DE202022103535U1

DE202022103535U1 - A system to study the application of modified Gallego's stain as a differential stain for hard tissue

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Publication number: DE202022103535U1
Application number: DE202022103535.0U
Authority: DE
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Priority date: 2022-06-26
Filing date: 2022-06-26
Publication date: 2022-07-12
Anticipated expiration: 2032-06-27

Abstract

System zur Untersuchung der Anwendung von modifizierter Gallego's Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe, wobei das System umfasst:
eine Hartgewebe-Färbeeinheit zum Durchführen der Differenzialfärbung der Hartgewebe, wobei Hartgewebe, die im Zahn, im Knochen und in der pathologischen Läsion zu sehen sind, ausgewählt werden, und wobei die Differenzialfärbung der ausgewählten Gewebe durchgeführt wird, um ihre Beschaffenheit zu bewerten und um die histopathologische Diagnose zu bestätigen, die durch das Routine-Färbeverfahren erhalten wird;
eine Färbeeinheit für mineralisierte Komponenten zur Durchführung einer Differenzialfärbung der faser-knöchernen Läsionen, die Zement und Knochen enthalten, wobei eine histochemische Identifizierung durch Durchführung der Differenzialfärbung durchgeführt wird; und
eine Auswerteeinheit zum Auswerten der histopathologischen Veränderung, die im Zahnfollikel auftritt, unter Verwendung der radiographischen pericoronalen Radioluzenz von weniger als 3 mm und der Art der Verkalkung und Ablagerung unter Verwendung der modifizierten Gallelo-Färbung, wobei die histologischen Merkmale des Zahnfollikels mit der pericoronalen Breite auch radiographisch korreliert werden.

A system for investigating the application of modified Gallego's stain as a differential stain for hard tissue, the system comprising:
a hard tissue staining unit for performing the differential staining of the hard tissues, wherein hard tissues seen in the tooth, the bone and the pathological lesion are selected, and wherein the differential staining of the selected tissues is performed to assess their condition and to determine the to confirm histopathologic diagnosis obtained by the routine staining procedure;
a mineralized component staining unit for performing differential staining of the fibrous-bony lesions containing cementum and bone, wherein histochemical identification is performed by performing the differential staining; and
an evaluation unit for evaluating the histopathological change occurring in the tooth follicle using the radiographic pericoronal radiolucency of less than 3 mm and the type of calcification and deposit using the modified Gallelo stain, the histological features of the tooth follicle with the pericoronal width also radiographically correlated.

Description

BEREICH DER ERFINDUNGFIELD OF THE INVENTION

Die vorliegende Offenbarung bezieht sich auf das Gebiet der histopathologischen Spezialfärbung mit dem Titel „Modifizierte Gallego's Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe in der oralen Histopathologie“. Insbesondere bezieht sich die vorliegende Offenbarung auf ein System zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe.The present disclosure relates to the field of special histopathological staining entitled "Modified Gallego's stain as a differential stain for hard tissue in oral histopathology". In particular, the present disclosure relates to a system for investigating the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue.

HINTERGRUND DER ERFINDUNGBACKGROUND OF THE INVENTION

Zur Unterscheidung der Gewebe werden Färbemittel verwendet, aber das Problem ist, dass die H- und E-Färbemittel manchmal nicht in der Lage sind, zwischen den Hartgeweben der Mundschleimhaut wie Zement, Dentin, Knochen und Schmelz zu unterscheiden. Außerdem wird vor der Färbung ein zusätzlicher Schritt der Entkalkung durchgeführt, der zu Problemen bei der Färbung führen kann.Stains are used to distinguish the tissues, but the problem is that the H and E stains are sometimes unable to distinguish between the hard tissues of the oral mucosa such as cementum, dentin, bone and enamel. In addition, an additional decalcification step is carried out before staining, which can lead to problems with staining.

Daher ist es notwendig, eine andere Färbung für diesen Zweck zu verwenden. Es wurde herausgefunden, dass die modifizierte Gallegos-Färbung eine bessere Alternative ist, und dies ist die einzige Färbung, die erfolgreich für die Unterscheidung zwischen verschiedenen Arten von oralem Hartgewebe unter Verwendung von entkalktem Gewebe, Gefrierschnitten und auch geschliffenen Schnitten verwendet werden kann. Als die Färbung an Zahnschnitten ausprobiert wurde, erwähnten die Forscher, dass sie auch an Odontomen ausprobiert werden sollte. Alle Bilder in dem Artikel waren schwarz-weiß und die Farben konnten von den Lesern nicht erkannt werden. Die Kenntnis der Farben der in dem Artikel erwähnten Färbung war nur durch die Beschreibung ersichtlich. Daher hat die derzeitige Forschergruppe in dieser Veröffentlichung die Forschung um mehrere Schritte vorangebracht und ihr Färbeprinzip in verschiedenen innovativen odontogenen Forschungen mit verschiedenen fortschrittlichen Technologien umgesetzt. Es wurde auch erfolgreich umgesetzt.Therefore, it is necessary to use a different coloring for this purpose. Modified Gallegos stain was found to be a better alternative and this is the only stain that can be used successfully for distinguishing between different types of oral hard tissue using decalcified tissue, frozen sections and also ground sections. When the staining was tried on dental sections, the researchers mentioned that it should be tried on odontomas as well. All of the images in the article were black and white and the colors could not be discerned by readers. Knowledge of the colors of the coloring mentioned in the article was evident only from the description. Therefore, in this publication, the current research group has advanced the research by several steps and implemented its staining principle in various innovative odontogenic researches with various advanced technologies. It was also implemented successfully.

In Anbetracht der vorangegangenen Diskussion wird deutlich, dass ein System zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe benötigt wird.In view of the foregoing discussion, it is clear that a system is needed to study the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNGSUMMARY OF THE INVENTION

Die vorliegende Offenbarung bezieht sich auf ein System zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzierungsfärbung für Hartgewebe. Die modifizierte Gallego's Färbung ist eine Variante der Lille's Färbung, wobei diese modifizierte Färbung basische Reagenzien wie Hämatoxylin, Carbol Fuschin und Anilinblau zur Differenzierung von hartem Gewebe verwendet. Die modifizierte Gallego-Färbung wurde in verschiedenen normalen Geweben und Pathologien zur Analyse der Beschaffenheit von Hartgeweben erprobt, z. B. für orale Hartgewebe in der oralen Pathologie, wobei die Differenzierung zwischen den harten und verschiedenen Arten von Weichgeweben und verschiedenen Arten von Hartgeweben in derselben Läsion durchgeführt wird. Sie wird mit der Hämatoxylin- und Eosinfärbung (H&E) korreliert. Sie wurde in der folgenden Pionierarbeit erprobt: Fibro-ossäre Läsion - bei der die Läsionen Zement und Knochen enthalten. Die Ergebnisse zeigten, dass die modifizierte Gallego-Färbung das beste Hilfsmittel für die Diagnose von fibrös-knöchernen Läsionen sein könnte. Zahnfollikelgewebe - Gewebe für das Vorhandensein von pathologischen Veränderungen, die sowohl mit epithelialen als auch mit mesenchymalen Komponenten verbunden sind, um die histopathologische Variation im Zahnfollikel und die Art der Verkalkung und Ablagerung zu bewerten, und ein weiteres Ziel ist es, die histologischen Merkmale des Zahnfollikels mit der perikoronalen Breite röntgenologisch zu korrelieren. Diese Differenzialfärbung könnte auch als alternative Färbung in der forensischen Odontologie in Betracht gezogen werden, bevor man zu fortgeschritteneren Diagnoseverfahren übergeht. Sie kann auch in der forensischen Wissenschaft verwendet werden, um die abgetrennten, fragmentierten Hartgewebe des Körpers zu identifizieren, da sie verschiedenen Hartgeweben unterschiedliche Farben verleiht.The present disclosure relates to a system for investigating the application of modified Gallego stain as a hard tissue differential stain. Modified Gallego's stain is a variant of Lille's stain, this modified stain using basic reagents such as hematoxylin, carbol fuschin and aniline blue to differentiate hard tissue. Modified Gallego staining has been tried in various normal tissues and pathologies to analyze the nature of hard tissues, e.g. B. For oral hard tissues in oral pathology, the differentiation between the hard and different types of soft tissues and different types of hard tissues is performed in the same lesion. It is correlated with hematoxylin and eosin staining (H&E). It has been tried in the following pioneering work: Fibro-osseous lesion - where the lesions contain cement and bone. The results indicated that modified Gallego staining could be the best tool for diagnosing fibrous-bony lesions. Tooth follicle tissue - tissue for the presence of pathological changes associated with both epithelial and mesenchymal components, to evaluate the histopathological variation in the tooth follicle and the nature of calcification and deposition, and another objective is to assess the histological features of the tooth follicle to correlate radiologically with the pericoronal width. This differential staining could also be considered as an alternative staining in forensic odontology before proceeding to more advanced diagnostic procedures. It can also be used in forensic science to identify the severed, fragmented hard tissues of the body, as it gives different colors to different hard tissues.

