DD238304A3 - PROCESS FOR INCREASING THE STORAGE STABILITY OF BLOOD WAVES AND SPERM - Google Patents
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Abstract
Verfahren zur Erhoehung der Lagerungsstabilitaet von biologischem Material zum Zwecke der Vorrathaltung. Hauptanwendungsgebiete sind die Medizin, Veterinaermedizin/Tierproduktion und Biologie. Das Ziel der Erfindung besteht darin, eine verbesserte Erhaltung der strukturellen und funktionellen Integritaet von Blutzellen und Sperma im Rahmen der hypothermen und/oder kryothermen Konservierung durch eine Erhoehung der Membranstabilitaet zu erreichen. Das Wesen der Erfindung beruht auf der Zugabe von Penicillin bzw. Penicillin-Derivaten in Konzentrationen von 0,1 bis 10,0 g/l zum Konservierungsmedium, und Zusaetzen von Eisen-II-Ionen, in Konzentrationen von 10-40 mol/l mit der das biologische Material behandelt wird. Die erreichte deutliche Steigerung des Ueberlebens von Zellen, Geweben und Organen in einem Medium mit derartigen Zusaetzen verspricht ueberall dort bedeutende oekonomische Auswirkungen, wo vitales biologisches Material zum Zwecke der Wiederverwendung zur Verfuegung stehen muss.Method for increasing the storage stability of biological material for the purpose of stockpiling. Main fields of application are medicine, veterinary medicine / animal production and biology. The object of the invention is to achieve an improved preservation of the structural and functional integrity of blood cells and sperm in the context of hypothermic and / or cryothermal preservation by an increase in membrane stability. The essence of the invention is based on the addition of penicillin or penicillin derivatives in concentrations of 0.1 to 10.0 g / l to the preservation medium, and addition of ferrous ions, in concentrations of 10-40 mol / l with the biological material is treated. The significant increase in the survival of cells, tissues, and organs in a medium containing such supplements promises significant economic effects wherever vital biological material needs to be available for reuse.
Description
Die Verträglichkeit der Verbindungen mit biologischem Material ist nachgewiesen. Die erfindungsgemäß erreichte Steigerung des Überlebens von Blutzellen und Spermien in einem Medium mit derartigen Zusätzen verspricht überall dort bedeutende ökonomische Auswirkungen, wo vitales biologisches Material zum Zwecke der Wiederverwendung zur Verfügung stehen muß, wie z. B. in Blutzeil- und Spermienbanken. Zurtechnisch-ökonomischen Auswirkung wird eingeschätzt, daß Erhöhungen der Überlebensrate von konsverviertem biologischen Material bis etwa auf das Mehrfache des Kontrollwertes auftreten können. Die Erfindung wird nachstehend an folgenden Ausführungsbeispielen erläutert:The compatibility of the compounds with biological material has been proven. The invention achieved by increasing the survival of blood cells and sperm in a medium with such additives promises significant economic impact everywhere where vital biological material must be available for the purpose of reuse, such. B. in blood cells and sperm banks. For technical-economic impact, it is estimated that increases in survival of conserved biological material may occur to about several times the control value. The invention is explained below with reference to the following exemplary embodiments:
I.BeispielI.Beispiel
Aus ACD-Vollblutkonserven wurde nach üblichen Verfahren ein Thrombozytenkonzentrat präpariert und bei 00C Dimethylsulfoxid (DMSO) als basaler Gefrierschutzstoff zugesetzt (Endkonzentration 0,7mol/l). Erfindungsgemäß erfolgte zu dieser Suspension ein Zusatz von Benzylpenicillin-Natrium in einer Konzentration von 2,0g/l und unterschiedlichen Konzentrationen von Fe (M)SO4(0,10,20 und40/imol/l). Nach einer Inkubationszeit von 30min wurden die Proben kontrolliert (Kühlrate 1 K/min) bis -196°C gefroren und bei dieser Temperatur mindestens 24 Stunden gelagert. Nach einem schnellen Wiedererwärmen/Auftauen wurden die Proben schrittweise verdünnt und zur Vitalitätstestung (Zellzahl, HSR = hypotonic shock response, Aggregation mittels ADP bzw. Kollagen) eingesetzt. Die Tab. 1 enthält die Ergebnisse der Untersuchungen und verdeutlicht den signifikanten Anstieg der Überlebensraten unter dem Einfluß der verwendeten protektiven Wirkstoffe.From ACD whole blood preserves, a platelet concentrate was prepared by conventional methods and added at 0 0 C dimethyl sulfoxide (DMSO) as a basal cryoprotectant (final concentration 0.7 mol / l). In accordance with the invention, this suspension was supplemented with benzylpenicillin sodium in a concentration of 2.0 g / l and different concentrations of Fe (M) SO 4 (0.10, 20 and 40 / g / l). After an incubation period of 30 minutes, the samples were frozen in a controlled manner (cooling rate 1 K / min) to -196 ° C and stored at this temperature for at least 24 hours. After a rapid reheating / thawing, the samples were gradually diluted and used for vitality testing (cell count, HSR = hypotonic shock response, aggregation by means of ADP or collagen). Tab. 1 contains the results of the investigations and illustrates the significant increase in survival rates under the influence of the protective agents used.
