DE10016163A1 - Biocidal material useful in photographic processing machines comprises a water-permeable matrix containing a dispersed mixture of hydrophilic and hydrophobic biocides - Google Patents
Biocidal material useful in photographic processing machines comprises a water-permeable matrix containing a dispersed mixture of hydrophilic and hydrophobic biocidesInfo
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Abstract
Description
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Aufbewahrung oder zum Transport von lebenden Zellen eines Probanden, insbesondere von vitalen Gewebe-, Flüssigkeits- oder Zellmaterialien, wobei sich die Zellen während der Aufbewahrung oder des Transports in einem Medium befinden, das mit einer körpereigenen Flüssigkeit des Probanden, von dem die Zellen entstammen, angereichert ist.The present invention relates to a method of storage or for transporting living cells of a test person, especially vital cells Tissue, fluid or cell materials, where the cells during the Storage or transport in a medium that is with a body fluid of the test person, from which the cells originate, is enriched.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich ferner auf einen Container zur Aufbewahrung oder zum Transport von vitalem Zell- und Gewebematerial, sowie Körperflüssigkeiten jeglicher Art. Derartige Transportcontainer werden zur Entnahme und zum stabilen Transport von entsprechenden biologischen Proben verwendet, die einer Untersuchung zugeführt werden sollen, um z. B. die Wirkung von Prüfsubstanzen zu ermitteln. Derartige Transportcontainer werden in den Bereichen der klinischen Analyse und Diagnostik, in der Chemo-, Immun- und Gentherapie, in der Pharmakologie, z. B. im Rahmen der Abklärung pharmakodynamischer Wirkmechanismen, oder für die toxikologische Prüfung von Stoffen oder der nahrungsmittelinduzierten Allergie verwendet.The present invention further relates to a container for Storage or transport of vital cell and tissue material, as well Body fluids of all kinds. Such transport containers become Taking and for the stable transport of appropriate biological samples used, which are to be subjected to an investigation, for. B. the effect of test substances. Such transport containers are in the Areas of clinical analysis and diagnostics, in the chemical, immune and Gene therapy, in pharmacology, e.g. B. as part of the clarification pharmacodynamic mechanisms of action, or for the toxicological testing of Substances or food-induced allergy.
Es ist bekannt, Organgewebe, Zellstanzen und Feinnadelaspirate in adaptiertem Transportmedium an Untersuchungslaboratorien zu versenden und dort selektiv für die spezifischen Untersuchungen und Tests aufzuarbeiten.It is known to adapt organ tissue, cell punches and fine needle aspirates Send transport medium to examination laboratories and selectively there for to process the specific examinations and tests.
Bislang wurden die Versandbedingungen (Art der Verpackung, Behältnisse, Transportmedien etc.) und die damit einhergehende Beeinträchtigung des Probenmaterials nur unzureichend berücksichtigt. Häufig besteht Diversität bei der Zusammensetzung des Transportmediums. Es enthält Komponenten, die z. B. dem Tier oder humanen Plasmaproben entstammen und nicht individuelle, auf das Untersuchungsgut des Patienten (Proband) adaptierte Komponenten besitzen. Diese Situation ergibt sich, wenn durch eine artifizielle Isolierung, Zellen (z. B. Gewebeproben, Biopsie, Proben Excision) ihrem natürlichen Körperumfeld entzogen werden und folglich assoziierte und stabilisierende Faktoren für das Untersuchungsgut verloren gehen und im Transportmedium nicht mehr zur Verfügung gestellt werden.So far, the shipping conditions (type of packaging, containers, Transport media etc.) and the associated impairment of the Inadequate consideration of sample material. There is often diversity in the Composition of the transport medium. It contains components that e.g. B. the Animal or human plasma samples come from, and not individual, from that Have patient's test material (subject) have adapted components. This situation arises when, through artificial isolation, cells (e.g. Tissue samples, biopsy, sample excision) your natural body environment are withdrawn and consequently associated and stabilizing factors for the Test material is lost and no longer available in the transport medium Will be provided.
Dies kann zur Unterversorgung der Zellen mit notwendigen Komponenten führen und unphysiologische Veränderungen an den Zellen auslösen.This can lead to undersupply of the cells with the necessary components and trigger unphysiological changes in the cells.
Werden Zellen in dieser Situation einem anschließenden Monitoring durch Diagnosetestung unterzogen (z. B. einer Interaktion mit Referenz- oder Festsubstanzen), so kann das Testergebnis für eine anschließende Analyse zu einer falschen Diagnose führen. Davon betroffen können in vitro Testsysteme sein, die eingesetzt werden, um das Verhalten eines Organs oder des betroffenen Gewebes oder den systemischen Zustand eines Patienten zulassen.If cells in this situation are subjected to subsequent monitoring Subjected to diagnostic testing (e.g. an interaction with reference or Solid substances), the test result can be used for a subsequent analysis make a wrong diagnosis. In vitro test systems can be affected, which are used to control the behavior of an organ or the affected Tissue or systemic condition of a patient.
