DD153241A1 - PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS - Google Patents
PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS Download PDFInfo
- Publication number
- DD153241A1 DD153241A1 DD22406680A DD22406680A DD153241A1 DD 153241 A1 DD153241 A1 DD 153241A1 DD 22406680 A DD22406680 A DD 22406680A DD 22406680 A DD22406680 A DD 22406680A DD 153241 A1 DD153241 A1 DD 153241A1
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- growth
- factors
- influencing
- detection
- organs
- Prior art date
Links
Abstract
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zum Nachweis von Wachstumsfaktoren, insbesondere zum Nachweis von Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Gesamtaktivitaet in organischen Materialien. Die Erfindung ist zur Anwendung in der pharmazeutischen Industrie, in der Human- und Veterinaermedizin sowie auf dem Gebiet der Wirkstoffsuche geeignet. Die Wirkstofforschung wird durch das erfindungsgemaesse Verfahren in die Lage versetzt, in organischen Materialien Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Gesamtaktivitaet sicher und schnell nachzuweisen. Die Aufgabe der Erfindung wird dadurch geloest, dass Gewerbe oder Organe zerschnitten, gewaschen und nach Abkuehlung lyophilisiert und in einem Naehr-, Reaktions- oder Inkubationsmedium inkubiert und mechanisch zerkleinert werden; die Gewebe- oder Organpraeparationen werden im biologischen Test, z.B. unter Verwendung von Zellkulturen, auf wachstumsbeeinflussende Gesamtaktivitaet geprueft.The invention relates to a method for the detection of growth factors, in particular for the detection of factors with growth-influencing overall activity in organic materials. The invention is suitable for use in the pharmaceutical industry, in human and veterinary medicine as well as in the field of drug discovery. Drug research is enabled by the method according to the invention to reliably and quickly detect factors with growth-influencing overall activity in organic materials. The object of the invention is achieved by cutting or washing trades or organs and, after cooling, lyophilizing them and incubating them in a nutrient, reaction or incubation medium and mechanically comminuting them; the tissue or organ preparations are tested in the biological assay, e.g. using cell cultures, tested for growth-influencing overall activity.
Description
frXXß _gum Nach we Js- yon Wachs^tumsj; ak „toren, Anwendungsgebiet der Erfindung frXXß _gum According to Js - yon waxingj; Actors, field of application of the invention
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zum Nachweis von Wachstumsfaktoren in Geweben, Organen und Organteilen· Sie betrifft insbesondere den Nachweis von Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Gesamtaktivität in unterschiedlichen Zellen, Geweben und Organen»The invention relates to a method for detecting growth factors in tissues, organs and organ parts. It relates in particular to the detection of factors with growth-influencing total activity in different cells, tissues and organs.
Die Erfindung ist von Bedeutung für das Gebiet der Wirkstoffsuche β Die Wirkstoffprschung wird durch das erfindungsgemäße Verfahren in die Lage versetzt», unter organischen Materialien diejenigen zu erfassen, die wachstumsbeeinflussende Faktoren enthalten· Hauptanwendungsgebiet ist die pharmazeutische Industrie* Weitere Anwendungsgebiete sind die Human- und Veterinärmedizin»The invention is of importance in the field of drug discovery. The drug discovery is enabled by the process of the invention to detect among organic materials those which contain growth-influencing factors. Main field of application is the pharmaceutical industry. Further applications are human and veterinary medicine »
£hj3raj<tej^^^£ hj3raj <tej ^^^
Bekannt sind wachstumsfördernde Faktoren, die in verschiedenen Geweben, Organen und Organteilen lokalisiert sind und die in Gewebe- oder Organextrakten angereichert oder aus diesen isoliert werden« So enthalten zeB« Corpus-luteum-Extrakte (Gospodarowicz, D.» and K9K4, Thakral» Proceed. Nat· Acad« Sei., USA, 75^ 847 - 851 (1978); Heder, GM W· Dakob, W, Halle, Be~ Mauersberger* G. Kambach, K8D8 Dentzsch, and P, Oehme, Exp« Path» 17^ 493 - 497 (1979)) und Rinderhirnextrakte (Gospodarowicz, D«, O, Biol. Chenw 250^ 2515 - 2520 (1975);There are known growth-promoting factors that are localized in various tissues, organs and parts of organs and that are enriched or isolated from tissue or organ extracts. "For example, Z e B contains corpus luteum extracts (Gospodarowicz, D." and K 9 K 4 , Thakral "Proceed Nat" Acad "Sci., USA, 75 ^ 847-851 (1978); Heder, G M W Dakob, W, Halle, B e ~ Mauersberger * G. Kambach, K 8 D 8 Dentzsch , and P, Oehme, Exp. Path. 17: 493-497 (1979)), and bovine brain extracts (Gospodarowicz, D., O, Biol. Chenw 250, 2515-2520 (1975);
