DD211874A5 - IMPROVED SAMPLING TEST STRIP AND TEST PROCEDURE FOR OKKULTES BLOOD - Google Patents

IMPROVED SAMPLING TEST STRIP AND TEST PROCEDURE FOR OKKULTES BLOOD Download PDF

Info

Publication number
DD211874A5
DD211874A5 DD83251341A DD25134183A DD211874A5 DD 211874 A5 DD211874 A5 DD 211874A5 DD 83251341 A DD83251341 A DD 83251341A DD 25134183 A DD25134183 A DD 25134183A DD 211874 A5 DD211874 A5 DD 211874A5
Authority
DD
German Democratic Republic
Prior art keywords
acid
substrate
test
buffered
guaiac
Prior art date
Application number
DD83251341A
Other languages
German (de)
Inventor
Josefina T Baker
Paul J Lawrence
Charles W Townsley
Original Assignee
Smithkline Diagnostics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Smithkline Diagnostics Inc filed Critical Smithkline Diagnostics Inc
Publication of DD211874A5 publication Critical patent/DD211874A5/en

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721Haemoglobin
    • G01N33/726Devices

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Abstract

A method and novel absorbent substrate for determining the presence of occult blood in gastric fluid. The substrate is acid treated and contains guaiac. The method includes the addition of the gastric fluid to the acid treated guaiac substrate which is developed with a buffered developing solution. Preferably the substrate is an acid treated sheet of absorbent paper and the developing solution is an aqueous buffered solution of hydrogen peroxide.

Description

Titel der Erfindung:Title of the invention:

"Verbesserter Proben-Teststreifen und Testverfahren für okkultes Blut""Improved Sample Test Strip and Occult Blood Test Method"

Anwendungsgebiet der Erfindung;Field of application of the invention;

Die Anwendung der Erfindung erfolgt auf dem Gebiet der medizinischen Tests, insbesondere der Prüfungen zur Bestimmung von okkultem BlutThe application of the invention is in the field of medical tests, in particular the tests for the determination of occult blood

25 25

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen:Characteristic of the known technical solutions:

Proben-Teststreifen und Verfahren zum Auffinden von okkultem Blut im Stuhl sind bereits bekannt. Beispielsweise sind in der US-PS 3 996 006 Streifen beschrieben, die ein die Probe aufnehmendes Blatt zwischen einer vorderen und einer hinteren Platte aufweisen. Sie haben mindestens eine Öffnung in der vorderen Platte und eine öffnung in der hinteren Platte sowie drehbare Abdeckungen zum Verschließen dieser Öffnungen. Im Falle eines Tests für okkultes BlutSample test strips and methods for finding faecal occult blood are already known. For example, U.S. Patent 3,996,006 describes strips comprising a sample receiving sheet between a front and a back plate. They have at least one opening in the front panel and an opening in the rear panel and rotatable covers for closing these openings. In the case of an occult blood test

L -1L -1

Γ - 2 - ΠΓ - 2 - Π

im Stuhl ist das die Probe aufnehmende Blatt üblicherweise ein Papier, das mit Guajakharz imprägniert oder beschichtet ist. Sine Entwicklerlösung, beispielsweise eine Peroxidlösung, wird durch die Öffnung in der hinteren Platte zugeführt. Ein solcher Teststreifen ist unter der Bezeichnung "Hemoccult" auf dem Markt.In the chair, the sample receiving sheet is usually a paper impregnated or coated with guaiac resin. A developer solution, such as a peroxide solution, is fed through the opening in the back plate. Such a test strip is marketed under the name "Hemoccult".

Das Testverfahren verläuft kurz erläutert folgendermaßen:The test procedure is briefly explained as follows:

Eine Stuhlprobe wird durch eine Öffnung der vorderen Platte auf das Guajak-Papier gestrichen. Die Platte wird dannA stool sample is streaked through an opening in the front panel onto the guaiac paper. The plate will then

abgedeckt und die Klappe der hinteren Platte geöffnet. ":J Eine Entwicklerlösung, wie Wasserstoffperoxid, wird durch die entsprechende Öffnung in der hinteren Platte auf das Guagak-Papier aufgebracht. Wenn Blut in dem Stuhl enthalten ist, färbt die Guajak-Seaktion das Papier blau. Die blaue Farbe ist auf die durch Hämoglobin katalysierte Oxidation des Guajakharzes zurückzuführen:covered and the flap of the rear panel opened. " : A developer solution, such as hydrogen peroxide, is applied to the Guagak paper through the corresponding opening in the back plate, and if there is blood in the stool, the guaiac seaction turns the paper blue, the blue color is on the hemoglobin catalyzed oxidation of the guaiac resin due:

H2O2 H 2 O 2

Guajakharz farblos -> , oxidiertes GuajakharzGuaiac resin colorless -> , oxidized guaiac resin

