DE1126399B - Process for the preparation of cytostatic derivatives of p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine - Google Patents

Process for the preparation of cytostatic derivatives of p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine

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DE1126399B
DE1126399B DEN19067A DEN0019067A DE1126399B DE 1126399 B DE1126399 B DE 1126399B DE N19067 A DEN19067 A DE N19067A DE N0019067 A DEN0019067 A DE N0019067A DE 1126399 B DE1126399 B DE 1126399B
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John Albert Stock
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Description

Verfahren zur Herstellung cytostatisch wirkender Derivate des p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalanins Die Erfindung betrifft Verfahren zur Herstellung von Chemotherapeutica mit Hemmwirkung gegenüber Tumorwachstum.Process for the preparation of cytostatic derivatives of p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine The invention relates to processes for the production of chemotherapeutic agents with an inhibitory effect versus tumor growth.

In der britischen Patentschrift 750 155 ist das p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalanin beschrieben. Die Verbindung hat die Formel Sie besitzt ein asymmetrisches Kohlenstoffatom und existiert daher in der D- als auch L-Form sowie als Racemat. Die L-Form dieser Verbindung ist unter Namen Melphalan bekannt und wirkt ausgeprägt cytostatisch.British patent 750 155 describes p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine. The compound has the formula It has an asymmetric carbon atom and therefore exists in the D and L form as well as a racemate. The L-form of this compound is known as melphalan and has a pronounced cytostatic effect.

Ziel der vorliegenden Erfindung ist die Herstellung von Derivaten dieser Verbindung, insbesondere der L-Isomeren mit einer cytostatischen Wirkung, die vergleichbar ist mit der Stammverbindung, die jedoch eine geringere Toxizität besitzen und infolgedessen ein günstigeres Verhältnis von Aktivität zu Giftigkeit aufweisen.The aim of the present invention is to produce derivatives this compound, especially the L-isomers with a cytostatic effect, which is comparable to the parent compound, but which has a lower toxicity possess and consequently a more favorable ratio of activity to toxicity exhibit.

Diese Derivate sind Diastereoisomere von Verbindungen der allgemeinen Formel worin R Wasserstoff oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und X eine Formyl- oder Acetylgruppe bedeutet und der Rest aus einer optisch aktiven a-Aminosäure mit nur einer Aminogruppe herrührt.These derivatives are diastereoisomers of compounds of the general formula wherein R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms and X is a formyl or acetyl group and the remainder originates from an optically active α-amino acid with only one amino group.

Die Verbindungen der obenstehenden allgemeinen Formel sind bisher in der Literatur nicht beschrieben, sie besitzen zwei asymmetrische Kohlenstoffatome, und sie können daher in diastereoisomeren Formen auftreten, d. h. als LL-, DD-, DL- und LD-Formen.The compounds of the general formula above are so far not described in the literature, they have two asymmetric carbon atoms, and they can therefore occur in diastereoisomeric forms, i.e. H. as LL-, DD-, DL and LD forms.

Bei den bevorzugten Verbindungen gemäß der Erfindung besitzt der p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalaninesterteil des Moleküls die L-Konfiguration, und die Aminosäure, mit der die Peptidbindung eingegangen ist, ist eine optisch aktive natürliche Aminosäure, z. B. L-Phenylalanin, oder ein substituiertes Derivat einer derartigen Aminosäure, z. B. p-Nitro-L-phenylalanin oder die entsprechenden Enantiomorphen.In the preferred compounds according to the invention the p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine ester part has of the molecule has the L configuration, and the amino acid that makes the peptide bond is received is an optically active natural amino acid, e.g. B. L-phenylalanine, or a substituted derivative of such an amino acid, e.g. B. p-nitro-L-phenylalanine or the corresponding enantiomorphs.

Die Verbindungen gemäß der Erfindung können nach jedem der bekannten Verfahren zur Herstellung von Dipeptiden gewonnen werden.The compounds according to the invention can be prepared according to any of the known Process for the production of dipeptides can be obtained.

