DD159817A1

DD159817A1 - REAGENT FOR ERYTHROCYTE MEASUREMENTS

Info

Publication number: DD159817A1
Application number: DD23103381A
Authority: DD
Inventors: Hans-Juergen Heckemann
Original assignee: Heckemann Hans Juergen
Priority date: 1981-06-23
Filing date: 1981-06-23
Publication date: 1983-04-06
Also published as: HU187728B; DE3207270A1

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Reagens fuer Erythozytenmessungen, insbesondere fuer die Erythozytenzaehlung. IhrZiel ist es, eine ausreichende Genauigkeit von Erythozytenmessungen und eine hohe Langzeitstabilitaet der Messapparatur und des -verfahrens bei geringen apparativen und Verfahrensaufwand zu gewaehrleisten. Der Erfindung lag die Aufgabe zugrunde, ein Reagens zu finden, das die Adsorbierbarkeit der Erythozyten stark herabsetzt ohne ihre Form zu veraendern. Als Reagens wurde ein Prophylenoxid-Eththylenoxid-Copolymer gefunden. Als zweckmaessig hat sich erwiesen: das Gewichtsverhaeltnis des Propylenoxidanteils zu dem Ethylenoxidanteil = 6:4, die Gesamt-Molmasse 3000g je Mol und die Konzentration 5-50 mg Reagens je Liter verduennten Blutes.The invention relates to a reagent for erythocyte measurements, in particular for erythocyte counting. Their goal is to ensure a sufficient accuracy of Erythozytenmessungen and a high long-term stability of the measuring apparatus and the method with low equipment and process costs. The invention had the object of finding a reagent which greatly reduces the adsorbability of erythrocytes without altering their shape. As the reagent, a propylene oxide-ethylene oxide copolymer was found. As expedient has been found: the weight ratio of the propylene oxide to the ethylene oxide = 6: 4, the total molecular weight 3000g per mole and the concentration of 5-50 mg of reagent per liter of dilute blood.

Description

Reagens für ErythrozytenmessungenReagent for erythrocyte measurements

Internationale Patentklassifikation:International Patent Classification:

G öl Έ - 15/06, - 15/07, - 33/16, - 33/48Oil Έ - 15/06, - 15/07, - 33/16, - 33/48

Anwendungsgebiet der Erfindung:Field of application of the invention:

Die Erfindung betrifft ein Reagens für Erythrozytenmessungen, insbesondere für die Bestimmung der Erythrozytenzahl und des gepackten Zellvolumens. Derartige Messungen werden üblicherweise in medizinischen Labors für diagnostische Zwecke durchgeführt,,The invention relates to a reagent for erythrocyte measurements, in particular for the determination of the erythrocyte count and the packed cell volume. Such measurements are usually performed in medical laboratories for diagnostic purposes,

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen:Characteristic of the known technical solutions:

Die Gewährleistung einer Genauigkeit von mindestens 3 % der Erythrozytenzählung und der Bestimmung des gepackten Zellvolumens ist Voraussetzung für eine zuverlässige Diagnose. Diese Genauigkeit ist mit Teilchenzählgeräten und Analysenautomaten, die mit mehrfach verwendeten Reaktionsgefäßen arbeiten, kaum zu erreichen. Auch- kontinuierlich arbeitendeThe assurance of an accuracy of at least 3 % of the erythrocyte count and the determination of the packed cell volume is a prerequisite for a reliable diagnosis. This accuracy is difficult to achieve with particle counters and automatic analyzers that work with multiply used reaction vessels. Also - continuously working

Geräte und Geräte mit Einmalgebrauchsgefäßen liegen nicht immer zuverlässig in dem genannten Genauigkeitsbereich. Als Ursachen für die großen Meßfehler (bis 3o .%) wurden bisher die Mikrohämolyse und die Aggregation der Erythrozyten angesehen. Zur Verringerung der Mikrohämolyse können Reaktionsgefäße aus einem speziellen Material, z.B« spezielle Polyethylene, hergestellt werden. Derartige Materialien sind teuer; ein Einsatz der aus ihnen hergestellten Gefäße muß mehrfach sein,' damit er ökonomisch . vertretbar ist. Die erreichbare Senkung der Meßfehler ist zwar erheblich, aber noch nicht ausreichend. Außerdem schwächt sich der Effekt nach häufigem Gebrauch ab. Zur Einschränkung einer Aggregation ist es naheliegend, die Messung kurz nach der Verdünnung- der Blutprobe durchzuführen. Aber auch hier ist eine Grenze durch notwendige Reaktionszeiten der Blutpartikel mit zugegebenen Reagenzien gesetzt. Die fehlerreduzierende Wirkung· dieser Maßnahme ist geringοDevices and devices with disposable containers are not always reliable in the specified range of accuracy. The causes of the large measurement errors (up to 3o .%) Have hitherto been regarded as microhemolytic and aggregation of the erythrocytes. To reduce the microhemolytic reaction vessels can be made of a special material, eg «special polyethylenes. Such materials are expensive; a use of the vessels produced from them must be multiple, so that he economically. is acceptable. The achievable reduction of measurement errors is considerable, but not sufficient. In addition, the effect weakens after frequent use. To limit aggregation, it makes sense to take the measurement shortly after dilution of the blood sample. But even here, a limit is set by the necessary reaction times of the blood particles with added reagents. The error-reducing effect of this measure is small

Untersuchungen des Anmelders haben als Hauptursache Adsorptionsvorgänge zwischen den Erythrozyten und den V/änden der Reaktionsgefäße ermittelt.Applicant's investigations have identified as the main cause adsorption processes between the erythrocytes and the walls of the reaction vessels.

