DE2124249C3

DE2124249C3 - Trans-2-chloro-l 1 - (3-piperazinyl propylidene) -6Hdibenz- [b, e] -oxepine, process for its preparation and pharmaceutical preparation

Info

Publication number: DE2124249C3
Application number: DE19712124249
Authority: DE
Inventors: Yi-Han Waterford Chang; William Merrill Gales Ferry Mclamore; James Ray East Lyme Tretter
Original assignee: Pfizer Inc
Current assignee: Pfizer Inc
Priority date: 1970-05-25
Filing date: 1971-05-15
Publication date: 1980-06-12
Also published as: CA971965A; GB1302624A; ES390595A1; DE2124249A1; DE2124249B2; FR2100678A1; FR2100678B1; BE767293A; JPS547795B1; SE381051B

Description

4. Pharmazeutisches Präparat, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung nach Anspruch 1.4. Pharmaceutical preparation, characterized by a content of a compound according to Claim 1.

•Γ)• Γ)

Die vorliegende Erfindung betrifft ein neues und wertvolles therapeutisches Dibenzoxepinderivat. Sie bezieht sich auch auf ein neues Präparat zur Behandlung von Entzündungszuständen und zur Modifizierung von Immunitätsreaktionen des Körpers bei leukämischen und hyperlymphozytischen Zuständen durch Anwendung dieser Verbindung in Form eines ihrer Isomeren.The present invention relates to a new and useful therapeutic dibenzoxepine derivative. she also refers to a new preparation for the treatment of inflammatory conditions and for the modification of Immunity reactions of the body in leukemic and hyperlymphocytic conditions by application this compound in the form of one of its isomers.

Es war bereits bekannt, daß Dihydrochlorid des 2-Chlor-11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxfpins in Form eines cis-trans-Gemischs erhalten werden konnte, wenn es durch eine modifizierte Wittig-Reaktion nach dem in der USA-Patentschrift 54 155 beschriebenen Verfahren aus 2-Chloridbenz-[b,e]-oxepin-11(6H)-on und Triphenyl-[3-(l-piperazinyl)-propyl]-phosphoniumbromid-hydrobromid hergestellt wird. Dieses Produkt hat einige schwache psychotrope Eigenschaften und ist nützlich als Zwischenprodukt für die Herstellung weiterer psychoterapeutischer Präparate. In der USA-Patentanmeldung Serial Nr. 6 09 345 ist ein Verfahren zur Abtrennung des reinen cis-isomeren aus dem vorstehend genannten Gemisch mit der trans-Verbindung beschrieben. Das reine cis-Isomere ist nützlich als Zwischenprodukt für die Herstellung des entsprechenden reinen cis-N-(3-Hydroxyäthyl)-Derivats, das als Beruhigungsmittel bekannt ist (z.B. siehe britische Patentschrift 10 85 405). Das auf diese Weise isolierte cis-Isomere besitzt jedoch selbst keine wesentlichen pharmakologischen Eigenschaften. It was already known that dihydrochloride of 2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxfpins could be obtained in the form of a cis-trans mixture if it was modified by a Wittig reaction according to the process described in US Pat. No. 54,155 from 2-Chloridbenz- [b, e] -oxepin-11 (6H) -one and triphenyl [3- (1-piperazinyl) propyl] phosphonium bromide hydrobromide will. This product has some weak psychotropic properties and is useful as an intermediate for the production of other psychotherapeutic preparations. In the USA patent application Serial No. 6 09 345 is a process for separating the pure cis isomer from the above Mixture with the trans compound described. The pure cis isomer is useful as an intermediate for the preparation of the corresponding pure cis-N- (3-hydroxyethyl) derivative, known as a sedative (e.g. see British patent specification 10 85 405). However, the cis isomer isolated in this way possesses itself no essential pharmacological properties.

Erfindungsgemäß wurde nun überraschend gefunden, daß das reine trans-lsomere des 2-Chlor-l l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepins und die pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze dieser Verbindung eine Klasse nützlicher therapeutischer Mittel bilden, wenn sie auf dem Gebiet der Human- und Veterinärtherapie zur Linderung von Entzündungszuständen und hyperlymphozytischen Zuständen verwendet werden. Darüber hinaus wirkt das neuartige nicht-steroide entzündungshemmende Mittel der vorliegenden Erfindung auch als Unterdrücker der phagozytisehen Funktion der Leukozyten. Daher unterscheidet sich dieses Mittel radikal von anderen auf diesem Gebiet bekannten Arzneimitteln (d. h. nicht-steroiden entzündungshemmenden Mitteln) nicht nur aufgrund seiner chemischen Struktur, sondern auch wegen seines einzigartigen pharmakologischen Profils. Fetner ist es nützlich als neuartiges Immunisierungsreaktionen unterdrückendes Mittel aufgrund seiner spezifischen Fähigkeit, eine reversible Atrophie lyinphoider Gewebe ohne Beeinträchtigung des Knochenmarks und der Differentialzählung der Blutkörperchen einzuleiten oder herbeizuführen. Es ist daher besonders nützlich bei der Behandlung von Leukämie und gewissen hyperlymphozytischen Zuständen, wie z. B. der Hodgkin'schen Krankheit und dgl. Dementsprechend findet das trans-lsomere von 2-Chlor-l l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-fb.e]-oxepin eine dreifache Anwendung als neuartiges nicht-steroides entzündungshemmendes Mittel, als ein für die Behandlung von Leukämie nützliches Mittel und als ein Immunisierungsreaktionen unterdrückendes Mittel zur Modifizierung der Immunitätsreaktion des Körpers bei Warmblütern, einschließlich des Menschen.According to the invention it has now surprisingly been found that the pure trans isomer of 2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine and the pharmaceutically acceptable acid addition salts of these compounds are a class of useful therapeutic ones Forms agents when used in the fields of human and veterinary therapy for the relief of inflammatory conditions and hyperlymphocytic conditions. In addition, the novel works non-steroidal anti-inflammatory agents of the present invention also act as phagocytic vision suppressors Function of the leukocytes. Therefore, this remedy is radically different from others in this field known drugs (i.e. non-steroidal anti-inflammatory agents) not only because of its chemical structure, but also because of its unique pharmacological profile. It is Fetner useful as a novel immunization suppressant agent because of its specificity Ability to atrophy reversible lyinphoid tissue without affecting the bone marrow and the Initiate or bring about differential counting of blood cells. It is therefore particularly useful in the treatment of leukemia and certain hyperlymphocytic conditions, such as e.g. B. Hodgkin's Disease and the like. Accordingly, the trans-isomer of 2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz-fb.e] -oxepine is found triple application as a novel non-steroidal anti-inflammatory agent, as one for the treatment of leukemia useful agent and as an immunization response suppressant for modifying the immunity response of the body in warm-blooded animals, including humans.