Hämoglobin blaue FarbeHemoglobin blue color

Einer der mit diesem Guajak-Test verbundenen Nachteile besteht darin, daß die durch Hämoglobin katalysierte Entstehung einer blauen Färbung vom pH-Wert abhängt. Die Entwicklerlösung arbeitet unterhalb eines bestimmten pH-Wertes nicht reproduzierbar. Der pH-Wert für erfolgreiche Durchführung des vorstehend erläuterten bekannten Systems reicht von etwa 4,0 bis 7,0, wobei der günstigste pH-Wert bei 5,5 bis 6,0 liegt. Deshalb wird nur eine geringe oder möglicherweise überhaupt keine Färbung bemerkt, wenn Hämoglobin mit dem mit Guajakharz behandelten Substrat in einem Medium zusammenkommt, das einen wesentlich anderen als den günstigsten pH-Wert aufweist.One of the disadvantages associated with this guaiac test is that the hemoglobin-catalyzed formation of a blue color depends on the pH. The developer solution does not work reproducibly below a certain pH. The pH for successfully carrying out the above-described known system ranges from about 4.0 to 7.0, with the most favorable pH being 5.5 to 6.0. Therefore, little or no staining is noticed when hemoglobin comes into contact with the guaiac-resin-treated substrate in a medium that has substantially less than the most favorable pH.

Infolge des vorstehend erwähnten Nachteils ist der derzeit benutzte Teststreifen für die Prüfung auf dieDue to the above-mentioned drawback, the currently used test strip is for testing for

Anwesenheit von okkultem Blut in Proben, die einen niedrigen pH-Wert aufweisen, v/ie Magensaft, der einen pH-Wert unter 2 haben kann, nicht geeignet. Die Feststellung von Verbindungen, die im Mageninhalt normalerweise nicht anwesend sind, insbesondere die Anwesenheit von okkultem Blut ist jedoch von erheblicher Wichtigkeit für den klinischen Befund. Blut im Mageninhalt kann aus verschiedenen Quellen stammen. Hierzu gehören Blut, das nach einer Verletzung außerhalb des Magen-Darm-Trakts verschluckt wurde, sowie Blutungen im Magen-Darm-Trakt. Bei bestimmten Erkrankungen, wie Magenkrebs, Magengeschwür und Gastritis, kann Blut im Magen anwesend sein. Die Aufnahme von Alkohol und verschiedenen Arsneistoffen, wie Aspirin, andere Analgetika und Corticosteroide,kann Verletzungen der Magenschleimhaut-Zellen und möglicherweise Magenblutungen hervorrufen. Verletzungen im Magen und anschließende Blutungen wurden auch bei Patienten berichtet, die zur Behandlung schwerer Verletzungen oder Verbrennungen in Krankenhäuser eingeliefert wurden. Diese Art von Verletzungen können innerhalb von 24- Stunden nach dem ursprünglichen Trauma auftreten und zu akuten lebensbedrohenden Magenblutungen führen. Eine frühe Entdeckung von okkultem Blut im Magen—Darm-Trakt wäre deshalb für die Diagnose all der vorstehend aufgeführten Erkrankungen in frühem Stadium von größter Wichtigkeit, da sie dann noch mit größerer Wirksamkeit behandelt werden können.Presence of occult blood in samples having a low pH and gastric juice, which may have a pH below 2, not suitable. However, finding compounds that are not normally present in the stomach contents, especially the presence of occult blood, is of considerable importance for the clinical finding. Blood in the stomach contents can come from different sources. These include blood that has been swallowed after injury outside the gastrointestinal tract, as well as bleeding in the gastrointestinal tract. Be in certain diseases, such as stomach cancer, gastric ulcer and gastritis, ka nn blood in the stomach present. Intake of alcohol and various drugs, such as aspirin, other analgesics and corticosteroids, may cause gastric mucosal cell damage and possibly gastric bleeding. Injuries in the stomach and subsequent bleeding have also been reported in patients hospitalized for the treatment of severe injuries or burns. These types of injuries can occur within 24 hours after the initial trauma and can lead to acute life-threatening gastric bleeding. An early discovery of occult blood in the gastrointestinal tract would therefore be of paramount importance for the diagnosis of all the diseases listed above at an early stage, since they can then be treated with greater effectiveness.

Es wurden bereits Versuche unternommen, das mit Guajakharz imprägnierte Papier oder den Teststreifen gegen Änderungen des pH-Wertes sowie gegen einwirkende Stoffe, v/ie Peroxidasen, zu stabilisieren. In der DE-OS 27 16 060· ist der Zusatz von Pufferstoffen oder Chelatbildnem zum Guajak-Papier beschrieben, um die vorstehend erläuterten Schwierigkeiten zu überwinden. Die größte Notwendigkeit für eine Pufferung besteht dann, wenn das zu prüfende Medium stark vom günstigsten pH-Bereich abweicht, wie esAttempts have already been made to stabilize the paper impregnated with guaiac resin or the test strips against changes in the pH and against acting substances, ie peroxidases. In DE-OS 27 16 060 · the addition of buffers or Chelatbildnem is described to guaiac paper to overcome the difficulties explained above. The greatest need for buffering exists when the medium to be tested deviates greatly from the most favorable pH range, as it does

L ·L ·

beispielsweise bei Magensaft der Fall ist, oder wenn klei ne Mengen Katalysator, wie Hämoglobin, aufzufinden sind.for example, in gastric juice, or when small amounts of catalyst, such as hemoglobin, are found.

