DE102012219576B4 - Device, arrangement and method for transmitting energy for lysis - Google Patents
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Abstract
Einheit (10), die ausgestaltet ist, Energie zum Lysieren zu übertragen, wobei die Einheit (10) eine Kontaktfläche (101) aufweist, über welche Kontakt zu einem Lyse-Behälter mit einer zu lysierenden Probe erstellt wird, wobei die Kontaktfläche (101) eine Öffnung (102) in die Kontaktfläche (101) aufweist und wobei die Einheit (10) ausgestaltet ist, den Lyse-Behälter über die Öffnung (102) an die Kontaktfläche (101) anzusaugen.Unit (10) designed to transmit energy for lysing, wherein the unit (10) has a contact surface (101) via which contact is made with a lysis container with a sample to be lysed, wherein the contact surface (101) has an opening (102) in the contact surface (101) and wherein the unit (10) is designed to suck the lysis container to the contact surface (101) via the opening (102).
Description
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine Einheit, die ausgestaltet ist, Energie zum Lysieren zu übertragen, auf eine Vorrichtung, die ausgestaltet ist, Energie zum Lysieren zu übertragen, und auf ein Verfahren zum Lysieren einer zu lysierenden Probe.The present invention relates to a unit designed to transmit energy for lysing, to a device designed to transmit energy for lysing, and to a method for lysing a sample to be lysed.
Stand der TechnikState of the art
Das Lysieren als ein Verfahren zum Auflösen von Zellmembranen und somit zum Bewirken des Zerfalls von Zellen ist allgemein bekannt. Zum Lysieren können verschiedene Verfahren eingesetzt werden, darunter auch das Lysieren mittels Ultraschalls, welches ebenfalls allgemein bekannt ist. Durch Anwenden des Ultraschalls auf eine (Proben-) Flüssigkeit mit den aufzulösenden Zellen werden die Zellen durch Scherkräfte, die auf die Zellmembranen und/oder Zellwände wirken, zerstört. Üblicher Weise wird eine Energie- (z.B. Ultraschall-) - übertragende Einheit in die zu lysierende Probe eingetaucht und die Probe wird der übertragenen Energie ausgesetzt (z.B. mit Ultraschall beschallt). Das Einkoppeln der Energie in die zu lysierende Probe durch die energieübertragende Einheit führt zum Erzeugen der Kavitation oder Scherkräfte in der Probe. Die erzeugten Scherkräfte und/oder die erzeugte Kavitation bewirken das Zerstören oder den Zerfall der Zellen, die sich in der Probe befinden. Dieses Zerstören oder dieser Zerfall von Zellen wird als Lysieren bezeichnet.Lysing as a method for dissolving cell membranes and thus causing cells to disintegrate is well known. Various methods can be used for lysing, including lysing by means of ultrasound, which is also well known. By applying ultrasound to a (sample) liquid containing the cells to be dissolved, the cells are destroyed by shear forces acting on the cell membranes and/or cell walls. Typically, an energy (e.g. ultrasound) transmitting unit is immersed in the sample to be lysed and the sample is exposed to the transmitted energy (e.g. ultrasound). The coupling of the energy into the sample to be lysed by the energy transmitting unit leads to the generation of cavitation or shear forces in the sample. The shear forces and/or cavitation generated cause the destruction or disintegration of the cells in the sample. This destruction or disintegration of cells is called lysing.
Im Nachfolgenden wird beispielhaft das Lysieren mittels Ultraschalls behandelt, wobei die vorliegende Anmeldung nicht zwingend auf das Anwenden von Ultraschall als Energie beschränkt ist.Lysis by means of ultrasound is discussed below as an example, although the present application is not necessarily limited to the use of ultrasound as energy.