Die vorliegende Offenlegung zielt darauf ab, ein System für die Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe bereitzustellen. Das System umfasst: eine Hartgewebe-Färbeeinheit zur Durchführung der Differenzialfärbung der Hartgewebe, wobei Hartgewebe, die im Zahn, im Knochen und in der pathologischen Läsion zu sehen sind, ausgewählt werden, und wobei die Differenzialfärbung der ausgewählten Gewebe durchgeführt wird, um ihre Beschaffenheit zu bewerten und die histopathologische Diagnose zu bestätigen, die durch das Routine-Färbeverfahren erhalten wird; eine Färbeeinheit für mineralisierte Komponenten zur Durchführung einer Differenzialfärbung der fibrös-knöchernen Läsionen, die Zement und Knochen enthalten, wobei eine histochemische Identifizierung durch Durchführung der Differenzialfärbung durchgeführt wird; und eine Bewertungseinheit zur Bewertung der histopathologischen Veränderung, die im Zahnfollikel auftritt, unter Verwendung einer radiographischen perikoronalen Röntgendurchlässigkeit von weniger als 3 mm und der Art der Verkalkung und Ablagerung unter Verwendung der modifizierten Gallelo-Färbung, wobei die histologischen Merkmale des Zahnfollikels mit der perikoronalen Breite auch radiographisch korreliert werden.The present disclosure aims to provide a system for studying the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue. The system includes: a hard tissue staining unit for performing differential staining of the hard tissues, selecting hard tissues seen in the tooth, bone and pathological lesion, and performing differential staining on the selected tissues to determine their nature evaluate and confirm the histopathologic diagnosis obtained by the routine staining procedure; a mineralized component staining unit for performing differential staining of the fibrous-bony lesions containing cementum and bone, wherein histochemical identification is performed by performing the differential staining; and an evaluation unit for evaluating the histopathological change occurring in the tooth follicle using a radiographic pericoronal X-ray transmittance of less than 3 mm and the type of calcification and deposition using the modified Gal lelo staining, in which the histological features of the tooth follicle are also radiographically correlated with the pericoronal width.

Ein Ziel der vorliegenden Offenlegung ist die Bereitstellung eines Systems zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe.An aim of the present disclosure is to provide a system for investigating the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Offenlegung ist die Durchführung von Differenzialfärbungen unter Verwendung der H&E-Färbung und der modifizierten Gallego-Färbung, wobei beide Färbungen zur Korrelation der histopathologischen Diagnose verwendet werden.Another objective of the present disclosure is to perform differential staining using H&E stain and modified Gallego stain, both stains being used to correlate histopathological diagnosis.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Offenlegung ist es, zwischen Hart- und Weichgewebe zu unterscheiden.Another aim of the present disclosure is to distinguish between hard and soft tissue.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Offenlegung ist die Unterscheidung der mineralisierten Komponenten in ossifizierenden Fibromen, zementierenden Fibromen und zementierenden Fibromen.Another aim of the present disclosure is to distinguish the mineralized components in ossifying fibroma, cementing fibroma and cementing fibroma.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Veröffentlichung ist es, die histopathologischen Veränderungen im Zahnfollikel und die Art der Verkalkung und Ablagerungen mit Hilfe der modifizierten Gallego-Färbung zu bewerten.Another aim of the present publication is to evaluate the histopathological changes in the dental follicle and the nature of calcification and deposits using modified Gallego staining.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Veröffentlichung ist es, die histologischen Merkmale des Zahnfollikels mit der pericoronalen Breite radigraphisch zu korrelieren.Another aim of the present publication is to radiographically correlate the histological features of the dental follicle with the pericoronal width.

Ein weiteres Ziel der vorliegenden Offenlegung ist es, die Eignung der modifizierten Gallego-Färbung als alternative Färbung für die Durchführung verschiedener Diagnosen zu zeigen.Another aim of the present disclosure is to demonstrate the suitability of the modified Gallego stain as an alternative stain for performing various diagnoses.

Zur weiteren Verdeutlichung der Vorteile und Merkmale der vorliegenden Offenbarung wird eine genauere Beschreibung der Erfindung durch Bezugnahme auf bestimmte Ausführungsformen gegeben, die in den beigefügten Figuren dargestellt sind. Es wird davon ausgegangen, dass diese Figuren nur typische Ausführungsformen der Erfindung darstellen und daher nicht als Einschränkung des Umfangs der Erfindung zu betrachten sind. Die Erfindung wird mit zusätzlicher Spezifität und Detail mit den beigefügten Figuren beschrieben und erläutert werden.In order to further clarify the advantages and features of the present disclosure, a more detailed description of the invention is provided by reference to specific embodiments that are illustrated in the accompanying figures. It is understood that these figures represent only typical embodiments of the invention and therefore should not be considered as limiting the scope of the invention. The invention will be described and illustrated with additional specificity and detail with the accompanying figures.

Figurenlistecharacter list

Diese und andere Merkmale, Aspekte und Vorteile der vorliegenden Offenbarung werden besser verstanden, wenn die folgende detaillierte Beschreibung unter Bezugnahme auf die beigefügten Figuren gelesen wird, in denen gleiche Zeichen gleiche Teile in den Figuren darstellen, wobei:

1 ein Blockdiagramm eines Systems zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung zeigt;
2 ein Flussdiagramm eines differenziellen Färbeverfahrens unter Verwendung von H & E und modifizierter Gallego-Färbung gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung zeigt;
3A und 3B die Interpretation der Art der Klassifizierung unter Verwendung der modifizierten Gallego-Färbung in normalem bzw. pathologischem Gewebe in Übereinstimmung mit einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung veranschaulichen;
4 die Kreuztabelle der Hämatoxylin- und Eosinfärbung und der modifizierten Gallego-Färbung für die Gruppen der ossifizierenden Fibrome (OF), der zementierenden OF (COF) und der zementierenden Fibrome (CF) gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung zeigt; und
5A und 5B die Ergebnisse der Auswertung von 50 Zahnfollikeln von impaktierten Zähnen, um die histopathologischen Veränderungen in Zahnfollikeln gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenlegung zu bewerten zeigen.

These and other features, aspects, and advantages of the present disclosure will be better understood when the following detailed description is read with reference to the accompanying figures, in which like characters represent like parts throughout the figures, wherein:

1 Figure 12 shows a block diagram of a system for investigating the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue, according to an embodiment of the present disclosure;
2 Figure 12 shows a flow chart of a differential staining procedure using H&E and modified Gallego staining according to an embodiment of the present disclosure;
3A and 3B illustrate the interpretation of the type of classification using modified Gallego staining in normal and pathological tissue, respectively, in accordance with an embodiment of the present disclosure;
4 Figure 10 shows the cross-tabulation of hematoxylin and eosin staining and modified Gallego staining for the groups of ossifying fibroids (OF), cementing OF (COF), and cementing fibroids (CF) according to an embodiment of the present disclosure; and
5A and 5B shows the results of evaluating 50 dental follicles from impacted teeth to assess histopathological changes in dental follicles according to an embodiment of the present disclosure.

Der Fachmann wird verstehen, dass die Elemente in den Figuren der Einfachheit halber dargestellt sind und nicht unbedingt maßstabsgetreu gezeichnet wurden. Die Flussdiagramme veranschaulichen beispielsweise das Verfahren anhand der wichtigsten Schritte, um das Verständnis der Aspekte der vorliegenden Offenbarung zu verbessern. Darüber hinaus kann es sein, dass eine oder mehrere Komponenten der Vorrichtung in den Figuren durch herkömmliche Symbole dargestellt sind, und dass die Figuren nur die spezifischen Details zeigen, die für das Verständnis der Ausführungsformen der vorliegenden Offenbarung relevant sind, um die Figuren nicht mit Details zu überfrachten, die für Fachleute, die mit der vorliegenden Beschreibung vertraut sind, leicht erkennbar sind.Those skilled in the art will understand that the elements in the figures are presented for simplicity and are not necessarily drawn to scale. For example, the flow charts illustrate the method of key steps to enhance understanding of aspects of the present disclosure. Furthermore, one or more components of the device may be represented in the figures by conventional symbols, and the figures only show the specific details relevant to understanding the embodiments of the present disclosure to avoid deleting the figures with details to overload, which are easily recognizable to those skilled in the art familiar with the present description.

