DE19700327A1

DE19700327A1 - Protease and amylase detergent

Info

Publication number: DE19700327A1
Application number: DE1997100327
Authority: DE
Inventors: Beatrix Dr Kottwitz; Horst Dr Upadek
Original assignee: Henkel AG and Co KGaA
Current assignee: Henkel AG and Co KGaA
Priority date: 1997-01-08
Filing date: 1997-01-08
Publication date: 1998-07-09
Also published as: EP0964911A1; WO1998030669A1; JP2001507748A

Abstract

The combination of a protease mutant, in which the amino acid leucine present in position 211 (BLAP (bacillus lentus alkaline protease) counting method) in the wild-type protease is exchanged at this location for an aspartic acid or glutamic acid, and of an amylase mutant, in which at least one methionine, tryptophane, cysteine or tyrosine present in the wild-type amylase is removed or exchanged for another amino acid which is in particular not cysteine or methionine, results in unexpected synergistic improvements in performance in textile detergents.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft enzymhaltige Waschmittel, die neben üblichen Bestandteilen eine bestimmte Protease und eine bestimmte Amylase enthalten.The present invention relates to enzyme-containing detergents which, in addition to conventional ones Ingredients contain a certain protease and a certain amylase.

Enzyme, insbesondere proteolytische Enzyme, finden ausgedehnte Verwendung in Wasch-, Waschhilfs- und Reinigungsmitteln. Derzeit werden ausschließlich Proteasen aus der Subti lisinfamilie eingesetzt. Dabei handelt es sich um extrazelluläre Proteine mit einem Molekulargewicht im Bereich von etwa 20 000 bis 45 000. Subtilisine sind relativ unspezifische Enzyme, die neben der hydrolytischen Wirkung auf Peptidbindungen auch esterolytische Eigenschaften aufweisen (M. Bahn, R.D. Schmidt, Biotec 1, 119 1987). Viele Vertreter der Subtilisine sind physikalisch und chemisch genau charakterisiert. Ihre räumliche Struktur ist durch Röntgenstrukturanalyse oft im Detail bekannt. Hierdurch sind die Voraussetzungen für molekulares Modelling und sogenanntes Protein Engineering in Form gezielter Mutagenese gegeben (Kraut, Ann. Rev. Biochem. 46, 331-358, 1977). Gentechnische Modifikationen von Proteasen sind vielfach beschrieben; so waren im Juni 1991 bereits 219 durch Protein Engineering erhaltene Proteinvarianten der Subtilisine bekannt (A. Recktenwald et al., J.Biotechnol. 28, 1-23, 1993). Die meisten dieser Varianten wurden erzeugt, um die Stabilität der Proteasen zu verbessern.Enzymes, especially proteolytic enzymes, are used extensively in washing, Washing aids and cleaning agents. Currently only proteases from the Subti lisin family used. These are extracellular proteins with a Molecular weight in the range of about 20,000 to 45,000. Subtilisins are relative non-specific enzymes, which in addition to the hydrolytic effect on peptide bonds have esterolytic properties (M. Bahn, R.D. Schmidt, Biotec 1, 119 1987). Lots Representatives of the subtilisins are precisely characterized physically and chemically. Your spatial structure is often known in detail by X-ray structure analysis. This is the requirements for molecular modeling and protein engineering in Form of targeted mutagenesis (Kraut, Ann. Rev. Biochem. 46, 331-358, 1977). Genetic modifications of proteases have been widely described; so were in June 1991 already 219 protein variants of the subtilisins obtained by protein engineering known (A. Recktenwald et al., J.Biotechnol. 28, 1-23, 1993). Most of these variations were created to improve the stability of the proteases.

Eine unter stark alkalischen Bedingungen stabile und aktive Protease aus der Subtilisinfamilie kann wie in der internationalen Patentanmeldung WO 91/02792 beschrieben in Bacillus lentus (DSM 5483) produziert werden. Diese Bacillus lentus alkalische Protease (BLAP) kann durch Fermentation von Bacillus licheniformis produziert werden, der mit einem Expressionsplasmid transformiert wurde, welches das Gen für BLAP unter der Kontrolle des Promotors aus Bacillus licheniformis ATCC 53926 trägt. Die Zusammensetzung wie auch die räumliche Struktur von BLAP ist bekannt (D.W. Godette et al. J.Mol.Biol. 228, 580-595, 1992). Diese Protease ist durch die in der zitierten Literatur be schriebene Sequenz aus 269 Aminosäuren, ein rechnerisches Molekulargewicht von 26 823 Dalton und einen theoretischen isoelektrischen Punkt von 9,7 charakterisiert. Durch Mutation zugängliche Varianten dieser Bacillus lentus DSM 5483 Protease sind in der US- amerikanischen Patentschrift US 5 340 735 beschrieben. Unter diesen sind Proteaseenzyme, die bei insbesondere mehrfacher Waschbehandlung von Textilien aus proteinogenen Fasern, beispielsweise textilen Flächengebilden aus Naturseide oder Wolle, ohne Verlust an Reinigungsleistung zu besonders geringen Substanzschädigungen beziehungsweise Zerstörungen der Faserverbände führen.A stable and active protease from the Subtilisin family can be used as in international patent application WO 91/02792 described in Bacillus lentus (DSM 5483). This Bacillus lentus Alkaline protease (BLAP) can be produced by fermentation of Bacillus licheniformis which has been transformed with an expression plasmid which contains the gene for BLAP under the control of the Bacillus licheniformis promoter ATCC 53926. The The composition as well as the spatial structure of BLAP is known (D.W. Godette et al. J.Mol.Biol. 228, 580-595, 1992). This protease is characterized by the be in the literature cited written sequence of 269 amino acids, a calculated molecular weight of 26 823 Dalton and a theoretical isoelectric point of 9.7. By Mutation-accessible variants of this Bacillus lentus DSM 5483 protease are described in the US U.S. Patent No. 5,340,735. Among these are protease enzymes, in particular in the case of multiple washing treatment of textiles from proteinogenic fibers, For example, textile fabrics made of natural silk or wool without loss Cleaning performance at particularly low substance damage respectively Destruction of the fiber dressings.

Amylasen haben die Aufgabe, die Entfernung stärkehaltiger Anschmutzungen durch die katalytische Hydrolyse des Stärke-Polysaccharids zu erleichtern und werden zu diesem Zweck ebenfalls seit längerer Zeit in Reinigungsmitteln für Geschirr, aber auch in Wasch mitteln eingesetzt. Dabei ist beobachtet worden, daß die Leistung von Amylasen, die den in der Natur vorkommenden Enzymen entsprechen, durch in solchen Mitteln üblicherweise enthaltene Bleichmittel relativ stark beeinträchtigt wird. Neben der Erhöhung ihrer Leistungsfähigkeit hat die gentechnische Modifikation von Amylasen daher im wesentlichen die Stabilitätserhöhung gegen den Angriff von Oxdationsmitteln zum Ziel. Ein Ansatz zur Erreichung dieses Ziels, der in der internationalen Patentanmeldung WO 94/18314 vorgeschlagen wurde, besteht in der Entfernung besonders oxidationsanfälliger Aminosäuren, wie Methionin, Tryptophan, Cystein oder Tyrosin, aus der Aminosäuresequenz der Amylase, oder deren Austausch durch andere, oxidationsstabilere Aminosäuren. Ein ähnliches Vorgehen wird auch in der internationalen Patentanmeldung WO 95/21247 vorgeschlagen, die empfiehlt, in der Amylase-Aminosäuresequenz mindestens ein Methionin durch eine Aminosäure, die weder Methionin noch Cystein ist, auszutauschen.Amylases have the task of removing starchy stains from the facilitate and become catalytic hydrolysis of the starch polysaccharide Also used for a long time in detergents for dishes, but also in washing means used. It has been observed that the performance of amylases that the in correspond to naturally occurring enzymes, usually in such means bleach contained is relatively badly affected. In addition to increasing their The genetic modification of amylases is therefore essentially efficient the aim of increasing stability against the attack of oxidizing agents. An approach to To achieve this goal, which is described in international patent application WO 94/18314 has been proposed to remove is particularly susceptible to oxidation Amino acids, such as methionine, tryptophan, cysteine or tyrosine, from which Amylase amino acid sequence, or its replacement by another, more oxidation stable Amino acids. A similar procedure is also used in the international patent application WO 95/21247 suggested that recommends in the amylase amino acid sequence at least one methionine by an amino acid that is neither methionine nor cysteine, exchange.

Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß die Kombination aus einer oben beschriebe nen gentechnisch veränderten Protease und einer obengenannten gentechnisch veränderten Amylase zu unerwartetet synergistischen Leistungsverbesserungen führt, wenn man sie in Waschmitteln einsetzt. Surprisingly, it has now been found that the combination of one described above a genetically modified protease and an above-mentioned genetically modified one Amylase leads to unexpected synergistic performance improvements when viewed in Uses detergents.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein protease- und amylasehaltiges Textilwaschmittel, das neben üblichen mit derartigen Enzymen verträglichen Inhaltsstoffen eine Proteasemutante, bei der in Position 211 (BLAP-Zählung) die an dieser Stelle in der Wildtyp-Protease vorhandene Aminosäure Leucin gegen Asparaginsäure oder Glutamin säure ausgetauscht ist, und eine Amylasemutante, bei der mindestens ein in der Wildtyp- Amylase vorhandenes Methionin, Tryptophan, Cystein oder Tyrosin entfernt oder durch eine andere Aminosäure ausgetauscht ist, die insbesondere nicht Cystein oder Methionin ist, enthält.The invention therefore relates to a textile detergent containing proteases and amylases, which, in addition to the usual ingredients compatible with such enzymes Protease mutant at which in position 211 (BLAP count) the at this point in the Wild-type protease amino acid leucine against aspartic acid or glutamine acid is exchanged, and an amylase mutant in which at least one in the wild-type Amylase present or removed methionine, tryptophan, cysteine or tyrosine another amino acid is exchanged, which in particular is not cysteine or methionine, contains.

Vorzugsweise weist das Mittel eine proteolytische Aktivität im Bereich von etwa 100 PE/g bis etwa 7500 PE/g, insbesondere 500 PE/g bis 5000 PE/g auf. Die Proteaseaktivität wird gemäß dem nachfolgend beschriebenen standardisierten Verfahren, wie in Tenside 2 (1970), 125 beschrieben, bestimmt: Eine Lösung, die 12 g/l Casein und 30 mM Natriumtripoly phosphat in Wasser des Härtegrades 15°dH (enthaltend 0,058 Gew.-% CaCl₂.2 H₂O, 0,028 Gew.-% MgCl₂.6 H₂O und 0,042 Gew.-% NaHCO₃) wird auf 70°C erwärmt, der pH-Wert wird durch Zugabe von 0,1 N NaOH auf 8,5 bei 50°C eingestellt. Zu 600 ml der Substratlösung werden 200 ml einer Lösung des zu testenden Enzyms in 2 gewichtsprozen tiger Natriumtripolyphosphat-Pufferlösung (pH 8,5) gegeben. Die Reaktionsmischung wird bei 50°C für 15 Minuten inkubiert. Die Reaktion wird danach durch Zugabe von 500 ml TCA-Lösung (0,44 M Trichloressigsäure und 0,22 M Natriumacetat in 3 volumenprozentiger Essigsäure) und Abkühlen (Eisbad bei 0°C, 15 Minuten) gestoppt. Das TCA-unlösliche Protein wird durch Zentrifugation entfernt, 900 ml des Überstandes werden mit 300 ml 2 N NaOH verdünnt. Die Absorption dieser Lösung bei 290 nm wird mit Hilfe eines Absorptionsspektrometers bestimmt, wobei der Absorptionsnullwert durch das Messen einer zentrifugierten Lösung, die durch Mischen von 600 ml der obengenannten TCA-Lösung mit 600 ml der obengenannten Substratlösung und anschließender Zugabe der Enzymlösung hergestellt wird, zu bestimmen ist. Die proteolytische Aktivität einer Proteaselösung, die unter den angegebenen Meßbedingungen eine Absorption von 0,500 OD bewirkt, wird zu 10 PE (Protease-Einheiten) pro ml definiert.The agent preferably has a proteolytic activity in the range from about 100 PE / g to about 7500 PE / g, in particular 500 PE / g to 5000 PE / g. The protease activity is determined according to the standardized method described below, as described in Tenside 2 (1970), 125: A solution containing 12 g / l casein and 30 mM sodium tripoly phosphate in water with a degree of hardness of 15 ° dH (containing 0.058 wt. % CaCl ₂ .2 H ₂ O, 0.028% by weight MgCl ₂ .6 H ₂ O and 0.042% by weight NaHCO ₃ ) is heated to 70 ° C., the pH is adjusted by adding 0.1 N NaOH set to 8.5 at 50 ° C. 200 ml of a solution of the enzyme to be tested in 2% by weight sodium tripolyphosphate buffer solution (pH 8.5) are added to 600 ml of the substrate solution. The reaction mixture is incubated at 50 ° C for 15 minutes. The reaction is then stopped by adding 500 ml of TCA solution (0.44 M trichloroacetic acid and 0.22 M sodium acetate in 3% acetic acid by volume) and cooling (ice bath at 0 ° C., 15 minutes). The TCA-insoluble protein is removed by centrifugation, 900 ml of the supernatant are diluted with 300 ml of 2N NaOH. The absorption of this solution at 290 nm is determined with the aid of an absorption spectrometer, the zero absorption value being obtained by measuring a centrifuged solution which is prepared by mixing 600 ml of the above-mentioned TCA solution with 600 ml of the above-mentioned substrate solution and then adding the enzyme solution determine is. The proteolytic activity of a protease solution, which causes an absorption of 0.500 OD under the specified measurement conditions, is defined as 10 PE (protease units) per ml.

Das Mittel weist vorzugsweise eine amylolytische Aktivität von 50 NU/g bis 1000 NU/g, insbesondere 75 NU/g bis 750 NU/g, auf ("Novo-Units" pro Gramm gemäß der Standard- Methode der Firma Novo, wobei 1 Kilo-Novo-Unit die Enzymmenge ist, die 5,26 g Stärke bei pH 5,6 und 37°C abbaut, basierend auf der von P. Bernfeld in S.P. Colowick und N.D. Kaplan, Methods in Enzymology, Band 1, 1955, Seite 149 beschriebenen Methode).The agent preferably has an amylolytic activity of 50 NU / g to 1000 NU / g, in particular 75 NU / g to 750 NU / g, on ("Novo-Units" per gram according to the standard Novo method, where 1 kilo Novo unit is the amount of enzyme, the 5.26 g starch degrades at pH 5.6 and 37 ° C, based on that from P. Bernfeld in S.P. Colowick and N.D. Kaplan, Methods in Enzymology, Volume 1, 1955, page 149).

Zu den erfindungsgemäß brauchbaren Proteasen zählen gentechnisch veränderte Proteasen des obengenannten BLAP-Typs, bei denen in Position 211 (BLAP-Zählung) die an dieser Stelle in der Wildtyp-Protease vorhandene Aminosäure Leucin (L im gebräuchlichen Ein- Buchstaben-Code) gegen Asparaginsäure (D) beziehungsweise Glutaminsäure (E) ausge tauscht ist (L211D beziehungsweise L211E). Diese können wie in der internationalen Pa tentanmeldung WO 95/23221 beschrieben hergestellt werden. Zusätzlich können weitere Veränderungen gegenüber der ursprünglichen Bacillus lentus-Protease, wie beispielsweise mindestens einer der Aminosäureaustausche S3T, V4I, R99G, R99A, R99S, A188P, V193M und/oder V199I, vorgenommen worden sein. Besonders bevorzugt ist die in der genannten internationalen Patentanmeldung als F49 aufgeführte Variante, bei welcher die Aminosäure austausche S3T + V4I + A188P + V193M + V1991 + L211D vorgenommen wurden. Bei der vorstehend beschriebenen Proteasenomenklatur über den Austausch einzelner Aminosäuren ist zu beachten, daß die Numerierung der Aminosäurepositionen in BLAP sich von der häufig anzutreffenden des Subtilisin BPN unterscheidet. Die Numerierung der Positionen 1 bis 35 ist identisch in Subtilisin BPNt und BLAP; aufgrund fehlender korrespondierender Aminosäuren entsprechen die Positionen 36 bis 54 in BLAP den Positionen 37 bis 55 in BPN', ebenso die Positionen 55 bis 160 in BLAP den Positionen 57 bis 162 in BPN und die Positionen 161 bis 269 denen von 167 bis 275 in BPN'.The proteases which can be used according to the invention include genetically modified proteases of the above-mentioned BLAP type, in which in position 211 (BLAP count) those on this Place the amino acid leucine (L in the usual Letter code) against aspartic acid (D) or glutamic acid (E) is exchanged (L211D or L211E). As in the international Pa tent registration WO 95/23221 can be produced. In addition, other Changes from the original Bacillus lentus protease, such as at least one of the amino acid exchanges S3T, V4I, R99G, R99A, R99S, A188P, V193M and / or V199I. The one mentioned is particularly preferred international patent application as F49 variant, in which the amino acid exchanges S3T + V4I + A188P + V193M + V1991 + L211D. In the Protease nomenclature described above on the exchange of individual amino acids it should be noted that the numbering of the amino acid positions in BLAP differs from that commonly found of the subtilisin BPN differs. Numbering of positions 1 to 35 is identical in subtilisin BPNt and BLAP; due to lack of corresponding Amino acids correspond to positions 36 to 54 in BLAP to positions 37 to 55 in BPN ', as well as positions 55 to 160 in BLAP, positions 57 to 162 in BPN and the Positions 161 to 269 those from 167 to 275 in BPN '.