Gemäß dem Verfahren, das zur Isolierung des erfindungsgemäßen reinen trans-Isomeren angewendet wird, wird ein cis-trans-lsomerengemisch von 2-Chlor-According to the method used to isolate the pure trans isomer of the invention is, a cis-trans isomer mixture of 2-chloro

11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin,
das vorzugsweise in Form eines Säureadditionssalzes durch die in der USA-Patentschrift 33 54 155 beschriebene modifizierte Wittig-Reaktion erhalten wurde, zur Isolierung des entsprechenden cis-isomeren dem Abtrennungsverfahren, das in der gleichzeitig laufenden USA-Patentanmeldung Serial Nr. 6 09 345, beschrieben wurde, unterworfen. Das auf diese Weise nach der Entfernung des cis-isomeren erhaltene wäßrige Filtrat wird danach bei niedrigen Temperaturen (etwa 0 bis 15⁰C) gerührt, wobei eine zweite kristalline Menge an gemischtem Isomerem erhalten wird, die überwiegend aus trans-Isomeren besteht (d.h. >50% trans-lsomeres). Die weitere Umkristallisierung dieses Produktes aus 3 M wäßrigem Ammoniumchlorid, gefolgt von erneutem Aufschlämmen in siedendem Alkohol ergab dann das reine trans-lsomere des 2-Chlor-l 1 -(3-piperazinyl-propyIiden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepins in Form11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine,
which was preferably obtained in the form of an acid addition salt by the modified Wittig reaction described in US Pat. No. 33 54 155, for the isolation of the corresponding cis-isomer the separation process described in co-pending US Pat. No. 6,09,345 was subjected. The isomeric cis-in this way after removal of the aqueous filtrate obtained is thereafter stirred at low temperature (about 0 to 15 ⁰ C), wherein a second crystalline quantity is obtained of mixed isomer, which consists predominantly of the trans isomer is (ie,> 50% trans isomer). Further recrystallization of this product from 3 M aqueous ammonium chloride, followed by reslurrying in boiling alcohol then gave the pure trans isomer of 2-chloro-l 1 - (3-piperazinyl propylene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepins in the form

eines kristallinen Säureadditionssalzes, das dem Säureadditionssalz des Ausgangsmaterials zumindest hinsichtlich chemischer Analysen entsprichtof a crystalline acid addition salt, which is the acid addition salt of the starting material corresponds at least in terms of chemical analyzes

Wie bereits angegeben wurde, ist das erfindungsgemäße trans-Isomere entweder in Form der freien Base oder als pharmazeutisch akzeptables Säureadditionssalz, z. B. in Form des Dihydrochlorids, gut für die therapeutische Verwendung als entzündungshemmendes Mittel, als antileukämisches Mittel und als immunisierungsunterdrückendes Mittel geeignet. Beispielsweise wurde gefunden, daß trans-2-Chlor-!l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin in Form des kristallinen Dihydrochlorid-säureadditionssalzes (Schmelzpunkt 249—25 Γ C) die polymorphonukleare (PMN) Phagozytosis von Stärkekörnchen in vitro bei r> Konzentrationen von nur 1 χ 10-⁵M unterdrückt, und daher etwa zehnfach wirksamer sowohl als Indomethacin als auch als Phenylbutazon in dieser Beziehung istAs already indicated, the trans isomer of the invention is either in the form of the free base or as a pharmaceutically acceptable acid addition salt, e.g. In the form of the dihydrochloride, well suited for therapeutic use as an anti-inflammatory agent, an antileukemic agent and an immunization suppressant agent. For example, it has been found that trans-2-chloro-! L- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine in the form of the crystalline dihydrochloric acid addition salt (melting point 249-25 ° C) is the polymorphonuclear (PMN ) Phagozytosis of starch granules in vitro at r> concentrations as low as 1 χ 10- ⁵ M suppressed, and therefore, about ten times more potent than both indomethacin and phenylbutazone in this respect is as

Darüber hinaus wurde gefunden, daß bei der durch Uratkristalle induzierten Synovitis, die der menschlichen gichtigen Arthritis in mancher Hinsicht ähnelt, trans-2-Chlor-11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid die Synoviadruckreaktion auf die Uratinjektion definitiv unterdrückt sowie die Leukozytenzahl der Synovia verringert, wenn es intravenös in einer Menge von 5 mg/kg oder intraperitoneal in einer Menge von 10 mg/kg oder sogar intraartikulär in einer Menge von 2 mg/Gelenk verabreicht wird.In addition, urate crystal-induced synovitis was found to be similar to that of human resembles gouty arthritis in some respects, trans-2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride the synovial pressure response to the urine injection is definitely suppressed as well as the leukocyte count of the synovia decreases when it is intravenously in an amount of 5 mg / kg or intraperitoneally in an amount of 10 mg / kg or even administered intra-articularly in an amount of 2 mg / joint.

Außerdem wurde gefunden, daß trans-2-Chlor-l l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin in Form des Dihydrochlorids auch eine spezifische Wirkung auf lymphoides Gewebe hat. Verabreichte man beispielsweise dieses Medikament oral in einer Menge · "; 30 mg/kg pro Tag 5 bis 24 Tage lang an Affen, so fand r. man klare Beweise für eine Atrophie der Follikel in der Milz und den mesenterischen Lymphknoten. Diese Veränderungen erweisen sich zudem bei Entzug des Medikaments als reversibel und sind denen ähnlich, die in der Vergangenheit für Mittel beschrieben wurden, die die Immunisierungsreaktion unterdrücken, wie Hydrocortison oder 6-Mercaptopurin. Das erfindungsgemäße trans-lsomere unterscheidet sich von den bekannten Verbindungen des letzteren Typs jedoch auffallend dadurch, daß es keine Veränderungen im Knochenmark 4> und bei der Differentialzählung der Blutkörperchen bei irgend einem der untersuchten Tiere verursacht. Dementsprechend findet das vorliegende trans-lsomere nicht nur bei der Behandlung von rheumatischer Arthritis Anwendung, sondern auch zur Linderung >o anderer hyperlymphozytischer Zustände wie der Hogkin'schen Krankheit usw.It was also found that trans-2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine in the form of the dihydrochloride also has a specific effect on lymphoid tissue. For example, it was administered this drug orally in an amount · "; 30 mg / kg per day in monkeys for 5 to 24 days, r. there is clear evidence of atrophy of the follicles in the Spleen and the mesenteric lymph nodes. These changes also show up in withdrawal of the Drug as reversible and are similar to those that have been described in the past for means that suppress the immunization response, such as hydrocortisone or 6-mercaptopurine. The inventive trans-isomers differs strikingly from the known compounds of the latter type, however in that there are no changes in the bone marrow 4> and in the differential count of blood cells in any of the animals examined. Accordingly, the present trans-isomer finds use not only in the treatment of rheumatic Arthritis application, but also for relief> o other hyperlymphocytic conditions such as Hogkin's disease, etc.