Ein besonders geeignetes Verfahren besteht in der Umsetzung eines Derivates einer Aminosäure der allgemeinen Formel worin X die oben beschriebene Bedeutung besitzt, mit einem Ester der Chlorameisensäure, z. B. dem Äthyl-, n-Butyl- oder Isobutylester, in Gegenwart eines geeigneten Säurereakzeptors bzw. Säure bindenden Mittels, wie Triäthylamin. Anschließend wird das gebildete gemischte Anhydrid mit einem Phenylalaninderivat der allgemeinen Formel zur Reaktion gebracht, worin R die oben beschriebene Bedeutung besitzt. Soll R im Endprodukt ein Wasserstoffatom bedeuten, so wird die Carboxylgruppe des Phenylalaninderivats in ein Salz umgewandelt, z. B. ein Alkalisalz, bevor man die Verbindung mit dem gemischten Anhydrid zur Reaktion bringt. Anschließend wird durch Ansäuern die Säure wieder in Freiheit gesetzt. Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen können aus dem Reaktionsgemisch z. B. durch Lösungsmittelextraktion gewonnen werden.A particularly suitable method consists in converting a derivative of an amino acid of the general formula wherein X has the meaning described above with an ester of chloroformic acid, e.g. B. the ethyl, n-butyl or isobutyl ester, in the presence of a suitable acid acceptor or acid-binding agent, such as triethylamine. The mixed anhydride formed is then mixed with a phenylalanine derivative of the general formula brought to reaction, wherein R has the meaning described above. If R in the end product is to be a hydrogen atom, the carboxyl group of the phenylalanine derivative is converted into a salt, e.g. B. an alkali salt before reacting the compound with the mixed anhydride. The acid is then released again by acidification. The compounds prepared according to the invention can be prepared from the reaction mixture, for. B. obtained by solvent extraction.

In einer bevorzugten Durchführungsform der Erfindung wird Chlorameisensäureisobutylester zu einer Lösung von N-Acetyl-L-phenylalanin und Triäthylamin in Tetrahydrofuran gegeben. Die erhaltene Lösung wird mit p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino-L-phenylalaninäthylester versetzt. Zur Vervollständigung der Reaktion läßt man das Reaktionsgemisch einige Zeit stehen und isoliert den N-Acetyl-L-phenylalanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester durch Lösungsmittelextraktion. Dieses Verfahren ist in technischer Hinsicht vorteilhaft, doch wurde festgestellt, daß bei der Bildung des gemischten Anhydrids das asymmetrische Kohlenstoffatom des Ausgangsmaterials teilweise racemisiert, wodurch als Endprodukt ein Gemisch von zwei der möglichen Diastereoisomeren anfällt.In a preferred embodiment of the invention, isobutyl chloroformate is used to a solution of N-acetyl-L-phenylalanine and triethylamine in tetrahydrofuran given. The solution obtained is with p- [bis- (2-chloroethyl) -amino-L-phenylalanine ethyl ester offset. To complete the reaction, the reaction mixture is left for a few minutes Stand for time and isolate the N-acetyl-L-phenylalanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) amino] -L-phenylalanine ethyl ester by solvent extraction. This procedure is advantageous from a technical point of view, however, it has been found that when the mixed anhydride is formed, the asymmetric Carbon atom of the starting material partially racemized, resulting in the end product a mixture of two of the possible diastereoisomers is obtained.

Ein anderes Verfahren zur Herstellung der Verbind. ngen der Erfindung besteht in der Umsetzung des p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalaninesters mit einem Carbonsäureazid der allgemeinen Formel Dieses Verfahren ist als Curtius-Verfahren bekannt. Die Umsetzung wird im allgemeinen in der Kälte in einem mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel durchgeführt, wie Äthylacetat, Äther oder bestimmten Kohlenwasserstoffen. Bei diesem Verfahren erfolgt keine Veränderung der sterischen Konfiguration am Asymmetriezentrum.Another method of making the connection. The invention consists in the reaction of the p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine ester with a carboxylic acid azide of the general formula This process is known as the Curtius process. The reaction is generally carried out in the cold in a water-immiscible organic solvent, such as ethyl acetate, ether or certain hydrocarbons. In this process there is no change in the steric configuration at the center of asymmetry.