Zu den erfindungsgemäß brauchbaren Amylasen gehören insbesondere gentechnisch verän derte Amylasen, die sich durch Austausch des Methionins in Position 197 durch eine andere Aminosäure, insbesondere Leucin, Threonin, Alanin, Glycin, Serin, Isoleucin, Asparagin oder Asparaginsäure, von der in Bacillus licheniformis vorkommenden α-Amylase (Wildtyp-Amylase) ableiten. Analog der oben für Proteasen beschriebenen Nomenklatur werden diese Amylasen als M197L, M197T, M197A, M197G, M197S, M197I, M197N und M197D bezeichnet. Die Entfernung sonstiger Aminosäuren, insbesondere an den Positionen 1 und/oder 2 (mit (1-2)* bezeichnet), und/oder weitere Aminosäureaustausche wie L3V, M15T, M15L, R23K, S29A, A30E, Y31H, A33S, E34D, H68Q, W138F, W138Y, R242P, H35I, E255P, T341P, Q374P, E458D, P459T, V461K, N463G und/oder E465D etc., die aus den obengenannten internationalen Patentanmeldungen bekannt sind, können vorgenommen werden. Auch entsprechend veränderte Wildtyp-Amylasen aus anderen Mikroorganismen, wie Bacillus amyloliquefaciens oder Bacillus stearothermophilus, deren Aminosäuresequenz-Homologie zur Amylase aus Bacillus licheniformis aus der internationalen Patentanmeldung WO 94/18314 bekannt ist, können erfindungsgemäß eingesetzt werden. Handelsübliche gentechnisch veränderter Amylasen im Sinne der Erfindung sind zum Beispiel Duromyl® von Novo Nordisk und Purafect® OxAm von Genencor International.The amylases which can be used according to the invention include in particular genetically modified other amylases, which are replaced by the methionine in position 197 by another Amino acid, especially leucine, threonine, alanine, glycine, serine, isoleucine, asparagine or aspartic acid, from the α-amylase found in Bacillus licheniformis (Wild type amylase). Analogous to the nomenclature described above for proteases these amylases are called M197L, M197T, M197A, M197G, M197S, M197I, M197N and M197D designated. The removal of other amino acids, especially at the positions 1 and / or 2 (denoted by (1-2) *), and / or further amino acid exchanges such as L3V, M15T, M15L, R23K, S29A, A30E, Y31H, A33S, E34D, H68Q, W138F, W138Y, R242P, H35I, E255P, T341P, Q374P, E458D, P459T, V461K, N463G and / or E465D etc. made from the above-mentioned international patent applications can be made will. Correspondingly modified wild-type amylases from other microorganisms, such as Bacillus amyloliquefaciens or Bacillus stearothermophilus, whose Amino acid sequence homology to Bacillus licheniformis amylase from international patent application WO 94/18314 is known can according to the invention be used. Commercially available genetically modified amylases in the sense of Invention are, for example, Duromyl® from Novo Nordisk and Purafect® OxAm from Genencor International.

Die erfindungswesentliche Kombination aus gentechnisch veränderter Protease und gentechnisch veränderter Amylase kann durch Einarbeitung der zwei separaten be ziehungsweise in bekannter Weise separat konfektionierten Enzyme oder durch gemeinsam in einem Granulat konfektionierte Protease und Amylase, wie zum Beispiel aus den interna tionalen Patentanmeldungen WO 96/00772 oder WO 96/00773 bekannt, in erfindungs gemäßen Waschmitteln eingesetzt werden.The combination of genetically modified protease and essential to the invention genetically modified amylase can be by incorporating the two separate or in a known manner separately prepared enzymes or by jointly protease and amylase packaged in granules, such as from the interna tional patent applications WO 96/00772 or WO 96/00773 known in Invention appropriate detergents are used.

Die erfindungsgemäßen Waschmittel, die als insbesondere pulverförmige Feststoffe, in nachverdichteter Teilchenform, als homogene Lösungen oder Suspensionen vorliegen können, können außer der erfindungsgemäß eingesetzten Enzymkombination im Prinzip alle bekannten und in derartigen Mitteln üblichen Inhaltsstoffe enthalten. Die erfindungs gemäßen Mittel können insbesondere Buildersubstanzen, oberflächenaktive Tenside, Bleichmittel auf Basis organischer und/oder anorganischer Persauerstoffverbindungen, Bleichaktivatoren, wassermischbare organische Lösungsmittel, zusätzliche Enzyme, Seque strierungsmittel, Elektrolyte, pH-Regulatoren und weitere Hilfsstoffe, wie optische Auf heller, Vergrauungsinhibitoren, Farbübertragungsinhibitoren, Schaumregulatoren, Farb- und Duftstoffe enthalten.The detergents according to the invention, which are in particular powdery solids, in post-compacted particle form, as homogeneous solutions or suspensions can in principle all except the enzyme combination used according to the invention contain known and common ingredients in such agents. The fiction agents can include builder substances, surface-active surfactants, Bleaching agents based on organic and / or inorganic peroxygen compounds, Bleach activators, water-miscible organic solvents, additional enzymes, Seque agents, electrolytes, pH regulators and other auxiliaries, such as optical additives brighter, graying inhibitors, color transfer inhibitors, foam regulators, color and Contain fragrances.

Die erfindungsgemäßen Mittel können Tenside enthalten, wobei insbesondere anionische Tenside, nichtionische Tenside und deren Gemische in Frage kommen. Geeignete nichtio nische Tenside sind insbesondere Alkylglykoside und Ethoxylierungs- und/oder Propoxy lierungsprodukte von Alkylglykosiden oder linearen oder verzweigten Alkoholen mit jeweils 12 bis 18 C-Atomen im Alkylteil und 3 bis 20, vorzugsweise 4 bis 10 Alkylether gruppen. Weiterhin sind entsprechende Ethoxylierungs- und/oder Propoxylierungsprodukte von N-Alkylaminen, vicinalen Diolen, Fettsäureestern und Fettsäureamiden, die hinsichtlich des Alkylteils den genannten langkettigen Alkoholderivaten entsprechen, sowie von Alkyl phenolen mit 5 bis 12 C-Atomem im Alkylrest brauchbar.The agents according to the invention can contain surfactants, in particular anionic ones Surfactants, nonionic surfactants and their mixtures come into question. Suitable nonio African surfactants are especially alkyl glycosides and ethoxylation and / or propoxy lation products of alkyl glycosides or linear or branched alcohols each have 12 to 18 carbon atoms in the alkyl part and 3 to 20, preferably 4 to 10 alkyl ethers groups. Corresponding ethoxylation and / or propoxylation products are also of N-alkylamines, vicinal diols, fatty acid esters and fatty acid amides, which with regard to of the alkyl part correspond to the long-chain alcohol derivatives mentioned, and of alkyl phenols with 5 to 12 carbon atoms in the alkyl radical can be used.

Geeignete anionische Tenside sind insbesondere Seifen und solche, die Sulfat- oder Sulfo nat-Gruppen mit bevorzugt Alkaliionen als Kationen enthalten. Verwendbare Seifen sind bevorzugt die Alkalisalze der gesättigten oder ungesättigten Fettsäuren mit 12 bis 18 C- Atomen. Derartige Fettsäuren können auch in nicht vollständig neutralisierter Form eingesetzt werden. Zu den brauchbaren Tensiden des Sulfat-Typs gehören die Salze der Schwefelsäurehalbester von Fettalkoholen mit 12 bis 18 C-Atomen und die Sulfatierungs produkte der genannten nichtionischen Tenside mit niedrigem Ethoxylierungsgrad. Zu den verwendbaren Tensiden vom Sulfonat-Typ gehören lineare Alkylbenzolsulfonate mit 9 bis 14 C-Atomen im Alkylteil, Alkansulfonate mit 12 bis 18 C-Atomen, sowie Olefinsulfonate mit 12 bis 18 C-Atomen, die bei der Umsetzung entsprechender Monoolefine mit Schwefel trioxid entstehen, sowie alpha-Sulfofettsäureester, die bei der Sulfonierung von Fettsäure methyl- oder -ethylestem entstehen.Suitable anionic surfactants are, in particular, soaps and those containing sulfate or sulfo contain nat groups with preferably alkali ions as cations. Soaps that can be used are preferably the alkali salts of saturated or unsaturated fatty acids with 12 to 18 C- Atoms. Such fatty acids can also be in a form which is not completely neutralized be used. The surfactants of the sulfate type include the salts of Sulfuric acid half-esters of fatty alcohols with 12 to 18 carbon atoms and the sulfation Products of the nonionic surfactants mentioned with a low degree of ethoxylation. To the usable surfactants of the sulfonate type include linear alkylbenzenesulfonates with 9 to 14 carbon atoms in the alkyl part, alkane sulfonates with 12 to 18 carbon atoms, and olefin sulfonates with 12 to 18 carbon atoms, which are used in the implementation of corresponding monoolefins with sulfur trioxide, as well as alpha-sulfofatty acid esters, which are used in the sulfonation of fatty acid methyl or ethyl esters arise.