Bisherige Transportbehälter und Transportmedien berücksichtigen kaum diese physiologische Voraussetzung zur Aufbewahrung und zum Transport von Zellen, so daß ein dringender Bedarf besteht, diese Behälter und Medien unter dem Aspekt deutlich zunehmender in vitro- und ex vivo- Untersuchungen zu verbessern.Previous transport containers and transport media hardly take these into account physiological requirement for the storage and transport of cells, see above that there is an urgent need to consider these containers and media to improve significantly increasing in vitro and ex vivo studies.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung eines Aufbewahrungs- bzw. Transportverfahrens sowie eines Containers zur Aufbewahrung oder zum Transport von vitalen Gewebe-, Flüssigkeits- und Zellmaterialien, in dem die Probe stabilisiert und in ihrer Vitalität und natürlichen Funktionsfähigkeit weitestgehend erhalten wird. Aufgabe ist es daher auch, Verfahren sowie einen Transportcontainer zur Verfügung zu stellen, die es ermöglichen, entnommene Gewebe in einem herkunftsnahen Umfeld zu transportieren, damit die anschließenden Untersuchungen verläßliche Aussagen über das Gewebe zulassen, dem die Probe entnommen wurde.The object of the present invention is to provide a storage or transport method and a container for storage or for Transport of vital tissue, fluid and cell materials in which the sample stabilized and largely in their vitality and natural functionality is obtained. It is therefore also a task, procedures and a transport container to make available that allow removed tissue in one to transport the environment close to the origin, so that the subsequent ones Investigations allow reliable statements about the tissue to which the sample was removed.
Diese Aufgabe wird durch die in den Patentansprüchen bezeichneten Ausführungsformen gelöst. This object is achieved by those specified in the claims Embodiments solved.
Somit betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Aufbewahrung oder zum Transport von lebenden Zellen eines Probanden, wobei sich die Zellen während des Transports in einem Medium befinden, das mit einer körpereigenen Flüssigkeit des Probanden, von dem die Zellen entstammen, angereichert ist.The present invention thus relates to a method for storage or for Transport of living cells of a test subject, the cells moving during of transportation are in a medium containing a body's own liquid of the subject from whom the cells originate is enriched.
Die erfindungsgemäße Verwendung von körpereigenen Flüssigkeiten eines Probanden zur Aufbewahrung oder zum Transport von lebenden Zellen desselben Probanden gewährleistet eine höhere Stabilität der Probe und stellt sicher, daß die Probe weniger körperfremden Einflüssen ausgesetzt ist, die die Ergebnisse von gegebenenfalls durchzuführenden Untersuchungen verfälschen könnten, wie z. B. Immunreaktionen mit körperfremden Substanzen. Darüber hinaus können Aufbewahrungs- und Transportzeiten erheblich verlängert werden, ohne daß die Zellen geschädigt werden.The use according to the invention of the body's own liquids Subjects to store or transport living cells of the same Subjects ensured a higher stability of the sample and ensured that the Sample is exposed to less foreign influences, which the results of possibly falsify studies to be carried out, such as. B. Immune reactions with foreign substances. In addition, you can Storage and transport times can be extended significantly without the Cells are damaged.
Der Ausdruck "Proband" umfaßt dabei jede Art von Organismus, von dem lebende Zellen stammen können. Vorzugsweise handelt es sich um einen menschlichen Organismus.The expression "subject" encompasses every type of organism, of which living Cells can originate. It is preferably a human Organism.
Als körpereigene Flüssigkeiten kommen dabei insbesondere alle Flüssigkeiten in Betracht, die ein Herkunftsorganismus bilden kann, z. B. Blut, Gewebewasser, Plasma, Sekrete, Sputum, Speichel, Urin, Gelenkflüssigkeit. Bevorzugt handelt es sich bei der körpereigenen Flüssigkeit um Serum, das aus dem Blut des Probanden gewonnen wurde.The body's own liquids include all liquids Consideration that an organism of origin can form, e.g. Blood, tissue water, Plasma, secretions, sputum, saliva, urine, synovial fluid. It is preferred the body's fluid around serum, which comes from the blood of the subject was won.
Das Serum des Probanden kann dabei auf herkömmliche, dem Fachmann bekannte Art und Weise gewonnen werden, z. B. mittels Separation durch Zentrifugation bei 2000 × g für ca. 15 Minuten oder durch Verwendung eines geeigneten Filters (Sarstedt AG, Nurmbrecht). Verfahren zur Separierung von Körperflüssigkeiten in zelluläre und flüssige Bestandteile sind auch beschrieben in Thomas (Labor und Diagnose, 5. Auflage, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH (1998), 1494 ff), in Eberhagen (Klinische Chemie und Hämatologie, 3. Auflage, Urban & Schwarzenberg Verlag (1973), 8 ff) und in Jacobs, Wayne, Paul (Laboratory Test Handbook, 2. Auflage, Lexi-Comp. Inc. Hudson (1994), 21 ff). The subject's serum can be obtained in a conventional manner known to those skilled in the art, e.g. B. by separation by centrifugation at 2000 × g for about 15 minutes or by using a suitable filter (Sarstedt AG, Nurmbrecht). Methods for separating body fluids into cellular and liquid components are also described in Thomas (Laboratory and Diagnosis, 5th Edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH ( 1998 ), 1494 ff), in Eberhagen (Clinical Chemistry and Hematology, 3rd Edition, Urban & Schwarzenberg Verlag ( 1973 ), 8 ff) and in Jacobs, Wayne, Paul (Laboratory Test Handbook, 2nd edition, Lexi-Comp. Inc. Hudson ( 1994 ), 21 ff).