Beispiel 1 1,32 ml (10 mMol) Chlorameisensäureisobutylester werden tropfenweise unter Rühren zu einer eisgekühlten Lösung von 2,07 g (10 rnMol) N-Acetyl-L-phenylalanin und 1,40 ml (10 mMol) trockenem Triäthylamin in 20 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran gegeben. Das Reaktionsgemisch wird 15 Minuten bei 0°C stehengelassen und anschließend mit einer frisch hergestellten Lösung von 3,70 g (10 mMol) p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester, Hydrochlorid und 1,4 ml Triäthylamin in 20 ml Chloroform versetzt. Die Lösung wird über Nacht bei Zimmertemperatur stehengelassen. Hierauf wird das Gemisch unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, der Rückstand mit Äthylacetat extrahiert und die Äthylacetatlösung nacheinander mit 0,1 n-Salzsäure (eine Emulsion wird durch Abzentrifugieren gebrochen), Natriumbicarbonatlösung und Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen mit Magnesiumsulfat wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand nach Lösen in kaltem Methanol durch vorsichtige Zugabe von Wasser zur Kristallisation gebracht. Man erhält 3,6 g (70 °/o der Theorie) an N-Acetylphenylalanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester vom Fp. 156 bis 158°C in Form farbloser Stäbchen; [,x]' = -I-10° (111/0 in Äthanol) oder +31° (2°/o in Chloroform). C26H33C12N304: Berechnet ... C59,8, H6,4, Cl 13,6, N8,011/0; gefunden ... C60,2, H6,4, C113,9, N8,30/0. Das Produkt ist ein Isomerengemisch, und es enthält einen größeren Anteil des äußerst aktiven N-Acetyl-L-phenylalanylisomers und in geringerer Menge das D-Isomer.EXAMPLE 1 1.32 ml (10 mmol) of isobutyl chloroformate are added dropwise with stirring to an ice-cooled solution of 2.07 g (10 mmoles) of N-acetyl-L-phenylalanine and 1.40 ml (10 mmol) of dry triethylamine in 20 ml of anhydrous Given tetrahydrofuran. The reaction mixture is left to stand for 15 minutes at 0 ° C. and then with a freshly prepared solution of 3.70 g (10 mmol) of p- [bis- (2-chloroethyl) amino] -L-phenylalanine ethyl ester, hydrochloride and 1.4 ml Triethylamine is added in 20 ml of chloroform. The solution is left to stand overnight at room temperature. The mixture is then evaporated to dryness under reduced pressure, the residue is extracted with ethyl acetate and the ethyl acetate solution is washed successively with 0.1N hydrochloric acid (an emulsion is broken by centrifugation), sodium bicarbonate solution and water. After drying with magnesium sulfate, the solvent is distilled off under reduced pressure and, after dissolving in cold methanol, the residue is brought to crystallization by carefully adding water. 3.6 g (70% of theory) of N-acetylphenylalanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester with a melting point of 156 ° to 158 ° C. are obtained in the form of colorless rods; [, x] '= -I -10 ° (111/0 in ethanol) or + 31 ° (2 ° / o in chloroform). C26H33C12N304: Calculated ... C59.8, H6.4, Cl 13.6, N8.011 / 0; Found ... C60.2, H6.4, C113.9, N8.30 / 0. The product is a mixture of isomers and contains a major proportion of the highly active N-acetyl-L-phenylalanyl isomer and a minor proportion of the D-isomer.