DETAILLIERTE BESCHREIBUNGDETAILED DESCRIPTION

Um das Verständnis der Erfindung zu fördern, wird nun auf die in den Figuren dargestellte Ausführungsform Bezug genommen und diese mit bestimmten Worten beschrieben. Es versteht sich jedoch von selbst, dass damit keine Einschränkung des Umfangs der Erfindung beabsichtigt ist, wobei solche Änderungen und weitere Modifikationen des dargestellten Systems und solche weiteren Anwendungen der darin dargestellten Grundsätze der Erfindung in Betracht gezogen werden, wie sie einem Fachmann auf dem Gebiet der Erfindung normalerweise einfallen würden.For the purposes of promoting an understanding of the invention, reference will now be made to the embodiment illustrated in the figures and specific language will be used to describe the same. It should be understood, however, that no limitation on the scope of the invention is intended, and such changes and further modifications of the system illustrated and such further applications of the principles of the invention illustrated therein as would normally occur to one skilled in the art to which the invention pertains.

Es versteht sich für den Fachmann von selbst, dass die vorstehende allgemeine Beschreibung und die folgende detaillierte Beschreibung beispielhaft und erläuternd für die Erfindung sind und diese nicht einschränken sollen.It will be understood by those skilled in the art that the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory of the invention and are not intended to be limiting.

Wenn in dieser Beschreibung von „einem Aspekt“, „einem anderen Aspekt“ oder ähnlichem die Rede ist, bedeutet dies, dass ein bestimmtes Merkmal, eine bestimmte Struktur oder eine bestimmte Eigenschaft, die im Zusammenhang mit der Ausführungsform beschrieben wird, in mindestens einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung enthalten ist. Daher können sich die Ausdrücke „in einer Ausführungsform“, „in einer anderen Ausführungsform“ und ähnliche Ausdrücke in dieser Beschreibung alle auf dieselbe Ausführungsform beziehen, müssen es aber nicht.When this specification refers to "an aspect," "another aspect," or the like, it means that a particular feature, structure, or characteristic described in connection with the embodiment is present in at least one embodiment included in the present disclosure. Therefore, the phrases "in one embodiment," "in another embodiment," and similar phrases throughout this specification may or may not all refer to the same embodiment.

Die Ausdrücke „umfasst“, „enthaltend“ oder andere Variationen davon sollen eine nicht ausschließliche Einbeziehung abdecken, so dass ein Verfahren oder eine Methode, die eine Liste von Schritten umfasst, nicht nur diese Schritte einschließt, sondern auch andere Schritte enthalten kann, die nicht ausdrücklich aufgeführt sind oder zu einem solchen Verfahren oder einer solchen Methode gehören. Ebenso schließen eine oder mehrere Vorrichtungen oder Teilsysteme oder Elemente oder Strukturen oder Komponenten, die mit „umfasst...a“ eingeleitet werden, nicht ohne weitere Einschränkungen die Existenz anderer Vorrichtungen oder anderer Teilsysteme oder anderer Elemente oder anderer Strukturen oder anderer Komponenten oder zusätzlicher Vorrichtungen oder zusätzlicher Teilsysteme oder zusätzlicher Elemente oder zusätzlicher Strukturen oder zusätzlicher Komponenten aus.The terms "comprises," "including," or other variations thereof are intended to cover non-exclusive inclusion, such that a method or method that includes a list of steps includes not only those steps, but may also include other steps that are not expressly stated or pertaining to any such process or method. Likewise, any device or subsystem or element or structure or component preceded by "comprises...a" does not, without further limitation, exclude the existence of other devices or other subsystem or other element or other structure or other component or additional device or additional subsystems or additional elements or additional structures or additional components.

Sofern nicht anders definiert, haben alle hierin verwendeten technischen und wissenschaftlichen Begriffe die gleiche Bedeutung, wie sie von einem Fachmann auf dem Gebiet, zu dem diese Erfindung gehört, allgemein verstanden wird. Das System, die Methoden und die Beispiele, die hier angegeben werden, dienen nur der Veranschaulichung und sind nicht als Einschränkung gedacht.Unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one skilled in the art to which this invention pertains. The system, methods, and examples provided herein are for purposes of illustration only and are not intended to be limiting.

Ausführungsformen der vorliegenden Offenbarung werden im Folgenden unter Bezugnahme auf die beigefügten Figuren im Detail beschrieben.Embodiments of the present disclosure are described in detail below with reference to the attached figures.

1 zeigt ein Blockdiagramm eines Systems zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung. Das System 100 umfasst eine Hartgewebefärbeeinheit 102 zur Durchführung der Differenzialfärbung der Hartgewebe, wobei Hartgewebe, die im Zahn, im Knochen und in der pathologischen Läsion zu sehen sind, ausgewählt werden, und wobei die Differenzialfärbung der ausgewählten Gewebe durchgeführt wird, um ihre Beschaffenheit zu bewerten und um die histopathologische Diagnose zu bestätigen, die durch das Routinefärbeverfahren erhalten wird. 1 12 shows a block diagram of a system for investigating the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue, according to an embodiment of the present disclosure. The system 100 includes a hard tissue staining unit 102 for performing differential staining of the hard tissues, selecting hard tissues seen in the tooth, bone and pathological lesion, and performing differential staining on the selected tissues to assess their condition and to confirm the histopathologic diagnosis obtained by the routine staining procedure.

In einer Ausführungsform wird eine Färbeeinheit 104 für mineralisierte Komponenten verwendet, um eine Differenzialfärbung der faser-knöchernen Läsionen, die Zement und Knochen enthalten, durchzuführen, wobei eine histochemische Identifizierung durch die Durchführung der Differenzialfärbung durchgeführt wird.In one embodiment, a mineralized component staining unit 104 is used to perform differential staining of the fibrous-bony lesions containing cementum and bone, and histochemical identification is performed by performing the differential staining.

In einer Ausführungsform wird eine Auswerteeinheit 106 verwendet, um die histopathologischen Veränderungen im Zahnfollikel unter Verwendung einer perikoronalen Röntgendurchlässigkeit von weniger als 3 mm und die Art der Verkalkung und Ablagerung unter Verwendung der modifizierten Gallego-Färbung zu bewerten, wobei die histologischen Merkmale des Zahnfollikels mit der perikoronalen Breite auch radiologisch korreliert werden.In one embodiment, an evaluation unit 106 is used to evaluate the histopathological changes in the tooth follicle using a pericoronal radiopacity of less than 3 mm and the type of calcification and deposit using the modified Gallego stain, where the histological features of the tooth follicle are compared with the pericoronal width can also be correlated radiologically.

In einer Ausführungsform wird eine Hartgewebsfärbung zur Durchführung der Differentialfärbung der oralen Hartgewebe, zur Bestätigung der histopathologischen Diagnose Differentialfärbung der fibrös-knöchernen Läsionen, die Zement und Knochen enthalten, und zur Bewertung der histopathologischen Veränderung, die in den Zahnfollikeln auftritt, unter Verwendung der modifizierten Gallego-Färbung und ihrer Korrelation mit der röntgenologischen perirokornalen Radioluzenbreite verwendet.In one embodiment, hard tissue staining is used to perform differential staining of the oral hard tissues, confirm the histopathological diagnosis of the fibrous-osseous lesions containing cementum and bone, and evaluate the histopathological change occurring in the dental follicles using the modified Gallego -staining and its correlation with the radiographic perirocornal radiolucene width.

In einer Ausführungsform wird die Differenzialfärbung mit einer Hämatoxylin- und Eosinfärbung (H und E) und einer modifizierten Gallego-Färbung durchgeführt.In one embodiment, differential staining is performed with a hematoxylin and eosin stain (H and E) and a modified Gallego stain.

In einer Ausführungsform wird die Differenzialfärbung des Hartgewebes zur Unterscheidung zwischen Hart- und Weichgewebe, zur Unterscheidung verschiedener Arten von Hartgewebe in derselben Läsion und zur Korrelation der histopathologischen Diagnose mittels Hämatoxylin und Eosin (H und E) und modifizierter Gallego-Färbung durchgeführt.In one embodiment, differential staining of hard tissue is performed to distinguish between hard and soft tissue, to distinguish different types of hard tissue in the same lesion, and to correlate histopathologic diagnosis using hematoxylin and eosin (H and E) and modified Gallego stain.