-Z--Z-
Gospodarowicz, D0, Ηβ Bialecki,, and T*l<« Thakral, Εχρβ Eye Res* 28f 501-514 (1979)) Faktoren, die das Wachstum von Endothelzellen und Fibroblasten beeinflussen«, Auch bei den bisherigen Verfahren zum Nachweis von Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Aktivität ging man stets von Extrakten aus, die aus Zellen, Geweben oder Organen gewonnen und entweder in dieser Art als Rohextrakte oder nach ihrer weiteren Aufbereitung mittels physikochemischer oder anderer Trennverfahren als gereinigte Faktoren verwendet wurdeno Dieses Verfahren ist relativ aufwendig und besitzt erhebliche Nachteile t dadurch hervorgerufen t daß durch die Art der Gewinnung von Rohextrakten und deren weitere Aufbereitung Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Aktivität unterschiedlicher Molekülgröße verloren gehen oder daß ihre wachstumsbeeinflussenden Eigenschaften so weit verändert werden kön~ hen, daß sie sich im biologischen Test als inaktiv in Bezug auf diese Eigenschaften erweisen^ Desweiteren kann durch diese Behandlung eine synergistische Wirkung mehrerer Komponenten .verloren geherioGospodarowicz, D 0 , β Bialecki, and T * l <"Thakral, Εχρ β Eye Res * 28 f 501-514 (1979)) Factors Affecting the Growth of Endothelial Cells and Fibroblasts" detection of factors with growth-affecting activity is always went from extracts of, were recovered from cells, tissues or organs and either used in this type as crude extracts or following its further processing by means of physicochemical or other separation methods as purified factors o this method is relatively complicated and has considerable disadvantages t characterized caused t that is lost by the method of production of crude extracts and their further processing factors with growth-affecting activity of different molecular size, or that their growth-influencing properties Kgs be changed as far ~ hen that they are in the biological test as inactive in terms to prove these qualities ^ Desweit This treatment can result in a synergistic effect of several components
Ziel der ErfinduniAim of the invention
Es ist das Ziel der Erfindungs ein Verfahren zu entwickeln* mit dessen Hilfe sich wachstumsbeeinflussende Faktoren in Zellen, Geweben und Organen mit einfachen Mitteln nachweisen lassen« It's the goal of developing the invention, a method * with the help of which growth influencing factors in cells, tissues and organs can be detected by simple means "
Darlegung des Wesens der ErfindunqExplanation of the essence of the invention
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, durch ein Präparationsverfahren Zellen* Gewebe und Organe so zuzubereiten, daß sie auf wachstumsbeeinflussende Gesamtaktivitäten getestet werden können« Die Aufgabe wurde dadurch gelöstf daßThe invention has for its object to prepare by a preparation process cells * tissue and organs so that they can be tested for growth-influencing overall activities «The task was solved f
organische Materialien mechanisch zerkleinert, mit isotonischen Salzlösungen oder mit Aqua bidest· gewaschen, anschließend abgekühlt und lyophilisiert und danach in einem Reaktions- oder Inkubätionsmedium ,wie z«B· in Nährmedien für Zellkulturen oder in isotonischen Salzlösungen, bei Temperaturen von 15° bis 400C für 5 bis 45 Minuten inkubiert werden· Falls erforderlich, ist danach eine weitere mechanische Zerkleinerung, ZeB» durch P^JLpettierung des Gemisches, bestehend aus Reaktions- oder Inkubationsmedium und lyophilisierten Örganstückchen, möglich«, Die Wirkung der gesamten Vorbehand-. lung besteht in einem weitestgehenden Aufschluß der Zellen, so daß Zellinhaltsstoffe und extrazelluläres Material in das Medium freigesetzt werden»mechanically crushed organic materials, washed with isotonic saline or with double-distilled water, then cooled and lyophilized and then in a reaction or incubation medium, such as in nutrient media for cell cultures or in isotonic saline solutions, at temperatures of 15 ° to 40 0th C may be incubated for 5 to 45 minutes. If necessary, subsequent mechanical comminution is possible thereafter, by p.preparation of the mixture consisting of reaction or incubation medium and lyophilized organics. The effect of the total pretreatment. treatment consists in the most extensive digestion of the cells, so that cell contents and extracellular material are released into the medium »