Biologische Tests dieser Verbindung ergaben, daß die zur vollständigen Hemmung des Wachstums von Walker-Tumoren in Ratten benötigte Minimaldosis 12,5 mg/kg und die LDso bei Ratten etwa 300 mg/kg beträgt. Diese Werte liegen sehr günstig im Vergleich zu anderen tumorwachstumshemmenden Verbindungen.Biological tests on this compound indicated that it was complete Inhibition of the growth of Walker's tumors in rats required a minimum dose of 12.5 mg / kg and the LD50 in rats is about 300 mg / kg. These values are very favorable compared to other tumor growth inhibiting compounds.

Beispiel 2 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-D-phenylalanin anstatt des L-Isomers wiederholt. Der erhaltene N-Acetylphenylalanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 170 bis 172°C; [cx] D = -I-28,3° (2,3 °/(, in Chloroform). Ce6H33 C12 N3 04: Berechnet ... C59,8, 1 16,4, Cl 13,6, N8,0'/0; gefunden ... C59,8, H6,5, Cl 13,7, N8,00/0. Ebenso wie im Beispiel 1 ist das Reaktionsprodukt ein Gemisch von zwei Diastereoisomeren. Die Walker-Tumoren in Ratten wurden bei einer Dosis von 25 mg/kg mäßig im Wachstum gehemmt, und die LD5o beträgt für Ratten etwa 700 mg/kg.Example 2 Example 1 was repeated using N-acetyl-D-phenylalanine in place of the L-isomer. The N-acetylphenylalanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 170 to 172 ° C .; [cx] D = -I-28.3 ° (2.3 ° / (, in chloroform). Ce 6 H33 C12 N3 04: Calculated ... C59.8, 1-16.4, Cl 13.6, N8.0 '/ 0; Found ... C59.8, H6.5, Cl 13.7, N8.00 / 0. As in Example 1, the reaction product is a mixture of two diastereoisomers. The Walker tumors in rats were moderately inhibited in growth at a dose of 25 mg / kg and the LD50 for rats is about 700 mg / kg.

Beispiel 3 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetylp-nitro-L-phenylalanin anstatt N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Acetyl-p-nitrophenylalanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 167 bis 170°C; [x]'[)' = -f-39° (20/0 in Chloroform). C2sH32C12N406: Berechnet ... C 55,0, H 5,7, Cl 12,5, N 9,9 °/o; gefunden ... C 55,3, H 5,8, Cl 12,5, N 10,0 °/o. Wie im Beispiel 1 ist das Produkt ein Gemisch von zwei Diastereoisomeren. Das Wachstum von Walker-Tumoren in Ratten wurde bei einer Dosis von 250 mg/kg vollständig gehemmt; die LD" beträgt bei Ratten etwa 500 mg/kg. Beispiel 4 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetylp-nitro-D-phenylalanin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Acetyl-pnitrophenylalanyl - p - [bis - (2 - chloräthyl) - amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 125 bis 127°C; [x] -D" _ -,'42° (20/0 in Chloroform). C26 H32 CI N4 0,: /p; Berechnet ... C 55,0, H 5,7, Cl 12,5, N 9,91 gefunden ... C 55,3, H 5,7, Cl 12,2, N 9,7°/o. Ebenso wie im Beispiel 1 ist das Produkt ein Gemisch von zwei Diastereoisomeren. Das Wachstum der Walker-Tumoren in Ratten wurde bei einer Dosis von 100 mg/kg vollständig gehemmt; die LD50 beträgt bei Ratten etwa 700 mg/kg.Example 3 Example 1 was repeated using N-acetyl-p-nitro-L-phenylalanine instead of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetyl-p-nitrophenylalanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 167 to 170 ° C .; [x] '[)' = -f-39 ° (20/0 in chloroform). C2sH32C12N40 6 : Calculated ... C 55.0, H 5.7, Cl 12.5, N 9.9%; Found ... C 55.3, H 5.8, Cl 12.5, N 10.0%. As in Example 1, the product is a mixture of two diastereoisomers. The growth of Walker's tumors in rats was completely inhibited at a dose of 250 mg / kg; the LD "is about 500 mg / kg in rats. Example 4 Example 1 was repeated using N-acetyl-p-nitro-D-phenylalanine instead of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetyl-pnitrophenylalanyl - p - [bis - (2 - chloroethyl) - amino] -L-phenylalanine ethyl ester melts at 125 to 127 ° C; [x] -D "_ -, '42 ° (20/0 in chloroform). C26 H32 CI N4 0 ,: / p; Calculated ... C 55.0, H 5.7, Cl 12.5, N 9.91 Found ... C 55.3, H 5.7, Cl 12.2, N 9.7%. As in Example 1, the product is a mixture of two diastereoisomers. The growth of Walker's tumors in rats was completely inhibited at a dose of 100 mg / kg; the LD50 in rats is about 700 mg / kg.

