DE1517123A1 - Process for the production of flavorings - Google Patents

Process for the production of flavorings

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DE1517123A1
DE1517123A1 DE19601517123 DE1517123A DE1517123A1 DE 1517123 A1 DE1517123 A1 DE 1517123A1 DE 19601517123 DE19601517123 DE 19601517123 DE 1517123 A DE1517123 A DE 1517123A DE 1517123 A1 DE1517123 A1 DE 1517123A1
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hydrolyzate
acid
nucleotides
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DE19601517123
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Eiichiro Fujita
Koichi Ogata
Einosuke Ohmura
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Takeda Pharmaceutical Co Ltd
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Takeda Pharmaceutical Co Ltd
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    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06Lysis of microorganisms
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    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/14Yeasts or derivatives thereof
    • A23L33/145Extracts

Description

PATENTANWÄLTEPATENT LAWYERS

DR.-ING. VON KREISLER DR.-1NG. SCHDNWALD DR. SIEBENEICHER DR.-ING. TH. MEYERDR.-ING. BY KREISLER DR.-1NG. SCHDNWALD DR. SIEBENEICHER DR.-ING. TH. MEYER

KÖLNl.DEICHMANNHAUSCOLOGNE.DEICHMANNHAUS

Köln, den 18.7.1960Cologne, July 18, 1960

Dt/AxDt / Ax

Takeda Pharmaceutical Industries« Ltd..Takeda Pharmaceutical Industries "Ltd ..

27» Doshomaohi 2-ohome, Higashiku, Osaka, (Japan)27 »Doshomaohi 2-ohome, Higashiku, Osaka, (Japan)

aVerfahren gur Herstellung von v/ürzatoffen" a process for the production of v / ürzatoffen "

Di· Erfindung besieht sich auf ein Verfahren iur Herstellung Ton neuen fürsen, die nucleotide allein oder Nucleotide und Aminosäuren enthalten, durch Hydrolyse τοη Hefen.The invention relates to a method of manufacture Sound new forens that contain nucleotides alone or nucleotides and contain amino acids, by hydrolysis τοη yeasts.

Es ist bekannt, daß Würzen aus tierischen oder pflansuchen Proteinen durch Hydrolyse der Proteine mit Säure oder Protease hergestellt werden können, und daß sie verschiedene Aminosäuren, die aue den Proteinen stammen, als Hauptkomponenten enthalten. Es ist ferner bekannt, daß Mononatriumglutamat und Hatriumsuccinat als chemische WUrsen verwendbar sind* Außer diesen chemischen Wttrsen ist Hatrium-S'-inosinat als Mittel bekannt, die Schmackhaftigkeit bsw· das Aroma von Nahrunge- und Genußmitteln su steigern bzw· su verbessern, obwohl es noch nicht auf den Harkt gebracht wurde.It is known that seasonings from animal or vegetable origin Proteins can be produced by hydrolysis of the proteins with acid or protease, and that they are different Contain amino acids derived from proteins as main components. It is also known that monosodium glutamate and sodium succinate can be used as chemical sources are * Besides these chemical substances there is sodium-S'-inosinate known as a means, the palatability bsw · the aroma of food and luxury foods to increase or improve, although it has not yet been brought to the harkt.

Es ist außerdem bekannt, daß jede dieser chemischen Würsen ihre gans spezielle Geschmacksrichtung hat» so daß jede für sich als wertvoll anerkannt worden ist· Sine wirksame Steigerung der Schmackhaftigk«it bzw. des Aromas von Nahrungsmitteln wird jedoch ersielt, wenn diese \Ursen in Kombination gebraucht werden·It is also known that each of these chemical Würsen their goose special flavor has "so that each has been recognized for to be valuable · Sine effective increase Schmackhaftigk" it or the flavor of food, however, ersielt if they \ Ursen in combination to be needed·

Angesichts Asr Tatsache, daß Hefen reich an Proteinen und HueIeinsäurβ sind, diese beiden Komponenten su AminosäurenGiven Asr fact that yeast are rich in proteins and These two components are also amino acids

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bzw. Nucleotiden hydrolysiert werden können und einige der auf diese Weise erhaltenen Aminosäuren und Nucleotide die Fähigkeit haben, die Schmackhaftigkeit bzw. die WUrse von Nahrungs- und Genußmitteln au heben, untersuchten die Erfinder die aus Hefen herstellbaren Substanzen, die sich als brauchbare V/Ursen erwiesen haben. or nucleotides can be hydrolyzed and some of the amino acids and nucleotides obtained in this way have the ability to lift the palatability or the sausage of foods and luxury foods, the inventors investigated the substances which can be produced from yeasts and which prove to be useful sources have proven.

Nucleinsäure, die gewöhnlich wasserlöslich ist, kann mit einer Alkallsalzlösung aus Hefe extrahiert werden. Hierbei bleiben die Proteine, die im allgemeinen in Wasser schwerlöslich sind, in dem bei der Extraktion anfallenden Filterkuchen zurück.Nucleic acid, which is usually water soluble, can be extracted from yeast with an alkali salt solution. Here the proteins, which are generally sparingly soluble in water, remain in the filter cake obtained during the extraction return.