Die Verwendung der erfindungsgemäßen Gewebe- oder Organpräparation gestattet die sichere Bestimmung der Gesamtaktivität wachstumsbeeinflussender Faktoren in unterschiedlichen Geweben und Organen unter Verwendung eines entsprechenden Reaktions» oder Inkubationsmediums in unterschiedlichen biologischen Testsystemen©The use of the tissue or organ preparation according to the invention allows the safe determination of the total activity of growth-influencing factors in different tissues and organs using a corresponding reaction or incubation medium in different biological test systems ©
Anhand einiger Beispiele soll der Nachweis von Faktoren mit wachstumsbeeinflussender Gesamtaktivität in organischen Materialien näher erläutert werden«By means of some examples, the proof of factors with growth-influencing total activity in organic materials will be explained in more detail «
1. Chorioallantoismembran-Präparation Eine Chorioallantoismembranr-Präparation wird zum Nachweis ihrer wachstumsbeeinflussenden Gesamtaktivität wie folgt gewonnen und im Zellkulturtest eingesetzt: Etwa 5 cm große Chorioallantoismembran-Teile aus Hühnereiern, nach einer Bebrütungszeit von 12 Tagen isoliert, werden mehrmals in Aqua bides.te gewaschen und nach schneller Abkühlung auf -600C lyophilisierte Die mechanisch weiter zerkleinerten Stückchen werden dann in einem KuI-1. chorioallantoic membrane preparation A Chorioallantoismembranr preparation is obtained for the detection of their growth influencing overall activity as follows, and used in cell culture test: about 5 cm chorioallantoic membrane parts from chicken eggs, isolated after incubation for 12 days, several times bides.t in Aqua washed e and after rapid cooling to -60 0 C lyophilized e The further mechanically comminuted chips are then in a KuI-
turgefäß mit einem Nährmedium zur Kultivierung tierischer Zellen, wie zoBe Minimal Essential Medium .nach EAGLE, überschichtet und bei einer Temperatur von 22 C für 20 bis 30 Minuten inkubiert» Zum Nachweis der Änderung der Wachstumsaktivität unter Einwirkung der Chorioallantoismembran-Präparation dient die quantitative Bestimmung entweder der Zellzahl oder des DNS- oder Proteingehaltes im Zellkulturtest, zeB» unter Verwendung von in vitro kultivierten Endothelzellen aus Kälberaorten und von Fibroblasten aus Mäuseembryonen«turgefäß with a nutrient medium for the cultivation of animal cells, such as z o B e Minimal Essential Medium., After EAGLE, overlaid and incubated at a temperature of 22 C for 20 to 30 minutes »To demonstrate the change in growth activity under the influence of the chorioallantoic membrane preparation is the quantitative determination of either the cell count or the DNA or protein content in the cell culture test, z e B "using in vitro cultured endothelial cells from calf aortas and from mouse embryo fibroblasts"
Wie aus der Tabelle 1 zu entnehmen ist, zeigen die erfindungsgemäß hergestellten Chorioallantoismernbran-Präpa" rationen, in einer Menge von 10 bis 100 /jg pro ml Nährmedium eingesetzt, sowohl bei den Endothelzellen als auch bei den Fibroblasten in der Zellkultur eine wachstumsbeeinflussende Gesamtaktivität, nachgewiesen durch einen statistisch signifikanten Anstieg der Zellzahl gegenüber . den Kontrollkulturen, denen keine Chorioallantoismembran-Präparationen verabreicht wurden©As can be seen from Table 1, the Chorioallantoismernbran-Präpa according to the invention show "configurations used in an amount of 10 to 100 / jg per ml of nutrient medium, both in the endothelial cells as well as fibroblasts in the cell culture a growth affecting overall activity, as demonstrated by a statistically significant increase in cell number over control cultures to which no chorioallantoic membrane preparations were administered ©
2e Corpus-luteum-Präparation2e corpus luteum preparation
Eine Corpus-luteum-Präparation wird zum Nachweis ihrer wachstumsbeeinflussenden Gesamtaktivität wie im Beispiel 1 beschrieben hergestellt und an Gefäßendothelzellen in der Zellkultur getestet» Es kann ebenfalls das Vorhandensein einer wachstumsstimulierenden Aktivität in der Corpus~luteum~Präparation nachgewiesen werden.»A corpus luteum preparation is prepared as described in Example 1 for detection of its growth-influencing total activity and tested on vascular endothelial cells in cell culture. "The presence of a growth-stimulating activity in the corpus luteum preparation can also be detected."
. . ' .. 2 24 Q. , , '.. 2 24 Q.
- 5 - . - 5 -.
