DE102011001368A1 - Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik - Google Patents

Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik Download PDF

Info

Publication number
DE102011001368A1
DE102011001368A1 DE102011001368A DE102011001368A DE102011001368A1 DE 102011001368 A1 DE102011001368 A1 DE 102011001368A1 DE 102011001368 A DE102011001368 A DE 102011001368A DE 102011001368 A DE102011001368 A DE 102011001368A DE 102011001368 A1 DE102011001368 A1 DE 102011001368A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
phenyl
dimethylamino
polymeric particle
methanone
lanthanide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE102011001368A
Other languages
English (en)
Other versions
DE102011001368B4 (de
Inventor
Ana Descalzo
Knut Rurack
Michael Weller
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bundesanstalt fuer Materialforschung und Pruefung BAM
Original Assignee
Bundesanstalt fuer Materialforschung und Pruefung BAM
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bundesanstalt fuer Materialforschung und Pruefung BAM filed Critical Bundesanstalt fuer Materialforschung und Pruefung BAM
Priority to DE201110001368 priority Critical patent/DE102011001368B4/de
Publication of DE102011001368A1 publication Critical patent/DE102011001368A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE102011001368B4 publication Critical patent/DE102011001368B4/de
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6408—Fluorescence; Phosphorescence with measurement of decay time, time resolved fluorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
    • G01N2021/6441—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks with two or more labels

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft neue polymere Partikel enthaltend Sensibilisatoren für Lanthanoid-Chelate, die Herstellung derartiger Polymerpartikel sowie die Verwendung der Polymerpartikel, welche die Lanthanoid-Chelate mit den Sensibilisatoren enthalten, in der Bioanalytik, bevorzugt in der zeitaufgelösten Fluoreszenzdetektion bzw. Fluorometrie.