Der die Nucleinsäure enthaltende Hefeextrakt kann mit Phosphodiesterase, die mit Adenylsäuredeaminase verunreinigt sein kann» zu 5'-Nucleotiden hydrolysiert werden. Einige 5'-Nucleotide Termögen die Schmackhaftigkeit bzw. die Würze von Nahrungs- und Genußmitteln zu heben, während die 3' -Nucleotide, die durch chemische Hydrolyse τοη Nucleinsäure mit einer Säure herstellbar sind, diese Wirkung nicht aufweisen. Das Hydrolysat des Hefeextraktes ist gewöhnlich nicht nur mit rerschiedenen Stoffen, die nicht immer giftig oder schädlich sind, sondern auch mit verschiedenen Nucleotiden oder Nucleoslden verunreinigt, die nicht die erwünschte Wirkung ausüben. Es wurde jedoch festgestellt, daß diese Verunreinigungen bzw. unwirksamen Nucleoside usw. die Schmackhaftigkeit bzw. Würze von . Nahrungs- und Öenußmitteln kaum ungünstig beeinflussen. Daher kann das Hydrolysat bzw. das aufgearbeitete Produkt daraus ohne eine verfeinernde Behandlung als Würze für Nahrungs- und Genußmittel verwendet werden.The yeast extract containing the nucleic acid can be treated with phosphodiesterase, which can be contaminated with adenylic acid deaminase »hydrolyzed to 5'-nucleotides. Some 5 'nucleotides I like the palatability or the flavor of Food and luxury foods to lift while the 3 'nucleotides, which by chemical hydrolysis τοη nucleic acid with an acid can be produced, do not have this effect. The yeast extract hydrolyzate is usually not only with various substances that are not always toxic or harmful but are also contaminated with various nucleotides or nucleosides that do not have the desired effect exercise. However, it has been found that these impurities or ineffective nucleosides, etc. reduce the palatability or wort of. Food and beverages are hardly unfavorable influence. Therefore, the hydrolyzate or the processed product can be made from it without any refining treatment can be used as a condiment for foodstuffs and luxury foods.

Der bei der Extraktion der Hefe erhaltene Filterkuchen enthält, wie bereits erwähnt, Proteine, die mit Säure oder Protease zu verschiedenen Aminosäuren hydrolysiert werden können. Das Hydrolysat des Filterkuchens enthält natürlich verschiedene Aminosäuren zusammen mit ungiftigen oder unschädlichen Verunreinigungen. Diese Verunreinigungen üben keinen unerwünschten BinfluB aus, wenn das Hydrolysat oder das verarbeitet· Produkt äarata« als Würz« verwendet wird.The filter cake obtained during the extraction of the yeast contains, as already mentioned, proteins which can be hydrolyzed to various amino acids with acid or protease. The hydrolyzate of the filter cake naturally contains various amino acids along with non-toxic or harmless impurities. These impurities do not exert any undesirable influence if the hydrolyzate or the processed product arata "as a spice" is used.

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Aus den obigen Erkenntnissen heraus gelang den Erfindern die Herstellung τοη neuen Würzen, die ein aus Hefeextrakten mit Hilfe von Phosphodiesterase, die mit Adenylsäuredeaminase gemischt eein kann, erhaltenes Hydrolysat oder dessen aufgearbeitetes Produkt und gegebenenfalls ein Hydrolysat des bei der Extraktion von Hefen anfallenden Filterkuchen enthalten.From the above findings, the inventors succeeded the production of τοη new condiments, which are made from yeast extracts with the help of phosphodiesterase that with adenylic acid deaminase mixed eein, hydrolyzate obtained or its worked-up product and optionally a hydrolyzate of the Contain filter cakes from the extraction of yeast.

(Gegenstand der Erfindung 1st somit ein Verfahren zur Herstellung τοη Würzen, dl· entweder aus einem Hydrolysat Ton Hefeextrakten oder aus diesem Hydrolysat oder dessen aufgearbeitetem Produkt und einem Hydrolysat eines bei der Extraktion τοη Hefen erhaltenen Filterkuchen bestehen.(The subject of the invention is thus a process for the production of τοη condiments, dl · either from a hydrolyzate clay Yeast extracts or from this hydrolyzate or its processed product and a hydrolyzate one of the Extraction τοη yeast obtained filter cake consist.

Durch Hydrolyse Ton Hlbonucleinsäure können 2*-, 3'- und 5'-Nucleotide gebildet werden. Ton diesen Nucleotiden ist bisher S'-Inosinaäur* als brauchbar sur Hebung der Schmackhaftlgkeit bzw. der Würze τοη Nahrungs- und Genußmitteln bekannt. Es wurde nun gefunden, daß auch 5'-Guanylsäure eine der 5'-Inosinaäure ähnliche Wirkung hat, während die meisten anderen Nucleotide diese Wirkung nicht aufweisen. S'-Inosinsäure wurde jedoch nicht als Baustein τοη Nucleinsäure erkannt, sondern als Deaminierungsprodukt τοη 5'-Adenylsäure angesehen.By hydrolysis clay nucleic acid can 2 * -, 3'- and 5 'nucleotides are formed. Up to now, S'-inosinic acid has been found to be useful for enhancing the palatability and flavoring of foodstuffs and luxury foods known. It has now been found that 5'-guanylic acid is also a the 5'-inosine acid has similar effects, while most other nucleotides do not have this effect. S'-inosinic acid was not used as a building block τοη nucleic acid recognized, but as a deamination product τοη 5'-adenylic acid viewed.