Das hier beschriebene therapeutische Dibenzoxepin-Präparat kann einem Patienten entweder auf oralem oder parenteralem Wege verabreicht werden. Im ·>ί allgemeinen wird das trans-lsomere des 2-ChIor-l l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepins am zweckmäßigsten in Dosierungen von etwa 20 mg bis zu etwa 1,0 g pro Tag verabreicht, obgleich sich jedoch notwendigerweise in Abhängigkeit vom Gewicht des zu t>u behandelnden Patienten Abweichungen ergeben werden. Eine Dosierung im Bereich von etwa 0,3 mg bis etwa 15 mg/kg Körpergewicht pro Tag wird jedoch am zweckmäßigsten zur Erzielung wirksamer Ergebnisse angewendet. Es ist jedoch zu beachten, daß sich auch andere Abweichungen in dieser Beziehung ergeben können, die von der Art des zu behandelnden Lebewesens und seiner individuellen Reaktion auf das Medikament sowie vom besonderen Typ der gewählten pharmazeutischen Formulierung und der Zeitspanne sowie den zeitlichen Abständen der Verabreichungen abhängen. In einigen Fällen können Dosierungen unterhalb der unteren Grenze des oben angeführten Gesamtbereichs mehr als ausreichen, während in anderen Fällen möglicherweise noch etwas größere Dosen anzuwenden sind; dies kann jedoch mit Sicherheit geschehen, ohne daß irgendwelche wesentlichen schädlichen oder nachteiligen Nebenwirkungen bei dem Patienten auftreten, bei dem die Verabreichung erfolgtThe therapeutic dibenzoxepine preparation described here can be administered to a patient on either oral or by the parenteral route. In ·> ί in general, the trans isomer of 2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine most conveniently administered in dosages of from about 20 mg up to about 1.0 g per day, although however necessarily depending on the weight of the to t> u treating patients will result in deviations. A dosage ranging from about 0.3 mg to however, about 15 mg / kg of body weight per day will be most convenient for achieving effective results applied. It should be noted, however, that there are other deviations in this relationship depending on the type of living being to be treated and its individual reaction to the Drug as well as the particular type of pharmaceutical formulation chosen and the length of time as well as the time intervals between the administrations. In some cases, dosages can be used below the lower limit of the total range given above is more than sufficient, while in in other cases, slightly larger doses may have to be used; however, this can be done with Safety happens without any substantial harmful or adverse side effects occur in the patient to whom the administration is being made

Im Zusammenhang mit der Verwendung des erfindungsgemäßen trans-Isomeren zur Behandlung eines Patienten ist zu beachten, da3 dieses Isomere entweder allein oder in Kombination mit pharmazeutisch akzeptablen Trägern auf einem der vorstehend angegebenen Wege verabreicht werden kann, und daß diese Verabreichung sowohl in Einzeldosen als auch in Mehrfachdosen erfolgen kann. Insbesondere kann das neue erfindungsgemäße therapeutische Mittel in einer Vielzahl verschiedener Formen verabreicht werden, d. h. es kann mit verschiedenen pharmazeutisch akzeptablen inerten Trägern in Form von Tabletten, Kapseln, Pastillen, Rhomben, harten Bonbons, Pulvern, wäßrigen Suspensionen, injizierbaren Lösungen, Elixieren, Sirups und dgl. kombiniert werden. Zu derartigen Trägern gehören feste Verdünnungsmittel oder Füllstoffe, sterile wäßrige Medien und verschiedene nicht-toxische organische Lösungsmittel etc. Derartige oral zu verabreichende pharmazeutische Gemische können zudem auf geeignete Weise durch verschiedene Mittel des üblicherweise für einen derartigen Zweck verwendeten Typs gesüßt und/oder schmackhaft gemacht werden. Im allgemeinen ist das erfindungsgemäße therapeutisch wirksame Mittel in derartigen Dosierungsformen in Konzentrationen von etwa 0,5 bis etwa 90 Gew.-% bezogen auf das Gesamtgemisch anwesend, d. h. es ist in Mengen anwesend, die zur Bereitstellung der gewünschten Dosierungseinheit ausreichen. In connection with the use of the invention trans isomers for the treatment of a patient should be noted that this isomer is either alone or in combination with pharmaceutically acceptable carriers on any of the above indicated routes can be administered, and that this administration both in single doses as well as in Multiple doses can be made. In particular, the new therapeutic agent according to the invention in a Administered in a variety of different forms; H. it can with different pharmaceutical acceptable inert carriers in the form of tablets, capsules, lozenges, diamonds, hard candies, powders, aqueous suspensions, injectable solutions, elixirs, syrups and the like. Can be combined. To such Carriers include solid diluents or fillers, sterile aqueous media, and various non-toxic organic solvents, etc. Such pharmaceutical mixtures to be administered orally can also be appropriately used by various means of the customary for such a purpose the type used can be sweetened and / or made palatable. In general, that is according to the invention therapeutically active agents in such dosage forms at concentrations from about 0.5 to about 90% by weight based on the total mixture present, d. H. it is present in quantities appropriate to Providing the desired dosage unit is sufficient.

Für die Zwecke der oralen Verabreichung können Tabletten verwendet werden, die verschiedene Träger wie Natriumeitrat, Calciumcarbonat und Dicalciumphosphat zusammen mit verschiedenen zerfallfördernden Mitteln wie Stärke, beispielsweise Kartoffelstärke oder Tapiokastärke, Alginsäure, und gewissen komplexen Silikaten sowie Bindemitteln wie Polyvinylpyrrolidon, Saccharose. Gelatine und Akazin enthalten. Außerdem sind Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, Natriumlaurylsulfat und Talkum oft für Tablettierungszwecke sehr nützlich. Feste Gemische eines ähnlichen Typs können auch als Füllstoffe in weich und hart gefüllten Gelatinekapseln verwendet werden, bevorzugte Materialien in diesem Zusammenhang sind auch Lactose und Milchzucker sowie hochmolare Polyäthylenglycole. Wenn wäßrige Suspensionen und/oder Elixiere für orale Verabreichung gewünscht werden, kann der wesentliche aktive Bestandteil in ihnen mit verschiedenen Süßstoffen oder Aromastoffen, Farbstoffen oder Farben und gewünschienfalls auch Emulsions- und/oder Suspensionsmitteln zusammen mit Verdünnungsmitteln wie Wasser, Äthanol, Propylenglycol. Gh i'in und verschiedenen Kombinationen dieser Mittel kombiniert werden.For the purpose of oral administration, tablets can be used which have various carriers like sodium citrate, calcium carbonate and dicalcium phosphate along with various disintegrating agents Means such as starch, for example potato starch or tapioca starch, alginic acid, and certain complexes Silicates and binders such as polyvinylpyrrolidone, sucrose. Contains gelatin and acacia. In addition, lubricants such as magnesium stearate, sodium lauryl sulfate and talc are often very useful for tableting purposes. Solid mixtures of a similar one Type can also be used as fillers in soft and hard-filled gelatin capsules, preferred Materials in this context are also lactose and milk sugar as well as high molar polyethylene glycols. If aqueous suspensions and / or elixirs for oral administration are desired, can be the main active ingredient in them with various sweeteners or flavorings, coloring agents or colors and, if desired, emulsifiers and / or suspending agents together with diluents such as water, ethanol, propylene glycol. Gh i'in and various combinations of these Funds are combined.