Description

  • Die vorliegende Erfindung betrifft neue polymere Partikel enthaltend Sensibilisatoren für Lanthanoid-Chelate, die Herstellung derartiger Polymerpartikel sowie die Verwendung der Polymerpartikel, welche die Lanthanoid-Chelate mit den Sensibilisatoren enthalten, in der Bioanalytik, bevorzugt in der zeitaufgelösten Fluoreszenzdetektion bzw. Fluorometrie.
  • Aus dem. Stand der Technik ist es bereits bekannt, Lanthanoid-Komplexe in der Fluoreszenzspektroskopie einzusetzen. Die US-PS 4,374,120 stellt Eu- und Tb-Chelate als Fluoreszenzmarker mit einer relativ langen Fluoreszenzabklingzeit von 50 bis 1000 Mikrosekunden vor; Liganden sind u. a. Aminopolycarbonsäuren. Es ist weiterhin bekannt, dass sich einige Lanthanoid-Chelatkomplexe für die zeitaufgelöste Fluorometrie besonders eignen, wobei Tb(III)-BPTA-NHS und Eu(III)-Östrogen im Stand der Technik bevorzugt genannt werden und ersteres in einem DNA-Hybridisierungs-Assay Verwendung findet (K. Matsumoto et al., RIKEN Review 35, May, 2001).
  • Lanthanoid-Chelate finden gemäß der WO-A-00/01663 auch Verwendung in HTRF (Homogeneous-Time-Resolved Fluorescence) Assays. Die Deutsche Offenlegungsschrift DE-A-42 22 255 beschreibt Markierungsreagenzien mit einer Lanthanoidionen-chelatisierenden Struktur zum Einsatz in der Gensondendiagnostik. Bevorzugt als Lanthanoidionen chelatisierende Strukturen sind gemäß dieser Offenlegungsschrift Pyridinderivate (siehe u. a. US-PS 5,032,677 ).
  • H. Takalo et al. beschreiben im J. Alloy. Compd., 1995, 225, 511–514 Tb(III)- und Eu(III)-Chelate und ihre Lumineszenzausbeute.
  • Daneben werden zur Bestimmung von Phosphorylierungsaktivitäten in der deutschen Offenlegungsschrift DE-A-698 13 850 Kryptate eingesetzt, die ein Seltenerdatom – wie Tb, Eu, Sm, Dy, Nd – enthalten und ferner einen Komplexbildner – wie Bispyridin. Diese Kryptate werden als fluoreszierende Donorverbindungen eingesetzt.
  • Weiterhin beschreiben I. Hemmilää, und S. Webb in Drug Discov. Today, 1997, 2, 373–381 Prinzipien der time-resolved fluorometry (zeitaufgelöste Fluorometrie) mit Lanthanoid-Chelaten zum Drogenscreening. In der deutschen Offenlegungsschrift DE-A-102 59 677 wird eine Sonde zum Nachweis von Nukleinsäuren vorgestellt, die in einer bevorzugten Ausführungsform Seltene-Erden-Farbstoffe als Fluorophore einsetzt.
  • Die zeitaufgelöste Fluoreszenzdetektion verkörpert eine sehr empfindliche Analysenmethode, bei der eine zur Fluoreszenz befähigte Probe zunächst mittels eines Lichtpulses angeregt wird und das auf dem Wege der Fluoreszenz emittierte Licht nach einer bestimmten Zeitverzögerung – typischerweise im Mikro- bis Millisekunden-Bereich – gemessen wird. Derartige Verfahren erlauben die effiziente Unterdrückung von gestreutem Anregungslicht und von Licht, das aus der Autofluoreszenz anderer Probenbestandteile herrührt. Verglichen mit den Methoden der konventionellen – statischen – Fluorometrie weist die zeitaufgelöste Fluorometrie den Vorteil auf, dass das Verhältnis von Signal zu Rauschen deutlich verbessert wird und somit auch schwächere Signale erfolgreich detektiert werden können.
  • Dabei hat sich bei der zeitaufgelösten Fluorometrie speziell die Verwendung von Farbstoffen mit langen Lumineszenzabklingzeiten als vorteilhaft erwiesen. Diese Lumineszenzabklingzeiten können durch phasenmodulierte bzw. Impuls-Lumineszenzmesstechniken bestimmt werden. Als vorteilhaft hat sich für diesen Zweck der Einsatz von Komplexen mit Lanthanid- bzw. Lanthanoidionen – bevorzugt von Terbium(III)-Ionen und von Europium(III)-Ionen – erwiesen.
  • Die Abklingzeiten von dreiwertig positiv geladenen Ionen der Lanthaniden (Ln(III)) sind relativ lang, weil die Emission auf den formal verbotenen f-f-Übergängen basiert, was auf der anderen Seite allerdings auch ein Grund dafür ist, dass die Absorptionskoeffizienten dieser Übergänge sehr klein sind. Aus diesem Grunde wurde im Stand der Technik der Einsatz von sog. Antennenliganden vorgeschlagen, die mit dem Lanthanid- bzw. Lanthanoid-Ion eine koordinative Bindung eingehen. Diese Antennenliganden übertragen die von ihnen empfangene Anregungsenergie auf das Lanthanid- bzw. Lanthanoidion – zum Beispiel bevorzugt auf Ln(III)-Ionen, wie z. B. das Eu(III)-Ion
  • Die meisten – beispielsweise im Hinblick auf den Einsatz des Europium(III)-Ions – vorgeschlagenen Antennenliganden ermöglichen die oben beschriebene Sensibilisierung lediglich im UV-Bereich mit Anregungswellenlängen < 400 nm. Demgegenüber erscheint jedoch eine entsprechenden Anregung mittels sichtbarem Lichts wesentlich vorteilhafter, da die Proben bei der Bestrahlung mit UV-Licht schneller zerfallen und weil der Einsatz von Lichtquellen, die sichtbares Licht erzeugen, instrumentell erheblich einfacher und preisgünstiger zu verwirklichen ist.
  • Im Stand der Technik wurden daher bereits einige Alternativen, die die Verwendung von sichtbarem Licht mit einer Wellenlänge von > 400 nm zum Gegenstand haben, vorgeschlagen, die jedoch gravierende Nachteile aufweisen.
  • So sind einige Komplexe mit derartigen Antennenliganden experimentell nur nach einer mehr oder weniger aufwendigen Derivatisierung zugänglich [A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2000, 2359–2360; A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2002, 348–357] oder die Komplexe erweisen sich als in Lösung instabil [R. van Deun et al., Chem. Commun., 2005, 590–592]. In anderen Fällen führen die Chelate zu einer sehr geringen Quantenausbeute und/oder sie erlauben lediglich einen ineffizienten Energietransfer. So ermöglichen zum Beispiel Eu(III)-Komplexe mit Schiff'schen Basen nur die Erzielung von niedrigen Quantenausbeuten, sobald das Absorptionsmaximum bei längeren Wellenlängen auftritt [R. D. Archer, H. Chen, Inorg. Chem., 1998, 37, 2089–2095]. Bei anderen Chelaten kann eine essentielle Lumineszenz bzw. Fluoreszenz nur bei deren Verwendung in organischen Lösungsmitteln beobachtet werden, was sie für eine Verwendung für Anwendungszecke in biologischen Systemen als unpraktikabel bzw. unattraktiv erscheinen lässt. So beschreiben Martinus et al. ein Europium-Chelat mit Michler's Keton [4,4'-Bis(N,N-dimethylamino)benzophenon] (”MK”), das ein Absorptionsmaximum bei 414 nm aufweist. Allerdings wird die Komplexbildung nur in nicht-koordinierenden Solvenzien ermöglicht, in denen keine Wassermoleküle, die mit dem Chelatbildner MK bei der Belegung der Koordinationsstellen in Konkurrenz treten können, vorhanden sind [M. H. V. Werts et al., Chem. Commun., 1999, 799–800].
