DE102016115919A1 - A method of providing a tissue sample from living tissue, fluid jet cutting apparatus and their use - Google Patents
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Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe, indem durch Flüssigkeitsstrahlschneiden mittels eines dünnen Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls von einer lebenden Gewebemenge die Gewebeprobe als im Wesentlichen planparallele Scheibe abgeschnitten wird, wobei die Zellen der Gewebeprobe vital erhalten werden und durch das Abschneiden der Gewebeprobe von der lebenden Gewebemenge im Wesentlichen nicht beeinträchtigt werden. Die Erfindung betrifft außerdem eine Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung sowie eine Verwendung einer derartigen Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe.The invention relates to a method for providing a tissue sample from living tissue by cutting the tissue sample as a substantially plane-parallel slice by liquid jet cutting by means of a thin high-pressure liquid jet from a living tissue, the cells of the tissue sample being obtained vitally and by cutting the tissue sample are substantially unaffected by the amount of living tissue. The invention also relates to a liquid jet cutting apparatus and to a use of such a liquid jet cutting apparatus for providing a tissue sample from living tissue.
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe gemäß Anspruch 1. Die Erfindung betrifft außerdem eine Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung gemäß Anspruch 6 sowie eine Verwendung einer derartigen Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe.The invention relates to a method of providing a tissue sample of living tissue according to
Die Analyse lebender menschlicher Gewebeverbände kann als Modellsystem für Erkrankungen dienen und kann entsprechende neue Erkenntnisse erbringen und zum Testen klinisch-pharmakologischer Interventionen beitragen. Eine Reihe neuerer Entwicklungen macht es möglich, vitale dreidimensionale komplexe lebende Gewebe in bisher nicht möglicher Weise zu untersuchen, z.B. durch Mehrphotonen- und spektrale Konfokalmikroskopie, Licht-Blatt Mikroskopie sowie durch dreidimensionale Rekonstruktionen in Mehrfarbendarstellungen an lebenden Geweben über die Zeit. Für solche Analysen besteht ein Bedarf daran, aus heterogenen Gewebestücken lebenden Gewebes möglichst atraumatisch und steril geeignete Gewebeproben bereitzustellen. Existierende Schneidverfahren haben Nachteile, wie z.B. die Bildung von Quetschartefakten, thermischen Artefakten und sonstigen Schädigungen am Gewebe oder sehr lange Schneidzeiten.The analysis of living human tissue associations can serve as a model system for diseases and can provide corresponding new insights and contribute to the testing of clinical-pharmacological interventions. A number of recent developments make it possible to study vital three-dimensional complex living tissues in ways not yet possible, e.g. by multi-photon and spectral confocal microscopy, light-sheet microscopy, and three-dimensional reconstructions in multicolor representations on living tissues over time. For such analyzes, there is a need to provide tissue samples that are as heterogeneous as possible from living tissues that are as atraumatic and sterile as possible. Existing cutting methods have disadvantages such as e.g. the formation of pinch artifacts, thermal artifacts and other tissue damage or very long cutting times.
Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, verbesserte Möglichkeiten zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe anzugeben.The invention is therefore based on the object of providing improved possibilities for providing a tissue sample from living tissue.
