DD269854A5 - METHOD FOR THE PRODUCTION OF DESAZA-PURINE UNCLEOSIDE DERIVATIVES AND THEIR USE IN NUCLEIC ACID SEQUENCING AND AS ANTIVIRAL AGENTS - Google Patents
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- DD269854A5 DD269854A5 DD31456488A DD31456488A DD269854A5 DD 269854 A5 DD269854 A5 DD 269854A5 DD 31456488 A DD31456488 A DD 31456488A DD 31456488 A DD31456488 A DD 31456488A DD 269854 A5 DD269854 A5 DD 269854A5
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Abstract
Erfindungsgemaess werden neue Desaza-purin-nucleoside der Formel (I) hergestellt, in der beispielsweise bedeuten: X Stickstoff oder eine Methingruppe,W Stickstoff oder die GruppeR1, R2, R3, R4, gleich oder verschieden Wasserstoff, Halogen, eine Niederalkyl-, Hydroxy-, Mercapto-, Niederalkylthio-, Niederalkyloxy-, Aralkyl-, Aralkyloxy-, Aryloxy- oder eine gegebenenfalls ein- oder zweifach substituierte Aminogruppe, R5 Wasserstoff oder eine Hydroxygruppe, R6, R7 jeweils Wasserstoff oder einer der beiden Reste R6 und R7 Halogen, eine Cyano-, eine Acido- oder eine gegebenenfalls ein- oder zweifach substituierte Aminogruppe Y Wasserstoff, eine Monophosphat-, Diphosphat- oder Triphosphatgruppe sowie moegliche Tautomere und Salze und Nucleinsaeuren, die eine oder mehrere Verbindungen der Formel I als Baustein enthalten. Formel (I)According to the invention, novel desaza purine nucleosides of the formula (I) are prepared in which, for example: X is nitrogen or a methine group, W is nitrogen or the group R 1, R 2, R 3, R 4, identical or different, hydrogen, halogen, a lower alkyl, hydroxy , Mercapto, lower alkylthio, lower alkyloxy, aralkyl, aralkyloxy, aryloxy or an optionally monosubstituted or disubstituted amino group, R5 is hydrogen or a hydroxy group, R6, R7 are each hydrogen or one of the two radicals R6 and R7 is halogen, a cyano, an acid or an optionally mono- or di-substituted amino group Y hydrogen, a monophosphate, diphosphate or triphosphate group and also possible tautomers and salts and Nucleinsaeuren containing one or more compounds of formula I as a building block. Formula (I)
Description
in derin the
X, W, R1, R2, R3, R5, R6', R7' und R' die oben angegebono Bedeutung haben, umsetzt und gegebenenfalls vorhandene Sauerstoffschutzgruppe abspaltet und danach gegebenenfallsX, W, R 1 , R 2 , R 3 , R 5 , R 6 ', R 7 ' and R 'have the above angegebono meaning, and optionally eliminates any existing oxygen protecting group and then optionally
eine so erhaltene Verbindung, in der R6 oder R7 eine Hydroxygruppe bedeutet, nach vorherigem selektivem Schutz der 5'-Hydroxygruppe mit einem Halogenid, Cyanid oder Azid in bekannter Weise in eina Verbindung der Formel I, in der Re oder R7 Halogen, eine Cyano- oder eine Azidogruppe bedeutet, überführt oder in bekannter Weise zu einer Verbindung der Formel I, in dera compound thus obtained in which R 6 or R 7 represents a hydroxy group, after prior selective protection of the 5'-hydroxy group with a halide, cyanide or azide in a known manner in a compound of formula I in which R e or R 7 is halogen , a cyano or an azido group, converted or in a known manner to a compound of formula I, in which
R6 oder R7 Wasserstoff bedeutet, desoxygeniertR 6 or R 7 is hydrogen, deoxygenated
oder eine so erhaltene Verbindung der Formel I, in der R6 oder R7 eine Azidogruppe bedeutet, in bekannter Weise zu einer Verbindung der Formel I, in der R6 oder R' eine Aminogruppe bedeutet, überführtor a compound of the formula I in which R 6 or R 7 is an azido group is converted in a known manner to give a compound of the formula I in which R 6 or R 'is an amino group
und gowünschtenfalls anschließend Verbindungen der Formel I, in denen Y Wasserstoff bedeutet, in bekannter Weise in die Mono-, Di- oderTriphosphate überführt und gewünschtenfalls erhaltene freie Basen bzw. Säuren in die entsprechenden Salze oder erhaltene Salze in die entsprechenden freien Basen bzw. Säuren umwandelt.and, if desired, compounds of the formula I in which Y is hydrogen are then converted into the mono-, di- or tri-phosphates in a known manner and, if desired, free bases or acids obtained are converted into the corresponding salts or salts obtained into the corresponding free bases or acids ,
2. Verwendung von Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie bei der DNA-Sequenzierung eingesetzt werden.2. Use of compounds according to claim 1, characterized in that they are used in DNA sequencing.
3. Verwendung von Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie zur Herstellung von Arzneimitteln eingesetzt werden.3. Use of compounds according to claim 1, characterized in that they are used for the preparation of medicaments.
Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Desaza-purin-nucleosid-Derivaten sowie die Verwendung dieser Nucleosid-Derivate bei der Sequenzierung von Nucleinsäuren sowie als antivirale Mittel.The invention relates to a process for the preparation of desaza purine nucleoside derivatives and to the use of these nucleoside derivatives in the sequencing of nucleic acids and as antiviral agents.
Charakteristik des bekannten Standes der TechnikCharacteristic of the known state of the art
Die Bausteine der Nucleinsäuren enthalten als glycosidische Komponente entweder den ß-D-Ribofuranosylrest oder dessen 2'-Desoxy-Derivat. Neben diesen aglykonischen Resten werden in Nucleosid-Antibiotika modifizierte D-Ribofuranosyl-Derivate gefunden. So enthält z. B. Cordycepin, das aus den Kulturfiltraten von Cordyceps militaris isoliert werden kann, das Monosaccharid Cordycepose. Neben diesem 2'- bzw. 3'-Desoxy-Derivat der Ribonucleoside hat man vor geraumer Zeit 2', 3'-Didesoxynucleoside synthetisch dargestellt. Sie wirken antiviral und können speziell über die Inhibierung des Enzyms Reverse Transkriptase die Vermehrung von Retroviren hemmen (vergleiche Proc. Natl. Acad. Sei. USA 83 [1986] 1911 bzw. Nature 326 (1987) 773). Von besonderem therapeutischem Interesse ist die Hemmwirkung auf das HIV-Virus, den Verursacher von AIDS. Sie haben allerdings den Nachteil, daß sie Inhibitoren auch der zellulären DNA-Polymerase sind, so daß sie cytotoxisch wirken. Weiterhin können sie durch zelluläre Enzyme deaktiviert werden.The building blocks of the nucleic acids contain as glycosidic component either the ß-D-ribofuranosyl or its 2'-deoxy derivative. In addition to these aglycic residues, modified nucleoside antibiotics have found modified D-ribofuranosyl derivatives. So z. Cordycepin, which can be isolated from the culture filtrates of Cordyceps militaris, the monosaccharide Cordycepose. In addition to this 2'- or 3'-deoxy derivative of the ribonucleosides, 2 ', 3'-dideoxynucleosides have been synthetically synthesized some time ago. They have an antiviral action and can specifically inhibit the proliferation of retroviruses by inhibiting the enzyme reverse transcriptase (compare Proc Natl Acad., See, USA 83 [1986] 1911 and Nature 326 (1987) 773). Of particular therapeutic interest is the inhibitory effect on the HIV virus, the causative agent of AIDS. However, they have the disadvantage that they are inhibitors of cellular DNA polymerase, so that they act cytotoxic. Furthermore, they can be deactivated by cellular enzymes.
Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung von neuen Verbindungen mit wertvollen pharmakologischen Eigenschaften, insbesondere mit antiviraler Wirkung, die frei sind von Nebenwirkungen und insbesondere keine cytotoxische Wirkung aufweisen.The aim of the invention is the provision of novel compounds with valuable pharmacological properties, in particular with antiviral activity, which are free of side effects and in particular have no cytotoxic effect.
Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Verbindungen mit den gewünschten Eigenschaften und Verfahren zu ihrer Herstellung aufzufinden.The invention has for its object to find new compounds with the desired properties and processes for their preparation.
fMindungsgemäß werden neue Desaza-purin-nucleosid-Derivate der allgemeinen Formel IAccording to the invention, novel desaza purine nucleoside derivatives of the general formula I
R1 R3 R 1 R 3
(I)(I)
hergestellt, in dermade in the
X Stickstoff oder eine Methingruppe,X is nitrogen or a methine group,
W Stickstoff oder die Gruppe "^ C-R^W nitrogen or the group "^ C-R ^
R1, R2, R3, R4, die gleich oder verschieden sein können, Wasserstoff, Halogen, eine Niederalkyl-, Hydroxy-, Mercapto-, Niederalkyllhio-, Niederalkyloxy-, Aralkyl-, Aralkyloxy-, Aryloxy- oder eine gegebenenfalls ein- oder zweifach substituierte Aminogruppe,R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , which may be the same or different, are hydrogen, halogen, lower alkyl, hydroxy, mercapto, lower alkyl, lower alkyloxy, aralkyl, aralkyloxy, aryloxy or optionally mono- or di-substituted amino group,
R5 Wasserstoff oder eine Hydroxygruppe,R 5 is hydrogen or a hydroxy group,
R6, R7 jeweils Wasserstoff oder einer der beiden Reste R6 und R7 Halogen, p'-.a Cyano-, eine Azido- oder eine gegebenenfalls ein- oder zweifach substituierte Aminogruppe bedeuten,R 6 , R 7 are each hydrogen or one of the two radicals R 6 and R 7 is halogen, p '- is cyano, an azido or an optionally monosubstituted or disubstituted amino group,
wobei einer der Reste R6 und R7 auch eine Hydroxygruppe vorteilen kann, wenn X eine Methingruppe bedeutet, und außerdem R5 und R7 zusammen eine weitere Bindung zwischen C-2' und C-3' darstellen können und Y Wasserstoff, eine Monophosphat-, Diphophat- oder Triphospr MgrLppe vorstellt,' sowie mögliche Tautomere und Salze und Nucleinsäuren, die Verbindungen der Formel I als Baustein enthalten.wherein one of R 6 and R 7 may also benefit from a hydroxy group when X is a methine group, and also R 5 and R 7 together may represent another bond between C-2 'and C-3' and Y is hydrogen, a monophosphate -, Diphophat- or Triphospr MgrLppe presents, 'and possible tautomers and salts and nucleic acids containing compounds of formula I as a building block.
Die Niederalkylreste in der Definition der Substituenten R1, R2, R3 und R4 können gesättigt oder ungesättigt, geradkettig oder verzweigt sein und 1-7, vorzugsweise 1-4 Kohlenstoffatome enthalten. Diese Definition der Alkylreste gilt aucn für die Alkylreste, die in den Definitionen der Niederalkylthio- und Niederalkoxyreste vorkommen. Ganz besonders bevorzugt sind die Methyl- und die Ethylgruppe.The lower alkyl radicals in the definition of the substituents R 1 , R 2 , R 3 and R 4 can be saturated or unsaturated, straight-chain or branched and contain 1-7, preferably 1-4, carbon atoms. This definition of alkyl radicals also applies to the alkyl radicals which occur in the definitions of the lower alkylthio and lower alkoxy radicals. Very particularly preferred are the methyl and the ethyl group.
Unter Halogen in der Definition der Substituenten R', R2, R3, R4, Re und R7 werden Fluor, Chlor, Brom und Jod verstanden.Halogen in the definition of the substituents R ', R 2 , R 3 , R 4 , R e and R 7 is understood as meaning fluorine, chlorine, bromine and iodine.
Die in den Definitionen der Substituenten R1, R2, R3 und R4 vorkommenden Aralkyl- bzw. Aralkoxy-Reste enthalten einen Alkylrest mit 1 bis 5, vorzugsweise 1-3 Kohlenstoffatomen, die ein- oder mehrfach mit einem aromatischen Rest, beispielsweise Phenyl oder Naphthylrest, substituiert sind. Die aromatischen Reste können ihrerseits ein- oder mehrfach durch eine Alkyl- oder Alkoxygruppe mit jeweils 1-3 Kohlenstoffatomen substituiert sein. Besonders bevorzugt ist die Benzylgruppe.In the definitions of the substituents R 1, R 2, R 3 and R 4 aralkyl or aralkoxy occurring residues containing an alkyl group having 1 to 5, preferably 1-3 carbon atoms, the one or more times with an aromatic radical, for example Phenyl or naphthyl radical. The aromatic radicals may in turn be mono- or polysubstituted by an alkyl or alkoxy group each having 1-3 carbon atoms. Particularly preferred is the benzyl group.
Als Aryloxy-Rest in der Definition der Substituenten R1, R2, R3 und R4 sind besonders Phenyioxy-Reste bevorzugt, die gegebenenfalls ein- oder mehrfach durch weitere Substituenten, wie beispielsweise Nitro-, Alkyl- und Alkoxygruppen substituiert sein können.Particularly preferred aryloxy radicals in the definition of the substituents R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are phenyloxy radicals which may optionally be monosubstituted or polysubstituted by further substituents, for example nitro, alkyl and alkoxy groups.
Die in der Definition der Substituenten R1, R2, R3, R4, Re und R7 vorkommende Aminogruppe, die gegebenenfalls ein- oder zweifach substituiert sein kann, enthält als mögliche Substituenten vorzugsweise Alkylgruppen mit 1-5, vorzugsweise 1-3 Kohlenstoffatomen, die ihrerseits wiederum durch Alkoxygruppen, Halogen oder gegebenenfalls ein- oder mehrfach fubstituierte Aminogruppen substituiert sein können. Diese Substituenten können auch einen Aralkylrest vorstellen. Die beiden Stickstoffsubstituenten können auch zusammen einen Alkyliden, vorzugsweise einen Methyliden-Rest darstellen, der seinerseits durch Alkoxy, substituierte Aminogruppen oder Halogen substituiert sein kann. Ein ganz bevorzugter Substituent dieser Art ist dieDimethylaminomethyliden-Gruppe.The amino group occurring in the definition of the substituents R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R e and R 7 , which may optionally be monosubstituted or disubstituted, preferably contains, as possible substituents, alkyl groups having 1-5, preferably 1- 3 carbon atoms, which in turn may be substituted by alkoxy groups, halogen or optionally mono- or poly-substituted amino groups. These substituents may also represent an aralkyl group. The two nitrogen substituents may together also represent an alkylidene, preferably a methylidene radical, which in turn may be substituted by alkoxy, substituted amino groups or halogen. A most preferred substituent of this type is the dimethylaminomethylidene group.
Die Monophosphatgruppe ist die Gruppe -PO(OH)2, die Diphosphatgruppe, die Gruppe -P2O3(OH)3 und die Triphosphatgruppe bedeutet die Gruppe-P3O6(OH)4.The monophosphate group is the group -PO (OH) 2 , the diphosphate group, the group -P 2 O 3 (OH) 3 and the triphosphate group means the group-P 3 O 6 (OH) 4 .
Als mögliche Salze kommen vor allem Alkali-, Erdalkali- und Ammoniumsalze der Phosphatgruppen in Frage. Als Alkalisalze sindPossible salts are, in particular, alkali metal, alkaline earth metal and ammonium salts of the phosphate groups. As alkali salts are
Lithium-, Natrium- und Kaliumsalze bevorzugt. Als Erdalkalisalze kommen insbesondere Magnesium- und Calciumsalze inLithium, sodium and potassium salts are preferred. The alkaline earth salts are in particular magnesium and calcium salts
Frage. Unter Ammoniumsalzen werden erfindungsgemäß Salze verstanden, die das Ammoniumion enthalten, das bis zu vierfach durch Alkylreste mit 1-4 Kohlenstoffatome oder/und Aralkylreste, bevorzugt Benzylreste, substituiert sein kann. Die Substituenten können hierbei gleich oder verschieden sein. Die Salze der Phosphate können auf bekannte Weise in die freien Säuren überführt werden.Question. According to the invention, ammonium salts are understood as meaning salts which contain the ammonium ion, which may be substituted up to four times by alkyl radicals having 1-4 carbon atoms and / or aralkyl radicals, preferably benzyl radicals. The substituents here may be the same or different. The salts of the phosphates can be converted in a known manner into the free acids.
Die Verbindungen der Formel I können basische Gruppen, insesondere Amino-Gnippen enthalten, die mit geeigneten Säuren in Säureadditionsalze übergeführt werden können. Als Säuren kommen hierfür beispielsweise in Betracht: Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Zitronensäure, M.'^hsäure, Maleinsäure oder Methansulfonsäure.The compounds of the formula I may contain basic groups, in particular amino-groups, which can be converted into acid addition salts with suitable acids. Examples of suitable acids are: hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, phosphoric acid, fumaric acid, succinic acid, tartaric acid, citric acid, maleic acid, maleic acid or methanesulfonic acid.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel I sind neue Verbindungen. Sie können in Analogie zu bekannten, verwandten Verbindungen hergestellt werden. Als besonders zweckmäßig hat sich zur Herstellung der Verbindungen der Formel I ein Verfahreii erwiesen, bei dem man eine Verbindung der Formel IlThe compounds of general formula I are novel compounds. They can be prepared in analogy to known, related compounds. To be particularly useful for the preparation of the compounds of formula I has proven a Verfahreii in which a compound of formula II
in derin the
X, W, R1, R* und R3 die oben angegebene Bedeutung haben,X, W, R 1 , R * and R 3 have the abovementioned meaning,
mit emei Verbindung der Formel IIIwith a compound of formula III
Q' -O Q 'is -O
(Ill),(Ill),
in derin the
R6 die oben angegebene Bedeutung hat,R 6 has the meaning given above,
R6, R7 jeweils Wasserstoff oder einer der beiden Reste R6 und R7' eine Azido- oder eine durch eine Sauerstoffschutzgrupp j geschützte Hydroxygruppe,R 6 , R 7 are each hydrogen or one of the two radicals R 6 and R 7 'is an azido or a hydroxy protected by an oxygen protecting group j,
R' eine Sauerstoffschutzgruppe undR 'is an oxygen protecting group and
Z eine reaktive Gruppe bedeutenZ is a reactive group
zu Verbindungen der Formel IVto compounds of formula IV
(IV)(IV)
in derin the
X, W, R', R2, R3, R6, R6', R7' und R' die oben angegebene Bedeutung haben, umsetzt und gegebenenfalls vorhandene Sauerstoffschutzgruppen abspaltet und danach gegebenenfallsX, W, R ', R 2 , R 3 , R 6 , R 6 ', R 7 'and R' have the abovementioned meaning, and optionally eliminates any existing oxygen protecting groups and then optionally
eine so erha'tene Verbindung, in der R6 oder R7 eine Hydroxygruppe bedeutet, nach vorherigem selektivem Schutz dera compound of this type in which R 6 or R 7 denotes a hydroxy group, after prior selective protection of the
B'-Hydroxygruppe mit einem Halogenid, Cyanid oder Azid in bekannter Weise in eine Verbindung der Formel I, in cer R6 oder R7 Halogen oder eine Cyano- oder Azidogruppe bedeutet, überführt oder in bekannter Weise zu einer Verbindung der Formel I, in der R6 oder R7 Wasserstoff bedeutet, desoxygeniertB'-hydroxy group with a halide, cyanide or azide in a known manner in a compound of formula I, in cer R 6 or R 7 is halogen or a cyano or azido group, converted or in a known manner to a compound of formula I, in R 6 or R 7 is hydrogen, deoxygenated
oder eine so erhaltene Verbindung der Formel I, in der R6 oder R7 eine Azidogruppe bedeutet, in bekannter Weise zu einer Verbindung der Formel I, in der R6 oder R7 eine Aminogruppe bedeutet, reduziertor a compound of the formula I in which R 6 or R 7 is an azido group is reduced in a known manner to give a compound of the formula I in which R 6 or R 7 denotes an amino group
und gowünschtenfalls anschließend Verbindungen der Formel I, in denen Y Wasserstoff bedeutet, in bekannter Weise in die Mono-, Di- oder Triphosphate überführtand, if desired, compounds of the formula I in which Y is hydrogen are then converted into the mono-, di- or triphosphates in a known manner
und gewünschtenfalls erhaltene freie Basen bzw. Säuren in die entsprechenden Sähe oder erhaltene Salze >n die entsprechenden freien Basen bwz. Säuren umwandelt.and, if desired, free bases or acids, respectively, which are obtained in the corresponding sows or salts obtained, the corresponding free bases, for example. Acids converted.
Die Verbindungen der Formel Il werden mit den Verbindungen der Formel III umgesetzt, besonders vorteilhaft unter Phasentransferbedingungen. Unter den Bedingungen der Phasentransferkatalyse werden die Gasoen dor pr rmel Il in ein entsprechendes Anion überführt, beispielsweise durch 50%ige wäßrige Natronlauge Das so entstandene Anun wird durch einen Phasantransferkatalysator, beispielsweise TrU2-(2-m6thoxyethoxy)dthyl|amin, hydrophobiert und in die organische Phase transportiert, in der es mit der reaktiven Verbindung der Formel III abreagiert.The compounds of the formula II are reacted with the compounds of the formula III, particularly advantageously under phase transfer conditions. Under the conditions of phase transfer catalysis, the Gasoen be dor p r sleeves Il transferred to a corresponding anion, sodium, for example by 50% aqueous sodium hydroxide solution The resulting Anun is a Phasantransferkatalysator, for example TrU2- (2-m6thoxyethoxy) dthyl | amine hydrophobic, and in transports the organic phase in which it reacts with the reactive compound of formula III.
Als reaktive Gruppen Z in den Verbindungen der allgemeinen Formel III kommen vorzugsweise Halogenreste und Alkoxygruppen in Frage. Die Hydroxygruppen des Zuckerrestes wardden bei dieser Umsetzung in üblicher Weise durch dem Fachmann geläufige Sauerstoffschutzgruppen, beispielsweise Toluoyl-, Benzoyl- oder Acetylgruppen, goschützt. Die Sauerstoffschutzgruppen können nach beendeter Umsetzung in bekannter Weise unter alkalischen Bedingungen wieder abgespalten werden, 7weckmäßigerweise verwandet man eine 1M methanolische Methanolatlösung. Es kann zweckmäßig sein, iuch die Reste h\ R2, R3 und R4 während der Reaktion durch geeignete Schutzgruppen geschützt zu halten.Suitable reactive groups Z in the compounds of general formula III are preferably halogen radicals and alkoxy groups. The hydroxy groups of the sugar radical were in this reaction in the usual way by those skilled in familiar oxygen protecting groups, for example, toluoyl, benzoyl or acetyl groups, goschützt. After completion of the reaction, the oxygen-protecting groups can be eliminated again in a known manner under alkaline conditions. It is convenient to use a 1M methanolic solution of methanolate. It may be convenient to keep the radicals iuch h \ R 2, R 3 and R 4 is protected during the reaction by suitable protecting groups.
Eine weitere vorteilhafte Methode zur Herstellung der Verbindungen der Formel IV stellt das Fest-Flüssig-Phasentransfer-Verfahren unter Verwendung von festem, pulverförrnigern Kaliumhydroxid, dem oben genannten Kryptanden, sowie den Verbindungen der Formeln Il und III in einem aprotischen Lösungsmittel dar.Another advantageous method for preparing the compounds of formula IV is the solid-liquid phase transfer method using solid, powder-formulated potassium hydroxide, the above-mentioned cryptand, and the compounds of formulas II and III in an aprotic solvent.
Verbindungen der Forr :r ι1, in den R6 oder R7 Halogen oder eine Azidogruppe bedeutet, werden vorzugsweise hergestellt, indem man von Verbindungen der Formel I ausgeht, in der Re oder R7 eine Hydroxygruppe vorstellt. Die Hydroxygruppe in 5'-Ste!li:ng wird zunächst selektiv geschützt. Auch hierzu stehen dem Fachmann bekannte Verfahren zur Verfügung. Beispielsweise hat sich in der Nucleotidchemie die 4,4'-Dimethoxytripheny!methylgruppe bewährt. Diese kann nach erfolgte;· Umsetzung wieder leicht durch milde Säurehydrolyse abgespalten werden, während die ebenfalls säurelabile (ilycosidische Bindung unter diesen V.dingunger· nicht hydrolysiert wird. Die Umsetzung des zu schützenden Ni'cloosids η it dem Sauerstoffschutzgruppenreagenz für dib 5'-Hydroxygruppe wird in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, zwerkmäßigerweise getrocknetem Pyridin, mit einem leichten Überschuß des Sauerstoffschutzgruppenreagenzes sowie gegebenenfalls einer geeigneten Hilfsbase, beispielsweise N-Etiiyldiisopropylamin, durchgeführt. Die so geschützte Verbindung dor Formei I wird mit einem Halogenid, zwackmäßigerweise einem Alkalihalogenid oder einem organischen Halogenid, ozv/. mit einem Azid, zweckmäßigerwoise mit einem Alkaliazid, in allgemein bekannter Weise umgesetzt. Die OH-Grup^e mit C-3'Atom wird dabei nucleophil durch das Halogenid bzw. Azid substituiert. Verbindungen der Fo'mel I, in der He oder R7 eine H/droxygruppe bedeutet, können auch nach vorherigem Schutz der 5'-Hydioxygi uppe in vorstehender Weise, nach bekannten 'Methoden desoxygeniert werden, wobei Verbindungen der Formel I entstehen, in denen Re und R7 Wasserstoff bedeutet. Hiorzu wird die Verbindung der allgemeinen Formel I, in der R6 oder R7 eine Hydroxygruppe vorstellt und bei der die 5'-Hydrox>'gruppe in vorstehender Weise geschützt worden ist und auch sonstige funktionell Reste Schutzgruppen tragen, zunächst η ein 3'-O-Thiocarbonylderivat überführt, welches anschließend mit Tributylzinnhydrid radikalisch reduziert wird. Solche V ethoden zur Desoygenierung von 2'-Desoxynucleoriden zu 2',3'-Didesoxynucleosiden sind dem Fachmann bekannt. P Is besonders günstig hat sich Hie Methode der Barton-Desoxv genierung erwiesen (J. Chem. Soc, Perkin Trans. I [1975] 1574).Compounds of Forr : r ι1 in which R 6 or R 7 is halogen or an azido group, are preferably prepared by starting from compounds of formula I, in which R e or R 7 represents a hydroxy group. The hydroxy group in 5'-Ste! Li: ng is initially selectively protected. Again, methods known to those skilled in the art are available. For example, the 4,4'-dimethoxytriphenyl methyl group has been found to be useful in nucleotide chemistry. This reaction can again be easily cleaved off by mild acid hydrolysis after the reaction has taken place, while the acid-labile (ilycosidic bond under this reaction) is not hydrolyzed The reaction of the niocoside to be protected with the oxygen protecting group reagent for dib 5'-hydroxy group is carried out in a suitable organic solvent, pyridino-pyridine, with a slight excess of the oxygen-protecting group reagent and optionally a suitable auxiliary base, for example N-ethyldiisopropylamine The protected compound of formula I is treated with a halide, preferably an alkali halide or an organic halide, ozv / with an azide, suitably with an alkali azide, in a well-known manner, where the OH group with C-3'atom is nucleophilically substituted by the halide or azide H e or R 7 is a hydroxy group b According to known methods, even after previous protection of the 5'-hydroxypropionate in the above manner, it is possible to deoxygenate by known methods to give compounds of the formula I in which R e and R 7 signify hydrogen. Hiorzu is the compound of the general formula I in which R 6 or R 7 represents a hydroxy group and in which the 5'-Hydrox>'group has been protected in the above manner and also carry other functional radicals protecting groups, first η a 3' Transferred O-thiocarbonyl derivative, which is then radically reduced with tributyltin hydride. Such methods for deoxygenating 2'-deoxynucleorides to 2 ', 3'-dideoxynucleosides are known to those skilled in the art. The method of Barton deoxvation has proven to be particularly favorable (J. Chem. Soc, Perkin Trans. I [1975] 1574).
Verbindungen der Formel I, in denen R6 oder R7 eine Aminogruppe bedeutet, w< rdori zweckmäßigerweise hergestellt, indem man Verbindungen der Formei I, it. der dieser Rest R* oder R7 eine Azidogruppe darstellt, reduziert. Diese Reduktion der Azidogruppe zur Aminogrupps kann nach verschiedenen, ellgemein bekannter. Methoden erfolgen. Besonders vorteilhaft hat sich die Reduktion mit Wasserstoffen einem Palladium-Kohlekataiysator erwiesen.Compounds of the formula I in which R 6 or R 7 denotes an amino group are advantageously prepared by reacting compounds of the formula I, it. this radical R * or R 7 represents an azido group, reduced. This reduction of the azido group to the amino group can according to various, well-known. Methods are done. The reduction with hydrogen has proved to be particularly advantageous for a palladium-carbon catalyst.
Die Phosphatgruppen werden in Verbindungen der allgemeinen Formel I, in d anen Y Wasserstoff bedeutet, in bekannter Weise eingeführt. Die Monophosphate erhält man beispielsweise, indem man Verbindungen der Formel I, in denen Y Wassorstoft bedeutet, mit Phosphore;<ychlorid in Trimethylphosphat phosphoryliert. Die auf diesem Wege erhaltenen Triethylammoniumsalze können in bekannter Weise in andere Salze durch Umsätzen überführt werden. Die Di- bzw. Triphosphate werden nach bekannten Methoden, vorzugsweise aus den Monophosphaten durch Umsetzung mit o-Phosphaten bzw. Pyrophosphaten erhalten. Ihre verschiedenen Salze können ebenfalls nach bekannten Methoden hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel Il s'nd bekannte Verbindungen oder können in Analogie zu bekannten Verbindungen hergestellt werden. Derartige Herstellungsverfahren sind beispielsweise beschrieben in Chemische Berichte 110 (1977) 1462, J. Chem. Soc. 1960,131 bzw. Tetrahedron Letters 21 (1980)3135.The phosphate groups are introduced into compounds of the general formula I in which Y is hydrogen, in known manner. The monophosphates are obtained, for example, by phosphorylating compounds of the formula I in which Y represents hydrogen with phosphoryl chloride in trimethyl phosphate. The triethylammonium salts obtained in this way can be converted in a known manner into other salts by means of conversions. The di- or triphosphates are obtained by known methods, preferably from the monophosphates by reaction with o-phosphates or pyrophosphates. Their various salts can also be prepared by known methods. The compounds of the formula II are known compounds or can be prepared in analogy to known compounds. Such preparation methods are described, for example, in Chemische Berichte 110 (1977) 1462, J. Chem. Soc. 1960,131 and Tetrahedron Letters 21 (1980) 3135.
Auch die Verbindungen der Formel III sind zum Teil bekannte Verbindungen. Bisher nicht beschriet ene Verbindungen können in völliger Analogie zu den bekannten Verbindungen hergestellt warden. Die Herstellung einer solchen Verbindung ist beispielsweise beschrieben in Chem. Ber. 93 (1960) 2777 bzw. iiynthecis 1984,961.The compounds of the formula III are also known compounds. Heretofore not envisaged compounds can be prepared in complete analogy to the known compounds. The preparation of such a compound is described for example in Chem. Ber. 93 (1960) 2777 and iiynthecis 1984, 961, respectively.
Die neuen Verbindungen der vorliegenden Erfindung weisen v\ ertvolle pharmakologische Eigenschaften auf. Insbesondere wird durch Inhibierung des Enzyms reverse Transkriptase die Vermehrung von Retrovirun verhindert, d. h. die erfindungsgen laßen Substanzen haben insbesondere cytostatische wie antivirale 'iigenschnften.The novel compounds of the present invention have valuable pharmacological properties. In particular, inhibition of the enzyme reverse transcriptase prevents the proliferation of retrovirun, i. H. the substances according to the invention have, in particular, cytostatic and antiviral properties.
Die Verbindungen gemäß Formel I weisen die Nachteile der bekannten Verbindungen nicht auf. S' wirken antiviral, ohne cytotoxisch zu sein.The compounds according to formula I do not have the disadvantages of the known compounds. S 'act antivirally without being cytotoxic.
Die erfindungsgemäßen Substanzen der Formel I lassen sich auch vorteilhaft bei der DNA-Sequenzierung nach Sanger einsetzen. Besonders die Sequenzierung d(G-C)-reicher DNA-Fragmonte wird durch die Bildung von Sekundärstrukturen, JIo zu einer Bandenkompression im Bereich von d(G-C)-Clustern führen, erschwert. Der Grund hierfür liegt in der Hoogsteen-Basenpaarung von Guanosinmolekülen. Durch den Ersatz von ?'-D'Jsoxygu3ncsintriphosphat durch erfindungsgemäße Verbindungen, in denen Re eine Hydroxygruppe vorstellt, wird die Bandenkompression größtenteils behoben. Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I, in denen R6 und R7 Wasserstoff bedeuten, werden bei der DNA-Sequenzierung nach Sanger als Kettenterminatoren anstelle der bekannten 2',3'-Didesoxyverbindungen verwendet. Nucleinsäuren, die als Baustein eine oder mehrere Verbindungen der Formel I enthalten, können nrch bekannten Verfahren hergestellt werden (beispielsweise Nucleic Acids Research Vol. Ί4, Nr. 5,1986, S.2319ff.). Sie entstehend aber auch beispielsweise bei der DNA-Sequenzierung. Werden als Bausteine Verbindungen der Formel I verwendet, in welcher Re eineThe substances of the formula I according to the invention can also be used advantageously in DNA sequencing according to Sanger. In particular, the sequencing of d (GC) -rich DNA fragment is complicated by the formation of secondary structures, JIo lead to a band compression in the range of d (GC) clusters. The reason for this lies in the Hoogsteen base pairing of guanosine molecules. Substitution of α'-D -oxyalkyne triphosphate by compounds of the present invention in which R e introduces a hydroxy group largely eliminates band compression. The compounds of the formula I according to the invention in which R 6 and R 7 are hydrogen are used in the Sanger DNA sequencing as chain terminators instead of the known 2 ', 3'-dideoxy compounds. Nucleic acids which comprise one or more compounds of the formula I as building block can be prepared by known processes (for example Nucleic Acids Research Vol. 4, No. 5,1986, p. 2319ff.). They also arise, for example, in DNA sequencing. Are used as building blocks compounds of formula I, in which R e a
Hydroxygruppe bedeutet, so kann eine Nucloinsaure mehrere solcher Bausteine aufweisen; wird als Baustein eine Verbindung der Formel I verwendet, in der R6 Wasserstoff bedeutet, so kann ein solcher Baustein nur einmal, nämlich am Kettenende eingebaut sein. Die erfindungsgemäßer. Nucleinsäuren sind aus 2 bis 1000, vorzugsweise 8 bis 50 Nucleotidhaustelnon aufgebaut. Besonders bevorzugt sind Nucleinsäuren mit 15- 30 Nucleotidbausteinen.Hydroxy group, so a Nucloinsaure can have several such building blocks; If the building block used is a compound of the formula I in which R 6 is hydrogen, such a building block can be incorporated only once, namely at the end of the chain. The inventive. Nucleic acids are made up of from 2 to 1000, preferably 8 to 50, nucleotide units. Particular preference is given to nucleic acids having 15-30 nucleotide units.
Diese Nucleinsäuren können ebenfalls als antivirale Mittel eingesetzt werden. Als sogenannte anti-sense-Nucleinsäure hybridisiert diese Nucleinsäure mit der ssDNA/RNA des Virus und erschwert die Transskription zur Virus-DNA. Solche Nucleinsäuren können insbesondere als Mitte! gegen AIDS verwendet werden, da sie nicht oder nur schwer durch zelleigene Restriktionsenzyme abgebaut werden.These nucleic acids can also be used as antiviral agents. As a so-called anti-sense nucleic acid, this nucleic acid hybridizes with the ssDNA / RNA of the virus and complicates the transcription to the viral DNA. Such nucleic acids can be used as a middle! against AIDS because they are not or only with difficulty degraded by cell-specific restriction enzymes.
Zur Herstellung von Arzneimitteln werden die Substanzen der allgemeinen Formel I, ihru pharmakologisch verträglichen Salze oder sie enthaltenden Nucleinsäuren in an sich bekannter Weise mit geeigneten pharmazeutischen Trägersubstanzen, Aroma-, Geschmacks- und Farbstoffen gemischt und beispielsweise als Tabletten oder Dragees ausgeformt oder unter Zugabe entsprechender Hilfsstuffe in Wasser oder Öl, wie z. B. Olivenöl, suspendiert oder gelöst.For the preparation of medicaments, the substances of the general formula I, their pharmacologically acceptable salts or nucleic acids containing them are mixed in a manner known per se with suitable pharmaceutical carriers, flavors, flavors and dyes and shaped, for example, as tablets or dragees or with the addition of appropriate auxiliary stoppers in water or oil, such. As olive oil, suspended or dissolved.
Die «rfindungngetiäii-- Substanzen können in flüssiger oder fester Form enteral oder parenteral appliziert werden. Als Injektionsmedium kommt vorzugsweise Wasser zur Anwendung, welches die bei Injektionslösungen üblichen Zusätze, wie Stabilisierungsmittel, Lösungsvermittler oder Puffer enthält.The inhalation substances can be administered in liquid or solid form, either enterally or parenterally. Water is preferably used as the injection medium, which contains the additives customary in injection solutions, such as stabilizers, solubilizers or buffers.
Derartige Zusätze sind z. B. Tartrat- und Citratpuffer, Ethanol, Komplexbildner (wie Ethylendiamintetraessigsäure und deren nichttoxische Salze) und hochmolekulare Polymere (wie flüssiges Polyethylenoxid) zur Viskositätsregulierung. Feste Trägerstoffe sind z. B. Stärke, Lactose, Mannit, Methylcellulose, Talkum, hochdisperse Kieselsäuren, hochmolekulare Fettsäuren (wie Stearinsäure), Gelatine, Agar-Agar, Cilciumphosphat, Magnesiumstearat, tierische und pflanzliche Fette und feste hochmolekulare Polymere (wie Polyethyienrjlykole). Für orale Applikation geeignete Zubereitungen können gewünschtenfalls Geschmacks- und Süßstoffe enthalten.Such additives are z. Tartrate and citrate buffers, ethanol, complexing agents (such as ethylenediaminetetraacetic acid and its non-toxic salts) and high molecular weight polymers (such as liquid polyethylene oxide) for viscosity control. Solid carriers are z. As starch, lactose, mannitol, methylcellulose, talc, fumed silica, high molecular weight fatty acids (such as stearic acid), gelatin, agar-agar, Cilciumphosphat, magnesium stearate, animal and vegetable fats and solid high molecular weight polymers (such as Polyethyienrjlykole). If desired, preparations suitable for oral administration may contain flavorings and sweeteners.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden üblicherweise in Mengen von 1-100mg, vorzugsweise 2-80 mg pro Tag und pro kg Körpergewicht appliziert. Bevorzugt ist es, die Tagesdosis auf 2-5 Applikationen zu verteilen, wobei bei jeder Applikation 1-2 Tabletten mit einem Wirkstoffgehalt von 5-1 GOOmg verabreicht worden. Die Tabletten können auch retardiert sein, wodurch sich ιί:<» Anzahl der Applikationen pro Tag auf 1-3 vermindert. Der Wirkstoffgehalt der retardierten Tabletten kann 2O-2OOOmg betragen. Der Wirkstoff kann auch durch injektion ein- bis achtmal pro Tag bzw. durch Dauerinfusion gegeben werden, wobei Mengen von 50-4000 mg/Tag normalerweise ausreichen.The compounds according to the invention are usually administered in amounts of 1-100 mg, preferably 2-80 mg per day and per kg of body weight. It is preferred to distribute the daily dose to 2-5 applications, with each application 1-2 tablets having an active ingredient content of 5-1 GOOmg been administered. The tablets may also be retarded, reducing ιί: <»number of applications per day to 1-3. The active ingredient content of the delayed-release tablets can be 2O-2OOOmg. The active ingredient may also be given by injection one to eight times a day or by continuous infusion, with amounts of 50-4000 mg / day usually being sufficient.
Ausführungsbeispieleembodiments
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert.The invention is further illustrated by the following examples.
Beispiel 1 2-Amino-7-desflza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-onExample 1 2-Amino-7-desflza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purin-6-one
a) 2-[(4,4'-Dimethoxytriphenylmethyl)amino]-7-desaza-2'-desoxy-5'-0-(4,4'-dimothoxytriphenylmethyl)-9-ß-D-ribofuranosylpurin-6-ona) 2 - [(4,4'-Dimethoxytriphenylmethyl) amino] -7-deaza-2'-deoxy-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -9-.beta.-D-ribofuranosylpurin-6-one
1 ,Og (3,8 mmol) 7-Desaza-2'-desoxyguanosin wird zweimal mit trockenem Pyridin abgedampft und in 20 ml Pyridin suspendiert. Man fügt 4,0g (11,8mmol)4,4'-Dirnethoxytriphenylmethylchlorid und 2,5ml (14,6mmol) Hünig-Base (N-Ethyldiisopropylamin) hinzu und rührt 3 Stunden bei Raumtemperatur.1, Og (3.8 mmol) of 7-deaza-2'-deoxyguanosine is evaporated twice with dry pyridine and suspended in 20 ml of pyridine. 4.0 g (11.8 mmol) of 4,4'-dilethoxytriphenylmethyl chloride and 2.5 ml (14.6 mmol) of Hünig's base (N-ethyldiisopropylamine) are added and the mixture is stirred at room temperature for 3 hours.
Die Reaktionsmischung wird anschließend in 150 ml 5%ige, wässerige NaHCOjLösung gegeben und zwei !,al mit je 150 ml CH2CI2 extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden über Na2SO4 getrocknet, filtriert und an Kieselgel 6OH (Säule 10 χ 4cm, CH2CI2/Aceton [9:1]) chromatographiert. Nach Einengen der Hauptzone wird der Rückstand in wenig CH2CI2 gelöst und in eine Mischung aus n-Hexan/Ether (1:1) eingetropft. Nach Filtration erhält man 2,04g (61 %) der gewünschten farblosen, amorphen Verbindung. — DC (Kieselgel, CH2CI2/Aceton [8:2]): RF = 0,7.—UV (MeOH): Amix = 2/2,283nm (Sch.) (ε = 18800, 16400).—The reaction mixture is then added to 150 ml of 5% strength aqueous NaHCO 3 solution and extracted two times, each with 150 ml of CH 2 Cl 2 . The combined organic extracts are dried over Na 2 SO 4 , filtered and chromatographed on silica gel 6OH (column 10 × 4 cm, CH 2 Cl 2 / acetone [9: 1]). After concentrating the main zone, the residue is dissolved in a little CH 2 Cl 2 and added dropwise to a mixture of n-hexane / ether (1: 1). After filtration, 2.04 g (61%) of the desired colorless, amorphous compound are obtained. - TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / acetone [8: 2]): R F = 0.7. UV (MeOH): A mix = 2 / 2.283 nm (Sch.) (Ε = 18800, 16400). -
'H-NMR( [D6]DMSO): δ = 1,75 (m, 2'-Hb), 1,86 (m, 2'-H1), 3,09 (m, 5'-H), 3,79 (m, 4-H), 4,10 (m, 3'-H), 5,19 (d, 3'-OH, J = 4,3 Hz), 5,61 (pt, T-H, J = 6,5Hz),6,16d,6-H,J = 3,5Hz), 6,62 (d,5-H, J = 3,5Hz), 10,35 (s, NH). Cs3H50N4Oe (871,0) Ber. C 73,09 H 5,79 N 6,43 Gef. C 73,02 H 5,98 N 6,34'H-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 1.75 (m, 2'-H b ), 1.86 (m, 2'-H 1 ), 3.09 (m, 5'-H ), 3.79 (m, 4-H), 4.10 (m, 3'-H), 5.19 (d, 3'-OH, J = 4.3 Hz), 5.61 (pt, TH, J = 6.5Hz), 6.16d, 6-H, J = 3.5Hz), 6.62 (d, 5-H, J = 3.5Hz), 10.35 (s, NH). Cs 3 H 50 N 4 Oe (871.0) Ber. C 73.09 H 5.79 N 6.43 Gef. C 73.02 H 5.98 N 6.34
b) 2-((4,4'-Dimethoxytriphenylmethyl)amino)-7-desaza-2'-desoxy-3'-O-phenoxythiocarbonyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-onb) 2 - ((4,4'-Dimethoxytriphenylmethyl) amino) -7-deaza-2'-deoxy-3'-O-phenoxythiocarbonyl-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -9-β- D-ribofuranosyl-purine-6-one
Eine Suspension aus 1,0g (1,1 mmol) der Verbindung aus 1 a) in 15ml trockenem Acetonitril wird mit 300mg (2,5mmol) p-Dimethylaminopyridin und300|il (2,2mmol) Phenoxythiocarbonylchlorid versetzt und 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wird eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 6OH (Säule 10 χ 4cm, CH2CI2/Aceton [8:2]) chromatographiert. Der durch Eindampfen der H;>upt?one enthaltene Rückstand wird in wenig CH2CI2 gelöst und durch Eintropfen in eine Mischung aus n-Hexan/Ether (1:1) ausgefällt, man erhält 0,99g (89%) farblose, amorpne Substanz. — DC (Kieselgel, CH2CI2/Aceton [8:2]): Rf = 0,8. —UV(MeOH): Amlx = 269,282nm (Sch.) (ε = 19300,16000).— 1H-NMR (ID6IDMSO): δ = 2,06 (m, 2'-Hb), 2,34 (m, 2'-Ha), 3,26 (m, 5'-H), 4.25 (m, 4'-H), 5,61 (m, 3'-H und 1'-H), t.?3 (d, 6-H, J = 3,5Hz), 6,67 (d, 5-H, J = 3,5! !*), 10,41 (s, NH).A suspension of 1.0 g (1.1 mmol) of the compound from 1 a) in 15 ml of dry acetonitrile is mixed with 300 mg (2.5 mmol) of p-dimethylaminopyridine and 300 ml (2.2 mmol) of phenoxythiocarbonyl chloride and stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture is concentrated by evaporation and the residue is chromatographed on silica gel 6OH (column 10 × 4 cm, CH 2 Cl 2 / acetone [8: 2]). The residue obtained by evaporating the H 2 O is dissolved in a little CH 2 Cl 2 and precipitated by dropwise addition into a mixture of n-hexane / ether (1: 1), giving 0.99 g (89%) of colorless amorphous substance. - TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / acetone [8: 2]): R f = 0.8. -UV (MeOH): A mlx = 269.282nm (Sch.) (Ε = 19300, 16000) .- 1 H-NMR (ID 6 IDMSO): δ = 2.06 (m, 2'-H b ), 2 , 34 (m, 2'-H a ), 3.26 (m, 5'-H), 4.25 (m, 4'-H), 5.61 (m, 3'-H and 1'-H) , t.3 (d, 6-H, J = 3.5Hz), 6.67 (d, 5-H, J = 3.5!! *), 10.41 (s, NH).
C60H54N4O9S (1007,2) Btr. C71,77 H 5,40 N 5,56 S3.18C 60 H 54 N 4 O 9 S (1007.2) Btr. C71.77 H 5.40 N 5.56 S3.18
Gef. C 71,26 H 5,43 N 5,52 S 3,11C 71.26 H 5.43 N 5.52 S 3.11
c) 2-((4,4'-Dimethoxytriphunylmethyl)amino)-7-desaia-2'-3'-didesoxy-5'-O-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-9-p-D-ribfuranosyl-purin-6-onc) 2 - ((4,4'-Dimethoxytriphunylmethyl) amino) -7-diaza-2'-3'-dideoxy-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -9-pD-ribfuranosyl-purine 6-one
ROOmg (0,5mmol) der Verbindung aus 1 b) in 2OmI frisch destilliertem Toluol werden mit 30mg (0,2mmol) 2,2'-Azo-bls-(2-meihylpropionsäurenitril) und 300μΙ '1,1 mmol) Tributylzinnhydrid versetzt und 3 Stunden unter Argon bei 80"C gerührt (DC-Kontrolle, CHCI3/Methanol [97:3]). Nach vollständiger Umsetzung wird die Reaktionsmischen eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 60 H (Säule 30 χ 4ci n), ChClj/Methanol (99:1 ]) chromatographiert. Nach Eindampfen der Hauptzone und Aufnehmen in wenig CH2CI2 werden 320 mg (75%) der gewünschten amorphen, farblosen Veroindung durch Eintropfen in n-Hexbn/Ether gefäll!. — DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol [95:5]): RF = 0,51H-NMR ([D6]DMSO): δ = 1,63,1,00 (2 m, 2'-H und 3'-H), 3,O-* (m, 5'-H), 4,06 (m, 4'-H, 5,43 (m, 1'-H), 6,11 (d, 6-H, J = 3,5Hz), 6,65 (d, 5-H), J = 3,5Hz), 10,34 (s, NH).ROOmg (0.5 mmol) of the compound from 1 b) in 2OmI freshly distilled toluene are mixed with 30mg (0.2 mmol) of 2,2'-azo-bls- (2-meihylpropionsäurenitril) and 300μΙ '1.1 mmol) tributyltin hydride and Stirred under argon at 80 ° C. for 3 hours (TLC check, CHCl 3 / methanol [97: 3]). After complete reaction, the reaction mixtures are concentrated by evaporation and the residue is suspended on silica gel 60 H (column 30 × 4 ci), ChClj / methanol After evaporation of the main zone and absorption in a little CH 2 Cl 2 , 320 mg (75%) of the desired amorphous, colorless compound are precipitated by dropwise addition into n-hexane / ether! - TLC (silica gel, CH 2 ) 2 CI 2 / methanol [95: 5]): R F = 0.5 1 H-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 1.63, 1.00 (2 m, 2'-H and 3 ') -H), 3, O - * (m, 5'-H), 4.06 (m, 4'-H, 5.43 (m, 1'-H), 6.11 (d, 6-H , J = 3.5Hz), 6.65 (d, 5-H), J = 3.5Hz), 10.34 (s, NH).
d) 2-Amino-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosylpurin-6-ond) 2-Amino-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosylpurine-6-one
300mg (0,35mmol) der Verbindung aus 1 c) werden in 10ml 80%iger Essigsäurt» gelöst und 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel im Ölpumpenvakuurn abgezogen und der Rückstand mehrmals mit Wasser abgedampft. Das Rohrprodukt wird an Kieselgel 6OH (Säule ΊΟ χ 4cm, CH2CI2/Methanol [9:1]) chromatographiert. Dia durch eindampfen der Hauptfraktion erhaltene, schaumige Substanz wird aus wenig Methanol kristallisiert, man erhält 50 mg (57 %) fürblose Nadeln vom Schmp. 228°C(Zers.). —DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol [9:1]): RF = 0,3. UV (MeOH): Jw = 261,281 nm (Sch.) (ε = 13300,7800).—300 mg (0.35 mmol) of the compound from 1 c) are dissolved in 10 ml of 80% strength acetic acid »and stirred for 15 minutes at room temperature. The solvent is then removed in an oil pump vacuum and the residue is evaporated several times with water. The crude product is chromatographed on silica gel 6OH (column ΊΟ χ 4 cm, CH 2 Cl 2 / methanol [9: 1]). The frothy substance obtained by evaporation of the main fraction is crystallized from a little methanol, giving 50 mg (57%) of bare needles of mp 228 ° C. (dec.). -DC (silica gel, CH 2 Cl 2 / methanol [9: 1]): R F = 0.3. UV (MeOH): Jw = 261.281 nm (Sch.) (Ε = 13300.7800) .-
1H-NMR ([D8]UMSO): δ = 1,96(m,3'-H;,2,08,2,27(2m,2'-H, und 2'-Hb), 3,48 (m, 5'-H), 3,97 (m, 4'-H), 4,86 (t, 5'-OH1J = 5,4Hz), 6,12 (pt, 1'-H, J = 5,5Hz), 6,24 (m, NH2 und 6-H), 6,92 (d, 5-H, J = 3,5Hz), 10,34 (s, NH). CuH14N4O3 (250,3) Ber. C 52,79 H5.64 N 22,39 Gef. C 52,98 H 5,80 N 22,55 1 H-NMR ([D 8 ] UMSO): δ = 1.96 (m, 3'-H ;, 2.08.2.27 (2m, 2'-H, and 2'-H b ), 3 , 48 (m, 5'-H), 3.97 (m, 4'-H), 4.86 (t, 5'-OH 1 J = 5.4Hz), 6.12 (pt, 1'- H, J = 5.5Hz), 6.24 (m, NH 2 and 6-H), 6.92 (d, 5-H, J = 3.5Hz), 10.34 (s, NH). CuH 14 N 4 O 3 (250.3) calc. C 52.79 H5.64 N 22.39 Gef. C 52.98 H 5.80 N 22.55
In analoger Weise erhält man über die entsprechenden 2'-Desoxynucleoside und anschließende Deoxigenierung, wie unter c) beschrieben:In an analogous manner is obtained via the corresponding 2'-deoxynucleosides and subsequent deoxygenation, as described under c):
A) 3,7-Dldesaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purln UV (0,1 n-HCI): Kmn = 224,274nmA) 3,7-Dldesaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine UV (0.1 n-HCl): K mn = 224.274 nm
C12H14N2O2 (218,2) Ber. C 66,0 H 6,4 N 12,8 Gef. C 66,1 H 6,4 N 12,6C 12 H 14 N 2 O 2 (218.2) Ber. C 66.0 H 6.4 N 12.8 Gef. C 66.1 H 6.4 N 12.6
UV (Methanol): Xm.x = 264nm (ε = 11600), 282nm (ε = 8000), 295nm (ε = 5200) C12H14N2O3 (234,2) Ber. C61.5 H6,0 N 11,95 Gef. C 61,3 H 6,1 N 11,8UV (methanol): X m . x = 264nm (ε = 11600), 282nm (ε = 8000), 295nm (ε = 5200) C 12 H 14 N 2 O 3 (234.2) m. C61.5 H6,0 N 11,95 Gef. C 61,3 H 6,1 N 11,8
C) 2-Chlor-6-methoxy-3,7-didesaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin UV (Methanol) Am„ = 271,280 nmC) 2-Chloro-6-methoxy-3,7-dideaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine UV (methanol) A m "= 271.280 nm
C13H16N2O3CI (282,6) Ber. C 55,2 H 5,3 N 9,9 Gef. C 55,1 H 5,3 N 9,9C 13 H 16 N 2 O 3 Cl (282.6) Calcd. C 55.2 H 5.3 N 9.9 Gef. C 55.1 H 5.3 N 9.9
D) 6-Amino-3,7-didesaza-2',3'-dideioxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin C12H15N3O2 (233,2) Ber. C 63,65 H 6,16 N 17,13D) 6-Amino-3,7-dideaza-2 ', 3'-dideioxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine C 12 H 15 N 3 O 2 (233.2) Ber. C 63.65 H 6,16 N 17,13
Gef. C 63,62 H 6,11 N 17,01 UV (Methanol) Xmn 271 nm (ε = 12800)Found C 63.62 H 6.11 N 17.01 UV (methanol) X mn 271 nm (ε = 12800)
E) 3,7-Didesaza-2',3'-didesoxy-9-ß-U-r:hofuranosyl-purln-2,6-dion C12H14N2O4 (250,2) Ber. C57.&5 H5,6 N 11,2E) 3,7-Dideaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-uro: hofuranosyl-purine-2,6-dione C 12 H 14 N 2 O 4 (250.2) Ber. C57. & 5 H5.6 N 11.2
Gef. C 57,50 H 5,7 N 11,2Gef. C 57.50 H 5.7 N 11.2
2-{[(Dimethylamino)methylen]amino}-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-on2 - {[(dimethylamino) methylene] amino} -7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine-6-one
a) 2{[(Dimethylamino)methylen]amino}-7-desaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-on270mg (1,01 mmol) 7-Desaza-2'-desoxy-guanosin in 5ml trockenem, aminfreiem Dimethylformamid werden mit 2ml (11,7 mmol) Ν,Ν-Dimethylformamiddiethylacetal versetzt und 1 Stunde bei 50cC unter Argon gerührt. Anschließend wird die Reaktionsmischung im Vakuum eingedampft und r η Kieselgel 6OH (Säule 10 x 4cm, CH2CI2/Methanol [9:1 j) chromatographiert. Durch Abdampfen des Lösungsmittels erhält man aus der Hauptzone 230 mg (71 %) hellgelbe, amorphe Substanz.—a) 2 {[(dimethylamino) methylene] amino} -7-desaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purin-6-one 270mg (1.01 mmol) 7-deaza-2'-deoxy- guanosine in 5 ml of dry, amine-free dimethylformamide are mixed with 2 ml (11.7 mmol) of Ν, Ν-dimethylformamide diethyl acetal and stirred for 1 hour at 50 ° C. under argon. Subsequently, the reaction mixture is evaporated in vacuo and r η 6OH silica gel (column 10 x 4 cm, CH 2 Cl 2 / methanol [9: 1 j) chromatographed. Evaporation of the solvent gives the main zone 230 mg (71%) of pale yellow, amorphous substance.
DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol [9:1]): RF = 0,3. —UV (MeOH): Am„ = 240,311 nm (ε = 18300,17400).— 1H-NMR ([D6)IDMSO: δ = 2,15 (m, 2'-Hb), 2,41 (m, 2'-H,), 3,02,3,15 (s, 2CH3), 3,52 (m, 5'-H), 3,79 (m, 4'-H), 4,32 im, 3'-H), 4,91 (t,5'-0H,J = 5,4 Hz), 5,27 (d, 3'-OH), J = 3,5 Hz), 6,34 (d, 6-H, J = 3,5 Hz), 6,45 (pt, 1'-H, J = 7,0 Hz), 7,07 (d, 5-H, J = 3,5 Hz), 8,56 (s, NH=C), 11,04 (s, NH).TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / methanol [9: 1]): R F = 0.3. -UV (MeOH): A m "= 240.311 nm (ε = 18300, 1700) .- 1 H-NMR ([D 6 ] IDMSO: δ = 2.15 (m, 2'-Hb), 2.41 ( m, 2'-H,), 3.02.3.15 (s, 2CH 3 ), 3.52 (m, 5'-H), 3.79 (m, 4'-H), 4.32 in, 3'-H), 4.91 (t, 5'-0H, J = 5.4 Hz), 5.27 (d, 3'-OH), J = 3.5 Hz), 6.34 (d, 6-H, J = 3.5 Hz), 6.45 (pt, 1'-H, J = 7.0 Hz), 7.07 (d, 5-H, J = 3.5 Hz ), 8.56 (s, NH = C), 11.04 (s, NH).
C14H19N6O4 (321,3) Ber. C 52,33 H 5,96 N 21,79 Gef. C 52,48 H 6,14 N 21,69C 14 H 19 N 6 O 4 (321.3) Ber. C 52.33 H 5.96 N 21.79 Gef. C 52.48 H 6.14 N 21.69
b) 2-{[(Dimethylamino)methylonlamino}-7-de3aza-2'-desoxy-5'-0-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-onb) 2 - {[(Dimethylamino) -methylonlamino} -7-de3aza-2'-deoxy-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -9-.beta.-D-ribofuranosyl-purin-6-one
100mg (0,31 mmol) der Verbindung aus 2a) werden in 2ml trockenem Pyridin gelöst, mit 170mg (0,5mmol) 4,4'-Dimethoxytriphenylmethylchlorid und 0,2 ml (1,2 mmol) Hünig-Base versetzt und 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird die Reaktionsmischung eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 6OH (Säule 10 χ 2,5cm, Solvens CHCI3/Methanol [99:1]) chromatographiert. Der durch Eindampfen der Hauptfraktion erhaltene Rückstand wird in CH2CI2 gelöst, und durch Eintropfen in eine Mischung aus n-Hexan/Ether (1:1) werden 160 mkg (84%) farblose, amorphe Substanz gefällt. — DC (Kieselgel, CH CI2/Methanol [9:1)): RF = 0,6. — UV (MeOH): X011x = 236,311 nm (ε = 38200.18100).—100 mg (0.31 mmol) of the compound from 2a) are dissolved in 2 ml of dry pyridine, mixed with 170 mg (0.5 mmol) of 4,4'-dimethoxytriphenylmethyl chloride and 0.2 ml (1.2 mmol) of Hünig base and left to stand for 3 hours stirred at room temperature. The reaction mixture is then evaporated and the residue is chromatographed on silica gel 6OH (column 10 × 2.5 cm, solvent CHCl 3 / methanol [99: 1]). The residue obtained by evaporation of the main fraction is dissolved in CH 2 Cl 2 and by dropwise addition to a mixture of n-hexane / ether (1: 1) 160 mkg (84%) of colorless, amorphous substance are precipitated. - TLC (silica gel, CH CI 2 / methanol [9: 1)): R F = 0.6. - UV (MeOH): X 011x = 236.311 nm (ε = 38200.18100) .-
1H-NMR (IDe]DMSO): δ = 2,23 (m, 2'-H„), 2,42, (m, 2'-H1), 3,03 (s, CH3), 3,14 Im, 5'-H und CH3), 3,90 (m, 4'-H), 4,33 (m, 3'-H), 5,34 (d, 3'-OH, J = 4,3Hz), 6,34 (d, 6-H, J = 3,5Hz), 6,49 (pr, 1'-H, J = 6,8Hz), 6,90 (d, 5-H, J = 3,5Hz), 8,58 (s, NH=C), 11,07 (s, NH). C35H37N5Oe (623,7) Ber. C 67,40 H 5,98 N 11,23 Gef. C 67,31 H 6,00 N 11,17 1 H-NMR (IDe! DMSO): δ = 2.23 (m, 2'-H "), 2.42, (m, 2'-H 1 ), 3.03 (s, CH 3 ), 3 , 14 Im, 5'-H and CH 3 ), 3.90 (m, 4'-H), 4.33 (m, 3'-H), 5.34 (d, 3'-OH, J = 4.3Hz), 6.34 (d, 6-H, J = 3.5Hz), 6.49 (pr, 1'-H, J = 6.8Hz), 6.90 (d, 5-H, J = 3.5Hz), 8.58 (s, NH = C), 11.07 (s, NH). C 35 H 37 N 5 Oe (623.7) Ber. C 67.40 H 5.98 N 11.23 Gef. C 67.31 H 6.00 N 11.17
c) 2-{((Dimathylamino)methylen]amino}-7-desaza-2'-desoxy-3'-O-phenoxythiocarbonyl-5'-O-(4,4-dimethoxytriphenylmethyl)-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-onc) 2 - {((Dimathylamino) methylene] amino} -7-deaza-2'-deoxy-3'-O-phenoxythiocarbonyl-5'-O- (4,4-dimethoxytriphenylmethyl) -9-.beta.-D-ribofuranosyl purine-6-one
900mg (1,4mmol) der Verbindung aus 2 b), gelöst in 15ml trockenem CH2CI2, werden mit 340mg (2,8mmol) p-Dimethylaminopyridin und 250μΙ (1,8mmol) Phenoxythiocarbonylchlorid versetzt und 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 6OH (Säule 20 χ 4cm, CHCIs/Aceton [7:3], CHCI3/Aceton [6:4]) chromatographiert. Der durch Eindampfen der Hauptzone erhaltene Rückstand wird in wenig CH2CI2 aufgenommen und durch Eintropfen in n-Hexan/Ether (1:1) werden 980mg (90%) der gewünschten farblosen, amorphen Verbindung gefällt. —900 mg (1.4 mmol) of the compound from 2 b), dissolved in 15 ml of dry CH 2 Cl 2 , are mixed with 340 mg (2.8 mmol) of p-dimethylaminopyridine and 250 μl (1.8 mmol) of phenoxythiocarbonyl chloride and stirred at room temperature for 16 hours. The solution is evaporated in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel 6OH (column 20 × 4 cm, CHCIs / acetone [7: 3], CHCl 3 / acetone [6: 4]). The residue obtained by evaporation of the main zone is taken up in a little CH 2 Cl 2 and 980 mg (90%) of the desired colorless, amorphous compound are precipitated by dropwise addition into n-hexane / ether (1: 1). -
DC(Kieselgel,CHjClj/Methanol [95:5]): RF = 0,5.UV(MeOH): \mix = 235,312nm (ε = 41300,11400,12600,17000).— 1H-NMR ([D6]DMSO): δ = 2,73 (m, 2'-H„), 2,97 (m, 2'-H1), 3,01,3,10 (s, 2CH3), 3,37 (m, 5'-H), 4,33 (m, 4'-H), 5,90 (m, 3'-H), 6,40 (d, 6-H, J = 3,5Hz), 6,55 (pt, V-H), 6,98 (d, 5-H, J = 3,5Hz), 8,58 (s, CH=N), 11,30 (s, NH). O12H4IN6O7S (759,9) Ber. C 66,39 H 5,44 N 9,22 S 4,22 Gef. C 66,49 H 5,55 N 9,25 S 4,29TLC (silica gel, CHjClj / methanol [95: 5]): R F = 0.5.UV (MeOH): \ mix = 235.312nm (ε = 41300, 1400, 12600, 17000) .- 1 H-NMR ([ D 6 ] DMSO): δ = 2.73 (m, 2'-H "), 2.97 (m, 2'-H 1 ), 3.01.3, 10 (s, 2CH 3 ), 3, 37 (m, 5'-H), 4.33 (m, 4'-H), 5.90 (m, 3'-H), 6.40 (d, 6-H, J = 3.5Hz) , 6.55 (pt, VH), 6.98 (d, 5-H, J = 3.5Hz), 8.58 (s, CH = N), 11.30 (s, NH). O 12 H 4 IN 6 O 7 S (759.9) Ber. C 66.39 H 5.44 N 9.22 S 4.22 Gef. C 66.49 H 5.55 N 9.25 S 4.29
d) 2-{[(Dimethylamino)methylen]amino}-7-desaza-2',3'-didesoxy-5'-0-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-9-ß-D-ribofuranosylpurin-6-ond) 2 - {[(dimethylamino) methylene] amino} -7-desaza-2 ', 3'-dideoxy-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -9-β-D-ribofuranosylpurine-6 on
500mg (0,7mmol) der Verbindung aus 2c), gelöst in 20ml frisch destilliertem Toluol, v/erden mit 25mg (0,15mmol) 2,2'-Azobis-(2-methylpropionsäurenitril)und50ul (1,9mmol)Tributylzinnhydrid versetzt und bei 8O0C unter Argon 16 Stunden gerührt. Anschließend wird die Reaktionsmischung im Ölpumpenvakuum eingedampft und der Rückstand an Kieselgel 6OH (Säule 20 χ 4cm, CH2CI2/Aceton (9:1], CHCI3MCeUJn [7:3], CHCI3/Aceton [6:4]) chromatographiert. Dor durch Einengen der Hauptraktion erhaltene Rückstand wird in wenig Dichlormethan gelöst und durch Eintropfen in n-Hexan/Ether gefällt, man erhält 320mg (80%) der gewünschten farblosen, amo'phen Verbindung500 mg (0.7 mmol) of the compound from 2c), dissolved in 20 ml of freshly distilled toluene, mixed with 25 mg (0.15 mmol) of 2,2'-azobis (2-methylpropionitrile) and 50 μl (1.9 mmol) of tributyltin hydride, and stirred at 8O 0 C under argon for 16 hours. The reaction mixture is then evaporated in an oil pump vacuum and the residue is suspended on silica gel 6OH (column 20 χ 4 cm, CH 2 Cl 2 / acetone (9: 1), CHCl 3 MCeUJn [7: 3], CHCl 3 / acetone [6: 4]). The residue obtained by concentrating the main fraction is dissolved in a little dichloromethane and precipitated by dropwise addition into n-hexane / ether, giving 320 mg (80%) of the desired colorless, amorphous compound
DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol [95:5]): RF = 0,3. —TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / methanol [95: 5]): R F = 0.3. -
UV (MeOH): An,,., = 236,277 (Sch.), 284,312nm (ε = 37200,12000,13500,18000).—UV (MeOH): A n ,,., = 236.277 (Sch.), 284.312 nm (ε = 37200, 12000, 13 500, 18 000) .-
1H-NMR ([D6]DMSO): δ = 2,02 (m, 3'-H), 2,20,2,33 (m, 2'-H. und 2'-Hb), 3,02,3,13 (s, CH3), 3,08 (m, 5'-H), 4,17 (m, 4'-H), 6;31 (d, 6-H, J = 3,5Hz), 6,38 (m, 1'-H), 6,92 (d, 5-H, J = 3,5Hz), 8,61 (s, CH=N), 11,07 (s, NH). C36H37N5O7 (607,7) Ber. C 69,18 H 6,14 N 11,52 Gef. C 69,23 H 6,24 N 11,61 1 H-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 2.02 (m, 3'-H), 2.20, 2.33 (m, 2'-H and 2'-H b ), 3 , 02,3,13 (s, CH 3), 3.08 (m, 5'-H), 4.17 (m, 4'-H), 6; 31 (d, 6-H, J = 3 , 5Hz), 6.38 (m, 1'-H), 6.92 (d, 5-H, J = 3.5Hz), 8.61 (s, CH = N), 11.07 (s, NH). C 36 H 37 N 5 O 7 (607.7) Ber. C 69.18 H 6.14 N 11.52 Gef. C 69.23 H 6.24 N 11.61
e) 2-{[(Dimethylamino)methylen]amino}-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-one) 2 - {[(Dimethylamino) methylene] amino} -7-desaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purin-6-one
130mg (0,21 mmol) der Verbindung aus 2 d) werden in 5ml 80%iger Essigsäure gelöst und 15 Minuten bei Raumptemperatur gerührt. Anschließend dampft man die Essigsäure im Ölpumpenvakuum ab und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel 6OH (Säule 20 χ 2cm), CH2CI2/Methanol [95:5]). Der durch Einengen der Hauptfraktion erhaltene Rückstand wird durch wiederholtes Abdampfen mit Aceton aufgeschäumt, man orhält 43 mg (67%) der gewünschten farblosen, amorphen Verbindung.—130 mg (0.21 mmol) of the compound from 2 d) are dissolved in 5 ml of 80% acetic acid and stirred for 15 minutes at room temperature. Then the acetic acid is evaporated off in an oil pump vacuum and the residue is chromatographed on silica gel 6OH (column 20 × 2 cm), CH 2 Cl 2 / methanol [95: 5]). The residue obtained by concentrating the main fraction is foamed by repeated evaporation with acetone, or 43 mg (67%) of the desired colorless, amorphous compound are obtained.
DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol [9:1]): RF = 0,5.— UV (MeOH): Amix = 239,282 (Sch.), 311 nm (ε = 17400,10500,16900).—TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / methanol [9: 1]): R F = 0.5% UV (MeOH): A mix = 239.282 (Sch.), 311 nm (ε = 17400.10500, 690000) .-
1H-NMR ([D6]DMSO): δ = 2,06 2,32 (m, 2'-H und 3'-H), 3,01,3,14 (s, 2 CH3), 3,51 (m, 5'-H), 4,00 (m, 4'-H), 4,87 (t, 5'-OH), 6,33 (m, V-H und 6-H, J = 3,3Hz), 7,05 (d, 5-H, J = 3,3Hz), 8,59 (s, CH=N), 11,02 (s, NH). Ci4H19N5O3 (305,3) Ber. C 55,07 H 6,27 N 22,94 Gef. C 55,23 H 6,41 N 22,75 1 H-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 2.06 2.32 (m, 2'-H and 3'-H), 3.01.3, 14 (s, 2 CH 3 ), 3 , 51 (m, 5'-H), 4.00 (m, 4'-H), 4.87 (t, 5'-OH), 6.33 (m, VH and 6-H, J = 3 , 3Hz), 7.05 (d, 5-H, J = 3.3Hz), 8.59 (s, CH = N), 11.02 (s, NH). Ci 4 H 19 N 5 O 3 (305.3) Ber. C 55.07 H 6.27 N 22.94 Gef. C 55.23 H 6.41 N 22.75
2-Amlno-6-methoxy-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin2-Amlno-6-methoxy-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine
a) 2-Amino-6-methoxy-7-desaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purina) 2-Amino-6-methoxy-7-deaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine
543mg (10mmol) fein gepulvertes Kaliumhydroxid und 68mg (0,2mmol) Tetrabutylammoniumhydrogensulfat in 30ml absolutem Dichlormethan werden 15 Minuten unter NrAtmosph^re bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird mit 330mg (2mmol)2-Amino-6-methoxy-7-desa7a-purin(2-Amino-4-methoxy-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin) versetzt und weitere 30 Minuten gerührt. Nach Zugabe von 884 mg (2,2 mmol) 2-Desoxy-3,5-di-O-p-toluoyl-ß-D-erythro-pentofuranosylchlorid läßt man noch weitere 3 Minuten rühren. Man saugt unlösliche Bestandteile ab, wäscht mit wenig Dichlormethan und engt μ _. das Filtrat auf etwa 10 ml ein. Nach Versetzen mit 3 ml 1 M-Natriummethoxid in Methanol läßt men 3 Stunden bei543 mg (10 mmol) of finely powdered potassium hydroxide and 68 mg (0.2 mmol) of tetrabutylammonium hydrogen sulfate in 30 ml of absolute dichloromethane are stirred at room temperature for 15 minutes under nitrogen atmosphere. Then 330 mg (2 mmol) of 2-amino-6-methoxy-7-desa7a-purine (2-amino-4-methoxy-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine) are added and the mixture is stirred for a further 30 minutes. After addition of 884 mg (2.2 mmol) of 2-deoxy-3,5-di-O-p-toluoyl-.beta.-D-erythro-pentofuranosyl chloride is allowed to stir for a further 3 minutes. It sucks in insoluble constituents, washed with a little dichloromethane and concentrated μ _. the filtrate to about 10 ml. After addition of 3 ml of 1 M sodium methoxide in methanol, men are allowed to stand for 3 hours
Raumtemperatur rühren. Nach Neutralisation mit Essigsäure wird das Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in h sißern Wasser aufgenommen, filtriert und das Filtrat aus einer Dowex-(1 x 2OH-Form, 30 χ 3cm)-lonenaustauschersäu!e chromatographiert (Wasser/Methanol 9:1). Nach Abziehen erhält man aus den Hauptzonen 260mg (63%) farblose Kristalle.Stir room temperature. After neutralization with acetic acid, the solvent is stripped off, the residue is taken up in water, filtered, and the filtrate is chromatographed from a Dowex (1 × 2OH form, 30 × 3 cm) ion exchange acid (water / methanol 9: 1). After stripping, 260 mg (63%) of colorless crystals are obtained from the main zones.
Schmp. 152-1540C.M.p. 152-154 0 C.
DC (Kieselgel, CHaCI2/Me0H 9:1} Rf = 0,7.TLC (silica gel, CH a CI 2 / MeOH 9: 1) R f = 0.7.
UV (Methanol) Kn = 225,259,2ß5 (ε = 24900,3600,7600).UV (methanol) K n = 225.259.25 (ε = 24900.3600.7600).
1H-NMR(Id9]DMSO)O = 6,27(1H,d,J = 3,7Hz),6,42,C- H,dd Jr,r. = 8,4Hz,Jn2b = *,9Hz),7,10(1 H,d,J = 3,7Hz)ppm. 1 H-NMR (Id 9 ! DMSO) O = 6.27 (1H, d, J = 3.7Hz), 6.42, C-H, dd J r , r . = 8.4Hz, J n2b = *, 9Hz), 7.10 (1H, d, J = 3.7Hz) ppm.
'3C-NMR (ID(IDMSO) δ = 52,49 (OCH3), 02,37 (C-V), 98,85 (C-5), 119,45 (C-6) ppm.' 3 C-NMR (ID (IDMSO) δ = 52.49 (OCH 3 ), 02.37 (CV), 98.85 (C-5), 119.45 (C-6) ppm.
b) Die nach a) erhaltene Verbindung 2-Amino-6-methoxy-7-desaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin wird, wie in Beispiel 1 c) beschrieben, zu 2-Amino-6-methoxy-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß D-rii ofuranosyl-purin desoxigeniert.b) The compound obtained according to a) 2-amino-6-methoxy-7-deaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine is, as described in Example 1 c), to 2-amino-6 -methoxy-7-desaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β D-rii ofuranosyl-purine.
Beispiel 4 2-Amlno-6-chlor-7-desaza-2',3'-dldesoxy-9-ß-D-ribofuranusylpurinExample 4 2-Amino-6-chloro-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranusylpurine
a) Die Verbindung wird nanh Acetylierung von 2-Amino-7-desaza-2',3'-didesoxy-9ß-D-ribofuia osyl-purir.-6-on (hergestellt nach Beispiel 1 d) nach der in Liebigs Ann. Them. 1987,15-19 beschriebenen Methode durch Halogenierung hergestellt.a) The compound is nanoh acetylation of 2-amino-7-desaza-2 ', 3'-dideoxy-9ß-D-ribofluoro osyl-purir.-6-one (prepared according to Example 1 d) according to the in Liebigs Ann. Them. 1987, 15-19 described method produced by halogenation.
b) Das resultierende Rohgemisch wird zur Entfernung der Acetylschutzgruppe 3 Stunden mit methanolischer Ammoniaklösung bei Raumtemperatur stehengelassen, bis zur Trockne eingeengt und anschließend auf Kieselgel mit dem Laufmittel Chloroform/Methanol chromatographiert. Nach Vereinigen der Hauptfraktionen und Eindampfen wird aus H2O kristallisiert. UV (Methanol): Xn,,, = 235,258,316 (ε = 27800,4300,5800).b) The resulting crude mixture is allowed to stand for 3 hours with methanolic ammonia solution at room temperature to remove the Acetylschutzgruppe, concentrated to dryness and then chromatographed on silica gel with the eluent chloroform / methanol. After combining the main fractions and evaporation, crystallized from H 2 O. UV (methanol): X n ,,, = 235,258,316 (ε = 27,800.4300, 5800).
CnH13N4O2CI (268,7): Ber. C 49,1 H 4,8 N 20,8 Cl 130 Gef. C 49,3 H 4,85 N 20,7 Cl 13,1CnH 13 N 4 O 2 Cl (268.7): Ber. C 49.1 H 4.8 N 20.8 Cl 130 Gef. C 49.3 H 4.85 N 20.7 Cl 13.1
2-Amino-7-decaza-2',3'-didasoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purln2-Amino-7-decaza-2 ', 3'-didasoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purln
286mg (1 mmol) 2-Amino-6-chlor-7-des3za-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin werden in 25ml 70%igem, wäßrigen Methanol gelöst, zu einer Suspension von 30mg vorhydriertem Pd/C (10%ig) in 25ml 70%igem wäßrigem Methanol gegeben und bis zur beendeten H2-Aufnahme hydriert. Man zieht das Lösungsmittel ab und kristallisiert aus Methanol. Ausbeute 180mg (77%).286 mg (1 mmol) of 2-amino-6-chloro-7-des3za-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine are dissolved in 25 ml of 70% aqueous methanol, to a suspension of 30 mg pre-hydrogenated Pd / C (10%) in 25 ml of 70% aqueous methanol and hydrogenated until the end of H 2 uptake. The solvent is removed and crystallized from methanol. Yield 180mg (77%).
CnH14N4O2 (234,3) Ber. C 56,4 H 6,0 N 23,9 Gef. C 56,3 H 6,0 N 23,7C n H 14 N 4 O 2 (234.3) Ber. C 56.4 H 6.0 N 23.9 Gef. C 56.3 H 6.0 N 23.7
UV (Methanol): An,,,, = 234,256,314nm (ε = 30600,4100,5200).UV (methanol): A n ,,,, = 234.256.314 nm (ε = 30600, 400, 500).
2-Amino-6-mercapto-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin2-amino-6-mercapto-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine
536g (2mmol) 2-Amino-6-chlor-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin und 1,5g (20mol) Thioharnstoff .verden in 30ml Ethanol suspendiert und während etwa 1? Stunden am Rückfluß erhitzt. Danach destilliert mn das Lösungsmittel ab, nimmt den Rückstand in etwa 25 ml Methanol auf und chromatographiert an Kieselgel 60 H (Gaule 20x3 cm, CH2CI2/Me0H 9:1). Durch Eindampfen der Hauptfraktion und Kristallisation aus Methanol/H2O erhält man 230mg (43%) der Thioverbindung C11H14N4O2S (266,3) Ber. C 49,6 H 5,3 N 21,0 Gef. C 49,4 H 5,4 N 21,1536 g (2 mmol) of 2-amino-6-chloro-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine and 1.5 g (20 mol) of thiourea are suspended in 30 ml of ethanol and stirred for about 1? Heated to reflux for hours. Then the solvent is distilled off, the residue is taken up in about 25 ml of methanol and chromatographed on silica gel 60 H (Gaule 20 × 3 cm, CH 2 Cl 2 / MeOH 9: 1). Evaporation of the main fraction and crystallization from methanol / H 2 O gives 230 mg (43%) of the thio compound C 11 H 14 N 4 O 2 S (266.3) Ber. C 49.6 H 5.3 N 21.0 Gef. C 49.4 H 5.4 N 21.1
UV (Methanol): Am„ = 235,271,345nm (ε = 17600,11700,18700).UV (methanol): A m "= 235.271.345 nm (ε = 17600, 1700, 180000).
1H-NMR (ID6]DMSO): δ = 1,9 (m, 3'-H), 2,1 (m, 2'-Hb), 2,34 (m, 2'-H1), 3,50 (m, 5'-H), 3,97 (m, 4'-H), 4,86 (t, 5'-OH), 6,12 (m,-1'-H), 6,24 (m, NH2 und 8-H), 6,92 (d, 7-H), 11,1 (s, NH) 1 H-NMR (ID 6 ! DMSO): δ = 1.9 (m, 3'-H), 2.1 (m, 2'-H b ), 2.34 (m, 2'-H 1 ) , 3.50 (m, 5'-H), 3.97 (m, 4'-H), 4.86 (t, 5'-OH), 6.12 (m, -1'-H), 6.24 (m, NH 2 and 8-H), 6.92 (d, 7-H), 11.1 (s, NH)
2,6-Diamino-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-pur.n2,6-diamino-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-pur.n
268mg (1 mmol) 2-Amino-6-chlor-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin werden mit ^UmIg wäßriger, konzentrierter Ammoniaklösung versetzt und 60 Stunden bei 650C im Wasssrbad gut verschlossen erwärmt. Nach Abdampfen des Lösungsmittels wird an einer Kieselgel-Säule chromatographiert, zuerst mit CH2CI2/Me0H (9:1) (Ausgangsmaterial), dann mit CHCI3/Methanol (4:1). Nach Kristallisation aus Wassre erhält man 120mg (48%) c!sr Diaminoverbindung. C11H16N5O2 (249,3) Ber. C 53,0 H 6,0 N 28,1 Gef. C 53,15 H 5,9 N 28,2268 mg (1 mmol) of 2-amino-6-chloro-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine are treated with ^ UmIg aqueous concentrated ammonia solution and 60 hours at 65 0 C. warmed well closed in a water bath. After evaporating off the solvent, it is chromatographed on a silica gel column, first with CH 2 Cl 2 / MeOH (9: 1) (starting material), then with CHCl 3 / methanol (4: 1). After crystallization from Wassre, 120 mg (48%) of the diamino compound are obtained. C 11 H 16 N 5 O 2 (249.3) Ber. C 53.0 H 6.0 N 28.1 Gef. C 53.15 H 5.9 N 28.2
UV (Methanol): Xmax = 264,284nm (ε = 9800,8000).UV (methanol): X max = 264.284 nm (ε = 9800.8000).
'-HNMR ([D6IDMSO): δ = 1,9 (m, 3'-H), 2,1,2,4 (2m, 2'-H8,b), 3,4 (m, 5'-H), 3,3 (m, 4'-H), 4,8 (t, 5'-OH), 5,6 (s, NH2), 6,2 (dd, 1 '-H), 6,3 (d, 7-H), 6,7 (s, NH2), 6,9 (d, 8-H).'HNMR ([D 6 IDMSO): δ = 1.9 (m, 3'-H), 2, 1, 2, 4 (2m, 2'-H 8 , b ), 3.4 (m, 5 '-H), 3.3 (m, 4'-H), 4.8 (t, 5'-OH), 5.6 (s, NH 2 ), 6.2 (dd, 1'-H) , 6.3 (d, 7-H), 6.7 (s, NH 2 ), 6.9 (d, 8-H).
Z-Methylthio-e-methoxy^-desaza^'.S'-didesoxy-S-ß-D-ribofuranosyl-purinZ-methylthio-e-methoxy ^ -desaza ^ '. S'-dideoxy-S-beta-D-ribofuranosyl-purine
a) 2-Methylthio-6-methoxy-7-desaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purina) 2-methylthio-6-methoxy-7-deaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine
500mg (2,56mmol) 4-Methoxy-2-methylthio-7H-pyrrolo[2,3-d]-pyrimidin und 400mg (1,75mmol) Benzyltriethylammoniumchlorid, gelöst in 20mi Dichlormethan mit 20ml 50%iger Natronlauge als Gegenphase werden mit dem Vibromischer kurz durchgemischt. Man versetzt mit 1,2g (3,1 mol) 2-Desoxy-3,5-di-0-(p-toluoyl)-ß-D-erythropentofuranosylchlorid in wenig Di hlormethan und setzt das Vibromischen 30 Minuten fort. Die organische Phase wird ? „.. it und die wäßrige mit Dichiormethan gegengeschüttelt. Die vereinigten organischen Extrakte werden mit Wasser g, /vasu.en and mit Natriumsulfat getrocknet. Nach Filtration wird eingedampft und der Rückstand in 100ml 1M Natriummethanolat in Methanol gelöst. Man läßt etwa 12 Stunden bei Raumtemperatur rühren, dampft ein, nimmt in Wasser auf und adsorbiert an einer Dowex 1 -X2-Ionenaustauschersäule (30 χ 3cm, OH"-Form). Elution mit Wasser-Methanol (1:1)500mg (2.56mmol) of 4-methoxy-2-methylthio-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine and 400mg (1.75mmol) of benzyltriethylammonium chloride dissolved in 20mL of dichloromethane with 20ml of 50% sodium hydroxide solution as the counterphase Vibromischer briefly mixed. 1.2 g (3.1 mol) of 2-deoxy-3,5-di-O- (p-toluoyl) -β-D-erythropentofuranosyl chloride are added in a small amount of dichloromethane and the vibromic acid is continued for 30 minutes. The organic phase will? ".. and the aqueous shaken with dichloromethane. The combined organic extracts are dried with water, washed and dried with sodium sulfate. After filtration, it is evaporated and the residue is dissolved in 100 ml of 1M sodium methoxide in methanol. The mixture is stirred for about 12 hours at room temperature, evaporated, taken up in water and adsorbed on a Dowex 1 -X2 ion exchange column (30 χ 3 cm, OH "form). Elution with water-methanol (1: 1)
führt zu einer Hauptzone. Nach dem Veidampfen des Lösungsmittels wird aus Wasser umkristallisiert; Ausbeute 321 mg (40%) fsifalose Nadeln mit Schmp. 1180C. — DC iKleselgel/CHjC^/Aceton (8:2)) RF = 0,26. — UV (Methanol): Xm„ - 283, 236nm(e = 13000,1550O)1 1H-NMR(IDa)DMSO)IO = 2,20 (m, 2'-H), 2,40 (m, 2'-H), 2,56 (8,CH3S), 3,50 (m, 5'-H2) 3,81(m, 4'-H), 4,01 (s, CH3O), 4,35 (m, 3'-H), 4,90 (1,5-OH, J = 5Hz),5,29(d,3'-OH,J = 4Hz),6,48(d,5 H,J = 4Hz),6,55(M'-H1J = 5Hz),7,47 (d.6-H,J=4Hz).leads to a main zone. After evaporation of the solvent is recrystallized from water; Yield 321 mg (40%) fsifalose needles with mp 118 0 C. - DC iKleselgel / CHjC ^ / acetone (8: 2).) R F = 0.26. UV (methanol): X m "- 283, 236 nm (e = 13000, 1550) 1 1 H-NMR (IDa) DMSO) IO = 2.20 (m, 2'-H), 2.40 (m, 2'-H), 2.56 (8, CH 3 S), 3.50 (m, 5'-H 2 ) 3.81 (m, 4'-H), 4.01 (s, CH 3 O ), 4.35 (m, 3'-H), 4.90 (1.5-OH, J = 5Hz), 5.29 (d, 3'-OH, J = 4Hz), 6.48 (i.e. , 5 H, J = 4Hz), 6.55 (M'-H 1 J = 5Hz), 7.47 (d.6-H, J = 4Hz).
Ci3H17N3O4S (311,4) Ber. C50,i5 H 5,50 N 13,50 S 10,30 Gef. C 50,28 H 5,47 N 13,56 S 10,31Ci 3 H 17 N 3 O 4 S (311.4) Calcd. C50, i5 H 5,50 N 13,50 S 10,30 Gef. C 50,28 H 5,47 N 13,56 S 10,31
b) 2-Methylthio-6-methoxy-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purinb) 2-Methylthio-6-methoxy-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine
Wird durch Deoxigeniorung der nach a) erhaltenen 2'Desoxy-Verbindung wie unter Beispiel I c) beschrieben hergestellt. UV (Methanol): Kn^, = 283,236nm (e = 1300,15500) C1JlIuN3O3S (295,4) Ber. C 52,8 H 5,75 N 14,2 Gef. C 52 J H 5,70 N 14,2Is prepared by Deoxigeniorung the obtained according to a) 2'Desoxy compound as described in Example I c). UV (methanol): K n ^, = 283.236nm (e = 1300, 155500) C 1 JlIuN 3 O 3 S (295.4) Ber. C 52.8 H 5.75 N 14.2 Gef. C 52 JH 5.70 N 14.2
Beispiel 9 6-Methoxy-7-desaza-.?',3'-dldesjxy-9-ß-D-ribofuronosyl-purinExample 9 6-Methoxy-7-desaza-, 3'-dldesjxy-9-β-D-ribofuronosyl-purine
a) 6-Methoxy-7-desaza-2'-d9Soxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purina) 6-Methoxy-7-deaza-2'-d9soxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine
b) Das Didesoxy Derivat kann durch Deoxigenierung der Verbindung aus 9a) wie in Beispiel 1 c) beschrieben erhalten worden. Ein alternativer Weg besteht in der Entschwefelung von 2-Methylthio-6-methjxy-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin aus Beispiel 8 ebenfalls nach Liobigs Ann. Chem. 1985,1360-1366.b) The dideoxy derivative can be obtained by deoxygenation of the compound of 9a) as described in Example 1 c). An alternative route is the desulfurization of 2-methylthio-6-methoxy-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine from Example 8 also according to Liobigs Ann. Chem. 1985, 1360-1366.
DC (CHjCI2/MeOH 9:1): R( = 0,8 UV(MeOH): Xmlx = 261 nm (log[e) = 3,86).TLC (CHjCl 2 / MeOH 9: 1): R ( = 0.8 UV (MeOH): X mlx = 261 nm (log [e] = 3.86).
1H-NMR (DMSO-de): δ = 2,04 (m, 3'-H); 2,24 (m, 2'-Hb); 2,40 (m, 2'-H1); 3,55 (m, 5'-H); 4,04 (s, OCH3); 4,07 (m, 4'-H); 4,93 (t, J = ",5Hz, 5'-OH); 6,47 (dd, J = 4,4 und 6,8Hz, V-H); 6.55 (d, J = 3.7 Hz. 5-H): 7.66 (d. .1 = 3.7 Hr R-H); 8,42 (s, 2-H). C12H16N3O3 (249,3) Ber. C 57,8 H 6,0 N 16,8 Gef. C 57,8 Ho1O1I N 16,65 1 H-NMR (DMSO-d e ): δ = 2.04 (m, 3'-H); 2.24 (m, 2'- Hb ); 2.40 (m, 2'-H 1 ); 3.55 (m, 5'-H); 4.04 (s, OCH 3 ); 4.07 (m, 4'-H); 4.93 (t, J = ", 5Hz, 5'-OH); 6.47 (dd, J = 4.4 and 6.8Hz, VH); 6.55 (d, J = 3.7Hz, 5-H). : 7.66 (i.e., 1 = 3.7 hr RH); 8.42 (s, 2-H). C 12 H 16 N 3 O 3 (249.3) calc. C 57.8 H 6.0 N 16. 8 Gef. C 57.8 Ho 1 O 1 IN 16.65
7-Desoza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-onDie Herstellung der Verbindung erfolgt über die 2'-Desoxy-Verbindung wie in Liebigs Ann. Chem. 1985,312-320 beschrieben und anschließender Deoxigenierung wie unter Beispiel 1 c). UV (Methanol): Am,x = 258,280nm (Schulter), (ε - 9200,6400) DC(CH2CI2/MeOH9:1):R, = 0,57-desoza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purin-6-one. The preparation of the compound is via the 2'-deoxy compound as in Liebigs Ann. Chem. 1985, 3120-320 and subsequent deoxygenation as in Example 1c). UV (methanol): A m , x = 258.280nm (shoulder), (ε - 9200.6400) TLC (CH 2 Cl 2 / MeOH 9: 1): R, = 0.5
1H-NMR (DMSO-d6): δ = 2,00(m, 3'-H); 2,16 (m, 2'-Hb); 2,37 (m, 2'-H1); 3,49 (dd, J = 4,9 und 11,6Hz, 5'-H); 3,58 (dd, J 4,? und 11,6Hz,5'-H); 4,05 (m, 4'-H); 6,33 (dd, J = 4,2 und 6,9Hz, 1'-H); 6,50(d, J = 3,5Hz, 5-H); 7,36 (d, J = 3,5Hz, 6-H); 7,90 (s, 2-H). C11H13N3O3 (235,2) Ber. C 56,1 H 5,5 N 17,8 Gef. C 56,0 H 5,3 N 18,0 1 H-NMR (DMSO-d 6 ): δ = 2.00 (m, 3'-H); 2.16 (m, 2'- Hb ); 2.37 (m, 2'-H 1 ); 3.49 (dd, J = 4.9 and 11.6Hz, 5'-H); 3.58 (dd, J 4, and 11.6Hz, 5'-H); 4.05 (m, 4'-H); 6.33 (dd, J = 4.2 and 6.9Hz, 1'-H); 6.50 (d, J = 3.5Hz, 5-H); 7.36 (d, J = 3.5Hz, 6-H); 7.90 (s, 2-H). C 11 H 13 N 3 O 3 (235.2) Ber. C 56.1 H 5.5 N 17.8 Gef. C 56.0 H 5.3 N 18.0
7-Desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-2,6-dii>nSynthese erfolgt über die 2-Desoxy-Verbindung wie in Liebigs Ann. Chem. 1985,312-320 beschrieben und anschließender Deoxigenierung wie unter Beispiel 1 c).7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine-2,6-diisocyanate synthesis via the 2-deoxy compound as in Liebigs Ann. Chem. 1985, 3120-320 and subsequent deoxygenation as in Example 1c).
UV (Phosphatpuffer, pH = 7,0): A„,ax = 251,280nm (ε = 10500,7400) C11H13N3O4 1251,4) Ber. C 52,5 H 5,2 N 16,7 Gef. C 52,3 H 5,1 N 16,5UV (phosphate buffer, pH = 7.0): A ", ax = 251.280 nm (ε = 10500.7400) C 11 H 13 N 3 O 4 1251.4) C 52.5 H 5.2 N 16.7 Gef. C 52.3 H 5.1 N 16.5
2,6-Dimethoxy-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin2,6-dimethoxy-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine
Das Derivat wurde durch Phasentransferglycosylierung des entsprechenden Purins und anschließender Deoxigenierung wie unter Beispiel 1 c) beschrieben, synthetisiert. UV (Methanol): Amax = 257,271 nm (ε = 7 300,7 400) C13H17N3O4 (273,3) Ber. C 55,85 H 6,1 N 15,0 Gef. C 55,7 H 6,1 N 15,1The derivative was synthesized by phase transfer glycosylation of the corresponding purine followed by deoxygenation as described in Example 1c). UV (methanol): A max = 257.271 nm (ε = 7 300.7 400) C 13 H 17 N 3 O 4 (273.3) Ber. C 55.85 H 6.1 N 15.0 Gef. C 55.7 H 6.1 N 15.1
6-Amino-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-2-on6-amino-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine-2-one
Die Verbindung wurde nach J. Chem. Soc, Perkin Trans. Il 1986,525-530, durch Phasentransfer-Glykosylierung von 2-Methoxy-6-amino-7-desaza-purin, anschließender Demethylierung und letztlicher Deoxigenierung analog Beispiel 1 c) erhalten. UV (Methanol): Amax = 255,305nm (ε = 7600,7200) C11H14N4O3 (250,2) Ber. C 52,7 H 5,6 N 22,4 Gef. C 52,75 H 5,5 N 22,3The compound was obtained according to J. Chem. Soc., Perkin Trans. Il 1986,525-530, by phase transfer glycosylation of 2-methoxy-6-amino-7-deaza-purine, subsequent demethylation and final deoxygenation analogous to Example 1 c) , UV (methanol): A max = 255.305 nm (ε = 7600.7200) C 11 H 14 N 4 O 3 (250.2) Ber. C 52.7 H 5.6 N 22.4 Gef. C 52.75 H 5.5 N 22.3
Die Verbindung wurde über das in Llebljs Ann. Chem. 1984,700-721 beschriebene 2'-Desoxy-nucloosid mit r ..chfolgomlor Deoxigenlerung wie in Beispiel 1 c) beschrieben, synthetisiertThe connection was made via the in Llebljs Ann. Chem. 1984, 700-721 2'-deoxy-nucleoside with r.chfolgomlor deoxigenization as described in Example 1 c) synthesized
UV (Methanol): Xn,,, « 224,264,285 nm (Schulter) (c = 22600,10500,6500) CuH1I1N4O] (264,?) Bor. 54,5 H 6,05 N 21,2 Göf. 64,3 H 6,1 N 21,1UV (methanol):. ,,, n X "224,264,285 nm (shoulder) (c = 22600,10500,6500) CuH 1 I 1 N 4 O] (264 ,?) boron 54.5 H 6.05 N 21, 2 Göf. 64.3 H 6.1 N 21.1
2-Amlno-7>dessza-2'-3'-didesoxy-3'-eildo-9*ß*O-rlbofuranosyl*purin-6*on2-Amlno-7> dessza-2'-3'-dideoxy-3'-eildo-9 * ß * O * rlbofuranosyl purin-6 * on
Die Verbindung wurde durch Glycosylierung von 2-Amlno-7-desaza-pur!n-6-on mit dom nach Byatkira/Azhayov (Synthesis 1984,901-963) hergestellten Azido-Zuckcr hergestellt.The compound was prepared by glycosylation of 2-amino-7-desaza-pur! N-6-one with azido-sugar prepared according to Byatkira / Azhayov (Synthesis 1984,901-963).
UV (Methanol): Xm,„ = 261,281 nm (Schulter) (ε = 13300,7800) C11H13N1O3 (291.3) Ber. C 45,3 H 4,45 N 33,65 Gef. C 45,4 H 4,3 N 33,4UV (methanol): X m , "= 261.281 nm (shoulder) (ε = 13300.7800) C 11 H 13 N 1 O 3 (291.3) Ber. C 45.3 H 4.45 N 33.65 Gef. C 45.4 H 4.3 N 33.4
3,7-Didesaza-2',3'-dldesoxy-3'-azido-9-ß-D-ribofuranosyl-purln3,7-Didesaza-2 ', 3'-dldesoxy-3'-azido-9-ß-D-ribofuranosyl-purln
Die Verbindung wurde durch Ribosidierung von 3,7-Didesaza-purin mit dom nach Byatkina/Azhayov (Synthesis 1984,961-963) hergestellten A2ido-7ucker präpariertThe compound was prepared by ribosidation of 3,7-didesaza-purine with domido-7-sugar prepared according to Byatkina / Azhayov (Synthesis 1984, 961-963)
UV (Methanol): An,,, = 224,274nm CuH13N6O2 (259,2) Ber. C 55,55 H 5,0 N 27,0 Gef. C 55,4 H 5,1 N 26,8 Beispiel 17UV (methanol): A n ,,, = 224.274nm CuH 13 N 6 O 2 (259.2) Ber. C 55.55 H 5.0 N 27.0 vessel C 55.4 H 5.1 N 26.8 Example 17
6-Amino-8-aza-7-desaza-2',3'-dldesoxy-9-ß-D-rlbofuranosylpurin (4-Amino-1-(2-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-pyrazolo-(3(4-d]pyrimidin)6-amino-8-aza-7-deaza-2 ', 3'-dldesoxy-9-.beta.-D-r-bofuranosylpurine (4-amino-1- (2-deoxy-.beta.-D-erythro-pentofuranosyl) -1H- pyrazolo (3 ( 4-d) pyrimidine)
a) 4-Benzoylcimino-1 -(2'-desoxy-9-ß-D 3rythro-pentofuranosyl-5'-0-(4,4'-dimQthoxytriphenylmothyl)-1 H-pyrazolo|3,4-dlpyrimidina) 4-Benzoylcimino-1 - (2'-deoxy-9-.beta.-D-3-trifluoropentofuranosyl-5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmothyl) -1H-pyrazolo | 3,4-dlpyrimidine
6-Amino-8-aza-7-desaza-2'-dnsoxy-ß-D-ribofuranosyl-purin wurde hergestellt, wie in HoIv. Chim. Acta 68,563-570 (1985) beschrieben. Die Benzoylierung der 4-Aminogruppe und die anschließende Einführung der Dimothoxytritylschutzgruppo wurde analog zu bekannten Methoden durchgeführt.6-Amino-8-aza-7-deaza-2'-dnsoxy-β-D-ribofuranosyl-purine was prepared as described in HoIv. Chim. Acta 68, 563-570 (1985). The benzoylation of the 4-amino group and the subsequent introduction of the Dimothoxytritylschutzgruppo was carried out analogously to known methods.
b) 4-Benzoylamino-1-(2'-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-5'-0-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-3'-0-phenoxythiocarhonyl-1H-pyrazolo(3,4-d]-pyrimidinb) 4-Benzoylamino-1- (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -3'-O-phenoxythiocarhonyl-1H-pyrazolo (3, 4-d] pyrimidine
200mg (0,3 mmol) des Produkts aus Beispiel 17 a) wurden in 4 ml Acetonitril mit 82 μΙ (0,6mmol) Phenylchlorothiocarbonat bei Raumtemperatur 16 Stunden lang in Anwesenheit von 90mg (0,75mmol)4-(Dimethylamino)-pyridin umgesotzt. I .'ach chromatographischer Reinigung (Kieselgel, Dichlormethan/Ethylacetat (95:5) wurden 150mg (63%) des Produkts isoliert. DC (Kieselgel, CH2CI2/Ethylacetat, 95:5): R, = 0,4200 mg (0.3 mmol) of the product from Example 17 a) were in 4 ml of acetonitrile with 82 .mu.Ι (0.6 mmol) Phenylchlorothiocarbonat at room temperature for 16 hours in the presence of 90mg (0.75 mmol) of 4- (dimethylamino) pyridine umgesotzt , After chromatographic purification (silica gel, dichloromethane / ethyl acetate (95: 5), 150 mg (63%) of the product were isolated TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / ethyl acetate, 95: 5): R, = 0.4
1H-NMR (IClDMSO): δ = 3,26 (m, 5'-H), 3,69 (s, 2 x OCH3), 4,45 (m, 4'-H), 5,98 (m, 3'-H), (s, 3-H), 8,78 (s, 6-H), 11,72 (s, NH). 1 H-NMR (ICIDMSO): δ = 3.26 (m, 5'-H), 3.69 (s, 2 x OCH 3 ), 4.45 (m, 4'-H), 5.98 ( m, 3'-H), (s, 3-H), 8.78 (s, 6-H), 11.72 (s, NH).
c) 4-Benzoylamino-1-(2',3'-didesoxy-9-ß-D-glycero-pentofuranosyl)-5'-0-(4,4'-dimethoxytriphonylmethyl)-1H-pyrazolo-[3,4· dJ-lpyrimidinec) 4-Benzoylamino-1- (2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-glycero-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytriphonylmethyl) -1H-pyrazolo [3,4 · DJ-l-pyrimidines
200mg (0,25mmol) des Produktes aus Beispiel 17b) wurden nach Barton in 7ml Toluol mit 150μΙ (0,55mmol) Tri-N-butylstannan und 15 mg 2,2'-azobis(2-methylpropionitril) während einer Stunde bei 800C unter Argon desoxigeniort. Nach Chromatographie (Kieselgel, Dichlormethan/Ethylacetat 95:5) erhielt man 120mg (75%) des Produkts (farblos, amorph). DC (Kieselgel, CHjClj/Ethylacetat, 95:5): R, ·- 0,3.200mg (0.25mmol) of the product of Example 17b) were after Barton in 7ml toluene with 150μΙ (0.55mmol) tri-N-butylstannane and 15 mg of 2,2'-azobis (2-methylpropionitrile) for one hour at 80 0 C deoxygenated under argon. Chromatography (silica gel, dichloromethane / ethyl acetate 95: 5) gave 120 mg (75%) of the product (colorless, amorphous). TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / ethyl acetate, 95: 5): R, * - 0.3.
'H-NMR (ID6]DMSO): ö = 2,16 (m, 3'-H), 2,49 (m, 2'-H), 2,99 (m, 5'-H), 3,65,3,6C'" ., 2 x OCH3), 4,32 (m, 4'-H), 6,39 (m, V-H), 8,41 (s, 3-H), 8,80 (s, 6-H), 11,66 (s, NH). 1 H-NMR (ID 6 ) DMSO): δ = 2.16 (m, 3'-H), 2.49 (m, 2'-H), 2.99 (m, 5'-H), 3 , 65.3,6C '', 2 x OCH 3 ), 4.32 (m, 4'-H), 6.39 (m, VH), 8.41 (s, 3-H), 8, 80 (s, 6-H), 11.66 (s, NH).
d) 6-Amino-8-aza-7-deseza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin (4-Amino-1-(2',3'-ciidesoxy-ß-D-glycero-pentofuranosyl)-1 H-pyrazolo(3,4-d]pyrimidin)d) 6-Amino-8-aza-7-deseza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine (4-amino-1- (2', 3'-ciidesoxy-.beta.-D glycero-pentofuranosyl) -1H-pyrazolo (3,4-d] pyrimidine)
a) 300mg (0,47 mmol) des Produkts aus Beispiel 17c) wurden in 40ml mit Ammoniak gesättigtem Methanol bei 6O0C während 4 Stunden behandelt und zur Trockne eingedampft. Man erhält 200mg (81 %) 4-Amino-1-(2',3'-didesoxy-ß-D-glycero-pentofuranosyl)-5'-O-(4,4'-dimethoxytriphenylmethyl)-1 H-pyrazolo[3,4-d)pyrimidin als farblosen Schaum nach Chromatographie an Kieselgel (Dichlormethan/Aceton 7:3).a) 300 mg (0.47 mmol) of the product from Example 17c) were dissolved in 40ml saturated with ammonia methanol at 6O 0 C for 4 hours, and evaporated to dryness. 200 mg (81%) of 4-amino-1- (2 ', 3'-dideoxy-β-D-glycero-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytriphenylmethyl) -1 H -pyrazolo [ 3,4-d) pyrimidine as a colorless foam after chromatography on silica gel (dichloromethane / acetone 7: 3).
1H-NMR(ID6]DMSO)=O = 2,16(m, 3'-H), 2,45 (m, 2'-H), 2,99 (m, 5'-H),3,69,3,70(2s, 2 x OCH3),4,25 (m,4'-H),6,52 (m,1'-H),7,74 (s, NH2), 8,06 (s, 3-H), 8,24 (s, 6-H). 1 H-NMR (ID 6 ) DMSO) = O = 2.16 (m, 3'-H), 2.45 (m, 2'-H), 2.99 (m, 5'-H), 3 , 69,3,70 (2s, 2 x OCH3), 4.25 (m, 4'-H), 6.52 (m, 1'-H), 7.74 (s, NH 2), 8 , 06 (s, 3-H), 8,24 (s, 6-H).
b) 110mg (0,2 mmol) des Produkts wurden mit 10ml 80%iger Essigsäure bei Raumtemperatur 20 Minuten lang gerührt. Nach Chromatographie (Kieselgel, Dichlormethan/Methanol 9:1) erhielt man das gewünschte Produkt kristallin. Nachfolgende Umkristallisation aus Isopropanol/Cyclohexan ergab 40mg (85%) des Produkts als .'ablösen Feststoff.b) 110 mg (0.2 mmol) of the product were stirred with 10 ml of 80% acetic acid at room temperature for 20 minutes. After chromatography (silica gel, dichloromethane / methanol 9: 1), the desired product was obtained in crystalline form. Subsequent recrystallization from isopropanol / cyclohexane gave 40 mg (85%) of the product as a decomposed solid.
UV (ΜβΟΗ):λ™χ = 260,275nm (ε = 9000,10200) C10H13N5O2 (235,25) Ber: C 51,06 H 5,57 N 29,77 Gef: C 50,96 H 5,65 N 29,80UV (ΜβΟΗ): λ ™ χ = 260.275nm (ε = 9000.10200) C 10 H 13 N 5 O 2 (235.25) Calcd: C 51.06 H 5.57 N 29.77 V: C 50, 96 H 5.65 N 29.80
13C-NMR([De]DMSO):δ = 133(C-8), 100,3(C-5), 158,1 (C-6), 156,1 (C-2), 153,6(C-4),84,4 (C-V),30,4(C-2'), 27,4 (C-31),81,7 (C-4'),64,3(C-5') 13 C NMR ([De] DMSO): δ = 133 (C-8), 100.3 (C-5), 158.1 (C-6), 156.1 (C-2), 153.6 (C-4), 84.4 (CV), 30.4 (C-2 '), 27.4 (C-3 1 ), 81.7 (C-4'), 64.3 (C-5 ')
DC (Kieselgel, CH2CI2/Methanol, 9:1,: R, = 0,4. — UV (MrOH): Amax = 260,275nm(c = 9000,10200).TLC (silica gel, CH 2 Cl 2 / methanol, 9: 1 ,: R, = 0.4. UV (MrOH): A max = 260.275nm (c = 9000.10200).
1H-NMR ((D6]DMSO): δ = 2,11 (m, 3'-H), 2,40 (m, 2'-H), 3,3P (m, V-H), 4,08 (m, 4'-H), 4,75 (m, 5'-OH), 6,45 (m, Γ-Η), 7.75 (s, NH2), 8,14 (s, 3-H), 8,18 (s, 6-H). 1 H-NMR ((D 6 ) DMSO): δ = 2.11 (m, 3'-H), 2.40 (m, 2'-H), 3.3 P (m, VH), 4.08 (m, 4'-H), 4.75 (m, 5'-OH), 6.45 (m, Γ-Η), 7.75 (s, NH 2 ), 8.14 (s, 3-H) , 8,18 (s, 6-H).
-12- 269 8B4-12- 269 8B4
a) 4,6·ΟΙοΗΙθΓ-1·(2'·αθ8θχγ·3',5'-αΙ^·|^οΙυογΙ·β·0·βΓνΙηΓθ·ρβΜο-ΙυΓβηο$νΙ)·1Η·ρνΗθΙο[3ι2-ο]ρνΓΜΙηa) 4.6 · ΟΙοΗΙθΓ-1 · (2 '· αθ8θχγ · 3', 5'-αΙ ^ · | ^ οΙυογΙ · β · 0 · βΓνΙηΓθ · ρβΜο-ΙυΓβηο $ νΙ) · 1Η · ρνΗθΙο [3 ι 2- ο] ρνΓΜΙη
(8,0mmol) Kaliumhydroxid und 30mg (0,1 mmol) Tris-(2-U-methoxy-ethoxy)ethyl]arnin enthält, wurde bei Raumtemperaturunter Stickstoff 30 Minuten lang gerührt. Unter Rühren wurden 625mg (1,6mmol) α·Chlor-2-desoxy-3,5-di-O-p-toluoyl-D-erythro-pentofuranose zugegeben und weitere 15 Minuten gerührt. Unlösliches Material wurde abfiltriert. Das Filtrat wurdeim Vakuum eingeengt. Der ölige Rückstand wurde an Kieselgel (Säule 17 x 4cm, Elutionsmittel Dichlormethan-Ethylacetat[97:3]) chromatographiert. Man erhielt 762mg (90%) des farblosen anrorphen Produktes.(8.0 mmol) of potassium hydroxide and 30 mg (0.1 mmol) of tris (2-U-methoxyethoxy) ethyl] arnine was stirred at room temperature under nitrogen for 30 minutes. With stirring, 625 mg (1.6 mmol) of α-chloro-2-deoxy-3,5-di-O-p-toluoyl-D-erythro-pentofuranose were added and the mixture was stirred for a further 15 minutes. Insoluble material was filtered off. The filtrate was concentrated in vacuo. The oily residue was chromatographed on silica gel (17 x 4 cm column, eluent dichloromethane-ethyl acetate [97: 3]). 762 mg (90%) of the colorless anoropenic product were obtained.
1H-NMR (Me2SO-d,): δ = 2,37 und 2,41 (2s, 2CH3), 2,77 (m, H-2's), ?.S Im, H-2'),4,57 (m, H-41, H-5'), 5,68 (m, H-3'), 6,66 (pt. 1 H-NMR (Me 2 SO-d,): δ = 2.37 and 2.41 (2s, 2CH 3 ), 2.77 (m, H-2's),? .S Im, H-2 ') , 4.57 (m, H-4 1 , H-5 '), 5.68 (m, H-3'), 6.66 (pt.
H-1'), 6,71 (d, J = 3,5Hz, H-3), 8,00 (s, H-7),H-1 '), 6.71 (d, J = 3.5Hz, H-3), 8.00 (s, H-7),
13C-NMR (MejSO-de): δ = 36,8 (C-2'), 64,2 (C-5'l, 74,9 (C-31), 81,7 (C-T), 85,6 (C-4'), 102,0 (C-3), 106,1 (C-7), 123,1 (C-3a), 129,7(C-2), 140,0 (C-6), 140,6 (C-4), 142,4 (C-7a). 13 C-NMR (MejSO-d e ): δ = 36.8 (C-2 '), 64.2 (C-5'l, 74.9 (C-3 1 ), 81.7 (CT), 85.6 (C-4 '), 102.0 (C-3), 106.1 (C-7), 123.1 (C-3a), 129.7 (C-2), 140.0 ( C-6), 140.6 (C-4), 142.4 (C-7a).
b) 4,6-Dichlor-1 •(2'-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosy.')-1 H-pyrrolo[3,2-c]pyrldinb) 4,6-dichloro-1 • (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl. ') - 1 H -pyrrolo [3,2-c] pyridine
500mg (0,93 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18a) wurden in 30 ml methanolischem Ammoniak gelöst und bei 50°C12 Stunden lang gerührt. Die Lösung wurde zur Trockne eingeengt, der feste Rückstand an Kieselgel 60 H (2g) adsorbiert undauf eine Kieselgelsäule (14 x 4cm, Elutionsmittel Chloroform/Methanol [9:11) aufgegeben. Aus der Hauptfraktion wurde das500 mg (0.93 mmol) of the compound from Example 18a) were dissolved in 30 ml of methanolic ammonia and stirred at 50 ° C for 12 hours. The solution was concentrated to dryness, the solid residue adsorbed on silica gel 60 H (2g) and applied to a silica gel column (14 x 4cm, eluent chloroform / methanol [9:11]. The main faction became the
1H-NMR (Me2SO-d„): δ = 2,28 (m, H-2's), 2,43 (m,H-2'a), 3,56 (m, H-5'), 3,85 (m, H-4'), 4.38 (m, H-3'), 5,02 (t, J = 5,2Hz,5'-OH),5,34 (d, J = 4,1 Hz, 3'-OH)16,42 (pt, H-V), 6,67 (d, J = 3,4Hz, H-3), 7,89 (d, J = 3,4Hz, H'-2),7,96 (s, H-7). 1 H-NMR (Me 2 SO-d "): δ = 2.28 (m, H-2's), 2.43 (m, H-2'a), 3.56 (m, H-5 ') , 3.85 (m, H-4 '), 4.38 (m, H-3'), 5.02 (t, J = 5.2Hz, 5'-OH), 5.34 (d, J = 4 , 1 Hz, 3'-OH) 1 6.42 (pt, HV), 6.67 (d, J = 3.4Hz, H-3), 7.89 (d, J = 3.4Hz, H ' -2), 7.96 (s, H-7).
13C-NMR (Me2SO-de): δ = 40,6 (C-2'), 61,5 (C-5'l, 70,5 (C-31), 85,5 (C-V), 87,6 (C-4'l, 101,3 (C-3), 106,1 (C-7), 123,1 (C-3a), 129,7(C-2), 139,7 (C-6), 140,4 (C-4), 142,0 (C-7a). 13 C-NMR (Me 2 SO-d e ): δ = 40.6 (C-2 '), 61.5 (C-5'l, 70.5 (C-3 1 ), 85.5 (CV ), 87.6 (C-4'l, 101.3 (C-3), 106.1 (C-7), 123.1 (C-3a), 129.7 (C-2), 139, 7 (C-6), 140.4 (C-4), 142.0 (C-7a).
c) 4-Amlno-6-chlor-1-(2'-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-pyrrolo[3,2-c]pyrldlnc) 4-Amino-6-chloro-1- (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -1H-pyrrolo [3,2-c] pyridine
460 mg (1,52 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18 b) wurden in 6 ml trockenem Hydrazin gelöst und auf 80°C 60 Minuten lang erhitzt. Das Hydrazin wurde im Vakuum entfernt und der ölige Rückstand zweimal mit je 10ml Ethanol eingeengt. Der Rückstand wurde in 40ml wäßrigem Ethanol gelöst. Dann wurden 2g Raney-Nickel-Katalysator zugegeben und die Mischung für zwei Stunden unter Rühren zum Sieden erhitzt. Der Katalysator wurde abfiltriert und gründlich mit lieißem wäßrigem Ethanol gewaschen. Das Filtrat wurde zur Trockne eingeengt, der Rückstand in Methanol gelöst, an 2 g Kieselgel adsorbiert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Dieses Kieselgel wurde in Chloroform/Methanol (9:1) suspendiert und auf eine Kieselgelsäule (6 χ 3cm) aufgegeben. Elution mit Chloroform/Methanol (9:1) ergab einen farblosen Sirup, aus welchem durch Kristallisation aus Methanol das Produkt in kleinen, farblosen Kristallen mit dem Schmelzpunkt 232°C erhalten werden konnte.460 mg (1.52 mmol) of the compound from Example 18 b) were dissolved in 6 ml of dry hydrazine and heated to 80 ° C for 60 minutes. The hydrazine was removed in vacuo and the oily residue was concentrated twice with 10 ml of ethanol. The residue was dissolved in 40 ml of aqueous ethanol. Then, 2 g of Raney nickel catalyst was added and the mixture was heated to boiling with stirring for two hours. The catalyst was filtered off and washed thoroughly with fresh aqueous ethanol. The filtrate was concentrated to dryness, the residue dissolved in methanol, adsorbed on 2 g of silica gel and the solvent removed in vacuo. This silica gel was suspended in chloroform / methanol (9: 1) and applied to a silica gel column (6 × 3 cm). Elution with chloroform / methanol (9: 1) gave a colorless syrup from which, by crystallization from methanol, the product could be obtained in small, colorless crystals of melting point 232 ° C.
