DE10156436A1 - Process for inducing the production of stress proteins in plant material - Google Patents

Process for inducing the production of stress proteins in plant material

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Ralf Goldmann
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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Induktion der innerzellulären Produktion von Stressproteinen in pflanzlichem Material, wobei hochwertige Futtermittel und/oder reine Stressproteine erhalten werden.The invention relates to a method for inducing the intracellular production of stress proteins in plant material, high-quality feed and / or pure stress proteins being obtained.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Induktion der innerzellulären Produktion von Stressproteinen in pflanzlichem Material, wobei hochwertige Futtermittel und/oder reine Stressproteine erhalten werden. The present invention relates to a method for inducing intracellular Production of stress proteins in plant material, with high quality Feed and / or pure stress proteins can be obtained.

Hitzestressproteine, die auch als HSPs bezeichnet werden, werden in einer Zelle gebildet, wenn diese einer Stresssituation, wie Wärme, ausgesetzt wird. Es ist eine große Anzahl an Genen bekannt, die Stressproteine kodieren. Die wichtigsten Stressproteine werden in vier Familien eingeteilt, nämlich HSP 90, HSP 70, HSP 60 und eine niedermolekulare HSP-Familie. Die niedermolekulare HSP-Familie hat als wichtigste Mitglieder HSP 45, HSP 20 und HSP 17. Heat stress proteins, also known as HSPs, are formed in a cell when it is exposed to a stressful situation, such as heat. A large number of genes that encode stress proteins are known. The main stress proteins are divided into four families, namely HSP 90 , HSP 70 , HSP 60 and a low-molecular HSP family. The most important members of the low-molecular HSP family are HSP 45 , HSP 20 and HSP 17 .

Auch wenn die genaue Wirkungsweise und Funktion von Stressproteinen, auch als Chaperone bekannt, noch nicht vollständig erforscht ist, wird angenommen, dass diese die korrekte Faltung von Proteinen überwachen, falsch gefaltete Proteine restrukturieren, die Zelle und insbesondere die DNA und auch die mRNA vor schädigenden Umwelteinflüssen schützen sowie eine wesentliche Rolle in der Stimulierung des Immunsystems spielen. Daher finden Stressproteine Verwendung auf den Gebieten der Medizin, Veterinärmedizin, Molekularbiologie, Pharmazie, Kosmetik und dem Pflanzenschutz. Even if the exact mode of action and function of stress proteins, too Known as chaperones, not yet fully understood, it is believed that they monitor the correct folding of proteins, wrongly folded ones Restructuring proteins, the cell and especially the DNA and also the Protect mRNA from damaging environmental influences as well as an essential one Play a role in stimulating the immune system. Therefore find Stress proteins use in the fields of medicine, veterinary medicine, Molecular biology, pharmacy, cosmetics and crop protection.

Verfahren zur Induktion der Produktion von Stressproteinen in pflanzlichem Material sind bekannt. So ist beispielsweise in der WO 00/70931 ein Verfahren zum Herstellen von Stressproteinen aus pflanzlichem Material beschrieben, wobei die Pflanzen geerntet und unmittelbar vor und/oder während und/oder nach dem Ernten erwärmt werden, um die Produktion von Stressproteinen in dem pflanzlichen Material zu induzieren. Process for inducing the production of stress proteins in plants Material is known. For example, WO 00/70931 describes a method described for the production of stress proteins from plant material, the plants being harvested and immediately before and / or during and / or After harvesting, be warmed to the production of stress proteins to induce the vegetable material.

Das Erwärmen kann dabei durch Einbringen des pflanzlichen Materials in verschlossene Behälter erfolgen, wodurch sich das pflanzliche Material aufgrund der endobiochemischen Vorgänge erwärmt, oder durch Verwendung eines Strahlers oder Gebläses durchgeführt werden. The heating can be done by introducing the vegetable material into sealed containers take place, which causes the vegetable material due of the endobiochemical processes, or by using a Radiator or blower.