Für die Zwecke der parenteralen Verabreichung können Lösungen des erfindungsgemäßen trans-Isomeren entweder in Sesamöl oder Irdnußöl oder inFor the purposes of parenteral administration, solutions of the trans isomer according to the invention either in sesame oil or peanut oil or in

wäßrigem Propylenglycol genauso verwendet werden wie sterile wäßrige Lösungen der entsprechenden wasserlöslichen pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze. Derartige wäßrige Lösungen sollten erforderlichenfalls auf geeignete Weise gepuffert werden, und das flüssige Verdünnungsmittel sollte zunächst mit ausreichend Kochsalz oder Glukose isotonisch gemacht werden. Diese speziellen Lösungen sind besonders geeignet für intravenöse, intramuskuläre und subkutane Injektionen.Aqueous propylene glycol can be used as well as sterile aqueous solutions of the corresponding water soluble pharmaceutically acceptable acid addition salts. Such aqueous solutions should appropriately buffered if necessary, and the liquid diluent should first made isotonic with sufficient table salt or glucose. These special solutions are particularly suitable for intravenous, intramuscular and subcutaneous injections.

example 1

25,4 kg Isomerengemisch von 2-Chlor-l l-(3-piperazinyIpropylide:i)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid (60: 40-cis-trans-Mischung, die nach dem in der USA-Patentanmeldung Serial Nr. 6 09 345 eingehend beschriebenen Verfahren erhalten wurde) wurden in 231,68 Litern warmem Wasser von 53° C, das 37,2 kg Ammoniumchlorid enthielt (dies stellte eine 3 M wäßrige NH₄CI-Lösung dar) gelöst. Die erhaltene Lösung wurde dann 30 Minuten lang bei der vorgenannten Temperatur gerührt und danach langsam innerhalb von 6 Stunden auf 40⁰C abkühlen gelassen, wobei während der gesamten Abkühlungsdauer von Zeit zu Zeit gerührt wurde (d. h. Rühren in 30minütigen Abständen). Da sich zu diesem Zeitpunkt abtrennende kristalline Material (im wesentlichen reines cis-Isomeres) wurde dann durch Saugfiitration entfernt und das auf diese Weise erhaltene wäßrige Filtrat wurde gewonnen und anschließend für die Verwendung in der nächsten Verfahrensstufe in ein 378,54 Liter fassendes Gefäß gebracht.25.4 kg isomer mixture of 2-chloro-l l- (3-piperazinyIpropylide: i) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine-dihydrochloride (60:40-cis-trans-mixture, which after the in the U.S. Patent Application Serial No. 6 09 345) were dissolved in 231.68 liters of warm water at 53 ° C. containing 37.2 kg of ammonium chloride (this was a 3 M aqueous NH ₄ Cl solution) . The resulting solution was then stirred for 30 minutes at the aforementioned temperature and then ^{allowed to cool slowly to 40 °} C. over the course of 6 hours, stirring from time to time during the entire cooling period (ie stirring at 30-minute intervals). The crystalline material separating out at this point (essentially pure cis isomer) was then removed by suction filtration and the aqueous filtrate obtained in this way was recovered and then placed in a 378.54 liter vessel for use in the next stage of the process.

Das wäßrige Filtrat wurde danach bei 5 bis 10°C über Nacht (etwa 16 Stunden lang) gerührt. Das sich dabei abscheidende kristalline Material wurde auf einem Saugfilter gesammelt und mit 26,5 Litern Aceton gewaschen. Die Trocknung an der Luft bis zur Erreichung eines konstanten Gewichts ergab dann 12,3 kg kristallines Produkt, das ;:u etwa 60% aus dem trans-Isomeren (Schmelzpunkt 2!0-233⁰C) bestand, wie eine Analyse durch Dünnschichtchromatographie unter Verwendung von Äthylacetat/Diäthylamin/Wasser (Volumenverhältnis 90 :15 :5) als Lösungsmittel für das System ergab.The aqueous filtrate was then stirred at 5 to 10 ° C. overnight (about 16 hours). The crystalline material which separated out was collected on a suction filter and washed with 26.5 liters of acetone. The drying in air until reaching a constant weight then gave 12.3 kg of crystalline product; and about 60% of the trans isomers was as an analysis by thin layer chromatography (melting point 2 0-233 ⁰ C!) Use of ethyl acetate / diethylamine / water (90: 15: 5 volume ratio) as a solvent for the system resulted.

7,5 kg der vorstehend genannten kristallinen Ausbeute an gemischten Isomeren (60% trans-Isomeres) wurde dann vierma' aus einer 3 M wäßrigen Ammoniumchloridlösung umkristallisiert und danach in etwa 37,91 siedendem Äthanol für die Dauer von 6 Stunden aufgeschlämmt. Die erhaltene kristalline Aufschlämmung wurde dann auf 25°C gekühlt und unter diesen Bedingungen weitere 24 Stunden ohne zusätzliches Rühren abgestellt. Die anschließende Sammlung dieser zweiten Ausbeute an Kristallen auf einem Saugfilter und anschließendes Waschen mit getrennten Mengen kalten Äthanols und Acetous ergab dann 100% reines trans-isomeres als Endprodukt. Nach Luft-Trocknung dieses letzteren Materials bis zur Erreichung eines konstanten Gewichts wurden schließlich 2,35 kg (14,3%) reines trans-2-Chlor-li-O ~iperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihyurochlorid mit einem Schmelzpunkt von 249 — 251 ° C erhalten.7.5 kg of the above crystalline yield of mixed isomers (60% trans isomer) was then recrystallized four times from a 3 M aqueous ammonium chloride solution and then in about 37.91 slurried in boiling ethanol for 6 hours. The resulting crystalline slurry was then cooled to 25 ° C and under these conditions for a further 24 hours without additional Stirring stopped. The subsequent collection of this second crop of crystals on a suction filter and subsequent washing with separate amounts of cold ethanol and acetous then gave 100% pure trans isomer as the end product. After air-drying this latter material to achieve a of constant weight were finally 2.35 kg (14.3%) of pure trans-2-chloro-1-O ~ iperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine-dihyurochloride obtained with a melting point of 249-251 ° C.

Example 2

Peritoneale Leukozyten von Kaninchen wurden nach einer Modifizierung des Verfahrens von Z. A. Cohn u. a., das in Journal of Experimental Medicine, Band 110, (1959), Seiten 419—443, beschrieben ist, erhalten, wobei Kaninchen der Rasse Neuseeland (New Zealand strain) verwendet wurden. Zwei Tage nach den Initaldosen (50 ml 0,1 %igen Glycogen intraperitoneal täglich für die Dauer von vier Tagen) wurde eine weitere Dosis von 250 ml injiziert Vier Stunden später wurde Hanksche Lösung (100 ml, die 5 mg Heparin enthielten) unter Verwendung einer perforierten Nadel Nr. 15 injiziert. Während die Nadel in ihrer Stellung blieb, wurde der Unterleib vorsichtig massiert und dann ließ man dieRabbit peritoneal leukocytes were measured following a modification of the method of Z. A. Cohn et al. as described in Journal of Experimental Medicine, Vol. 110, (1959), pp. 419-443, wherein New Zealand strain rabbits were used. Two days after the initial doses (50 ml of 0.1% glycogen intraperitoneally daily for the Duration of four days) another dose of 250 ml was injected. Four hours later, Hanksche became Solution (100 ml containing 5 mg of heparin) using a 15 mm perforated needle. With the needle in place, the abdomen was gently massaged and then left

ίο Flüssigkeit daraus vorsichtig durch die Schwerkraft in einen eisgekühlten Behälter auslaufen. Die Leukozyten wurden dann mittels einer Zentrifuge bei 1000 U/Min. (4⁰C) sedimentiert. Die erhaltene Masse wurde dann in einer Phosphatpufferlösung nach Krebs-Ringer (die 0,5 N Calciumchlorid enthielt) bei einem pH-Wert von 7,4 wieder suspendiert, so daß eine Konzentration von 5 χ 10⁷ Zellen/ml erhalten wurde.ίο The liquid is carefully drained from it by gravity into an ice-cold container. The leukocytes were then centrifuged at 1000 rpm. (4 ⁰ C) sedimented. The mass obtained was then resuspended in a Krebs-Ringer phosphate buffer solution (containing 0.5 N calcium chloride) at a pH of 7.4 so that a concentration of 5 × 10 ⁷ cells / ml was obtained.