Steigerung der Überlebensraten gefrierkonservierter Thrombozytenkonzentrate unter Zusatz von Benzylpenicillin-Natrium (2g/l)und Fe(II)SO4(0,10,20υηα40μπηοΙ/Ι)ζυΓη kryoprotektiven Medium. Angaben in Prozent Steigerung gegenüber dem Kontrollwert, η = 5.Increasing the survival rates of freeze-preserved platelet concentrates with the addition of benzylpenicillin sodium (2 g / l) and Fe (II) SO 4 (0,10,20υηα40μπηοΙ / Ι) kυΓη cryoprotective medium. Figures in percent increase over the control value, η = 5.
Parameter Steigerung der Überlebensrate (%)Parameter increase in survival rate (%)
Zusatz von Fe(II)SO4 (μητιοΙ/Ι) 0 (Kontrolle) 10 20 40Addition of Fe (II) SO 4 (μητιοΙ / Ι) 0 (control) 10 20 40
112,5 123,2 108,9112.5 123.2 108.9
163,7* 166,7* 154,2*163.7 * 166.7 * 154.2 *
127,7* 181,9* 182,3*127.7 * 181.9 * 182.3 *
104,9 115,4 105,3104.9 115.4 105.3
* statistisch signifikant im Vergleich zur Kontrolle (p < 0,05)* statistically significant compared to control (p <0.05)
2. Beispiel2nd example
Bullensperma wurde unter üblichen Bedingungen gewonnen und nach TGL 22261 der Gefrierkonservierung unterzogen, wobei dem Verdünner erfindungsgemäß zusätzlich Benzylpenicillin-Natrium in einer Konzentration von 1 g/l und Fe (H)SO4 in einer Konzentration von 20μ.ιτιοΙ/Ι zugesetzt worden war. Der zur Beurteilung der Spermienvitalität verwendete Thermoresistenztest wurde unmittelbar nach dem Auftauen sowie 1,2,3 und 4 Stunden danach an den Proben durchgeführt. Die Tab. 2 stellt die Ergebnisse dar, nach denen ein signifikanter Anstieg der Spermienmotilität bei Verwendung der protektiven Wirkstoffe deutlich sichtbar wird.Bull sperm was obtained under standard conditions and subjected to the TGL 22261 cryopreservation, wherein the diluent according to the invention additionally benzylpenicillin sodium in a concentration of 1 g / l and Fe (H) SO 4 was added in a concentration of 20μ.ιτιοΙ / Ι. The thermoresistance test used to assess sperm vitality was performed immediately after thawing and 1,2,3 and 4 hours later on the samples. Table 2 presents the results showing that a significant increase in sperm motility is evident when using the protective agents.
Thermoresistenzrest zur Beurteilung der Motilitätvon Bullensperma nach Lagerung bei — 196°Cmitund ohne Zusatz von Benzylpenicillin-Natrium in einer Konzentration von 1 g/l und Fe(II)SO4 (Endkonzentration 20μηηοΙ/1) zum Standardverdünner nachTGL22261,n = 5.Thermoresistance residue for evaluation of motility of bull sperm after storage at - 196 ° C with and without addition of benzylpenicillin sodium in a concentration of 1 g / l and Fe (II) SO 4 (final concentration 20μηηοΙ / 1) to the standard diluent according to TGL22261, n = 5.
0 26 ±5 32 ±4*0 26 ± 5 32 ± 4 *
1 23 ± 7 34 ± 4*1 23 ± 7 34 ± 4 *
2 16±7 21±62 16 ± 7 21 ± 6
3 10±5 13±73 10 ± 5 13 ± 7
4 4±2 3±14 4 ± 2 3 ± 1
statistisch signifikant im Vergleich zur Kontrolle (p < 0,05)statistically significant compared to control (p <0.05)
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DD26022084A DD238304A3 (en) | 1984-01-13 | 1984-01-13 | PROCESS FOR INCREASING THE STORAGE STABILITY OF BLOOD WAVES AND SPERM |
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DD26022084A DD238304A3 (en) | 1984-01-13 | 1984-01-13 | PROCESS FOR INCREASING THE STORAGE STABILITY OF BLOOD WAVES AND SPERM |
Publications (1)
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DD238304A3 true DD238304A3 (en) | 1986-08-20 |
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ID=5554794
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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DD26022084A DD238304A3 (en) | 1984-01-13 | 1984-01-13 | PROCESS FOR INCREASING THE STORAGE STABILITY OF BLOOD WAVES AND SPERM |
Country Status (1)
Country | Link |
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DD (1) | DD238304A3 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4082339A1 (en) | 2021-04-29 | 2022-11-02 | Forschungsverbund Berlin e.V. | Agent for preserving mammalian sperm and use of the agent |
-
1984
- 1984-01-13 DD DD26022084A patent/DD238304A3/en unknown
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4082339A1 (en) | 2021-04-29 | 2022-11-02 | Forschungsverbund Berlin e.V. | Agent for preserving mammalian sperm and use of the agent |
DE102021002257A1 (en) | 2021-04-29 | 2022-11-03 | Forschungsverbund Berlin E.V. | Composition for preserving mammalian sperm and use of the composition |
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