstands nach Zentrifugieren der zuvor in einem Potter-Gerät zerkleinerten Viruskultur erhaltenen Plaques, Waschen sowie Zusatz von Nährmilieu. Zwei gut isolierte Plaques werden darauffolgend am 4. Tag der Kultivierung zur Vornahme der 37. sowie 66. Übertragung entnommen.Two clones were formed with the viruses of the 36th and 65th transfers at 33 ° C: Cloning on KN cells by the method of after inoculation of the cell lawn with the help of various Dilutions of the supernatant after centrifugation of the virus culture previously disintegrated in a Potter device obtained plaques, washing and addition of nutrient medium. Two well-isolated plaques appear as a result taken on the 4th day of cultivation to make 37th and 66th transfers.
Der Virus der 79. Übertragung wurde auf eine Zellschicht von Hühnerembryonen (im folgenden kurz als ZHE bezeichnet) der ersten Explantation geimpft (10-Tage-Embryo, der Trypsinbehandlung unterzogen; Zellen gewonnen und auf Eagle-MEM-Milieu zur Kultur angesetzt, das mit Lactalbumin-Hydrolysat, Kälberserum und üblichen Antibiotika versetzt war). Nach 5 Tagen Kulturdauer bei 33° C war keinerlei cyctopathogene Wirkung feststellbar; die Virusvermehrung wurde durch Immunfluoreszenz, Komplementbinriung und Impfung auf KN-Zellen nachgewiesen. Eine zweite Kultur wurde unter gleichen Bedingungen durchgeführt und diente zur Klonierung des Virus auf KN-Zellen: Drei isolierte Plaques wurden markiert und zur Impfung auf ZHE entnommen; die drei so erhaltenen Klone wurden zur Abschätzung ihrer Pathogenität Kaninchen eingeimpft; einer davon wurde zurückbehalten und diente für die letzten Übertragungen auf ZHE und Klonierungen auf KN: Auf diese Weise wurden 25 Übertragungen bei 33°C auf ZHE vorgenommen, die von drei Klonierungen der Viren der 6., 10. und 24. Übertragung unterbrochen wurden. Die 25. Übertragung lieferte den im Pasteur-Institut unter der Nummer 1028 hinterlegten Stamm.The virus of the 79th transmission was deposited on a cell layer of chicken embryos (hereinafter referred to as briefly referred to as ZHE) of the first explantation (10-day embryo, subjected to trypsin treatment; Cells obtained and placed on an Eagle MEM medium for culture, which with lactalbumin hydrolyzate, calf serum and usual antibiotics). After 5 days of culture at 33 ° C. there was no cyctopathogenic whatsoever Effect noticeable; virus replication was determined by immunofluorescence, complement binding and Vaccination on KN cells detected. A second culture was carried out under the same conditions and was used to clone the virus on KN cells: three isolated plaques were marked and used for vaccination taken on ZHE; the three clones thus obtained were rabbits to assess their pathogenicity inoculated; one of them was retained and was used for the last transmissions to ZHE and Clonings on KN: In this way, 25 transfers were made to ZHE at 33 ° C, the were interrupted by three cloning of the viruses of the 6th, 10th and 24th transmission. The 25th transmission delivered the strain deposited in the Pasteur Institute under the number 1028.
Das Beispiel bezieht sich auf die Herstellung eines Impfstoffs durch Kultivierung des Stamms Nr. 1028 auf Kaninchennierenzellen.The example relates to the preparation of a vaccine by cultivating strain No. 1028 Rabbit kidney cells.
Der Stamm wird auf KN-Zellen aufgeimpft, die in Kulturflaschen in Eagle-MEM-Milieu kultiviert wurden, das mit Glutamin, 5% Kälber-Fetalserum und üblichen Antibiotika versetzt wurde.The strain is inoculated on KN cells that have been cultivated in culture flasks in an Eagle MEM environment, to which glutamine, 5% calf fetal serum and common antibiotics were added.
Die Kultinierung wird 72 bis 90 h bei 33° C vorgenommen. Die Kulturflaschen werden anschließend ganz eingefroren. Nach dem Auftauen werden Milieu und Zellen homogenisiert und auf aliquote Mengen aufgeteilt.The cultivation is carried out at 33 ° C. for 72 to 90 hours. The culture bottles are then completely frozen. After thawing, the environment and cells are homogenized and aliquoted Divided quantities.