Allerdings sind diese Verfahren zum Erwärmen des pflanzlichen Materials aufwendig und ermöglichen keine gleichmäßige Erwärmung des geschnittenen Pflanzenmaterials. Daher liegt der Erfindung die Aufgabe zugrunde, diese Nachteile des Standes der Technik zu überwinden. However, these are methods of heating the plant material complex and do not allow uniform heating of the cut Plant material. The invention is therefore based on the object To overcome disadvantages of the prior art.

Die Lösung der Aufgabe ist ein Verfahren umfassend die Schritte, a) Bereitstellen von pflanzlichem Material, b) Einbringen des pflanzlichen Materials in ein flüssiges Medium mit einer für die Induktion von Stressproteinen geeigneten Temperatur, und gegebenfalls c) Abtrennen des pflanzlichen Materials. The solution to the problem is a method comprising the steps, a) Providing plant material, b) introducing the plant material into a liquid medium with a suitable for the induction of stress proteins Temperature, and optionally c) separating the plant material.

Im Sinne dieser Erfindung umfasst der Begriff "pflanzliches Material" sowohl Pflanzen und Samen als auch geerntetes pflanzliches Material jeder Art. For the purposes of this invention, the term “vegetable material” encompasses both Plants and seeds as well as harvested plant material of all kinds.

In einer Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens wird zum Bereitstellen des pflanzlichen Materials in Schritt a) das pflanzliche Material geerntet, vorzugsweise vor der Blüte. Als pflanzliches Material werden vorzugsweise Wasserpflanzen, Algen, Sojabohnen, Gras, Getreide und/oder Luzerne verwendet. In one embodiment of the method according to the invention Providing the vegetable material in step a) harvesting the vegetable material, preferably before flowering. As a vegetable material are preferred Aquatic plants, algae, soybeans, grass, cereals and / or alfalfa used.

Nach dem Ernten wird das pflanzliche Material vorzugsweise innerhalb von 10 bis 120 min., am besten zwischen 30 und 60 min. in unzerkleinerter Form gemäß Schritt b) in das flüssige Medium eingebracht. Das flüssige Medium ist vorzugsweise Wasser, das mit weiteren Stressoren versetzt werden kann. Die Temperatur des flüssigen Mediums sowie gegebenenfalls die zusätzlichen Stressoren sind geeignet, um die Produktion von Stessproteinen im pflanzlichen Material zu induzieren. Hierbei sollte die Temperatur des flüssigen Mediums vorzugsweise etwa 30 bis etwa 55°C betragen. Die Dauer der Induktion liegt vorzugsweise zwischen etwa 10 min. und etwa 300 min., am besten zwischen 30 und 120 min. After harvesting, the vegetable material is preferably grown within 10 up to 120 min., preferably between 30 and 60 min. in uncrushed form introduced into the liquid medium according to step b). The liquid medium is preferably water that can be mixed with other stressors. The Temperature of the liquid medium and, if necessary, the additional Stressors are suitable for the production of stress proteins in the plant To induce material. This should be the temperature of the liquid medium preferably about 30 to about 55 ° C. The duration of the induction is preferably between about 10 minutes. and about 300 min., preferably between 30 and 120 min.