  • Daneben berichten Steemers et al. über Europium- und Terbium-Komplexe, die eine Serie von Calix[4]arenen aufweisen und deren Anregungswellenlängen jenseits von wenigstens 350 nm liegen. Allerdings sind die beobachteten Quantenausbeuten relativ niedrig und der Energietransfer stellt sich als relativ ineffizient heraus. Zur Erklärung wird angenommen, dass ein signifikanter Teil dieser Komplexe von Sauerstoff abgefangen bzw. inaktiviert wird, was mit einer sog. Löschung (Quenching) einher geht, welche ihrerseits keinen Beitrag zur Lumineszenz leistet [F. J. Steemers et al., J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 9408–9414]. Des Weiteren berichten Werts et al. über Lanthanid-Komplexe mit Fluorexon {4',5'-bis-[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]-fluorescein} [M. H. V. Werts et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 2000, 433–439], die mit sichtbarem Licht angeregt werden können. Aber auch diese Chelate weisen eine relative niedrige Quantenausbeute in einem Bereich von lediglich 1,7 – 8,9·10–4 auf.
  • Der vorliegenden Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, lumineszierende Partikel zur Verfügung zu stellen, die mit sichtbaren Licht angeregt werden können und die in empfindlichen Assays in der Bioanalytik unter Anwendung der zeitaufgelösten Detektion (Fluorometrie) eingesetzt werden können.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, die oben beschriebenen Partikel für Anregungswellenlängen von > 400 nm verfügbar zu machen.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, lumineszierende Partikel zur Verfügung zu stellen, die ein gegenüber dem molekularen Luminophor verstärktes Signal erzeugen.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, ein Verfahren zur Herstellung dieser Partikel zur Verfügung zu stellen.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, ein modulares Verfahren für die Synthese der erfindungsgemäßen Partikel aufzufinden.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, Partikel verfügbar zu machen, die in einem Assay verwendet werden können, der auch in wässeriger Lösung erfolgreich eingesetzt werden kann.
  • Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, einen Assay zu Verfügung zu stellen, bei dem die Affinität der Analyt-Rezeptor-Bindung hoch ist.
  • Diese Aufgaben werden zumindest teilweise durch Lanthanoidionen-haltige Partikel, die vorzugsweise Europium(III)-, Terbium(III)-, Samarium(III)-, Neodym(III)-, Dysprosium(III)-, Praseodymium(III)-, Holmium(III)-, Erbium(III)- oder Ytterbium(III)-Komplexe – besonders bevorzugt Ytterbium(III)- und Europium(III)-Komplexe – als Bestandteil der Polymerpartikel enthalten können, gelöst, in denen ein oder mehrere Sensibilisator(en) bzw. Liganden der allgemeinen Formel 1 bis 12
    Figure 00050001
    in denen R1 Wasserstoff oder Alkyl,
    R2 Wasserstoff, -NHCOAlkyl, -NHCONR3, -NHCSNR3, NR4 2,
    R3 Alkyl,
    R4 unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl,
    X wie jeweils angegeben N, S, O, CH, CH2, CH(Alkyl), C(Alkyl)2
    bedeuten können und/oder eine oder mehrere der Verbindungen 13–22
    Figure 00050002
    Figure 00060001
    – in denen Me für eine Methylgruppe und CO für eine Carbonylgruppe steht – enthalten sind.
  • Derartige Verbindungen sind aus dem Stand der Technik bekannt [K. D. Bartle, G. Hallas und J. D. Hepworth, Organic Magnetic Resonance Vol. 7, 1973, 154–159].
  • Vorzugsweise weisen die Partikel durch die Anwesenheit funktioneller Gruppen einen hohen Funktionalisierungsgrad auf, der eine Erhöhung bzw. Verstärkung der Analyt-Rezeptor-Bindung bewirkt. Dabei können die funktionellen Gruppen aus dem die polymeren Partikel aufbauenden Polymeren stammen oder aber aus einer Beschichtung des polymeren Partikels mit einem Polymer, welches die gewünschten funktionalisierte Gruppen aufweist oder – als Vorstufe – die gewünschten funktionellen Gruppen verfügbar machen kann.
  • Wenn nicht anders angegeben, weisen die in der Beschreibung und die in den Patentansprüchen verwendeten folgenden Begriffe die nachstehend angegebene Bedeutung auf:
    ”Alkyl” bedeutet einen linearen oder verzweigten gesättigten einwertigen C1-C30-Kohlenwasserstoffrest, bevorzugt einen C1-C20-Kohlenwasserstoffrest und besonders bevorzugt einen C1-C16-Kohlenwasserstoffrest, wobei beim Vorhandensein mehrerer Alkylsubstituenten die Reste untereinander gleich oder verschieden sein können. Als Beispiele seien folgende Kohlenwasserstoffreste genannt:
    Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl, 1-Methylpropyl, 2-Methylpropyl-, 1,1-Dimethylethyl, n-Pentyl, 1-Methylbutyl, 2-Methylbutyl, 3-Methylbutyl, 1,1-Dimethylpropyl, 1,2-Dimethylpropyl, 2,2-Dimethylpropyl, 1-Ethylpropyl, Hexyl, 1-Methylpentyl, 2-Methylpentyl, 3-Methylpentyl, 4-Methylpentyl, 1,1-Dimethylbutyl, 1,2-Dimethylbutyl, 1,3-Dimethylbutyl, 2,2-Dimethylbutyl, 2,3-Dimethylbutyl, 3,3-Dimethylbutyl, 1-Ethylbutyl, 2-Ethylbutyl, 1,1,2-Trimethylpropyl, 1,2,2-Trimethylpropyl, 1-Ethyl-1-methylpropyl und 1-Ethyl-2-methylpropyl, Heptyl, Octyl, Nonyl, Decyl, Undecyl, Dodecyl, Tridecyl, Tetradecyl, Pentadecyl, Hexadecyl, Heptadecyl, Octatecyl, Nonadecyl, Eicosyl, Henicosyl, Docsyl, Tricosyl, Tetracosyl, Pentacosyl, Hexacosyl, Heptacosyl, Octacosyl, Nonacosyl und Triacosyl.