Diese Aufgabe wird gemäß Anspruch 1 gelöst durch ein Verfahren zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe, indem durch Flüssigkeitsstrahlschneiden mittels eines dünnen Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls von einer lebenden Gewebemenge die Gewebeprobe als im Wesentlichen planparallele Scheibe abgeschnitten wird, wobei die Zellen der Gewebeprobe vital erhalten werden und durch das Abschneiden der Gewebeprobe von der lebenden Gewebemenge im Wesentlichen nicht beeinträchtigt werden. Die Erfindung hat den Vorteil, dass auf einfache, zuverlässige und schnelle Weise die gewünschten Gewebeproben als im Wesentlichen planparallele Scheiben bereitgestellt werden können. Durch die Erfindung gelingt es, die Gewebeproben im Wesentlichen atraumatisch und steril bereitzustellen, sodass insbesondere auch Infektionen darin vermieden werden können. Die auf diese Weise bereitgestellten Gewebeproben eignen sich in besonderer Weise für weitere Analysen z.B. der eingangs genannten Art. Als im Wesentlichen planparallel gilt in diesem Zusammenhang eine Dickentoleranz von +/–30% bezüglich der mittleren Dicke der bereitgestellten Gewebeprobe.This object is achieved according to
Ein weiterer Vorteil ist, dass der Flüssigkeitsstrahl das Gewebe beim Schneidvorgang kühlt, sodass auch hierdurch eine thermische Schädigung des Gewebes beim Schneidvorgang vermieden werden kann. Zudem wird der Schneideprozess ohne direkten Werkzeugkontakt durchgeführt, was die Einhaltung der Sterilität erleichtert.Another advantage is that the liquid jet cools the tissue during the cutting process, so that a thermal damage to the tissue during the cutting operation can be avoided as well. In addition, the cutting process is performed without direct tool contact, which facilitates compliance with sterility.
Der Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl, der als Schneidstrahl zum Abschneiden der Gewebeprobe dient, kann insbesondere als steriler Flüssigkeitsstrahl ausgebildet sein. Dementsprechend kann als Schneidflüssigkeit für die Erzeugung des Flüssigkeitsstrahls beispielsweise Wasser verwendet werden, z.B. destilliertes Wasser. Es können auch andere sterile Flüssigkeiten genutzt werden, z.B. Kochsalzlösung (z.B. 0,9%ige Kochsalzlösung), alkoholische Flüssigkeiten oder Kokosmilch. The high-pressure liquid jet, which serves as a cutting jet for cutting off the tissue sample, can be designed in particular as a sterile liquid jet. Accordingly, as the cutting liquid for the generation of the liquid jet, for example, water may be used, e.g. distilled water. Other sterile liquids may also be used, e.g. Saline (e.g., 0.9% saline), alcoholic fluids or coconut milk.
Der Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl kann dabei aus reiner Flüssigkeit bestehen, d.h. der Schneidflüssigkeit, oder eine Mischung aus der Schneidflüssigkeit und einem Abrasivmittel sein. Als Abrasivmittel können insbesondere sterile Materialien hinzugefügt werden. Ferner muss das Abrasivmittel biokompatibel sein. Es eignen sich z.B. Abrasivmittel wie Zucker, Salz, Magnesium- oder Eisenspäne. Durch Hinzufügen des Abrasivmittels können auch härtere Gewebemengen effizient geschnitten werden.The high-pressure liquid jet can consist of pure liquid, i. the cutting fluid, or a mixture of the cutting fluid and an abrasive. In particular, sterile materials can be added as abrasives. Furthermore, the abrasive must be biocompatible. It is suitable e.g. Abrasives such as sugar, salt, magnesium or iron filings. By adding the abrasive, even harder amounts of tissue can be efficiently cut.
Mittels der Erfindung ist es insbesondere möglich, die Gewebeprobe als im Wesentlichen planparallele Scheibe mit einer sehr geringen Dicke bereitzustellen, z.B. 400 μm oder weniger, oder 200 μm oder weniger. Solche relativ dünnen Gewebeproben eignen sich in besonderer Weise für die Gewebeperfusion und damit eine Kultur und zur Einpassung in entsprechende mikroskopierbare, mikrofluidische Untersuchungskammern, z.B. zur Grundlagenforschung oder zur pharmakologischen und/oder toxikologischen Substanztestung. Ferner eignen sich solche Gewebeproben in besonderem Maße für eine Kryokonservierung.In particular, it is possible by means of the invention to provide the tissue sample as a substantially plane-parallel disc with a very small thickness, e.g. 400 μm or less, or 200 μm or less. Such relatively thin tissue samples are particularly suitable for tissue perfusion and thus culture and for fitting into corresponding microscopic microfluidic examination chambers, e.g. for basic research or for pharmacological and / or toxicological substance testing. Furthermore, such tissue samples are particularly suitable for cryopreservation.
