DD210352A1 - SENSITIVE MICROELECTRODE FOR DETERMINING NITRATION ACTIVITIES - Google Patents

SENSITIVE MICROELECTRODE FOR DETERMINING NITRATION ACTIVITIES Download PDF

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DD210352A1
DD210352A1 DD24360182A DD24360182A DD210352A1 DD 210352 A1 DD210352 A1 DD 210352A1 DD 24360182 A DD24360182 A DD 24360182A DD 24360182 A DD24360182 A DD 24360182A DD 210352 A1 DD210352 A1 DD 210352A1
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nitrate
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glass capillary
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DD24360182A
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Inventor
Hans-Peter Vielemeyer
Ingo Dahse
Udo Gruenke
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Hermsdorf Keramik Veb
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Abstract

Die Erfindung bezieht sich auf die o.g. Elektrode, die aus einer Glaskapillare, deren Spitze mit einer fluessigkeitsundurchlaessigen nitratsensitiven Membran gefuellt ist, und einem inneren Referenzeinsatz mit Ag/AgCl-Referenzelement besteht. Eine derartige Elektrode muss dem Druck beim Einstechen in die zu untersuchende Zelle standhalten. Deshalb soll die Membran auf der Glasoberflaeche zuverlaessig haften. Erfindungsgemaess wird dies erreicht, indem die Glaskapillare silikonisiert ist und die Membran aus Tetraalkyl- oder Triarylalkylphosphoniumnitrat besteht, das im Verhaeltnis 1:20 in o/p-Nitrophenyl-n-octylaether mit einem Lack (Verhaeltnis Aether: Lack=1:1), wie er normalerweise als Parkettversiegelungslack verwendet wird, bestehend im wesentlichen aus Komponenten auf der Basis von Phthalsaeureanhydrid und eines Aminoplastlackharzes, geloest und ausgehaertet ist. Die Mikroelektrode ist besonders zur Untersuchung von toten und lebenden Zellen geeignet.The invention relates to the above-mentioned. An electrode consisting of a glass capillary tip filled with a liquid-impermeable nitrate-sensitive membrane and an internal reference insert with Ag / AgCl reference element. Such an electrode must withstand the pressure of piercing the cell to be examined. Therefore, the membrane should adhere reliably to the glass surface. According to the invention, this is achieved by siliconized the glass capillary and the membrane consists of tetraalkyl or triarylalkylphosphonium nitrate, which in the ratio 1:20 in o / p-nitrophenyl n-octyl ether with a paint (ratio of ether: paint = 1: 1), as it is normally used as a parquet sealant, consisting essentially of components based on phthalic anhydride and a Aminoplastlackharzes, solved and cured. The microelectrode is particularly suitable for the investigation of dead and living cells.

Description

!Eitel.der Erfindung' ! Eitel.der invention '

Sensitive Mikroelektrode zur Bestimmung· von HitrationenaktivitätenSensitive microelectrode for the determination of hitration activities

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft eine sensitive Mikroelektrode zur Bestinsnung von Nitrationenaktivitäten, z« B Tv pflanz liehen und '/in tierischen Zellen, bestehend aus einer Glaskapillare, deren Spitze mit. einer flüssigkeitsundurchlässigen nitratsensitiven Membran gefüllt ist und einem inneren Referenzeinsatz mit Ag/AgG1-Referenzelement.The invention relates to a sensitive microelectrode for purifying nitrate activities, for example, plants and / or in animal cells, consisting of a glass capillary, the tip of which. a liquid-impermeable nitrate-sensitive membrane is filled and an internal reference insert with Ag / AgG1 reference element.

Charakteristik der bekannten - technischen LosungenCharacteristic of the known - technical solutions

Es ist bekanntj für intrazelluläre Messungen verschiedene sensitive likroelektroden einzusetzen. So wurden von Hinke in M, Lavallee, 0·Ρ· Schanne, H*C* Hebert. (Eds) Glasmicroelectrodes,. Wiley; Sons Inc. Hew York, London, Sydney, Toronto 1969, pH-· uhd; liatrdSm^Mikroelektroden;: bescnfie'ben, dereh"Slektro(iehspitze;n aus pH- bzw« Ufa-sensitivem Glas bestehen-It is known to use various sensitive electrolyte electrodes for intracellular measurements. Thus Hinke in M, Lavallee, 0 · Ρ · Schanne, H * C * Hebert. (Eds) glass microelectrodes ,. Wiley; Sons Inc. Hew York, London, Sydney, Toronto 1969, pH-uhd ; liatrdSm ^ microelectrodes; bescnfie'ben, Dereh "Slektro (iehspitze n of pH or" Ufa-a Sensitive Glass existing