In einer Ausführungsform werden für die Durchführung der Differentialfärbung der Hartgewebe Grundschnitt, entkalkte Schnitte und Weichgewebe ausgewählt, wobei die ausgewählten Schnitte, die Grundschnitt erwarten, mit Hämatoxylin und Eosin (H und E) gefärbt werden und die Schnitte anschließend auch mit modifizierter Gallego-Färbung gefärbt werden, um die Färbung der Hartgewebe zu korrelieren.In one embodiment, to perform the differential staining, the hard tissue base section, decalcified sections, and soft tissue tissue selected, with selected sections awaiting basal section stained with hematoxylin and eosin (H and E) and sections subsequently also stained with modified Gallego stain to correlate hard tissue staining.

In einer Ausführungsform werden die mineralisierten Komponenten in ossifizierenden Fibromen, zementierenden Fibromen und zementierenden Fibromen durch den Vergleich der Hämatoxylin- und Eosinfärbung (H und E) mit der modifizierten Gallego-Färbung unterschieden, wobei die insgesamt 10 Kontrollgruppen aus geschliffenen Knochen- und Zahnabschnitten, entkalkten Knochen- und Zahnabschnitten und Odontomabschnitten mit Zement und Weichgewebe bestehen.In one embodiment, the mineralized components are distinguished in ossifying fibroma, cementing fibroma and cementing fibroma by comparing the hematoxylin and eosin stain (H and E) with the modified Gallego stain, with the total of 10 control groups of ground bone and tooth sections, decalcified Bone and tooth sections and odontoma sections with cement and soft tissue.

In einer Ausführungsform umfasst die differentielle Färbung der mineralisierten Komponenten die Gewinnung von zwei in Paraffin eingebetteten Schnitten jeder Probe und deren anschließende Färbung mit Hämatoxylin und Eosin (H und E) und modifizierter Gallego-Färbung.In one embodiment, differential staining of the mineralized components comprises obtaining two paraffin-embedded sections of each specimen and then staining them with hematoxylin and eosin (H and E) and modified Gallego stain.

In einer Ausführungsform wird das Zahnfollikelgewebe auf das Vorhandensein pathologischer Veränderungen untersucht, die sowohl mit epithelialen als auch mit mesenchymalen Komponenten verbunden sind, wobei Hämatoxylin- und Eosin-Färbung (H und E) mit modifizierter Gallego-Färbung zur Bewertung verwendet werden.In one embodiment, the dental follicle tissue is examined for the presence of pathological changes associated with both epithelial and mesenchymal components using hematoxylin and eosin stain (H and E) with modified Gallego stain for evaluation.

2 zeigt ein Flussdiagramm eines differenziellen Färbeverfahrens unter Verwendung von H & E und modifizierter Gallego-Färbung gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung. In Schritt 202 umfasst das Verfahren 200 das Entparaffinieren der ausgewählten Abschnitte. 2 12 shows a flow diagram of a differential staining procedure using H&E and modified Gallego staining according to an embodiment of the present disclosure. In step 202, the method 200 includes dewaxing the selected sections.

In Schritt 204 umfasst das Verfahren 200 die Färbung der Schnitte mit Hämatoxylin und Eosin (H und E) für 8 bis 12 Minuten und anschließendes Spülen mit destilliertem Wasser.In step 204, the method 200 includes staining the sections with hematoxylin and eosin (H and E) for 8 to 12 minutes and then rinsing with distilled water.

In Schritt 206 umfasst das Verfahren 200 das Färben in Beize für 2 Minuten und das anschließende Spülen mit destilliertem Wasser, wobei die Beize durch Mischen von 200 ml destilliertem Wasser in 1,5 ml konzentrierter Salpetersäure mit 1 ml 40 % Formaldehyd und 1.5 ml USP-Eisenchlorid gebildet wird.In step 206, the method 200 includes staining in stain for 2 minutes and then rinsing with distilled water, the stain being prepared by mixing 200 ml distilled water in 1.5 ml concentrated nitric acid with 1 ml 40% formaldehyde and 1.5 ml USP iron chloride is formed.

In Schritt 208 umfasst das Verfahren 200 die Färbung mit 3 ml Karbolfuschin in 50 ml 0.2 %iger Essigsäure und anschließendes Spülen mit destilliertem Wasser.In step 208, the method 200 includes staining with 3 mL of carbolus fuschin in 50 mL of 0.2% acetic acid and then rinsing with distilled water.

In Schritt 210 umfasst das Verfahren 200 das Waschen mit einem Beizmittel über einen Zeitraum von 1-2 Minuten.In step 210, the method 200 includes washing with a caustic agent for a period of 1-2 minutes.

In Schritt 212 umfasst das Verfahren 200 die Färbung mit 0.01 % Anilinblau in gesättigter Pikrinsäurelösung über einen Zeitraum von 30 Sekunden.In step 212, the method 200 includes staining with 0.01% aniline blue in saturated picric acid solution for 30 seconds.

In Schritt 214 umfasst das Verfahren 200 die Dehydratisierung und Reinigung mit Xylol und die anschließende Einbettung in Dibutylphthalat in Xylol-Einbettungsmedien.In step 214, the method 200 includes dehydration and purification with xylene and subsequent embedding in dibutyl phthalate in xylene embedding media.

In einer Ausführungsform sind die Proben, die für die Differenzialfärbung der Hartgewebe ausgewählt werden, Schliffe, die normales Gewebe und pathologisches Gewebe umfassen, wobei normales Gewebe Knochen und Zähne und pathologisches Gewebe Odontome umfasst. Entkalkte Schnitte, die ähnliche Proben wie Schliffe umfassen, und Weichgewebebiopsien der pathologischen Gewebe, die kalzifizierende odontogene Zyste, adenomatoiden odontogenen Tumor und zementverknöcherndes Fibrom umfassen. Die Gewebe werden aus den Archiven ausgewählt, die verkalkte Komponenten in verschiedenen Formen wie Zementoid, Dentinoid, Osteoid, Schmelz, Dentin, Zement, dystrophische Verkalkungen, Knochen usw. aufweisen. Die ausgewählten Abschnitte werden zunächst mit der H- und E-Färbung und dann mit der modifizierten Gallego-Färbung gefärbt, indem eine Differenzialfärbung durchgeführt wird.In one embodiment, the specimens selected for differential staining of the hard tissues are sections that include normal tissue and pathologic tissue, where normal tissue includes bones and teeth and pathologic tissue includes odontomas. Decalcified sections, which include similar specimens as ground sections, and soft tissue biopsies of the pathologic tissues, which include calcifying odontogenic cyst, adenomatoid odontogenic tumor, and cementitious fibroma. The tissues are selected from the archives that have calcified components in various forms such as cementoid, dentinoid, osteoid, enamel, dentin, cementum, dystrophic calcification, bone, etc. The selected sections are first stained with H and E staining and then with modified Gallego staining by performing differential staining.

In einer Ausführungsform umfassen die Läsionen mit knöchernen Komponenten ossifizierende Fibrome (OF), zementierende OF (COF) und zementierende Fibrome (CF), wobei das Experiment zur Bestimmung der histochemischen Identifizierung der fibro-ossären Läsionen insgesamt 30 Fälle in der Studiengruppe umfasst, wobei jeweils 10 Fälle ossifizierende Fibrome (OF), zementierende OF (COF) bzw. zementierende Fibrome (CF) sind. Die Färbung der ausgewählten Proben wird durchgeführt, indem von jeder Probe zwei in Paraffin eingebettete Schnitte entnommen werden, die dann mit der H- und E-Färbung und der modifizierten Gallego-Färbung gefärbt werden. Die gefärbten Proben oder Schnitte werden dann unter dem Mikroskop bei jeder Vergrößerung untersucht, und gemäß den von Gallego vorgegebenen Kriterien wird die Art der Verkalkung bestimmt. Die mineralisierten Ablagerungen werden anhand von drei verschiedenen mikroskopischen Feldern beobachtet und analysiert, die nach dem Zufallsprinzip ausgewählt werden, wobei die Beobachtung und Analyse unter Verwendung eines x40-Objektivs unter dem Lichtmikroskop Leica Reseach von zwei Pathologen durchgeführt wird, denen die Augen verbunden wurden, wobei in beiden Abschnitten darauf geachtet wird, dass die gleichen Felder sichtbar gemacht werden. Eine LES-Software wird für die Bilderfassung verwendet, um eine Analyse der Bilder durchzuführen. Die Art der Verkalkung wird bestimmt, und die histopathologische Diagnose wird mit beiden Färbungen verglichen und korreliert, um festzustellen, ob sich die Diagnosen geändert haben oder gleich geblieben sind. Es wird eine Kreuztabelle der kategorialen Daten erstellt, da aufgrund fehlender numerischer Daten keine statistischen Tests durchgeführt werden können. Nach der Kreuztabellierung werden deskriptive statistische Analysen durchgeführt, und die Ergebnisse der kontinuierlichen Messungen werden als Mittelwert ± Standardabweichung und die Ergebnisse der kategorialen Messungen als Anzahl (%) dargestellt.In one embodiment, the lesions with bony components include ossifying fibroma (OF), cementing OF (COF), and cementing fibroma (CF), and the experiment to determine the histochemical identification of the fibro-osseous lesions includes a total of 30 cases in the study group, each with 10 cases are ossifying fibroma (OF), cementing OF (COF) or cementing fibroma (CF). Staining of the selected specimens is performed by taking two paraffin-embedded sections from each specimen, which are then stained with the H and E stain and the modified Gallego stain. The stained samples or sections are then examined under the microscope at each magnification and, according to the criteria provided by Gallego, the type of calcification is determined. The mineralized deposits are observed and analyzed through three different microscopic fields, chosen at random, the observation and analysis being performed by two pathologists, blindfolded, using a x40 objective under the Leica Reseach light microscope, where care is taken in both sections to make the same fields visible. A LES software used for image acquisition to perform an analysis of the images. The type of calcification is determined and the histopathologic diagnosis is compared and correlated with both stains to determine if the diagnoses have changed or remained the same. A crosstabulation of the categorical data is generated because statistical tests cannot be performed due to the lack of numerical data. After cross-tabulation, descriptive statistical analyzes are performed and the results of continuous measurements are presented as mean ± standard deviation and the results of categorical measurements are presented as counts (%).