Ziel der Erfindung:Object of the invention:

Ziel der Erfindung ist es, einen verbesserten Proben-Teststreifen für okkultes Blut bereitzustellen, der unabhängig von Änderungen im pH-Wert der Probe benutzt werden kann.The object of the invention is to provide an improved occult blood sample test strip which can be used independently of changes in the pH of the sample.

Darlegung des Wesens der Erfindung:Explanation of the essence of the invention:

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, einen Teststreifen zur Prüfung auf okkultes Blut bereitzustellen, der von Änderungen im pH-Wert!des zu prüfenden Stoffes nicht beeinflußt wird und der auch für andere Proben als Stuhl angewendet werden kann. Eine weitere Aufgäbe der Erfindung ist die Bereitstellung eines geeigneten qualitativen Tests zur Hilfe bei der Diagnose von Magen-Darm-Erkrankungen durch Erüherkennung von okkultem Blut im Magensaft. Schließlich ist es Aufgabe der Erfindung, einen Proben-Teststreifen bereitzustellen, bei dem falsche positive Reaktionen, die auf die Gegenwart' von Peroxidasen, Eisen, Kupfer oder chemischen Stoffen, wie Cimetidin, zurückzuführen sind, ausgeschlossen werden können.The invention has for its object to provide a test strip for testing for occult blood, which is not affected by changes in the pH of the substance to be tested and can also be used for other than stool samples. A further object of the invention is to provide a suitable qualitative test for aiding in the diagnosis of gastrointestinal disease by visualizing occult blood in gastric juice. Finally, it is an object of the invention to provide a sample test strip in which false positive reactions due to the presence of peroxidases, iron, copper or chemicals such as cimetidine can be excluded.

Überraschenderweise wurde festgestellt, daß der Proben-Teststreifen von Änderungen im pH-Wert der Probe nicht beeinflußt wirtl und falsche positive Reaktionen infolge der Gegenwart von Peroxidasen, Metallionen oder Cimetidin vermieden werden, wenn die Puffersubstanzen in die Entwicklerlösung einverleibt werden,statt nach dem Stand der Technik in das Guajak-Papier imprägniert zu werden.Surprisingly, it has been found that the sample test strip is unaffected by changes in the pH of the sample and false positive reactions due to the presence of peroxidases, metal ions or cimetidine are avoided when the buffering agents are incorporated into the developing solution rather than the prior art Technique to be impregnated into the guaiac paper.

.Gegenstand der Erfindung ist ein Proben-Teststreifen zur Prüfung auf okkultes Blut, gekennzeichnet durch ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat, das Guajakharz als Testreagens enthält.The object of the invention is a sample test strip for occult blood testing, characterized by an acid-treated absorbent substrate containing guaiac resin as a test reagent.

Vorzugsweise umfaßt das Substrat ein Blatt Saugpapier.Preferably, the substrate comprises a sheet of absorbent paper.

Die Säure, mit der das Substrat behandelt wird, ist vorzugsweise Citronensäure.The acid with which the substrate is treated is preferably citric acid.

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein Verfahren zur Be- J Stimmung der Anwesenheit von okkultem Blut im Magensaft, gekennzeichnet dadurch, daß man die Magensaft-Probe auf ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat aufbringt, das Guajakharz als Testreagenz enthält, eine gepufferte Entwicklerlösung auf das Substrat aufbringt und feststellt, ob sich das Substrat blau verfärbt.The invention further provides a method for loading J mood of the presence of occult blood in gastric juice, characterized in that applying the gastric juice sample to an acid treated absorbent substrate containing guaiac as a test reagent, a buffered developing solution to the substrate Apply and determine whether the substrate turns blue.

In dem genannten Verfahren enthält die Entwicklerlösung vorzugsweise Wasserstoffperoxid..In the said method, the developing solution preferably contains hydrogen peroxide.

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein Prüfsatz zur Bestimmung der Anwesenheit von okkultem Blut im Magensaft, gekennzeichnet durch ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat, das Guajakharz als Testreagenz enthält und ein eine gepufferte Entwicklerlösung enthaltendes Gefäß, welche mit dem genannten Reagenz reagiert und das Substrat blau färbt.The invention further provides an assay kit for determining the presence of occult blood in gastric juice, characterized by an acid-treated absorbent substrate containing guaiac resin as a test reagent and a vessel containing a buffered developer solution which reacts with said reagent and turns the substrate blue ,

Schließlich ist Gegenstand der Erfindung eine wäßrige Entwicklerlösung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an etwa Λ bis 5°p Wasserstoffperoxid und gepuffert mit 0,2 M Citronensäure/Natriumcitrat mit einem pH-Wert von etwa 5,8.Finally, the invention relates to an aqueous developer solution, characterized by a content of about Λ to 5 ° p hydrogen peroxide and buffered with 0.2 M citric acid / sodium citrate having a pH of about 5.8.