Hierbei kann die Temperatur entweder voreingestellt sein, oder aber in variablen zeitlichen Abständen erhöht oder erniedrigt werden. Es ergeben sich so unterschiedliche Induktionszeiten und damit unterschiedliche Hitzestressreaktionen der Pflanzen bzw. Pflanzenteile, die wiederum zu unterschiedlichen HSP-Syntheseprofilen führen. Beispielsweise kann die Temperatur des Induktionsbades über der Induktionsdauer gleichmäßig von 25°C auf bis zu 55°C erhöht werden. Beispielsweise kann diese Temperaturerhöhung während eines Zeitabschnittes von 30 bis 60 min. während der Gesamtinduktionsdauer erfolgen. Als vorteilhaft erweist sich auch die Induktion mit einem Wechselbad, wobei das erste Induktionsbad eine Temperatur bis 55°, vorzugsweise um 40°C aufweist und ein zweites Induktionsbad eine Temperatur zwischen 25° und 30°C aufweist und die Pflanzen bzw. Pflanzenbestandteile zuerst für etwa 10 min. dem ersten Induktionsbad ausgesetzt werden, anschließend etwa 15 min. dem zweiten Induktionsbad und dann wieder bis zu 180, vorzugsweise 90 bis 120 min. dem ersten Induktionsbad. The temperature can either be preset or in variable time intervals are increased or decreased. So it turns out different induction times and therefore different Heat stress reactions of the plants or parts of plants, which in turn lead to different Lead HSP synthesis profiles. For example, the temperature of the Induction bath evenly over the induction period from 25 ° C up to 55 ° C increase. For example, this temperature increase during a Period from 30 to 60 min. during the total induction period respectively. Induction with an alternating bath also proves to be advantageous, wherein the first induction bath has a temperature of up to 55 °, preferably around 40 ° C. and a second induction bath has a temperature between 25 ° and 30 ° C. has and the plants or plant components first for about 10 min. exposed to the first induction bath, then about 15 min. the second induction bath and then again up to 180, preferably 90 to 120 min. the first induction bath.

Durch das Einbringen in ein flüssiges Medium bei einer geeigneten Temperatur wird das pflanzliche Material im Unterschied zu dem vorbekannten Verfahren gleichmäßig erwärmt, wobei die gleichmäßige Erwärmung durch eine in dem Induktionsbad vorhandene Umwälzanlage mit einer senkrechten Strömungsrichtung unterstützt werden kann. By placing it in a liquid medium at a suitable temperature the vegetable material is different from the previously known method evenly heated, the uniform heating by one in the Induction bath existing circulation system with a vertical Flow direction can be supported.

Zusätzlich zum Erwärmen kann das pflanzliche Material vor, während und/oder nach, vorzugsweise während, Schritt b) zusätzlichen chemischen und/oder physikalischen Stressoren ausgesetzt werden. Als zusätzliche physikalische Stressoren können Lichtmangel, elektromagnetische Felder sowie eine UV-Strahlung eingesetzt werden. In addition to heating, the vegetable material can be before, during and / or after, preferably during, step b) additional chemical and / or exposed to physical stressors. As an additional physical Stressors can be lack of light, electromagnetic fields and UV radiation be used.

Als zusätzliche chemische Stressoren können hohe Salzkonzentrationen, Alkohole oder Schwermetallionen, vorzugsweise Kupferionen, Aluminiumionen, Zinkionen verwendet werden. Dadurch wird der Stress auf die lebende Pflanzenzelle erhöht, die Produktion der Stressproteine zusätzlich induziert und die Erwärmungsdauer im Induktionsbad nach der etwa 10 Minuten dauernden Umstellung der Proteinsynthese in der Zelle verkürzt. As additional chemical stressors, high salt concentrations, Alcohols or heavy metal ions, preferably copper ions, aluminum ions, Zinc ions are used. This will relieve the stress on the living Plant cell increases, the production of the stress proteins is additionally induced and the Heating time in the induction bath after about 10 minutes Changeover of protein synthesis in the cell shortened.

Außerdem kann das pflanzliche Material vor, während und/oder nach, vorzugsweise während Schritt b), Aktivatoren ausgesetzt werden, die den pflanzlichen Stoffwechsel anregen. Als Aktivatoren können dem Induktionsbad zur Versorgung des lebenden pflanzlichen Materials Nährstoffe, wie CO2 und Spurenelemente sowie Dünger zusetzt werden oder das pflanzliche Material wird zusätzlich einer niedrigenergetischen Ultraschallbelastung ausgesetzt. Durch die Aktivatoren wird der Stoffwechsel der Zellen angeregt, wodurch wiederum die Produktion der Stressproteine während des Einflusses von die Produktion der Stressproteine induzierenden Stressoren erhöht wird. In addition, the plant material can be exposed to activators which stimulate the plant metabolism before, during and / or after, preferably during step b). As inducers, nutrients such as CO 2 and trace elements as well as fertilizer can be added to the induction bath to supply the living plant material or the plant material is additionally exposed to a low-energy ultrasound load. The activators stimulate the metabolism of the cells, which in turn increases the production of the stress proteins during the influence of stressors inducing the production of the stress proteins.

