DE102004001145A1 - Lactose-Messsystem - Google Patents

Abstract

Lactose-Messystem, dadurch gekennzeichnet, dass Proben mit Hilfe eines Blutzuckermessgerätes mit Kontroll-Lösung, einem Pipette und β-Galactosidase-Lösung auf ihren Lactosegehalt untersucht werden können.

Description

• Es ist bekannt, den Glucosegehalt von Blutproben mit Blutzuckermessgeräten (etwa Bayer Glucometer Dex^®) zu bestimmen. Es ist ebenfalls bekannt, das β-Galactosidase Lactose in Glucose und Galactose spaltet. Lactosetests, die auf einer pH-Wert-Messung beruhen, werden für den Gebrauch in klinischen Laboratorien angeboten (Schlag, BG: Schnelltest für Lactose-Wissenschaftliche Messinstrumente, Bergisch-Gladbach, 2002 und Shermna, SK, Sehgal, N, Kunar, A: A quick and simple biostrip technique for detection of lactose Biotech. Letters, 24/20, S. 1737-1739, 2000).
• Nachteile des Standes der Technik:
• Zur Durchführung von Lactose-Messungen ist derzeit eine Laborausstattung erforderlich. Z. B. haben Patienten mit Lactose-Intoleranz bisher keine Möglichkeit, den Lactosegehalt von Lebensmitteln und damit ihre Verträglichkeit selbstständig zu kontrollieren. Daten zum Lactosegehalt von Nahrungsmitteln sind kaum zugänglich.
• Diese Aufgabe wird durch ein Messsystem mit den Merkmalen des Anspruchs I geflöst.
• Lösung der Aufgabe/Vorteile der Erfidung:
• Mit dem Lactose-Messsystem können Lactose-Messungen auf einfache Weise durchgeführt werden. Patienten können den Lactosegehalt von Nahrungsmitteln selbstständig bestimmen und somit Daten zur Kontrolle ihrer Diät erhalten.
• Die Messungen sind weder zeit- noch kostenaufwädig, mit einfachen Miteln durchzuführen, erfordern keinerlei Vorkenntnisse.
• Ausführungsbeispiele sind in der folgenden Messvorschrift dargestellt:
  Zur Gewinnung von Daten mit dem Lactose-Messsystem geht man folgenderweise vor:
  Probengewinnung: Flüssige Proben können direkt eingesetzt werden, feste Proben nachdem sie fein zerkleinert und in Lösung gebracht worden sind. In Wasser zunächst unlösliche Nahrungsmittel sollten im Wasserbad erhitzt werden (etwa 20 min bei ca. 60°C). Die Probe wird aus der wässrigen Phase entnommen, in der die Lactose gelöst ist. Ist der Glucose- und/oder der Lactosegehalt der Probe sehr hoch (jeweils über 30mmol/L), muss sie mit Wasser verdünnt werden.
  Hydrolyse: 50μL der Probe werden mit einer standardisierten Lösung – 40μL 2 mM MgCl₂ in PBS, 10μL Enzymlösung (β-Galactosidase in 2 mM MgCl₂ in PBS) – bei Raumtemperatur 25 min inkubiert.
  Messung: Nach der Hydrolyse werden 10μL des Produktes mit dem gleichen Volumen 0,15% Glucose-Kontroll-Lösung (Teil des Messgeräts) in das Blutzuckermessgerät gegeben. 5μL nicht mit der Hydrolyse-Lösung versetzte Probe werden mit 5μL Wasser und 10μL Kontroll-Lösung gemessen, um ihren Glucosegehalt zu bestimmen.
• Formel zur quantitativen Bestimmung von Lactose
• Der Lactosegehalt L (in g/100mL) errechnet sich wie folgt: L = (mh – m0 – k1)·v·Vw·k2

m_h

Messwert der hydrolysierten Probe

m₀

Messwert der nicht-hydrolysierten Probe k₁ = 5,1 mmol/L (hervorgerufen durch die eingesetzte Enzymmenge)

v

Verdünungsfaktor

V_w

Anteil der wässrigen Phase am Gesamtvolumen (Näherung über Fettgehalt der Probe) k₂ = ·0,036 (g/100mL)/(mmol/L) (Umrechnung der Einheiten)

• Qualitative Bestimmung von Lactose:
• Einfacher ist die qualitative Bestimmung von Lactose: Ist der nach o.a. Vorschrift erhaltene Messwert der hydrolysierten Probe um mehr als 5,1 mmol/L größer als der der nicht hydrolysierten, enthält das getestete Nahrungsmittel Lactose.
• Ein sofortiger qualitativer Nachweis ist in Proben mit relativ hohem Lactosegehalt (z.B. Milch) auch ohne Abwarten der regulären Hydrolyse-Zeit möglich.
• Bestimmung von Galactose:
• Mit Hilfe dieser Messvorschrift lässt sich auch der Gehalt einer Probe an Galactose aus Lactose errechnen.
• Messung anderer Disaccharide:
• Ersetzt man die β-Galactosidase- durch andere Enzymlösungen, Disaccharidasen, die andere glucosehaltige Dissaccharide spalten, lassen sich diese Kohlehydrate analog zur Lactose (vgl. oben) nachweisen.

Claims (2)

1. Lactose-Messystem, dadurch gekennzeichnet, dass Proben mit Hilfe eines Blutzuckermessgerätes mit Kontroll-Lösung, einem Pipette und β-Galactosidase-Lösung auf ihren Lactosegehalt untersucht werden können.
2. Messsystem nach Ansruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die Messung nach einer der in B aufgeführten Vorgehensweisen oder einer wergleichbaren Messvordvhrift durchgehend wird.