Vorzugsweise wird der genannten Entwicklerlösung ein nichtionisches Netzmittel zugesetzt.Preferably, a nonionic surfactant is added to said developer solution.

L JL J

Γ - 6 - ΠΓ - 6 - Π

Aus dem Puffern der Entwicklerlösung anstelle der Imprägnierung des Guajak-Papiers mit einem Puffer ergeben sich, mehrere größere Vorteile. Die Menge an Puffer, die auf das Guajak-Papier aufgebracht v/erden kann, ist durch die Saugfähigkeit des Papiers begrenzt. Wenn eine starke Pufferwirkung erforderlich ist, ist somit die Pufferung des Entwicklers wirksamer. Perner ist eine gleichmäßige Verteilung des Puffers auf dem Papier schwierig zu erreichen. Durch Pufferung des Entwicklers ist der pH-Wert nicht, auf denjenigen des Substrates begrenzt, d.h. der pH-Wert' kann geändert werden. Wenn das Papier einmal imprägniert ist, ist dagegen der pH-Wert definiert und begrenzt. Eine große Salzkonzentration auf dem Papier beeinflußt ferner andere Reagenzien und ändert die physikalischen Eigenschaften des Papiers selbst. Durch Pufferung der Entwicklerlösung ergibt sich dagegen keine Änderung im Herstellungsverfahren des Proben-Teststreifens. Somit ist diese !Lösung sehr wirtschaftlich.Buffering the developer solution instead of impregnating the guaiac paper with a buffer yields several major benefits. The amount of buffer that can be applied to the guaiac paper is limited by the absorbency of the paper. Thus, when a strong buffering effect is required, the buffering of the developer is more effective. Perner is an even distribution of the buffer on paper difficult to reach. By buffering the developer, the pH is not limited to that of the substrate, i. the pH value can be changed. Once the paper has been impregnated, however, the pH is defined and limited. A large salt concentration on the paper also affects other reagents and changes the physical properties of the paper itself. By buffering the developer solution, on the other hand, there is no change in the method of preparation of the sample test strip. Thus, this solution is very economical.

Die vorteilhaftesten Ergebnisse werden bei kombinierter Verwendung von mit Säure behandeltem Guajak-Papier und gepuffertem Entwickler erhalten. Es wurde festgestellt, daß die Säurebehandlung des Guajak-Papiers falsche positive Tests mit Cimetidin ausschließt und die Wechselwirkung mit Peroxidasen vermindert. !Ferner verhindert die Säure im Gua.jak-Papier unerwartet erweise eine blaue Verfärbung des Guajakharzes während der Lagerung, die sonst durch Oxidation an der Luft auftreten kann. Der gepufferte Entwickler ist erforderlich, um die Entdeckung des Hämoglobins unter den im Guajak-Harz vorliegenden sauren Bedingungen zu ermöglichen. Dies wird durch die Ergebnisse der folgenden Versuche veranschaulicht.The most advantageous results are obtained with combined use of acid-treated guaiac paper and buffered developer. It has been found that the acid treatment of the guaiac paper precludes false positive tests with cimetidine and reduces the interaction with peroxidases. Furthermore, the acid in the Gua.jak paper unexpectedly prevents a blue discoloration of the guaiac resin during storage, which otherwise can occur due to oxidation in the air. The buffered developer is required to allow the detection of hemoglobin under the acidic conditions found in the guaiac resin. This is illustrated by the results of the following experiments.

Proben von synthetischem Magensaft mit einem Gehalt von 0,05 nig Hämoglobin und 30 ^1S Cimetidin pro ml werden bereitet. Dann werden 25 /ul Proben auf "Hemoccult"-StreifenSamples of synthetic gastric juice containing 0.05 ng hemoglobin and 30 ^ 1 s cimetidine per ml are prepared. Then 25 / μl samples are placed on "Hemoccult" strips

L JL J

-V--V-

iffertenifferten

aufgebracht und mit gepufferten und nichtgepuj Entwicklern entwickelt. Die"Hemoccult"-Streifen werden dann durch Säurebehandlung des Guajak-Papiers vor dem Aufbringen und Entwickeln der Proben angesäuert. Die Ergebnisse dieser Prüfungen sind in den nachstehenden Tabellen: I und II zusammengefaßt.applied and developed with buffered and nongepuj developers. The "Hemoccult" strips are then acidified by acid treatment of the guaiac paper prior to application and development of the samples. The results of these tests are in the tables below: I and II zusa m quantity handled.