Vorteilhafterweise wird das pflanzliche Material in Schritt b) in einem Tauchbecken in das flüssige Medium eingebracht. Das pflanzliche Material kann auch in mehrere Tauchbecken nacheinander mit unterschiedlichen Temperaturen eingebracht werden. Außerdem kann das pflanzliche Material nach der Induktion in ein gekühltes flüssiges Medium, vorzugsweise Wasser, eingebracht werden, um die Resorption und den Autoabbau der induzierten HSP vor der Weiterverarbeitung zu verlangsamen oder sogar ganz zu unterbinden. Advantageously, the plant material in step b) in one Plunge pool introduced into the liquid medium. The herbal material can also be in several plunge pools in succession with different temperatures be introduced. In addition, the plant material after induction in a cooled liquid medium, preferably water, can be introduced in order the absorption and auto-degradation of the induced HSP before the Slow down further processing or even prevent it altogether.

In Schritt c) wird das pflanzliche Material vom flüssigen Medium abgetrennt. Das Abtrennen kann vorzugsweise mittels Einbringen des pflanzlichen Materials in eine Schleuder erfolgen. In step c) the vegetable material is separated from the liquid medium. The separation can preferably be carried out by introducing the vegetable material done in a slingshot.

Sollte es erwünscht sein, das pflanzliche Material noch weiter vom flüssigen Medium zu befreien, kann dieses in eine Vakuumtrockenkammer eingebracht werden. Bevorzugt ist die Temperatur in der Vakuumtrockenkammer etwa 4°C, was vorzugsweise durch zusätzliches Erwärmen des Trocknungsgutes durch Infrarotstrahlung erreicht wird. Da vorzugsweise das pflanzliche Material nicht zerkleinert ist und daher lebende Zellen in dem pflanzlichen Material enthalten sind, wird beim Einbringen in die Vakuumtrockenkammer eine abschließende Induktion der Produktion von Stressproteinen durch Kälte, Sauerstoffmangel und/oder Eisbildung auf dem pflanzlichen Material bewirkt. Should it be desirable to further remove the vegetable material from the liquid To free the medium, it can be placed in a vacuum drying chamber become. The temperature in the vacuum drying chamber is preferably about 4 ° C. which is preferably carried out by additional heating of the items to be dried Infrared radiation is reached. Because preferably the vegetable material is not is crushed and therefore contains living cells in the plant material are a final one when placed in the vacuum drying chamber Induction of the production of stress proteins through cold, lack of oxygen and / or ice formation on the plant material.

Nach Schritt c) kann das pflanzliche Material zusätzlich zerkleinert und verpresst werden, wobei das Verpressen insbesondere so durchgeführt wird, dass "lose" press cakes erhalten werden, und während des Pressvorganges die Temperatur deutlich unter 95°C, vorzugsweise unterhalb von 45°C gehalten wird. Dieses ist notwendig, da den vorbekannten Presstechniken mit sehr hohem Druck ein hochverdichteter press cake erzeugt wird und die dabei entstehenden Presstemperaturen zum Abbau oder zur Denaturierung der induzierten HSP führen. Mit den niedrigen Presstemperaturen wird ein erfindungsgemäßes, einen hohen HSP-Anteil aufweisendes Futtermittel erhalten. After step c), the vegetable material can also be crushed and be pressed, the pressing being carried out in particular in such a way that "loose" press cakes are obtained, and during the pressing process Temperature kept well below 95 ° C, preferably below 45 ° C becomes. This is necessary because the known press techniques with very high pressure, a highly compressed press cake is created and this arising press temperatures for degradation or denaturation of the induced Lead HSP. With the low pressing temperatures, an inventive receive a high proportion of feed containing HSP.