Erhöhung der Zellzahl durch eine Chorioallantoismembran-Präparation bei Gefäßendothelzellen in der 6· bis 8O Sub· kultur Und bei Mäuseembryofibroblasten·Increase in cell number by a chorioallantoic membrane preparation in vascular endothelial cells in the 6 to 8 · O · Sub Culture and in mouse embryo fibroblasts ·
Konzentrationconcentration
Endothel zellen Endothelium cells
O (Kontrollen) 219 920 +O (controls) 219 920 +
5 209 520 +5 209 520 +
3.0 255 200 *3.0 255 200 *
50 302 000 Ψ50 302 000 Ψ
100 293 360 +100 293 360 +
Claims (2)
abkühlt und lyophilisiert wirde 2 * Process according to item 1, characterized in that organic material is heated to temperature «
cools and lyophilizes e
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD22406680A DD153241A1 (en) | 1980-09-23 | 1980-09-23 | PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD22406680A DD153241A1 (en) | 1980-09-23 | 1980-09-23 | PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD153241A1 true DD153241A1 (en) | 1981-12-30 |
Family
ID=5526402
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD22406680A DD153241A1 (en) | 1980-09-23 | 1980-09-23 | PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD153241A1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0257995A1 (en) * | 1986-08-21 | 1988-03-02 | President And Fellows Of Harvard College | Growing keratinocyte megacolonies, and their use in assays |
-
1980
- 1980-09-23 DD DD22406680A patent/DD153241A1/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0257995A1 (en) * | 1986-08-21 | 1988-03-02 | President And Fellows Of Harvard College | Growing keratinocyte megacolonies, and their use in assays |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE4323567B4 (en) | Aucubin for the treatment of hepatitis B virus infection | |
| EP1003786B1 (en) | Peptide with radio protective effect | |
| DE3027105A1 (en) | METHOD FOR PRODUCING A FACTOR STIMULATING THE PROLIFERATION AND DIFFERENTIATION OF HUMAN GRANULOPOETIC STEM CELLS | |
| EP0151246B1 (en) | Polypeptide inhibitor of the activity of alpha-amylase, process for its preparation, its use, and pharmaceutical preparations | |
| DE60019506T2 (en) | Laminaria algae extract, process for their preparation and cosmetic or pharmaceutical compositions containing them | |
| EP0140134B1 (en) | Process for the preparation of a biologically active extract | |
| DE102006056766A1 (en) | Use of compatible solutes | |
| DE3402647C2 (en) | Process for the recovery of colony stimulating factor and kallikrein from human urine | |
| Levin et al. | Partial purification and some properties of an antibacterial compound from Aloe vera | |
| EP0220453B1 (en) | Use of extracts of plant pollen in the manufacture of pharmaceutical preparations which reduce the growth of tumour cells, and process for preparing the same | |
| DE2645993A1 (en) | AGENT AGAINST MYELOIC LEUKAEMIA AND ITS MANUFACTURING METHOD | |
| DE2923144A1 (en) | VACCINE FOR THE PROPHYLAXIS AND TREATMENT OF TRICHOPHYTIA CAUSED BY TRICHOPHYTON MENTAGROPHYTES AND THEIR PRODUCTION | |
| DD153241A1 (en) | PROCESS FOR DETECTING GROWTH FACTORS | |
| Nienhaus et al. | Thymus stimulation and cancer prophylaxis by Viscum proteins | |
| DE3434122A1 (en) | METHOD FOR PRODUCING INTERFERON | |
| DE3716907C2 (en) | ||
| DE69918953T2 (en) | COMPOSITION OF OLIGOSACCHARIDES FOR REGULATING APOPTOSIS | |
| DE4006609A1 (en) | INHIBITOR OF PROLIFERATION OF ENDOTHEL CELLS | |
| DE1017744B (en) | Process for obtaining growth-promoting substances for therapeutic purposes | |
| DE3524794A1 (en) | Pharmaceutical product containing live, viable embryo cells, process for its production and test method for determining the pharmaceutical activity | |
| Rabes et al. | Proliferationskinetik der Hepatocyten in primären Leberkulturen | |
| DE2227173A1 (en) | ||
| KR20000016714A (en) | Vegetable extract, method for preparation thereof and its applications in human and veterinary medicine | |
| DD232509A5 (en) | METHOD FOR THE PRODUCTION OF LYMPHOTOXINE AND LYMPHOTOXIN-MRNA | |
| Fritsch | Über den Einfluß des hydrostatischen druckes auf die ultrastrukturen von zellen und geweben. I. Untersuchungen am Kiemenepithel marine Muscheln |