Die minimale infektiöse Dosis beim Kaninchen sowie die für KN-Zellen cytophatogene Dosis werden durch Titration bestimmt; die für die gesamte Kultur pro ml erhaltenen Titer liegen zwischen !O4 und 106 50%-Mini-ί malinfektionsdosen beim Kaninchen und zwischen 105 und lü7 cyctopathogenen Dosen bei KN-Zellen. Je nacü dem bestimmten Titer wird der Impfstoff in einem zur Lyophilisierung geeigneten Schutzmilieu verdünnt, auf Ampullen verteilt, eingefroren und gefriergetrocknetThe minimum infectious dose in rabbits and the cytophatogenic dose for KN cells are determined by titration; the titers obtained for the entire culture per ml are between 10 4 and 10 6 50% mini-malinfection doses in rabbits and between 10 5 and 10 7 cyctopathogenic doses in KN cells. Depending on the titer determined, the vaccine is diluted in a protective medium suitable for lyophilization, divided into ampoules, frozen and freeze-dried
Das Beispiel erläutert die Herstellung eines Impfstoffs durch Kultivierung des Stamms Nr. 1028 auf Hühnerembryonalzellen.The example illustrates the production of a vaccine by cultivating strain No. 1028 Chicken embryonic cells.
Der Stamm wird auf Hühnerembryonalzellen der ersten Explantation aufgeimpft und in Kulturflaschen in Eagle-MEM-Milieu kultiviert, das mit LactalbuminHydrolysat, 2% Kälberserum und üblichen Antibiotika versetzt ist.The strain is inoculated onto chicken embryonic cells from the first explantation and placed in culture flasks in Eagle MEM milieu cultivated with lactalbumin hydrolyzate, 2% calf serum and common antibiotics is offset.
Die Kultur wird 90 bis 100 h bei 33° C durchgeführt; die Abfolge der Verfahrensschritte ist mit denen des vorstehenden Beispiels identisch; auch die erhaltenen Titer ergeben analoge Werte.The culture is carried out at 33 ° C. for 90 to 100 hours; the sequence of process steps is identical to that of the previous example; also received Titers give analogous values.
Das Beispiel erläutert die Unschädlichkeit des erfindungsgemäßen Impfstoffs.The example illustrates the harmlessness of the vaccine according to the invention.
In einer eisten Phase wurde der gemäß Beispiel 1 hergestellte Impfstoff 150 Kaninchen von 2 bis 4At one stage, the vaccine prepared according to Example 1 was given to 150 rabbits from 2 to 4
jo Monaten intradermal injiziert. Nach dieser Injektion
trat am 3. bis 4. Tag ein Impfknoten auf, der seine maximale Entwicklung am 6. bis 8. Tag erreichte, wobei
sein Durchmesser zwischen 1 und 3 cm lag; dieser Knoten bildete sich anschließend vor der dritten Woche
wieder bis zum vollständigen Verschwinden zurück, ohne daß es zu einer Generalisation kam. Das
Vaccinalvirus fand sich in den der Impfstelle benachbarten lymphatischen Ganglien.
Eine postvaccinale Virämie, auf die zwei willkürlich herausgegriffene Kaninchen untersucht wurden, konnte
lediglich bei einem davon nachgewiesen werden; sie erwies sich nur als schwach (5 50%-lnfektionsdosen pro
ml Blut) und vorübergehend (Auftreten lediglich am 4. und 5. Tag).injected intradermally every year. After this injection, an inoculation nodule appeared on the 3rd to 4th day, which reached its maximum development on the 6th to 8th day, its diameter being between 1 and 3 cm; this knot then regressed until it had completely disappeared before the third week without any generalization occurring. The vaccinal virus was found in the lymphatic ganglia adjacent to the vaccination site.
Post-vaccinal viraemia, for which two randomly selected rabbits were examined, could only be detected in one of them; it turned out to be only weak (5 50% infection doses per ml of blood) and transient (occurrence only on the 4th and 5th day).
In einer zweiten Phase wurde der Impfstoff 17 jungen Kaninchen nach dem Verlassen des Nests mit einem Alter von 3 bis 4 Wochen injiziert; die beobachteten Impfreaktionen waren schwächer als die obigen.In a second phase, the vaccine was given to 17 boys Injected rabbits after leaving the nest at 3 to 4 weeks of age; who watched Vaccine responses were weaker than the above.
In einer dritten Phase wurde der Impfstoff erwachsenen, vermehrungsfähigen Kaninchen (2 Männchen und 4 Weibchen) injiziert, die 15 bis 21 Tage nach der Impfung zur Paarung kamen; die Fruchtbarkeit war normal; an den Neugeborenen wurde keinerlei teratogene Wirkung festgestellt.In a third phase, the vaccine was given to adult, reproductive rabbits (2 males and 4 Females) that mated 15 to 21 days after vaccination; fertility was normal; at no teratogenic effects were found in the newborns.
Das Beispiel erläutert die Wirksamkeit des Impfstoffs.The example illustrates the effectiveness of the vaccine.