Dementsprechend ist es vorteilhaft, wenn der Flüssigkeitsstrahl mit geringem Durchmesser bereitgestellt wird, z.B. maximal 0,25 mm. Grundsätzlich ist es vorteilhaft, den Flüssigkeitsstrahl möglichst dünn auszubilden, z.B. im Bereich von 0,04 mm.Accordingly, it is advantageous if the liquid jet is provided with a small diameter, e.g. maximum 0.25 mm. Basically, it is advantageous to make the liquid jet as thin as possible, e.g. in the range of 0.04 mm.
Der Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl wird in einer vorteilhaften Ausgestaltung der Erfindung in einem Druckbereich von 600 bar bis 3300 bar bereitgestellt, insbesondere 700 bar bis 3000 bar. Hervorragende Ergebnisse werden mit einem Druck im Bereich von 700 bar bis 1100 bar erzielt.The high-pressure liquid jet is provided in an advantageous embodiment of the invention in a pressure range of 600 bar to 3300 bar, in particular 700 bar to 3000 bar. Excellent results are achieved with pressures ranging from 700 bar to 1100 bar.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die lebende Gewebemenge während des Flüssigkeitsstrahlschneidvorgangs auf einer auswechselbaren Auflagefläche gelagert wird, wobei die Auflagefläche während des Abschneidens der Gewebeprobe durch den Flüssigkeitsstrahl wenigstens zum Teil mit durchschnitten wird. Auf diese Weise können unerwünschte Schwingungen an der Gewebemenge oder der bereits abgetrennten Gewebeprobe, die aufgrund des Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls oder dem Flüssigkeitsstrahl nachströmender Luft auftreten können, zuverlässig vermieden werden. Die Auflagefläche wird dementsprechend nach einem Schneidvorgang ausgetauscht. Dies trägt auch zur Durchführung eines sterilen Schneidvorgangs bei, indem für einen neuen Schneidvorgang eine neue sterile Auflagefläche eingesetzt wird. Die Auflagefläche kann z.B. als Zellulose-Nitrat-Scheibe ausgebildet sein, z.B. mit einer Dicke von ca. 1 mm.According to an advantageous embodiment of the invention, it is provided that the living amount of tissue during the Liquid jet cutting operation is stored on a replaceable support surface, wherein the support surface is at least partially cut through during the cutting of the tissue sample by the liquid jet. In this way, unwanted vibrations on the amount of tissue or the already separated tissue sample, which may occur due to the high pressure liquid jet or the liquid jet of air flowing, can be reliably avoided. The support surface is replaced accordingly after a cutting operation. This also helps to perform a sterile cutting operation by using a new sterile bearing surface for a new cutting operation. The support surface may be formed, for example, as a cellulose nitrate disc, for example with a thickness of about 1 mm.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung wird die lebende Gewebemenge zumindest während des Flüssigkeitsstrahlschneidens in einer Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung fixiert. Hierdurch kann eine präzise Schnittführung des Flüssigkeitsstrahls durch die Gewebemenge sichergestellt werden. Auf diese Weise können Gewebeproben mit hoher Planparallelität bereitgestellt werden.According to an advantageous embodiment of the invention, the living amount of tissue is fixed at least during the liquid jet cutting in a liquid jet cutting device. In this way, a precise cut of the liquid jet can be ensured by the amount of tissue. In this way, tissue samples with high plane parallelism can be provided.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die lebende Gewebemenge an der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung oder einem daran fixierten Bauteil mittels Unterdruck und/oder durch Festkleben fixiert wird. Auf diese Weise kann die lebende Gewebemenge besonders schonend an der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung fixiert werden. Es können mechanische oder sonstige Schädigungen der Gewebemenge vermieden werden. Wird die Gewebemenge direkt an der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung mittels Unterdruck fixiert, so ist es vorteilhaft, als Anlagefläche für die Gewebemenge dort ein luftdurchlässiges Anlagebauteil vorzusehen. Das Anlagebauteil kann insbesondere eine offenporige, schwammartige Struktur aufweisen. Geeignet sind hierfür z.B. Silikatschäume, z.B. aus gepresstem Silikat. Beispielsweise können in der Chemie verwendete Filtergläser eingesetzt werden. Die offenporige schwammartige Struktur kann dabei eine Porengröße von z.B. 10 μm bis 100 μm aufweisen.According to an advantageous embodiment of the invention, it is provided that the living amount of tissue is fixed to the liquid jet cutting device or a component fixed thereto by means of negative pressure and / or by sticking. In this way, the living amount of tissue can be particularly gently fixed to the liquid jet cutting device. It can be mechanical or other damage to the amount of tissue can be avoided. If the amount of tissue is fixed directly to the liquid jet cutting device by means of negative pressure, it is advantageous to provide there as an abutment surface for the amount of tissue there an air-permeable investment component. The investment component may in particular have an open-pore, sponge-like structure. Suitable for this purpose are e.g. Silicate foams, e.g. made of pressed silicate. For example, filter glasses used in chemistry can be used. The open-pored sponge-like structure may have a pore size of e.g. 10 μm to 100 μm.