DC (Chloroform/Methanol [9:1]): Rr = 0,2; UV (Methanol) Amix = 277nm (ε = 14800), 285nm (ε = 13800); 1H-NMR (Me2SO-da): δ = 2,20(m, H-2'm), 2,40 (m, H-2'a), 3,51 (m, H-5'), 3,78 (m, H-4'),4,32 (m, H-3'), 4,89 (t, J = 5Hz, 5'-OH), 5,26 (d, J = 4Hz, 3'-OH), 6,19 (pt. H-V), 6,55 (s, NH2), 6,64 (d, J = 3Hz, H-3), 6,83 (s, H-7), 7,36 (d, J = 3Hz, H-2).TLC (chloroform / methanol [9: 1]): R r = 0.2; UV (methanol) A mix = 277nm (ε = 14800), 285nm (ε = 13800); 1 H-NMR (Me 2 SO-d a ): δ = 2.20 (m, H-2'm), 2.40 (m, H-2'a), 3.51 (m, H-5 '), 3.78 (m, H-4'), 4.32 (m, H-3 '), 4.89 (t, J = 5Hz, 5'-OH), 5.26 (d, J = 4Hz, 3'-OH), 6.19 (pt. HV), 6.55 (s, NH 2 ), 6.64 (d, J = 3Hz, H-3), 6.83 (s, H -7), 7.36 (d, J = 3Hz, H-2).
13C-NMR (Me2SO-d8): δ = 40 (C-2'), 61,8 (C-51), 70,6 (C-3'), 64,7 (C-V), 87,2 (C-4'), 95,1 (C-7), 101,6 (C-3), 109,6 (C-3a), 123,5 (C-2), 141,0 (C-6), 141,4 (C-7 a), 152,9 (C-4) 13 C-NMR (Me 2 SO-d 8 ): δ = 40 (C-2 '), 61.8 (C-5 1 ), 70.6 (C-3'), 64.7 (CV), 87.2 (C-4 '), 95.1 (C-7), 101.6 (C-3), 109.6 (C-3a), 123.5 (C-2), 141.0 ( C-6), 141.4 (C-7a), 152.9 (C-4)
C12H14CIN3O3 Ber. C50.80 H4.97 N 14,81 Cl 12,50% Gef. C 50,91 H 5,05 N 14,75 Cl 12,53%C 12 H 14 CIN 3 O 3 Ber. C50.80 H4.97 N 14.81 Cl 12.50% Gef. C 50.91 H 5.05 N 14.75 Cl 12.53%
d) 4-Amino-1-(2'-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-pyrrolo-[3,2-c]pyridind) 4-Amino-1- (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -1H-pyrrolo [3,2-c] pyridine
Eine Lösung von 200mg (0,7 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18c) in Methanol (30ml), das 0,4 ml mit Ammoniak gesättigtem Methanol enthält, wurde in Gegenwart von Palladium-Tierkohle (50mg, 10% Pd) bei Raumtemperatur 30 Stunden lang hydriert. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Reinigung durch Flashchromatographie (Säule 4 x 4cm, Elutionsmittel Chloroform/Methanol/Triethylamin [7:3:2]) und Kristallisation aus Methanol ergaben 70mg (40%) des Produktes als farblose Kristalle vom Schmelzpunkt 2050C. DC (Laufmittel Chloroform/ Methanol/Triethylamin[7:3:2]v/v/v): R, = 0,4; UV(Methanol)An,., = 271 nm (ε = 12800); 1H-NMR(Me2SO-d„): δ = 2,20(m, H-2'b), 2,42 (m, H-2'a), 3,51 (m, H-5'), 3,80 (m, K-4'), 4,32 (m, H-3'), 4,91 (m, 5'-OH), 5,32 (m, 3'-OH), 6,08 (s, NH2), 6,23 (pt. H-1'), 6,65 (d, J = 3Hz, H-3), 6,75 (d, J = 6Hz, H-7), 7,35 (d, J = 3Hz, H-2), 7,55 (d, J = 6Hz, H-6).A solution of 200 mg (0.7 mmol) of the compound of Example 18c) in methanol (30 ml) containing 0.4 ml of methanol saturated with ammonia was dissolved in the presence of palladium-charcoal (50 mg, 10% Pd) at room temperature Hydrogenated for hours. The catalyst was filtered off and the solvent removed in vacuo. ([7: 3: 2] Column 4 x 4cm, eluent chloroform / methanol / triethylamine) Purification by flash chromatography and crystallization from methanol gave 70 mg (40%) of the product (as colorless crystals of melting point 205 0 C. TLC eluent chloroform / methanol / Triethylamine [7: 3: 2] v / v / v): R, = 0.4; UV (methanol) A n ,., = 271 nm (ε = 12800); 1 H-NMR (Me 2 SO-d "): δ = 2.20 (m, H-2'b), 2.42 (m, H-2'a), 3.51 (m, H-5 '), 3.80 (m, K-4'), 4.32 (m, H-3 '), 4.91 (m, 5'-OH), 5.32 (m, 3'-OH) , 6,08 (s, NH 2 ), 6,23 (pt H-1 '), 6,65 (d, J = 3Hz, H-3), 6,75 (d, J = 6Hz, H- 7), 7.35 (d, J = 3Hz, H-2), 7.55 (d, J = 6Hz, H-6).
13C-NMR (MejSO-de): δ = 39,8 (C-2'), 62,0 (C-5'), 70,8 (C-3'), 84,5 (C-V), 87,1 (C-41),96,9 (C-7), 101,5 (C-3), 110,7 (C-3a), 122,5 (C-2), 139,7 (C-6), 140,0 (C-7a), 153,7 (C-4) 13 C-NMR (MejSO-de): δ = 39.8 (C-2 '), 62.0 (C-5'), 70.8 (C-3 '), 84.5 (CV), 87 , 1 (C-4 1 ), 96.9 (C-7), 101.5 (C-3), 110.7 (C-3a), 122.5 (C-2), 139.7 (C -6), 140.0 (C-7a), 153.7 (C-4)
Ci2H15N3O3 Ber. C 57,82 H 6,07 N 16,86% Gef. C 57,97 H 6,12 N 16,74%Ci 2 H 15 N 3 O 3 Ber. C 57.82 H 6.07 N 16.86% Gef. C 57.97 H 6.12 N 16.74%
a) 6-Chlor-1-(2'-dosoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-pyrrolo[3^i-c]pyridin-4onEine Lösung von 400mg (1,32 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18b) in 2 N wäßriger Natronlauge (mit geringen Mengen von 1,4-Dioxan) wurde 30 Stunden zum Sieden erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde mit 2 N Salzsäure neutralisiert, filtriert und dann auf eine Amberlite-XAD-4-Säule (17x2 cm) aufgegeben. Anorganische Salze wurden durch Waschen mit Wasser entfernt. Das Frodukt wurde mit Methanol aluiert. Kristallisation aus Wasser ergab 158 mg (42%) farblose Kristalle. Schmelzpunkt 242-2430C. DC (Chloroform/Methanol [8:2]):a) 6-Chloro-1- (2'-dosoxy-.beta.-D-erythro-pentofuranosyl) -1H-pyrrolo [3] ic] pyridin-4one. A solution of 400 mg (1.32 mmol) of the compound from Example 18b) in 2 N aqueous sodium hydroxide solution (with small amounts of 1,4-dioxane) was heated to boiling for 30 hours. The reaction mixture was neutralized with 2N hydrochloric acid, filtered and then loaded onto an Amberlite XAD-4 column (17x2 cm). Inorganic salts were removed by washing with water. The product was aluiert with methanol. Crystallization from water gave 158 mg (42%) of colorless crystals. Melting point 242-243 0 C. TLC (chloroform / methanol [8: 2]):
R, = 0,5 -UV (Methanol): Xmjx = 270nm (ε = 11100), 292 nm (ε = 9300); 1H-NMR (Me2SOd6): δ = 2,22 (m, H-2'b), 2,38 (m, H-2'a), 3,53 (m, H-5'), 3,80 (m, H-4'), 4,33 (m, H-3'), 4,96 (m, 5'-OH), 5,29 (m, 3'-OH), 6,22 (pt. H-V), 6,54 (d, J = 3,3 Hz, H-3), 6,96 (s, H-7), 7,38 (d, J = 3,3Hz, H-2), 11,81 (br. NH). 13C-NMR (Me2SO-d6): 40,5 (C-2'), 61,7 (C-5'), 70,6 (C-3'), 85,0 (C-V), 87,4 (C-4'), 94,9 (C-7), 104,1 (C-3), 114,0 (C-3a), 123,2 (C-2), 129,1 (C-6), 139,2 (C-7a), 158,7 (C-4). C12H13CIN2O4 Ber. C 50,63 H 4,60 N 9,84 Cl 12,45 Got. C 50,79 H 4,74 N 9,80 Cl 12,69R, = 0.5 UV (methanol): X mjx = 270 nm (ε = 11100), 292 nm (ε = 9300); 1 H-NMR (Me 2 SOd 6 ): δ = 2.22 (m, H-2'b), 2.38 (m, H-2'a), 3.53 (m, H-5 ') , 3.80 (m, H-4 '), 4.33 (m, H-3'), 4.96 (m, 5'-OH), 5.29 (m, 3'-OH), 6 , 22 (pt HV), 6.54 (d, J = 3.3 Hz, H-3), 6.96 (s, H-7), 7.38 (d, J = 3.3Hz, H -2), 11.81 (NH, NH). 13 C-NMR (Me 2 SO-d 6 ): 40.5 (C-2 '), 61.7 (C-5'), 70.6 (C-3 '), 85.0 (CV), 87.4 (C-4 '), 94.9 (C-7), 104.1 (C-3), 114.0 (C-3a), 123.2 (C-2), 129.1 ( C-6), 139.2 (C-7a), 158.7 (C-4). C 12 H 13 CIN 2 O 4 Ber. C 50.63 H 4,60 N 9,84 Cl 12,45 Got. C 50.79 H 4.74 N 9.80 Cl 12.69
-13- 269 8ii4-13- 269 8ii4
b) 1-(2'-Desoxy-ß-D-erYthro-pentofuranosyl)-1H-pyrrolo[3.2-c]pyridln-4-onb) 1- (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -1H-pyrrolo [3.2-c] pyridin-4-one
Eine Lösung von 100mg (0,35mmol) der Verbindung aus Beispiel 19a) in Methanol (15ml) wurde mit 0,5ml 25%igom wäßrigem Ammoniak vermischt und in Gegenwart von Palladium/Tierkohle (10% Pd, 15mg) 3 Stunden lang bei Raumtemperatur hydriert. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Filtrat zur Trockne eingeengt. Der feste Rückstand wurde aus Wasser kristallisiert. Man erhielt 51 mg (58%) Produkt vom Schmelzpunkt 147-1480C. DC (Laufmittel Chloroform/ Methanol (8:2]):A solution of 100 mg (0.35 mmol) of the compound of Example 19a) in methanol (15 ml) was mixed with 0.5 ml of 25% aqueous ammonia and in the presence of palladium / animal charcoal (10% Pd, 15 mg) for 3 hours at room temperature hydrogenated. The catalyst was filtered off and the filtrate was concentrated to dryness. The solid residue was crystallized from water. This gave 51 mg (58%) of product of melting point 147-148 0 C. TLC (eluant chloroform / methanol (8: 2]):
R( = 0,3; -UV (Methanol): λ™, = 264nm (e = 11700), 282nm (sh, ε = 8000), 295nm (sh, e = 5100); -1H-NMR (Me2SO-d6): δ = 2,22 (m, H-2's), 2,40 (m, H-2's), 3,52 (m, H-5'), 3,81 (m, H-41), 4,32 (m, H-3's), 4,93 (t, J = 5,4 Hz, 5'-OH), 5,32 (d, J = 4,3 Hz, 3'-OH), 6,21 (pt. H-1'», 6,54 (d, J = 3Hz, H-3), 6,62 (d, J = 7 Hz, H-7), 7,03 (d, J = 7Hz, H-6), 7,34 (d, J = 3Hz, H-2), 10,87 (br. NH).R (= 0.3; -UV (methanol): λ ™, = 264 nm (e = 11700), 282 nm (sh, ε = 8000), 295 nm (sh, e = 5100), - 1 H-NMR (Me 2 SO-d 6 ): δ = 2.22 (m, H-2's), 2.40 (m, H-2's), 3.52 (m, H-5 '), 3.81 (m, H) 4 1 ), 4.32 (m, H-3's), 4.93 (t, J = 5.4 Hz, 5'-OH), 5.32 (d, J = 4.3 Hz, 3'- OH), 6.21 (pt H-1 '', 6.54 (d, J = 3Hz, H-3), 6.62 (d, J = 7Hz, H-7), 7.03 ( d, J = 7Hz, H-6), 7.34 (d, J = 3Hz, H-2), 10.87 (br. NH).
"C-NMR (Me2SO-dj): δ = 40 (C-2f, überlagert von Lösungsmittel-Signalen), 61,8 (C-51), 70,7 (C-3'), 84,8 (C-1'), 87,4 (C-4'), 93,8 (C-7), 104,6 (C-3), 115,9 (C-3 a), 122,0 (C-2), 127,8 (C-6), 139,0 (C-7 a), 159,6 (C-4). C13H14N2O4 Ber. C 59,08 H 6,10 N 10,60% Gef. C 59,09 H 6,07 N 10,65%C-NMR (Me 2 SO-dj): δ = 40 (C-2 f , superimposed on solvent signals), 61.8 (C-5 1 ), 70.7 (C-3 '), 84, 8 (C-1 '), 87.4 (C-4'), 93.8 (C-7), 104.6 (C-3), 115.9 (C-3 a), 122.0 ( C-2), 127.8 (C-6), 139.0 (C-7a), 159.6 (C-4), C 13 H 14 N 2 O 4 calc. C 59.08 H 6, 10 N 10.60% Gef. C 59.09 H 6.07 N 10.65%
a) 1-(2'-Desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-4,6-dlchlor-5'-0-(4,4'-dlmethoxytrityl)-1H-pyrrolo[3.2-c]pyridlna) 1- (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -4,6-dichloro-5'-O- (4,4'-dimethoxytrityl) -1H-pyrrolo [3.2-c] pyridine
500 mg (1,65 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18b) wurden mit 10ml Pyridin zur Trockne eingeengt. Das Material wurde in 10ml trockenem Pyridin gelöst; man gab 0,7ml (4,1 mmol) Hünigs Base sowie 690mg (2,0mmol) 4,4'-Dimethoxytritylchlorid zu. Die Lösung wurde für eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Nach Zugabe von 75 ml 5%iger wäßriger Natriumbicarbonat-Lösung wurde mit Dichlormethan extrahiert (2 x 75 ml). Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet. Das Natriumsulfat wurde abfiltriert und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde auf eine Kieselgelsäule (30 x 3cm, Elutionsmittel Dichlormethan und Dichlormetban/Aceton [99:1]) aufgegeben. Das Produkt wurde aus der Hauptfraktion als gelbliche amorphe Masse gewonnen. Das Produkt wurde in Ether gelöst und mit η-Hexan gefällt. Ausbeute: 740 mg (74%).500 mg (1.65 mmol) of the compound from Example 18b) were concentrated to dryness with 10 ml of pyridine. The material was dissolved in 10 ml of dry pyridine; 0.7 ml (4.1 mmol) Hünigs base and 690 mg (2.0 mmol) 4,4'-dimethoxytrityl chloride were added. The solution was stirred for one hour at room temperature. After addition of 75 ml of 5% aqueous sodium bicarbonate solution was extracted with dichloromethane (2 x 75 ml). The combined organic phases were dried over sodium sulfate. The sodium sulfate was filtered off and the filtrate was concentrated. The residue was applied to a silica gel column (30 × 3 cm, eluent dichloromethane and dichlorometane / acetone [99: 1]). The product was recovered from the main fraction as a yellowish amorphous mass. The product was dissolved in ether and precipitated with η-hexane. Yield: 740 mg (74%).
1H-NMR (Me2SO-de): δ = 2,39 (m, H-2'b), 2,64 (m, H-2'a), 3,09 (m, H-5'), 3,72 (s, 2OCH3), 3,96 (m, H-4'), 4,42 (m, H-3'), 5,41 (d, J = 4,8Hz, 3'-OH), 6,47 (pt, H-1'), 6,65 (d, J = 3,5Hz, H-3), 6,76-7,27 (aromat. H), 7,76 (d, J = 3,5Hz, H-2), 7,89 (s, H-7), 13C-NMR (Me2SO-de): δ = 40 (C-2' überlagert von Lösungsmittel Signalen) 55,1 (2OCH3), 63,6 (C-5'), 70,05 (C-3'), 85,0,85,5, 85,5 (C-V, C-4', OCDMT), 101,3 (C-3), 106,2 (C-7), 123,2 (C-3a), 129,1 (C-2), 139,8 (C-6), 140,5.'"M), 142,3 (C-7a). C33H30CI2N2O5 Ber. C 65,46 H 4,99 Cl 11,71 N 4,63% Gef. C 65,47 H 5,09 Cl 11,78 N 4,56% 1 H-NMR (Me 2 SO-d e ): δ = 2.39 (m, H-2'b), 2.64 (m, H-2'a), 3.09 (m, H-5 '), 3.72 (s, 2OCH 3 ), 3.96 (m, H-4'), 4.42 (m, H-3 '), 5.41 (d, J = 4.8Hz, 3 '-OH), 6.47 (pt, H-1'), 6.65 (d, J = 3.5Hz, H-3), 6.76-7.27 (aromat H), 7.76 (d, J = 3.5Hz, H-2), 7.89 (s, H-7), 13 C-NMR (Me 2 SO-d e ): δ = 40 (C-2 'superimposed on solvent signals ) 55.1 (2OCH 3 ), 63.6 (C-5 '), 70.05 (C-3'), 85.0, 85.5, 85.5 (CV, C-4 ', OCDMT) , 101.3 (C-3), 106.2 (C-7), 123.2 (C-3a), 129.1 (C-2), 139.8 (C-6), 140.5. '"M), 142.3 (C-7a). C 33 H 30 CI 2 N 2 O 5 Calculated. C 65.46 H 4.99 Cl 11.71 N 4.63%. Found: C 65.47 H 5.09 Cl 11.78 N 4.56%
b) 1-(2'-Desoxy-ß-D-ervthro-pentofuranosyl)-4,6-dichlor-5'-0-(4,4'-dimethoxytrltyl)-3'-0-phenoxythiocarbonyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridinb) 1- (2'-deoxy-β-D-ergothipentofuranosyl) -4,6-dichloro-5'-O- (4,4'-dimethoxytrltyl) -3'-O-phenoxythiocarbonyl-1H-pyrrolo [ 3,2-c] pyridine
300mg (0,5mmol) der Verbindung aus Beispiel 20a) wurden in trockenem Acetonitril (11 ml) gelöst. 350 mg (2,8mmol) 4-Dimethylaminopyridin und 150μΙ (1,1 mmol) Phenylchlorthiocarbonat wurden zugegeben und die Lösung wurde bei Raumtemperatur 16 Stunden lang gerührt. Anschließend wurde die Reaktionsmischung im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde an Kieselgel Chromatographien (Elutionsmittel Dichlormethan). Aus der Hauptfraktion wurde das farblose Produkt isoliert (310mg, 84%).300 mg (0.5 mmol) of the compound from example 20a) were dissolved in dry acetonitrile (11 ml). 350 mg (2.8 mmol) of 4-dimethylaminopyridine and 150 μΙ (1.1 mmol) of phenyl chlorothiocarbonate were added and the solution was stirred at room temperature for 16 hours. Subsequently, the reaction mixture was concentrated to dryness in vacuo. The residue was chromatographed on silica gel (eluent dichloromethane). The colorless product was isolated from the main fraction (310 mg, 84%).
1H-NMR (Me2SO-d6): δ = 2,92 (m, H-2'a, b), 3,35 (m, H-5'),3,72 (s, 2OCH3),4,43 (m, H-4'), 5,89 (m, H-3'), 8,61 (pt. H-V).6,71 (d, J = 3,5Hz, H-3), 6,81-7,52 (aromat. H), 7,76 (d, J = 3,5Hz, H-2), 8,01 (s, H-7). 1 H-NMR (Me 2 SO-d 6 ): δ = 2.92 (m, H-2'a, b), 3.35 (m, H-5 '), 3.72 (s, 2OCH 3 ), 4.43 (m, H-4 '), 5.89 (m, H-3'), 8.61 (pt. HV) .6.71 (d, J = 3.5Hz, H-3 ), 6.81-7.52 (aromatics H), 7.76 (d, J = 3.5Hz, H-2), 8.01 (s, H-7).
13C-NMR (Me2SO-d6): δ = 37,0 (C-2'), 55,1 (2OCH3), 63,8 (C-5'), 83,0,84,2,85,6,86,0 (C-1', C-3', C-4', OCDMT) 10' ,8 (C-3), 106,3 (C-7). 123,1 (C-3a), 128,9 (C-2), 140,1 (C-6), 140,6 (C-4), 142,4 iC-7a), 193,8 (C=S). C40H34CI2N2OeS Ber. C 64,78 H 4,62 Cl 9,55 N 3,77 S 4,32% Gef. C 64,66 H 4,59 Cl 9,65 N 3,70 S 4,40% 13 C-NMR (Me 2 SO-d 6 ): δ = 37.0 (C-2 '), 55.1 (2OCH 3 ), 63.8 (C-5'), 83.0, 84.2 , 85.6, 86.0 (C-1 ', C-3', C-4 ', OCDMT) 10', 8 (C-3), 106.3 (C-7). 123.1 (C-3a), 128.9 (C-2), 140.1 (C-6), 140.6 (C-4), 142.4 iC-7a), 193.8 (C = S). C 40 H 34 Cl 2 N 2 OeS Ber. C 64.78 H 4.62 Cl 9.55 N 3.77 S 4.32% Gef. C 64.66 H 4.59 Cl 9.65 N 3.70 S 4.40%
c) 4,6-Dichlor-1-(2',3'-didesoxy-ß-D-glycero-pentofuranosyl)-5'-0-(4,4'-dimethoxytrityl)-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridinc) 4,6-dichloro-1- (2 ', 3'-dideoxy-β-D-glycero-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytrityl) -1H-pyrrolo [3,2- c] pyridine
170mg (0,23 mmol) der Verbindung aus Beispiel20b) und 15mg (0,1 mmol) 2,2'-azobis(2-methyl)propionitril wurden in 10ml trockenem Toluol unter Argonatmosphäre gelöst. Unter Rühren wurden 140 μΙ (0,51 mmol) Tri-n-butylstannan zugegeben und 3 Stunden lang bei 80°C gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand an Kieselgel (Elutionsmittel Dichlormethan) Chromatographien. Aus der Hauptfraktion wurden 115mg (85%) des Produkts isoliert. 1H-NMR (Me2SO-d6): δ = 2,05 (H-3'), 2,50 (H-21, überlagert von Signalen des Lösungsmittels), 2,90-3,15 (m, H-5'), 4,25 (m, H-4'), 6,38 (m, H-V), 6,63 (d, J = 3,4Hz, H-3), 6,69-7,30 (aromat. H). 7,79 (d, J = 3,4Hz, H-2), 7,89 (s, H-7).170 mg (0.23 mmol) of the compound from Example 20b) and 15 mg (0.1 mmol) of 2,2'-azobis (2-methyl) propionitrile were dissolved in 10 ml of dry toluene under an argon atmosphere. With stirring, 140 μΙ (0.51 mmol) of tri-n-butylstannane were added and stirred at 80 ° C for 3 hours. The solvent was removed in vacuo and the residue chromatographed on silica gel (eluent dichloromethane). From the main fraction, 115 mg (85%) of the product was isolated. 1 H-NMR (Me 2 SO-d 6 ): δ = 2.05 (H-3 '), 2.50 (H-2 1 , superimposed on signals from the solvent), 2.90-3.15 (m , H-5 '), 4.25 (m, H-4'), 6.38 (m, HV), 6.63 (d, J = 3.4Hz, H-3), 6.69-7 , 30 (aromatic H). 7.79 (d, J = 3.4Hz, H-2), 7.89 (s, H-7).
d) 2,6-Dichlor-3,7-didesaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purind) 2,6-dichloro-3,7-didezaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine
e) 6-Amlno-3,7-didesaza-,T,3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purine) 6-Amino-3,7-didesza, T, 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine
Die Verbindung aus Beispiel 20d) wurde mit Hydrazin behandelt und anschließend mit Raney-Nickel reduziert wie in Beispiel 18c) beschrieben. Man erhielt so die in Beispiel 1 D) beschriebene Ve/bindung.The compound of Example 20d) was treated with hydrazine and subsequently reduced with Raney nickel as described in Example 18c). This gave the compound described in Example 1 (D).
f) 3,7-Didesaza-2',3'-did3soxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purinf) 3,7-didesaza-2 ', 3'-did3soxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine
Die Verbindung aus Beispiel 20d) wurde mit Pd/Tierkohle/Wasserstoff analog zu Beispiel 24g) hydriert. Man erhielt die schon in Beispiel 1 A) beschriebene Verbindung.The compound from Example 20d) was hydrogenated with Pd / animal charcoal / hydrogen analogously to Example 24g). The compound already described in Example 1 A) was obtained.
g) 3,7-Didesaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranos/!-purln-6-ong) 3,7-didesaza-2 ', 3'-dideoxy-9-.beta.-D-ribofuranos /! -purlin-6-one
Die Verbindung aus Beispiel 20d) wurde mit Natronlauge behandelt wie in Beispiel 19a) beschrieben und anschließend hydriert wie unter Beispiel 19b) beschrieben. Man erhielt so die schon in Beispiel 1 E) beschriebene Verbindung.The compound from Example 20d) was treated with sodium hydroxide solution as described in Example 19a) and then hydrogenated as described in Example 19b). This gave the compound already described in Example 1 E).
2-Amino-(2',i'-dide8OXY-ß-D-glycero-pentofurenosyl)-1H-pyrazolo[3.4-d]pyrimidln-4-on2-amino- (2 ', i'-dide8OXY-ß-D-glycero-pentofurenosyl) -1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidln-4-one
Diese Verbindung wurde analog zu dem in Beispiel 17 beschriebenen Wej über 2-Amino-(2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl)-1 H-pyrazolo(3,4-d]pyrimidin-4-on und Barton-Deoxygenierung von 2-Amin'j-(2'-desoxy-3'-O-methoxythiocarbonyl-5'-toluoyl-ribofuranosyO-1 H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin 4-on hergestelltThis compound was prepared analogously to Wej described in Example 17 via 2-amino- (2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl) -1H-pyrazolo (3,4-d] pyrimidin-4-one and Barton Deoxygenation of 2-amino'j- (2'-deoxy-3'-O-methoxythiocarbonyl-5'-toluoyl-ribofuranosyO-1H-pyrazolo [3,4-d] pyrimidine 4-one
Ci0H13N5O3 (251,25) Ber.: C47.81 H5.22 N 27,88% Gef.: C 48,01 H 5,30 N 27,83%CI 0 H 13 N 5 O 3 (251.25) Calc .: C47.81 H5.22 N 27.88% Found: C 48.01 H 5.30 N 27.83%
13C-NMR (DMSO-de): δ = 135,1 (C-3), 99,7 (C-3a), 157,9 (C-4), 155,3 (C-6), 154,5 (C-7a), 83,8 (C-V), 30,3 (C-2'), 27,3 (C-3'l, 8ϊ,6(C-4'), 64,3' (C-5'). 13 C-NMR (DMSO-d e ): δ = 135.1 (C-3), 99.7 (C-3a), 157.9 (C-4), 155.3 (C-6), 154 , 5 (C-7a), 83.8 (CV), 30.3 (C-2 '), 27.3 (C-3'l, 8ϊ, 6 (C-4'), 64.3 '( C-5 ').
1H-NMR: δ = 6,19 (dd, 1'-H, j = 6,9,3,5Hz), 2,06 (m, 3'-H) 1 H NMR: δ = 6.19 (dd, 1'-H, j = 6.9.3.5Hz), 2.06 (m, 3'-H)
Schmp.:221°CSchmp.:221°C
3,7-Dldesaza-2'-desoxy-9-ß-D-rlbofuranosyl-purln(2'-Desoxy-3,7-dldesaza-nebularln)Die Verbindung aus Beispiel 18b) wurde an Palladium/Tierkohle (10% Pd) in ammoniakalischem Methanol hydriert. Das Produkt wurde nach Abfiltrieren des Katalysators und Einengen des Filtrats im Vakuum von anorganischen Salzen durch Chromatographie an Amberlite XAD (Methanol/Wasser) sowie Kristallisation aus Wasser gereinigt. Schmp.:175-176°C3,7-Dldesaza-2'-deoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine (2'-deoxy-3,7-dldesaza-nebular) The compound from Example 18b) was assayed on palladium / animal charcoal (10% Pd). hydrogenated in ammoniacal methanol. The product was purified by filtration of the catalyst and concentration of the filtrate in vacuo of inorganic salts by chromatography on Amberlite XAD (methanol / water) and crystallization from water. Schmp.:175-176°C
13C-NMR ([D6]DMSO): δ = 126,9 (C-2), 101,7 (C-3), 125,5 (C-3a), 143,3 (C-4), 140,6(C-6), 105,9 (C-7), 139,2 (C-7a), 84,6 (C-V),70,8 (C-3'), 87,8 (C-4'), 61,9 (C-5·) 13 C-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 126.9 (C-2), 101.7 (C-3), 125.5 (C-3a), 143.3 (C-4), 140.6 (C-6), 105.9 (C-7), 139.2 (C-7a), 84.6 (CV), 70.8 (C-3 '), 87.8 (C) 4 '), 61.9 (C-5 ·)
UV (0,1 N wäßr. HCI): Amix = 224,274nm C12H14N2O3 Ber.: C 61,53 H 6,02 N 11,96% Gef.: C 61,55 H 6,12 N 12,02%UV (0.1 N aq. HCl): A mix = 224.274 nm C 12 H 14 N 2 O 3 Calc .: C 61.53 H 6.02 N 11.96% Found: C 61.55 H 6, 12N 12.02%
1H-NMR (L MSO-de): δ = 2,23 (m, 2'-Hb), 2,29 (m, 2'-Ha), 2,55 (m, 5'-H2), 3,85 (m, 4'-H), 4,38 (m, 3'-H), 4,99 (5'-OH), 5,37 (3'-OH), 6,42(pt,l'-H),6,66(d,J = 3Hz,3-H),7,62(d,j = 6Hz,7-H),7,71 (d,j = 3Hz,2-H),8,21 (d,j = 6Hz, 6-H), 8,23 (s, 4-H). 1 H-NMR (L MSO-de): δ = 2.23 (m, 2'-Hb), 2.29 (m, 2'-Ha), 2.55 (m, 5'-H 2 ), 3.85 (m, 4'-H), 4.38 (m, 3'-H), 4.99 (5'-OH), 5.37 (3'-OH), 6.42 (pt, I-H), 6.66 (d, J = 3Hz, 3-H), 7.62 (d, j = 6Hz, 7-H), 7.71 (d, j = 3Hz, 2-H) , 8.21 (d, j = 6Hz, 6-H), 8.23 (s, 4-H).
a) 2-Chlor-e-nv3thoxy-3,7-didesaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosylpurlna) 2-Chloro-e-n.sub.3-thoxy-3,7-didezaZe-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosylpurene
Die Verbindung aus Beispiel 18b) wurde 40 Stunden in 1N methanolischer Natriummethanolatlcsung erhitzt. Das Reaktionsprodukt wurde an Amberlite XAD durch hydrophobe Chromatographie gereinigt (Mothanol/Wasser). UV (Methanol): An,,,, = 271,280nmThe compound from example 18b) was heated for 40 hours in 1N methanolic sodium methanolate. The reaction product was purified on Amberlite XAD by hydrophobic chromatography (methanol / water). UV (methanol): A n ,,,, = 271,280nm
C13H15CIN2O4 Ber. C 52,27 H 5,06 Cl 11,87 N 9,38% Gef. C52,24 H5,14 Cl 12,05 N9,46%C 13 H 15 CIN 2 O 4 Ber. C 52.27 H 5.06 Cl 11.87 N 9.38% Gef. C52.24 H5.14 Cl 12.05 N9.46%
b) 2-Chlor-3,7-didesaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purln-6-onb) 2-chloro-3,7-dideaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine-6-one
30stündiges Erhitzen der Verbindung aus Beispiel 18 b) in 2 N wäßriger Natronlauge/1,4-Dioxan ergab 2-Chlor-3 7-didesaza-2'-desoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-on: UV (Methanol): An,,,, = 262 nm Ci3H16N2O4 Ber.: C59,08 H6,10 N 10,60% Gef.: C 59,09 H 6,07 N 10,65%Heating the compound of Example 18 b) in 2N aqueous sodium hydroxide / 1,4-dioxane for 30 hours gave 2-chloro-3,7-dideaza-2'-deoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purin-6-one: UV (Methanol): A n ,,,, = 262 nm Ci 3 H 16 N 2 O 4 Calc .: C59.08 H6.10 N 10.60% Found: C 59.09 H 6.07 N 10.65 %
1H-NMR ([D6]DMSO): δ = 2,22 (m, 2'-H„) 2,38 (m, 2'-H1), 3,53 (m, 5'-H2), 3,80 {m, 4'-H), 4,33 (m, 3'-H), 4,96 (5'-OH), 5,29 (3'-OH), 6,22 (pt, 1 '-H), 6,54 (d, j = 3 Hz, 3-H), 6,96 (s, 7-H), 7,38 (d, j = 3 Hz, 2-H), 11,81 (NH). 1 H-NMR ([D 6 ] DMSO): δ = 2.22 (m, 2'-H ") 2.38 (m, 2'-H 1 ), 3.53 (m, 5'-H 2 3.80 {m, 4'-H), 4.33 (m, 3'-H), 4.96 (5'-OH), 5.29 (3'-OH), 6.22 ( pt, 1'-H), 6.54 (d, j = 3Hz, 3-H), 6.96 (s, 7-H), 7.38 (d, j = 3Hz, 2-H) , 11.81 (NH).
a) 4-Chlor-7-(2'-desoxy-3,5-dl-0-(p-toluoyl)-ß-D-erythropentofuranosyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrin>idin1 g (17,8mmol) pulverförmiges Kaliumhydroxid wurde bei Raumtemperatur in 60ml trockenes Acetonitril gegeben. Unter Rühren wurden 100 μΙ (0,31 mmol) Tris-[2-(2-methoxy-ethoxy)ethyl]amin zugegeben. Nach 5 Minuten wurden 1,23g (8,01 mmol) 4-Chlor-7 H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin in der Reaktionsmischung gelöst und für weitere 5 Minuten gerührt. Dann wurde a-Chlor-2-desoxy-3,5-di-O-p-toluoyl-ß-D-erythro-pento-furanose zugegeben. Nach 15minütigem Rühren wurde unlösliches Material durch Filtration entfernt. Das Filtrat wurde im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand an einer Kieselgelsäule (5 x 7cm, Chloroform) Chromatographien. Einengen des Eluats im Vakuum ergab 3,26g (81 %) Produkt, das aus Ethanol in farblosen Nadeln kristallisierte (Schmelzpunkt 120°C)a) 4-Chloro-7- (2'-deoxy-3,5-dl-O- (p-toluoyl) -β-D-erythropentofuranosyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyridine> idine 1 g ( 17.8 mmol) of powdered potassium hydroxide was added at room temperature in 60 ml of dry acetonitrile. With stirring, 100 μΙ (0.31 mmol) of tris [2- (2-methoxyethoxy) ethyl] amine was added. After 5 minutes, 1.23 g (8.01 mmol) of 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was dissolved in the reaction mixture and stirred for an additional 5 minutes. Then, a-chloro-2-deoxy-3,5-di-Opo-toluoyl-β-D-erythro-pento-furanose was added. After stirring for 15 minutes, insoluble material was removed by filtration. The filtrate was concentrated to dryness in vacuo and the residue was chromatographed on a silica gel column (5 x 7cm, chloroform). Concentration of the eluate in vacuo gave 3.26 g (81%) of product which crystallized from ethanol in colorless needles (mp 120 ° C).
Weitere Varianten des Herstellungsverfahrens: Other variants of the manufacturing process:
(I) Fest-Flüssig-Glykosilierung in Abwesenheit eines Katalysators: Die Reaktion wurde ausgeführt wie oben boschrieben, jedoch ohne Katalysator. Nach Aufarbeitung erhielt man 2,82 g (70%) des Produktes.(I) Solid-liquid glycosylation in the absence of a catalyst: The reaction was carried out as described above but without catalyst. After working up, 2.82 g (70%) of the product were obtained.
(II) Durch flüssig-flüssig-Phasentransfer-Glykosilierung:(II) By liquid-liquid phase transfer glycosylation:
500mg (3,26mmo!) 4-Chlor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin wurden in 20ml Dichlormethan gelöst. 9ml 50%iger wäßriger Natronlauge wurde zugegeben. Nach Zugabe von 10mg (0,03 mmol) Tetrabutyiammoniumhydrogensulfat wurde die Lösung mit einem Vibromischer eine Minute gerührt. Anschließend wurden 1,.4n (3,61 mmol) ·.;.-,' oben beschriebenen Halogenose zugegeben und weitere drei Minuten gemischt. Danach wurden die Phasen getre nt. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit jeweils 25ml Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phast-T wurden über Natriumsulfat getrocknet. Das Filti at wurde zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde an Kieselgel (Säule 5 x 5cm, Chloroform) Chromatographie«. Isolierung des Materials der Hauptfraktion und Kristallisation aus Ethanol erpab 1,04g (63%) Produkt. Schmelzpunkt: 1180C.500mg (3.26mmol) of 4-chloro-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine was dissolved in 20ml of dichloromethane. 9 ml of 50% aqueous sodium hydroxide solution was added. After adding 10 mg (0.03 mmol) of tetrabutylammonium hydrogensulfate, the solution was stirred with a vibromixer for one minute. Next, 1 .4n (3.61 mmol) of the above-described halogenose was added and mixed for a further three minutes. Thereafter, the phases were found. The aqueous phase was extracted twice with 25 ml of dichloromethane each time. The combined organic Phast-T were dried over sodium sulfate. The filter was evaporated to dryness. The residue was chromatographed on silica gel (column 5 × 5 cm, chloroform). Isolation of main fraction material and crystallization from ethanol erpab 1.04g (63%) product. Melting point: 118 ° C.
'H-NMR (DMSO-de): δ = 2,37,2,40 (s, 2CH3); 2,77 (m, 2'-H„); 3,18 (m, 2'-Ha); 4,60 (m, 4'-H und 5'-H); 5,77 (m, 3'-H); 6,75 (d,ο = 3,7Hz, 5-H); 6,78 (m, V-H); 7,34,7,91 (m, 8 aromat. H und β-Η); 8,65 (s, 2-H).'H-NMR (DMSO-de): δ = 2.37, 2.40 (s, 2CH 3 ); 2.77 (m, 2'-H "); 3.18 (m, 2'-Ha); 4.60 (m, 4'-H and 5'-H); 5.77 (m, 3'-H); 6.75 (d, ο = 3.7Hz, 5-H); 6.78 (m, VH); 7, 34, 7, 91 (m, 8 aromatic, H and β-Η); 8.65 (s, 2-H).
b) 4-Chlor-7-(2'-desoxy-9-ß-D-erythro-pentof uranosyl)-7 H-pyrrolo[2,: J]pyrimidlnb) 4-Chloro-7- (2'-deoxy-9-.beta.-D-erythro-pentofuranosyl) -7H-pyrrolo [2 ,: J] pyrimidine
2,4 g (4,7mmol) derVerbindung aus Beispiel 24a) wurden in 10OmI mit Ammoniak gesättigtem Methanol für 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde zur Trockne eingeengt, der Rückstand an Kieselgel 6OHMOg) adsorbiert und auf einu Kieselgelsäule (4 x 10cm, Chloroform/Methanol, 95:5) aufgegeben. Aus der Hauptfraktion wurde das Produkt als eine farblose feste Substanz isoliert, die aus Ethylacetat in farbloser Nadeln kristallisierte. Ausbeute: 1,07g (84%). Schmelzpunkt 162°C. C C (Chloroform/Methanol, 9:1): Rf = 0,v.2.4 g (4.7 mmol) of the compound from Example 24a) were stirred in 10 μl of ammonia-saturated methanol for 24 hours at room temperature. The solution was concentrated to dryness, the residue was adsorbed on silica gel 6OHMOg) and applied to a silica gel column (4 × 10 cm, chloroform / methanol, 95: 5). From the main fraction, the product was isolated as a colorless solid which crystallized from ethyl acetate in colorless needles. Yield: 1.07 g (84%). Melting point 162 ° C. CC (chloroform / methanol, 9: 1): R f = 0, v.
UV (ΜβΟΗ):λη,,χ = 273nm (löge = 3,69). 1H-NMH (DMSO-de): δ = 2,28 (m, 2'-Hb); 2,58 (m, 2'-Ha); 3,57 (m, 5'-H); 3,87 (m, 4'-H); 4,40 (m, 3'-H); 5,00 (t, J = 5,4Hz, 5'-OH), 5,35 (d, J = 4,2Hz, 3'-OH); 6,66 (m, Γ-Η); 6,72 (d, J = 3,8Hz, 5-H); 7,99 (d, J = 3,8Hz,6-H);8,66(s,2-H).UV (ΜβΟΗ): λη ,, χ = 273nm (Löge = 3.69). 1 H-NMH (DMSO-d e ): δ = 2.28 (m, 2'-Hb); 2.58 (m, 2'-Ha); 3.57 (m, 5'-H); 3.87 (m, 4'-H); 4.40 (m, 3'-H); 5.00 (t, J = 5.4Hz, 5'-OH), 5.35 (d, J = 4.2Hz, 3'-OH); 6.66 (m, Γ-Η); 6.72 (d, J = 3.8Hz, 5-H); 7.99 (d, J = 3.8Hz, 6-H); 8.66 (s, 2-H).
c) 4-Chlor-7-(2'-deoxy-ß-D-orythro-pentofuranosyl-5'-0-(4,4'-dimethoxytrltyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrlmidlnc) 4-Chloro-7- (2'-deoxy-β-D-orythro-pentofuranosyl-5'-O- (4,4'-dimethoxytrltyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimididine
1 g (3,7 mmol) der Verbindung aus Beispiel 24 b) wurden durch Einengen mit 10 ml trockenem Pyridin getrocknet. Das Material wurde in trockenem Pyridin (20ml) gelöst. 2rr (11,7mmol) Hünigs Base und 2g (5,9mmol) 4,4'-Dimethoxytrity!chlorid wurden zugegeben. Die Lösung wurde drei St jnden lang bei Raumtemperat tr gerührt. Nach Zugabe von 80 ml 5%iger wäßrigor Natriumcarbonatlösung wurde die Lösung mit 3 x 100ml Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet. Nach Abfiltrieren wurde das Filtrat im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde säulenchromatographisch gereinigt (Kieselgel, Elutionsmittel Dichlormethan und Dichlormethan/Ethylacetat, 9:1). Isolierung des Materials der Hauptfraktion, Lösen in Ether und Fällen mit Petrolether ergab 1,66g (78%) gelbliche amorphe Substanz.1 g (3.7 mmol) of the compound from Example 24 b) were dried by concentration with 10 ml of dry pyridine. The material was dissolved in dry pyridine (20 ml). 2rr (11.7 mmol) Hünigs base and 2g (5.9 mmol) 4,4'-dimethoxytrityl chloride were added. The solution was stirred at room temperature for three hours. After addition of 80 ml of 5% strength aqueous sodium carbonate solution, the solution was extracted with 3 × 100 ml of dichloromethane. The combined organic phases were dried over sodium sulfate. After filtration, the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by column chromatography (silica gel, eluent dichloromethane and dichloromethane / ethyl acetate, 9: 1). Isolation of the major fraction material, dissolution in ether and petroleum ether cases gave 1.66 g (78%) of yellowish amorphous substance.
C32H30N3O5CI (572,1) Ber. C 67,19 H 5,29 Cl 6,20 N 7,35% Gef. C 67,03 H 5,47 Cl 6,19 N 7,29%C 32 H 30 N 3 O 5 Cl (572.1) Ber. C 67.19 H 5.29 Cl 6.20 N 7.35% Gef. C 67.03 H 5.47 Cl 6.19 N 7.29%
DC (CH2CI2/Aceton, 9:1): R, = 0,3.TLC (CH 2 Cl 2 / acetone, 9: 1): R, = 0.3.
UV (MeOH): A011x = 274nm (logle] = 3,85).UV (MeOH): A 011x = 274nm (logle] = 3.85).
1H-NMR (DMS0-de): δ = 2,36 (m, 2'-Hb); 2,70 (m, 2'-H1); 3,72 (s. OCH3); 3,18 (d, J = 4,5Hz, 5'-H); 3,99 (m, 4'-H); 4,45 (m, 3'-H), 5,42 (d, J = 4,6Hz, 3'-OH); 6,65 (m, 1'-H); 6,69 (d, J = 3,7Hz, 5-H); 7,81 (d, J = 3,7Hz, 6-H), 8,64 (s, 2-H). 1 H-NMR (DMS0-d s): δ = 2.36 (m, 2'-H b); 2.70 (m, 2'-H 1 ); 3.72 (see OCH 3 ); 3.18 (d, J = 4.5Hz, 5'-H); 3.99 (m, 4'-H); 4.45 (m, 3'-H), 5.42 (d, J = 4.6Hz, 3'-OH); 6.65 (m, 1'-H); 6.69 (d, J = 3.7Hz, 5-H); 7.81 (d, J = 3.7Hz, 6-H), 8.64 (s, 2-H).
d) 4-Chlor-7(2'-desoxy-ß-D-erythro-pentofuranosyl)-5'-0-(4,4'-dimethoxytrityl)-3'-0-phenoxythlocarbonyl-7H-pyrrolo[2,3-d-]-pyrimidind) 4-Chloro-7 (2'-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytrityl) -3'-O-phenoxythocarbonyl-7H-pyrrolo [2,3 -d -] - pyrimidine
1 g (1,7 mmol) derVerbindung aus Beispiel 24c) wurden in 30ml trockenem Acetonitril gelöst. 500 mg (4,1 mmol) 4-Dimethylaminopyridin und 400μΙ (2,9mmol) Phenylchlorothiocarbonat wurden zugegeben und die Lösung wurde bei Raumtemperatur 16 Stunden lang gerührt. Anschließend wurde die Reaktionsmischung im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand auf eine Kieselgelsäule (3 χ 15cm, Dichlormethan) aufgegeben. Aus der Hauptfraktion wurden 950mg (76%) farbloses amorphes Produkt isoliert.1 g (1.7 mmol) of the compound of Example 24c) was dissolved in 30 ml of dry acetonitrile. 500 mg (4.1 mmol) of 4-dimethylaminopyridine and 400 μΙ (2.9 mmol) of phenyl chlorothiocarbonate were added and the solution was stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture was then concentrated to dryness in vacuo and the residue was applied to a silica gel column (3 × 15 cm, dichloromethane). From the main fraction 950 mg (76%) of colorless amorphous product were isolated.