In einer bevorzugten Ausführungsform des Verfahrens wird für den Transport der Probe ein nachfolgend beschriebener erfindungsgemäßer Transportcontainer verwendet und die körpereigene Flüssigkeit des Probanden wie unten näher beschrieben mit Hilfe des Transportcontainers gewonnen.In a preferred embodiment of the method, the Sample a transport container according to the invention described below used and the subject's own fluid as detailed below described won with the help of the transport container.
Im allgemeinen wird für die Aufbewahrung oder den Transport der Zellen nicht die körpereigene Flüssigkeit alleine verwendet, sondern diese wird einem Medium zugesetzt, das sich für die Aufbewahrung von Zellen eignet. Beispiele für geeignete Medien sind RPMI-Medium oder DMEM-Medium, gegebenenfalls mit gängigen Zusätzen, wie z. B. Antibiotika (z. B. Penicillin, Streptomycin, Kanamycin), Antimykotika (z. B. Amphotericin) und foetales Kälberserum (FCS). Vorzugsweise wird die körpereigene Flüssigkeit dem Medium in einer Menge zugesetzt, daß eine Endkonzentration von z. B. 10% bezüglich der körpereigenen Flüssigkeit vorliegt.In general, the cell is not used for storage or transportation body's own fluid used alone, but this becomes a medium added, which is suitable for the storage of cells. Examples of suitable ones Media are RPMI medium or DMEM medium, possibly with common ones Additives such as B. antibiotics (e.g. penicillin, streptomycin, kanamycin), Antifungals (e.g. amphotericin) and fetal calf serum (FCS). Preferably the body's liquid is added to the medium in an amount that a Final concentration of e.g. B. 10% with respect to the body's fluid.
Dem Medium bzw. der körpereigenen Flüssigkeit des Probanden können gegebenenfalls weitere Substanzen oder Faktoren zugesetzt werden. Beispiele hierfür sind Zusätze, die bakterielle oder mykobielle Kontaminationen verhindern, sowie Zusätze, die eine hohe Stabilität der Probe gewährleisten. Hierzu zählen insbesondere Antibiotika und Antimykotika sowie Antibiotika- und Antimykotikamischungen, bevorzugt solche, die für die jeweilige Tumorherkunft und Tumorart spezifisch adaptiert sind, oder solche, die spezifisch auf Krankenhauskeime adaptiert sind, insbesondere auf Keime der Klinik, in der sich der jeweilige Proband aufhält und die Biopsie gewonnen wird. Weiterhin zählen hierzu Kombinationen aus Antibiotika- und Antimykotikamischungen.The medium or the body fluid of the test person can if necessary, further substances or factors are added. Examples for this are additives that prevent bacterial or mycobial contamination, and additives that ensure a high stability of the sample. Which includes in particular antibiotics and antifungals as well as antibiotics and Antifungal mixtures, preferably those suitable for the respective tumor origin and Tumor type are specifically adapted, or those that are specific to Hospital germs are adapted, in particular to germs of the clinic in which the respective subject stops and the biopsy is obtained. Keep counting combinations of antibiotic and antifungal mixtures.
Durch den Zusatz derartiger Antibiotika und/oder Antimykotika können aufkeimende Kontaminationen während der Aufbewahrung und/oder des Transports und bei einer sich gegebenenfalls daran ausschließenden Untersuchung an den Zellen unterbunden werden. Dies erhöht die Genauigkeit der erhaltenen Untersuchungsergebnisse, da die Untersuchung nicht durch aufkeimende Bakterien oder Pilze gestört und somit gegebenenfalls fehlinterpretiert wird.By adding such antibiotics and / or antifungals, germinating Contamination during storage and / or transportation and at an examination of the cells which may be exclusive thereof be prevented. This increases the accuracy of the received Test results since the test is not due to germs or fungi are disturbed and thus possibly misinterpreted.
Ferner können dem Medium bzw. der körpereigenen Flüssigkeit des Probanden folgende Zusätze beigefügt werden: z. B. Gerinnungsfaktoren, Konservierungsstoffe, radioaktive Isotope, virale Vektoren, Gen- und/oder Oligonucleotidsequenzen, immunmodulierende Faktoren, wie z. B. Interleukine und Interferone, Enzyme, wie z. B. Collagenasen und Dnasen, und/oder Substanzen, die Zellfunktionen beeinflussen können (z. B. Actinomycin).Furthermore, the medium or the body's own liquid of the test person the following additions are added: z. B. coagulation factors, Preservatives, radioactive isotopes, viral vectors, gene and / or Oligonucleotide sequences, immunomodulating factors, such as. B. Interleukins and Interferons, enzymes such as e.g. B. collagenases and doses, and / or substances that Can affect cell functions (e.g. actinomycin).
Bei den aufzubewahrenden oder zu transportierenden Zellen kann es sich um
beliebige lebende Zellen handeln, die lebende Zellen enthält, wie z. B. Zell- oder
Gewebeverbände, Körperflüssigkeiten oder Sekrete jeglicher Art und Herkunft.