Es ist bekannt, daß die Hydrolyse τοη Nucleineäure enthaltenden Hefeextrakten mit Säure oder anderen chemischen Mitteln nie zu 5'-Nucleotiden, sondern zu 2'- oder 3''-Nucleotiden fuhren kann, die nicht die gewünschte Wirkung haben. Es wurde jedoch gefunden, daß 5'-Nucleotide aus Nucleinsäure enthaltenden Hefeextrakten durch Hydrolyse mit einem durch Mikroorganismen erzeugten Enzymsystem hergestellt werden können. Me Mikroorganismen, die ein solches Eneymsystem zu erzeugen vermögen, gehören zu den Terschiedensten Gattungen, nämlich beispielsweise Streptomyoes grlseus, Streptomyoes flaTus, Streptomyoes aureus, Streptomyces lavendurae, Fusarium roseum, Helminthoeporium sigmoideum, Bacillus breTis, Bacillue subtilie, Anixiella retlculiepora, Asperglllus elegans, Aepergillus flavipes, Botryosphaeria rlbie chromo-It is known that the hydrolysis τοη nucleic acid-containing yeast extracts with acid or other chemical means never to 5 'nucleotides, but to 2' or 3 '' nucleotides that do not have the desired effect. It has been found, however, that 5 'nucleotides can be produced from yeast extracts containing nucleic acid by hydrolysis with an enzyme system generated by microorganisms. Me microorganisms that produce such an enzyme system ability belong to the most diverse genera, namely for example Streptomyoes grlseus, Streptomyoes flaTus, Streptomyoes aureus, Streptomyces lavendurae, Fusarium roseum, Helminthoeporium sigmoideum, Bacillus breTis, Bacillue subtilie, Anixiella retlculiepora, Asperglllus elegans, Aepergillus flavipes, Botryosphaeria rlbie chromo-

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gena, Chaetomidium japonicum, Glomerella cingulat, Neuropora crassa, Neuropona sitophila, 0phio2»lus miyabeanus, Ophiostoma ulmi, Sordaria fimicola und Tilachlidium humicola. Lilt anderen Worten, diese Mikroorganismen gehören eu den Klassen Ascomycetes, Fungi imperfeoti, Sohisomyeetes usw. In allen Enzymsystemen, die durch diese Mikroorganiemen erzeugt werden, ist Fhosphodiesterase enthalten, die Nucleinsäure zu 5'-Nucleotiden zu hydrolysieren Termag, und einige dieser Knzymsysterne enthalten Adenyleäuredeaminase, die fähig ist, 5'-Adenylsäure in 5f-Inosineäure umzuwandeln. Als Microorganismen, deren Ensymeyeteme Adenyleäuredeaminase enthalten, seien beispielsweise Streptomyoes aureue, Streptorayces griseus und Aspergillus-Mikroorganiemen genannt.gena, Chaetomidium japonicum, Glomerella cingulat, Neuropora crassa, Neuropona sitophila, 0phio2 »lus miyabeanus, Ophiostoma ulmi, Sordaria fimicola and Tilachlidium humicola. In other words, these microorganisms belong to the classes Ascomycetes, Fungi imperfeoti, Sohisomyeetes, etc. All enzyme systems produced by these microorganisms contain phosphodiesterase to hydrolyze nucleic acid to 5'-nucleotides, and some of these enzyme systems contain adenylic acid deaminase capable of converting 5'-adenylic acid into 5 f -inosine acid. Microorganisms whose enzymes contain adenylic acid deaminase are, for example, Streptomyoes aureue, Streptorayces griseus and Aspergillus microorganisms.

Als Ausgangsmaterial £ur Herstellung der WUrsen gemäß der Erfindung eignet sich jede Art von Hefen, wie Bierhefe, Backhefe, untergärige Hefe, obergärige Hefe, "Cines·"-Hefe, Weinhefe und Nährhefe.As starting material for the production of the currencies according to the Invention, any type of yeast is suitable, such as brewer's yeast, baker's yeast, bottom-fermenting yeast, top-fermenting yeast, "Cines" yeast, Wine yeast and nutritional yeast.