Tabelle ITable I

Gepufferter und ungepufferter Entwickler mit gewöhnlichen "Hemoccult"-Streifen; Ablesung nach 30 SekundenBuffered and unbuffered developer with ordinary "Hemoccult" strips; Reading after 30 seconds

.pH-Wert der Probe.pH value of the sample HÄMOGLOBINHEMOGLOBIN ungepuffer ter Ent wicklerunbuffered developer CIMETIDIN.Cimetidine. X ungepuf-.; ferter Entwickler X unpopped; finished developer 1,321.32 gepufferter Entwicklerbuffered developer 11 gepufferter Entwicklerbuffered developer 11 2,202.20 33 33 00 22 3,603.60 33 44 --- o--- o 22 4,324.32 44 44 00 22 5,605.60 44 33 00 44 6,376.37 44 33 00 44 44 00

Tabelle IITable II

Mit Säure behandelte und unbehandelte Streifen mit gepuffertem EntwicklerAcid-treated and untreated strips with buffered developer

Streifenstrip EÄMCGL03INEÄMCGL03IN 22 55 keinenone 22 Säureacid CIMETIDIN'.;.; Cimetidine. '. 22 55 keinenone Säureacid 55 Ablese- .Readout. Säureacid 55 55 55 Säureacid 00 00 00 min. ^ >minute ^> 55 55 0,50.5 55 55 00 00 0,50.5 22 55 £1.32£ 1.32 0,50.5 55 55 33 55 55 0,50.5 00 00 00 00 55 \ 5. 60 \ 5. 60 22 55 55 00 00 11 ο 6.37ο 6.37 55 44 55 00 00 33 55 00

Γ - 8 - ΠΓ - 8 - Π

Die "Hemoccult"-Streifen werden durch Behandlung der Mitte des Guagak-Papiers mit.25 μΐ Ο,ΊΜ Citronensäure angesäuert. Das Papier wird vor dem Gebrauch unter Normalbedingungen trocknen gelassen. Der gepufferte Entwickler enthält Wasserstoffperoxid in einem 0,2M Citronensäure/Citrat-Puffer mit einem pH-Wert von 5,8. Der ungepufferte Entwickler ist der handelsübliche "Hemoccult"-Entwickler, der Wasserstoffperoxid in Äthanol und Wasser enthältThe "Hemoccult" strips are acidified by treating the center of the Guagak paper with .25 μΐ Ο, ΊΜ citric acid. The paper is allowed to dry under normal conditions before use. The buffered developer contains hydrogen peroxide in a 0.2M citric acid / citrate buffer with a pH of 5.8. The unbuffered developer is the commercial "Hemoccult" developer containing hydrogen peroxide in ethanol and water

10 10

Die Intensität der blauen Färbung wird in einer Skala mit Werten von 1 bis 5 bewertet, wobei 0 farblos bedeutet. Aus Tabelle I ist zu sehen, daß bei der Verwendung des gepufferten Entwicklers mit dem üblichen "Hemoccult"-Streifen ein gleichmäßigerer positiver Hämoglobin—Test erhalten wird. Der gepufferte Entwickler eliminiert auch falsche positive Ergebnisse, die durch Cimetidin verursacht werden. Die Ergebnisse in Tabelle II zeigen, daß die Verwendung von angesäuertem Guajak-Papier zusammen mit gepuffertem Entwickler keine falschen positiven Ergebnisse infolge von Cimetidin ergibt, auch wenn die Ablesung des Testergebnisses verzögert ist und nach den vorgeschriebenen 30 Sekunden erfolgt. Es ist festzustellen, daß diese Behandlung den TestThe intensity of the blue color is rated on a scale with values from 1 to 5, where 0 means colorless. It can be seen from Table I that a more positive hemoglobin positive test is obtained using the buffered developer with the standard Hemoccult strip. The buffered developer also eliminates false positive results caused by cimetidine. The results in Table II show that the use of acidified guaiac paper together with buffered developer does not give false positive results due to cimetidine even though the reading of the test result is delayed and occurs after the prescribed 30 seconds. It should be noted that this treatment is the test

auf Hämoglobin nicht beeinflußtnot affected by hemoglobin

25 25

Die durch Peroxidase katalysierte falsche positive Reaktion ist ebenfalls vom pH-Wert abhängig und die Katalyse nimmt mit abnehmendem pH-Wert ab. Es wurde festgestellt, daß die Säurebehandlung des GuaJak-Papiers vor dem Auf-The peroxidase-catalyzed false positive reaction also depends on the pH and catalysis decreases with decreasing pH. It was found that the acid treatment of the GuaJak paper was

^ bringen der Probe eine durch -säurelabile Peroxidasen katalysierte falsche.positive Reaktion verhindert. Das be-" handelte Papier ergibt, wenn es mit einem gepufferten Entwickler verwendet wird, mit Hämoglobin enthaltenden Proben eine blaue Färbung, und beeinflußt die Prüfung auf Hämoglobin nicht. Beispielsweise ergibt synthetischer Magensaft vom pH-Wert 6,5, der gereinigte Meerrettich-^ bring the sample prevented by acid-labile peroxidases catalyzed incorrect.positive reaction. The treated paper, when used with a buffered developer, gives a blue color to samples containing hemoglobin, and does not affect the assay for hemoglobin, for example, synthetic gastric juice of pH 6.5, the purified horseradish.