Bevorzugt umfassen die Zellen Krebszeilen. Die Krebszeilen können dabei von
jedem Typ von Krebs stammen. Beispiele für Typen von Krebs bzw. Tumoren sind
insbesondere Mammakarzinom, Ovarialkarzinom, Bronchialkarzinom,
Kolonkarzinom, Melanom, Blasenkarzinom, Magenkarzinom, Kopf/Halstumore,
maligne Lymphome, Gehirntumore, Gebärmutterhalskrebs, Prostatakarzinom,
Hodenkarzinom, Schwanom, Leukämien, Leiomyosarkome, Non-Hodgkin-
Lymphom, Hodgkin-Lymphom, Schilddrüsenlymphom, Knochenkrebs,
Nierenkarzinom, Bauchspeicheldrüsenkrebs und Speiseröhrenkrebs.The cells to be stored or transported can be any living cells that contain living cells, such as. B. cell or
Tissue dressings, body fluids or secretions of any kind and origin. The cells preferably comprise cancer cells. The cancer lines can come from any type of cancer. Examples of types of cancer or tumors are particularly breast cancer, ovarian cancer, lung cancer, colon cancer, melanoma, bladder cancer, gastric cancer, head / neck tumors, malignant lymphoma, brain tumors, cervical cancer, prostate cancer, testicular cancer, Schwanom, leukemias, leiomyosarcoma, non-Hodgkin's lymphoma , Hodgkin's lymphoma, thyroid lymphoma, bone cancer, kidney cancer, pancreatic cancer and esophageal cancer.
Die Probe läßt sich dabei über unterschiedliche Entnahmearten entnehmen, z. B. über Feinnadelbiopsien (Feinnadelaspirate), Stanzbiopsien, solide Gewebestücke, Pleuraergüsse, Ascitesproben, Spülflüssigkeiten, Blutproben, Urinproben, Spermaproben oder als Spinal- und Zerebralflüssigkeiten, ganze Organe (z. B. Nebenniere), komplette Organismen (z. B. Nematoden). Die so gewonnenen Gewebe können mit den körpereigenen Flüssigkeiten vermengt und transportiert werden. So können beispielsweise Körperflüssigkeiten mit einer Pleuraprobe vermengt werden. Bei einer Pleuraprobe handelt es sich um Körperflüssigkeiten, die aus dem Bauchraum oder der Lunge entnommen werden und Anteile von Tumorzellen enthalten. Ferner können Körperflüssigkeiten mit z. B. Serumbestandteilen mit einer Spüllösung vermengt werden, die z. B. im Bereich der Vagina zum Ausspülen von Tumorzellen verwendet wird. Ebenso können Körperflüssigkeiten mit z. B. Serumbestandteilen mit Medium vermengt werden und mit Spüllösungen aus dem Bereich der Blase, die zum Ausspülen von Tumorzellen aus diesem Bereich verwendet werden. Körperflüssigkeiten mit z. B. Serumbestandteilen können auch vermengt werden mit Knochenmarksexplantaten, z. B. Lumbalflüssigkeiten. Schließlich können Körperflüssigkeiten mit z. B. Serumbestandteilen vermengt werden mit einem Feinnadelaspirat, wie es z. B. durch Punktion beim Mammakarzinom gewonnen wird. Die verschiedenen Entnahmetechniken sind z. B. beschrieben in: Kremer et al. (Chirurgische Operationslehre, Georg Thieme Verlag, Stuttgart/New York (1999), Band 4, S. 186; Band 7, 2, S. 370; Band E, Seiten 146 bis 147 und Band 5, S. 238), Pichlmayr und Löhlein (Chirurgische Therapie, Springer Verlag (1991), S. 225, 130, 89, 93, 116, 546 und 547), Malte (Angiologie in Klinik und Praxis, Georg Thieme Verlag (1998), S. 258), Niethard und Pfeil (Orthopädie, Hippokrates Verlag Stuttgart, S. 38) und Bonk (Biopsie und Operationspräparat; Kompendium für Ärzte und Studenten).The sample can be removed using different types of sampling, e.g. B. via fine needle biopsies (fine needle aspirates), punch biopsies, solid pieces of tissue, pleural effusions, ascites samples, rinsing fluids, blood samples, urine samples, sperm samples or as spinal and cerebral fluids, whole organs (e.g. adrenal glands), complete organisms (e.g. nematodes) , The tissues obtained in this way can be mixed with the body's own liquids and transported. For example, body fluids can be mixed with a pleural sample. A pleural sample is a body fluid that is taken from the abdomen or lungs and contains parts of tumor cells. Furthermore, body fluids with z. B. serum components are mixed with a rinsing solution, the z. B. in the vagina for rinsing tumor cells. Likewise, body fluids with e.g. B. Serum components are mixed with medium and with rinsing solutions from the area of the bladder, which are used to rinse tumor cells from this area. Body fluids with e.g. B. Serum components can also be mixed with bone marrow explants, e.g. B. Lumbar fluids. Finally, body fluids with e.g. B. Serum components are mixed with a fine needle aspirate, such as z. B. is obtained by puncture in breast cancer. The different removal techniques are e.g. B. described in: Kremer et al. (Surgical operations theory, Georg Thieme Verlag, Stuttgart / New York ( 1999 ), volume 4 , p. 186; volume 7 , 2 , p. 370; volume E, pages 146 to 147 and volume 5 , p. 238), Pichlmayr and Löhlein (Surgical Therapy, Springer Verlag ( 1991 ), pp. 225, 130, 89, 93, 116, 546 and 547), Malte (Angiology in Clinic and Practice, Georg Thieme Verlag ( 1998 ), p. 258), Niethard and Pfeil (orthopedics, Hippokrates Verlag Stuttgart, p. 38) and Bonk (biopsy and surgical specimen; compendium for doctors and students).