In einer Ausführungsform werden zur Untersuchung der histopathologischen Variationen im Zahnfollikel die weggeworfenen extrahierten impaktierten Zähne gesammelt und im Fixiermittel konserviert, wobei insgesamt 50 Zahnfollikel der impaktierten Zähne gesammelt und für die Bewertung der histopathologischen Variationen im Zahnfollikel einbezogen werden, wobei die Patienten, die dafür eingeschrieben werden, die Patienten sind, die die Entfernung von mandibulären oder maxillären vollständig impaktierten Zähnen aller Arten benötigen, die ausreichend Zahnfollikelgewebe haben. Das perikoronale Gewebe wird nach der Extraktion des dritten Molaren sorgfältig kürettiert und dann zur histopathologischen Untersuchung eingeschickt. Als Kontrollgruppe werden die Abschnitte mit sich entwickelnden Zahnkeimen und entkalkten Zähnen aus den Archiven ausgewählt. Die Patienten, die eine radiologische Breite von mehr als 3 mm aufweisen, und die impaktierten Zähne mit einer etablierten Pathologie werden von dieser Studie ausgeschlossen. Bei jedem Fall wird das Panoramaröntgenbild auf das Vorhandensein einer perikoronalen Röntgenstrahlenbildung untersucht. Der perikoronale Raum an den mesialen, distalen und okklusalen Flächen wird mit dem Messwerkzeug der Kodak Dental Imaging Software gemessen, und die größte Breite wird ebenfalls aufgezeichnet. Eine mikroskopische Untersuchung der epithelialen und mesenchymalen Komponenten aller Zahnfollikelproben wird unter dem Lichtmikroskop durchgeführt. Bei 4-facher, 10-facher und 40-facher Vergrößerung werden die Art des Epithels, das Bindegewebe, das Vorhandensein und die Art der Verkalkung, das Vorhandensein und die Aktivität der odontogenen Zellreste und zusätzliche Merkmale wie Riesenzellen, klare Zellen, Fettzellen, neoplastische Umwandlungen usw. untersucht. Bei der mikroskopischen Beurteilung des Gewebes mit Hilfe der H- und E-Färbung werden die Zahnfollikel als zystisch eingestuft, wobei die Zahnfollikel ausgekleidet sind durch einige Schichten des geschichteten Plattenepithels, da die Dentin-Zyste in der Regel von reduziertem Schmelz-Epithel ausgekleidet ist. Die Art der Verkalkungen, die in den Bindegeweben des Zahnfollikels vorhanden sind, werden mit der modifizierten Gallego-Färbung als Zement bestimmt, wenn sie rot gefärbt sind, und als Dentinoid oder Knochen, wenn sie grün gefärbt sind, wobei die Verkalkungen in den Bindegeweben des Zahnfollikels durch pathologische Veränderungen entstehen können. In dieser Studie werden die Daten statistisch erfasst, und der Pearson-Chi-Quadrat-Test wird zur Prüfung der Zusammenhänge zwischen den Merkmalen verwendet. Die Daten mit Mittelwerten und Prozentsätzen werden für jede Gruppe berechnet, und der Chi-Quadrat-Test wird für die Analyse der kategorischen Daten verwendet, wobei in all diesen Tests die p-Werte als 0.05 oder weniger für die statistische Signifikanz angesehen werden.In one embodiment, to examine the histopathological variations in the tooth follicle, the discarded extracted impacted teeth are collected and preserved in the fixative, with a total of 50 tooth follicles of the impacted teeth being collected and included for the assessment of the histopathological variations in the tooth follicle, with the patients being enrolled who are patients who require the removal of mandibular or maxillary fully impacted teeth of any type that have sufficient dental follicular tissue. The pericoronal tissue is carefully curetted after extraction of the third molar and then sent for histopathological examination. As a control group, the sections with developing tooth germs and decalcified teeth are selected from the archives. Patients presenting a radiographic width greater than 3 mm and impacted teeth with an established pathology are excluded from this study. In each case, the panoramic radiograph is examined for the presence of pericoronal radiographic formation. The pericoronal space at the mesial, distal, and occlusal surfaces is measured with the Kodak Dental Imaging Software measurement tool and the greatest width is also recorded. A microscopic examination of the epithelial and mesenchymal components of all tooth follicle specimens is performed under the light microscope. At 4x, 10x and 40x magnification, the type of epithelium, connective tissue, the presence and type of calcification, the presence and activity of odontogenic cell debris and additional features such as giant cells, clear cells, fat cells, neoplastic transformations, etc. examined. On microscopic evaluation of the tissue using H and E staining, the dental follicles are classified as cystic, the dental follicles being lined by some layers of stratified squamous epithelium, since the dentinal cyst is usually lined by reduced enamel epithelium. The type of calcifications present in the connective tissues of the dental follicle are determined with the modified Gallego stain as cement when stained red and dentinoid or bone when stained green, the calcifications present in the connective tissues of the Tooth follicles can be caused by pathological changes. In this study, the data are statistically collected and Pearson's chi-square test is used to test the associations between the characteristics. The data with means and percentages are calculated for each group and the chi-square test is used for the analysis of the categorical data, in all these tests p-values are taken as 0.05 or less for statistical significance.

3A und 3B veranschaulichen die Interpretation der Art der Klassifizierung mit modifizierter Gallego-Färbung in den normalen Geweben bzw. pathologischen Geweben gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenlegung. Bei dieser differenzierten Färbung der Hartgewebe werden alle normalen und pathologischen Gewebe mit H&E und Gallego's Färbung gefärbt, wobei die Interpretation der Färbung unter dem Mikroskop erfolgt und die Beobachtung gemacht wird. Die Tabellen in 3A und 3B zeigen die Korrelation der histopathologischen Diagnose nach der H&E-Färbung und der modifizierten Gallego-Färbung. Die Ergebnisse der Beobachtung werden im Folgenden näher erläutert. 3A and 3B illustrate the interpretation of the type of classification with modified Gallego staining in the normal tissues and pathological tissues, respectively, according to an embodiment of the present disclosure. In this differentiated staining of hard tissues, all normal and pathological tissues are stained with H&E and Gallego's stain, interpretation of staining is done under microscope and observation is made. The tables in 3A and 3B show the correlation of histopathological diagnosis after H&E staining and modified Gallego staining. The results of the observation are explained in more detail below.

Odontogener Tumor: Diese Kategorie umfasst die Untersuchung von Läsionen wie dem Dentinogenen Geisterzelltumor, dem Odontom und dem Adenomatoiden Odontogenen Tumor.Odontogenic Tumor: This category includes the study of lesions such as dentinogenic ghost cell tumor, odontoma, and adenomatoid odontogenic tumor.

Dentinogener Geisterzelltumor: Dieser Schnitt zeigt die Proliferation des odontogenen Epithels in ameloblastomatösem Patter unter der H&E-Färbung. Der deutliche Nachweis von Geisterzellen zusammen mit der Verkalkung weist auf den dentinogenen Geisterzelltumor hin. Dentinogenic ghost cell tumor: This section shows proliferation of odontogenic epithelium in ameloblastomatous pattern under H&E stain. The clear evidence of ghost cells along with the calcification indicates the dentinogenic ghost cell tumor.