22 Kaninchen wurden durch intradermale Injektion22 rabbits were injected intradermally
mit dem wie oben in Beispiel 1 hergestellten Impfstoff geimpft. Sie wurden 3 Wochen nach der Impfung durch intradermale Injektionen von 1000 50%-Infektionsdosen eines virulenten Myxomatose-Virus mit einer Virulenz der Klasse 1 der Ecole Veterinaire von Toulouse getestet.vaccinated with the vaccine prepared as in Example 1 above. They were due 3 weeks after the vaccination intradermal injections of 1000 50% infectious doses of a virulent myxomatosis virus with a Class 1 virulence tested by the Ecole Veterinaire of Toulouse.
21 der Kaninchen waren gegen die eingeimpften Viren geschützt, während von 8 Vergleichstieren alle 8 innerhalb von 10 bis 13 Tagen starben. Die erhaltene Immunisierung ist infolgedessen von außerordentlich21 of the rabbits were protected against the inoculated viruses, while all 8 of 8 control animals died within 10 to 13 days. The immunization obtained is therefore extraordinary
zufriedenstellender Stärke und zugleich erheblich besser als die mit dem fibromatösen Vakzin erhältliche Immunisierung.satisfactory strength and at the same time considerably better than that obtainable with the fibromatous vaccine Immunization.
Das Beispiel erläutert die Wirkungsdauer des erfindungsgemäßen Impfstoffs.The example illustrates the duration of action of the vaccine according to the invention.
Es wurden mehrere Gruppen von Kaninchen geimpft und darauf unter den Bedingungen von Beispiel 4 zu untererhiedlichen Zeitpunkten nach der Impfung untersucht:Several groups of rabbits were vaccinated and approached under the conditions of Example 4 examined at different times after vaccination:
— Untersuchung 2 Monate nach der Impfung:
13 von 13 Kaninchen geschützt;- Examination 2 months after vaccination:
13 out of 13 rabbits protected;
— Untersuchung 3 Monate nach der Impfung:
10 von 10 Kaninchen geschützt;- Examination 3 months after vaccination:
10 out of 10 rabbits protected;
— Untersuchung 4 Monate nach der Impfung:
8 von 9 Kaninchen geschützt;- Examination 4 months after vaccination:
8 out of 9 rabbits protected;
— Untersuchung 5 Monate nach der Impfung:
5 von 5 Kaninchen geschützt;- Examination 5 months after vaccination:
5 out of 5 rabbits protected;
— Untersuchung 6 Monate nach der Impfung:
8 von 8 Kaninchen geschützt;- Examination 6 months after vaccination:
8 out of 8 rabbits protected;
— Untersuchung 8 Monate nach der Impfung:
3 von 5 Kaninchen geschützt.- Examination 8 months after vaccination:
3 out of 5 rabbits protected.
Von den nicht geimpften Vergleichstieren überlebte keines den obigen Virustest.None of the non-vaccinated control animals survived the above virus test.
Aus den erhaltenen Ergebnissen geht hervor, daß mit dem erfindungsgemäßen Impfstoff eine zufriedenstellende Schutzwirkung über eine Dauer von 6 Monaten erzielt wird.From the results obtained, it can be seen that with the vaccine of the present invention, a satisfactory one Protective effect is achieved over a period of 6 months.
Das Beispiel erläutert das sehr rasche Eintreten der Immunisierung.The example illustrates the very rapid onset of immunization.
6 geimpfte und am 8. Tag unter den obengenannten Bedingungen getestete Kaninchen widerstanden der Infektion vollständig; das Kaninchen kann infolgedessen ab den; 8. Tag nach der Impfung als immunisiert betrachtet wreden.6 rabbits vaccinated and tested on the 8th day under the above conditions withstood the Infection completely; the rabbit can as a result from the; 8th day after vaccination as immunized considered wreden.
Das Beispiel erläutert die Stabilität des Impfstamms.The example illustrates the stability of the vaccine strain.
Der Test beruhte auf der Vornahme von acht hintereinander erfolgenden Übertragungen auf Kaninchen: Jede Übertragung wurde auf 2 Kaninchen vorgenommen, die jeweils intradermal 0,1 ml eiues 1 :1000 verdünnten Zerkleinerungsprodukts von Vakzinalknoten verabreicht erhielten, das am 5. bis 6. Tag gewonnen wurde, wobei das Zerkleinerungsprodukt aus einem Gemisch der Knoten der zwei Kaninchen von der vorhergehenden Übertragung bestand.The test was based on making eight consecutive transmissions to rabbits: Each transfer was made to 2 rabbits, each egg 0.1 ml intradermally 1: 1000 diluted comminution product of vaccinal nodes administered, which was obtained on the 5th to 6th day, with the comminution product from consisted of a mixture of knots from the two rabbits from the previous transfer.