Wird die lebende Gewebemenge an einem an der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung fixierten Bauteil fixiert, d.h. an einem Bauteil, das nicht Teil der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung ist, so kann die nach dem Schneidvorgang von der Gewebemenge abgetrennte Gewebeprobe an diesem Bauteil verbeiben und dieses Bauteil zugleich als Trägerbauteil für weitere Analysen dienen. So kann das Bauteil z.B. als Objektträger für Analysen ausgebildet sein. Die Gewebemenge kann an diesem Bauteil z.B. durch Festkleben fixiert sein, insbesondere durch sterilen Klebstoff. Das Bauteil kann an der Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung wiederum beispielsweise mittels Unterdruck fixiert sein.When the living amount of tissue is fixed to a member fixed to the liquid jet cutting apparatus, i. On a component which is not part of the liquid jet cutting device, the tissue sample separated from the tissue amount after the cutting process can remain on this component and at the same time serve as a carrier component for further analyzes. Thus, the component may e.g. be designed as a slide for analysis. The amount of tissue may be attached to this component e.g. be fixed by sticking, in particular by sterile adhesive. The component can in turn be fixed to the liquid jet cutting device, for example by means of negative pressure.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass der Unterdruck zum Fixieren der lebenden Gewebemenge variierbar ist, insbesondere während des Flüssigkeitsstrahlschneidvorgangs variierbar ist. Dies hat den Vorteil, dass über eine Druckregelung der erzeugte Unterdruck den jeweiligen Erfordernissen des Schneidvorgangs angepasst werden kann. So kann z.B. bei weicherem Gewebematerial der Unterdruck reduziert werden, um Schädigungen des Gewebes zu vermeiden, während bei härterem Gewebematerial, z.B. Knorpel oder Knochen, ein höherer Unterdruck eingestellt werden kann. Dementsprechend kann der Unterdruck während des Flüssigkeitsstrahlschneidvorgangs variiert werden.According to an advantageous development of the invention, it is provided that the negative pressure for fixing the living amount of tissue can be varied, in particular can be varied during the liquid jet cutting process. This has the advantage that the negative pressure generated can be adapted to the respective requirements of the cutting process via a pressure control. Thus, e.g. with softer fabric material, the negative pressure may be reduced to avoid damage to the fabric, while with harder fabric material, e.g. Cartilage or bone, a higher negative pressure can be adjusted. Accordingly, the negative pressure can be varied during the liquid jet cutting operation.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die aus der Schnittstelle zwischen lebender Gewebemenge und Gewebeprobe austretende Schneidflüssigkeit des Flüssigkeitsstrahls aufgefangen und mehrstufig über wenigstens zwei unterschiedliche Energiedissipationsmittel abgeleitet wird. Auf diese Weise kann das erfindungsgemäße Verfahren in praktisch jeder Umgebung durchgeführt werden, da die Umgebung durch Austreten der Schneidflüssigkeit nicht verunreinigt wird. Zudem wird die Restenergie des Flüssigkeitsstrahls in definierter Weise abgebaut. Die Energiedissipationsmittel können z.B. ein erstes Energiedissipationsmittel aufweisen, auf das der Flüssigkeitsstrahl zunächst trifft und das als schräg zur Stahlrichtung des Flüssigkeitsstrahls angestelltes Ablenkteil ausgebildet sein kann. Ein dem ersten Energiedissipationsmittel folgendes zweites Energiedissipationsmittel kann in Form von kugelförmigen