Es werden zwei verschiedene Arten von Ablagerungen beobachtet, wobei eine Ablagerung innerhalb der sternförmigen retikulären Zellen und die andere Ablagerung in der Nähe der großen säulenförmigen Zellen zu sehen ist. Unter der modifizierten Gallego-Färbung sind die Ablagerungen in den Blättern des sternförmigen Retikulums grün gefärbt, was darauf hinweist, dass es sich um Dentinoide handelt. Die Ablagerungen, die an die hohen Säulenzellen angrenzen, sind rosa gefärbt, was darauf hindeutet, dass es sich um Schmelzmatrix handelt, die der Farbe des Schmelzes im geschliffenen Abschnitt des normalen Zahns entspricht.Two different types of deposits are observed, with one deposit seen within the stellate reticular cells and the other deposit seen near the large columnar cells. Under modified Gallego staining, the deposits in the leaves of the stellate reticulum are stained green, indicating that they are dentinoids. The deposits bordering the tall columnar cells are colored pink, suggesting that it is enamel matrix, which matches the color of the enamel in the ground section of the normal tooth.

Odontom (Komplex): Im Fall des Schliffs ist zu beobachten, dass ein Abschnitt Dentin mit den Dentintubuli zeigt, die durch ihn verlaufen, und die Schmelzablagerung in dunkelbraunen Kügelchen, wobei auch eine unregelmäßige Zementablagerung zu beobachten ist. Unter der Gallego-Färbung wird festgestellt, dass die Ablagerung des Dentins grün ist und Dentintubuli aufweist. Es ist zu erkennen, dass der Zahnschmelz kugelförmige Ablagerungen in rosa Farbe aufweist und das Zementum Ablagerungen in Blättern von dunkelroter Farbe aufweist. Der entkalkte Schnitt unter der H&E-Färbung zeigt eine unregelmäßige Anordnung von Dentin, Schmelz, Schmelzzwischenräumen, Zement und pulpaähnlichem Bindegewebe, die eine unregelmäßige Masse bilden. Unter der Gallego-Färbung ist zu erkennen, dass das Hartgewebe eine unregelmäßige Anordnung aufweist, wobei die Farbe mit den normalen Bestandteilen des Zahns unter dieser Färbung übereinstimmt. Die grünen Ablagerungsschichten werden beobachtet, und der Verlauf der Tubuli durch sie ist ein Hinweis darauf, dass es sich um Dentin handelt. Eine unregelmäßige Anordnung der dunkelroten Ablagerungen, entweder in Form von Blättern oder Kügelchen, weist darauf hin, dass es sich um Zement handelt. Es werden auch zarte Bindegewebe beobachtet, die im Dentin eingeschlossen sind und wie Pulpa erscheinen, wobei auch Schmelzräume zu sehen sind.Odontoma (Complex): In the case of the section, it is observed that a section shows dentin with the dentinal tubules passing through it and the enamel deposit in dark brown globules, irregular cement deposition is also observed. Under Gallego staining, it is noted that the deposit of the dentin is green and has dentinal tubules. It can be seen that the enamel has spherical deposits of pink color and the cementum has deposits in sheets of dark red color. The decalcified section under H&E stain shows an irregular arrangement of dentin, enamel, interenamel spaces, cementum and pulp-like connective tissue forming an irregular mass. Under the Gallego stain, the hard tissue can be seen to have an irregular arrangement with the color consistent with the normal constituents of the tooth under this stain. The green deposit layers are observed and the course of the tubules through them is an indication that it is dentin. An irregular arrangement of the dark red deposits, either in the form of sheets or globules, indicates that it is cement. Delicate connective tissues are also observed, trapped in the dentin and appearing like pulp, with enamel spaces also being seen.

Adenomatoider odontogener Tumor: In der H&E-Färbung zeigt sich, dass dieser Tumor eine gut definierte fibröse Kapsel aufweist. Das bindegewebige Stroma ist stark vaskularisiert. Bei den Lumina wird eine duktusähnliche Struktur beobachtet, die von einer einzigen Schicht hoher säulenförmiger Zellen ausgekleidet wird, die strahlenförmig angeordnet sind und deren Zellkerne vom Lumen entfernt liegen. In der Mitte ist außerdem ein homogenes eosinophiles Material zu sehen. Die festen Bereiche werden zusammen mit den Wirbeln oder Rosetten beobachtet. Im Bindegewebsstroma ist eine Fülle von verkalktem Material vorhanden, das jedoch unregelmäßig geformt und ungleichmäßig verteilt ist. Unter der Gallego-Färbung, nach der Analyse der Ablagerungen wurde festgestellt, dass eine mit den großen Säulenzellen verbunden ist und die andere im Bindegewebe liegt. Innerhalb des hochzelligen Bindegewebsstromas wurden verschiedene unregelmäßige dunkelrote Ablagerungen beobachtet, die auf zementartige Ablagerungen hinweisen. Neben den großen säulenartigen Zellen im Lumen ist eine Ablagerung von heller Farbe zu sehen, die auf die Schmelzmatrix hinweist.Adenomatoid odontogenic tumor: H&E staining shows this tumor to have a well-defined fibrous capsule. The connective tissue stroma is highly vascularized. A duct-like structure is observed in the lumina, lined by a single layer of tall columnar cells arranged in a radiating manner, with the nuclei remote from the lumen. A homogeneous eosinophilic material is also seen in the center. The solid areas are observed along with the whorls or rosettes. There is an abundance of calcified material in the connective tissue stroma, but it is irregularly shaped and unevenly distributed. Under the Gallego stain, after analysis of the deposits, it was found that one is connected to the large columnar cells and the other lies in the connective tissue. Various irregular dark red deposits were observed within the highly cellular connective tissue stroma, indicative of cementitious deposits. A deposit of light color indicative of the enamel matrix can be seen alongside the large columnar cells in the lumen.

Zementiertes ossifizierendes Fibrom (intraossär): In der H&E-Färbung sind die kugelförmigen Ablagerungen in der basophilen Natur zu erkennen, die auf das Zementum hinweisen, wobei auch verschiedene Ablagerungen des trabekulären Knochens zu erkennen sind. Es wurde festgestellt, dass das Bindegewebe hochgradig zellulär ist und aus einem feinen fibrillären Stroma besteht. Bei der Gallego-Färbung wurde festgestellt, dass es mehrere kugelförmige und trabekuläre Ablagerungen in grüner Farbe gab, was darauf hinweist, dass die Ablagerungen knöcherner Natur sind, wobei auch mehrere unregelmäßige dunkelrote Ablagerungen, die Zement sind, festgestellt wurden.Cemented ossifying fibroma (intraosseous): H&E stain shows the spherical deposits in basophilic nature indicative of the cementum, with various deposits of trabecular bone also visible. The connective tissue has been found to be highly cellular and composed of a fine fibrillar stroma. Gallego staining revealed that there were multiple spherical and trabecular deposits of green color, indicating that the deposits are bony in nature, while multiple irregular dark red deposits, which are cementitious, were also noted.

4 zeigt die Kreuztabelle der Hämatoxylin- und Eosinfärbung und der modifizierten Gallego-Färbung für die Gruppen der ossifizierenden Fibrome (OF), der zementierenden Fibrome (COF) und der zementierenden Fibrome (CF) gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenbarung. Die Gewebe in den Kontrollgruppen werden als Knochen und Dentin (grün) und als Zement (rot) interpretiert. Die Kreuztabelle der Hämatoxylin- und Eosinfärbung und der modifizierten Gallego-Färbung für die Gruppe der ossifizierenden Fibrome (OF) zeigt, dass bei der modifizierten Gallego-Färbung 9 (90 %) der Proben knöchernes Gewebe aufweisen, was auch bei der H&E-Färbung der Fall ist, Diese Ähnlichkeit deutet darauf hin, dass sich die Diagnose nicht geändert hat, aber 1 (10 %) der Probe in der modifizierten Gallego-Färbung sowohl Knochen als auch Zement aufweist, was sich von der H&E-Färbung unterscheidet und somit ein klarer Hinweis auf eine Änderung der endgültigen Diagnose als Zementfibrom (COF) ist. 4 Figure 12 shows the cross-tabulation of hematoxylin and eosin staining and modified Gallego staining for the groups of ossifying fibroids (OF), cementing fibroids (COF), and cementing fibroids (CF) according to an embodiment of the present disclosure. The tissues in the control groups are interpreted as bone and dentin (green) and as cementum (red). Cross-tabulation of hematoxylin and eosin stain and modified Gallego stain for the group of ossifying fibroids (OF) shows that with modified Gallego stain 9 (90%) of the specimens have bony tissue, which is also the case with H&E stain of the In this case, this similarity suggests that the diagnosis has not changed, but 1 (10%) of the specimen has both bone and cementum in the modified Gallego stain, which differs from the H&E stain and is therefore a clearer one Indicative of a change in definitive diagnosis as cementitious fibroma (COF).