In der ersten Stufe werden diese Hefen extrahiert, wobei eine Nuclelneäure enthaltende Extraktflüesigkeit erhalten wird* Die Extraktion wird zweckmäßig mit einer Alkali«alBiosung vorgenommen, deren Pg-Wert bei 7,$ - 8,0 liegen kann, und deren Gehalt an Kocheais 0,5 - 5»0# betragen kann. Sie Extraktion wird im allgemeinen gefördert, wenn bis etwa zum Siedepunkt der Salzlösung erhitzt wird. Das 'Gemisch wird durch Filtration oder Zentrifugieren in eine Nucleinsäure enthaltende Flüssigkeit und proteinhaltige Feststoffe getrennt. Die erstere dient but Herstellung einer 5*-Nucleotide enthaltenden ffüree, während die letzteren in ein Aminosäuregemisch umgewandelt werden, das mit der Würze gemischt werden kann.In the first stage these yeasts are extracted, with one Extract liquid containing nucleic acid is obtained * The extraction is expediently carried out with an alkali solution made, the Pg value of which can range from $ 7.0 - 8.0, and the content of cooking ais can be 0.5-5 »0 #. she Extraction is generally promoted when heated to about the boiling point of the salt solution. The 'mixture will separated by filtration or centrifugation into a liquid containing nucleic acid and solids containing protein. The former is used to produce a 5 * nucleotide containing fefree, while the latter are converted into a mixture of amino acids that is mixed with the seasoning can be.

In der nächsten Stufe wird die Nucleinsäure enthaltende Flüssigkeit mit einem Ensymsystem hydrolysiert, das durch einen der vorstehend genannten Mikroorganismen erzeugt wurde. Das Enzymsystem kann für diesen Zweok in Form des lebenden Mikroorganismus oder als extrahierte Ensymlösung, Zellensuspension o.dgl. verwendet werden, kit anderen Worten, esThe next stage is containing the nucleic acid Liquid hydrolyzed with an Ensymsystem that by one of the above-mentioned microorganisms has been produced. The enzyme system can be used for this purpose in the form of the living Microorganism or as an extracted ensym solution, cell suspension or the like. used, in other words, kit it

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ist möglich, den Mikroorganismus auf einem Medium, das einen der genannten Hefeextrakte sowie andere Nährstoffquellen enthält, su bebrüten oder da« filtrat einer Kultur des Mikroorganismus mit dem Hefeextrakt zusammenzugehen oder eine Zelleneuepension des Mikroorganismus mit dem Hefeextrakt in Berührung zu bringen. In allen fällen kann die Bebrütung des Mikroorganismus 2-5 Tage bei etwa 20 - 30° durchgeführt werden·is possible to put the microorganism on a medium that has a of the yeast extracts mentioned as well as other nutrient sources contains, incubate or da «filtrate of a culture of the microorganism with the yeast extract or a Bringing cell renewal of the microorganism into contact with the yeast extract. In all cases, the incubation of the microorganism for 2-5 days at around 20-30 ° will·

Zuweilen ist das Eazymsyst'em mit Phosphomonoestersse verunreinigt, die fähig ist, 5'-Nucleotide zu Nucleoeiden au hydrolysieren, die frei von Geschmack sind* In diesem Fall ist ein Inhibitor für die Phosphomonoeeterase dem Reaktionssystem zuzugeben. Als Inhibitoren eignen sich beispielsweise Phosphate, Metallsalze (Salase τοη Nickel, Kobalt U8w,}( Arsenate und fluoride.Sometimes the Eazymsyst'em is contaminated with Phosphomonoestersse, which is able to hydrolyze 5'-nucleotides to nucleoids which are devoid of taste * In this case an inhibitor for the Phosphomonoesterase is to be added to the reaction system. Suitable inhibitors are, for example, phosphates, metal salts (Salase τοη nickel, cobalt U8w,} ( arsenates and fluoride.

Das Hydrolysat des Hefeextraktes besteht hauptsächlich aus verschiedenen 5'-Nucleotiden, Hierunter befinden eich 5*-Guanylsäure und 5f-Inosinsäure, die beide die Schmackhaftlgkelt bzw, die Wr*e von Nahrungs- und Genußmitteln su heben vermögen. In fällen, in denen das Hydrolysat keinen unangenehmen Geschmack oder Geruch aufweist oder toxische oder schädliche Komponenten enthält, kann es ohne jede Verarbeitung als Würze verwendet werden* Es kann auch verschiedenen Behandlungen, wie filtration, Einengung und Trocknung, unterworfen werden, um als flüssige, konzentriert« oder pulrerförmige Würze verwendet su werden*The hydrolyzate of yeast extract is mainly composed of various 5'-nucleotides Among these are calibrated 5 * -Guanylsäure and 5 f -Inosinsäure, both or the Schmackhaftlgkelt, fortune raise the Wr * e from food products below. In cases where the hydrolyzate does not have an unpleasant taste or smell or contains toxic or harmful components, it can be used as a condiment without any processing. concentrated or powdered wort can be used *