Das erfindungsgemäße Futtermittel wird bevorzugt in luftdichte Beutel unter Stickstoff oder Vakuum verpackt, damit wird eine Konservierung mit chemischen Konservierungsmitteln vermieden. The feed according to the invention is preferably placed in airtight bags Packaged with nitrogen or vacuum so that it is preserved with chemical preservatives avoided.

Das erfindungsgemäße Futtermittel hat eine Restfeuchte von < 10% und enthält etwa 0,5 bis etwa 50 g Stressproteine pro Tonne Futtermittel. Daher ist es ausgezeichnet geeignet als Zusatzfuttermittel für Tiere, da auch bei Tieren oral gegebene HSP das Immunsystem stabilisieren. Eine erfindungsgemäße Anlage zur Erzeugung HSP-haltiger Futtermittel wird vorzugsweise einen Durchsatz von einer bis vier Tonnen pro Stunde ermöglichen. The feed according to the invention has a residual moisture content of <10% and contains about 0.5 to about 50 g of stress proteins per ton of feed. Therefore, it is excellently suitable as additional feed for animals, as oral in animals too given HSP stabilize the immune system. A system according to the invention throughput is preferably used to produce feed containing HSP enable from one to four tons per hour.

In einer anderen Ausführungsform der Erfindung werden als pflanzliches Material Samen, Wasserlinsen oder Algen verwendet. Die Samen werden vorzugsweise vor der Verwendung in dem erfindungsgemäßen Verfahren ohne Licht zum Keimen gebracht. Das hat den Vorteil, dass sich kein Chlorophyll und so gut wie kein Rubisco bildet, die bei der Gewinnung hochreiner HSP später abgetrennt werden müßte. Die Algen bzw. Wasserlinsen können vorzugsweise bei optimaler Nährstoffzufuhr und leichtem Temperaturstreß bei Temperaturen zwischen etwa 25 bis etwa 35°C und gegebenenfalls unter niedrigenergetischer Ultraschallbehandlung vermehrt werden bevor sie dem oder den Induktionsbädern ausgesetzt werden. In another embodiment of the invention are considered herbal Material uses seeds, duckweed or algae. The seeds will preferably before use in the process according to the invention without light germinated. The advantage is that there is no chlorophyll and such virtually no Rubisco forms that later in the extraction of high purity HSP would have to be separated. The algae or duckweed can preferably be optimal nutrient supply and slight temperature stress at temperatures between about 25 to about 35 ° C and optionally below low-energy ultrasound treatment are multiplied before the Induction baths are exposed.

Für die Gewinnung hochreiner HSP werden die Schritte b) und c) gemäß der vorstehend beschriebenen Ausführungsform durchgeführt, wobei das pflanzliche Material nach Schritt c) vorzugsweise nicht in eine Vakuumtrockenkammer eingebracht wird. To obtain high-purity HSP, steps b) and c) according to the embodiment described above, wherein the Vegetable material after step c) preferably not in a vacuum drying chamber is introduced.

Sodann wird das in Schritt c) abgetrennte pflanzliche Material durch Schneiden und Aufmahlen weiter verarbeitet. Das erhaltene Mahlgut wird daraufhin einer Mikrofiltration, wie Abpressen mittels einer Membran mit 150 kDalton oder einer keramischen oder polymeren Hohlfaser gleicher Porengröße, unterworfen. Der so erhaltene Saft wird einer Ultrafiltration gegen eine Ultrafiltrationskaskade mit 80, 60, 30 und 10 kDalton unterworfen. Vorzugsweise wird das pflanzliche Material nach Schritt c) bei einer Temperatur von etwa 2°C weiterverarbeitet, um die Protease, den Abbau der HSP durch Enzyme zu vermeiden. Then the vegetable material separated in step c) is cut and grinding further processed. The regrind obtained then becomes one Microfiltration, such as pressing using a membrane with 150 kDalton or ceramic or polymeric hollow fiber of the same pore size. The juice obtained in this way is subjected to ultrafiltration against an ultrafiltration cascade Subjected to 80, 60, 30 and 10 kDaltons. Preferably the vegetable Material after step c) processed at a temperature of about 2 ° C to the protease to avoid degradation of the HSP by enzymes.