  • Die Alkylgruppen können ggf. mit einem oder mehreren Substituenten – wie Nitrogruppe(n), Aminogruppe(n) und oder einem oder mehreren Halogenatom(n), die gleich oder verschieden sein können – substituiert sein. Entsprechendes gilt auch für die niederen Alkylreste Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl und tert.-Butyl, die bevorzugt werden. Daneben können auch die Grundkörper der Sensibilisatoren der allgemeinen Formel 1–22 mit einem oder mehreren – zusätzlich zu den bereits angegebenen Substituenten – Alkylsubstituenten, die gleich oder verschieden sein können, substituiert sein.
  • Lanthanid oder Lanthanoid bedeutet im Sinne der vorliegenden Anmeldung die zu der Gruppe der Lanthanoiden gehörenden Elemente bzw. Ionen – wie z. B. Praseodym (Pr3+), Neodym (Nd3+), Samarium (Sm3+), Europium (Eu3+), Terbium (Tb3+), Dysprosium (Dy3+), Holmium (Ho3+), Erbium (Er3+), Thulium (Tm3+) und Ytterbium (Yb3+).
  • Als besonders bevorzugte Lanthanoid-Ionen finden neben dem Pr(III) bzw. Pr3+-Ion, dem Tb(III) bzw. Tb3+-Ion, dem Sm(III) bzw. Sm3+-Ion, dem Er(III) bzw. Er3+-Ion, dem Nd(III) bzw. Nd3+-Ion, dem Sm(III) bzw. Sm3+-Ion, dem Ho(III) bzw. Ho3+-Ion, dem Dy(III) bzw. Dy3+-Ion und dem Yb(III) bzw. Yb3+-Ion das Eu(III)-Ion bzw. Eu3+-Ion Verwendung.
  • Als besonders bevorzugter Eu(III)-Komplex wird der Eu(fod)3-Komplex
    Figure 00070001
    eingesetzt.
  • Daneben finden vorzugsweise Komplexe des Yb(III) mit den erfindungsgemäß vorgeschlagenen Liganden Verwendung, die – ebenso wie einige nah-infrarot (NIR) emittierende Ln(III) Komplexe – mittels sichtbaren Lichts angeregt werden können. Partikel, die derartige Komplexe beinhalten, ermöglichen eine Detektion im nahen Infrarot (NIR)-Bereich, was einen sehr großen Vorteil der vorliegenden Erfindung darstellt, da in diesem Bereich wegen fehlender Proteinfluoreszenz keine Untergrundsignale vorhanden sind – bzw. im Falle ihres Vorhandenseins – effizient unterdrückt werden können. Daneben erlaubt die große (pseudo) Stokessche Verschiebung von mehr als 500 nm eine einfache Abtrennung von störenden Streusignalen.
  • Besonders bevorzugt werden die oben erwähnten Aufgaben u. a. durch Polymerpartikel gelöst, die einen – oder mehrere – Europium(III) bzw. Eu(fod)3-Komplexe enthalten, in denen daneben Sensibilisatoren der allgemeinen Formel 1 bis 22 enthalten sind.
  • Vorzugsweise finden funktionalisierte Polymerpartikel Verwendung. Polymere Partikel, die funktionalisiert sind bzw. funktionalisiert werden können bzw. die bereits entsprechende Vorstufenfunktionen besitzen, sind aus dem Stand der Technik hinlänglich bekannt.
  • Die Fähigkeit, gezielt eine oder mehrere Spezies von Biomolekülen an die Oberfläche der funktionalisierten Polymerpartikel zu binden, wird in erheblichem Maße durch die Art des verwendeten Polymers sowie durch die an diesem Polymer befindlichen funktionellen Gruppen bestimmt. Die funktionalisierten Polymerpartikel weisen im Allgemeinen eine möglichst hohe Bindungskapazität gegenüber der zu analysierenden Biomolekül-Spezies auf, um den Einsatz. der Polymerpartikel effektiv und kostengünstig gestalten zu können. Daneben sollte die Bindung möglichst selektiv erfolgen.
  • Für eine entsprechende Funktionalisierung eignet sich eine Vielzahl von hinreichend hydrophoben Polymeren, d. h. von Polymeren – beispielsweise Polyene (wie Polyethylene oder Polypropylene), die ähnlich hydrophob wie Polystyrol sind und die sich gut quervernetzen lassen. Diese Polymere sind aus dem Stand der Technik hinlänglich bekannt.
  • Daneben eignen sich auch Oligomere oder Polymere, die ein oder mehrere Partialstrukturen von Michlers Keton aufweisen – wie zum Beispiel Polymere des folgenden Typs 24:
    Figure 00090001
  • Worin x und y beliebig gewählt werden können und die Verhältnisse von x:y beispielsweise in einem Bereich von 10 zu 1 bis 1 zu 10 liegen können [Y. Wen et al., Polym. Adv. Technol., Article first published online : 21 SEP 2009, DOI: 10.1002/pat.1552].
  • Die Herstellung entsprechender Partikel ist dem Fachmann aus dem Stand der Technik ebenfalls hinlänglich bekannt. Der Einbau hinreichend lipophiler Lanthanid- und/oder Lanthanoid-Chelate und Sensibilisatoren kann durch verschiedene kovalente und nicht-kovalente Techniken – beispielsweise durch Einquellen – erfolgen.
  • 1 zeigt die Absorptionsspektren des freien MK (Michlers Keton) vor und nach der Zugabe von zunehmenden Mengen an Eu(fod)3 in Toluol. Die wiedergegebenen experimentellen Daten belegen eine deutliche Verschiebung der Absorption des neu gebildeten Komplexes zu längeren Wellenlängen. Werden diese Komplexe in der langwelligen Absorptionsbande angeregt, bewirkt dies eine typische Emission – beispielsweise von Eu(III) bei 615 nm.
  • 2 zeigt die Absorptionsspektren der freien Ketone 1 und 2 und der jeweils mit Eu(fod)3 in Toluol gebildeten Komplexe.
  • Die nachfolgende Tabelle (Tabelle 1) gibt die Absorptionsmaxima und die Photolumineszenz Quantenausbeute (Photo Luminescence Quantum Yield (PLQY) ΦL) für die von Eu(fod)3 mit MK sowie mit den erfindungsmäßen Liganden 1 und 2 gebildeten Komplexen der Verbindungen 1 und 2 wieder. Tabelle 1
    Komplex λabs/nm ΦL
    Eu(fod)3 mit MK 412 0,25
    Eu(fod)3 mit Ligand 1 431 0,09
    Eu(fod)3 mit Ligand 2 439 0,001
  • Wenn Lanthanid- und/oder Lanthanoid-Chelate und Sensibilisatoren in den Polymerpartikeln co-immobilisiert werden, dann wird der Komplex innerhalb des Partikels gebildet. Dies ermöglicht Messungen in wässriger Lösung.
  • 3 zeigt das Fluoreszenzemissionsspektrum (rechtes Signal bei 615 nm) sowie das Fluoreszenzanregungsspektrum (linkes Signal bei 414 nm bzw. 430 nm) der lumineszierenden Eu(fod)3-MK sowie Eu(fod)3-1 Komplexe im Partikel eingeschlossen in wässriger Lösung.