Die Wirkung des Medikamentes auf die Phagocytosis wurde nach dem Albumin-J¹³¹-Verfahren nach Y. H.The effect of the drug on phagocytosis was determined by the Albumin-J ¹³¹ method according to YH

Chang, das in Experimental Cell Research, Band 54 (1969), Seite 42, beschrieben ist, bestimmt. 1,01 ml des Kaninchenserums mit einem pH-Wert von 7,4 und 1,0 ml polymorphkernige (PMN) Leukozytensuspension (5 χ 10⁷ Zellen/ml) in Phosphatpuffer nach Krebs-Ringer wurden in eine 25 ml fassende Serumphiole pipettiert und anschließend wurden 0,2 ml der Medikamentlösung [entweder trans-2-Chlor-11-(3-piperazinyi-Chang, which is described in Experimental Cell Research, Vol. 54 (1969), page 42. 1.01 ml of the rabbit serum with a pH value of 7.4 and 1.0 ml of polymorphonuclear (PMN) leukocyte suspension (5 × 10 ⁷ cells / ml) in phosphate buffer according to Krebs-Ringer were pipetted into a 25 ml serum vial and then 0.2 ml of the drug solution [either trans-2-chloro-11- (3-piperazinyi-

propyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid,
Phenylbutazon oder Indomethacin] oder im Falle des Blindversuchs 0,2 ml doppelt destilliertes Wasser zugesetzt. Die Phiole wurde dann in einen Inkubator mit Schüttelvorrichtung nach Dubnoff gesetzt, der auf 37°C und 80 Hin- und Herbewegungen pro Minute eingestellt worden war. Nach 30minütiger Inkubationszeit unter diesen Bedingungen wurden 0,4 ml einer Stärkesuspension (5 mg/ml, 6,7 χ 10⁸ Stärkekörnchen pro mg enthaltend) in einem Phosphatpuffer nach Krebs-Ringer, der gekennzeichnetes menschliches Serumalbumin in einer Menge von ΙΟ,Ομ^ηιΙ und Glucose in einer Menge von 7,5 mg/ml enthielt, rasch der Phiole zugesetzt. Eine identische Lösung, bei der jedoch die Stärke fehlte, wurde einer anderen Phiole zugesetzt, die zur Kontrolle diente. Die Inkubation wurde dann weitere 30 Minuten fortgesetzt und danach beendet, 3 indem man die Phiole in Eis brachte.propylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride,
Phenylbutazone or indomethacin] or, in the case of the blank test, 0.2 ml of double-distilled water was added. The vial was then placed in a Dubnoff shaker incubator set at 37 ° C and 80 reciprocations per minute. After an incubation time of 30 minutes under these conditions, 0.4 ml of a starch suspension (5 mg / ml, 6.7 10 ⁸ starch granules per mg containing) in a phosphate buffer according to Krebs-Ringer, the labeled human serum albumin in an amount of ΙΟ, Ομ ^ ηιΙ and glucose contained in an amount of 7.5 mg / ml, quickly added to the vial. An identical solution, but lacking starch, was added to another vial which served as a control. Incubation was then continued for an additional 30 minutes and then terminated 3 by placing the vial in ice.

Nachdem der Inhalt der Serumphiole nach dem Verfahren von Chang aufgearbeitet worden war, wurde die erhaltene Lösung dann unter Anwendung von üblichen Verfahren zur Scintillationszählung bei Flüssigkeiten auf Radioaktivität untersucht. Die auf diese Weise hinsichtlich der Hemmung der Phagocytosis erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle aufgeführt:After the contents of the serum vial were worked up by Chang's method, was the resulting solution then using conventional liquid scintillation counting procedures examined for radioactivity. In this way in terms of inhibiting phagocytosis The results obtained are shown in the following table:

⁵⁵ Verbindung ⁵⁵ connection Konzentrationconcentration * M* M Hemmunginhibition bo Abo A I X 10I X 10 ⁵ M ⁵ M. 2727 AA. I X 10I X 10 ' M'M 1515th AA. 1 x 101 x 10 ' M'M 2727 AA. 1 X 101 X 10 ^SM ^S M 1616 ^h5 Phenylbutazon ^h5 phenylbutazone I X 10I X 10 ⁵ M ⁵ M. 33 PhenylbutazonPhenylbutazone 5 x 105 x 10 * M* M 77th PhenylbutazonPhenylbutazone 1 X 101 X 10 )8)8th

Fortsetzungcontinuation

Verbindunglink

Konzentrationconcentration

Hemmunginhibition

Phenylbutazon
Phenylbutazon
PhenylbutazonPhenylbutazone
Phenylbutazone
Phenylbutazone

Indomethazin
IndomethazinIndomethazine
Indomethazine

x ΙΟ"⁵ Μ
x IO ⁴ M
x 10 ⁴ Mx ΙΟ " ⁵ Μ
x IO ⁴ M
x 10 ⁴ sts

x 10"' M
x ΙΟ"⁴ Μx 10 "'M.
x ΙΟ " ⁴ Μ

21
24
2121
24
21

6
236th
23

Aus den in dieser Tabelle aufgeführten Daten ergibt sich eindeutig, daß trans-2-Chlor-ll-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid (A) eine deutliche Wirkung bei der Unterdrückung der polymorphonuklearen (PMN) Phagocytosis von Stärkekörnchen durch Leukozyten aufweist, wenn es in vitro bei einer Konzentration von nur 1 χ 10-⁵M getestet wird. Es wurde gefunden, daß die hemmende Wirkung dieses Isomeren etwa der des Phenylbutazon oder Indomethazin äquivalent ist, wenn die letzteren bei zehnmal so hohen Konzentrationen (d.h. jeweils 1 χ 10-⁴M) untersucht wurden.The data listed in this table clearly shows that trans-2-chloro-II- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride (A) has a clear effect in the suppression of the polymorphonuclear (PMN) having Phagocytosis of starch granules by leukocytes, when tested in vitro at a concentration of only 1 χ 10- ⁵ M. It has been found that the inhibitory effect of this isomer as that of phenylbutazone or indomethacin is equivalent if the latter at ten times as high concentrations (ie each 1 χ 10- ⁴ M) were examined.

