DD276103A1 - METHOD FOR OBTAINING NUCLEIC ACID BIOMASS - Google Patents

METHOD FOR OBTAINING NUCLEIC ACID BIOMASS Download PDF

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DD276103A1
DD276103A1 DD32057188A DD32057188A DD276103A1 DD 276103 A1 DD276103 A1 DD 276103A1 DD 32057188 A DD32057188 A DD 32057188A DD 32057188 A DD32057188 A DD 32057188A DD 276103 A1 DD276103 A1 DD 276103A1
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nucleic acid
biomass
whey
yeast strains
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DD32057188A
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Martin Schenk
Dieter Weiske
Klaus Puechner
Ingeborg Flemming
Helmut Hrapia
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Leipzig Chemieanlagen
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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von nukleinsaeurearmer Biomasse durch Kultivierung von bekannten ausgewaehlten Hefestaemmen auf kohlehydrathaltigen Substanzen, insbesondere Molken, mit dem Ziel einer umfassenden und vorteilhaften Anwendung in der Tierernaehrung aus ernaehrungsphysiologischer Sicht. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zu entwickeln, welches ohne jeglichen zusaetzlichen Aufwand und ohne Gebrauchswertverminderung der Biomasse realisiert werden kann. Erfindungsgemaess wird die Aufgabe dadurch geloest, dass auf die genannten Substanzen die Hefestaemme Debaryomyces hansenii LH 306 und Kluyveromyces marxianus LH 35 im Verhaeltnis von 2:1 bis 7:1, vorzugsweise 3:1, kontinuierlich fermentiert werden. Es werden Nukleinsaeuregehalte bis 26 g NS/kg Trockensubstanz erreicht.The invention relates to a process for the extraction of low-nucleic acid biomass by cultivating known selected yeast strains on carbohydrate-containing substances, in particular whey, with the aim of a comprehensive and advantageous application in animal nutrition from a nutritional physiological point of view. The invention has for its object to develop a method which can be realized without any additional effort and without reducing the utility of the biomass. According to the invention, the object is achieved by continuously fermenting the yeast compounds Debaryomyces hansenii LH 306 and Kluyveromyces marxianus LH 35 in a ratio of 2: 1 to 7: 1, preferably 3: 1, to the said substances. Nucleic acid levels up to 26 g NS / kg dry matter are achieved.

Description

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von nukleinsäurearmer Biomasse, die durch Kultivierung von ausgewählten Hefestämmen auf kohlehydrathaltigen Substanzen, insbesondere Molken, gewonnen worden. Sie kann in der biotschnologischen Produktion genutzt werden.The invention relates to a process for the extraction of low-nucleic acid biomass obtained by cultivating selected yeast strains on carbohydrate-containing substances, in particular whey. It can be used in biotchnological production.

Charakteristik der bekannten technischen LösungenCharacteristic of the known technical solutions

Der Einsatz mikrobiell erzeugter Biomasse in derTierernährung wird aus ernährungsphysiologischen Gründen durch den Gehalt an Nukleinsäuren wesentlich limitiert. Es sind eine Reihe von Verfahren bekannt geworden, die die Zielstellung zur Bereitstellung einer nukleinsäuregeminderten Biomasse beinhalten. Diese Verfahren können in folgend* Gruppen untergliedert werden:The use of microbially produced biomass in animal nutrition is substantially limited by the content of nucleic acids for nutritional reasons. A number of methods have become known which include the goal of providing a nucleic acid-reduced biomass. These methods can be broken down into the following groups:

- Verfahren zur Reduzierung des Nukleinsäuregehaltes nach der Kultivierung- Method for reducing the nucleic acid content after cultivation

Darunter sind Methoden zum mechanischen bzw. thermischen Aufschluß des Kulturmediums und seine Extraktion mit Hilfsmitteln, z. B. DE PS 2 503868 und DD PS 211921,oder*ur enzvmatischen Spaltung dur Nukleinsäuren, z. B. DE OS 3500912 und DD PS 161243, beschrieben. Dazu zählen auch Methoden zur Hitzeschockbehandlung und anschließende Inkubation bis zu 180min für verhefte Sa»ier;nolken (Kie'er Milchwirtschaftliche Forschungsberichte 31 (4) 1979, S.297-361). Sämtlichen Verfahren der aufgeführten Einordnung ist der hohe energetische, stoffliche bzw. apparative Aufwand, verbunden mit Qualitätsminderungen der Biomasse, eigin.These include methods for mechanical or thermal digestion of the culture medium and its extraction with auxiliaries, for. For example, DE PS 2 503868 and DD PS 211921, or * enzvmatischen splitting by nucleic acids, eg. For example, DE OS 3500912 and DD PS 161243 described. These include methods for heat shock treatment and subsequent incubation for up to 180 min for hunted saltpans (Kie'er Milchwirtschaftliche Forschungsberichte 31 (4) 1979, pp. 297-361). All procedures of the listed classification is the high energy, material or equipment expense, coupled with quality degradations of biomass, eigin.