Ferner betrifft die vorliegende Erfindung auch die Verwendung einer körpereigenen Flüssigkeit eines Probanden zur Aufbewahrung oder zum Transport von Zellen, die von demselben Probanden stammen. Die körpereigene Flüssigkeit kann dabei jede Art von Flüssigkeit sein, die ein Herkunftsorganismus bilden kann (siehe oben).Furthermore, the present invention also relates to the use of a body's own A subject's fluid for storing or transporting cells that come from the same subject. The body's own fluid can do any Be the type of fluid that an organism of origin can form (see above).
Ferner betrifft die vorliegende Erfindung einen Transportcontainer wie in Anspruch 1 definiert. Vorteilhafte Weiterbildungen des erfindungsgemäßen Transportcon tainers werden in den abhängigen Ansprüchen gegeben.Furthermore, the present invention relates to a transport container as in claim 1 defined. Advantageous further developments of the Transportcon according to the invention tainers are given in the dependent claims.
Erfindungsgemäß weist der Transportcontainer zwei Kammern auf.According to the invention, the transport container has two chambers.
Eine der Kammern (Kammer A) dient zur Aufnahme von Körperflüssigkeiten. Diese Kammer kann beispielsweise in Form eines Röhrchens unterschiedlicher Größe ausgebildet sein, an deren Ende sich eine Öffnung befindet, an der z. B. eine Injektionsnadel befestigt werden kann.One of the chambers (chamber A) is used to hold body fluids. This Chamber can for example be in the form of a tube of different sizes be formed, at the end of which there is an opening at which, for. Legs Injection needle can be attached.
In einer bevorzugten Ausführungsform ist die Seite, an der sich die Öffnung befindet, so ausgebildet, daß statt der Öffnung für eine Injektionsnadel, ein offenes Innengewinde vorhanden ist, in das ein (im Handel) erhältliches Blutabnahmesystem eingeschraubt werden kann. Auf der Außenseite befindet sich dann vorteilhafterweise ein weiteres Gewinde, auf das beispielsweise ein fest verschließbares Hüllröhrchen aufgeschraubt werden kann. In a preferred embodiment, the side on which the opening is is so designed that instead of the opening for an injection needle, an open There is an internal thread in which a (commercially available) Blood collection system can be screwed in. Is on the outside then advantageously another thread on which, for example, a fixed sealable tube can be screwed on.
Die zweite Kammer (Kammer B) kann das zu transportierende vitale Gewebe-, Flüssigkeits- und Zellmaterial aufnehmen. Die beiden Kammern sind über einen beweglichen als Filter ausgeführten Stempel (Trennelement) voneinander getrennt. Dieser Stempel dient zum einen dem Ansaugen von Körperflüssigkeiten, zum anderen dient er gleichzeitig als Filter zum Trennen disperser Flüssigkeiten. So läßt sich beispielsweise in die erste Kammer A Blut eines Patienten aufnehmen, das anschließend mit Hilfe des Filterstempels in verschiedene Bestandteile z. B. Serum und Blutkuchen getrennt wird. Nach Entfernen des Stempelstiels und Befüllen der Kammer B kann dann sich das abgetrennte Serum mit dem Zellmaterial vermischen. Damit kann gewährleistet werden, daß das vitale Probenmaterial während des weiteren Transportes beständig in einem Medium aufbewahrt und transportiert wird, das körpereigene, probandenspezifische Komponenten enthält (physiologisches Milieu). Dadurch wird eine individuell adaptierte Stabilisierung der Probe bzw. des vitalen Gewebes erreicht.The second chamber (chamber B) can contain the vital tissue, Absorb liquid and cell material. The two chambers are above one movable stamp designed as a filter (separating element) separated from each other. This stamp serves on the one hand to suck up body fluids, on the other others it also serves as a filter for separating disperse liquids. So lets for example, take blood from a patient into the first chamber A, which then with the help of the filter stamp in various components such. B. Serum and blood cake is separated. After removing the stem and filling the Chamber B can then collect the separated serum with the cell material mix. This can ensure that the vital sample material kept in a medium during the further transport and is transported, which contains the body's own, sample-specific components (physiological milieu). This enables an individually adapted stabilization of the Sample or vital tissue reached.
Insgesamt wird durch den erfindungsgemäßen Transportcontainer die Vitalität und die Funktionsfähigkeit der Gewebeprobe erheblich verbessert und verlängert.Overall, the vitality and the functionality of the tissue sample is significantly improved and extended.
Es folgt daraus eine hohe Zuverlässigkeit für die Aussagekraft der anschließenden Diagnostik der Probe.This results in a high degree of reliability for the meaningfulness of the subsequent ones Diagnostics of the sample.