Example 3

Die intrasynoviale Injektion von Natriumuratkristallen in das Kniegelenk von anästesierten Hunden wurde nach dem von D. J. McCarthy u. a. in Journal of Experimental Medicine, Band 124 (1966), Seiten 99 -114 beschriebenen Verfahren unter Verwendung von Bastardhunden beider Geschlechter als Versuchstiere durchgeführt. Dabei wurde eine Erhöhung des intrasynovialen Druckes und der Blutkörperchenzahl sowie eine Herabsetzung des pH-Wertes (also in vieler Hinsicht Ähnlichkeiten mit gichtiger Arthritis des Menschen) im Vergleich zu den Ergebnissen hervorgerufen, die bei Injektion einer Salzlösung nach genau dem gleichen Verfahren in das andere Knie erhalten wurden. Bei dem Versuch wurde trans-2-Chlor-ll-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid entweder intravenös oder intraperitoneal 30 Minuten vor der Uratinjektion verabreicht. Die Messungen der Synovialflüssigkeit erfolgten fünf Stunden später. Die Tiere wurden während der Versuchsreihe nur einmal verwendet.The intrasynovial injection of sodium urate crystals into the knee joint of anesthetized dogs according to the method described by D. J. McCarthy et al. in Journal of Experimental Medicine, Vol. 124 (1966), pp. 99-114 described method using hybrid dogs of both sexes as test animals carried out. There was an increase in intrasynovial pressure and blood cell count as well a lowering of the pH value (thus in many respects similarities with gouty arthritis of the People) compared to the results obtained when injecting a saline solution after exactly that same procedure obtained in the other knee. During the experiment, trans-2-chloro-II- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride administered either intravenously or intraperitoneally 30 minutes prior to urine injection. The measurements of the Synovial fluid followed five hours later. The animals were only used once during the series of experiments used.

Es wurde gefunden, dsß bei intravenöser Verabreichung von trans-2-Chlor-ll-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid in einer Menge von 5 mg/kg bzw. 10 mg/kg die durch Kristalle induzierte Synovitis beim Hund deutlich unterdrückt wurde. Wurde die Verbindung intraartikulär in einer Menge von 2 mg/Gelenk verabreicht, ergab sich ebenfalls eine Hemmung oder Herabsetzung der durch das Urat hervorgerufenen Reaktion des Synovialflüssigkeitsdruckes und der Leukozytenzahl der Synovialflüssigkeit, Trans-2-Chlor-l l-(3-piperazinyIpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid unterdrückte auch die durch Kristalle hervorgerufene Synovitis (d. h. die Erhöhung des Synovialflüssigkeitsdruckes), wenn es intraperitoneal in einer Menge von 10 mg/kg verabreicht wurde, es verringerte jedoch unter diesen Umständen nicht die Konzentration von Leukozyten in dem SynovialexsudatIt has been found that when administered intravenously of trans -2-chloro-II- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride in an amount of 5 mg / kg or 10 mg / kg, the crystal-induced synovitis in dogs is significantly suppressed became. When the compound was administered intra-articularly in an amount of 2 mg / joint, it resulted also an inhibition or reduction of the reaction of the synovial fluid pressure evoked by the urate and the leukocyte count of the synovial fluid, trans-2-chloro-l l- (3-piperazinyIpropyliden) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine-dihydrochloride also suppressed synovitis (i.e., the increase in synovial fluid pressure) caused by crystals when it was administered intraperitoneally in an amount of 10 mg / kg, but it decreased among them May not reduce the concentration of leukocytes in the synovial exudate

Example 4

Die Wirkung eines Medikamentes auf die »Reverse Passive Arthus«-Reaktion (RPA) wurde auf die nachstehend beschriebene Weise unter Verwendung von normalen Ratten des Charles River Stamme; bestimmt. Den jeweils 200 bis 220 g wiegenden Ratter wurden intravenös 1,0 ml physiologische Kochsalzlö sung injiziert, die 2,5 mg Evansblau, 5,0 mg Eialbumir und 2,0 χ 10⁶ CPM radioaktives Jod (J¹³¹) enthaltende· menschliches Serumalbumin enthielt (65—90 μΰ/ιτ^) worauf unmittelbar an zwei Stellen am Rücker intracutane Injektionen von 0,03 ml Kaninchen-Anti· Eialbuminantiserum folgten, das so verdünnt war, daß es 3,65 mg Antikörper/mg enthielt. Die Tiere wurden danr drei Stunden nach der Injektion getötet, und die Haul wurde durch Schälen entfernt. Die durch die blaue Farbe angezeigten Stellen der intracutanen Injektior wurden dann unter Verwendung eines 19,05 mrr Locheisen ausgestanzt. Ein Stück Haut in der Nähe dei Injektionsstelle wurde ebenfalls ausgestanzt und diente zur Kontrolle. Die Hautproben wurden dann in 5 m 10 N wäßriger Natriumhydroxidlösung durch 30minüti· ges Erhitzen des Systems auf einem Dampfbac hydrolysiert, und die Radioaktivität des erhaltener Hydrolysate wurde durch Zählung der gamma-Strahlung in einem Nuclear-Chicago Automatic Gamma Counting System, Modell Nr. 4230 bestimmt. Die Medikamente wurden intraperitoneal eine Stunde vor der Injektion der Farbstoff-Albumin-Lösung verabreicht Die auf diese Weise erhaltenen Ergebnisse sind in der nachfolgenden Tabelle zusammengefaßt, in der die Wirkung von trans-Chlor-11-(3-piperazinylpropyIiden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid (A) Indomethazin und Natrium-(Na)-salicylat auf die RPA-Reaktion bei verschiedenen Dosierungen dargestellt sind:The effect of a drug on the Reverse Passive Arthus (RPA) response was determined in the manner described below using normal rats of the Charles River strain; certainly. The rats, each weighing 200 to 220 g, were injected intravenously with 1.0 ml of physiological saline solution containing 2.5 mg of Evans blue, 5.0 mg of egg albumin and 2.0 10 ⁶ CPM of radioactive iodine ( ^{I 131} ) containing human serum albumin (65-90 μΰ / ιτ ^) which was immediately followed by intracutaneous injections of 0.03 ml rabbit anti-egg albumin antiserum at two points on the back, which was diluted so that it contained 3.65 mg antibody / mg. The animals were then sacrificed three hours after injection and the haul removed by peeling. The areas of the intracutaneous injector indicated by the blue color were then punched out using a 19.05 mm punch. A piece of skin near the injection site was also punched out and served as a control. The skin samples were then hydrolyzed in 5 ml of 10 N aqueous sodium hydroxide solution by heating the system on a steam bath for 30 minutes, and the radioactivity of the hydrolyzate obtained was determined by counting the gamma radiation in a Nuclear-Chicago Automatic Gamma Counting System, Model No. 4230 certainly. The medicaments were administered intraperitoneally one hour before the injection of the dye-albumin solution. The results obtained in this way are summarized in the table below, in which the effect of trans-chloro-11- (3-piperazinylpropylides) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride (A) indomethazine and sodium (Na) salicylate on the RPA response at different dosages are shown:

Verbindunglink Dosisdose Unterdrückungoppression (mg/kg)(mg / kg) % ± SE% ± SE AA. 3333 35+835 + 8 AA. 6464 64 ± 464 ± 4 AA. 6464 47 ± 1347 ± 13 AA. 100100 58 ± 1458 ± 14 IndomethazinIndomethazine 100100 3± 123 ± 12 IndomethazinIndomethazine 200200 63 ± 363 ± 3 IndomethazinIndomethazine 200200 18± 718 ± 7 Natrium-salicvlatSodium salicvlat 400400 36+636 + 6

Aus den in dieser Tabelle angegebenen Daten ist klar ersichtlich, daß trans-2-Chlor-ll-(3-piperazinylpropyIiden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid (A) eine hochgradige Verringerung der Arthus-Reaktion bewirkt, wenn es intraperitoneal in Mengen von 33 mg/kg, 64 mg/kg bzw. 100 mg/kg verabreicht wird. Es ist daher wirksamer als Indomethazin oder Natrium-salicylaLIt is clear from the data given in this table it can be seen that trans-2-chloro-II- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride (A) causes a profound reduction in the Arthus reaction when administered intraperitoneally in amounts of 33 mg / kg, 64 mg / kg or 100 mg / kg is administered. It is therefore more effective than indomethazine or sodium salicylaL

Example 5

Die Wirkungen von trans-2-Chlor-11-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochIorid auf iymphoide Gewebe wurden an Bastardhunden bei Dosierungen von 12^5 mg/kg, 25 mg/kg bzw. 50 mg/kg und an Rhesusaffen bei Dosierungen von 3 mg/kg, 10 mg/kg bzw. 30 mg/kg in beiden Fällen bei oralerThe effects of trans -2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine-dihydrochloride on lymphoid tissue were tested on hybrid dogs at doses of 12-5 mg / kg, 25 mg / kg and 50 mg / kg, respectively and on rhesus monkeys at doses of 3 mg / kg, 10 mg / kg and 30 mg / kg in both cases with oral

Verabreichung untersucht. Die mesenterischen Lymphknoten wurden durch Probeexzision entnommen und histologisch untersucht, während eine Elektrophorese des Serums und der Blutbefund (d. h. Differentialzählung, Blutsenkungsgeschwindigkeit und Eosinophilzählung) wöchentlich erfolgte. Nach Abschluß dieser Behandlungsstufen wurden die Mandeln, die peripheren Lymphknoten. Thymus, Milz, Peyersche Haufen des Darms und das Knochenmark ebenfalls histologisch untersucht.Administration investigated. The mesenteric lymph nodes were removed by trial excision and histologically examined, while electrophoresis of the serum and blood findings (i.e. differential counting, Sedimentation rate and eosinophil count) was carried out weekly. After completing this Treatment stages were the tonsils, the peripheral lymph nodes. Thymus, spleen, Peyer's heaps of The intestines and the bone marrow were also examined histologically.

Beim Hund wurde nach histologischer Untersuchung gefunden, daß vor der Verabreichung durch Exzision gewonnene Proben der mesenterischen Lymphknoten nicht abnormal waren, daß jedoch nach siebentätiger Verabreichung (d.h. nach Behandlung mit trans-2-Chlor-11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-1 -dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid) durch Exzision gewonnene Lymphknoten Follikel mit schlecht definierten Koronas und Keimzentren enthielten, die aus primitiven Retikulärzellen (Histiozyten) zusammengesetzt waren, welche eine cytoplasmische Vakuolisierung aufwiesen, die auf Kohlehydrate, Protein und Fett negativ reagierte. Nach einer Verabreichungsdauer von 14 Tagen besaßen die Lymphknotenfollikel eine erhöhte Anzahl vakuolisierler Zellen in ihren Keimzentren bei Verlust, d. h. einer auffälligen Abwesenheit ihrer jeweiligen Koronen. Lymphknoten, die nach 21tägiger Dosierung durch Exzision erhalten wurden, wiesen ebenfalls ausgeprägte histologische Veränderungen auf, die spezifisch aus deutlichen Haufen übermäßig vakuolisierter Histiozyten in der gesamten Cortex in Verbindung mit der Abwesenheit jeder erkennbaren corticalen Follikel mit ihren jeweiligen Koronen sowie der Anwesenheit verschiedener, die Medullarsinus einnehmender vamoüsierter Histiozyten bestehen. Die 28 Tage nai.n der oralen Verabreichung untersuchten Knoten unterschieden sich nur quantitativ von den nach 21 Tagen untersuchten Knoten. Wurde jedoch die Verabreichung des Medikaments für die Dauer von 2 Wochen ausgesetzt, konnten wieder bedeutsame Veränderungen in den Follikeln beobachtet werden, d. h. die während der Verabreichung beobachteten vakuolisierten Zellen in den Keimzentren waren weniger geworden, und die üblichen großen kernhaltigen Erytrozyten (blast cells), die in den normalen Keimzentren sitzen, wurden wieder beobachtet. Während der gesamten Untersuchung waren die Differentialzählungen der Blutzellen bei allen untersuchten Tieren stets normal.In the dog, after histological examination, it was found that prior to administration by excision mesenteric lymph node samples obtained were not abnormal, but after seven days Administration (i.e. after treatment with trans-2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-1 -dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride) Lymph nodes obtained by excision contained follicles with ill-defined coronas and germinal centers derived from primitive reticular cells (Histiocytes) were composed, which had a cytoplasmic vacuolization, which on Carbohydrates, protein and fat reacted negatively. After an administration period of 14 days, the Lymph node follicles have an increased number of vacuolated cells in their germinal centers if they are lost; H. one conspicuous absence of their respective coronas. Lymph nodes that appeared after 21 days of dosing Excision obtained also showed pronounced histological changes that were specific distinct clusters of excessively vacuolated histiocytes throughout the cortex in connection with the Absence of any discernible cortical follicle with their respective coronas as well as the presence different, more vamoous, occupying the medullary sinus Histiocytes exist. The nodes examined 28 days after oral administration differed differ only quantitatively from the nodes examined after 21 days. However, the administration was If the drug was exposed for a period of 2 weeks, significant changes were again possible observed in the follicles, d. H. the vacuolated cells observed during administration in the germinal centers had become fewer, and the usual large nucleated erytrocytes (blast cells), that sit in the normal germination centers were observed again. Throughout the investigation the differential counts of the blood cells were always normal in all animals examined.

Bei Affen, die trans-2-Chlor-l 1-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid oral (in Kapseiforrn) in einer menge von 30 mg/kg pro Tag 5 bis 24 Tage lang erhielten, wurden deutliche histologische Veränderungen in der Milz und in den mesenterischen Lymphknoten dieser Tiere festgestellt Diese speziellen Veränderungen in den Follikeln bestanden in einer Verringerung der Größe der Follikel sowie in einem offensichtlichen Verlust der Keimzentrumzellen und einer Verringerung der Größe und des zeliartigen Aufbaus der Koronen. Darüber hinaus wiesen 25% der Tiere ähnliche Veränderungen in den Follikeln der Milz und der mesenterischen Lymphknoten auf, nachdem das Medikament 34 Tage lang mit 10 mg/kg pro Tag oral verabreicht worden war.In monkeys, the trans-2-chloro-l 1- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride orally (in capsule form) in an amount of 30 mg / kg per day 5 to Received for 24 days, there were marked histological changes in the spleen and in the mesenteric ones These special changes in the follicles existed in one of the lymph nodes of these animals Reduction in the size of the follicles as well as an apparent loss of germinal center cells and a reduction in the size and cell-like structure of the corona. In addition, 25% of the Animals show similar changes in the follicles of the spleen and mesenteric lymph nodes after the Drug orally for 34 days at 10 mg / kg per day had been administered.