- Verfahren zur Steuerung des Fermentation;»-egimes- Process for the control of fermentation;

In DD PS 201147 wird ein Verfahren mit Phosptarlimitation auf Basis von Kohlenwasserstoffen vorgestellt. Nach einer der Kultivierung nachfolgend notwendigen Aufkonzentrierung und Extraktion der Biomasse wird ein Gehalt an Nukleinsäuren von 7,1 % bis 8,4% im Trockenprodukt erreicht.In DD PS 201147 a method with Phosptarlimitation based on hydrocarbons is presented. After a subsequent cultivation of the necessary concentration and extraction of the biomass, a content of nucleic acids of 7.1% to 8.4% is achieved in the dry product.

Der nach dem genannton Verfahren erreichte Gehalt an Nukleinsäuren spricht dafür, daC. Veränderungen im Gehalt bestimmter zelleigener Inhaltsstoffe allein durch Steuerung des Fermentationsregimes nur in kleinsten Bereichen möglich sind (vergl. auch SCHULZ, OSLAGE: Prote In quality und utilization of SCP as äff ekted by the fermentationsprozesses an post-fermentations treatment«. AS-Symposium, Sorock 1981).The content of nucleic acids obtained by the genannton method suggests that. Changes in the content of certain cell-derived ingredients are only possible in the smallest areas by controlling the fermentation regime (see also SCHULZ, OSLAGE: Prote In quality and utilization of SCP as e ff ected by the fermentation process of post-fermentation treatment.) AS Symposium, Sorock 1981).

- Verfahren zur Züchtung einer nukleinsäuroarmen Biomasse- Method of growing a low-nucleic acid biomass

Nach einem semikontinuierlichen Verfahren (.Kieler Milchwirtschaftliche Forschungsberichte" 31 [4] 1979, S.346ff.) auf Molkebasis stellen sich folgende Parameter ein:According to a semi-continuous process ("Kieler Dairy Research Reports" 31 [4] 1979, p.346ff.) Based on whey, the following parameters are set:

Fermentationsdauerfermentation time RNSRNS RPRP inninn %dHTS% DHTS %d.HTS% d.HTS 00 4,074.07 49,349.3

21,4 2,37 40,621.4 2.37 40.6

Der dargestellte hohe zeitliche und damit ökonomische Aufwand ist verbunden mit einer Oualitätsverschlechterung der Biomasse. Der Nachteil hoher Züchtungsze ten mit einem Pilz der Ar; Penicillium notatum wird auch in SU PS 597362 kund. In DD A23K/297745.6 wird ein «Verfahren zur Gewinnung von hochwertigem Futteteiwelß aus Molke" beschrieben, wobei ein NukSeinsäuregehalt von 3,5% in TS erreicht wird. In diesom Verfahren, welches auf hohe Protefnausbeute orientiert, bewirken die eingesetzten Stämme Pichia norwegensis H73 und Aciculocunidium aculeatum H308 6ine relative Erhöhung des Nukleinsäuregehaltes in der Biomasse.The shown high temporal and thus economic expenditure is connected with a deterioration in biomass quality. The disadvantage of high breeding times with a fungus of Ar; Penicillium notatum is also disclosed in SU PS 597362. DD A23K / 297745.6 describes a "process for obtaining high quality feed whey from whey" in which a suicic acid content of 3.5% is achieved in T. In this process, which is oriented towards high protease yield, the strains used cause Pichia norwegensis H73 and Aciculocunidium aculeatum H308 6in relative increase of nucleic acid content in the biomass.

Ziel der ErfindungObject of the invention

Ziel der Erfindung ist ein Verfahren zur Gewinnung von nukluinsäurearmer Biomasse, die aus ernährungsphysiologischer Sicht eine umfassende und vorteilhafte Anwendung in der Tierernährung finden kann.The aim of the invention is a method for the extraction of low-nuclear biomass, which can find a comprehensive and advantageous application in animal nutrition from a nutritional point of view.