Beispiel 5 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-L-leucin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Acetylleucyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 130 bis 132°C; [,x]" = +39,1' (2,5 0/0 in Chloroform). C23 H 35 C12 N3 04 Berechnet ... C 56,6, H 7,2, CI 14,5, N 8,60/0; gefunden ... C 56,7, H 6,8, Cl 14,7, N 8,2°/o. Ebenso wie im Beispiel 2 ist das Produkt ein Gemisch von zwei Diastereoisomeren. Das Wachstum der Walker-Tumoren in Ratten wurde bei einer Dosis von 12,5 mg/kg vollständig gehemmt; die LD50 für Ratten beträgt etwa 75 mg/kg.Example 5 Example 1 was repeated using N-acetyl-L-leucine in place of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetylleucyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 130 to 132 ° C .; [, x] "= +39.1 '(2.5% in chloroform). C23 H 35 C12 N3 04 Calculated ... C 56.6, H 7.2, CI 14.5, N 8.60 / 0; Found ... C 56.7, H 6.8, Cl 14.7, N 8.2 ° / o. As in Example 2, the product is a mixture of two diastereoisomers. The growth of Walker's tumors in rats was completely inhibited at a dose of 12.5 mg / kg; the LD50 for rats is about 75 mg / kg.

Beispiel 6 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-D-leucin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Acetylleucyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 132 bis 133°C; [x]o' = r42,5° (20/0 in Chloroform). C23 H35 C12 N3 04 Berechnet ... C 56,6, H 7,2, Cl 14,5, N 8,6 0/0; gefunden ... C 56,8, H 6,9, Cl 14,8, N 8,80/0. Wie im Beispiel 1 ist das Produkt ein Gemisch von zwei Diastereoisomeren. Das Wachstum von Walker-Tumoren in Ratten wurde bei einer Dosis von 5 mg/kg vollständig gehemmt; LD50 = 80 mg/kg bei Ratten. Beispiel 7 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Formyl-L-phenylalanin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Formylphenylalanylp-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 154 bis 156'C; [,x] ö = r-29,1 ° (2,3 0/0 in Chloroform). C25 H31 C12 N3 04 Berechnet .. . C 59,l, H 6, 1, Cl 14,0, N 8,30/0; gefunden ... C 59,2, H 6,3, Cl 13,7, N 8,00/0. Wie im Beispiel 1 ist das Produkt ein Gemisch von zwei Diastereomeren. Das Wachstum von Walker-Tumoren in Ratten wurde bei einer Dosis von 12,5mg/kg vollständig gehemmt; LD50 = 200 mg/kg bei Ratten. Beispiel 8 1,06g (5,7 mMol) N-Acetyl-L-leucinhydrazid in 10 ml Eisessig gelöst werden mit 25 ml Wasser versetzt. Die Lösung wird im Eisbad abgekühlt, dann mit 2 ml konzentrierter Salzsäure (d = 1,16) und hierauf mit einer Lösung von 0,44 g (6,4 mMol) Natriumnitrit in 1 ml Wasser versetzt. Die erhaltene Lösung wird mit eiskaltem Äthylacetat extrahiert, die organische, das Azid enthaltende Phase mit eiskalter gesättigter Natriumbicarbonatlösung und anschließend mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und abfiltriert.Example 6 Example 1 was repeated using N-acetyl-D-leucine in place of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetylleucyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 132 to 133 ° C; [x] o '= r 42.5 ° (20/0 in chloroform). C23 H35 C12 N3 04 Calculated ... C 56.6, H 7.2, Cl 14.5, N 8.6 0/0; Found ... C 56.8, H 6.9, Cl 14.8, N 8.80 / 0. As in Example 1, the product is a mixture of two