Tenside sind in den erfindungsgemäßen Waschmitteln in Mengenanteilen von vorzugsweise 5 Gew.-% bis 50 Gew.-%, insbesondere von 8 Gew.-% bis 30 Gew.-%, enthalten.Surfactants are preferred in the detergents according to the invention in proportions 5 wt .-% to 50 wt .-%, in particular from 8 wt .-% to 30 wt .-%, contain.

Ein erfindungsgemäßes Mittel enthält vorzugsweise mindestens einen wasserlöslichen und/oder wasserunlöslichen, organischen und/oder anorganischen Builder. Zu den wasser löslichen organischen Buildersubstanzen gehören Polycarbonsäuren, insbesondere Citronensäure und Zuckersäuren, monomere und polymere Aminopolycarbonsäuren, ins besondere Methylglycindiessigsäure, Nitrilotriessigsäure und Ethylendiamintetraessigsäure sowie Polyasparaginsäure, Polyphosphonsäuren, insbesondere Aminotris(methylenphos phonsäure), Ethylendiamintetrakis(methylenphosphonsäure) und 1-Hydroxyethan- 1,1-di phosphonsäure, polymere Hydroxyverbindungen wie Dextrin sowie polymere (Poly-)car bonsäuren, insbesondere die durch Oxidation von Polysacchariden beziehungsweise Dextrinen zugänglichen Polycarboxylate der internationalen Patentanmeldung WO 93/16110 beziehungsweise der internationalen Patentanmeldung WO 92/18542 oder der europäischen Patentschrift EP 0 232 202, polymere Acrylsäuren, Methacrylsäuren, Maleinsäuren und Mischpolymere aus diesen, die auch geringe Anteile polymerisierbarer Substanzen ohne Carbonsäurefunktionalität einpolymerisiert enthalten können. Die relative Molekülmasse der Homopolymeren ungesättigter Carbonsäuren liegt im allgemeinen zwischen 5 000 und 200 000, die der Copolymeren zwischen 2 000 und 200 000, vorzugs weise 50 000 bis 120 000, jeweils bezogen auf freie Säure. Ein besonders bevorzugtes Acrylsäure-Maleinsäure-Copolymer weist eine relative Molekülmasse von 50 000 bis 100 000 auf. Geeignete, wenn auch weniger bevorzugte Verbindungen dieser Klasse sind Copolymere der Acrylsäure oder Methacrylsäure mit Vinylethern, wie Vinylmethylethern, Vinylester, Ethylen, Propylen und Styrol, in denen der Anteil der Säure mindestens 50 Gew.-% beträgt. Als wasserlösliche organische Buildersubstanzen können auch Terpo lymere eingesetzt werden, die als Monomere zwei ungesättigte Säuren und/oder deren Salze sowie als drittes Monomer Vinylalkohol und/oder einem veresterten Vinylalkohol oder ein Kohlenhydrat enthalten. Das erste saure Monomer beziehungsweise dessen Salz leitet sich von einer monoethylenisch ungesättigten C₃-C₈-Carbonsäure und vorzugsweise von einer C₃-C₄-Monocarbonsäure, insbesondere von (Meth)-acrylsäure ab. Das zweite saure Monomer beziehungsweise dessen Salz kann ein Derivat einer C₄-C₈-Dicarbonsäure, wobei Maleinsäure besonders bevorzugt ist, und/oder ein Derivat einer Allylsulfonsäure, die in 2- Stellung mit einem Alkyl- oder Arylrest substituiert ist, sein. Derartige Polymere lassen sich insbesondere nach Verfahren herstellen, die in der deutschen Patentschrift DE 42 21 381 und der deutschen Patentanmeldung DE 43 00 772 beschrieben sind, und weisen im allgemeinen eine relative Molekülmasse zwischen 1 000 und 200 000 auf. Weitere bevorzugte Copolymere sind solche, die in den deutschen Patentanmeldungen DE 43 03 320 und DE 44 17 734 beschrieben werden und als Monomere vorzugsweise Acrolein und Acrylsäure/Acrylsäuresalze beziehungsweise Vinylacetat aufweisen. Die organischen Buildersubstanzen können, insbesondere zur Herstellung flüssiger Mittel, in Form wäßriger Lösungen, vorzugsweise in Form 30- bis 50-gewichtsprozentiger wäßriger Lösungen einge setzt werden. Alle genannten Säuren werden in der Regel in Form ihrer wasserlöslichen Sal ze, insbesondere ihre Alkalisalze, eingesetzt. An agent according to the invention preferably contains at least one water-soluble and / or water-insoluble, organic and / or inorganic builder. The water-soluble organic builders include polycarboxylic acids, particularly citric acid and sugar acids, monomeric and polymeric aminopolycarboxylic acids, in particular methylglycinediacetic acid, nitrilotriacetic acid and ethylenediaminetetraacetic acid and polyaspartic acid, polyphosphonic acids, in particular aminotris (methylenphos phonsäure), ethylenediaminetetrakis (methylenephosphonic acid) and 1-hydroxyethane 1,1 -di phosphonic acid, polymeric hydroxy compounds such as dextrin and polymeric (poly) carboxylic acids, in particular the polycarboxylates of international patent application WO 93/16110 or international patent application WO 92/18542 or European patent EP 0 232 202, which are accessible by oxidation of polysaccharides or dextrins , polymeric acrylic acids, methacrylic acids, maleic acids and copolymers of these, which also polymerize small amounts of polymerizable substances without carboxylic acid functionality e can contain. The relative molecular weight of the homopolymers of unsaturated carboxylic acids is generally between 5,000 and 200,000, that of the copolymers between 2,000 and 200,000, preferably 50,000 to 120,000, each based on free acid. A particularly preferred acrylic acid-maleic acid copolymer has a relative molecular weight of 50,000 to 100,000. Suitable, albeit less preferred, compounds of this class are copolymers of acrylic acid or methacrylic acid with vinyl ethers, such as vinyl methyl ethers, vinyl esters, ethylene, propylene and styrene, in which the proportion of acid is at least 50% by weight. Terpo polymers which contain two unsaturated acids and / or salts thereof as monomers and vinyl alcohol and / or an esterified vinyl alcohol or a carbohydrate as the third monomer can also be used as water-soluble organic builder substances. The first acidic monomer or its salt is derived from a monoethylenically unsaturated C ₃ -C ₈ carboxylic acid and preferably from a C ₃ -C ₄ monocarboxylic acid, in particular from (meth) acrylic acid. The second acidic monomer or its salt can be a derivative of a C ₄ -C ₈ dicarboxylic acid, maleic acid being particularly preferred, and / or a derivative of an allylsulfonic acid which is substituted in the 2-position by an alkyl or aryl radical. Polymers of this type can be produced in particular by processes which are described in German patent specification DE 42 21 381 and German patent application DE 43 00 772 and generally have a relative molecular weight of between 1,000 and 200,000. Further preferred copolymers are those which are described in German patent applications DE 43 03 320 and DE 44 17 734 and which preferably contain acrolein and acrylic acid / acrylic acid salts or vinyl acetate as monomers. The organic builder substances, in particular for the production of liquid agents, can be used in the form of aqueous solutions, preferably in the form of 30 to 50 percent by weight aqueous solutions. All of the acids mentioned are generally used in the form of their water-soluble salts, in particular their alkali metal salts.

Derartige organische Buildersubstanzen können gewünschtenfalls in Mengen bis zu 40 Gew.-%, insbesondere bis zu 25 Gew.-% und vorzugsweise von 1 Gew.-% bis 8 Gew.-% enthalten sein. Mengen nahe der genannten Obergrenze werden vorzugsweise in pastenförmigen oder flüssigen, insbesondere wasserhaltigen, erfindungsgemäßen Mitteln eingesetzt.Such organic builder substances can, if desired, in amounts up to 40% by weight, in particular up to 25% by weight and preferably from 1% by weight to 8% by weight be included. Amounts close to the above upper limit are preferably in paste-like or liquid, in particular water-containing agents according to the invention used.