Hartmaterialpartikeln, z.B. Hartkeramik- oder Hartmetall-Kugeln, ausgebildet sein, die in einer Auffangkammer für die Schneidflüssigkeit in Strahlrichtung des Flüssigkeitsstrahls hinter dem ersten Energiedissipationsmittel angeordnet ist.According to an advantageous development of the invention, it is provided that the cutting fluid emerging from the interface between the living tissue quantity and the tissue sample is collected by the fluid jet and derived in multiple stages via at least two different energy dissipation agents. In this way, the inventive method can be performed in virtually any environment, since the environment is not contaminated by leakage of the cutting fluid. In addition, the residual energy of the liquid jet is degraded in a defined manner. The energy dissipation agents may e.g. have a first Energiedissipationsmittel, which initially meets the liquid jet and which may be formed as obliquely to the steel direction of the liquid jet employed baffle. A second energy dissipation agent following the first energy dissipation agent may be in the form of spherical hard material particles, e.g. Hard ceramic or carbide balls, be formed, which is arranged in a collecting chamber for the cutting fluid in the beam direction of the liquid jet behind the first Energiedissipationsmittel.
So kann durch das erste Energiedissipationsmittel zudem vermieden werden, dass der austretende Flüssigkeitsstrahl in die Umgebung reflektiert wird oder in der Umgebung Gischt oder Wassernebel entstehen. Das zweite Energiedissipationsmittel erlaubt durch die Kugelform der Hartmaterialpartikel eine Ablenkung des Strahls über die Kugeloberflächen. Es erfolgt ein Energieverlust durch eine Defokussierung des Strahls. Auf diese Weise wird die im austretenden Flüssigkeitsstrahl noch vorhandene Restenergie zunächst in Bewegungsenergie der Kugeln umgesetzt, zudem in Reibung zwischen den Kugeln, und demzufolge in Wärme.In this way, the first energy-dissipating agent can also be used to prevent the emerging liquid jet from being reflected into the environment or to produce spray or water mist in the surroundings. The second energy dissipation agent allows by the spherical shape of the hard material particles, a deflection of the beam over the spherical surfaces. There is an energy loss due to a defocusing of the beam. In this way, the residual energy still present in the exiting liquid jet is first converted into kinetic energy of the balls, moreover in friction between the balls, and consequently in heat.
Die eingangs genannte Aufgabe wird ferner gelöst durch eine Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung, die wenigstens folgendes aufweist:
- a) eine Schneiddüse zum Abgeben eines dünnen Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls,
- b) ein Druckerzeugungsmittel zur Erzeugung des Schneiddrucks einer Schneidflüssigkeit des Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls,
- c) eine Zuführungsvorrichtung zur Zuführung der Schneidflüssigkeit zum Druckerzeugungsmittel,
- d) eine Aufnahmevorrichtung für eine lebende Gewebemenge mit Fixierungsmitteln zur Fixierung der lebenden Gewebemenge an der Aufnahmevorrichtung,
- e) eine Vorschubeinrichtung zur Erzeugung einer Relativbewegung zwischen der lebenden Gewebemenge und dem Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl, wobei die Vorschubeinrichtung zur Erzeugung einer eindimensionalen reproduzierbaren Relativbewegung eingerichtet ist, um durch die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung im Wesentlichen planparallele, scheibenförmige Gewebeproben von der lebenden Gewebemenge abzuschneiden.