  • Tabelle 2 zeigt die Lumineszenzabklingzeiten für die ausgewählten Eu(fod)3 Komplexe mit MK sowie mit den Liganden 1 und 2. Tabelle 2
    Komplex τ/μs
    Eu(fod)3 mit MK 360
    Eu(fod)3 mit Ligand 1 240
    Eu(fod)3 mit Ligand 2 45
  • Somit betrifft die vorliegende Erfindung polymere Partikel, enthaltend ein oder mehrere Lanthanid- und/oder Lanthanoidionen und in denen ein oder mehrere Sensibilisator(en) bzw. Liganden der allgemeinen Formel 1 bis 12
    Figure 00110001
    in denen R1 Wasserstoff oder Alkyl,
    R2 Wasserstoff, -NHCOAlkyl, -NHCONR3, -NHCSNR3, NR4 2,
    R3 Alkyl,
    R4 unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl,
    X wie jeweils angegeben N, S, O, CH, CH2, CH(Alkyl), C(Alkyl)2
    bedeuten können, und/oder eine oder mehrere der Verbindungen 13–22
    Figure 00110002
    Figure 00120001
    – in denen Me für eine Methylgruppe und CO für eine Carbonylgruppe steht – enthalten sind.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung obige polymere Partikel enthaltend eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Pr3+, Nd3+, Sm3+, Eu3+, Tb3+, Dy3+, Ho3+, Er3+, Tm3+ und Yb3+ – vorzugsweise eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Tb3+, Nd3+, Dy3+, Yb3+, Er3+, Sm3+, Pr3+ und Eu3+-Ionen und besonders bevorzugt eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Eu3+-, Tb3+- und Yb3+-Ionen – enthält.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung des Weiteren obige polymere Partikel enthaltend Eu(fod)3, Europium tris[3-(heptafluoropropylhydroxymethylen)-(+/–)-camphorat], Europium tris[3-(trifluoromethylhydroxymethylen)-(+/–)-camphorat], Europium(III) tris(d,d-dicampholylmethanat), Europium(III) tris[3-(heptafluoropropylhydroxymethylen)-d-camphorat] oder Tris(1,1,1,5,5,6,6,7,7,7-decafluoro-2,4-heptandionato) Europium Dihydrat enthält.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung des Weiteren die vorgenannten. Partikel, in denen der Substituent R1 in den allgemeinen Formeln 1 bis 22 Wasserstoff, Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl und tert.-Butyl bedeuten kann.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung des Weiteren die vorgenannten polymeren Partikel in denen der Substituent R2 in den allgemeinen Formeln 1 bis 22 Wasserstoff, -NHCOAlkyl, -NHCONHR3, -NHCSNHR3, NR4 2 und die Substituenten R3 und R4 Wasserstoff, Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl oder tert.-Butyl und der Substituent Alkyl unabhängig voneinander Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl oder tert.-Butyl bedeuten kann.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung des Weiteren die vorgenannten polymeren Partikel eines oder mehrere unpolare Monomere wie z. B. aus der Gruppe der Polyene – bevorzugt Polystyrol – aufweist.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung des Weiteren die vorgenannten polymeren Partikel, wobei das polymere Partikel ein Polymer mit funktionellen Gruppen aufweist.
  • Daneben betrifft die vorliegende Erfindung Verwendung vorbeschriebenen erfindungsgemäßen polymeren Partikels in einem bioanalytischen Verfahren.
  • Typischerweise betrifft die vorliegende Erfindung die vorgenannte Verwendung der erfindungsgemäßen polymeren Partikel in bioanalytischen Verfahren in denen das Verfahren ein fluorometrisches Verfahren, bevorzugt ein zeitaufgelöstes fluorometrisches Verfahren und besonders bevorzugt ein FRET-(Förster-Resonanzenergietransfer (FRET) bzw. Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer) Verfahren ist.
  • Des Weiteren betrifft die vorliegende Erfindung einen Assay enthaltend wenigstens eines der polymeren zuvor beschriebenen Partikel.
  • Des Weiteren betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines polymereren Partikels, das folgende Schritte umfasst:
    • i) Bereitstellen des polymeren Partikels,
    • ii) Bereitstellen einer Lösung enthaltend mindestens ein Lanthanid- und/oder Lanthanoidion und eine Verbindung der Formel 1–22,
    • iii) in Kontakt bringen der polymeren Partikel mit der mindestens ein Lanthanid- und/oder Lanthanoidion und eine Verbindung der Formel 1–22 enthaltenden Lösung.
  • ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
  • Diese Liste der vom Anmelder aufgeführten Dokumente wurde automatisiert erzeugt und ist ausschließlich zur besseren Information des Lesers aufgenommen. Die Liste ist nicht Bestandteil der deutschen Patent- bzw. Gebrauchsmusteranmeldung. Das DPMA übernimmt keinerlei Haftung für etwaige Fehler oder Auslassungen.
  • Zitierte Patentliteratur
    • US 4374120 [0002]
    • WO 00/01663 [0003]
    • DE 4222255 A [0003]
    • US 5032677 [0003]
    • DE 69813850 A [0005]
    • DE 10259677 A [0006]
  • Zitierte Nicht-Patentliteratur
    • K. Matsumoto et al., RIKEN Review 35, May, 2001 [0002]
    • H. Takalo et al. beschreiben im J. Alloy. Compd., 1995, 225, 511–514 Tb(III)- und Eu(III)-Chelate [0004]
    • I. Hemmilää, und S. Webb in Drug Discov. Today, 1997, 2, 373–381 [0006]
    • A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2000, 2359–2360 [0012]
    • A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2002, 348–357 [0012]
    • R. van Deun et al., Chem. Commun., 2005, 590–592 [0012]
    • R. D. Archer, H. Chen, Inorg. Chem., 1998, 37, 2089–2095 [0012]
    • M. H. V. Werts et al., Chem. Commun., 1999, 799–800 [0012]
    • Steemers et al. [0013]
    • F. J. Steemers et al., J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 9408–9414 [0013]
    • Werts et al. [0013]
    • M. H. V. Werts et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 2000, 433–439 [0013]
    • K. D. Bartle, G. Hallas und J. D. Hepworth, Organic Magnetic Resonance Vol. 7, 1973, 154–159 [0022]
    • Y. Wen et al., Polym. Adv. Technol., Article first published online : 21 SEP 2009, DOI: 10.1002/pat.1552 [0035]