Als wasserlösliche anorganische Buildermaterialien kommen insbesondere Alkalisilikate und Polyphosphate, vorzugsweise Natriumtripolyphosphat, in Betracht. Als wasser unlösliche, wasserdispergierbare anorganische Buildermaterialien werden insbesondere kri stalline oder amorphe Alkalialumosilikate, in Mengen von bis zu 50 Gew.-%, vorzugsweise nicht über 40 Gew.-% und in flüssigen Mitteln insbesondere von 1 Gew.-% bis 5 Gew.-%, eingesetzt. Unter diesen sind die kristallinen Natriumalumosilikate in Waschmittelqualität, insbesondere Zeolith A, P und gegebenenfalls X, bevorzugt. Mengen nahe der genannten Obergrenze werden vorzugsweise in festen, teilchenförmigen Mitteln eingesetzt. Geeignete Alumosilikate weisen insbesondere keine Teilchen mit einer Korngröße über 30 µm auf und bestehen vorzugsweise zu wenigstens 80 Gew.-% aus Teilchen mit einer Größe unter 10 µm. Ihr Calciumbindevermögen, das nach den Angaben der deutschen Patentschrift DE 24 12 837 bestimmt werden kann, liegt in der Regel im Bereich von 100 bis 200 mg CaO pro Gramm.Alkali silicates in particular come as water-soluble inorganic builder materials and polyphosphates, preferably sodium tripolyphosphate. As water Insoluble, water-dispersible inorganic builder materials are particularly critical stalline or amorphous alkali alumosilicates, in amounts of up to 50% by weight, preferably not more than 40% by weight and in liquid compositions in particular from 1% by weight to 5% by weight, used. Among these are the detergent grade crystalline sodium aluminosilicates, especially zeolite A, P and optionally X, preferred. Amounts close to the above Upper limits are preferably used in solid, particulate compositions. Suitable In particular, aluminosilicates have no particles with a grain size above 30 μm and preferably consist of at least 80% by weight of particles with a size below 10 µm. Your calcium binding capacity, which according to the information in the German patent specification DE 24 12 837 can be determined, is usually in the range of 100 to 200 mg CaO per gram.

Geeignete Substitute beziehungsweise Teilsubstitute für das genannte Alumosilikat sind kristalline Alkalisilikate, die allein oder im Gemisch mit amorphen Silikaten vorliegen können. Die in den erfindungsgemäßen Mitteln als Gerüststoffe brauchbaren Alkalisilikate weisen vorzugsweise ein molares Verhältnis von Alkalioxid zu SiO₂ unter 0,95, insbesondere von 1 : 1,1 bis 1 : 12 auf und können amorph oder kristallin vorliegen. Be vorzugte Alkalisilikate sind die Natriumsilikate, insbesondere die amorphen Natriumsili kate, mit einem molaren Verhältnis Na₂O:SiO₂ von 1 : 2 bis 1 : 2,8. Solche mit einem molaren Verhältnis Na₂O:SiO₂ von 1 : 1,9 bis 1 : 2,8 können nach dem Verfahren der europäischen Pa tentanmeldung EP 0 425 427 hergestellt werden. Als kristalline Silikate, die allein oder im Gemisch mit amorphen Silikaten vorliegen können, werden vorzugsweise kristalline Schichtsilikate der allgemeinen Formel Na₂Si_xO_2x-1.y H₂O eingesetzt, in der x, das soge nannte Modul, eine Zahl von 1,9 bis 4 und y eine Zahl von 0 bis 20 ist und bevorzugte Werte für x 2, 3 oder 4 sind. Kristalline Schichtsilikate, die unter diese allgemeine Formel fallen, werden beispielsweise in der europäischen Patentanmeldung EP 0 164 514 be schrieben. Bevorzugte kristalline Schichtsilikate sind solche, bei denen x in der genannten allgemeinen Formel die Werte 2 oder 3 annimmt. Insbesondere sind sowohl ß- als auch β- Natriumdisilikate (Na₂Si₂O₅.y H₂O) bevorzugt, wobei β-Natriumdisilikat beispielsweise nach dem Verfahren erhalten werden kann, das in der internationalen Patentanmeldung WO 91/08171 beschrieben ist. δ-Natriumsilikate mit einem Modul zwischen 1,9 und 3,2 können gemäß den japanischen Patentanmeldungen JP 04/238 809 oder JP 04/260 610 hergestellt werden. Auch aus amorphen Alkalisilikaten hergestellte, praktisch wasserfreie kristalline Alkalisilikate der obengenannten allgemeinen Formel, in der x eine Zahl von 1,9 bis 2,1 bedeutet, herstellbar wie in den europäischen Patentanmeldungen EP 0 548 599, EP 0 502 325 und EP 0452 428 beschrieben, können in erfindungsgemäßen Mitteln eingesetzt werden. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform erfindungsgemäßer Mittel wird ein kristallines Natriumschichtsilikat mit einem Modul von 2 bis 3 eingesetzt, wie es nach dem Verfahren der europäischen Patentanmeldung EP 0 436 835 aus Sand und Soda hergestellt werden kann. Kristalline Natriumsilikate mit einem Modul im Bereich von 1,9 bis 3,5, wie sie nach den Verfahren der europäischen Patentschriften EP 0 164 552 und/oder EP 0 293 753 erhältlich sind, werden in einer weiteren bevorzugten Ausführungs form erfindungsgemäßer Mittel eingesetzt. Falls als zusätzliche Buildersubstanz auch Alka lialumosilikat, insbesondere Zeolith, vorhanden ist, beträgt das Gewichtsverhältnis Alumo silikat zu Silikat, jeweils bezogen auf wasserfreie Aktivsubstanzen, vorzugsweise 1 : 10 bis 10 : 1. In Mitteln, die sowohl amorphe als auch kristalline Alkalisilikate enthalten, beträgt das Gewichtsverhältnis von amorphem Alkalisilikat zu kristallinem Alkalisilikat vorzugsweise 1 : 2 bis 2 : 1 und insbesondere 1 : 1 bis 2 : 1.Suitable substitutes or partial substitutes for the aluminosilicate mentioned are crystalline alkali silicates, which can be present alone or in a mixture with amorphous silicates. The alkali silicates which can be used as builders in the agents according to the invention preferably have a molar ratio of alkali oxide to SiO ₂ below 0.95, in particular from 1: 1.1 to 1:12, and can be amorphous or crystalline. Preferred alkali silicates are the sodium silicates, in particular the amorphous sodium silicates, with a Na ₂ O: SiO ₂ molar ratio of 1: 2 to 1: 2.8. Those with a molar Na ₂ O: SiO ₂ ratio of 1: 1.9 to 1: 2.8 can be prepared by the process of European patent application EP 0 425 427. Crystalline phyllosilicates of the general formula Na ₂ Si _x O _2x-1 .y H ₂ O, in which x, the so-called module, a number of 1, are preferably used as crystalline silicates, which may be present alone or in a mixture with amorphous silicates , 9 to 4 and y is a number from 0 to 20 and preferred values for x are 2, 3 or 4. Crystalline layered silicates which fall under this general formula are described, for example, in European patent application EP 0 164 514. Preferred crystalline layered silicates are those in which x assumes the values 2 or 3 in the general formula mentioned. In particular, both β- and β-sodium disilicate (Na ₂ Si ₂ O ₅ .y H ₂ O) are preferred, wherein β-sodium disilicate can be obtained, for example, by the method described in international patent application WO 91/08171. δ-sodium silicates with a modulus between 1.9 and 3.2 can be produced according to Japanese patent applications JP 04/238 809 or JP 04/260 610. Practically anhydrous crystalline alkali silicates of the above general formula, in which x denotes a number from 1.9 to 2.1, can also be prepared from amorphous alkali silicates, as described in European patent applications EP 0 548 599, EP 0 502 325 and EP 0452 428 , can be used in agents according to the invention. In a further preferred embodiment of agents according to the invention, a crystalline layered sodium silicate with a modulus of 2 to 3 is used, as can be produced from sand and soda by the process of European patent application EP 0 436 835. Crystalline sodium silicates with a modulus in the range from 1.9 to 3.5, as can be obtained by the processes of European patent EP 0 164 552 and / or EP 0 293 753, are used in a further preferred embodiment of agents according to the invention. If alkali aluminosilicate, in particular zeolite, is also present as an additional builder substance, the weight ratio of aluminosilicate to silicate, based in each case on anhydrous active substances, is preferably 1:10 to 10: 1. In agents which contain both amorphous and crystalline alkali silicates the weight ratio of amorphous alkali silicate to crystalline alkali silicate is preferably 1: 2 to 2: 1 and in particular 1: 1 to 2: 1.