Insgesamt können damit Zellkonglomerate, die aus unterschiedlichen Biopsien gewonnen wurden, transportiert werden. Als Zellmaterialien können fungieren: Zell- und Gewebeverbände, Körperflüssigkeiten und Sekrete jeglicher Art und Herkunft. Bevorzugt handelt es sich bei dem Zellmaterial um Material, das Krebszellen enthält, insbesondere um Krebszellen, die einem Probanden entnommen wurden. Vorteilhafterweise besteht die Vorrichtung zum Ansaugen von Körperflüssigkeiten aus einem als Filter ausgeführten Stempel, der mit einem Stiel verbunden ist, der sich durch die zweite Kammer erstreckt. Durch Aufziehen des Stempels wird folglich in die erste Kammer durch Unterdruck Flüssigkeit, beispielsweise eine Blutprobe angesaugt und durch anschließendes Herunterdrücken des Stempels, der als Filter mit einer bestimmten Porengröße ausgeführt ist, der Blutkuchen von den restlichen Bestandteilen abgetrennt. Anschließend kann der Stiel von dem Stempel an einer Sollbruchstelle innerhalb der ersten Kammer abgetrennt und aus dem Transportcontainer gezogen werden. Der als Filter ausgebildete Stempel verbleibt im System und bildet jetzt die Trennwand zwischen der Körperflüssigkeitskomponente, z. B. zwischen Serum/Plasma und Blutkuchen, und gleichzeitig zwischen Kammer A und Kammer B. Das abgepreßte Serum befindet sich jetzt bereits in Kammer B und kann dort das noch einzufüllende Probenmaterial umspülen.Overall, cell conglomerates can be obtained from different biopsies won, are transported. The following can function as cell materials: and tissue bandages, body fluids and secretions of any kind and origin. The cell material is preferably material, the cancer cells contains, especially around cancer cells, which were taken from a test person. The device for sucking in body fluids advantageously exists from a stamp designed as a filter, which is connected to a stem, the extends through the second chamber. By opening the stamp consequently into the first chamber by vacuum liquid, for example a Blood sample is sucked in and then pressed down by the stamp, which is designed as a filter with a certain pore size, the blood cake from the remaining components separated. Then the stem of the Stamp separated at a predetermined breaking point within the first chamber and out be pulled out of the transport container. The stamp designed as a filter remains in the system and now forms the partition between the Body fluid component, e.g. B. between serum / plasma and blood cake, and simultaneously between chamber A and chamber B. The pressed serum is located is already in chamber B and can still fill in what is still there Rinse sample material.
Durch die Wahl unterschiedlicher Porengrößen und Membraneigenschaften für den Filter ist eine differentielle Separation, beispielsweise in große oder kleine Zellen bzw. Partikel oder Moleküle unterschiedlicher Größe und damit eine spezifische Separation der aufgezogenen Flüssigkeit in zelluläre und flüssige Bestandteile (z. B. Blut) möglich. Vorzugsweise ist der Filter derart ausgestattet, daß er, wenn die angesogene Körperflüssigkeit Blut ist, eine Trennung in z. B. Serum oder Plasma und Blutkuchen erlaubt. Blut besteht ganz allgemein aus Plasma und Blutkörperchen, wobei das Plasma wiederum aus Serum und Fibrinogen besteht. Plasma und Serum sind biologische Träger wichtiger Eigenschaften, wie z. B. Immunität. Plasma ist der flüssige Bestandteil des Bluts. "Blutkuchen" ist dagegen der zelluläre Bestandteil des Bluts. Der Begriff "Serum" umfaßt den nicht mehr gerinnungsfähigen Bestandteil des Bluts, der von Blutkörperchen und Fibrin gereinigten Restlösung. Eine Trennung in Serum und Blutkuchen kann bei menschlichem Blut beispielsweise erreicht werden durch Verwendung eines Filters mit einer Porengröße von ca. 5 µm oder weniger. Derartige Filter können aus dem Fachmann geläufigen Materialien bestehen und können beispielsweise bezogen werden von der Firma Sarstedt AG, Nurmbrecht. Da der Filter in der ersten Kammer als Trennwand dauerhaft verbleibt, bleibt auch während des gesamten Transportes die abgetrennte Fraktion, beispielsweise der Blutkuchen zwar in dem Transportcontainer, jedoch von dem Probenmaterial getrennt.By choosing different pore sizes and membrane properties for the Filter is a differential separation, for example in large or small cells or particles or molecules of different sizes and thus a specific one Separation of the liquid drawn up into cellular and liquid components (e.g. Blood) possible. Preferably, the filter is equipped so that when the aspirated body fluid is blood, a separation into e.g. B. serum or plasma and blood cake allowed. Blood generally consists of plasma and Blood cells, the plasma in turn consisting of serum and fibrinogen. Plasma and serum are biological carriers of important properties, such as B. Immunity. Plasma is the liquid component of the blood. "Blood cake" is against it the cellular component of the blood. The term "serum" no longer includes that coagulable component of the blood, that of blood cells and fibrin purified residual solution. A separation in serum and blood cake can help human blood, for example, can be achieved by using a filter with a pore size of about 5 µm or less. Such filters can from the Materials familiar to those skilled in the art exist and can be obtained, for example are from Sarstedt AG, Nurmbrecht. Because the filter in the first Chamber remains as a partition, remains throughout Transport the separated fraction, for example the blood cake in the Transport container, but separated from the sample material.
Um folgenden wird ein beispielhafter erfindungsgemäßer Transportcontainer unter Bezug auf Fig. 1 beschrieben.An exemplary transport container according to the invention is described below with reference to FIG. 1.
Fig. 1 zeigt einen Transportcontainer 1, der in eine erste Kammer A und eine zweite Kammer B aufgeteilt ist. Kammer A dient dabei der Aufnahme von Körperflüssigkeiten wie z. B. Blut, Lymphe o. ä., deren Aufnahme mittels einer Injektionsnadel oder einem anderem Entnahmesystem möglich ist. Die Kammer B dient der Aufbewahrung und dem Transport von lebendem Zellmaterial. Fig. 1 shows a transport container 1 , which is divided into a first chamber A and a second chamber B. Chamber A is used to hold body fluids such. B. blood, lymph or the like, the uptake of which is possible by means of an injection needle or another withdrawal system. Chamber B is used to store and transport living cell material.