Peroxidase (2 Einheiten pro ml) enthält, bei der Prüfling mit "Hemoccult"-Streifen ein falsches positives Ergebnis. Wenn dagegen das Guajak-Papier mit Säure vorbehandelt ist und die genannte synthetische Magenflüssigkeit mit Peroxidase aufgebracht und mit der Säure 5 Minuten vor dem Entwiekeln umsetzen gelassen wird, wird keine blaue positive !Färbung erzeugt.Peroxidase (2 units per ml) contains a false positive result for the specimen with "Hemoccult" strips. On the other hand, if the guaiac paper is pretreated with acid and the said synthetic gastric fluid is applied with peroxidase and allowed to react with the acid for 5 minutes prior to the dehydration, no blue positive dye is produced.

Beispiele für Säuren, die sich zur Behandlung des Guajak-Papiers eignen, sind Salzsäure, Schwefe!säure, Citronensäure, Phosphorsäure und Oxalsäure. Daneben können auch andere starke organische und anorganische Säuren verwendet werden. Ein Beispiel für die Säurebehandlung des Guajak-Papiers wird nachstehend gegeben, 15Examples of acids which are suitable for the treatment of the guaiac paper are hydrochloric acid, sulfuric acid, citric acid, phosphoric acid and oxalic acid. In addition, other strong organic and inorganic acids can be used. An example of the acid treatment of the guaiac paper is given below, 15

Ausführungsbeispielembodiment

Lösung ISolution I

Lösung I 800 gSolution I 800 g

Citronensäure 768 gCitric acid 768 g

Isopropanol 432 gIsopropanol 432 g

. Wasser JOO g., Water JOO g.

Die Lösung II kann entweder durch Imprägnieren oder durch Drucken auf das Saugpapier aufgebracht werden,The solution II can be applied either by impregnation or by printing on the absorbent paper,

Der Entwickler kann mit gedein bekannten Puffersystem, beispielsweise Citronensäure/iTatriumcitrat, Citronensäure/zweibasiges Hatriumphosphat, tris-Maleat oder EDTA gepuffert werden.The developer can be buffered with known buffer system, for example citric acid / itatrium citrate, citric acid / dibasic sodium phosphate, tris maleate or EDTA.

Die gepufferte Entwieklerlösung enthält vorzugsweise etwa 1 bis Jfo Wasserstoffperoxid. Der nachstehendThe buffered developer solution preferably contains about 1 to about 5% hydrogen peroxide. The following

L JL J

Guajakharzguaiac Lösungsolution IIII 77 ,8,8th SS Isopropanolisopropanol 9292 ,22 SS

Γ - 10 - ΠΓ - 10 - Π

beschriebene gepufferte Entwickler, der einen 0,2M Citronensäure/Citrat-Puffer mit einem pH-Wert von 5,8 enthält, wird vorzugsweise in vorliegender Erfindung verwendet.described buffered developer containing a 0.2M citric acid / citrate buffer with a pH of 5.8, is preferably used in the present invention.

Wasserstoffperoxid 2,17 SHydrogen peroxide 2,17 p

Äthanol 32,87 gEthanol 32.87 g

Citronensäure , 0,75 gCitric acid, 0.75 g

Natriumeitrat - 4-,37 SSodium citrate - 4-, 37 S

V/asser ^58,8OgV / asser ^ 58.8g

Triton X-100 1,04 g.Triton X-100 1.04 g.

Vorzugsweise wird ein nichtionisches Netzmittel dem gepufferten Entwickler zugesetzt, um die Peroxidase-Inhibierung zu unterstützen. Besonders bevorzugt ist die Ver-Wendung eines Triton X-Netzmitteis, Polyäthylenglykolp-isooetylphenyläther.Preferably, a nonionic surfactant is added to the buffered developer to aid peroxidase inhibition. Particularly preferred is the use of a Triton X Netzmitteis, Polyäthylenglykolp-isooetylphenyläther.

Wenn ein gepufferter Entwickler zusammen mit einem Substrat aus säurebehandeltem Guajak-Papier verwendet wird, ergibt sich ein Proben-Teststreifen, der stabil ist und die Prüfung auf die Anwesenheit von okkultem Blut in Proben mit niedrigem pH-Wert, wie Magensaft, gestattet. Außerdem v/erden falsche positive Ergebnisse infolge von Cimetidin, Peroxidasen und Metallionen, wie Kupfer- und Eisenionen, ausgeschlossen.When a buffered developer is used with a substrate of acid-treated guaiac paper, a sample test strip results which is stable and allows testing for the presence of occult blood in low pH samples such as gastric juice. In addition, false positive results due to cimetidine, peroxidases and metal ions such as copper and iron ions are excluded.