Zuweilen enthält das Hydrolysat jedoch gewiss· Proteine, anorganische Substanzen usw. oder Verunreinigungen, die einen unangenehmen Geschmack oder Geruch aufweisen, so daß das Hydrolysat nicht als solches zum Würzen verwendbar ist» In solchen fällen können die unerwünschten Stoffe mit Hilfe geeigneter Ionenaustauschharz· entfernt werden« Geeignet sind schwach saure Kationenaustauschharz·, z.B, Harz· von Carbonsäuren und Acrylsäuren (beispielsweise "Amberlite IKC-50", IE-89 usw«) und Phenolharze (β,B, "Buollt· 08-100") oder schwach alkalische ^ionenaustauschharz·, wie Polystyrol-Occasionally, however, the hydrolyzate certainly contains proteins, inorganic substances, etc., or impurities which have an unpleasant taste or smell, so that the Hydrolyzate cannot be used as such for seasoning »In such cases, the unwanted substances can be removed with the help suitable ion exchange resin · be removed «Suitable are weakly acidic cation exchange resin ·, e.g., resin · from Carboxylic acids and acrylic acids (for example "Amberlite IKC-50 ", IE-89 etc.«) and phenolic resins (β, B, "Buollt · 08-100") or weakly alkaline ion exchange resins, such as polystyrene

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und Polyaminharze (a.B. Amerlite IR-45) und Polyaminharze vom Phenol-Formaldehyd-Typ (z.B. Amberlite IR-4-B). ±>ie Behandlung des Hydrolysate mit dem Ionenaustauschharz wird durchgeführt, indem das Hydrolysat durch eine Säule oder Schicht des Harzee geführt oder mit dem Harz gemischt und dann filtriert wird. Da die Komponenten, die die SchmackhaftIgkeit oder Würze von Nahrungs- und Genußmitteln zu steigern vermögen, kaum am Harz adsorbiert werden, während die unerwünschten Verunreinigungen leicht adsorbiert werden, besteht die ablaufende Flüssigkeit bzw. das Filtrat aus 5'-Nucleotiden und 1st fast frei τοη Verunreinigungen, die sioh unangenehm auswirken= Die ablaufende Flüssigkeit bzw. das Filtrat kann also in dieser Form als flüssige Würze verwendet oder zur Herstellung τοη konzentrierter oder pulverförmiger Würze eingeengt oder getrocknet werden.and polyamine resins (a.B. Amerlite IR-45) and polyamine resins of the phenol-formaldehyde type (e.g. Amberlite IR-4-B). The treatment of the hydrolyzate with the ion exchange resin is carried out by passing the hydrolyzate through a column or layer des Harzee or mixed with the resin and then is filtered. As the components that increase the palatability or flavor of food and luxury foods can hardly be adsorbed on the resin, while the undesirable impurities are easily adsorbed the draining liquid or the filtrate of 5'-nucleotides and is almost free τοη impurities that have an unpleasant effect = the draining liquid or that Filtrate can therefore be used in this form as a liquid wort or for the production of τοη concentrated or powdered The wort can be concentrated or dried.

Zwar haben diese Würzen für sich allein die Fähigkeit, die Sohmackhaftigkeit oder das Aroma von Nahrungs- und Genußmitteln zu steigern, jedoch kann diese Fähigkeit Synergietisch verstärkt werden, Indem ein Hydrolysat des Filterkuchens, der bei der Extraktion der Hefe in der ersten Stufe erhalten wurde, zugegeben wird. Der Filterkuchen besteht hauptsächlich aus Proteinen und kann daher zu einem Gemisch von Aminosäuren hydrolysiert werden. Die Hydrolyse kann nach einem an sich bekannten Verfahren vorgenommen werden: Der Filterkuchen wird mit einer Mineralsäure gekocht oder mit Protease behandelt oder im Autoklaven erhitzt. Als Mineralsäure eignet sich Salzsäure, Schwefelsäure usw., während Jede von Mikroorganismen erzeugte oder von tierischen Geweben stammende Protease verwendbar ist. Das Hydrolysat kann als solch·· mit den duroh Hydrolyse der Hefeextrakte hergestellten Würzen vermischt werden. Es kann jedoch auch mit einem Ionenaustauschharz behandelt werden, um Verunreinigungen zu entfernen, die den Geschmack der Nahrungsmittel nachteilig beeinflussen* Die Behandlung kann In ähnlicher Weise wie beim Hydrolysat des Hefeeitraktes durchgeführt werden.Although these seasonings alone have the ability to increase the flavor or flavor of foodstuffs and luxury foods, this ability can be synergistic by adding a hydrolyzate of the filter cake obtained from the extraction of the yeast in the first stage. The filter cake consists mainly of proteins and can therefore become a mixture of Amino acids are hydrolyzed. The hydrolysis can be carried out by a method known per se: The Filter cake is boiled with a mineral acid or treated with protease or heated in an autoclave. As the mineral acid, hydrochloric acid, sulfuric acid, etc. are suitable, while Any protease produced by microorganisms or derived from animal tissues can be used. The hydrolyzate can be used as Such ·· are mixed with the seasonings produced by hydrolysis of the yeast extracts. However, it can also work with a Ion exchange resin treated to remove impurities that adversely affect the taste of the food affect * The treatment can be carried out in a similar way to the hydrolyzate of the yeast tract.