Bei den bisher bekannten Anwendungen von Ultraschall im Behälter wird in der Regel der Behälter mit einem elastischen Element (z.B. mit einer Feder) an eine Energie übertragende Einheit (z.B. an eine Sonotrode) gedrückt. Damit ein optimaler Kontakt zwischen der Energie übertragenden Einheit wie beispielsweise einer Sonotrode und dem Behälter, in dem sich die zu lysierende Probe (mit den aufzulösenden Zellen) befindet, entsteht, muss die Wand des Behälters eine Gegenkraft gegen die Energie übertragende Einheit wie z.B. eine Sonotrode aufbauen.In the previously known applications of ultrasound in containers, the container is usually pressed against an energy-transmitting unit (e.g. a sonotrode) using an elastic element (e.g. a spring). In order to achieve optimal contact between the energy-transmitting unit, such as a sonotrode, and the container containing the sample to be lysed (with the cells to be dissolved), the wall of the container must build up a counterforce against the energy-transmitting unit, such as a sonotrode.
Bei flachen Behältern können bei einem derartigen Aufbau schwer reproduzierbare Ergebnisse auftreten, da sich flache Behälterwände bei Andruck einer Energie übertragenden Einheit (z.B. einer Sonotrode) so durchbiegen, dass der Kontakt zwischen der Energie übertragenden Einheit und der Behälterwand abreißt. Das Abreißen des Kontakts kann beispielsweise im mittleren Bereich oder zur Mitte hin orientierten Bereich der jeweiligen Kontaktfläche der Energie übertragenden Einheit zu der Behälterwand entstehen. Je höher der Anpressdruck gewählt wird, desto schlechter kann der Kontakt zwischen der Energie übertragenden Einheit und der Behälterwand werden. Die beim Anwenden des Anpressdrucks entstehenden Kontaktflächen, die z.B. ringförmig sein können, können beim Anwenden der Energie (z.B. bei der Ultraschallbeaufschlagung) leicht überhitzen und die Ankopplung zwischen der Energie übertragenden Einheit bzw. der Kontaktfläche der Energie übertragenden Einheit kann unreproduzierbar werden. Je dünner die Wand des Behälters mit der zu lysierenden Probe ist, desto stärker kann dieses Phänomen auftreten.With flat containers, results that are difficult to reproduce can occur with such a structure, since flat container walls bend when an energy-transmitting unit (e.g. a sonotrode) is pressed against them, causing the contact between the energy-transmitting unit and the container wall to break. The contact can break, for example, in the middle area or the area oriented towards the middle of the respective contact surface between the energy-transmitting unit and the container wall. The higher the contact pressure is selected, the worse the contact between the energy-transmitting unit and the container wall can become. The contact surfaces created when the contact pressure is applied, which can be ring-shaped, for example, can easily overheat when the energy is applied (e.g. when using ultrasound), and the coupling between the energy-transmitting unit and the contact surface of the energy-transmitting unit can become unreproducible. The thinner the wall of the container with the sample to be lysed, the more pronounced this phenomenon can be.
Somit besteht nach wie vor Bedarf nach verbesserten Verfahren, Vorrichtungen und Einheiten, die zum Lysieren ausgestaltet sind oder das Lysieren zumindest unterstützen.Thus, there is still a need for improved methods, devices and units that are designed for lysing or at least support lysing.
Offenbarung der ErfindungDisclosure of the invention
Die vorliegende Erfindung wird im Wesentlichen durch Merkmale der unabhängigen Ansprüche angegeben. Weitere Ausgestaltungen der vorliegenden Erfindung, können beispielhaft den abhängigen Ansprüchen entnommen werden.The present invention is essentially specified by features of the independent claims. Further embodiments of the present invention can be taken by way of example from the dependent claims.
Die Idee der vorliegenden Erfindung besteht darin, eine Energie übertragende Einheit zum Lysieren einer Probe mit einer Öffnung in der Fläche der Energie übertragenden Einheit zu versehen, die mit dem Behälter, der die Probe enthält, bzw. mit der Wand des Behälters zwecks Energieübertragung (z.B. Ultraschallübertragung) konaktiert wird, und die Öffnung derart auszugestalten, dass über diese Öffnung der Behälter bzw. die Wand des Behälters an die Kontaktfläche der Energie übertragenden Einheit angesaugt wird.The idea of the present invention is to provide an energy-transmitting unit for lysing a sample with an opening in the surface of the energy-transmitting unit, which is contacted with the container containing the sample or with the wall of the container for the purpose of energy transmission (e.g. ultrasound transmission), and to design the opening in such a way that the container or the wall of the container is sucked onto the contact surface of the energy-transmitting unit via this opening.