Buildersubstanzen sind in den erfindungsgemäßen Waschmitteln vorzugsweise in Mengen bis zu 60 Gew.-%, insbesondere von 5 Gew.-% bis 40 Gew.-%, enthalten.Builder substances are preferably present in amounts in the detergents according to the invention up to 60 wt .-%, in particular from 5 wt .-% to 40 wt .-%, contain.

Als geeignete Persauerstoffverbindungen kommen insbesondere organische Persäuren be ziehungsweise persaure Salze organischer Säuren, wie Phthalimidopercapronsäure, Perben zoesäure oder Salze der Diperdodecandisäure, Wasserstoffperoxid und unter den Waschbe dingungen Wasserstoffperoxid abgebende anorganische Salze, wie Perborat, Percarbonat und/oder Persilikat, in Betracht. Sofern feste Persauerstoffverbindungen eingesetzt werden sollen, können diese in Form von Pulvern oder Granulaten verwendet werden, die auch in im Prinzip bekannter Weise umhüllt sein können. Besonders bevorzugt wird Alkaliper carbonat, Alkaliperborat-Monohydrat oder Wasserstoffperoxid in Form wäßriger Lösungen, die 3 Gew.-% bis 10 Gew.-% Wasserstoffperoxid enthalten, eingesetzt. Falls ein erfindungs gemäßes Waschmittel Persauerstoffverbindungen enthält, sind diese in Mengen von vor zugsweise bis zu 50 Gew.-%, insbesondere von 5 Gew.-% bis 30 Gew.-%, vorhanden. Der Zusatz geringer Mengen bekannter Bleichmittelstabilisatoren wie beispielsweise von Phos phonaten, Boraten beziehungsweise Metaboraten und Metasilikaten sowie Magnesiumsal zen wie Magnesiumsulfat kann zweckdienlich sein.Organic peracids are particularly suitable as peroxygen compounds or peracidic salts of organic acids, such as phthalimidopercaproic acid, perben zoic acid or salts of diperdodecanedioic acid, hydrogen peroxide and under the wash conditions inorganic salts releasing hydrogen peroxide, such as perborate, percarbonate and / or persilicate. If solid peroxygen compounds are used should, these can be used in the form of powders or granules, which also in can be encased in a known manner. Alkaliper is particularly preferred carbonate, alkali perborate monohydrate or hydrogen peroxide in the form of aqueous solutions, which contain 3% by weight to 10% by weight of hydrogen peroxide. If an invention appropriate detergent contains peroxygen compounds, these are in amounts of before preferably up to 50% by weight, in particular from 5% by weight to 30% by weight, is present. Of the Add small amounts of known bleach stabilizers such as Phos phonates, borates or metaborates and metasilicates as well as magnesium sal Zen like magnesium sulfate can be useful.

Als Bleichaktivatoren können Verbindungen, die unter Perhydrolysebedingungen aliphatische Peroxocarbonsäuren mit vorzugsweise 1 bis 10 C-Atomen, insbesondere 2 bis 4 C-Atomen, und/oder gegebenenfalls substituierte Perbenzoesäure ergeben, eingesetzt werden. Geeignet sind Substanzen, die O- und/oder N-Acylgruppen der genannten C- Atomzahl und/oder gegebenenfalls substituierte Benzoylgruppen tragen. Bevorzugt sind mehrfach acylierte Alkylendiamine, insbesondere Tetraacetylethylendiamin (TAED), acylierte Triazinderivate, insbesondere 1,5-Diacetyl-2,4-dioxohexahydro- 1,3,5-triazin (DADHT), acylierte Glykolurile, insbesondere Tetraacetylglykoluril (TAGU), N-Acylimide, insbesondere N-Nonanoylsuccinimid (NOSI), acylierte Phenolsulfonate, insbesondere n- Nonanoyl- oder Isononanoyloxybenzolsulfonat (n- bzw. iso-NOBS), Carbonsäureannydride, insbesondere Phthalsäureahhydrid, acylierte mehrwertige Alkohole, insbesondere Triacetin, Ethylenglykoldiacetat, 2,5-Diacetoxy-2,5-dihydrofuran und die aus den deutschen Patentanmeldungen DE 196 16 693 und DE 196 16 767 bekannten Enolester sowie acetyliertes Sorbitol und Mannitol beziehungsweise deren in der europäischen Patentanmeldung EP 0 525 239 beschriebene Mischungen (SORMAN), acylierte Zucker derivate, insbesondere Pentaacetylglukose (PAG), Pentaacetylfruktose, Tetraacetylxylose und Octaacetyllactose sowie acetyliertes, gegebenenfalls N-alkyliertes Glucamin und Gluco nolacton, und/oder N-acylierte Lactame, beispielsweise N-Benzoylcaprolactam, die aus den internationalen Patentanmeldungen WO 94/27970, WO 94/28102, WO 94/28103, WO 95/00626, WO 95/14759 und WO 95/17498 bekannt sind. Die aus der deutschen Pa tentanmeldung DE 196 16 769 bekannten hydrophil substituierten Acylacetale und die in der deutschen Patentanmeldung DE 196 16 770 sowie der internationalen Patentanmeldung WO 95/14075 beschriebenen Acyllactame werden ebenfalls bevorzugt eingesetzt. Auch die aus der deutschen Patentanmeldung DE 44 43 177 bekannten Kombinationen konventioneller Bleichaktivatoren können eingesetzt werden. Derartige Bleichaktivatoren sind im üblichen Mengenbereich, vorzugsweise in Mengen von 1 Gew.-% bis 10 Gew.-%, insbesondere 2 Gew.-% bis 8 Gew.-%, bezogen auf gesamtes Mittel, enthalten.As bleach activators can be compounds that are under perhydrolysis conditions aliphatic peroxocarboxylic acids with preferably 1 to 10 carbon atoms, in particular 2 to 4 carbon atoms and / or optionally substituted perbenzoic acid are used will. Substances which contain O- and / or N-acyl groups of the C- Bear atomic number and / or optionally substituted benzoyl groups. Are preferred multiple acylated alkylenediamines, especially tetraacetylethylenediamine (TAED), acylated triazine derivatives, especially 1,5-diacetyl-2,4-dioxohexahydro-1,3,5-triazine (DADHT), acylated glycolurils, especially tetraacetylglycoluril (TAGU), N-acylimides, especially N-nonanoylsuccinimide (NOSI), acylated phenol sulfonates, especially n- Nonanoyl or isononanoyloxybenzenesulfonate (n- or iso-NOBS), carboxylic acid anhydrides, especially phthalic acid hydride, acylated polyhydric alcohols, especially triacetin, Ethylene glycol diacetate, 2,5-diacetoxy-2,5-dihydrofuran and those from the German Patent applications DE 196 16 693 and DE 196 16 767 known enol esters as well acetylated sorbitol and mannitol or their in the European Patent application EP 0 525 239 mixtures described (SORMAN), acylated sugar derivatives, especially pentaacetylglucose (PAG), pentaacetylfructose, tetraacetylxylose and octaacetyl lactose and acetylated, optionally N-alkylated, glucamine and gluco nolactone, and / or N-acylated lactams, for example N-benzoylcaprolactam, which are derived from the international patent applications WO 94/27970, WO 94/28102, WO 94/28103, WO 95/00626, WO 95/14759 and WO 95/17498 are known. The from the German Pa tentanmeldung DE 196 16 769 known hydrophilically substituted acylacetals and the in German patent application DE 196 16 770 and international patent application Acyl lactams described in WO 95/14075 are also preferably used. Also the Combinations known from German patent application DE 44 43 177 conventional bleach activators can be used. Such bleach activators are in the usual range of amounts, preferably in amounts of 1% by weight to 10% by weight, in particular 2% by weight to 8% by weight, based on the total agent.