diastereoisomers. The growth of Walker's tumors in rats was completely inhibited at a dose of 5 mg / kg; LD50 = 80 mg / kg in rats. Example 7 Example 1 was repeated using N-formyl-L-phenylalanine in place of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-formylphenylalanylp- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 154 to 156 ° C .; [, x] δ = r-29.1 ° (2.3% in chloroform). C25 H31 C12 N3 04 Calculated .. . C 59.1, H 6, 1, Cl 14.0, N 8.30 / 0; Found ... C 59.2, H 6.3, Cl 13.7, N 8.00 / 0. As in Example 1, the product is a mixture of two diastereomers. The growth of Walker's tumors in rats was completely inhibited at a dose of 12.5 mg / kg; LD50 = 200 mg / kg in rats. Example 8 1.06 g (5.7 mmol) of N-acetyl-L-leucine hydrazide dissolved in 10 ml of glacial acetic acid are mixed with 25 ml of water. The solution is cooled in an ice bath, then 2 ml of concentrated hydrochloric acid (d = 1.16) and then a solution of 0.44 g (6.4 mmol) of sodium nitrite in 1 ml of water are added. The solution obtained is extracted with ice-cold ethyl acetate, the organic phase containing the azide is washed with ice-cold saturated sodium bicarbonate solution and then with water, dried over magnesium sulfate and filtered off.

In der Zwischenzeit werden 0,8 ml (5,7 mMol) Triäthylamin zu einer Lösung von 2,1 g (5,7 mMol) p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylesterhydrochlorid in 15 ml kaltem Äthyacetat unter Rühren gegeben. Diese Lösung wird hierauf zur vorher bereiteten Azidlösung zugegeben und das Gemisch über Nacht stehengelassen. Anschließend wird die Lösung mit 0,1 n-Salzsäure, Natriumbicarbonatlösung mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft; der Rückstand wird in kaltem Äthanol aufgenommen und durch vorsichtige Zugabe von Wasser zur Kristallisation gebracht. Der N-Acetyl-L-leucylp-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 134 bis 135°C; [x]" = -r-25,7° (2,5°/o in Chloroform); Ausbeute 1,5 g (53°/o der Theorie). Beispiel 9 Beispiel 8 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-L-phenylalaninhydrazid an Stelle von N-Acetyl-L-leucinhydrazid wiederholt. Der erhaltene N-Acetyl-L-phenylalanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 150 bis 152°C [x] r-38,9° (2,2°/o in Chloroform).In the meantime, 0.8 ml (5.7 mmol) of triethylamine are added to a solution of 2.1 g (5.7 mmol) of p- [bis- (2-chloroethyl) amino] -L-phenylalanine ethyl ester hydrochloride in 15 ml of cold Ethyacetate added with stirring. This solution is then added to the previously prepared azide solution and the mixture is left to stand overnight. The solution is then washed with 0.1N hydrochloric acid, sodium bicarbonate solution with water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure; the residue is taken up in cold ethanol and crystallized by carefully adding water. The N-acetyl-L-leucylp- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester melts at 134 to 135 ° C; [x] ″ = -r-25.7 ° (2.5% in chloroform); Yield 1.5 g (53% of theory). Example 9 Example 8 was carried out using N-acetyl-L The N-acetyl-L-phenylalanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester melts at 150 to 152 ° C. [x ] r -38.9 ° (2.2% in chloroform).