L JL J

Claims (7)

Erfindungsanspruchinvention claim 1. Proben-Teststreifen zur Prüfung auf okkultes Blut, gekennzeichnet durch ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat, das Guajak-Harz als Test-Reagenz enthält.An ocular blood sample test strip characterized by an acid-treated absorbent substrate containing guaiac resin as a test reagent. 2. Streifen nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß das Substrat ein Blatt Saugpapier umfaßt.2. Strip according to item 1, characterized in that the substrate comprises a sheet of absorbent paper. 3· Streifen nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß die Säure Citronensäure ist.Strip according to item 1, characterized in that the acid is citric acid. 4. Verfahren zur Bestimmung der Anwesenheit von okkultem Blut im Magensaft, gekennzeichnet dadurch, daß man den Magensaft auf ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat aufbringt, das'Guajak-Harz als Test-Keaganz enthält, eine gepufferte Entwicklerlösung auf das Substrat aufbringt und beobachtet, ob das Substrat sich blau verfärbt.4. A method for determining the presence of occult blood in gastric juice, characterized by applying the gastric juice to an acid-treated absorbent substrate containing giajak resin as a test keagan, applying a buffered developer solution to the substrate, and observing whether the substrate turns blue. L - JL - J 5. Verfahren nach Punkt 4, gekennzeichnet dadurch, daß die Entwicklerlösung Wasserstoffperoxid enthält.5. The method according to item 4, characterized in that the developer solution contains hydrogen peroxide. 6. Prüfsatz zur Bestimmung der Anwesenheit von okkultem Blut im Magensaft, gekennzeichnet durch ein mit Säure behandeltes absorbierendes Substrat, das Guajak-Harz als Test-Reagenz enthält und ein eine gepufferte Entwicklerlösung enthaltendes Gefäß, welche mit dem6. Test kit for the determination of the presence of occult blood in gastric juice, characterized by an acid-treated absorbent substrate containing guaiac resin as a test reagent and a container containing a buffered developer solution, which with the Reagenz reagiert und das Substrat blau färbt. 10Reagent reacts and the substrate turns blue. 10 7. Wäßrige Entwicklerlösung, gekennzeichnet dadurch, daß sie etwa 1 bis 5$ Wasserstoffperoxid, gepuffert mit 0,2M Citronensäure/Natriumcitrat mit einem pH-Wert von etwa 558 enthält.
*
An aqueous developer solution characterized by containing about 1 to 5 $ of hydrogen peroxide buffered with 0.2M citric acid / sodium citrate at a pH of about 5 to 5 .
*
8. Lösung nach Punkt 75 gekennzeichnet dadurch,, daß sie ein nichtionisches Netzmittel zugesetzt enthält.8. Solution according to item 7 5, characterized in that it contains a nonionic wetting agent added. 20 25 30 3520 25 30 35
DD83251341A 1982-05-28 1983-05-27 IMPROVED SAMPLING TEST STRIP AND TEST PROCEDURE FOR OKKULTES BLOOD DD211874A5 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US38290882A 1982-05-28 1982-05-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DD211874A5 true DD211874A5 (en) 1984-07-25

Family

ID=23510927

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DD83251341A DD211874A5 (en) 1982-05-28 1983-05-27 IMPROVED SAMPLING TEST STRIP AND TEST PROCEDURE FOR OKKULTES BLOOD

Country Status (23)

Country Link
EP (1) EP0095302B1 (en)
JP (1) JPS58215557A (en)
KR (1) KR900005485B1 (en)
AT (1) ATE18307T1 (en)
AU (1) AU557883B2 (en)
BG (1) BG42009A3 (en)
CA (1) CA1216501A (en)
CS (1) CS259514B2 (en)
DD (1) DD211874A5 (en)
DE (1) DE3362264D1 (en)
DK (1) DK159173C (en)
ES (1) ES522738A0 (en)
FI (1) FI75436C (en)
GR (1) GR79286B (en)
HU (1) HU192806B (en)
IE (1) IE54507B1 (en)
IL (1) IL68767A0 (en)
NO (1) NO161196C (en)
NZ (1) NZ204343A (en)
PH (1) PH23572A (en)
PL (1) PL142241B1 (en)
PT (1) PT76748B (en)
ZA (1) ZA833856B (en)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3314308A1 (en) * 1983-04-20 1984-10-25 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim METHOD AND REAGENT FOR DETERMINING THE HEMOGLOBIN-HAPTOGLOBIN COMPLEX IN THE PRESENCE OF FREE HAEMOGLOBIN
US4541987A (en) * 1983-09-29 1985-09-17 Helena Laboratories Corporation Test pad for detecting occult blood
US5374328A (en) * 1993-03-25 1994-12-20 Watkins Johnson Company Method of fabricating group III-V compound
CN111273007B (en) * 2020-03-13 2023-08-01 内江师范学院 Kit for rapidly detecting Edwardsiella ictaluri and detection method