Durch die vorliegende Erfindung wie in den Ansprüchen definiert und wie in der nachfolgenden Beschreibung und den dazugehörigen Figuren erläutert tritt das oben beschriebene Ankopplungsproblem nicht mehr auf. Insbesondere erlaubt die vorliegende Erfindung ein reproduzierbares Lysieren bzw. ein Erzielen von reproduzierbaren Lyse-Ergebnissen. Ferner wird ein sicherer und vollständiger Kontaktaufbau zwischen der Energie übertragenden Einheit und dem Behälter mit der zu lysierenden Probe gewährleistet. Darüber hinaus wird der Kontaktaufbau auf eine einfache Weise (d.h. ohne einen weiteren größeren Aufwand an Resourcen und/oder Schritten) ermöglicht. Ferner wird durch die vorliegende Erfindung ermöglicht, dass der Kontaktaufbau ohne das Kontaktieren der dem Lysieren zu unterziehenden Probe durch die Energie übertragende Einheit erfolgt, was ein von Verunreinigungen bzw. Kontaminationen freies Lysieren ermöglicht. Darüber hinaus erlaubt die vorliegende Erfindung das Verwenden von verschieden ausgestalteten Lyse-Behältern, insbesondere von flachen Behältern. Die Behälter können als Wand, an welcher der Kontakt zu der Energie übertragenden Einheit hergestellt wird, Membranen aufweisen. Beim Verwenden des Ultraschalls als Energie zum Beispiel wird eine sehr gute Einkopplungsreproduzierbarkeit ermöglicht und es wird sichergestellt, dass Kavitationsblasen, die zum Lysieren notwendig sind, im Lyse-Behälter entstehen. Ferner können auch sehr dünne Membranen als die Wand des Behälters, welche durch die Energie erzeugende Einheit kontaktiert wird, verwendet werden. Die Membranen können beispielsweise eine Dicke von 20 µm bis 1 mm aufweisen. Wenn flache Membranen verwendet werden, lassen sich die flachen Membranen vollflächig über die kontaktierte Oberfläche der Energie übertragenden Einheit kühlen und die flachen Membranen sind haltbarer als nur punktuell oder ringförmig anliegende Membranen. Gegenüber den Verfahren zum enzymatischen oder chemischen Lysieren ermöglicht die vorliegende Erfindung ein deutliches Vereinfachen und Verkürzen von Assays (z.B. von mehreren Stunden zu wenigen Sekunden) sowie das Einsparen von Reagentien.With the present invention, as defined in the claims and as explained in the following description and the associated figures, the coupling problem described above no longer occurs. In particular, the present invention allows reproducible lysis or the achievement of reproducible lysis results. Furthermore, a safe and complete contact is ensured between the energy-transmitting unit and the container with the sample to be lysed. In addition, the contact can be established in a simple manner (i.e. without any further major expenditure on resources and/or steps). Furthermore, the present invention makes it possible for the contact to be established without the energy-transmitting unit contacting the sample to be lysed, which enables a process free from contamination or Contamination-free lysis is possible. In addition, the present invention allows the use of differently designed lysis containers, in particular flat containers. The containers can have membranes as the wall on which contact is made with the energy-transmitting unit. When using ultrasound as energy, for example, very good coupling reproducibility is made possible and it is ensured that cavitation bubbles, which are necessary for lysis, are created in the lysis container. Furthermore, very thin membranes can also be used as the wall of the container which is contacted by the energy-generating unit. The membranes can, for example, have a thickness of 20 µm to 1 mm. If flat membranes are used, the flat membranes can be cooled over the entire surface of the energy-transmitting unit that is contacted, and the flat membranes are more durable than membranes that are only in contact at certain points or in a ring. Compared to methods for enzymatic or chemical lysis, the present invention enables assays to be significantly simplified and shortened (e.g. from several hours to a few seconds) and reagents to be saved.