Die röhrchenförmig gebaute Kammer A kann zur Entnahme von beispielsweise Blut oder anderen Körperflüssigkeiten an einer Öffnung 5 mit einer nicht dargestellten Injektionsnadel im Luer-Lock-System gekoppelt werden. Gegebenenfalls kann in ein vorhandenes Außengewinde (s. o.) ein bereits mit einer Körperflüssigkeit, z. B. Blut, gefülltes Röhrchen eingeschraubt werden. Über einen in der Kammer A angeordneten Kolben 8 wird dabei die Flüssigkeit durch Unterdruck angesaugt, indem der Kolben 8 an einem Kolbenstiel 9 und einem an dem Kolbenstiel angeordneten Griff 13 von der Öffnung 5 weggezogen wird. In der Kammer B befindet sich ggf. eine am Stempelstiel befestigte vakuumunterstützende Membran 4, die bei Zug entsprechend mit dem Stempel bewegt wird. Damit fließt in die Kammer A die zu entnehmende Flüssigkeit, beispielsweise Blut. Die Kammer A kann auf ihrer Innenseite individuell mit entsprechenden Substanzen beschichtet sein, um eine Stabilisierung der jeweiligen Flüssigkeit zu gewährleisten.The chamber A, which is constructed in the form of a tube, can be coupled at an opening 5 to an injection needle (not shown) in the Luer lock system for taking blood or other body fluids, for example. If necessary, an existing external thread (see above) can already be used with a body fluid, e.g. B. blood, filled tube. Via a piston 8 arranged in the chamber A, the liquid is sucked in by negative pressure by pulling the piston 8 away from the opening 5 on a piston rod 9 and a handle 13 arranged on the piston rod. In the chamber B there is possibly a vacuum-supporting membrane 4 attached to the stamp handle, which is correspondingly moved with the stamp when it is pulled. The liquid to be withdrawn, for example blood, thus flows into the chamber A. The inside of chamber A can be coated individually with appropriate substances in order to ensure stabilization of the respective liquid.
Der Kolben 8 ist zugleich als Filter mit einer für die jeweilige Anwendung geeigneten Porengröße ausgeführt (s. o.).The piston 8 is also designed as a filter with a pore size suitable for the respective application (see above).
Nachdem der Kolben 8 bis zu einem Anschlag 11 als Fixiererhebung zurückgezogen wurde und damit die Kammer A mit der vorbestimmten Flüssigkeitsmenge gefüllt ist, wird die Öffnung 5 durch eine Steck- oder Schraubverbindung 6 verschlossen. Daraufhin wird der Kolben 8 zurück in Richtung der Öffnung 5 gepreßt, wobei lediglich Flüssigkeiten oder Partikel einer durch die Porengröße limitierten Größe den Filter 8 passieren können und die nicht filtergängigen Bestandteile in Richtung der Öffnung 5 abgepreßt werden.After the piston 8 has been retracted as far as a stop elevation 11 and thus the chamber A is filled with the predetermined amount of liquid, the opening 5 is closed by a plug or screw connection 6 . The piston 8 is then pressed back in the direction of the opening 5 , only liquids or particles of a size limited by the pore size being able to pass through the filter 8 and the non-filter-compatible components being pressed out in the direction of the opening 5 .
Anschließend wird der Kolbenstiel 9 an einer in Nähe des Filters 8 angeordneten Sollbruchstelle 10 abgedreht und anschließend mit der Membran 4 aus dem Transportcontainer entnommen. Die Trennung der beiden Kammern erfolgt durch den Filter 8. Das Zellmaterial wird durch die Öffnung 7a in die Kammer B eingefüllt und kann nun mit den probandenspezifischen Komponenten interagieren (s. u.).Then the piston rod 9 is turned off at a predetermined breaking point 10 arranged near the filter 8 and then removed with the membrane 4 from the transport container. The two chambers are separated by the filter 8 . The cell material is filled through the opening 7 in a chamber B, and is now the subject's specific components interact (see below).
Der Transportcontainer 1 weist weiterhin auf der Seite der Kammer B einen Verschlußmechanismus 7 auf, auf den ein Schraub- oder Steckverschluß 12 aufgebracht werden kann, um den Behälter auch auf der Seite der Kammer B zu verschließen.The transport container 1 also has a locking mechanism 7 on the side of the chamber B, to which a screw or plug closure 12 can be applied in order to also close the container on the side of the chamber B.