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3933594A (en) * 1974-08-16 1976-01-20 Polaroid Corporation Method and device for determining the concentration of a substance in a fluid
DE2716061C2 (en) * 1977-04-09 1982-03-25 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Guaiaconic acid A, process for its preparation and the use of this substance as a diagnostic agent
DE2716060C3 (en) * 1977-04-09 1980-06-12 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Stabilized rapid diagnostics with oxidation indicators
AT360176B (en) * 1977-07-01 1980-12-29 Roehm Gmbh TEST CARD FOR DETECTING THE Occult BLOOD IN THE CHAIR
US4175923A (en) * 1978-06-26 1979-11-27 Friend William G Method and apparatus for occult blood testing in the home
US4277250A (en) * 1979-12-10 1981-07-07 Baylor College Of Medicine Methods for detecting and quantifying occult blood
ZA829434B (en) * 1982-01-05 1984-05-30 Hematec Corp Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public
ZA831268B (en) * 1982-04-30 1984-10-31 Hematec Corp Home diagnostic aid and method for determining the presence of occult blood for use by the general public
JPS6432947A (en) * 1987-07-30 1989-02-02 Shiroki Corp Door lock/unlock detecting device for burglary preventing device for automobile

Also Published As

Publication number Publication date
FI831850L (en) 1983-11-29
AU1497683A (en) 1983-12-01
PL142241B1 (en) 1987-10-31
ES8404513A1 (en) 1984-04-16
AU557883B2 (en) 1987-01-15
JPS58215557A (en) 1983-12-15
DK159173C (en) 1991-02-11
DE3362264D1 (en) 1986-04-03
JPH0449656B2 (en) 1992-08-12
KR900005485B1 (en) 1990-07-30
PT76748B (en) 1985-12-27
PH23572A (en) 1989-09-11
FI75436C (en) 1988-06-09
GR79286B (en) 1984-10-22
FI75436B (en) 1988-02-29
NO831871L (en) 1983-11-29
NZ204343A (en) 1986-05-09
NO161196C (en) 1989-07-12
PL242217A1 (en) 1985-02-13
ZA833856B (en) 1984-04-25
IE831262L (en) 1983-11-28
EP0095302A1 (en) 1983-11-30
FI831850A0 (en) 1983-05-24
CS259514B2 (en) 1988-10-14
CS380283A2 (en) 1988-02-15
EP0095302B1 (en) 1986-02-26
DK231083D0 (en) 1983-05-24
NO161196B (en) 1989-04-03
DK159173B (en) 1990-09-10
PT76748A (en) 1983-06-01
CA1216501A (en) 1987-01-13
IL68767A0 (en) 1983-09-30
DK231083A (en) 1983-11-29
ES522738A0 (en) 1984-04-16
IE54507B1 (en) 1989-10-25
HU192806B (en) 1987-07-28
BG42009A3 (en) 1987-09-15
ATE18307T1 (en) 1986-03-15
KR840004505A (en) 1984-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3012368C2 (en) Methods and diagnostic means for the detection of redox reactions
DE2265122C2 (en) Method for the determination of cholesterol
DE2640211C3 (en) Test device for the detection of peroxidatively active substances
DE3872998T2 (en) Test for occult blood in the chair.
DE1598752A1 (en) Preparation for the detection of chemical substances
DE3000380A1 (en) TEST MEANS AND THEIR USE FOR TROUBLE-FREE DETECTION OF OXIDIZING SUBSTANCES
DE1598809C3 (en) Diagnostic agents for glucose in liquids
DE1598008A1 (en) Diagnostic agents and methods for the detection of types of sugar in animal biological material
DE2843539B2 (en) Test agent for the determination of an oxidizing substance
DE2550634A1 (en) TEST PREPARATIONS
DE2330106A1 (en) METHOD OF DETERMINING A COMPONENT WITH THE AID OF A TEST PAPER
DE3125667C2 (en) Method and means for the detection of hydrogen peroxide
DE1598756A1 (en) Agent for the determination of urea in liquids
DE2439348B2 (en) DIAGNOSTIC AGENT FOR THE DETECTION AND DETERMINATION OF CHOLESTEROL AND CHOLESTEROL ESTERS IN BODY FLUIDS
DE2309794C3 (en) Test reagent for the determination of ascorbic acid
DE2500689C2 (en)
DE1673004A1 (en) Test strips for the determination of urea
DD211874A5 (en) IMPROVED SAMPLING TEST STRIP AND TEST PROCEDURE FOR OKKULTES BLOOD
EP0078971B1 (en) Reagent for the determination of glucose in biological fluids
DE2803955C3 (en) Test equipment for the determination of a peroxidative substance in a sample
EP0340511B2 (en) Carrier-bound multicomponent detection system for the colorimetric determination of esterolytic or/and proteolytic substances of body fluids
CH646792A5 (en) TEST DEVICE FOR DETERMINING URIC ACID.
DE3539772C2 (en)
DE69111016T2 (en) Composition of agents for the detection of a redox reaction.
DE2050481C3 (en) Diagnostic agent for the semi-quantitative determination of glucose in urine

Legal Events

Date Code Title Description
ENJ Ceased due to non-payment of renewal fee