Claims (10)

  1. Polymeres Partikel, enthaltend ein oder mehrere Lanthanid- und/oder Lanthanoidionen und in denen ein oder mehrere Sensibilisator(en) bzw. Liganden der allgemeinen Formel 1 bis 12
    Figure 00140001
    in denen R1 Wasserstoff oder Alkyl, R2 Wasserstoff, -NHCOAlkyl, -NHCONR3, -NHCSNR3, NR4 2, R3 Alkyl, R4 unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl, X wie jeweils angegeben N, S, O, CH, CH2, CH(Alkyl), C(Alkyl)2 bedeuten können und/oder eine oder mehrere der Verbindungen 13–22
    Figure 00140002
    Figure 00150001
    – in denen Me für eine Methylgruppe und CO für eine Carbonylgruppe steht – enthalten sind.
  2. Polymere Partikel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das polymere Partikel eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Pr3+, Nd3+, Sm3+, Eu3+, Tb3+, Dy3+, Ho3+, Er3+, Tm3+ und Yb3+ – vorzugsweise eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Tb3+, Nd3+, Dy3+, Yb3+, Er3+, Sm3+, Pr3+ und Eu3+-Ionen und besonders bevorzugt eines oder mehrere Ionen ausgewählt aus der Gruppe Eu3+-, Tb3+- und Yb3+-Ionen – enthält.
  3. Polymeres Partikel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das polymere Partikel Eu(fod)3, Europium tris[3-(heptafluoropropylhydroxymethylen)-(+/–)-camphorat], Europium tris[3-(trifluoromethylhydroxymethylen)-(+/–)-camphorat], Europium(III) tris(d,d-dicampholylmethanat), Europium(III) tris[3-(heptafluoropropylhydroxymethylen)-d-camphorat] oder Tris(1,1,1,5,5,6,6,7,7,7-decafluoro-2,4-heptandionato) Europium Dihydrat enthält.
  4. Polymeres Partikel nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass der Substituent R1 in den allgemeinen Formeln 1 bis 12 Wasserstoff, Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl und tert.-Butyl bedeuten kann.
  5. Polymeres Partikel nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass der Substituent R2 in den allgemeinen Formeln 1 bis 12 Wasserstoff, -NHCOAlkyl, -NHCONHR3, -NHCSNHR3, NR4 2 und die Substituenten R3 und R4 Wasserstoff, Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl oder tert.-Butyl und der Substituent Alkyl unabhängig voneinander Methyl, Ethyl, Propyl, 1-Methylethyl (iso-Propyl), Butyl oder tert.-Butyl bedeuten können.
  6. Polymeres Partikel nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass das polymere Partikel eines oder mehrere Monomere ausgewählt aus der Gruppe unpolaren Polymere vorzugsweise der Polyene und besonders bevorzugt der Polystyrole ist.
  7. Polymeres Partikel nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das polymere Partikel ein funktionelles Polymer aufweist.
  8. Verwendung des polymeren Partikels gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7 in einem bioanalytischen Verfahren vorzugsweise in einem fluorometrischen Verfahren, besonders bevorzugt in einem zeitaufgelöstes fluorometrisches Verfahren und ganz besonders bevorzugt in einem FRET-(Förster-Resonanzenergietransfer (FRET) bzw. in einem Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer) Verfahren.
  9. Assay enthaltend wenigstens ein polymeres Partikel gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7.
  10. Verfahren zur Herstellung wenigstens eines polymeren Partikels gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7, umfassend folgende Verfahrensschritte: i) Bereitstellen des polymeren Partikels, ii) Bereitstellen einer Lösung enthaltend mindestens ein Lanthanid- und/oder Lanthanoidion und eine Verbindung der Formel 1–22, iii) in Kontakt bringen der polymeren Partikel mit der mindestens ein Lanthanid- und/oder Lanthanoidion und eine Verbindung der Formel 1–22 enthaltenden Lösung.
DE201110001368 2011-03-17 2011-03-17 Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik Expired - Fee Related DE102011001368B4 (de)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE201110001368 DE102011001368B4 (de) 2011-03-17 2011-03-17 Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE201110001368 DE102011001368B4 (de) 2011-03-17 2011-03-17 Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE102011001368A1 true DE102011001368A1 (de) 2012-09-20
DE102011001368B4 DE102011001368B4 (de) 2013-01-31