-2- 276103 Darlegung des Wesens der Erfindung-2- 276103 Presentation of the Essence of the Invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Züchtung nukleinsäurearmer Biomasse zu entwickeln, welches ohne Jeglichen zusätzlichen Aufwand und ohne Gebrauchswertminderung für die Biomasse, z. B. Verlust an Amino-Eiweiß und Wirkstoffen, realisiert werden kann. Die Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß auf kohlehydratheltigen Substanzen, insbesondere Molken, in einem CLG-Hochlelstungsfermentor die Hefestämme Debaryomyces hansenii LH306 (ZIMET43788) und Kluyveromyces marxianus LH35 (ZIMET 43786) im Verhältnis von 2:Ί bio 7:1, vorzugsweise 3:1, bei einem pH-Wert von 1,8 bis 2,5, vorzugsweise 1,9 bis 2,1 und einer Verweilzeit von 3 bis 5h, vorzugsweise 4 h, kontinuierlich fermentiert werden. Überraschenderweise wurde gefundon, daß sowohl bei Einkcmponentenfermentation als auch Zweikomponentenfermentation der genannten Hefestämme und nur im genannten Verhältnis Biomasse mit sehr niedrigem Gehalt an Nukleinsäure produziert wird. So konnten Nukleinsäuregehalte bei Kultivierung auf Glukose bzw. Molken bis 2,6% in Trockenmasse erreicht werden.The invention has for its object to develop a method for breeding low-nucleic acid biomass, which without any additional effort and without loss of utility for the biomass, z. B. loss of amino-protein and drugs can be realized. The object is achieved according to the invention by the fact that the yeast strains Debaryomyces hansenii LH306 (ZIMET43788) and Kluyveromyces marxianus LH35 (ZIMET 43786) in ratios of 2: Ί bio 7: 1, preferably 3, on carbohydrate-rich substances, in particular whey, in a CLG high-performance fermentor. 1, at a pH of 1.8 to 2.5, preferably 1.9 to 2.1 and a residence time of 3 to 5h, preferably 4 h, are continuously fermented. Surprisingly, it has been found that, both in single-component fermentation and two-component fermentation of said yeast strains and only in said ratio biomass is produced with a very low content of nucleic acid. Thus, nucleic acid contents could be achieved by culturing on glucose or whey to 2.6% in dry matter.

AusführungsbelspieiAusführungsbelspiei

In einem Milchverarbeitungsbetrieb fällt täglich diskontinuierlich Labmolke in einer Gesamtmenge von 30t an. Dieses Substrat wird kontinuierlich über 24h in einem 10m3-CLG-Strahlfermentor mit einom Durchsatz von 1240l/h fermentiert. Die zur Fermentation eingesetzte Roh(lab)molke hat folgende Durchschnittsgehalte über den gesamten Tagesrhythmus (Analysendichte: 2 h):In a milk processing plant, rennet whey in a total amount of 30 tons is discontinued on a daily basis. This substrate is continuously fermented for 24 hours in a 10m 3 C-LG jet fermentor at a rate of 1240 L / hr. The raw (lab) whey used for fermentation has the following average contents over the entire daily rhythm (analysis density: 2 h):

Trockensubstanz (TS): 6Cg/kgOrig.-SubstanzDry substance (TS): 6Cg / kg original substance

Laktose 050 g/kg TSLactose 050 g / kg TS

Rohprotein 1C0 g/kg TSCrude protein 1C0 g / kg TS

Nukleinsäure 15 g/kg TS Phosphor 9,93 g/kg TSNucleic acid 15 g / kg TS phosphorus 9.93 g / kg TS

Bereits im Anfahrprozeß wird mit dem Molkesubstrat eine Impfhefe im 2001-Ansatz mit folgenden Anteilen zugegeben:Already in the starting process, a seed yeast in the 2001 batch with the following proportions is added to the whey substrate:

- Debaryomyces hansenii LH 306 - 3 Teile- Debaryomyces hansenii LH 306 - 3 parts

- Kluyveromyces marxianus LH 35 -1 Teil- Kluyveromyces marxianus LH 35 -1 part

Der kontinuierliche Fermentationsprozeß verläuft mit Zugaben von Ammonsulfat adäquat zum jeweiligen Gehalt an Laktose dos FermentorzulHufs der Rohmolke, im Durchschnitt des Tages von 13kg/t Rohmolke. Weiterhin erfolgen im Durchschnitt Spurensalzzugaben von:The continuous fermentation process proceeds with additions of ammonium sulfate adequately to the respective content of lactose dos Fermentorzu hoof of the raw whey, on average of the day of 13kg / t raw whey. Furthermore, on average, trace salt additions of:

Cu: 0,75 ppm Zn: 5 ppm Mn: 3 ppmCu: 0.75 ppm Zn: 5 ppm Mn: 3 ppm

Der Fermentationsprozeß stellt sich über dem Tagesrhythmus mit einer Verweilzeit zwischen 4 und 4,5h, einem pH-Wert zwischen 1,8 bis 2,2 und einer Fermentationstemperatur zwischen 350C und 36°C störfrei ein. Die kontinuierlich geerntete Biomasse wird entsprechend den veterinärhygienischen Vorschriften einer Kurzzeiterhitzung bei 90°C und einer Heißhaltezeit von 120 see unterworfen und dem Verkaufstank zugeführt. Die verkaufsfähige Biomasse hat folgende Tagesdurchschnittsgehalte:The fermentation process is above the daily rhythm with a residence time between 4 and 4.5 hours, a pH between 1.8 to 2.2 and a fermentation temperature between 35 0 C and 36 ° C without interference. The continuously harvested biomass is subjected to a short-term heating at 90 ° C and a heat holding time of 120 see according to veterinary regulations and fed to the sales tank. The salable biomass has the following average daily values:

Trockensubstanz (TS): 44 g/kg OriginalsubstanzDry substance (TS): 44 g / kg of original substance

Restlaktosegehalt: 15 g/kg TSResidual lactose content: 15 g / kg DM

Rohprotein: 460 g/kg TSCrude protein: 460 g / kg TS

Nukleinsäuregehalt: 26 g/kg TSNucleic acid content: 26 g / kg TS

Phosphor: 13,9 g/kg TSPhosphorus: 13.9 g / kg TS

Im weiteren wurden die Züchtungsbedingungen folgendermaßen verändert:Furthermore, the cultivation conditions were changed as follows:

- Bei Einsatz von LH 306 sirr ultan im Fermentor wurde ein Gehalt an NS von 38g/kg TS erzielt.- When using LH 306 Sirr ultan in the fermenter, a content of NS of 38g / kg TS was achieved.

- Der Einsatz von LH 35 sim jltan im Fermentor erbrachte eine Biomasse mit einein Gehalt an NS von 35 g/kg TS.- The use of LH 35 sim jltan in the fermentor yielded a biomass with a content of NS of 35 g / kg DM.

- Der Einsatz der Mischpopulation nach DD A23 K/297745.6 mit LH306, LH35 und den Hefestämmen Pichia norregensis H73, Aciculoconidium sculcatum H303 und Hansenula jodimll H307 erbrachte einen Gehalt an Nukleinsäure von 35g/kg TS bei einem Rohproteingehalt von 470g/kg OS.The use of the mixed population according to DD A23 K / 297745.6 with LH306, LH35 and the yeast strains Pichia norregensis H73, Aciculoconidium sculcatum H303 and Hansenula iodine H307 yielded a nucleic acid content of 35 g / kg DM at a crude protein content of 470 g / kg OS.

Claims (1)

Verfahren zur Gewinnung von nukleinsäurearmer Biomasse durch Kultivierung von bekannten ausgewählten Hefestämmon auf kohlehydrathaltigen Substanzen, insbesondere Molken, in einem CLG-Hochleistungsstrahlfermentor, gekennzeichnet dadurch, daß die Hefestämme Debaryomyces hansenii LH 306 (ZIMET 43788) und
Kluyveromyces marxianus LH 35 (ZIMET 43786)
A process for obtaining low-nucleic acid biomass by cultivating known selected yeast strains on carbohydrate-containing substances, in particular whey, in a CLG high-performance jet fermentor, characterized in that the yeast strains Debaryomyces hansenii LH 306 (ZIMET 43788) and
Kluyveromyces marxianus LH 35 (ZIMET 43786)
in einem Verhältnis von 2:1 bis7:1, vorzugsweise 3:1 und den spezifischen Kultivierungsbedingungen pH-Wert von 1,8-2,5, vorzugsweise 1,9-2,1 sowie einer Verweilzeit von 3-5 h, vorzugsweise 4 h, kontinuierlich fermentiert werden.in a ratio of 2: 1 to 7: 1, preferably 3: 1 and the specific cultivation conditions pH of 1.8-2.5, preferably 1.9-2.1 and a residence time of 3-5 h, preferably 4 h, be continuously fermented.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5486368A (en) * 1992-05-28 1996-01-23 Dmv Usa, Inc. Production of a cultured yeast product from whey permeate, yeast cream and yeast centrate

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US5486368A (en) * 1992-05-28 1996-01-23 Dmv Usa, Inc. Production of a cultured yeast product from whey permeate, yeast cream and yeast centrate

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