Beispiel 10 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-L-valin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der erhaltene N-Acetyl-L-valyl-0-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 181 bis 186°C; [x]ö5 = +31° (2,2°/o in Chloroform). Beispiel 11 Beispiel 1 wurde unter Verwendung von N-Acetyl-L-alanin an Stelle von N-Acetyl-L-phenylalanin wiederholt. Der N-Acetyl-L-alanyl-p-[bis-(2-chloräthyl)-amino]-L-phenylalaninäthylester schmilzt bei 95 bis 100°C; [x]'DS = +45,4° (1,9°/o in Chloroform).Example 10 Example 1 was repeated using N-acetyl-L-valine in place of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetyl-L-valyl-0- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester obtained melts at 181 to 186 ° C .; [x] δ5 = + 31 ° (2.2% in chloroform). Example 11 Example 1 was repeated using N-acetyl-L-alanine in place of N-acetyl-L-phenylalanine. The N-acetyl-L-alanyl-p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -L-phenylalanine ethyl ester melts at 95 to 100 ° C; [x] 'DS = + 45.4 ° (1.9% in chloroform).

Claims (5)

PATENTANSPRÜCHE: 1. Verfahren zur Herstellung cytostatisch wirkender Derivate des p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalanins der allgemeinen Formel 1 worin R Wasserstoff oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und X eine Formyl- oder Acetylgruppe bedeutet und der Rest Il sich von einer optisch aktiven a-Aminosäure mit nur einer Aminogruppe im Molekül ableitet, da-durch gekennzeichnet, daß man einen Aminosäureester der allgemeinen Formel III worin R die oben angegebene Bedeutung besitzt, mit einer N-Formyl- oder N-Acetylaminosäure der allgemeinen Formel IV worin X und Y die oben angegebene Bedeutung besitzen, oder einem funktionellen Derivat dieser Carbonsäure in an sich bekannter Weise unter Bildung eines Dipeptids (I) kondensiert. PATENT CLAIMS: 1. Process for the preparation of cytostatic derivatives of p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine of the general formula 1 where R is hydrogen or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms and X is a formyl or acetyl group and the remainder II is derived from an optically active a-amino acid having only one amino group in the molecule, data carried in that a Aminosäureester of the general formula III wherein R has the meaning given above, with an N-formyl- or N-acetylamino acid of the general formula IV in which X and Y have the meaning given above, or a functional derivative of this carboxylic acid is condensed in a manner known per se to form a dipeptide (I). 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als funktionelles Derivat der Carbonsäure ein gemischtes Anhydrid verwendet, daß sich von der Verbindung der allgemeinen Formel IV und einem niederen Alkylester der Chlorameisensäure ableitet. 2. The method according to claim 1, characterized in that one is as functional Derivative of the carboxylic acid used a mixed anhydride that is different from the compound of the general formula IV and a lower alkyl ester of chloroformic acid. 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man als Alkylester der Chlorameisensäure Chlorameisensäureisobutylester verwendet. 3. The method according to claim 2, characterized in that the alkyl ester Chloroformic acid isobutyl chloroformate is used. 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als funktionelles Derivat der Carbonsäure ein Carbonsäureazid verwendet. 4. The method according to claim 1, characterized in that a functional derivative of the carboxylic acid is used Carboxylic acid azide is used. 5. Verfahren nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als p-[Bis-(2-chloräthyl)-amino]-phenylalaninester das L-Isomere verwendet.5. The method according to claim 1 to 4, characterized in that that the L-isomer is used as the p- [bis- (2-chloroethyl) -amino] -phenylalanine ester.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0304341A2 (en) * 1987-08-21 1989-02-22 THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce Ramified alkyl esters of 4-bis(chloroethyl)aminophenyl-alkyl carboxylic acids
EP0304341A3 (en) * 1987-08-21 1989-11-23 Us Health Ramified alkyl esters of 4-bis(chloroethyl)aminophenyl-alkyl carboxylic acids

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