Family

ID=46756581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE201110001368 Expired - Fee Related DE102011001368B4 (de) 2011-03-17 2011-03-17 Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE102011001368B4 (de)

Citations (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4374120A (en) 1979-03-08 1983-02-15 Wallac Oy Fluorescence spectroscopy assay means with fluorescent chelate of a lanthanide
EP0203047A1 (de) * 1985-05-23 1986-11-26 Jouko Kankare Fluoreszierende Lanthanidchelate
US5032677A (en) 1987-11-06 1991-07-16 Baxter International Inc. Fluorescent poly(arylpyridine) rare earth chelates
US5095099A (en) * 1990-12-10 1992-03-10 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fluorescent compounds for absorption and re-emission of radiation
DE4222255A1 (de) 1992-07-07 1994-01-13 Bayer Ag Fotochemische Markierung von Nukleinsäuren mit Europiumchelat-Reagenzien und ihre Verwendung in Gensondentestsystemen
WO1996000901A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 The Regents Of The University Of California Luminescent lanthanide chelates and methods of use
WO2000001663A1 (en) 1998-07-07 2000-01-13 Smithkline Beecham Corporation Novel fluorescent lanthanide chelates
WO2000048990A1 (en) * 1999-02-18 2000-08-24 The Regents Of The University Of California Phthalamide-lanthanide complexes for use as luminescent markers
US20030089273A1 (en) * 2001-08-23 2003-05-15 Thomas Potrawa Europium-ammonium tetra chelates
DE69813850T2 (de) 1997-09-19 2004-04-01 Cis Bio International, Saclay Homogene nachweisverfahren zur bestimmung der phosphorylierungsaktivitäten von biologischem material
DE10259677A1 (de) 2002-12-18 2004-07-08 BÜDDEFELD, Jürgen Sonden zum Nachweis von Nukleinsäuren, insbesondere zum Nachweis pathogener Keime in Lebensmitteln
WO2005108405A2 (de) * 2004-05-07 2005-11-17 Sensient Imaging Technologies Gmbh Lanthanoidchelate und ihre anwendung in der bioanalytik
US20080114151A1 (en) * 2004-12-28 2008-05-15 Sumitomo Chemical Company Limited Polymer Compound And Device Using The Same
US7404912B2 (en) * 1999-02-18 2008-07-29 The Regents Of The University Of California Salicylamide-lanthanide complexes for use as luminescent markers
WO2009003700A1 (de) * 2007-07-05 2009-01-08 Merck Patent Gmbh Lumineszierende metallkomplexe für organische elektronische vorrichtungen
GB2451106A (en) * 2007-07-18 2009-01-21 Cis Bio Int Lanthanide (III) ion complexing pyrazoyl-aza(thio)xanthone comprising compounds, their complexes and their use as fluorescent labels
US20100068748A1 (en) * 2005-12-20 2010-03-18 Invitrogen Corporation Fluorescent Ion Indicators for Cadmium and Lanthanide Ion Detection
DE112008002375A5 (de) * 2007-09-03 2010-07-15 Thomas Schalkhammer Sensorische Pigmente für den Einsatz auf Lebensmitteln, Verpackungen, Papier sowie pharmazeutischen und elektronischen Produkten

Patent Citations (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4374120A (en) 1979-03-08 1983-02-15 Wallac Oy Fluorescence spectroscopy assay means with fluorescent chelate of a lanthanide
EP0203047A1 (de) * 1985-05-23 1986-11-26 Jouko Kankare Fluoreszierende Lanthanidchelate
US5032677A (en) 1987-11-06 1991-07-16 Baxter International Inc. Fluorescent poly(arylpyridine) rare earth chelates
US5095099A (en) * 1990-12-10 1992-03-10 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fluorescent compounds for absorption and re-emission of radiation
DE4222255A1 (de) 1992-07-07 1994-01-13 Bayer Ag Fotochemische Markierung von Nukleinsäuren mit Europiumchelat-Reagenzien und ihre Verwendung in Gensondentestsystemen
WO1996000901A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 The Regents Of The University Of California Luminescent lanthanide chelates and methods of use
DE69813850T2 (de) 1997-09-19 2004-04-01 Cis Bio International, Saclay Homogene nachweisverfahren zur bestimmung der phosphorylierungsaktivitäten von biologischem material
WO2000001663A1 (en) 1998-07-07 2000-01-13 Smithkline Beecham Corporation Novel fluorescent lanthanide chelates
US7404912B2 (en) * 1999-02-18 2008-07-29 The Regents Of The University Of California Salicylamide-lanthanide complexes for use as luminescent markers
WO2000048990A1 (en) * 1999-02-18 2000-08-24 The Regents Of The University Of California Phthalamide-lanthanide complexes for use as luminescent markers
US20030089273A1 (en) * 2001-08-23 2003-05-15 Thomas Potrawa Europium-ammonium tetra chelates
DE10259677A1 (de) 2002-12-18 2004-07-08 BÜDDEFELD, Jürgen Sonden zum Nachweis von Nukleinsäuren, insbesondere zum Nachweis pathogener Keime in Lebensmitteln
WO2005108405A2 (de) * 2004-05-07 2005-11-17 Sensient Imaging Technologies Gmbh Lanthanoidchelate und ihre anwendung in der bioanalytik
US20080114151A1 (en) * 2004-12-28 2008-05-15 Sumitomo Chemical Company Limited Polymer Compound And Device Using The Same
US20100068748A1 (en) * 2005-12-20 2010-03-18 Invitrogen Corporation Fluorescent Ion Indicators for Cadmium and Lanthanide Ion Detection
WO2009003700A1 (de) * 2007-07-05 2009-01-08 Merck Patent Gmbh Lumineszierende metallkomplexe für organische elektronische vorrichtungen
GB2451106A (en) * 2007-07-18 2009-01-21 Cis Bio Int Lanthanide (III) ion complexing pyrazoyl-aza(thio)xanthone comprising compounds, their complexes and their use as fluorescent labels
DE112008002375A5 (de) * 2007-09-03 2010-07-15 Thomas Schalkhammer Sensorische Pigmente für den Einsatz auf Lebensmitteln, Verpackungen, Papier sowie pharmazeutischen und elektronischen Produkten