Die Kreuztabellierung der H & E-Färbung und der modifizierten Gallego-Färbung für die COF-Gruppe ergab, dass bei der modifizierten Gallego-Färbung 6(60 %) der Gesamtproben Knochen und Zement aufwiesen, was keine Änderung der Diagnose bedeutete, während die restlichen 4(40 %) der Proben mineralisierte Ablagerungen von grüner Farbe aufwiesen, die auf Knochen hinweisen. Daher wird die Diagnose von COF auf OF geändert.Cross-tabulation of H&E staining and modified Gallego staining for the COF group revealed that with modified Gallego staining, 6(60%) of the total specimens had bone and cementum, implying no change in diagnosis, while the remaining 4(40%) of the samples showed mineralized deposits of green color indicative of bone. Therefore, the diagnosis is changed from COF to OF.

Die Kreuztabellierung der H&E-Färbung und der modifizierten Gallego-Färbung für die CF-Gruppe ergab, dass bei der modifizierten Gallego-Färbung nur bei 5(50 %) der Proben das Zementum zu sehen war, was mit der H&E-Färbung übereinstimmt und keine Änderung der Diagnose bedeutet. Die anderen 3(30 %) der Proben wiesen jedoch Knochen auf und die anderen 2(20 %) der Proben zeigten sowohl Knochen als auch Zement in der modifizierten Gallego-Färbung, was auf eine Änderung der Diagnose von CF zu OF bzw. COF hindeutet. In einem Fall wurde eine Kombination von Knochen- und Zementablagerungen in unterschiedlicher Farbe festgestellt. Ein Fall von juveniler psammomatoider OF wird in der modifizierten Gallego-Färbung als juveniles psammomatoides zementossifizierendes Fibrom interpretiert.Cross-tabulation of H&E stain and modified Gallego stain for the CF group revealed that the modified Gallego stain showed cementum in only 5(50%) of the specimens, consistent with H&E stain and none Change in diagnosis means. However, the other 3(30%) of the specimens had bone and the other 2(20%) of the specimens showed both bone and cementum in the modified Gallego stain, suggesting a change in diagnosis from CF to OF and COF, respectively . In one case, a combination of bone and cement deposits of different colors was noted. A case of juvenile psammomatoid OF is interpreted as juvenile psammomatoid cementossifying fibroma in modified Gallego staining.

5A und 5B zeigen die Ergebnisse der Auswertung von 50 Zahnfollikeln von impaktierten Zähnen, um die histopathologischen Veränderungen in Zahnfollikeln gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Offenlegung zu bewerten. In dieser Studie variiert das Alter der Probanden von 16 bis 43 Jahren und es wurden 50 Probanden ausgewählt, von denen 27 männlich und 23 weiblich sind. 5A veranschaulicht die Korrelation zwischen dem Alter und der Entzündung der Patienten, wobei sich herausstellt, dass in diesen 50 Fällen eine zystische Veränderung zu beobachten ist, bei der sich mit zunehmendem Alter die reduzierte Schmelzepithelschicht des Zahnfollikels in eine geschichtete Plattenepithelschicht verwandelt. Ein zur statistischen Analyse durchgeführter Chi-Quadrat-Test zeigt eine unbedeutende Korrelation zwischen der Altersgruppe und der Entzündung mit einem p-Wert von 0.8437. 5A and 5B show the results of the evaluation of 50 dental follicles from impacted teeth to show the histopathological changes in dental follicles according to one embodiment evaluate the form of this disclosure. In this study, the age of the subjects varied from 16 to 43 years and 50 subjects were selected, 27 of whom are male and 23 female. 5A illustrates the correlation between the age and the inflammation of the patients, revealing that in these 50 cases a cystic change can be observed in which, with age, the reduced enamel epithelial layer of the dental follicle turns into a stratified squamous epithelium. A chi-square test performed for statistical analysis shows an insignificant correlation between age group and inflammation, with a p-value of 0.8437.

In 5B sind zwei Tabellen dargestellt; Tabelle (a) zeigt die Korrelation zwischen der Entzündung und der Art des Epithels, wobei der Grad der Entzündung von leichter bis schwerer Auskleidung reicht und eine signifikante Korrelation zwischen dem Grad der Entzündung und den zystischen Veränderungen mit einem p-Wert von 0.029 besteht. In 5B stellt Tabelle (b) die Korrelation zwischen der Breite der perikoronalen Radioluzenz und den Arten der Verkalkung dar, wobei die Breite der perikoronalen Radioluzenz und die Rate der Verkalkungen direkt proportional sind, wobei die Art der Verkalkung durch die modifizierte Gallego-Färbung weiter bestätigt wird.In 5B two tables are shown; Table (a) shows the correlation between the inflammation and the type of epithelium, with the degree of inflammation ranging from mild to severe lining and there is a significant correlation between the degree of inflammation and cystic changes with a p-value of 0.029. In 5B Table (b) presents the correlation between the width of pericoronal radiolucency and the types of calcification, with the width of pericoronal radiolucency and the rate of calcifications being directly proportional, with the type of calcification being further confirmed by modified Gallego staining.

Die Auswertungsergebnisse zeigten, dass die Epithelauskleidung Variationen aufweist, wobei in einigen wenigen Fällen das Fehlen der Epithelauskleidung festgestellt wurde. Das Bindegewebsstroma der Zahnfollikel weist Veränderungen auf, die 11 verschiedenen neoplastischen Läsionen ähneln, wie z. B. Schleimzelldifferenzierung in odontogenen Inseln, unizystisches Ameloblastom, akanthomatisches Ameloblastom, follikuläres Ameloblastom, desmoplastisches Ameloblastom, klarzelliger odontogener Tumor, odontogenes Fibrom (einfacher Typ), odontogenes Fibrom (Who-Typ), Neurofibrom, Neurilemmom und Mukoepidermoidkarzinom. Die Ähnlichkeit all dieser 11 Typen unterstreicht die pluripotente Natur des Zahnfollikels und seine Fähigkeit, pathologische Veränderungen histologisch zu zeigen, ohne dass eine klinische oder radiologische Pathologie vorliegt.The evaluation results showed that the epithelial lining shows variations, with a few cases noting the absence of the epithelial lining. The connective tissue stroma of the tooth follicles exhibit changes resembling 11 different neoplastic lesions such as: B. Mucous cell differentiation into odontogenic islets, unicystic ameloblastoma, acanthomatic ameloblastoma, follicular ameloblastoma, desmoplastic ameloblastoma, clear cell odontogenic tumor, odontogenic fibroma (simple type), odontogenic fibroma (who type), neurofibroma, neurilemmoma and mucoepidermoid carcinoma. The similarity of all these 11 types underscores the pluripotent nature of the dental follicle and its ability to show pathological changes histologically in the absence of clinical or radiological pathology.

Die Ergebnisse der Färbung von hartem Gewebe und von fibrös-knöchernen Läsionen von OF, COF und CF haben gezeigt, dass die modifizierte Gallego-Färbung als praktisches Werkzeug für die Durchführung der Diagnose nicht nur im Fall von weichem Gewebe oder entkalktem Gewebe, sondern auch für den Schliff betrachtet werden kann, was bisher nicht berichtet wurde. Da die modifizierte Gallego-Färbung eine einfache Färbung ermöglicht, sollte der Pathologe sie als Alternative für die Diagnose in Betracht ziehen, bevor er zu fortschrittlicheren Methoden wie der Immunhistochemie übergeht, bei der die modifizierte Gallego-Färbung einen erheblichen Einblick in den Charakter der Läsion und der mineralisierten Ablagerungen bietet. Daher ist diese Färbung sehr hilfreich, um eine endgültige Diagnose zu stellen und die Analyse einer Läsion zu bestätigen.The results of hard tissue staining and fibrous-bony lesions of OF, COF and CF have shown that modified Gallego staining can be used as a practical tool for conducting diagnosis not only in the case of soft tissue or decalcified tissue, but also for the cut can be observed, which has not previously been reported. Because modified Gallego staining allows for easy staining, the pathologist should consider it as an alternative for diagnosis before proceeding to more advanced methods such as immunohistochemistry, where modified Gallego staining provides significant insight into the character of the lesion and of mineralized deposits. Therefore, this staining is very helpful to make a definitive diagnosis and to confirm the analysis of a lesion.