Als vorteilhafte Weiterbildung ist bei Verwendung des Containers zum Transport größerer Zellverbände, wie beispielsweise Biopsaten o. ä., gemäß Fig. 2 die Kammer B dann so ausgestattet, daß hierfür ein vom Schraubverschluß 12 spezifisch abgewandelter Deckel 15 mit zuerst rechtsgängigem und dann linksgängigem Gewinde 16 verwendet werden kann. An der Unterseite des Deckels sind z. B. Messerklingen 17 und eine randständige aus dem Deckel 15 ausfahrbare Ringklinge 18 angebracht. Die Messer dienen dem Gewebeaufschluß und können zur Zerkleinerung von Gewebestücken eingesetzt werden. Hierzu wird zuvor auf die Kammer B ein Sieb 19 aufgesetzt (Fig. 3A). Darauf wird die Biopsieprobe aufgebracht. Der Deckel 15 mit den aufsitzenden Messern wird dann aufgeschraubt, wobei das Gewinde nach links gedreht wird. Als Folge wird durch die Drehbewegung des Deckels das Gewebe durch die Messerklingen 17 mazeriert (Fig. 3B). Der Gegendruck wird durch das Sieb 19 erzeugt. In einem weiteren Schritt wird der Deckel 15 nun weiter, dazu jedoch nach rechts in das Gewinde von Kammer B 14 gedreht, wobei zusätzlich ein Auslösemechanismus im Deckel die Ringmesser ausfährt (Fig. 3C). Als dessen Folge wird das Sieb 19 inklusive der Gewebeprobe von der Kammer B abgetrennt und in die Transportlösung überführt. Die Kammer B wird dann durch den flüssigkeitsdichten Schraub- oder Steckverschluß 15 verschlossen.As an advantageous further development, when the container is used to transport larger cell groups, such as biopsies or the like, according to FIG. 2, the chamber B is then equipped in such a way that a cover 15 specifically modified from the screw closure 12 with first right-hand and then left-hand thread 16 can be used. At the bottom of the lid z. B. knife blades 17 and a peripheral ring blade 18 extendable from the cover 15 attached. The knives serve to break up the tissue and can be used to shred pieces of tissue. For this purpose, a screen 19 is placed on the chamber B beforehand ( FIG. 3A). The biopsy sample is applied to this. The cover 15 with the mounted knives is then screwed on, the thread being turned to the left. As a result, the tissue is macerated by the knife blades 17 due to the rotary movement of the cover ( FIG. 3B). The back pressure is generated by the screen 19 . In a further step, the lid 15 is now further turned, however, to the right into the thread of chamber B 14, an additional trigger mechanism in the lid extending the ring knives ( FIG. 3C). As a result, the sieve 19 including the tissue sample is separated from the chamber B and transferred to the transport solution. The chamber B is then closed by the liquid-tight screw or plug closure 15 .
Das Zellmaterial kann in die Kammer B als Zellsuspension oder als Gewebestück einem zuvor eingefüllten vordefinierten Medium zugesetzt werden. Außerdem besteht die Möglichkeit der Einbringung eines ampullenähnlichen Flüssigkeitsbehälters, der beispielsweise Transportmedium o. ä. enthält und zur Durchmischung mit dem Zellmaterial und der angesaugten und abseparierten Flüssigkeit zerbrochen oder zerdrückt werden kann.The cell material can enter chamber B as a cell suspension or as a piece of tissue be added to a previously filled in predefined medium. Moreover there is the possibility of introducing an ampoule-like Liquid container containing, for example, transport medium or the like and for Mix with the cell material and the aspirated and separated Liquid can be broken or crushed.
Das zerkleinerte Gewebe kann weiterhin durch Zusatz von Enzymen oder anderer Substanzen vorpräpariert werden. Dazu kann, um beispielsweise einen unkontrollierten Abbau des Gewebes zu vermeiden, eine begrenzte Menge von Enzymen oder anderen Substanzen als Lyophylisat oder als Wandbeschichtung in der Kammer B vorgelegt werden. Damit besteht die Möglichkeit bestimmte Laborprozesse bereits beim Transport im Transportcontainer ablaufen zu lassen. Nach dem Transport und bei Ankunft der Probe im Labor ist das Zellmaterial bereits zerkleinert, enzymatisch vorbehandelt und damit weitestgehend aufgearbeitet, so daß sich der anschließende Laborprozeß zeitlich deutlich verkürzt. Die Probe wird somit unter herkunftsnahen physiologischen Bedingungen transportiert und in kurzer Zeit bearbeitet und einer Diagnosestellung zugeführt.The shredded tissue can continue by adding enzymes or others Substances are prepared. To do this, for example, a to avoid uncontrolled degradation of the tissue, a limited amount of Enzymes or other substances as lyophilisate or as a wall coating in be presented to Chamber B. So there is the possibility of certain Letting laboratory processes run in the transport container during transport. After the transport and upon arrival of the sample in the laboratory, the cell material is already there crushed, enzymatically pretreated and thus largely processed, so that the subsequent laboratory process is significantly shortened in time. The rehearsal will thus transported under physiological conditions close to origin and in processed in a short time and diagnosed.
Der Transport kann gekühlt oder auch bei Umgebungstemperatur erfolgen.The transport can be chilled or at ambient temperature.
In dem beschriebenen Transportcontainer wird während des gesamten Transportes die Anwesenheit von körpereigenen, probandenspezifischen Komponenten gewährleistet, das Probenmaterial bereits zerkleinert und durch entsprechende Zusätze stabilisierend vorbehandelt und aufgearbeitet. Die Probe zeigt dadurch ideale Voraussetzungen für eine sich anschließende diagnostische Maßnahme.In the transport container described is during the entire transport the presence of the body's own, sample-specific components ensures that the sample material is already crushed and by appropriate Stabilizing additives pretreated and processed. The sample shows ideal conditions for a subsequent diagnostic measure.
Ferner betrifft die vorliegende Erfindung die Verwendung eines erfindungsgemäßen Transportcontainers zur Aufbewahrung oder zum Transport von Proben, die lebende Zellen enthalten, insbesondere Gewebe, Flüssigkeits- oder Zellmaterialien.Furthermore, the present invention relates to the use of an inventive Transport containers for storing or transporting samples that contain living cells, especially tissues, fluid or cell materials.
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