- a) a cutting nozzle for dispensing a thin high-pressure liquid jet,
- b) pressure generating means for generating the cutting pressure of a cutting fluid of the high pressure fluid jet,
- c) a supply device for supplying the cutting fluid to the pressure generating means,
- d) a living tissue receiving device having fixing means for fixing the living tissue amount to the receiving device,
- e) a feed device for generating a relative movement between the living tissue amount and the high-pressure liquid jet, wherein the feed device is adapted to produce a one-dimensional reproducible relative movement to cut through the liquid jet cutting device substantially plane-parallel disc-shaped tissue samples from the living tissue amount.
Auch hierdurch können die zuvor erläuterten Vorteile realisiert werden. Vorteilhafterweise ist die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung eingerichtet zur Bereitstellung einer Gewebeprobe, bei der die Zellen der Gewebeprobe vital erhalten werden und durch das Abschneiden der Gewebeprobe von der lebenden Gewebemenge im Wesentlichen nicht beeinträchtigt werden.This also makes it possible to realize the advantages explained above. Advantageously, the liquid jet cutting apparatus is arranged to provide a tissue sample in which the cells of the tissue sample are maintained vital and are substantially unaffected by the tissue sample being cut off from the living tissue.
Die Vorschubeinrichtung kann zur Erzeugung eines automatischen Vorschubs ausgebildet sein, z.B. durch einen vorgespannten Federmechanismus oder durch einen Motorantrieb, z.B. einen Elektroantrieb. Die Vorschubeinrichtung kann auch zur Erzeugung eines manuellen Vorschubs eingerichtet sein. Mittels der Vorschubeinrichtung kann eine eindimensionale reproduzierbare Relativbewegung zwischen der Gewebemenge und dem Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl erzeugt werden. Die Relativbewegung kann als Linearbewegung ausgebildet sein. Es kann z.B. auch eine nichtlineare, bogenförmige Bewegung erfolgen, z.B. eine kreisförmige Bewegung. Auch hierdurch können im Ergebnis wieder planparallele scheibenförmige Gewebeproben bereitgestellt werden.The feed device may be designed to generate an automatic feed, e.g. by a biassed spring mechanism or by a motor drive, e.g. an electric drive. The feed device can also be set up to generate a manual feed. By means of the feed device, a one-dimensional reproducible relative movement between the amount of tissue and the high-pressure liquid jet can be generated. The relative movement can be designed as a linear movement. It can e.g. also a non-linear arcuate motion, e.g. a circular movement. As a result, plane-parallel disc-shaped tissue samples can also be provided as a result.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung zur Abgabe eines sterilen Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls eingerichtet ist. Auf diese Weise wird vermieden, dass die Gewebeprobe durch den Flüssigkeitsstrahl kontaminiert oder infiziert wird.According to an advantageous development of the invention, it is provided that the liquid jet cutting device is set up for delivering a sterile high-pressure liquid jet. In this way it is avoided that the tissue sample is contaminated or infected by the liquid jet.