Bei der achten Übertragung waren die Folgen der Impfung völlig mit denen dej Ausgangs-Virus vergleichbar (lokale Reaktion ohne Generalisierung, Immunität).At the eighth transmission, the consequences of the vaccination were completely comparable to those of the original virus (local reaction without generalization, immunity).
Das Beispiel erläutert die Antigenwirkung des Impfstoffs.The example illustrates the antigenic effect of the vaccine.
ίο Untersuchung und Titerbestimmung der Antikörper in den Seren von Kaninchen wurden durch Komplementbindung unter Verwendung eines Zerkleinerungsprodukts von Myxomatose-Knoten (Wildform, Virulenz 1) vorgenommen.ίο Examination and titer determination of the antibodies in the sera of rabbits were complemented by the use of a comminution product of myxomatosis nodes (wild type, virulence 1) made.
Die an den Seren von 35 Kaninchen 21 bis 27 Tage nach der Schutzimpfung vorgenommene Titerbestimmung ergab positive Reaktionen für Serumverdünnungen, die je nach Individuum von 1 :8 bis 1 :128 variiert. Das Serum der nicht geimpften Kaninchen war bei einer Verdünnung von I : 4 stets negativ.The titer determination made on the sera of 35 rabbits 21 to 27 days after vaccination gave positive responses for serum dilutions which varied from 1: 8 to 1: 128 depending on the individual. The serum of the unvaccinated rabbits was always negative at a dilution of I: 4.
Das Beispiel bezieht sich auf die Übertragung des Vaccinalvirus durch KontaktThe example relates to the transmission of the vaccinal virus through contact
Bei sämtlichen vorstehenden Beispielen wurde die Impfung auf intradermalem Wege vorgenommen.In all of the above examples, vaccination was carried out by the intradermal route.
Ein Versuch der natürlichen Übertragung des Vaccinalvirus durch Kontakt ergab kein positives Ergebnis: Sechs ungeimpfte Kaninchen von 2 Monaten wurden 3 Wochen lang mit Kaninchen desselben Alters zusammen gehalten, die am Vortag des Zusammenbringens geimpft worden waren. Einen Monat nach Beendigung der gemeinschaftlichen Haltung ergaben die sechs Kaninchen serologisch negative Ergebnisse und überlebten den Virustest nicht.An attempt at natural contact vaccinal virus transmission did not yield a positive Result: Six unvaccinated rabbits of 2 months were mixed with rabbits of the same age for 3 weeks held together who had been vaccinated the day before they were brought together. One month after The six rabbits gave negative results in terms of serology and did not survive the virus test.
Die Untersuchung der Übertragung auf neugeborene Tiere lieferte ebenfalls kein positives Ergebnis; zwei Würfe von kleinen Kaninchen von Muttertieren, die einen und zwei Monate vor dem Sprung geimpft worden waren, wurden im Alter von 6 Wochen getestet; keines der kleinen Kaninchen überlebte den Test.The examination of the transmission to newborn animals also gave no positive result; two Litters of small rabbits from dams vaccinated one and two months before jumping were tested at 6 weeks of age; none of the small rabbits survived the test.
Beispiel 10Example 10
Das Beispiel betrifft die Haltbarkeit des Impfstoffs.
Ein Versuch zur Haltbarkeit des Impfstoffs ergab, daß der lyophilisierte Impfstoff nach 6 Monaten Aufbewahrung
bei einer Temperatur zwischen 0 und 4° C noch seinen anfänglichen Titer aufwies.The example concerns the shelf life of the vaccine.
A test of the stability of the vaccine showed that the lyophilized vaccine still had its initial titer after 6 months of storage at a temperature between 0 and 4 ° C.
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| DE3021960C2 (en) * | 1980-06-12 | 1984-01-12 | Felten & Guilleaume Fernmeldeanlagen GmbH, 8500 Nürnberg | Circuit arrangement in the form of a quadrupole to simulate an inductance |
-
1976
- 1976-08-05 FR FR7624243A patent/FR2384845A1/en active Granted
-
1977
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- 1977-08-02 ES ES461300A patent/ES461300A1/en not_active Expired
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004535203A (en) * | 2001-07-18 | 2004-11-25 | バヴァリアン・ノルディック・アクティーゼルスカブ | Virus propagation method |
| JP4700907B2 (en) * | 2001-07-18 | 2011-06-15 | バヴァリアン・ノルディック・アクティーゼルスカブ | Virus propagation method |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| FR2384845B1 (en) | 1980-06-06 |
| DE2734660A1 (en) | 1978-02-09 |
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