In beiden Fällen wurde gefunden, daß diese Veränderungen des Iymphoiden Gewebes nach oraler Verabreichung von trans-2-Chlor-l l-(3-piperazinylpropyIiden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid den Veränderungen ähneln, die für ImmunitätsreaktionenIn both cases it was found that these changes in the lymphoid tissue after oral Administration of trans-2-chloro-l l- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride resemble the changes required for immune responses

unterdrückende Mittel wie Hydrocortison oder 6-Mercaptopurin beschriebeil sind. Es wurde jedoch gefunden, daß das erfindungsgemäße irans-Isomere keine Veränderungen im Knochenmark oder der Differentialzählung der Blutkörperchen bei irgend einem der damit behandelten Tiere bewirkte und sich daher auffällig in diesem wichtigen Aspekt von den bekannten lmmunitätsreaktionen unterdrückenden Mitteln nach dem bisherigen Stand der Technik unterscheidet.suppressive agents such as hydrocortisone or 6-mercaptopurine are described. However, it was found that the irans isomer according to the invention no changes in the bone marrow or the differential count of blood cells in any of them treated animals and was therefore conspicuous in this important aspect of the known immunity reactions suppressive agents according to the prior art.

Example 6

Ein trockenes festes pharmazeutisches Gemisch wurde hergestellt, indem man die folgenden Materialien in den angegebenen Gewichtsverhältnissen miteinander kombinierte:A dry solid pharmaceutical mixture was prepared by using the following materials combined with each other in the specified weight ratios:

trans-2-Chlor-11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin- trans-2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepin-

dihydrochlorid 50dihydrochloride 50

Natriumzitrat 25Sodium citrate 25

Alginsäure 10Alginic acid 10

Polyvinylpyrrolidon 10Polyvinyl pyrrolidone 10

Magnesiumstearat 5Magnesium stearate 5

Nach gründlichem Vermengen der trockenen Mischung wurden aus der erhaltenen Masse Tabletten gepreßt, die jeweils eine solche Größe haben, daß jede Tablette 50 mg des aktiven Bestandteils enthielten. Auf ähnliche Weise wurden auch andere Tabletten hergestellt, die 5, 10 bzw. 25 mg des aktiven Bestandteils enthielten, wobei lediglich in jedem Fall die geeignete Menge des trans-lsomeren verwendet wurde.After thorough mixing of the dry mixture, the resulting mass became tablets each of a size such that each tablet contained 50 mg of the active ingredient. on Similarly, other tablets were made containing 5, 10 and 25 mg of the active ingredient, respectively with only the appropriate amount of trans isomer being used in each case.

Example 7

Ein trockenes festes pharmazeutisches Gemisch wurde hergestellt, indem man die folgenden Materialien in den nachstehend angegebenen Gewichtsverhältnissen kombinierte:A dry solid pharmaceutical mixture was prepared by using the following materials combined in the following weight ratios:

trans-2-Chlor-11 -(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepindihydrochlorid 50trans -2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride 50

Calciumcarbonat 20Calcium carbonate 20

Polyäthylenglycol, durchschn.
Molekulargewicht 4000 30Polyethylene glycol, avg.
Molecular weight 4000 30

Die auf diese Weise hergestellte getrocknete feste Mischung wurde dann gründlich gerührt, so daß ein pulverförmiges Produkt erhalten wurde, welches völlig gleichförmig war. Dann wurden weiche elastische und hart gefüllte Gelatinekapseln, die dieses pharmazeutische Gemisch enthielten, hergestellt, wobei eine so große Merige de» Material» verwendet wurde, daß jede Kapsel 100 mg des aktiven Bestandteils enthielt.The dried solid mixture thus prepared was then thoroughly stirred so that a powdery product was obtained which was completely uniform. Then became soft and elastic hard-filled gelatin capsules containing this pharmaceutical mixture prepared, one so great merige de "material" was used that each Capsule contained 100 mg of the active ingredient.

Example 8

Eine trans-2-Chlor-l l-(3-piperazinylpropyliden)-6H-dibenz-[b,e]-oxepin-dihydrochlorid enthaltende wäßrige Propylenglycoi-Lösung wurde hergestellt, indem man die genannte Verbindung in Propylenglycol-Wasser (Gewichtsverhältnis 1 :3) unter vorsichtigem Erhitzen löste. Die Menge der verwandten Verbindung war so bemessen, daß die erhaltene Lösung 5 mg des aktiven Bestandteils pro ml der Lösung enthielt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wurde die Lösung durch Filtrieren durch ein Seitz-Filter sterilisiert. Die auf diese Weise erhaltene sterile wäßrige Propylenglycoi-Lösung war dann für die intramuskuläre Verabreichung an Tiere geeignetA trans-2-chloro-11- (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine dihydrochloride Aqueous propylene glycol containing solution was prepared by the compound mentioned in propylene glycol-water (weight ratio 1: 3) with careful heating solved. The amount of the related compound was such that the solution obtained was 5 mg of the active Contained component per ml of the solution. After cooling to room temperature, the solution passed through Filter sterilized through a Seitz filter. The sterile aqueous propylene glycol solution obtained in this way was then suitable for intramuscular administration to animals

Claims

Patent claims:

1. Trans-2-chloro-1 ¹ - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine and its pharmaceutically acceptable acid addition salts.

2. Process for obtaining trans-2-chloro-11 - (3-piperazinylpropylidene) -6H-dibenz- [b, e] -oxepine from a mixture of the cis and trans isomers of oxepine, characterized in that one

(A) the Oxepingemisch in the form of the acidic amine salt in an aqueous solution of a Salt of the formula MX dissolves, in which M sodium, potassium, lithium, ammonium, monomethylammonium, Dimethylammonium or tetramethylammonium and X is chloride, bromide, nitrate or sulfate, wherein the salt MX used is selected so that its anion X with the anion des Amine salt is identical,

(b) the less soluble acidic amine salt of the cis isomer crystallized from the solution obtained in step (a) and separated off in crystalline form and leaves a solution

(C) the filtrate obtained from process step (b) cools and the solution becomes crystalline Separates product,

(d) the resulting crystalline product of the process step (c) recrystallized from an aqueous ammonium chloride solution and

(e) the resulting crystalline product of process step (d) is slurried in boiling ethanol and after cooling the pure trans isomer as Crystals wins.

3. The method according to claim 2, characterized in that the oxepine mixture is in the form of acidic amine salt in the aqueous salt solution (step (a)) at a temperature of 65 to 70 ° C dissolves, the acidic amine of the cis isomer crystallized by cooling the mixture from stage (a) to 20 to 25 ° C (Stage (b)), the filtrate from stage (b) cools to 0 to 15 ° C (stage (c)) and the crystalline product Stage (c) slurried in boiling alcohol (stage