Non-Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2000, 2359-2360
A. Dadabhoy et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2002, 348-357
F. J. Steemers et al., J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 9408-9414
H. Takalo et al. beschreiben im J. Alloy. Compd., 1995, 225, 511-514 Tb(III)- und Eu(III)-Chelate
I. Hemmilää, und S. Webb in Drug Discov. Today, 1997, 2, 373-381
K. D. Bartle, G. Hallas und J. D. Hepworth, Organic Magnetic Resonance Vol. 7, 1973, 154-159
K. Matsumoto et al., RIKEN Review 35, May, 2001
M. H. V. Werts et al., Chem. Commun., 1999, 799-800
M. H. V. Werts et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 2000, 433-439
R. D. Archer, H. Chen, Inorg. Chem., 1998, 37, 2089-2095
R. van Deun et al., Chem. Commun., 2005, 590-592
Steemers et al.
Werts et al.
Y. Wen et al., Polym. Adv. Technol., Article first published online : 21 SEP 2009, DOI: 10.1002/pat.1552

Also Published As

Publication number Publication date
DE102011001368B4 (de) 2013-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0566948B1 (de) Verbessertes Verfahren zur Kennzeichnung von Kunststoff
Bhalla et al. Pentaquinone based probe for nanomolar detection of zinc ions: chemosensing ensemble as an antioxidant
Zhou et al. Synthesis, optical properties and biological imaging of the rare earth complexes with curcumin and pyridine
Rudkevich et al. Calix [4] arene-triacids as receptors for lanthanides; synthesis and luminescence of neutral Eu 3+ and Tb 3+ complexes
DE102004022628A1 (de) FRET-Bioassay
DE102008033871A1 (de) Abstandsgesteuerte Energietransfer-Farbstoffkomplexe
DE60019918T2 (de) Subphthalocyaninfarbstoffe, tintezusammensetzungen und deren herstellungsverfahren
EP2286916B1 (de) Verfahren und Verwendung lumineszenter Verbindungen zur Messung einer photokatalytischen Oberflächenaktivität
DE19637433A1 (de) Metall-eingekapselte Fullerenverbindung und Verfahren zu deren Herstellung
Borozdina et al. Tuning the sensitivity of fluorophore–nitroxide radicals
CN110950854B (zh) 一种关-开型分子荧光探针cmtah及其制备方法与应用
DE19919119A1 (de) Neue Carbopyronin-Fluoreszenz-Farbstoffe
EP1054039B1 (de) Neue Fluoreszenzfarbstoffe und ihre Verwendung als Fluoreszenzmarker
Gong et al. A novel AIE-active camphor-based fluorescent probe for simultaneous detection of Al 3+ and Zn 2+ at dual channels in living cells and zebrafish
KR101539821B1 (ko) Ｏ-페놀살리실이민（ｐｓｉ） 화합물 및 그 유도체를 포함하는 알루미늄 이온 검출제, 이를 이용한 검출 방법 및 검출장치
Mizzoni et al. Circularly polarized activity from two photon excitable europium and samarium chiral bioprobes
US20090155837A1 (en) Two-photon fluorescent probes for acidic vesicles in live cells and tissue and method of imaging acidic vesicles in live cells and tissue using the same
DE102011001368B4 (de) Lanthanoid-Chelate enthaltende Partikel, deren Herstellung sowie deren Verwendung in der Bioanalytik
EP1765942A1 (de) Photostabilisierung von fluoreszenzfarbstoffen
EP0281829A2 (de) Addukte aus Ketoverbindungen und Anionen von Oxasäuren, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung sowie Azoketoverbindungen.
EP2399913A1 (de) Fluoreszenzfarbstoff und seine Verwendung
CN107831165A (zh) 一种双通道铜离子检测试纸及其制备方法
DE60016323T2 (de) Neue Pyrylium Verbindung, Verfahren zu ihrer Herstellung, Nucleinsäure-Färbemittel und markierte Nucleinsäure
DE102016106103B4 (de) Organische Moleküle mit zwei nicht-konjugierten Brücken zwischen Donator und Akzeptor, deren Verwendung zur Emission von Licht, sowie opto-elektronische Vorrichtungen und deren Herstellung
Gonçalves et al. BODIPY derivatives: Synthesis and evaluation of their optical properties

Legal Events

Date Code Title Description
R012 Request for examination validly filed
R016 Response to examination communication
R018 Grant decision by examination section/examining division
R020 Patent grant now final

Effective date: 20130501

R119 Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee