DD245585A1 - A method and apparatus for electrokinetic ultrafiltration - Google Patents

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Jochen Schneider
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Univ Halle Wittenberg
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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Apparatur zur Fraktionierung von Gemischen aus elektrisch geladenen Makromolekuelen verschiedener Groesse. The invention relates to a method and an apparatus for the fractionation of mixtures of electrically charged Makromolekuelen different sizes. Ziel der Erfindung ist es, eine Apparatur zu realisieren, die die Fraktionierung elektrisch geladener Makromolekuele aus fluessigen Gemischen, z. The aim of the invention is to realize an apparatus which fractionation of electrically charged macromolecule from liquid mixtures, z. B. die Proteinfraktionierung- und -anreicherung aus biologischen Fluessigkeiten, gestattet. B. the Proteinfraktionierung- and enrichment from biological fluids permitted. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, die Fraktionierung elektrisch geladener Molekuele mit Hilfe einer Kombination von Freier Elektrophorese und Ultrafiltration zu erreichen, wobei die Anzahl der Fraktionen und die Groesse der Molekuele zu einer jeweils angepassten Konfiguration der Apparatur fuehren sollen. The invention is based on the object to achieve the fractionation electrically charged molecules using a combination of Free electrophoresis and ultrafiltration, wherein the number of fractions and the size of the molecules should lead to a respective customized configuration of the apparatus. Das Wesen der Erfindung besteht darin, dass eine Kolonne thermostatisierbarer Kammern durch Ultrafiltrationsmembranen voneinander getrennt, von einem elektrischen Gleichstrom durchflossen wird, wobei sich die Membranen mit den Fraktionen belegen. The essence of the invention is that a column thermostatically chambers separated by ultrafiltration membranes from each other, is traversed by a direct electric current, wherein the membranes confirm to the fractions. Durch Umkehr der Polaritaet des elektrischen Feldes werden die Molekuele von den Membranen abgeloest und aus den Kammern ausgespuelt. By reversing the polarity of the electric field, the molecules are detached from the membranes and ausgespuelt from the chambers. Moegliche Einsatzgebiete der Erfindung sind die Vorfraktionierung von Enzymaktivitaeten, die Gewinnung grosser Proteinmengen fuer biotechnologische Zwecke, die Gewinnung von Enzymen als Therapeutika ua Possible areas of use of the invention, the pre-fractionation of Enzymaktivitaeten, obtaining large amounts of protein for biotechnological purposes, the recovery of enzymes as therapeutics include

Description

Hierzu 2 Seiten Zeichnungen For this purpose, 2 pages drawings

Anwendungsgebiet der Erfindung Field of the Invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Apparatur zur elektronischen Ultrafiltration von Makromolekülen und erlaubt die Fraktionierung von Makromolekülgemischen durch eine Kombination von Freier Elektrophorese und Ultrafiltration. The invention relates to a method and apparatus for electronic ultrafiltration of macromolecules and permits the fractionation of macromolecular mixtures by a combination of Free electrophoresis and ultrafiltration. Aus der Entwicklung der Biotechnologie und modernen Forschung ergibt sich in zunehmendem Maße der Bedarf an Apparaten zur leistungsfähigen Isolierung biologisch aktiver Proteine für folgende Einsatzgebiete: From the development of biotechnology and modern research, the need for equipment for efficient isolation of biologically active proteins for the following areas arises increasingly:

— Vorfraktionierung zur weiteren Hochreinigung und Charakterisierung von Enzymaktivitäten (biochem. Grundlagenforschung) - pre-fractionation for further high purification and characterization of enzyme activities (biochem basic research.)

— Gewinnung großer Proteinmengen für biotechnologische Zwecke: - obtaining large amounts of protein for biotechnological purposes:

Enzyme für die Trägerfixierung Enzymes for carrier fixation

Ectoenzymeausmikrobiellen Kulturen zum Abbau von Zellstrukturen (Zellwandabbau — Protoplastierung, Proteinbereitstellung) Ectoenzymeausmikrobiellen cultures to degrade cell structures (cell wall degradation - protoplastization, protein delivery)

Enzyme as Zellhomogenaten (z. B. pflanzliche Zellkulturen) für die Biotransformation organischer Stoffe zu Arzneimitteln Enzymefürdie Feinchemikalienbereitstellung (z. B. ausRacematen) Ausgewählte biotechnologische Einsatzgebiete: Enzymes as cell homogenates (. Eg plant cell cultures) for the biotransformation of organic substances to medicines Enzymefürdie fine chemical delivery (. Eg ausRacematen) Selected biotechnological applications:

Stärkeverarbeitung, Bauindustrie, Textilindustrie (Amylasen), Waschmittel, Käseproduktion, Lederindustrie (Proteasen), Frucht-und Gemüsesaftproduktion (Pektinasen, Amylasen), Backwarenherstellung (Amylasen, Proteasen) ua Fleischaufbereitung Starch processing, construction industry, textile industry (amylases), detergents, cheese production, leather industry (proteases), fruit and vegetable juice production (pectinases, amylases), bakery products (amylases, proteases) including meat processing

Gewinnung von Enzymen als Therapeutika, z. Production of enzymes as therapeutics, z. B. Applikation zur verbesserten Arzneinrttelresorption; B. Application for improved Arzneinrttelresorption; Kompensation der InsuffienzbestimmterOrganfunktionen; Compensating the InsuffienzbestimmterOrganfunktionen; Behandlung von Erkrankungen Vorreinigung von Proteinen für immunologische Untersuchungen (z. B. in der Differentialdiagnostik) Treatment of diseases pre-purification of proteins for immunological studies (eg. As in the differential diagnosis)

Abtrennung von Proteinen aus biotechnologischen „Abwässern", zB aus der Antibiotika-Produktion; Papierherstellung ua Separation of proteins from biotechnology "waste water", for example from antibiotic production, paper production, among others

Der Apparat ist grundsätzlich auch zur Fraktionierung anderer Makromoleküle, wie Muco-Polysaccharide und * The apparatus is basically also for the fractionation of other macromolecules, such as muco-polysaccharides and *

Nukleinsäuren geeignet. Nucleic acids suitable.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen Characteristic of the known technical solutions

Es sind verschiedene Verfahren der elektrophoretischen Trennung von Polyelektrolyten bekannt. There are various methods of electrophoretic separation of polyelectrolytes known. Dabei wird die elektrophoretische Beweglichkeit der Proteine genutzt, die von der Größe der Molekülladung sowie von der Größe und Form der einzelnen Teilchen abhängt. The electrophoretic mobility of the proteins is used which depends on the size of the molecular charge and the size and shape of the individual particles. Darüber hinaus beeinflussen auch die Eigenschaften des Trägermediums die Wanderungsgeschwindigkeit. In addition, the properties of the carrier medium influence the migration rate.

Bei der Freien Elektrophorese bewegen sich kolloidal gelöste Teilchen in der Untersuchungslösung unter elektrischer Feldwirkung. In the outdoor electrophoresis is dissolved particles move colloidal solution under investigation in the electric field effect. Dementsprechend sind die jeweils verwendeten Geräte sowie der Ablauf der elektrochemischen Vorgänge voneinander verschieden. Accordingly, the devices used in each case and the sequence of electrochemical processes are different from each other. Typische Beispiele sind Patente zur Ablenkungselektrophorese (US-PS 4.061.560, DE-PS 1.598.109, Typical examples are the patents deflection electrophoresis (U.S. Patent No. 4,061,560, DE-PS 1,598,109,

Für die Ultrafiltration von Makromolekülen stehen verschiedene kommerziell angebotene Geräte zur Verfügung, die die Abtrennung von Biopolymeren unter Druck über Filtermembranen erlauben. For the ultrafiltration of macromolecules various commercially offered devices are available that allow the separation of biopolymers under pressure through filter membranes.

Effektive Möglichkeiten zur Entsalzung von Proteinen schafft die Elektrodialyse, wobei lonenaustauschermembranen, teilweise in Kombination mit elektroneutralen Ultrafiltrationsmembranen, verwendet werden, deren Widerstände die Wirtschaftlichkeit der Kammern bestimmen. Effective ways for desalting of proteins creates the electrodialysis, ion exchange membranes which, sometimes in combination with electroneutral ultrafiltration membranes are used to determine the efficiency of the chambers whose resistances. Die bekannten technischen Lösungen erlauben lediglich eine Grobfraktionierung von großen (Proteinen) und kleinen (anorgan. Ionen) elektrischen Ladungsträgern. The known technical solutions allow only a coarse fractionation of large (proteins) and small (anorgan. Ions) electric charge carriers.

In den US-PS 2.801.962 und 3079.318 wird eine Proteinanreicherung durch dialytisch parallel geschaltete Kammern erreicht, wobei das angelegte Gleichspannungsfeld lediglich die Trennung beschleunigt. In the US-PS 2,801,962 and 3079,318 a protein enrichment is achieved by dialysis parallel chambers, wherein the applied DC field only speeds up the separation. Der Grad der Konzentration ist kontinuierlich schwer verfolgbar. The degree of concentration is continuously difficult traceable.

Es ist sehr zweifelhaft, ob die Apparatur einen kontinuierlichen Langzeitbetrieb erlaubt. It is very doubtful whether the apparatus allows a continuous long-term operation. Die verwendeten Papierfilter bzw. Dialysemembranen verstopfen sehr schnell. The paper filter or dialysis membranes used clog very quickly. In den Patenten werden keine Reinigungsmöglichkeiten beschrieben. In the patents no cleaning options are described. Die Apparaturen erlauben keine Auftrennung von Molekülen unterschiedlicher Größe. The apparatuses do not allow the separation of molecules of different sizes.

In der US-PS 3.844.926 wird ein Elektrodialysator mit rotierender Außenkammer und zahlreichen Kammern um die Mittelachse des zylindrischen Gerätes beschrieben, der Enzymmixturen entsalzt. In U.S. Patent 3,844,926 an electrodialyzer is described with a rotating outer chamber and several chambers about the central axis of the cylindrical device, the Enzymmixturen desalted.

Neuere technische Lösungen ordnen mehrere Trennkammern mit Dialysemembranen an, wobei das elektrische Feld senkrecht zum Flüssigkeitsstrom angelegt wird (US-PS 4.043.895; 4.123.342; 4.276.140; EP 0.029.540). Recent technical solutions arrange a plurality of separation chambers with dialysis membranes, wherein the electric field is applied perpendicularly to the liquid flow (U.S. Patent No. 4,043,895; 4,123,342; 4,276,140; EP 0,029,540).

Ziel der Erfindung OBJECT OF THE INVENTION

Ziel der Erfindung ist es, eine Apparatur zu realisieren, die die Fraktionierung elektrisch geladener Makromoleküle aus flüssigen Gemischen, z. The aim of the invention is to realize an apparatus which fractionation of electrically charged macromolecules from liquid mixtures, for example. B. die Proteinfraktionierung und -anreicherung aus biologischen Flüssigkeiten, gestattet. For example, the protein fractionation and enrichment from biological fluids permitted. Der Ablauf der Fraktionierung soll diskontinuierlich beliebig oft wiederholbar und automatisierungsfähig sein, so daß sowohl analytische wie biotechnologische Aufgaben erfüllt werden können. The sequence of the fractionation is to be discontinuous as often repeatable and capable of being automated so that both analytical and biotechnological tasks can be fulfilled.

Darlegung des Wesens der Erfindung Principle of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, die Fraktionierung elektrisch geladener Makromoleküle mit Hilfe einer Kombination von Freier Elektrophorese und Ultrafiltration zu erreichen, wobei die Anzahl der Fraktionen und die Größe der Moleküle zu einer jeweils angepaßten Konfiguration der Apparatur führen sollen. The invention has for its object to achieve fractionation of electrically charged macromolecules using a combination of Free electrophoresis and ultrafiltration, wherein the number of fractions and the size of the molecules to each matched configuration of the apparatus will result.

Weiterhin sollen durch geeigneten Aufbau der Apparatur und die Wahl des Regimes der äußeren Parameter eine oftmalige Wiederholung des Fraktionierungsprozesses möglich und darüber hinaus nur ein minimaler Anteil von Verschleißteilen Bestandteil der Apparatur sein. Furthermore, a frequent repetition of the fractionation are possible by appropriate setup of the apparatus and the choice of a mode of external parameters and, moreover, only a minimal amount of wear parts be part of the apparatus.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß eine Kolonne von thermostatisierten Kammern gebildet wird, deren jede durch eine auswechselbare Ultrafiltrationsmembran einseitig abgeschlossen ist. According to the invention the object is achieved in that a column is formed of thermostatic chambers, each of which is finished on one side by a removable ultrafiltration membrane. Die Ausrüstung der aneinanderzureihenden Kammern erfolgt in Anpassung an die jeweils zu fraktionierenden Moleküle mit Membranen entsprechend gestaffelter Porengröße. The equipment of concatenated, chambers is carried out in adaptation to the respectively to be fractionated molecules with membranes according staggered pore size. Je nach Aufgabenstellung (z. B. Aufkonzentrieren) werden Kammern gleicher und/oder unterschiedlicher Volumina eingesetzt. Depending on the task (z. B. Concentration) are chambers of the same and / or different volumes used. Am Anfang und am Ende der Kolonne befinden sich je eine Kammer mit einer Elektrode zur Erzeugung eines elektrischen Feldes über die gesamte Länge der Kolonne. At the beginning and at the end of the column are each a chamber having an electrode for generating an electric field over the entire length of the column.

Jede der Kammern besitzt einen separaten Zu- und Abfluß und eine separate Theromstatisierung, so daß die Kolonne aus einer variablen Anzahl von Kammern nach dem Baukastenprinzip zusammengesetzt werden kann. Each of the chambers has a separate inlet and outlet and a separate Theromstatisierung so that the column may be composed of a variable number of chambers according to the modular principle.

In Funktion werden die einzelnen Kammern im Parallelbetrieb an einen Thermostaten angeschlossen, alle Kammern außer der ersten werden mit Pufferlösung gefüllt und die erste Kammer wird mit dem zu fraktionierenden Gemisch beschickt. In operation, the individual chambers are connected to a thermostat in parallel operation, all the chambers except the first to be filled with buffer solution and the first chamber is charged with the mixture to be fractionated. Nachdem die Kolonne auf diese Weise betriebsbereit ist, wird an die Elektroden der ersten und letzten Kammer eine elektrische Gleichspannung so angelegt, daß die Makromoleküle des Gemischs in Richtung Kolonne zu wandern beginnen. After the column is ready for operation in this manner, a direct electric voltage is applied so that the macromolecules of the mixture begin to migrate in the direction of the column to the electrodes of the first and last chamber. Beim Durchlaufen der Kolonne treffen die Moleküle auf das nach abnehmender Porengröße gestaffelte System der Ultrafiltrationsmembranen und belegen diese als Fraktion in der Reihenfolge abnehmender Molekülgrößen. When passing through the column, the molecules strike the staggered order of decreasing pore size of the ultrafiltration membranes system and confirm this as a fraction in the order of decreasing molecular size.

Die Folgekammern nach der Primärkammer können durch kontinuierliche Beschickung der Primärkammer bis auf ein optimales Maß mit Fraktionen gefüllt werden, dabei tritt die aus der Drucktechnik bekannte Konzentrationspolarisation nicht auf. The result chambers after the primary chamber can be reduced to an optimal level filled with fractions by continuous feeding of the primary chamber, while the well-known from printing technology concentration polarization does not occur.

Wenn im zu fraktionierenden Gemisch Salzionen enthalten sind, wandern diese je nach Polarität im Sinne der Elektrodialyse in die Endkammer und können dort gegebenenfalls kontinuierlich oder zyklisch ausgespült werden. in the mixture to be fractionated if the salt ions are contained, they migrate depending on the polarity in the sense of electrodialysis in the header and can be continuously or periodically flushed out there, if necessary. Weiterhin entstehen in der Primärkammer und in der Endkammer Elektrolysegase, für deren Abtransport bei der konstruktiven Lösung gesorgt werden muß (im Ausführungsbeispiel nicht dargestellt). Continue to emerge in the primary chamber and in the end chamber electrolysis gases, provision must be made for their removal at the constructive solution (in the embodiment not shown).

Wenn die Fraktionierung vollständig stattgefunden hat, was am Erreichen eines Sättigungswertes der Elektrodenspannung bei Konstantstrombetrieb bzw. des Elektrodenstromes bei Konstantleistungsbetrieb oder an der Einstellung eines spezifischen Potentialverlaufs innerhalb einzelner Kammern erkennbar ist, werden die Kammer entleert, wobei auch durch Umpolung des elektrischen Feldes die fraktionierten Moleküle von den Membranen abgelöst werden können. If the fractionation has fully taken place, as can be seen from reaching a saturation value of the electrode voltage in constant current mode and the electrode current during constant power operation or the setting of a specific potential profile within individual compartments, to be emptied, it also being possible by reversing the polarity of the electric field the fractionated molecules can be removed from the membranes.

Danach kann der geschilderte Vorgang von vorn beginnen. After that, the described process can start over. Gegebenenfalls läßt sich der gesamte periodische Ablauf automatisieren. If necessary, the entire periodic sequence can be automated.

Für die kontrollierende Messung der elektrischen Potentiale der Kolonne ist jede einzelne Kammer mit einer Meßelektrode ausgerüstet. For controlling the measurement of electric potentials of the column each individual chamber is equipped with a measuring electrode.

- Ausführungsbeispiel - Embodiment

Die Erfindung soll nachstehend an einem Ausführungsbeispiel näher erläutert werden. The invention will be explained in more detail below using an embodiment.

Figur 1 zeigt die Kolonne für die fraktionierende elektrokinetische Ultrafiltration schematisch. Figure 1 shows the column for the fractional electrokinetic ultrafiltration schematically. Die einzelnen Kammern sind durch Ultrafiltrationsmembranen 1 gestaffelter Porengröße getrennt. The individual chambers are separated by ultrafiltration membranes 1 graded pore size. Jede der Kammern stellt ein zylindrisches Doppelmantelgefäß dar. Zwischen äußerer Wandung 2 und innerer Wandung 3 befindet sich das Volumen mit Zu-und Abflußstutzen für den Durchlauf der Thermostat-Flüssigkeit, wobei alle Kammern parallel geschaltet sind. Each of the chambers is a cylindrical jacketed vessel. Between the outer wall 2 and inner wall 3 is the volume of inflow and outflow connection piece for the passage of the thermostatic liquid, said all chambers are connected in parallel.

Alle Kammern besitzen weiterhin einen Zu- und Abflußstutzen zum Innenraum, wobei der Kammer A mit dem zu fraktionierenden Primär-Gemisch, die Kammern B und C mit Pufferlösung gefüllt werden. All chambers have a further inlet and outlet port for the interior, wherein the chamber A with the primary to be fractionated mixture, the chambers B and C are filled with buffer solution. Nach Beendigung der Fraktionierung verlassen die Kammer A ein sekundäres, dh das um die Fraktion reduzierte Primärgemisch, die Kammern B die Fraktionen 1,2, ... η und die Kammer C ein Rest-Gemisch von Puffer und Molekülen, die alle Membranen durchlaufen haben. After completion of the fractionation, the chamber A leave a secondary, that is, have the reduced to the fraction of primary mixture, the chambers B, the fractions 1.2, η ... and the chamber C, a residual mixture of buffer and molecules pass through all membranes , Die Kammern A und C sind mit inerten Elektroden 4 geeigneter geometrischer Gestalt für das Anlegen eines möglichst homogenen elektrischen Feldes an die Kolonne ausgerüstet. The chambers A and C are equipped with inert electrodes 4 a suitable geometric shape for creating a homogenous electric field to the column. Die Kammern B besitzen je eine Elektrode 5 für die Messung des elektrischen Kammerpotentials. The chambers B each have an electrode 5 for measurement of the electrical potential chamber.

Figur 2 zeigt die Kammern A, B und C im Schnitt. Figure 2 shows the chambers A, B and C in section. Die Verbindung der Kammern untereinander geschieht durch Schraubengewinde und zwischengelegte Dichtringe 6. Die Ultrafiltrationsmembranen 1 werden durch Schraubenringe 7 auf die Dichtfläche des Kammeroberteils 8 gepreßt und sind somit leicht auswechselbar. The connection of the chambers to one another is effected by screw thread and interposed sealing rings 6. The ultrafiltration membranes 1 are pressed by screws rings 7 on the sealing surface of the upper chamber part 8 and thus are easily replaceable.

Claims (14)