2aSER1982*O378672aSER1982 * O37867

- 2 - ,.. P 906- 2 -, .. P 906

Für kalium-, calcium'- -und chloridsensitive' Mikroelektrode]! werden Glaskapillar-Spitzen mit geeigneten Ionenaustauschern als Sensormaterial gefüllt (M, Oehme, W». Somin, Anal*. CMm* Acta 86 21 (1976) und I, Oehme Diasertation BTH Zürich.1977*For potassium-, calcium- and chloride-sensitive microelectrode! glass capillary tips are filled with suitable ion exchangers as sensor material (M, Oehme, W., Somin, Anal * CMm * Acta 86 21 (1976) and I, Oehme Diasertation BTH Zurich.1977 *

Brauchbare Mikroelektroden zur Bestimmung von Nitrationenaktivitäten in Zellen ließen sich bisher nicht herstellen, weil sich die von den Makroelektroden her bekannten Membranzusammensetzungen mit Tetraalkyl- oder TriarylalkyIphosphoniumnitrat als aktive Komponente und PVC als Trägermaterial (DD-PS 127 372) für diesen Einsatzzweck nicht eignen* Insbesondere stört die schlechte Haftung des Membranmaterials auf der Glasoberfläche in der Kapillarspitze, die, zur Punktionsunfähigkeit führt.Useful microelectrodes for the determination of nitrate activities in cells have hitherto not been possible because the membrane compositions known from the macroelectrodes with tetraalkyl- or triarylalkylphosphonium nitrate as active component and PVC as support material (DD-PS 127 372) are not suitable for this purpose the poor adhesion of the membrane material to the glass surface in the capillary tip, which leads to puncture inability.

Ziel der ErfindungObject of the invention

Ziel der Erfindung ist es, eine nitratsensitive Mikroelektrode zur Messung von ITitrationenaktivitäten in pflanzlichen und tierischen Zellen zu. entwickeln* Der Blektrodehspitzen-Durchmesser soll 1 bis 5/Um betragen*The aim of the invention is to provide a nitrate-sensitive microelectrode for measuring ITitrationenaktivität in plant and animal cells. develop * The Blektrodehspitzen diameter should be 1 to 5 / Um *

Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt deshalb die Aufgäbe zugrunde, eine sensitive Mikroelektrode zur Bestimmung":von HitrationenaktivitätenThe invention is therefore based on the Aufgäbe, a sensitive microelectrode for determining ": Hitrationenaktivitäten

' · · '· ·

zn entwickeln, deren Kapillarspitze und deren Membran so beschaffen sein sollen, daß eine zuverlässige Haftung der Membran auf der Glasoberfläche in der Kapillarspitze gewährleistet ist.zn develop whose capillary tip and the membrane should be such that a reliable adhesion of the membrane is ensured on the glass surface in the capillary tip.

Erfindungsgemäß wird dies erreicht t indem die Glaskapillare silikonisiert ist und die Membran aus Tetraalkyl- oder Triary1-alkyIphosphoniumnitrat besteht, das im Verhältnis von 1 : 20 in o/p-Hitrophenyl-n-octylather mit einem Lack (Verhältnis Äther : Lack = 1 : 1), wie er normalerweise als Parkettver-Invention, this is achieved according to t by the glass capillary is siliconized and the membrane consists of tetra or Triary1-alkyIphosphoniumnitrat is, the ratio of 1: 20 in o / p-Hitrophenyl-n-octylather (with a lacquer ratio ether: Paint = 1: 1), which is normally used as parquet

- 3 - P 906- 3 - P 906

siegeI-UiIgSlack verwendet wird, bestehend im wesentlichen aus Komponenten auf der Basis von Phthalsäureanhydrid und eines Aminoplastlackharzes, gelöst und ausgehärtet ist.SiegeI - UiIgSlack is used, consisting essentially of components based on phthalic anhydride and a Aminoplastlackharzes, dissolved and cured.

Die Aushärtezeit nach dem Pullen der Glaskapillare beträgt einige Tage. Danach kann die Referenzlösung eingefüllt werden und die Elektrode ist meßbereit.The curing time after pulling the glass capillary is several days. Then the reference solution can be filled in and the electrode is ready to measure.

In dieser Art lassen sich Mikroelektroden mit einem Spitzendurchmesser von 1 bis 5/Tius und einer Membranschichtdicke von ca, 200 ,um realisieren*In this way microelectrodes with a tip diameter of 1 to 5 / Tius and a membrane layer thickness of approx. 200 can be realized *

Die so gefertigte. Membran haftet fest an der Glasoberfläche und hält dem Druck beim Einstechen der Mikroelektrode in die Pflanzenzelle stand. Außerdem erfolgt durch das neuartige Trägermaterial'keine Erhöhung des elektrischen Widerstandes. Mit der Mikroelektrode können Hitrationenaktivitäten von 10 bis TO ·· M gemessen werden.The so made. Membrane adheres tightly to the glass surface and withstands the pressure of piercing the microelectrode into the plant cell. In addition, the novel carrier material does not increase the electrical resistance. With the microelectrode, titration activities from 10 to TO ·· M can be measured.