In nachfolgenden Figuren wird die vorliegende Erfindung konkreter unter Bezugnahme auf beispielhafte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung beschrieben. Zu Klarheitszwecken werden in den Figuren gleiche oder ähnliche Elemente mit den gleichen oder ähnlichen Bezugszeichen bezeichnet.
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1 zeigt den Querschnitt einer Energie übertragenden Einheit gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
2 zeigt die Öffnung in der Kontaktfläche der Energie übertragenden Einheit gemäß der Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
3 zeigt den Querschnitt einer Energie übertragenden Einheit gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
4 zeigt die Öffnung in der Kontaktfläche der Energie übertragenden Einheit gemäß der Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
5 zeigt den Querschnitt einer Energie übertragenden Vorrichtung gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
6 zeigt den Querschnitt einer Energie übertragenden Vorrichtung gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; -
7 zeigt den Querschnitt einer Vakuum zuführenden Einheit gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung; und -
8 zeigt die Schritte eines Verfahrens zum Lysieren einer zu lysierenden Probe gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung.
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1 shows the cross section of an energy transfer unit according to an embodiment of the present invention; -
2 shows the opening in the contact surface of the energy transmitting unit according to the embodiment of the present invention; -
3 shows the cross section of an energy transfer unit according to an embodiment of the present invention; -
4 shows the opening in the contact surface of the energy transmitting unit according to the embodiment of the present invention; -
5 shows the cross section of an energy transfer device according to an embodiment of the present invention; -
6 shows the cross section of an energy transfer device according to an embodiment of the present invention; -
7 shows the cross section of a vacuum supplying unit according to an embodiment of the present invention; and -
8th shows the steps of a method for lysing a sample to be lysed according to an embodiment of the present invention.
Wenn in der vorliegenden Anmeldung von einer „Energie übertragenden Einheit“ gesprochen wird, so kann darunter beispielsweise zumindest eine der folgenden Einheiten verstanden werden: eine Einheit, die ausgestaltet ist, Ultraschallwellen zum Lysieren zu übertragen; ein Resonator; und/oder eine Sonotrode, ein Horn, ein Stufenhorn, ein fokusierendes Horn oder ein Kegelhorn. Um in der vorliegenden Anmeldung alle möglichen konkreten Einheiten neben den oben beispielhaft genannten Einheiten abzudecken, wird in der Anmeldung im Wesentlichen der Begriff der „Energie übertragenden Einheit“ verwendet. Dabei ist jedoch zu verstehen, dass jede der konkreteren Ausgestaltungen/Einheiten unter dem Begriff „Energie übertragenden Einheit“ zu verstehen ist. Ebenso ist auch das Verwenden eines Begriffs, der eine konkretere Ausgestaltung bezeichnet, z.B. des Begriffs „Sonotrode“ so zu verstehen, dass auch andere Ausgestaltungen (z.B. Energie übertragende Einheit, Horn, Resonator etc.) darunter erfasst sind.When the present application refers to an “energy-transmitting unit”, this can be understood to mean, for example, at least one of the following units: a unit designed to transmit ultrasonic waves for lysis; a resonator; and/or a sonotrode, a horn, a standard horn, a focusing horn or a conical horn. In order to cover all possible concrete units in addition to the units mentioned above as examples in the present application, the term “energy-transmitting unit” is essentially used in the application. However, it should be understood that each of the more concrete configurations/units is to be understood under the term “energy-transmitting unit”. Likewise, the use of a term that designates a more concrete configuration, e.g. the term “sonotrode”, is to be understood to mean that other configurations (e.g. energy-transmitting unit, horn, resonator, etc.) are also included.