Die nach der Ultrafiltration erhaltenen Retenate werden zur Isolierung der jeweilig in den Retenaten enthaltenen Stressproteine einer Chromatographiefolge aus einer Ionenaustauscher- und Afflnitätschromatographie unterzogen. The retenates obtained after ultrafiltration are used to isolate the stress proteins of a chromatography sequence contained in the Retenates from ion exchange and affinity chromatography.

Ebenfalls kann die Abscheidung der HSP mit einem geeigneten Antikörper, vorzugsweise mit einem magnetisch markierten Antikörper und einer Abtrennung in einem Magnetfeld oder einer geeigneten, die Antikörper bindenden Oberfläche, erfolgen. Hierbei kann der Saft nach der Mikrofiltration in Verbindung mit unterschiedlichen Antikörpern zur Gewinnung unterschiedlicher HSP genutzt werden oder es werden die nach den jeweiligen Ultrafiltrationsschritten gewonnen Retentate genutzt. Dadurch werden hochreine Stressproteine erhalten, wobei die Anlage zur Gewinnung hochreiner HSP auf die Verarbeitung bis zu 100 kg Pflanzenmaterial ausgelegt sein kann, aus dem zum Beispiel bis zu 5 g HSP 70 gewonnen werden können. The HSP can also be deposited with a suitable antibody, preferably with a magnetically labeled antibody and separated in a magnetic field or with a suitable surface which binds the antibodies. The juice after microfiltration can be used in conjunction with different antibodies to obtain different HSPs or the retentates obtained after the respective ultrafiltration steps. This gives high-purity stress proteins, and the plant for obtaining high-purity HSP can be designed for processing up to 100 kg of plant material, from which, for example, up to 5 g of HSP 70 can be obtained.

Claims (19)