'Diese Ursache ist als Fehlerquelle für die Zählung der Thrombozyten bekannt. Gemäß US-PS 4 l6o 644 kann dieser. Fehler durch Zugabe einer Polyethylenglykol-Lösung entweder zu der Thrombozytensuspension oder zu ihrem Lösungsmittel stark reduziert v/erden« Dazu soll schon eine geringe Menge genügen. Versuche, diese Lösung auch für Erythrozytenmessungen zu verwenden, brachten kein positives Ergebnis, auch bei Zugabe größerer Lösungskonzentrationen.'This cause is known as a source of error for the count of platelets. According to US Pat. No. 4,160,644 this can be. Errors greatly reduced by the addition of a polyethylene glycol solution either to the platelet suspension or to its solvent. "A small amount should suffice. Attempts to use this solution also for erythrocyte measurements, brought no positive result, even with the addition of larger solution concentrations.

Ziel der Erfindung:Object of the invention:

Zweck der Erfindung ist es, eine ausreichende Genauigkeit von Erythrozytenmessungen und eine hohe LangzeitStabilitätThe purpose of the invention is to provide sufficient accuracy of erythrocyte measurements and high long-term stability

- 3 „- 3 "

~ 3 - 7~ 3 - 7

..der Meßapparatur und des Meßverfahrens "bei geringem apparativen und Veffahrensaufwand zu gewährleisten«..der Meßepparatur and the measuring method "with low equipment and Veffahrensaufwand to ensure«

Darlegung des Wesens der Erfindung:Explanation of the essence of the invention:

Der Erfindung lag die Aufgabe zugrunde, ein· Reagens zu finden, das die Adsorbierbarkeit der Erythrozyten stark herabsetzt, ohne ihre Form zu verändern, und damit eine genaue Erythrozytenzählung und Bestimmung des gepackten Zellvolumens ermöglicht»It was an object of the present invention to find a reagent which greatly reduces the adsorbability of the erythrocytes without changing their shape and thus permits an exact erythrocyte count and determination of the packed cell volume.

Erfindungsgemäß wird als Reagens ein Propylenoxid-Ethylenoxid-Copolymer verwendet.According to the invention, a propylene oxide-ethylene oxide copolymer is used as the reagent.

Ausführungsbeispiel:Embodiment:

Der erfindungsgemäße Effekt ist vom Verhältnis der Bestands teile des Reagens und von ihrer Lösungskonzentration ab-' . häng'ig. Am stärksten ausgeprägt ist er bei einem Gewichtsverhältnis des Propylenoxidanteils zu dem Ethylenoxidanteil von etwa 6 : 4 und einer Gesamt-Molmasse von etwa 3ooo g je Als günstig hat sich eine Konzentration innerhalb des Bereiches 5~5o mg/1 erwiesen.The effect according to the invention is dependent on the ratio of the constituent parts of the reagent and on their solution concentration. häng'ig. Most pronounced it is at a weight ratio of the propylene oxide to the ethylene oxide content of about 6: 4 and a total molecular weight of about 3ooo g each as low has a concentration within the range 5 ~ 5o mg / 1 proved.

Das Reagens wird entweder dem Suspensionsmedium des Blutes, einer spezifischen Kochsalzlösung, oder dem verdünnten Blut zugegeben» Es bewirkt eine Senkung der ursprünglichen Grenz- flächenspannung der flüssigen Bestandteile des verdünnten Blutes, wodurch ihr Netz-, Emulgier- und Dispergiervermögen verbessert wird. Auf Grund dieser Veränderungen sinkt die Adsorptionsfähigkeit der Erythrozaten, so daß keine oder nur sehr wenige von ihnen in der Eahe der Gefäßwände festgehalte werden und nicht in die Messung eingehen.The reagent is added either to the suspending medium of the blood, to a specific saline solution, or to the diluted blood. It causes a lowering of the original interfacial tension of the dilute blood liquid components, thereby improving their wetting, emulsifying and dispersing properties. Due to these changes, the adsorption capacity of the erythrocytes decreases, so that no or only very few of them are retained in the vicinity of the vessel walls and do not enter into the measurement.

Claims

- £ 4 - Claim:

1 reagent for RBCs, characterized in that it consists of a propylene oxide-ethylene oxide copolymer.

Reagent according to item 1, characterized in that the weight ratio of the propylene oxide fraction to the ethylene oxide fraction is about 6. 4 and the total molecular weight is 3ooo g per mole. , , ; ^;

3. Reagent according to item 1 and 2, characterized in that it is used in a concentration of 5 mg - 5o mg per liter.