Zusätzlich zu den oben aufgeführten konventionellen Bleichaktivatoren oder an deren Stelle können auch die aus den europäischen Patentschriften EP 0 446 982 und EP 0 453 003 be kannten Sulfonimine und/oder bleichverstärkende Übergangsmetallsalze beziehungsweise Übergangsmetallkomplexe als sogenannte Bleichkatalysatoren enthalten sein. Zu den in Frage kommenden Übergangsmetallverbindungen gehören insbesondere die aus der deutschen Patentanmeldung DE 195 29 905 bekannten Mangan-, Eisen-, Cobalt-, Ruthenium- oder Molybdän-Salenkomplexe und deren aus der deutschen Patentanmeldung DE 196 20 267 bekannte N-Analogverbindungen, die aus der deutschen Patentanmeldung DE 195 36 082 bekannten Mangan-, Eisen-, Cobalt-, Ruthenium- oder Molybdän- Carbonylkomplexe, die in der deutschen Patentanmeldung DE 196 05 688 beschriebenen Mangan-, Eisen-, Cobalt-, Ruthenium-, Molybdän-, Titan-, Vanadium- und Kupfer- Komplexe mit stickstoffhaltigen Tripod-Liganden, die aus der deutschen Patentanmeldung DE 196 20 411 bekannten Cobalt-, Eisen-, Kupfer- und Ruthenium-Amunimkomplexe, die in der deutschen Patentanmeldung DE 44 16 438 beschriebenen Mangan-, Kupfer- und Cobalt- Komplexe, die in der europäischen Patentanmeldung EP 0 272 030 beschriebenen Cobalt- Komplexe, die aus der europäischen Patentanmeldung EP 0 693 550 bekannten Mangan- Komplexe, die aus der europäischen Patentschrift EP 0 392 592 bekannten Mangan-, Eisen-, Cobalt- und Kupfer-Komplexe, die aus den internationalen Patentanmeldungen WO 96/23859, WO 96/23860 und WO 96/23861 bekannten Cobalt-Komplexe und/oder die in der europäischen Patentschrift EP 0 443 651 oder den europäischen Patentanmeldungen EP 0 458 397, EP 0 458 398, EP 0 549 271, EP 0 549 272, EP 0 544 490 und EP 0 544 519 beschriebenen Mangan-Komplexe. Kombinationen aus Bleichaktivatoren und Übergangsmetall-Bleichkatalysatoren sind beispielsweise aus der deutschen Patentanmeldung DE 196 13 103 und der internationalen Patentanmeldung WO 95/27775 bekannt. Bleichverstärkende Übergangsmetallkomplexe, insbesondere mit den Zentralatomen Mn, Fe, Co, Cu, Mo, V, Ti und/oder Ru, werden in üblichen Mengen, vor zugsweise in einer Menge bis zu 1 Gew.-%, insbesondere von 0,0025 Gew.-% bis 0,25 Gew.-% und besonders bevorzugt von 0,01 Gew.-% bis 0,1 Gew.-%, jeweils bezogen auf gesamtes Mittel, eingesetzt.In addition to the conventional bleach activators listed above or in their place can also be those from European patents EP 0 446 982 and EP 0 453 003 knew sulfonimines and / or bleach-enhancing transition metal salts respectively Transition metal complexes can be included as so-called bleaching catalysts. To the in Transition metal compounds in question include in particular those from the German patent application DE 195 29 905 known manganese, iron, cobalt, Ruthenium or molybdenum salt complexes and those from the German patent application DE 196 20 267 known N-analog compounds, which are from the German patent application DE 195 36 082 known manganese, iron, cobalt, ruthenium or molybdenum Carbonyl complexes described in German patent application DE 196 05 688 Manganese, iron, cobalt, ruthenium, molybdenum, titanium, vanadium and copper Complexes with nitrogen-containing tripod ligands resulting from the German patent application DE 196 20 411 known cobalt, iron, copper and ruthenium amine complexes, which in the German patent application DE 44 16 438 described manganese, copper and cobalt Complexes described in European patent application EP 0 272 030 Complexes known from the European patent application EP 0 693 550 manganese Complexes known from the European patent EP 0 392 592 manganese, iron, Cobalt and copper complexes resulting from international patent applications WO 96/23859, WO 96/23860 and WO 96/23861 known cobalt complexes and / or the in European patent specification EP 0 443 651 or European patent applications EP 0 458 397, EP 0 458 398, EP 0 549 271, EP 0 549 272, EP 0 544 490 and EP 0 544 519 described manganese complexes. Combinations of bleach activators and Transition metal bleach catalysts are, for example, from the German Patent application DE 196 13 103 and international patent application WO 95/27775 known. Bleach-enhancing transition metal complexes, especially with the Central atoms Mn, Fe, Co, Cu, Mo, V, Ti and / or Ru are used in usual quantities preferably in an amount of up to 1% by weight, in particular from 0.0025% by weight to 0.25% by weight and particularly preferably from 0.01% by weight to 0.1% by weight, in each case based on all means.

Als in den Mitteln zusätzlich zur erfindungswesentlichen Protease/Amylase-Kombination verwendbare Enzyme kommen solche aus der Klasse der Lipasen, Cutinasen, Pullulanasen, Hemicellulasen, Cellulasen, Oxidasen und Peroxidasen sowie deren Gemische in Frage. Ge gebenenfalls können auch andere als die erfindungswesentlichen Proteasen und/oder Amyla sen zusätzlich zu diesen vorhanden sein. Besonders geeignet sind aus Pilzen oder Bakterien, wie Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Streptomyces griseus, Humicola lanuginosa, Humicola insolens, Pseudomonas pseudoalcaligenes oder Pseudomonas cepacia gewonnene enzymatische Wirkstoffe. Die erfindungswesentlichen und die gegebenenfalls zusätzlich verwendeten Enzyme können, wie zum Beispiel in den internationalen Patentanmeldungen WO 92/11347 oder WO 94/23005 beschrieben, an Trägerstoffen adsorbiert und/oder in Hüllsubstanzen eingebettet sein, um sie gegen vorzeitige Inaktivierung zu schützen. Sie sind in den erfindungsgemäßen Waschmitteln vorzugsweise in Mengen bis zu 5 Gew.-%, insbe sondere von 0,2 Gew.-% bis 2 Gew.-%, enthalten.As in the agents in addition to the protease / amylase combination essential to the invention usable enzymes come from the class of lipases, cutinases, pullulanases, Hemicellulases, cellulases, oxidases and peroxidases as well as their mixtures in question. Ge if necessary, other than the proteases essential to the invention and / or Amyla in addition to these. From fungi or bacteria, such as Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Streptomyces griseus, Humicola lanuginosa, Humicola insolens, Pseudomonas pseudoalcaligenes or Pseudomonas cepacia enzymatic agents. The essentials of the invention and, if necessary, additionally Enzymes can be used, such as in international patent applications WO 92/11347 or WO 94/23005 described, adsorbed on carriers and / or in Envelope substances are embedded to protect them against premature inactivation. they are in the detergents according to the invention preferably in amounts of up to 5% by weight, in particular in particular from 0.2% by weight to 2% by weight.

Zu den in den erfindungsgemaßen Mitteln, insbesondere wenn sie in flüssiger oder pastöser Form vorliegen, neben Wasser verwendbaren organischen Lösungsmitteln gehören Alkohole mit 1 bis 4 C-Atomen, insbesondere Methanol, Ethanol, Isopropanol und tert.- Butanol, Diole mit 2 bis 4 C-Atomen, insbesondere Ethylenglykol und Propylenglykol, sowie deren Gemische und die aus den genannten Verbindungsklassen ableitbaren Ether. Derartige wassermischbare Lösungsmittel sind in den erfindungsgemäßen Waschmitteln vorzugsweise in Mengen nicht über 30 Gew.-%, insbesondere von 6 Gew.-% bis 20 Gew. %, vorhanden.To those in the agents according to the invention, especially if they are in liquid or pasty Form are present, in addition to water usable organic solvents Alcohols with 1 to 4 carbon atoms, especially methanol, ethanol, isopropanol and tert. Butanol, diols with 2 to 4 carbon atoms, especially ethylene glycol and propylene glycol, as well as their mixtures and the ethers derivable from the compound classes mentioned. Such water-miscible solvents are in the detergents according to the invention preferably in amounts not exceeding 30% by weight, in particular from 6% by weight to 20% by weight. %, available.

Zur Einstellung eines gewünschten, sich durch die Mischung der übrigen Komponenten nicht von selbst ergebenden pH-Werts können die erfindungsgemäßen Mittel system- und umweltverträgliche Säuren, insbesondere Citronensäure, Essigsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Milchsäure, Glykolsäure, Bernsteinsäure, Glutarsäure und/oder Adipinsäure, aber auch Mineralsäuren, insbesondere Schwefelsäure, oder Basen, insbesondere Ammonium- oder Alkalihydroxide, enthalten. Derartige pH-Regulatoren sind in den erfindungsgemäßen Mitteln vorzugsweise nicht über 20 Gew.-%, insbesondere von 1,2 Gew.-% bis 17 Gew.-%, enthalten.To set a desired, by mixing the other components the agents according to the invention cannot be systemic and environmentally compatible acids, especially citric acid, acetic acid, tartaric acid, malic acid, Lactic acid, glycolic acid, succinic acid, glutaric acid and / or adipic acid, but also Mineral acids, especially sulfuric acid, or bases, especially ammonium or Alkali hydroxides included. Such pH regulators are in the invention Agents preferably not more than 20% by weight, in particular from 1.2% by weight to 17% by weight, contain.