1. Verfahren zur Induktion der Produktion von Stressproteinen in pflanzlichem Material, umfassend die Schritte, a) Bereitstellen von pflanzlichem Material, und b) Einbringen des pflanzlichen Materials in ein flüssiges Medium mit einer für die Induktion der Produktion von Stressproteinen geeigneten Temperatur. 1. A method for inducing the production of stress proteins in plant material, comprising the steps a) providing plant material, and b) placing the plant material in a liquid medium at a temperature suitable for inducing the production of stress proteins. 2. Verfahren nach Anspruch 1, zusätzlich den Schritt umfassend, a) Abtrennen des pflanzlichen Materials vom flüssigen Medium. 2. The method according to claim 1, additionally comprising the step a) separating the plant material from the liquid medium. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei das pflanzliche Material ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Wasserpflanzen, Algen, Sojabohnen, Gras, Getreide, Luzerne, und deren Samen. 3. The method according to claim 1 or 2, wherein the vegetable material is selected from the group consisting of aquatic plants, algae, Soybeans, grass, cereals, alfalfa, and their seeds. 4. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das in Schritt b) verwendete flüssige Medium Wasser ist. 4. The method according to any one of the preceding claims, wherein in step b) liquid medium used is water. 5. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei die Temperatur des flüssigen Mediums in Schritt b) 30 bis 55°C beträgt. 5. The method according to any one of the preceding claims, wherein the Temperature of the liquid medium in step b) is 30 to 55 ° C. 6. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei Schritt b) etwa 10 bis etwa 300 min. durchgeführt wird. 6. The method according to any one of the preceding claims, wherein step b) about 10 to about 300 minutes. is carried out. 7. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das in Schritt b) in ein flüssiges Medium eingebrachte pflanzliche Material zusätzlich chemischen und/oder physikalischen Stressoren ausgesetzt wird. 7. The method according to any one of the preceding claims, wherein in step b) additionally plant material introduced into a liquid medium chemical and / or physical stressors is exposed. 8. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das in Schritt b) in ein flüssiges Medium eingebrachte pflanzliche Material zusätzlich Aktivatoren für den Pflanzenstoffwechsel ausgesetzt werden. 8. The method according to any one of the preceding claims, wherein in step b) additionally plant material introduced into a liquid medium Activators for plant metabolism are exposed. 9. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das pflanzliche Material in Schritt b) in einem Tauchbecken in das flüssige Medium eingebracht wird. 9. The method according to any one of the preceding claims, wherein the Vegetable material in step b) in a plunge pool in the liquid medium is introduced. 10. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das flüssige Medium mit Durchströmung des Induktionsgutes in Schritt b) umgewälzt wird. 10. The method according to any one of the preceding claims, wherein the liquid Medium circulated with flow through the induction material in step b) becomes. 11. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei Schritt b) 1 bis 3-mal wiederholt wird, wobei die Temperatur in einem ersten Induktionsbad bis zu 55°C und in einem zweiten Induktionsbad bis zu 35°C beträgt. 11. The method according to any one of the preceding claims, wherein step b) 1 is repeated 3 times, with the temperature in a first Induction bath up to 55 ° C and in a second induction bath up to 35 ° C is. 12. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 11, wobei das pflanzliche Material in Schritt c) von dem flüssigen Medium mittels einer Schleuder abgetrennt wird. 12. The method according to any one of claims 2 to 11, wherein the vegetable Material in step c) from the liquid medium using a centrifuge is separated. 13. Verfahren nach Anspruch 12, wobei das pflanzliche Material zusätzlich durch Einbringen in eine Vakuumtrockenkammer vom flüssigen Medium abgetrennt wird. 13. The method according to claim 12, wherein the vegetable material additionally by introducing the liquid medium into a vacuum drying chamber is separated. 14. Verfahren nach Anspruch 13, wobei der Druck in der Vakuumkammer kontinuierlich abgesenkt wird und die Temperatur in der Vakuumkammer etwa 2 bis etwa 6°C beträgt. 14. The method of claim 13, wherein the pressure in the vacuum chamber is continuously lowered and the temperature in the vacuum chamber is about 2 to about 6 ° C. 15. Verfahren nach einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das pflanzliche Material nach Schritt c) zerkleinert wird. 15. The method according to any one of the preceding claims, wherein the vegetable material is crushed after step c). 16. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 15, wobei das pflanzliche Material nach Schritt c) vorzugsweise bei einer Presstemperatur unter 45°C verpresst wird. 16. The method according to any one of claims 2 to 15, wherein the vegetable Material after step c) preferably at a pressing temperature below 45 ° C is pressed. 17. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 bis 16, wobei das pflanzliche Material nach Schritt c) ausgemahlen und der Pflanzensaft abgepreßt bzw. abzentrifugiert wird. 17. The method according to any one of claims 2 to 16, wherein the vegetable After step c), the material is ground and the plant juice is squeezed out or centrifuged. 18. Verfahren nach Anspruch 17, wobei das gemahlenen pflanzliche Material einer Mikrofiltration, Ultrafiltration, Chromatograpie und/oder Trennung mit geeigneten Antikörpern einmal oder mehrmals unterworfen wird, wodurch einzelne reine Stressproteine wie HSP 70 oder mehrere HSP- Arten in einem Arbeitsgang erhalten werden. 18. The method according to claim 17, wherein the ground plant material is subjected to microfiltration, ultrafiltration, chromatography and / or separation with suitable antibodies once or more, whereby single pure stress proteins such as HSP 70 or more HSP types are obtained in one operation. 19. Futtermittel, erhältlich nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 18. 19. Feed, obtainable by the process according to one of claims 1 until 18
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