Das Hydrolysat de« Filterkuchen» wird dann eingeengt oder getrocknet, wobei ein heuptsäüJtilloh aus verschiedenen Amino-The hydrolyzate de «filter cake» is then concentrated or dried, with a main soup made of various amino

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säuren bestehendes Konzentrat bzw. eine Trockenmasse erhalten wird. Die die Aminosäuren enthaltende Masse kann mit den durch Hydrolyse der Hefeextrakte erhaltenenWürzen gemischt werden, wobei eine Würze erhalten wird, die in ausgezeichneter Weise die Schmackhaftigkeit bzw. das Aroma von Nahrunga- und Genußmitteln zu steigern vermag.acidic existing concentrate or a dry matter obtained will. The mass containing the amino acids can be mixed with the spices obtained by hydrolysis of the yeast extracts are obtained, a seasoning is obtained which is excellent in the palatability or the aroma of food and luxury foods is able to increase.

Die beiden Komponenten der Würze (Hydrolysat der Hefeextrakte und des Filterkuchen») können vor oder nach der Einengung oder Trocknung gemischt werden. Im allgemeinen wird vor dieser Behandlung gemischt, wobei leicht eine homogene Mischung erhalten wird.The two components of the wort (hydrolyzate of the yeast extracts and the filter cake ”) can be used before or after the concentration or drying. In general, mixing is carried out before this treatment, being slightly homogeneous Mixture is obtained.

Die gemäß der Erfindung erhaltenen Würzen dienen dem genannter Zweck sowohl in der Nahrungsmittelindustrie als auch beim Kochen im Haushalt. Sie sind auf die verschiedensten Nahrungsmittel anwendbar, z.B. Suppen, vergorene Nahrungs- und Genußmittel, Teigwaren, Wurst, Salate, in Eesig eingelegte Hahrungsmittel, Konserven, eingelegte Gemüse usw., und können während des Kochens oder während der Verarbeitung oder unmittelbar vor dem Verzehr zugegeben werden.The seasonings obtained according to the invention serve the stated purpose both in the food industry and in Cooking in the household. They are applicable to a wide variety of foods, e.g. soups, fermented foods and Luxury foods, pasta, sausage, salads, preserved foods, canned goods, pickled vegetables, etc., and can added during cooking or processing or just before consumption.

Beispiel 1example 1

10 kg getrocknete Bierhefe werden bei 90° 4 Stunden mit 150 1 einer 3#igen Salzlösung extrahiert, deren pH~Wert vorher mit Natriumhydroxyd auf 8,0 eingestellt worden war. Der Extrakt wird durch Zentrifugieren von den unlöslichen Stoffen abgetrennt*10 kg of dried brewer's yeast extract at 90 ° 4 hours at 150 1 of a 3 # saline solution whose H p ~ value had been adjusted with sodium hydroxide to 8.0. The extract is separated from the insoluble substances by centrifugation *

Ein Stamm von 3treptomyces griseus (Krainsky emend.Waksman et al.) Wakaman et al. (hinterlegt beim Institute for Fermentation, Osaka, Japan, unter der Nummer IFO-3430 und bei der AmericanType Culture Collection, Washington, unter der Hummer ATCC-10137) wird 24 Stunden bei 28° in einem wäßrigen Medium bebrütet, dessen pH-tfert 7»0 beträgt, und das aus 5,0$ löslicher Stärke, 3f0$ Mais-Extraktioneflüsslgkelt, 0,1$ Ammoniumsulfat, 0,05$ wäßrigem Magnesiumsulfat, Pepton und 0,2$ Calclumcarbonat besteht.A strain of 3treptomyces griseus (Krainsky emend.Waksman et al.) Wakaman et al. (deposited at the Institute for Fermentation, Osaka, Japan, under the accession number IFO-3430 and with the American Type Culture Collection, Washington, under the lobster ATCC 10137) 24 hours at 28 ° incubated in an aqueous medium, the p H -tfert 7 "is 0, and for $ 5.0 soluble starch, 3 f 0 $ corn Extraktioneflüsslgkelt, 0.1 $ ammonium sulfate, 0.05 $ aqueous magnesium sulfate, peptone and 0.2 $ Calclumcarbonat exists.

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Zu 150 1 des auf die beschriebene Weise erhaltenen Hefeextraktes werden 50 1 des Kulturfiltrats der genannten Kultur gegeben. Dann wird die Hydrolyse bei etwa 40° für 15 Stunden durchgeführt, wobei die Mischung stehen gelassen wird· Das Hydrolysat wird nach Zumischen von 500 g Dlatomenerdt filtriert und dann durch eine mit 10 1 Kationenaustauschharz gefüllte Säule geleitet, wobei 220 1 ablaufend· flüssigkeit aufgefangen werden. Diese wird neutralisiert und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wird durch Tereρruhen getrocknet, wobei 550 g pulrerförmlg· Würze erhalten werden, die 5'-Guanylsäure, 5'-InOsInSaUTe und andere 5'-.Nucleotide enthält.50 l of the culture filtrate of the culture mentioned are added to 150 l of the yeast extract obtained in the manner described given. Then hydrolysis is carried out at about 40 ° for 15 hours with the mixture being left to stand · The After adding 500 g of Dlatomenerdt hydrolyzate filtered and then through one with 10 1 cation exchange resin Filled column passed, with 220 1 draining liquid being collected. This is neutralized and then under concentrated under reduced pressure. The concentrate is dried by standing still, with 550 g pulrer form · wort are obtained, the 5'-guanylic acid, 5'-InOsInSaUTe and contains other 5 '-. nucleotides.