Mit dem Bezugszeichen 11 wird die Wand oder die Seite des Lyse-Behälters (d.h. des Behälters mit der zu lysierenden Probe) bezeichnet, die zum Aufbau des Kontakts mit der Energie übertragenden Einheit 10 vorgesehen oder ausgestaltet ist. Zum Zweck des Lysierens wird oft eine Lysekammer eingesetzt, die aus einem Behälter zum Aufnehmen der zu lysierenden Probe besteht. Um eine bessere Übersicht über die vorliegende Erfindung zu bieten, wird in
Gemäß der vorliegenden Ausführungsform ist die Energie übertragende Einheit 10 ausgestaltet, Vakuum anzuwenden, so dass der Lyse-Behälter und somit seine Wand 11 über die Öffnung 102 an die Kontaktfläche 101 der Einheit 10 angesaugt wird. Auf diese Weise wird ein stabiler und dauerhafter Kontakt zwischen der Energie übertragenden Einheit 10 und dem Behälter mit der zu lysierenden Probe bzw. der Wand 11 des Behälters ermöglicht. Dieses führt automatisch zur Unterstützung und somit auch zur Ermöglichung aller weiteren positiven Wirkungen der vorliegenden Erfindung.According to the present embodiment, the energy-transmitting
Die Öffnung 102 kann eine Öffnung eines Kanals 103 in der Energie übertragenden Einheit 10 sein. Dabei kann der Kanal 103 durch die Energie übertragende Einheit 10 verlaufen. Der Kanal 102 kann senkrecht zur Kontaktfläche 101 verlaufen. Ferner kann der Kanal 103 eine Bohrung in die Kontaktfläche 101 sein, wobei die Bohrung 103 eine axiale Bohrung sein kann, die in der Energie übertragenden Einheit 10 senkrecht zu der Kontaktfläche 101 verläuft. Im Lichte der vorstehend genannten möglichen Ausgestaltungen, die auch in Kombination mit einander umgesetzt werden können, kann die Energie übertragende Einheit 10 ausgestaltet sein, das Vakuum über den Kanal 103 oder über die Bohrung 103 anzuwenden. Durch jede der vorstehend genannten Ausgestaltungen wird ein gutes Ansaugen des Behälters bzw. seiner Wand 11 an die Kontaktfläche 101 der Energie übertragenden Einheit 10 ermöglicht, wodurch auch eine jede der weiteren positiven Wirkungen der vorliegenden Erfindung unterstützt wird.The
Gemäß der vorliegenden Ausführungsform wird die Energie übertragende Einheit 10 (z.B. Sonotrode) an die Wand oder Membran 11 angelegt. Daraufhin wird das Vakuum eingeschaltet, mit dem die Lysekammer/der Lysebehälter bzw. die Wand 11 an die Energie übertragende Einheit 10 (z.B. Sonotrode) bzw. an die Kontaktfläche 101 der Energie übertragenden Einheit 10 gesaugt wird. In
Zu der Ausgestaltung der oben erläuterten Energie übertragenden Einheit 10 ist anzumerken, dass gemäß einer weiteren Ausführungsform, die auf einer der oben erläuterten Ausführungsformen basiert, die Kontaktfläche 101 der Energie übertragende Einheit 10 zumindest eine weitere Öffnung in der Kontaktfläche 101 aufweist und dass die Energie übertragende Einheit 10 ausgestaltet ist, den Lyse-Behälter bzw. seine Wand 11 zusätzlich auch über die zumindest eine weitere Öffnung an die Kontaktfläche 101 anzusaugen. Die Energie übertragende Einheit 10 kann dabei ausgestaltet sein, Vakuum derart anzuwenden, dass der Lyse-Behälter bzw. seine Wand 11 über die zumindest eine weitere Öffnung an die Kontaktfläche 101 der Energie übertragenden Einheit 10 angesaugt wird. Ähnlich wie die oben betrachtete Öffnung 102 kann die zumindest eine weitere Öffnung eine Öffnung eines entsprechenden weiteren Kanals in der Energie übertragenden Einheit 10 sein. Die Energie übertragende Einheit 10 kann dabei ausgestaltet sein, das Vakuum über den entsprechenden Kanal der jeweiligen zumindest einen weiteren Öffnung anzuwenden. Der zumindest eine weitere Kanal (zu der zumindest einen weiteren Öffnung) kann beispielsweise ein radial ausgestalteter Kanal sein, der zur Kontaktfläche 101 hin radial verläuft und/oder ein Ringkanal sein.Regarding the design of the