C39H34CIN3O6S (708,2) Ber. C 66,14 H 4,84 Cl 5,01 N 5,93 S 4,53 Gef. C 66,22 H 4,9' Cl 5,12 N 5,93 S 4,46C 39 H 34 CIN 3 O 6 S (708.2) Ber. C 66.14 H 4.84 Cl 5.01 N 5.93 S 4.53 Gef. C 66.22 H 4.9 'Cl 5.12 N 5.93 S 4.46
DC (CH2C!2/Aceton 95:5) R, = 0,8.TLC (CH 2 C! 2 / acetone 95: 5) R, = 0.8.
UV (MeOH): Amjx = 274 nm (log[e) = 3,87).UV (MeOH): A mjx = 274 nm (log [e] = 3.87).
1H-NMR (DMSO-de): δ = 2,84 (m, 2'-Hb); 3,21 (m, 2'-H1); 3,37 (m, 5'-H); 4,46 (in, 4'-H); 5,92 (m, 3'-H); 6,70 (m, 1'-H); 6,76 (d, J = 3,8Hz, 5-H); 7,85 (d, J = 3,8Hz, 6-H); 8,61 (s, 2-H). 1 H-NMR (DMSO-d e ): δ = 2.84 (m, 2'- Hb ); 3.21 (m, 2'-H 1 ); 3.37 (m, 5'-H); 4.46 (in, 4'-H); 5.92 (m, 3'-H); 6.70 (m, 1'-H); 6.76 (d, J = 3.8Hz, 5-H); 7.85 (d, J = 3.8Hz, 6-H); 8.61 (s, 2-H).
e) 4-Chloro-7-(2',3'-didesoxy-p-D-glycero-pentofuranosyl)-5'-0-(4,4'-dimethoxytitryl)-7H-pyirolo[2,3-d]pyrimidine) 4-chloro-7- (2 ', 3'-dideoxy-p-D-glycero-pentofuranosyl) -5'-O- (4,4'-dimethoxytitryl) -7H-pyirolo [2,3-d] pyrimidine
800mg (1,1 mmol) derVerbindung aus Beispiel 24d) und40mg (0,2mmoi) 2,2'-Azobis(2-mothyl)propionitril wurden in 40ml trockenem Toluol unter Argonatmosphäre gelöst. 600μI (2,2mmol) Tri-n-butylstannan wurden unter Rühren zugegeben und die Reaktion wurde fortgesetzt bei 750C für zwei Stunden. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde an Kieselgel (Säule 15 x 3cm, Dichlormethan/Ethylacetat 95:5) chromatographiert. Aus der Hauptfraktion erhielt man 470mg (75%) des Produktes.800 mg (1.1 mmol) of the compound of Example 24d) and 40 mg (0.2 mmol) of 2,2'-azobis (2-mothyl) propionitrile were dissolved in 40 ml of dry toluene under argon atmosphere. 600μI (2.2 mmol) of tri-n-butyl stannane was added with stirring and the reaction was continued at 75 0 C for two hours. The solvent was removed in vacuo and the residue was chromatographed on silica gel (column 15 x 3 cm, dichloromethane / ethyl acetate 95: 5). From the main fraction, 470 mg (75%) of the product were obtained.
C32H30CIN3O4 (556,1) Ber. C 69,12 H 5,44 Cl 6,38 N 7,56% Gef. C 69,07 H 5,53 Cl 6,33 N 7,58%C 32 H 30 CIN 3 O 4 (556.1) Ber. C 69.12 H 5.44 Cl 6.38 N 7.56% Gef. C 69.07 H 5.53 Cl 6.33 N 7.58%
DC (CH2CI2/Aceton 95:5): R; = 0/.TLC (CH 2 Cl 2 / acetone 95: 5): R ; = 0 /.
UV (MeOH): Xm„ = 273 nm (logU] = 3,78).UV (MeOH): X m "= 273 nm (logU) = 3.78).
1H-NMR(DMSO-de): δ = 2,08(m,3'-H); 2,10(m,2'-H„); 2,43(m,2'-H1); 3,11 (d, J = 4,4Hz,5'-H), 3,71 (s,OCH3); 4,27 (m,4'-H); 6,55 (dd, J = 3,6 und 6,SHz, 1'-H); 6,64 (d, J = 3,7Hz, 5-H); 7,83 (d, J = 3,7Hz, 6-H); 8,67 (s, 2-H). 1 H-NMR (DMSO-de): δ = 2.08 (m, 3'-H); 2.10 (m, 2'-H "); 2.43 (m, 2'-H 1 ); 3.11 (d, J = 4.4Hz, 5'-H), 3.71 (s, OCH 3 ); 4.27 (m, 4'-H); 6.55 (dd, J = 3.6 and 6, SHz, 1'-H); 6.64 (d, J = 3.7Hz, 5-H); 7.83 (d, J = 3.7Hz, 6-H); 8.67 (s, 2-H).
f) 4-Chlor-7-(2',3'-diaesoxy-ß-D-glycero-pentofuranosyl-7H-pyrrolo[2,3-d]-pyrimidinf) 4-Chloro-7- (2 ', 3'-diaesoxy-β-D-glycero-pentofuranosyl-7H-pyrrolo [2,3-d] -pyrimidine
400 mg (0,7 mmol) derVerbindung aus Beispiel 24 e) wurden in 15 ml 80%iger wäßriger Essigsäure gelöst und bei Raumtemperatur für 30 Minuten gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und Spuren von Essigsäure durch Einengen mit Wasser entfernt. Der Rückstand wurde säulenchromatographisch (Dichlormethan und Dichlormethan/ Methanol, 98:2) gereinigt. Aus der Hauptfraktion wurden 120mg (67%) Produkt nach Kristallisation aus Ethylacetat als farblose Nadeln erhellen. Schmelzpunkt 9O0C.400 mg (0.7 mmol) of the compound from Example 24e) were dissolved in 15 ml of 80% aqueous acetic acid and stirred at room temperature for 30 minutes. The solvent was removed in vacuo and traces of acetic acid removed by concentration with water. The residue was purified by column chromatography (dichloromethane and dichloromethane / methanol, 98: 2). From the main fraction, 120 mg (67%) of product was crystallized from ethyl acetate as colorless needles after crystallization. Melting point 9O 0 C.
C11H12CIN3O2 (253,7) Ber. C52.08 H4,77 CI13.98 N 16,56 Gef. C 52,20 H 4,81 Cl 14,04 N 16,54C 11 H 12 CIN 3 O 2 (253.7) Ber. C52.08 H4,77 CI13.98 N 16,56 Gef. C 52,20 H 4,81 Cl 14,04 N 16,54
DC (CH2CI2/Me0H 95:5): R, = 0,5TLC (CH 2 Cl 2 / MeOH 95: 5): R, = 0.5
UV (MeOH): Kn^ = 274nm (logle] = 3,65).UV (MeOH): K n ^ = 274nm (logle] = 3.65).
1H-NMR(DMSO^0)IO = 2,04 (m, 3'-H); 2,28 im, 2'-Hb); 2,46 (m, 2'-H1); 3,57 (m, 5'-H); 4,11 (m, 4'-H); 4,95 (t, J = 5,5Hz, 5'-OH); 6,52 (dd, J = 3,8 und 6.9Hz. 1'-H): 6,69 (d, J = 3,8Hz, 5-H); 8,01 (d, J = 3,8Hz, 6-H); 8,64 (s, 2-H). 1 H-NMR (DMSO ^ O ) IO = 2.04 (m, 3'-H); 2.28 in, 2'- Hb ); 2.46 (m, 2'-H 1 ); 3.57 (m, 5'-H); 4.11 (m, 4'-H); 4.95 (t, J = 5.5Hz, 5'-OH); 6.52 (dd, J = 3.8 and 6.9Hz, 1'-H): 6.69 (d, J = 3.8Hz, 5-H); 8.01 (d, J = 3.8Hz, 6-H); 8.64 (s, 2-H).
g) 7-(2',3'-Didesoxy-ß-D-gycero-pentofuranoiyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]-pyrlmldlneg) 7- (2 ', 3'-Dideoxy-β-D-gero-pentofuranoiyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrrole
Eine Lösung von 200mg (0,8mmol) der Verbindung aus Beispiel 24f) wurden in 20ml Methanol, welchem 0,5ml (6,6mmol) konzentriert wäßriger Ammoniak zugesetzt worden waren, wurde mit Palladium auf Tierkohle (40 mg, 10% Pd) in einer We* <arstoffatmosphäre bei Raumtemperatur für drei Stunden gerührt. Der Katalysator wurde abfiltriert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in Wasser gelöst und auf einer Amberlite XAD-4-Säule (1. Elutionsmittel Wasser, 2. Elutionsmittel Wasser/Methanol [8:2]) chromatographiert. Isolierung des Materials der Hauptzone ergab 130mg (75%) des farblosen Produkts in Nadeln. Schmelzpunkt 1310C. CnH13O2N3 (219,2) Ber. C 60,26 H 5,98 N 19,17% Gef. C 60,19 H 5,97 N 19,18%A solution of 200 mg (0.8 mmol) of the compound from Example 24f) was added to 20 ml of methanol, to which 0.5 ml (6.6 mmol) of aqueous ammonia had been added, with palladium on animal charcoal (40 mg, 10% Pd) in a white matter atmosphere at room temperature for three hours. The catalyst was filtered off and the solvent removed in vacuo. The residue was dissolved in water and chromatographed on an Amberlite XAD-4 column (1st eluent water, 2nd eluent water / methanol [8: 2]). Isolation of the main zone material yielded 130 mg (75%) of the colorless product in needles. Mp 131 0 C. C n H 13 O 2 N 3 (219.2) Calcd. C 60.26 H 5.98 N 19.17% Gef. C 60.19 H 5.97 N 19.18%
'H-NMR(DMSO-d„):ö = 2,06 (m, 3'-H); 2,27 (m,2'-Hb); 2,42 (m, 2'-Ho); 3,55 (m, 5'-H); 4,09 (m, 4'-H); 4,93 (t, J = 5,5Hz, 5'-OH);6,54 (dd,J =4,3 und 6,9Hz,1'-H); 6,67 (d,J = 3,7Hz,5-H); 7,86 (d,J = 3,7Hz, 6-H); 8,79 (s,4-H); 9,01 (s,2-H).'H NMR (DMSO-d'): δ = 2.06 (m, 3'-H); 2.27 (m, 2'- Hb ); 2.42 (m, 2'-Ho); 3.55 (m, 5'-H); 4.09 (m, 4'-H); 4.93 (t, J = 5.5Hz, 5'-OH); 6.54 (dd, J = 4.3 and 6.9Hz, 1'-H); 6.67 (d, J = 3.7Hz, 5-H); 7.86 (d, J = 3.7Hz, 6-H); 8.79 (s, 4-H); 9.01 (s, 2-H).
h) 4-Amlno-7-(2',3'-didesoxy-ß-D-fllycero-pentofuranosyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimldin(2',3'-dideoxytubercldin)200 mg (0,8mmol) der Verbindung aus Beispiel 24f) wurden in 60ml 25%igem wäßrigen Ammoniak 15 Stunden lang oei 1000C unter Druck in einer Stahlbombe gerührt. Anschließend wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand in 200 ml Wasser gelöst. Diese Lösung wurde an Dowex 1x2 (Ohr-Form) gereinigt. Die Säule wurde mit Wasser gewaschen und das Produkt mit Wasser/Methanol (9:1) elüert. Aus der Hau ptzone wurden 120 mg (65%) Produkt gewonnen. DC (CH2CI2/Me0H 9:1): R, = 0,3h) 4-Amino-7- (2 ', 3'-dideoxy-β-D-flipercero-pentofuranosyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (2', 3'-dideoxytubercidin) 200 mg (0 , 8 mmol) of the compound from Example 24f) were stirred in 60 ml of 25% aqueous ammonia for 15 hours or 100 0 C under pressure in a steel bomb. Then the solvent was removed in vacuo and the residue was dissolved in 200 ml of water. This solution was purified on Dowex 1x2 (ear-shaped). The column was washed with water and the product was eluted with water / methanol (9: 1). From the home zone, 120 mg (65%) product was recovered. TLC (CH 2 Cl 2 / MeOH 9: 1): R, = 0.3
1H-NMR (DMSO-de): δ = 2,03 (m, 3'-H); 2,22 (m, 2'-H1); 2,33 (m, 2'-Hb); 3,53 (m, 5'-H); 4,04 (m, 4'-H); 4,99 (m, 5'-OH); 6,35 (m, V-H); 6,51 (d, J - 3,6Hz, 5-H); 7,00 (s, NH2); 7,34 (,J = 3,6Hz, 6-H); 8,04 (s, 2-H). 1 H-NMR (DMSO-de): δ = 2.03 (m, 3'-H); 2.22 (m, 2'-H 1 ); 2.33 (m, 2'- Hb ); 3.53 (m, 5'-H); 4.04 (m, 4'-H); 4.99 (m, 5'-OH); 6.35 (m, VH); 6.51 (d, J - 3.6Hz, 5-H); 7.00 (s, NH 2 ); 7.34 (, J = 3.6Hz, 6-H); 8.04 (s, 2-H).
i) 7-(2',3'-didesoxy-ß-D-glycero-pentofurano8yl)-4-methoxy-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin170mg (0,7 mmol) der Verbindung aus Beispiel 24f) wurden in 5ml 1M methanolischer Methanolatlösung gelöst und bei Raumtemperatur vier Stunden gerührt. Die Lösung wurde mit 80%iger Essigsäure neutralisiert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde auf eine Kieselgelsäule (Elutionsmittel Dichlormethan/Methanol, 98:2) aufgegeben. Isolieren der Hauptzone ergab ein farbloses Öl, welches bei Lagerung in Nadeln kristallisierte. Ausbeute: 130mg (78%)i) 7- (2 ', 3'-dideoxy-β-D-glycero-pentofurano-8-yl) -4-methoxy-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine 170 mg (0.7 mmol) of the compound from Example 24f) dissolved in 5 ml of 1M methanolic methanolate solution and stirred at room temperature for four hours. The solution was neutralized with 80% acetic acid, concentrated in vacuo and the residue was applied to a silica gel column (eluent dichloromethane / methanol, 98: 2). Isolation of the major zone yielded a colorless oil which crystallized upon storage in needles. Yield: 130mg (78%)
j) 7-(2',3'-Dldesoxy-ß-D-grycero-pentofuranosyl)-4H-pyrrolo[2,3-dlpyrimidin-4-on200 mg (0,8 mmol) der Verbindung aus Beispiel 24f) wurden in 10ml 2 N Natronlauge suspendiert und fünf Stunden unter Rückfluß zum Sieden erhitzt. Die Lösung wurde mit 80%iger Essigsäure neutralisiert und das unlösliche Material durch Filtration entfernt. Das Filtrat wurde auf eine Amberlite XAD-4-Säule aufgegeben. Die Säule wurde mit 500 ml Wasser gewaschen und das Produkt mit Wasser/2-Propanol (9:1) eluiert. Man erhielt 180mg (80%) Produkt.j) 7- (2 ', 3'-Dldesoxy-.beta.-D-Grycero-pentofuranosyl) -4 H -pyrrolo [2,3-dl-pyrimidin-4-one 200 mg (0.8 mmol) of the compound from Example 24f) was added in 10 ml of 2N sodium hydroxide solution and heated to boiling for five hours under reflux. The solution was neutralized with 80% acetic acid and the insoluble material removed by filtration. The filtrate was applied to an Amberlite XAD-4 column. The column was washed with 500 ml of water and the product was eluted with water / 2-propanol (9: 1). This gave 180 mg (80%) of product.
1-(2',3'-didesoxy-ß-D-glycero-pentafuranosyl)-1H-pyrezolo[3,4-d]pyrimldin-4-on1- (2 ', 3'-dideoxy-.beta.-D-glycero-pentafuranosyl) -1H-pyrezolo [3,4-d] pyrimldin-4-one
Schmp. 1710CM.p. 171 0 C
13C-NMR ([D6I-DMSO): δ = 135,2 (C-8), 106,1 (C-5), 107,3 (C-6), 148,4 (C-2), 152,3 (C-4), 84,6 (C-V), 30,7 (C-2'), 27,3 (C-31), 82,2(C-4'),64,2(C-5f). 13 C-NMR ([D 6 I-DMSO]: δ = 135.2 (C-8), 106.1 (C-5), 107.3 (C-6), 148.4 (C-2) , 152.3 (C-4), 84.6 (CV), 30.7 (C-2 '), 27.3 (C-3 1 ), 82.2 (C-4'), 64.2 (C- 5f ).
1N-NMR(ID6I-DMSO): δ = 2,13 (m, 3'-H), 2,40 (m, 2'-H), 3,40 (m, 5'-H), 4,09 (m, 4'-H) 4,73 (m, 5'OH), 6,43 (m, V-H), 8,11 (s, 3-H), 1 N-NMR (ID 6 I-DMSO): δ = 2.13 (m, 3'-H), 2.40 (m, 2'-H), 3.40 (m, 5'-H), 4.09 (m, 4'-H) 4.73 (m, 5'OH), 6.43 (m, VH), 8.11 (s, 3-H),
Beispiel 26 2-Amlno-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin-6-on-5'-triphosphatExample 26 2-Amino-7-deaza-2 ', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purin-6-one 5'-triphosphate
C11H14N4O12P3Na3 (556,2) Ber. P: 16,7 Gef. P: 16,4C 11 H 14 N 4 O 12 P 3 Na 3 (556.2) Calcd. P: 16.7 Gef. P: 16.4
31P-NMR (D2O): δ = -8,35 (d, P-v.), -10,0 (d, P-a), -21,5 (t, P-ß) 31 P-NMR (D 2 O): δ = -8.35 (d, Pv), -10.0 (d, Pa), -21.5 (t, P-β)
Beispiel 27 2-Amino-3,7-didesaze-2'-desoxy-9-ßD-ribofuranosyl-purln-e-on-5'-triphosphatExample 27 2-Amino-3,7-didecaze-2'-deoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine-e-on-5'-triphosphate
C12H16N3O13P3Na3 (555,2) Ber. P: 16,75 Gef. P: 16,5C 12 H 16 N 3 O 13 P 3 Na 3 (555.2) Calcd. P: 16.75 Gef. P: 16.5
3,7-Dldesaza-2',3'-dldesoxy-9-ß-D-rlbofuranosyl-purin-5'-trlphosphat C12H14N2O11P3Na3 (524,1) Ber. P: 17,7 Gef. P: 17,33,7-Dldesaza-2 ', 3'-dldesoxy-9-.beta.-D-ribofuranosyl-purine-5'-tri-phosphate C 12 H 14 N 2 O 11 P 3 Na 3 (524.1) Calcd. P: 17.7 Gef. P: 17.3
UY (Puffer, pH 7,0): An,,, = 224,274 nmUY (buffer, pH 7.0): A n ,,, = 224.274 nm
Sämtliche, in den Beispielen 26 bis 28 aufgeführten Triphosphate wurden durch Phosphorylierung der entsprechenden Nucleoside nach Yoshikawa (Tetrah. Lett. 50,5065 (1967]) zum 5'-Monophosphat und anschließender Überführung in das 5'-Triphosphat nach Hoard und Ott (J. Am. Chem. Soc. 87, (1965) 1785) hergestellt.All the triphosphates listed in Examples 26 to 28 were prepared by phosphorylation of the corresponding Yoshikawa nucleosides (Tetrah. Lett. 50, 5065 (1967)) to the 5'-monophosphate and subsequent conversion into the 5'-triphosphate according to Hoard and Ott (J. Chem. Soc. 87, (1965) 1785).
Die Stabilität der N-glycosidischen Bindung von 2',3'-Didesoxy-nucleosiden ist verbunden mit der antiviralen Aktivität.The stability of the N-glycosidic linkage of 2 ', 3'-dideoxy-nucleosides is associated with the antiviral activity.
Die Hydrolyse der Bindung wurde untersucht bei 25°C bei drei verschiedenen Konzentrationen an Salzsäure. Dazu wurden die Abnahme der UV-Adsorption (E,) bei 258 nm gemessen. Über die Absorptions/Zeit-Kurve wurden die Geschwindigkeitskonstanten des Hydrolyse (k) und die Halbwertszeiten (Va) anhand der Gleichung K = l/t · In (E0 - E00)/ (Et - E00) ermittelt. Da.oei ist EodieAbsorptionzurZeitt - ο und E00 die Absorption nach vollständiger Beendigung der Reaktion.The hydrolysis of the bond was examined at 25 ° C at three different concentrations of hydrochloric acid. For this purpose, the decrease in UV adsorption (E,) at 258 nm was measured. The rate-constant of the hydrolysis (k) and the half-lives (Va) were determined by the absorption / time curve from the equation K = l / t × In (E 0 -E 00 ) / (Et - E 00 ). Thus, E o is the absorption - ο and E 00 is the absorption after completion of the reaction.
Verglichen wurden 2',3'-Didesoxyadenosin (a) und 6-Amino-8-aza-7-desaza-2',3'-didesoxy-9-ß-D-ribofuranosyl-purin (b) beiCompared were 2 ', 3'-dideoxyadenosine (a) and 6-amino-8-aza-7-deaza-2', 3'-dideoxy-9-β-D-ribofuranosyl-purine (b)
1NHCI 0,1NHCI 0,01NHCI1NHCI 0.1NHCI 0.01NHCI
(a) T/2 — 1,9 min 31,5 min(a) T / 2 - 1.9 min 31.5 min
k — 0,363 mh~1 0,022 min"1 k - 0.363 mh ~ 1 0.022 min " 1
(b) τ/2 0,83 min 20,4 mir. 280 min k 0,85 min"1 0,033 min'1 0,0025 min"1 (b) τ / 2 0.83 min 20.4 me. 280 min k 0.85 min " 1 0.033 min" 1 0.0025 min " 1
Tabelle 1 zeigt, daß die erfindungsgemäße Verbindung (b) mehr als 10mal stabiler und damit antiviral wirksamer ist als (a).Table 1 shows that compound (b) according to the invention is more than 10 times more stable and thus more antivirally more effective than (a).
Claims (1)
Z eine reaktive Gruppe bedeuten
zu Verbindungen dor Formel IVR 'is an oxygen protecting group and
Z is a reactive group
to compounds of Formula IV
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DE3712280 | 1987-04-10 |
Publications (1)
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Family Applications (1)
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1988
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- 1988-04-08 DD DD31456488A patent/DD269854A5/en unknown
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ZA882446B (en) | 1988-09-29 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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RPI | Change in the person, name or address of the patentee (searches according to art. 11 and 12 extension act) | ||
ASS | Change of applicant or owner |
Owner name: ROCHE DIAGNOSTICS GMBH, MANNHEIM Effective date: 19990128 |
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IF04 | In force in the year 2004 |
Expiry date: 20080409 |