In einer Ausführungsform, die Ergebnisse aus der Bewertung der histopathologischen Variationen in Zahnfollikel zeigte, dass die radiologische Analyse ist möglicherweise nicht ein zuverlässiger Ansatz für die Bewertung der Zahnfollikel, weil es 2D-Bildgebung, wobei CBCT kann als die Ergänzung für die Messung von radiographischen mit Zahnfollikel und weiter für die Bestätigung der Art der Diagnose, die immunhistochemische Hersteller können berücksichtigt werden.In one embodiment, the results from the evaluation of histopathologic variations in tooth follicles showed that radiological analysis may not be a reliable approach for evaluating tooth follicles because it can use 2D imaging, wherein CBCT can be used as the adjunct to the measurement of radiographic Tooth follicles and further for confirmation of the type of diagnosis, the immunohistochemical manufacturer can be considered.

Die Figuren und die vorangehende Beschreibung geben Beispiele für Ausführungsformen. Der Fachmann wird verstehen, dass eines oder mehrere der beschriebenen Elemente durchaus zu einem einzigen Funktionselement kombiniert werden können. Alternativ dazu können bestimmte Elemente in mehrere Funktionselemente aufgeteilt werden. Elemente aus einer Ausführungsform können einer anderen Ausführungsform hinzugefügt werden. So kann beispielsweise die Reihenfolge der hier beschriebenen Prozesse geändert werden und ist nicht auf die hier beschriebene Weise beschränkt. Darüber hinaus müssen die Aktionen eines Flussdiagramms nicht in der gezeigten Reihenfolge ausgeführt werden; auch müssen nicht unbedingt alle Aktionen durchgeführt werden. Auch können diejenigen Handlungen, die nicht von anderen Handlungen abhängig sind, parallel zu den anderen Handlungen ausgeführt werden. Der Umfang der Ausführungsformen ist durch diese spezifischen Beispiele keineswegs begrenzt. Zahlreiche Variationen sind möglich, unabhängig davon, ob sie in der Beschreibung explizit aufgeführt sind oder nicht, wie z. B. Unterschiede in der Struktur, den Abmessungen und der Verwendung von Materialien. Der Umfang der Ausführungsformen ist mindestens so groß wie in den folgenden Ansprüchen angegeben.The figures and the preceding description give examples of embodiments. Those skilled in the art will understand that one or more of the elements described may well be combined into a single functional element. Alternatively, certain elements can be broken down into multiple functional elements. Elements from one embodiment may be added to another embodiment. For example, the order of the processes described herein may be changed and is not limited to the manner described herein. Additionally, the actions of a flowchart need not be performed in the order shown; Also, not all actions have to be carried out. Also, those actions that are not dependent on other actions can be performed in parallel with the other actions. The scope of the embodiments is in no way limited by these specific examples. Numerous variations are possible, regardless of whether they are explicitly mentioned in the description or not, e.g. B. Differences in structure, dimensions and use of materials. The scope of the embodiments is at least as broad as indicated in the following claims.

Vorteile, andere Vorzüge und Problemlösungen wurden oben im Hinblick auf bestimmte Ausführungsformen beschrieben. Die Vorteile, Vorzüge, Problemlösungen und Komponenten, die dazu führen können, dass ein Vorteil, ein Nutzen oder eine Lösung auftritt oder ausgeprägter wird, sind jedoch nicht als kritisches, erforderliches oder wesentliches Merkmal oder Komponente eines oder aller Ansprüche zu verstehen.Advantages, other benefits, and solutions to problems have been described above with respect to particular embodiments. However, the benefits, advantages, problem solutions, and components that can cause an advantage, benefit, or solution to occur or become more pronounced are not to be construed as a critical, required, or essential feature or component of any or all claims.

BezugszeichenlisteReference List

100100: Ein System zur Untersuchung der Anwendung der modifizierten Gallego-Färbung als Differenzialfärbung für Hartgewebe.A system to study the application of modified Gallego stain as a differential stain for hard tissue.
102102: Eine Färbeeinheit für Hartgewebe.A staining unit for hard tissue.
104104: Ein Färbegerät für mineralisierte BestandteileA staining device for mineralized components
106106: Eine AuswerteeinheitAn evaluation unit
200200: Eine differenzierte Färbemethode mit H & E und modifizierter Gallego-FärbungA differentiated staining method using H&E and modified Gallego staining
202202: Entparaffinierung der ausgewählten Schnitte.Deparaffinize the selected sections.
204204: Färbung der Schnitte mit Hämatoxylin und Eosin (H und E) für 8 bis 12 Minuten und anschließendes Abspülen mit destilliertem Wasser.Stain sections with hematoxylin and eosin (H and E) for 8 to 12 minutes, followed by rinsing with distilled water.
206206: Färbung mit Beize für 2 Minuten und anschließendes Spülen mit destilliertem Wasser, wobei die Beize im Falle der Färbung von hartem Gewebe und fibro-ossköser Läsion durch Mischen von 200 ml destilliertem Wasser mit 1.5 ml konzentrierter Salpetersäure, 1 ml 40 %igem Formaldehyd und 1.5 ml U.S.P.-Eisenchlorid gebildet wird; im Falle der Färbung von Zahnfollikeln ist die Beize jedoch eine Eisenchloridlösung in 100 ml destilliertem WasserStaining with caustic for 2 minutes and then rinsing with distilled water, in case of hard tissue staining and fibro-osseous lesion staining the caustic by mixing 200 ml of distilled water with 1.5 ml of concentrated nitric acid, 1 ml of 40% formaldehyde and 1.5 ml U.S.P. ferric chloride is formed; however, in the case of staining of tooth follicles, the stain is a solution of ferric chloride in 100 ml of distilled water
208208: Färbung mit 3 ml Karbol-Fuschin in 50 ml 0.2 %iger Essigsäure für 5 Minuten und anschließendes Spülen mit destilliertem WasserStaining with 3 ml Karbol-Fuschin in 50 ml 0.2% acetic acid for 5 minutes and then rinsing with distilled water
210210: Waschen mit Beize für eine Zeitspanne von 1-2 Minuten.Wash with stain for a period of 1-2 minutes.
212212: Färbung mit 0.01 % Anilinblau in gesättigter Pikrinsäurelösung für 30 Sekunden.Staining with 0.01% aniline blue in saturated picric acid solution for 30 seconds.
214214: Dehydratisierung und Reinigung mit Xylol und anschließendes Aufziehen von DPX-Montagemittel.Dehydration and purification with xylene and subsequent mounting of DPX mounting agent.

Claims

A system for investigating the application of modified Gallego's stain as a differential stain for hard tissue, the system comprising: a hard tissue staining unit for performing the differential staining of the hard tissues, wherein hard tissues seen in the tooth, bone and pathological lesion are selected, and wherein the differential staining of the selected tissues is performed to assess their condition and to determine the to confirm histopathologic diagnosis obtained by the routine staining procedure; a mineralized component staining unit for performing differential staining of the fibrous-bony lesions containing cementum and bone, wherein histochemical identification is performed by performing the differential staining; and an evaluation unit for evaluating the histopathological change occurring in the tooth follicle using the radiographic pericoronal radiolucency of less than 3 mm and the type of calcification and deposit using the modified Gallelo stain, the histological features of the tooth follicle with the pericoronal width also radiographically correlated.

system after claim 1 , using hard tissue staining to perform differential staining of the oral hard tissues, to confirm the histopathologic diagnosis of the differential staining of the fibrous-bony lesions containing cementum and bone, and to evaluate the histopathologic change that occurs in the dental follicles using the modified Gallego- Staining and its correlation with the radiographic perirocornal radiolucene width is used.

system after claim 1 , where differential staining is performed using hematoxylin and eosin stain (H and E) and modified Gallego stain.

system after claim 1 , where differential staining of the hard tissues is performed to distinguish between hard and soft tissues, to distinguish different types of hard tissues in the same lesion, and to correlate the histopathological diagnosis using hematoxylin and eosin (H and E) and modified Gallego staining.

system after claim 1 , in which the basal section, decalcified section, and soft tissue are selected for performing differential staining of the hard tissues, with the selected sections awaiting the basal section being stained with hematoxylin and eosin (H and E), and the sections subsequently also being stained with modified Gallego staining stained to correlate the staining properties of the hard tissues.

system after claim 1 , distinguishing the mineralized components in ossifying fibroma, cementing fibroma, and cementing fibroma by comparing the hematoxylin and eosin stain (H and E) with the modified Gallego stain, the overall 10 Control groups consist of ground sections of bone and teeth, decalcified sections of bone and teeth, and odontoma sections with cement and soft tissue.

system after claim 1 , where differential staining of the mineralized components involves obtaining two paraffin-embedded sections from each specimen and then staining them with hematoxylin and eosin (H and E) and modified Gallego stain.

system after claim 1 , in which the dental follicular tissues are examined for the presence of pathological changes associated with both epithelial and mesenchymal components, using hematoxylin and eosin stain (H and E) with modified Gallego stain for examination.