Als Kationenaustauschharz diente ein stark saures Polystyrol-Sulfonsäure-Harz in Perlfora ("Amberlite IS-120*).A strongly acidic polystyrene sulfonic acid resin in Perlfora ("Amberlite IS-120 *) was used as the cation exchange resin.

Beispiel 2Example 2

Die durch Zentrifugieren τοη Hefeextrakt gemäß Beispiel 1 erhaltenen unlöslichen Stoffe werden 20 Stunden mit 20 1 verdünnter Salzsäure (2Oj6ig) gekocht und dann gefiltert. Nach neutralisation mit verdünntem Natriumhydroxyd wird das Piltrat mit der aus dem Ionenaustauschharz gemäß Beispiel 1 ablaufenden Flüssigkeit gemischt. Die Mischung wird unter vermindertem Druck eingeengt. Durch Zerstäubungstrocknen werden aus dem Konzentrat 700 g pulverförmige Würze enthalten, die verschiedene. Aminosäuren sowie 5*-Nucleotide enthält.The yeast extract obtained by centrifugation according to Example 1 The insoluble substances obtained are boiled for 20 hours with 20 liters of dilute hydrochloric acid (20%) and then filtered. After neutralization with dilute sodium hydroxide, the piltrate is mixed with that from the ion exchange resin according to Example 1 draining liquid mixed. The mixture is concentrated under reduced pressure. By spray drying the concentrate will contain 700 g powdery seasoning, the various. Contains amino acids and 5 * nucleotides.

Beispiel 3Example 3

Anstelle des in Beispiel 1 genannten Mikroorganismus können die folgenden Mikroorganismen verwendet WerdensInstead of the microorganism mentioned in Example 1, the following microorganisms can be used

* Streptomyces albogriseolus Benedict, Shotwell et Frldham HRBL B-1305* Streptomyces albogriseolus Benedict, Shotwell et Frldham HRBL B-1305

* Streptomyoes aureus (Waksman et Curtis) Waksman et Henrici IPO-3303, ATOO-13404* Streptomyoes aureus (Waksman et Curtis) Waksman et Henrici IPO-3303, ATOO-13404

Streptomyoes viridochromogenes (Krainsky) Waksman et Henrici, Waksman1scher StammStreptomyoes viridochromogenes (Krainsky) Waksman et Henrici, Waksman 1 scher strain

* Streptomyces purpuresoens Linderheim ΙΓΟ-3389, NRHL-B-1454* Streptomyces purpuresoens Linderheim ΙΓΟ-3389, NRHL-B-1454

* Streptomyces coelicolor (Müller) Waksman et Henrici IPO-3807, ATCC-13405* Streptomyces coelicolor (Müller) Waksman et Henrici IPO-3807, ATCC-13405

909839/0533909839/0533

BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

* Helminth©sporium sigmoideum var. irreguläre Cralley et Tullis IfO-5273, ATCC-13406* Helminth © sporium sigmoideum var. Irregular Cralley et Tullis IfO-5273, ATCC-13406

* Bacillus brβvia Migula emend. Ford ATCC-8185* Bacillus brβvia Migula emend. Ford ATCC-8185

Bacillus eubtilia Cohn emend. Prazmowski, ΙΙΌ-3032, ATCC-13407Bacillus eubtilia Cohn emend. Prazmowski, ΙΙΌ-3032, ATCC-13407

Anixiella reticulispora Saito et Mlnoura, IPO-5483, ATCC-13828Anixiella reticulispora Saito et Mlnoura, IPO-5483, ATCC-13828

* Aspergillue elegans ßasperini, ΙΙΌ~4286, ATCC-13829* Aspergillue elegans ßasperini, ΙΙΌ ~ 4286, ATCC-13829

Aspergillue flavipes (Beinier et Sartory) Thorn et Church» ΙϊΌ-4052, AICC-13830Aspergillue flavipes (Beinier et Sartory) Thorn et Church » ΙϊΌ-4052, AICC-13830

Aspergillue fischeri Hehmer ΙΙΌ-5866, ATCC-13831 Aapergillus melleus Yukawa, IFO-4339, ATGG-13832 Aspergillue nidurane (Eidam) Winter, IF0-5713» ATCC-13833Aspergillue fischeri Hehmer ΙΙΌ-5866, ATCC-13831 Aapergillus melleus Yukawa, IFO-4339, ATGG-13832 Aspergillue nidurane (Eidam) Winter, IF0-5713 »ATCC-13833

* Botryosphaeria ribis ohromogera G. et D. IFO-4837» ATCC-13834* Botryosphaeria ribis ohromogera G. et D. IFO-4837 » ATCC-13834

* Chaetomldium japonioum Saito et Okazaki, IPO-4-451, ATCC-13835* Chaetomldium japonioum Saito et Okazaki, IPO-4-451, ATCC-13835