AusfünrungsbeispielAusfünrungsbeispiel

An einem Beispiel soll die Erfindung näher* erläutert werden. In einer:.-5; cm; längen: silikonisierten Glaskapillare mit: einem Spitz'endurchmesser von 2/Um befindet sich die 200 ,um dicke . . nitratsensitive Membran. Diese besteht aus Tributyloctadecylphosphoniumnitrat gelöst 1 : 20 in o/p-litrophenyl-n-octylather und mit Parkettversiege lungslack als Trägermaterial 1. : Ί vermischt. Der- genannte Lack besteht aus den folgenden Komponenten:By way of example, the invention will be explained in more detail. In one: .- 5 ; cm; Lengths: siliconized glass capillary with : a tip diameter of 2 / around 200 to thick. , nitrate-sensitive membrane. This consists of Tributyloctadecylphosphoniumnitrat dissolved 1:20 in o / p-litrophenyl-n-octyl ether and varnish with Parkettversiege as carrier material 1.: Ί mixed. The mentioned paint consists of the following components:

- Ricinusöl, einem Glycerinaustauschstoff aus reinstem Äthylen-- castor oil, a glycerine substitute of the purest ethylene

' Lj'Lj

glykol und Phthalsäureanhydrid in Butylacetat gelöst, glycol and phthalic anhydride dissolved in butyl acetate,

- TallöIfettsäure, Pentaerythrit, einem Glycerinaustauschstoff- Tall oil fatty acid, pentaerythritol, a glycerin substitute

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aus reinstem Athylenglykol und Phthalsäureanhydrid gelöst in XylGl/Butanol,.from the purest ethylene glycol and phthalic anhydride dissolved in xylGl / butanol.

- säurehärtender Holzlack mittlerer Viskosität in Porm eines Aminoplastlackharzes, bestehend aus Harnstoff und Formaldehyd, das: mit n-Butanol verethert ist und in 5Q%ige.r Lösung, von n-Butanol vorliegt ♦ ..'.'..Acid-hardening wood varnish of medium viscosity in the form of an aminoplastic varnish resin, consisting of urea and formaldehyde, etherified with n-butanol and present in 5% strength solution of n-butanol.

- 4- P 906- 4- P 906

Hierbei ist zu beachten, daß der säurehärtende HoIzlack als letzte Komponente zugesetzt.wird.It should be noted that the acid-curing Hoizlack added as the last component.

Die Glaskapillare wird nach Aushärtung der nitratsensitiven Membran mit 0,1 M KMO3; 0,1 M KCl-Mischlösung blasenfrei gefüllt und mittels Ag/AgCl-Ableitelektrode zur Mikroelektrode komplettiert.The glass capillary is after curing of the nitrate-sensitive membrane with 0.1 M KMO 3 ; 0.1 M KCl mixed solution filled bubble-free and completed by means of Ag / AgCl-discharge electrode to the microelectrode.

Claims (1)

- 5 - P 906  - 5 - P 906 ΞrfindungaanspruchΞrfindungaanspruch Sensitive Mikroelektrode zur Bestimmung von Uitrationenaktivitäten, bestehend aus einer Glaskapillare, deren Spitze mit einer flüssigkeitsundurchlässigen nitratsensitiven Membran gefüllt ist, und einem inneren Referenzeinsatz mit Ag/ÄgC1-Referenzelement, gekennzeichnet dadurch, daß die Glaskapillare silikonisiert ist und die Membran aus Tetraalkyl- oder Triarylalkylphosphoniumnitrat: besteht, das im Verhältnis von 1 : 20 in o/p-iTitrophenyl-n-oetylather mit einem lack (Verhältnis Äther : Lack = 1 : 1), wie er normalerweise als Parkettversiegelungs lack verwendet wird, bestehend im wesentlichen aus Komponenten auf ,der Basis von Phthalsäureanhydrid und eines Aminoplastharzes'V gelöst und ausgehärtet ist«Sensitive microelectrode for determining uritration activities, consisting of a glass capillary, the tip of which is filled with a liquid-impermeable nitrate-sensitive membrane, and an internal reference insert with Ag / AgCl reference element, characterized in that the glass capillary is siliconized and the membrane of tetraalkyl or triarylalkylphosphonium nitrate : consisting in the ratio of 1: 20 in o / p-iTitrophenyl-n-oetylather with a varnish (ratio ether: varnish = 1: 1), as it is normally used as a parquet seal varnish, consisting essentially of components on which Base of phthalic anhydride and an aminoplast resin 'V dissolved and cured
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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GB2473769A (en) * 2006-05-05 2011-03-23 Univ Utah Res Found Nanopore membrane
GB2473769B (en) * 2006-05-05 2011-06-22 Univ Utah Res Found Nanopore membrane
US8293083B2 (en) 2006-05-05 2012-10-23 University Of Utah Research Foundation Nanopore electrode, nanopore membrane, methods of preparation and surface modification, and use thereof

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