Wenn die Energie übertragende Einheit 10 zumindest eine weitere Öffnung mit dem dazugehörigen Kanal oder mit dem dazugehörigen Vakuum zuführenden Element aufweist, kann eine Vakuum zuführende Einheit 51, 61, 62, 7 weitere entsprechende Vakuum zuführende Elemente aufweisen, die das Vakuum dem dazugehörigen Kanal oder dem dazugehörigen Vakuum zuführenden Element der Energie übertragenden Einheit 10 zuführen. Diese weiteren Vakuum zuführenden Elemente können eine ähnliche Ausgestaltung wie die oben Erläuterten aufweisen. Ferner ist es möglich, ein zentrales Vakuum zuführendes Element in einer Vakuum zuführenden Einheit derart bereitzustellen, dass es Verzweigungen zum Zuführen des Vakuums zu jedem der Kanäle oder der Vakuum zuführenden Elemente der Energie übertragenden Einheit 10 aufweist.If the
Das Lysieren wird durch das Reingeben der zu lysierenden Probe in einen Lyse-Behälter (der Lysekammer) vorbereitet. Hierzu kann beispielsweise eine keimhaltige Flüssigkeit (z.B. Körperflüssigkeit) wie Blut, Urin, Sputum, Serum, Plasma, Lympe, Abstriche, BAL (Broncheoalveoläre Lavage), etc. in den Behälter der Lysekammer platziert werden. Das Platzieren kann gegebenenfalls auch zusammen mit einem Probe-Stäbchen, z.B. Wattestäbchen, vorgenommen werden. Als zu lysierende Probe können beispielsweise Pflanzenzellen/Pflanzenproben, Nahrungsmittelproben, Pilzsuspensionen, Eukariontenzellen, Gewebeproben, Moose und Flechten, Wasser- und Abwasserproben, Filtermedien (Keimfilter, Klimaanlagenfilter etc.), Kühlschmierstoffe, Zellkulturen etc. verwendet werden. Dabei kann die zu lysierende Probe mit verschiedenen Zusätzen zur Unterstützung des Lysiervorgangs versetzt werden, z.B. mit EDTA zur Blockierung von DNAsen, mit RNAse-Blockern, Chaotropen Salze, Detergentien (z.B. SDS), Alkalien usw. Die oben erläuterten möglichen Ausgestaltungen einer zu lysierenden Probe sind nicht als einschränkend sondern beispielhaft zu sehen.Lysis is prepared by placing the sample to be lysed into a lysis container (the lysis chamber). For example, a fluid containing germs (e.g. body fluid) such as blood, urine, sputum, serum, plasma, lymph, swabs, BAL (bronchoalveolar lavage), etc. can be placed in the container of the lysis chamber. If necessary, the placement can also be carried out together with a sample stick, e.g. cotton swab. The sample to be lysed can be, for example, plant cells/plant samples, food samples, fungal suspensions, eukaryotic cells, tissue samples, mosses and lichens, water and wastewater samples, filter media (germ filters, air conditioning filters, etc.), cooling lubricants, cell cultures, etc. The sample to be lysed can be mixed with various additives to support the lysis process, e.g. with EDTA to block DNAses, with RNAse blockers, chaotropic salts, detergents (e.g. SDS), alkalis, etc. The possible configurations of a sample to be lysed explained above are not to be seen as restrictive but as examples.