Zusätzlich können die Mittel weitere in Wasch- und Reinigungsmitteln übliche Bestandteile enthalten. Zu diesen fakultativen Bestandteilen gehören insbesondere Enzymstabilisatoren, zusätzliche Vergrauungsinhibitoren wie Carboxymethylcellulose, Farbübertragungsinhibito ren, beispielsweise Polyvinylpyrrolidon oder Polyvinylpyridin-N-oxid, Schaumihhibitoren, beispielsweise Organopolysiloxane und/oder Paraffine, und optische Aufheller, beispielsweise Stilbendisulfonsäurederivate.In addition, the detergents can contain other constituents customary in washing and cleaning agents contain. These optional components include in particular enzyme stabilizers, additional graying inhibitors such as carboxymethyl cellulose, color transfer inhibitor ren, for example polyvinylpyrrolidone or polyvinylpyridine-N-oxide, foam inhibitors, for example organopolysiloxanes and / or paraffins, and optical brighteners, for example stilbene disulfonic acid derivatives.

Die Herstellung erfindungsgemäßer fester Mittel bietet keine Schwierigkeiten und kann auf bekannte Weise, zum Beispiel durch Sprühtrocknen oder Granulation, erfolgen, wobei die Enzyme und eventuelle weitere thermisch empfindliche Inhaltsstoffe wie zum Beispiel Bleichmittel gegebenenfalls später separat zugesetzt werden. Zur Herstellung erfindungsge mäßer Mittel mit erhöhtem Schüttgewicht, insbesondere im Bereich von 650 g/l bis 950 g/l, ist ein aus der europäischen Patentschrift EP 486 592 bekanntes, einen Extrusionsschritt auf weisendes Verfahren bevorzugt. Flüssige beziehungsweise pastöse erfindungsgemäße Wasch- oder Reinigungsmittel in Form von übliche Lösungsmittel enthaltenden Lösungen werden in der Regel durch einfaches Mischen der Inhaltsstoffe, die in Substanz oder als Lösung in einen automatischen Mischer gegeben werden können, hergestellt.The preparation of solid compositions according to the invention is not difficult and can be known manner, for example by spray drying or granulation, the Enzymes and any other thermally sensitive ingredients such as Bleach may be added separately later, if necessary. To manufacture fiction moderate average with increased bulk density, in particular in the range from 650 g / l to 950 g / l, is an extrusion step known from European patent EP 486 592 pointing method preferred. Liquid or pasty according to the invention Detergents or cleaning agents in the form of solutions containing customary solvents are usually made by simply mixing the ingredients in bulk or as Solution can be placed in an automatic mixer.

Examples

Zur Bestimmung des Waschvermögens wurden mit standardisierten Testanschmutzungen verunreinigte Baumwollgewebe bei 40°C (Waschmitteldosierung 76 g; Wasserhärte 16°d; Beladung 3,5 kg, Kurzprogramm) in einer Haushaltswaschmaschine (AEG Öko Lavamat® 694) gewaschen. In der nachfolgenden Tabelle 1 sind die Waschergebnisse (in dE Anfangs wert minus dE nach dem Waschen, Meßgerät Minolta® CR 310) für ein Waschmittel V2, das 0,6 Gew.-% nicht erfindungsgemäßes Amylasegranulat (Termamyl® 60T) und 1,2 Gew.-% eines Proteasegranulats (Aktivität 200 000 PE/g) mit der gentechnisch veränderten Protease F 49 gemäß WO 95/23221 enthielt, für ein Waschmittel V1, das an sonsten gleich zusammengesetzt war, aber statt F 49 proteinaktivitätsgleiche Mengen BLAP enthielt, ein ansonsten wie V1 zusammengesetztes Waschmittel V3, das statt Termamyl® die proteinaktivitätsgleiche Menge der gentechnisch veränderten Amylase Duramyl® enthielt, ein ansonsten wie V1 zusammengesetztes Waschmittel V4, das statt Termamyl® die proteinaktivitätsgleiche Menge der gentechnisch veränderten Amylase Purafect® OxAm enthielt, und für erfindungsgemäße Waschmittel M1 beziehungsweise M2, die ansonsten wie V2 zusammengesetzt waren, aber statt Termamyl® die proteinaktivitätsgleiche Menge der gentechnisch veränderten Amylase Duramyl® beziehungsweise der gentechnisch veränderten Amylase Purafect® OxAm als Ergebnis von Doppelbestimmungen angegeben.To determine the washability, we used standardized test stains contaminated cotton fabric at 40 ° C (detergent dosage 76 g; water hardness 16 ° d; Load 3.5 kg, short program) in a household washing machine (AEG Öko Lavamat® 694) washed. Table 1 below shows the washing results (in the beginning value minus dE after washing, measuring device Minolta® CR 310) for a detergent V2, the 0.6% by weight amylase granules not according to the invention (Termamyl® 60T) and 1.2% by weight of a protease granulate (activity 200,000 PE / g) with the genetically engineered modified protease F 49 according to WO 95/23221, for a detergent V1, the otherwise it was composed the same way, but instead of F 49 amounts of BLAP equal to protein activity contained, a detergent V3 otherwise composed like V1, which instead of Termamyl® the protein activity-equivalent amount of the genetically modified amylase Duramyl® contained, a detergent V4 otherwise composed like V1, which instead of Termamyl® the protein activity-equivalent amount of the genetically modified Amylase Purafect® OxAm contained, and for detergents M1 and M2 according to the invention, which otherwise were composed like V2, but instead of Termamyl® the same amount of protein activity the genetically modified Amylase Duramyl® or the genetically modified one modified Amylase Purafect® OxAm as the result of duplicate determinations.

Waschergebnisse (dE AW - dE gewaschen)Washing results (dE AW - dE washed)

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Claims

1. Protease and amylase-containing textile detergent, characterized in that, in addition to the usual ingredients compatible with such enzymes, a mutant protease in which the amino acid leucine present in the wild-type protease at position 211 (BLAP count) is replaced by aspartic acid or glutamic acid and an amylase mutant in which at least one methionine, tryptophan, cysteine or tyrosine present in the wild-type amylase is removed or replaced by another amino acid, which in particular is not cysteine or methionine.

2. Composition according to claim 1, characterized in that it has a proteolytic activity in the range from 100 PE / g to 7500 PE / g, in particular 500 PE / g to 5000 PE / g.

3. Composition according to claim 1 or 2, characterized in that it is an amylolytic Activity in the range 50 NU / g to 1000 NU / g, in particular 75 NU / g to 750 NU / g.

4. Agent according to one of claims 1 to 3, characterized in that in the protease mutant the amino acid exchange L211D or L211E has been made.

5. Composition according to claim 4, characterized in that in the mutant protease additionally at least one of the amino acid exchanges S3T, V4I, R99G, R99A, R99S, A188P, V193M and / or V199I has been made.

6. Composition according to claim 5, characterized in that in the protease mutant Amino acid exchanges S3T + V4I + AI88P + V193M + V199I + L211D have been.

7. Composition according to one of claims 1 to 6, characterized in that in the amylase mutant amino acid exchange M197L, M197T, M197A, M197G, M197S, M197I, M197N or M197D has been made.

8. Composition according to claim 7, characterized in that in the amylase mutant Amino acids at positions 1 and / or 2 have been removed.

9. Composition according to claim 7 or 8, characterized in that in the amylase mutant additionally at least one of the amino acid exchanges L3V, M15T, M15L, R23K, S29A, A30E, Y31H, A33S, E34D, H68Q, W138F, WI38Y, R242P, H35I, E255P, T341P, Q374P, E458D, P459T, V461K, N463G and / or E465D that is.

10. Agent according to one of claims 1 to 9, characterized in that it is 5 wt .-% to 50 wt .-%, in particular 8 wt .-% to 30 wt .-% surfactants, up to 60 wt .-%, ins particularly 5% by weight to 40% by weight builder, up to 50% by weight, in particular 5% by weight up to 30% by weight of peroxygen compounds, 1% by weight to 10% by weight, in particular 2% by weight to 8% by weight of bleach activators, up to 1% by weight, in particular 0.0025% to 0.25% by weight bleach-enhancing transition metal complexes, up to 5 wt .-%, in particular 0.2 wt .-% to 2 wt .-% of further enzymes and / or not 30% by weight, in particular 6% by weight to 20% by weight, of water-miscible solvents contains.