* (rlomerella cingulata (Stomem.) Spauld. et v.Schr., ΙΪΟ-59Ο7, ATCC-13836* (rlomerella cingulata (Stomem.) Spauld. et v.Schr., ΙΪΟ-59Ο7, ATCC-13836

* Heurospora crassa Shear et Dodge, IfO-6067, ATCC-13837 Keurospora sitophila Shear et Dodge, ΙΙΌ-6069, ATCG-13838* Heurospora crassa Shear et Dodge, IfO-6067, ATCC-13837 Keurospora sitophila Shear et Dodge, ΙΙΌ-6069, ATCG-13838

* OphioboluB mlyabeanua Ito et Kuribayashi, IPO-4870, ATCC-13839* OphioboluB mlyabeanua Ito et Kuribayashi, IPO-4870, ATCC-13839

* Ophiostoma ulai (Buisman) Hannf., I?0-6128, ATCC-13840* Ophiostoma ulai (Buisman) Hannf., I? 0-6128, ATCC-13840

* Sordaria fimioola (Eab.) Ceaari et de Notaris, IPO-4846, ATCC-13841* Sordaria fimioola (Eab.) Ceaari et de Notaris, IPO-4846, ATCC-13841

* Tilachlidlum humioola Oudemans, IFO-5696, ATCC-13842* Tilachlidlum humioola Oudemans, IFO-5696, ATCC-13842

In den obigenBeispielen bedeuten die Nummern hinter den Gattungsnamen der Mikroorganismen die Hinterlegungenummern des Stamme im Institute for Fermentation, Osaka, Japan (IfO), Northern Utilization Research Branch of U.S.Department of Agriculture, Peorla, 111., U.S.A. (NRHL) bzw.American Type Culture Collection, Washington, D.C., U.S.A. (ATCC).In the above examples, the numbers after the Generic names of the microorganisms the deposit numbers des strains in the Institute for Fermentation, Osaka, Japan (IfO), Northern Utilization Research Branch of U.S. Department of Agriculture, Peorla, 111., U.S.A. (NRHL) or American Type Culture Collection, Washington, D.C., U.S.A. (ATCC).

Die mit einem Stern (*) gekennzeichneten Mikroorganismen erzeugen mit der Phosphodiesterase gleichzeitig Fhosphomonoesterase. Bei Verwendung dieser Mikroorganismen wird daher "vorzugsweise ein Inhibitor für Phosphomonoesterase bei der Hydrolyse des Hefeeztraktes zugesetzt. Wenn Natriumarsenat als Inhibitor verwendet wird, kann seine Konzentration im Reaktionsgemisch etwa 6 χ 10~^ Hol/l betragen.The microorganisms marked with an asterisk (*) produce phosphomonoesterase at the same time as phosphodiesterase. When using these microorganisms will hence "preferably an inhibitor for phosphomonoesterase added during hydrolysis of the yeast extract. When sodium arsenate is used as an inhibitor, its concentration can decrease be about 6 χ 10 ~ ^ Hol / l in the reaction mixture.

909839/0533 BAOORlGiNM.909839/0533 BAOORlGiNM.

Claims (4)

Abschrift - 10 - PatentansprücheCopy - 10 - Claims 1.) Verfahren zur Herstellung von flüssigen oder pulverförmigen Würzstoffen, dadurch gekennzeichnet, daß man Hefe mit einem wässrigen Lösungsmittel extrahiert, den dabei erhaltenen Hefeextrakt mit einem Phosphodiesterase enthaltenden Enzymsystem eines Mikroorganismus hydrolisiert und aus dem Hydrolsat giftige Bestandteile und Verbindungen mit unerwünschtem oder schlechtem Geschmack entfernt.1.) Process for the production of liquid or powdery Seasonings, characterized in that yeast is extracted with an aqueous solvent, the the yeast extract obtained is hydrolyzed with a phosphodiesterase-containing enzyme system of a microorganism and from the hydrolyzate poisonous components and compounds with undesirable or bad taste removed. 2.) Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das fertige Produkt mit dem bei der Extraktion von Hefe mit vorzugsweise Protease oder Mineralsäuren erhaltenen Filterkuchen vermischt.2.) The method according to claim 1, characterized in that the finished product with the during the extraction mixed with filter cake obtained from yeast with preferably protease or mineral acids. 3.) Verfahren nach Ansprüchen 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Mikroorganismus zur Gattung Ascomycetes, Fungi Imperfecti oder Schizomycetes gehört.3.) Process according to Claims 1 and 2, characterized in that the microorganism belongs to the genus Ascomycetes, Belongs to Fungi Imperfecti or Schizomycetes. 4.) Verfahren nach Ansprüchen 1 bis 3, dadruch gekennzeichnet, daß die Entfernung der giftigen und unerwünschten Bestandteile durch ionenaustauschende Harze erfolgt. 4.) Process according to Claims 1 to 3, characterized in that the toxic and undesirable components are removed by means of ion-exchanging resins. f.d.R.d.A.:f.d.R.d.A .: BAD ORJGiNAL 909839/0533 BAD ORJGiNAL 909839/0533
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