Es ist ferner vorteilhaft, die wesentlichen Bauteile der die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung, die mit der Gewebemenge und der Gewebeprobe in Kontakt kommen, als sterilisierbare Bauteile auszubilden und vor der Durchführung eines Schneidvorgangs entsprechend zu sterilisieren. So kann z.B. das Druckerzeugungsmittel zur Erzeugung des Schneiddrucks, z.B. eine Pumpe, als sterilisierbares Druckerzeugungsmittel ausgebildet sein. Die Sterilisation vor der Durchführung eines Schneidvorgangs kann z.B. dadurch erfolgen, dass über die Zuführvorrichtung zur Zuführung der Schneidflüssigkeit zunächst eine Desinfektionsflüssigkeit eingespeist wird und anschließend auf die eigentliche Schneidflüssigkeit umgestellt wird. Die Desinfektionsflüssigkeit kann dabei durch das Druckerzeugungsmittel über die Schneiddüse abgegeben werden, sodass auch gleich die Schneiddüse sterilisiert wird.It is also advantageous to form the essential components of the liquid jet cutting device, which come into contact with the amount of tissue and the tissue sample, as sterilizable components and to sterilize accordingly before performing a cutting operation. Thus, e.g. the pressure generating means for generating the cutting pressure, e.g. a pump, be designed as a sterilizable pressure generating means. Sterilization before performing a cutting operation may be e.g. take place in that on the supply device for supplying the cutting fluid, first a disinfecting liquid is fed and then switched to the actual cutting fluid. The disinfecting liquid can be dispensed through the pressure generating means via the cutting nozzle, so that even the cutting nozzle is sterilized.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung als Fixierungsmittel wenigstens eine Unterdruckfixiereinrichtung aufweist, die zum Unterdruck-fixieren der lebenden Gewebemenge an der Aufnahmevorrichtung eingerichtet ist. Die Unterdruckfixiereinrichtung kann eine Unterdruckpumpe aufweisen. Zur Einstellung eines variierbaren Unterdrucks kann die Unterdruckpumpe über eine Steuereinrichtung steuerbar sein. Die Unterdruckfixierung erlaubt eine schonende Fixierung der Gewebemenge an der Aufnahmevorrichtung.According to an advantageous embodiment of the invention, it is provided that the liquid jet cutting device has at least one vacuum fixing device as fixing means, which is set up for vacuum-fixing the living amount of tissue to the receiving device. The vacuum fixing device may include a vacuum pump. To set a variable negative pressure, the vacuum pump can be controlled via a control device. The vacuum fixation allows a gentle fixation of the amount of tissue on the receiving device.
Die lebende Gewebemenge kann insbesondere eine Aufnahmevorrichtung zur Aufnahme der lebenden Gewebemenge aufweisen, an der diese fixiert wird. Wird die Gewebeprobe von der Gewebemenge abgeschnitten, so wird in einer vorteilhaften Ausgestaltung der Erfindung der Hochdruck-Flüssigkeitsstrahl in einem Abstand von der Aufnahmevorrichtung vorbeigeführt wird, der im Wesentlichen der gewünschten Dicke der Gewebeprobe entspricht. Die abgeschnittene Gewebeprobe wird nach Durchführung des Schneidvorgangs zunächst weiterhin an der Aufnahmevorrichtung gehalten.The living amount of tissue may in particular have a receiving device for receiving the amount of living tissue to which it is fixed. If the tissue sample is cut off from the amount of tissue, then in an advantageous embodiment of the invention the high-pressure liquid jet is guided past the receiving device at a distance which substantially corresponds to the desired thickness of the tissue sample. The cut tissue sample is first held on the receiving device after performing the cutting operation.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die Unterdruckfixiereinrichtung wenigstens eine offenporige, schwammartige Struktur mit einer Ansaugfläche zum Ansaugen der lebenden Gewebemenge an die offenporige, schwammartige Struktur aufweist. Hierfür kann z.B. der eingangs genannte Silikatschaum verwendet werden. According to an advantageous development of the invention, it is provided that the vacuum fixing device has at least one open-pored, sponge-like structure with a suction surface for sucking the living amount of tissue against the open-pored, sponge-like structure. For this purpose, e.g. The silicate foam mentioned above can be used.
Gemäß einer vorteilhaften Weiterbildung der Erfindung ist vorgesehen, dass die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung eine Auffangvorrichtung zum Auffangen der aus der Schnittstelle zwischen lebender Gewebemenge und Gewebeprobe austretenden Schneidflüssigkeit aufweist. Auf diese Weise wird vermieden, dass die austretende Schneidflüssigkeit in die Umgebung gelangt. Die Auffangvorrichtung kann insbesondere die zuvor bereits erläuterten wenigstens zwei unterschiedlichen Energiedissipationsmittel aufweisen.According to an advantageous embodiment of the invention, it is provided that the liquid jet cutting device has a collecting device for collecting the emerging from the interface between living tissue and tissue sample cutting fluid. In this way it is avoided that the exiting cutting fluid enters the environment. The collecting device may in particular have the previously explained at least two different Energiedissipationsmittel.