In Schritt 81 wird die Energie übertragende Einheit 10 vor einen Lyse-Behälter bzw. vor der Wand 11 des Lyse-Behälters mit der zu lysierenden Probe platziert und/oder positioniert und/oder der Lyse-Behälter mit der zu lysierenden Probe bzw. die Wand 11 des Lyse-Behälters wird vor die Energie übertragende Einheit 10 platziert und/oder positioniert. Daraufhin wird das Vakuum eingeschaltet und in Schritt 82 wird das Vakuum der Energie übertragenden Einheit 10 derart zugeführt, dass die Energie übertragende Einheit 10 den Lyse-Behälter bzw. die Wand 11 des Lyse-Behälters ansaugt. Wie oben beschrieben, kann zumindest eine entsprechend ausgestaltete Vakuum zuführende Einheit 103, 51, 61, 62, 71 das Anwenden des Vakuums am Loch 102 der Kontaktfläche 101 der Energie übertragenden Einheit 10 ermöglichen. Das Vakuum kann beispielsweise derart zugeführt oder angewendet werden, dass ein Absolutdruck von 0 bis 600 mbar entsteht.In
Anschließend wird in Schritt 83 das Lysieren der zu lysierenden Probe, die sich im Lyse-Behälter mit der Wand 11 befindet, unter Beibehaltung des durch das Ansaugen entstandenene Kontakts zwischen der Energie übertragenden Einheit 10 und dem Lyse-Behälter bzw. seiner Wand 11 ausgeführt. Wenn der Ultraschall als Energie angewendet wird, wird der Ultraschallgenerator bis zu mehreren Minuten betätigt. Dieses kann beispielsweise bei 22 W, 12 W/cm2, 30 kHz erfolgen. Es sind allerdings auch niedrigere oder höhere Frequenzen möglich, z.B. 20 kHz bis 1 MHz. Bei 40 kHz ist kann mehr oder eine bessere DNA-Fragmentierung erreicht werden. Bei 20 kHz kann eine starke Geräuschbelastung eintreten. Gegebenenfalls können gemäß dem vorliegenden Ausführungsbeispiel während der Lyse 83 Beads (z.B. 200 bis 500 µm, Glas) eingesetzt werden, die sich durch die Stöße untereinander während des Lysierschritts 83 unterstützen und Kavitation induzieren.Then, in
Nach dem Lysieren 83 kann die lysierte Probe bzw. das Lysat der Lysekammer mit dem Lyse-Behälter entnommen werden. Die lysierte Probe bzw. das Lysat kann beispielsweise in einem LOC/µTAS weiter bearbeitet werden.After
Somit betrifft die vorliegende Erfindung eine Einheit, die ausgestaltet ist, Energie zum Lysieren zu übertragen, wobei die Einheit eine Kontaktfläche aufweist, über welche Kontakt zu einem Lyse-Behälter mit einer zu lysierenden Probe erstellt wird, wobei die Kontaktfläche eine Öffnung in die Kontaktfläche aufweist und wobei die Einheit ausgestaltet ist, den Lyse-Behälter über die Öffnung an die Kontaktfläche anzusaugen. Ferner betrifft die vorliegende Erfindung eine Vorrichtung, welche ausgestaltet ist, Energie zum Lysieren zu übertragen, und welche die Energie übertragende Einheit aufweist. Zusätzlich betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zum Lysieren einer zu lysierenden Probe unter Verwendung der Energie übertragenden Einheit.Thus, the present invention relates to a unit which is designed to transmit energy for lysis, wherein the unit has a contact surface via which contact is made with a lysis container with a sample to be lysed, wherein the contact surface has an opening in the contact surface and wherein the unit is designed to suck the lysis container to the contact surface via the opening. Furthermore, the present invention relates to a device which is designed to transmit energy for lysis and which has the energy-transmitting unit. In addition, the present invention relates to a method for lysing a sample to be lysed using the energy-transmitting unit.
Die vorstehend erläuterten Ausführungsformen mit den dort erläuterten spezifischen Aspekten sind mit einander kombinierbar. Die vorliegende Erfindung ermöglicht ein kontaminationsfreies und reproduzierbares Lysieren mittels Energieübertragung, z.B. mittels Ultraschalls. Ferner kann das Lysieren auf eine schnelle, effiziente und einfache Weise vorgenommen werden. Zusätzlich wird durch die vorliegende Erfindung ein sicheres Einkoppeln der Energie (z.B. des Ultraschalls) in die zu lysierende Probe gewährleistet.The embodiments explained above with the specific aspects explained there can be combined with one another. The present invention enables contamination-free and reproducible lysis by means of energy transfer, e.g. by means of ultrasound. Furthermore, lysis can be carried out in a quick, efficient and simple manner. In addition, the present invention ensures that the energy (e.g. ultrasound) is safely coupled into the sample to be lysed.
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