  1. Patentansprüche: claims:
    1. Verfahren zur elektrokinetischen Ultrafiltration von Makromolekülen durch Kombinaten von Freier Elektrophorese und Ultrafiltration, gekennzeichnet dadurch, daß ein Molekülgemisch beim durch ein elektrisches Gleichfeld bewirkten Durchgang durch ein System von Ultrafiltrationsmembranen gestaffelter Porengröße in Fraktionen getrennt wird. 1. A method for electrokinetic ultrafiltration of macromolecules by Kombinate of Free electrophoresis and ultrafiltration, characterized in that a mixture of molecules when caused by a DC electric field by passage through a system of ultrafiltration membranes staggered pore size is separated into fractions.
  2. 2. Verfahren nach Anspruch 1, gekennzeichnet dadurch, daß für die Durchführung der Fraktionierung eine Primär-Kammer (A) mit dem Molekülgemisch und die Kammern (B) und (C) mit Pufferlösung gefüllt werden. 2. The method according to claim 1, characterized in that a primary chamber for carrying out the fractionation of (A) with the mixture of molecules and the chambers (B) and (C) are filled with buffer solution.
  3. 3. Verfahren nach den Ansprüchen 1 und 2, gekennzeichnet dadurch, daß alle Kammern im Parallelbetrieb an einen Thermostaten angeschlossen werden. 3. The method according to claims 1 and 2, characterized in that all the chambers are connected to a thermostat in parallel.
  4. 4. Verfahren nach den Ansprüchen 2 und 3, gekennzeichnet dadurch, daß nach Füllung der Kammern an die Elektroden 4 eine elektrische Gleichspannung angelegt wird. 4. The method according to claims 2 and 3, characterized in that an electrical DC voltage is applied after filling of the chambers to the electrodes. 4
  5. 5. Verfahren nach den Ansprüchen 2 bis 4, gekennzeichnet dadurch, daß vor dem Entleeren der Kammern (B) die an den Elektroden 4 anliegende Gleichspannung kurzzeitig umgepolt wird. 5. The method according to claims 2 to 4, characterized in that before the emptying of the chambers (B) the voltage applied to the electrodes 4 DC voltage is reversed for a short time.
  6. 6. Verfahren nach den Ansprüchen 2 bis 5, gekennzeichnet dadurch, daß die Entleerung der Kammern in Abhängigkeit von der Einstellung eines spezifischen Potentialverlaufs innerhalb einzelner Kammern steuerbar ist. 6. The method according to claims 2 to 5, characterized in that the emptying of the chambers, depending on the setting of a specific potential profile is controllable within individual chambers.
  7. 7. Apparatur zur Durchführung des Verfahrens nach Anspruch 1, gekennzeichnet dadurch, daß eine variable Anzahl von thermostatisierbaren Kammern (A, B, C) durch Ulträfiltrationsmembranen (1) voneinander getrennt, hintereinander, vertikal oder horizontal eine Kolonne bildend, angeordnet sind und mit einer elektrischen Gleichspannungsquelle in Verbindung stehen. 7. Apparatus for carrying out the method according to claim 1, characterized in that a variable number of thermostatically chambers (A, B, C) by Ulträfiltrationsmembranen (1) separated from each other, one behind the other, are vertically or horizontally, a column-forming, and provided with a are electrical DC voltage source connected.
  8. 8. Apparatur nach Anspruch 7, gekennzeichnet dadurch, daß jede Kammer (A, B, C) doppelwandig ist und je einen Zu- und Abfluß für Kühlflüssigkeit und für den eigentlichen Kammerinhalt besitzt. 8. Apparatus according to claim 7, characterized in that each chamber (A, B, C) is double-walled and one each inlet and outlet for cooling liquid and chamber for the actual content has.
  9. 9. Apparatur nach Anspruch 7, gekennzeichnet dadurch, daß die Kammern (B) und (C) mit Membran (1) geeigneter Porengröße mit Hilfe geeigneter Kupplungsmechanismen ausgerüstet sind. 9. Apparatus according to claim 7, characterized in that the chambers (B) and (C) with membrane (1) suitable pore size are provided with the aid of suitable coupling mechanisms.
  10. 10. Apparatur nach Anspruch 7, gekennzeichnet dadurch, daß die Kammern (A) und (C) mit je einer Elektrode (4) geeigneter geometrischer Gestalt für das Anlegen einer möglichst homogenen Gleichspannung ausgerüstet sind. 10. Apparatus according to claim 7, characterized in that the chambers (A) and (C) with one electrode (4) a suitable geometric shape for the application of a DC voltage as homogeneous as possible are provided.
  11. 11. Apparaturnach den Ansprüchen 7 bis 9, gekennzeichnet dadurch, daß die Kammern (B) je eine in radialer Richtung durch die Kammerwände geführte Meßelektrode (5) besitzen. 11. Apparaturnach to claims 7 to 9, characterized in that the chambers (B) each have a guided in the radial direction through the chamber walls of the measuring electrode (5).
  12. 12. Apparatur nach den Ansprüchen 7 bis 11, gekennzeichnet dadurch, daß die Kolonne durch geeignete Verbindung der für die jeweils benötigte Anzahl von Einzelkammern (B) aufgebaut ist. 12. Apparatus according to claims 7 to 11, characterized in that the column is constructed by appropriate compound of for each required number of individual chambers (B).
  13. 13. Apparaturnach den Ansprüchen 7 bis 12, gekennzeichnet dadurch, daß die Kammern (B) und (C) mit Membran (1) ausgerüstet sind, die in der Kolonne nach abnehmender Porengröße angeordnet sind. 13. Apparaturnach to claims 7 to 12, characterized in that the chambers (B) and (C) with membrane (1) are fitted, which are arranged in the column in order of decreasing pore size.
  14. 14. Apparaturnach den Ansprüchen 7 bis 13, gekennzeichnet dadurch, daß die Kammern (C) zur kontinuierlichen Spülung mit Pufferlösung mit einem externen Vorratsgefäß in Verbindung steht. 14. Apparaturnach to claims 7 to 13, characterized in that the chambers (C) is connected for continuous rinsing with buffer solution to an external storage vessel.
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