Die eingangs genannte Aufgabe wird ferner gelöst durch die Verwendung einer Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung der zuvor erläuterten Art zur Bereitstellung einer Gewebeprobe aus lebendem Gewebe, indem durch die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung mittels eines dünnen Hochdruck-Flüssigkeitsstrahls von einer lebenden Gewebemenge die Gewebeprobe als im wesentlichen planparallele Scheibe abgeschnitten wird, wobei die Zellen der Gewebeprobe vital erhalten werden und durch das Abschneiden der Gewebeprobe von der lebenden Gewebemenge im Wesentlichen nicht beeinträchtigt werden. Auch hierdurch können die zuvor erläuterten Vorteile realisiert werden.The above-mentioned object is further achieved by the use of a liquid jet cutting device of the type described above for providing a tissue sample from living tissue by the tissue sample is cut as a substantially plane-parallel disc by the liquid jet cutting device by means of a thin high-pressure liquid jet of a living tissue amount, said Cells of the tissue sample can be maintained vital and are not affected by the cutting of the tissue sample of the living tissue amount substantially. This also makes it possible to realize the advantages explained above.
Die Schneiddüse kann z.B. einen Durchlassquerschnitt von maximal 0,25 mm aufweisen. Die Schneiddüse kann z.B. als Diamantdüse oder Saphirdüse ausgebildet sein.The cutting nozzle may e.g. have a passage cross-section of not more than 0.25 mm. The cutting nozzle may e.g. be designed as a diamond nozzle or sapphire nozzle.
Die Erfindung erlaubt somit das planparallele Abschneiden von Scheiben von einer lebenden Gewebemenge, z.B. unterschiedlich fester, inhomogener Gewebe, wie z.B. Lunge, Leber, Niere, Darm, Muskelgewebe, Tumorgewebe, bis hin zu Knochen-Weichgewebeübergängen. Diese Gewebe enthalten unterschiedliche Anteile und Festigkeiten von Bindegewebe, bilden oder enthalten kleine oder große Hohlräume und sind von Leitungsbahnen durchzogen, z.B. Atemwege, Blutgefäße. Neben einem variabel harten Reinflüssigkeitsstrahl ist die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung auch eingerichtet zum Schneiden mittels Abrasivmitteln, die der Schneidflüssigkeit beigegeben werden. Um mit Abrasiven zu schneiden, weist die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung wenigstens eine Mischkammer auf, in der die Schneidflüssigkeit mit dem Abrasivmittel gemischt wird und dann zur Schneiddüse weitertransportiert wird.The invention thus permits plane-parallel cutting of slices from a living tissue amount, e.g. different solid, inhomogeneous tissues, e.g. Lung, liver, kidney, intestine, muscle tissue, tumor tissue, to bone soft tissue transitions. These tissues contain varying proportions and strengths of connective tissue, form or contain small or large voids, and are crossed by conduction paths, e.g. Respiratory system, blood vessels. In addition to a variably hard pure liquid jet, the liquid jet cutting device is also set up for cutting by means of abrasives, which are added to the cutting fluid. In order to cut with abrasives, the liquid jet cutting device has at least one mixing chamber in which the cutting fluid is mixed with the abrasive and then further transported to the cutting nozzle.
Die Erfindung wird nachfolgend anhand von Ausführungsbeispielen unter Verwendung von Zeichnungen näher erläutert.The invention will be explained in more detail by means of embodiments using drawings.
Es zeigenShow it
In den Figuren werden gleiche Bezugszeichen für einander entsprechende Elemente verwendet.In the figures, like reference numerals are used for corresponding elements.
Die in
Die Schneiddüse
Zum Fixieren einer Gewebeprobe an der Aufnahmevorrichtung
Ferner ist eine Vorschubeinrichtung
Zur Steuerung der beschriebenen Komponenten weist die Flüssigkeitsstrahlschneidvorrichtung ferner eine Steuereinrichtung
Wie in den
Da ein einfaches Auflegen der Gewebemenge
Unterhalb der Auflage
Der Behälter
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