CZ327896A3 - Adenosine derivatives, process of their preparation, the use of said derivatives for preparing medicaments, the derivatives used for therapy and pharmaceutical composition containing thereof - Google Patents

Description

Adenosinové deriváty, způsob jejich přípravy, to derivátů pro přípravu Léčiv, tyto deriváty při léčení a farmaceutická kompozice tyto der cí použití těch-! pro použití-3 ' váty obsáhajíQblast techniky

Vynález se týká adenosinových derivátů a vého použití agcnizujících činidel receptorů AI

Podstata vynálezu

ve kterém

Rj znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující až 4 uhlíkové atomy, allylovou skupinu, methallylovou skupinu, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkyLovou skupinu obsahující 3 až 8 uhlíkových atomů, hydroxycykloalkylovou skupinu obsahující 4 až 8 uhlí2 kových atomů, fenylovou skupinu mono- nebo vzájemně nezávisle di-substituovanou halogenem s atomovým čí; lem 9 až 35, aikyiovou skupinou obsahující I až 4 uhlíkové atomy, alkoxy-skupinou obsahující ! až i uhlíkové atomy nebo trifluormethylovou skupinou, nebo fenvlalkylovou tek obsahuje 1 až 4 skupinu, ve které alkylový zbyuhlíkové atomy a fenylový kruh je nesubstituován nebo mono- nebo vzájemné nezávisle di-substituován halogenem s atomovým číslem 9 až 35, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy·, alkoxy-skupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy nebo trifluormethylovou skupinou, alkylovou skupinu obsahu jící alespoň jednu hydroxy-skupinu nebo alespoň dvě fenylové skupiny, bičykloalkylovou skupinu_jako endonebo exo-bicyklo/2,2,1/heptylovou skupinu, naftyiaiky lovou skupinu, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy, acenaftylenylalkylovou skupinu, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy nebo skuoinu obecného vzorce A nebo obecného vzorce 3

ve kterém

Z znamená atom vodíku, hydroxy-skupinu nebo alkoxy-skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,

Q znamená atom vodíku nebo hydroxy-skupinu,

A	znamená	skupinu -CH..,-, -0-, -S- nebo přímou vazbu,
v	znamená	skupinu nebo přímou vazbu,
n·	znamená	c e l e c 131. o o c i qq z,
při	čemž přeruš	ováná čára ve vzorci A znamená případnou vaz
bu,

R₂ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, aminovou skupinu, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 5 uhlíkových atomů nebo atom halogenu s atomovým číslem 9 až 35 a znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy.

Některé z těchto sloučenin, jako například, sloučeniny, ve kterých R. je odlišný od hydroxycykloalkýlové skupiny, jso známé a popsané například ve zveřejněné bristké patentové přihlášce 2 226 027 A a evropských patentových přihláškách EP-Q-378513 a ΞΡ-Ο-259 574, jakož i v patentech US 4,843,066 a 4,985,049.

Ve výše uvedených vzorcích mají substituenty 2', 3', 4' a 3' tetrahydroíuranového kruhu konfiguraci jako v adenosinu.

V jedné skupině sloučenin obecného vzorce I, R₁ je jiný než hydroxycykloalkylová skupina. V jiné skupině sloučenin obecného vzorce I, R^ znamená hydroxycykloalkylovou skupinu obsahující 4 až 8 uhlíkových atomů.

Výhodně je sloučeninou obecného vzorce I 6-cyklohexyl2'-O-methyladenosin, který bude dále uváděn jako sloučenina

M.

vzorce

A i-Adenosinová účinnost u výhodných sloučenin obecného I může být typicky stanovena následujícím způsobem.

Afinita k adenosinovým receptorům

Způsobem popsaným H.Bruns-em a kol·, v Molecular Pharmacology 29 (1986), str. 331-344 se připraci prasečí srriatální membrány. K označení jak A., tak i A_?-receptorů se použije činidlo H-NFCA, což je neselektivní agonizující činidlo adenoslnových receptorů. Hodnoty IC-θ se odvodí zvytěsňovacích křivek za použití vážené nelineární metody nejmenších čtverců upravené pro Langmuirovu rovnici, načež se vypočtou hodnoty ρΚ_β.

Tabulka

Afinita adenosin-receptorových ligandů pró řecépúóřý^Aý'a? A’^'' '

	A1 (KD,nM)	A2 (Κθ,ηΜ)	A,.-A2 selektivita *	n
CPA	0,74+0,08	930+110	1260	6
CV 1808	2460+757	269+70	0,1	5
CGS 21680	4360+1080	18,6+4	0,004	4
Sloučenina M	23+2	24500+5160	1090	5
1,5 H2O

CPA = cyklopentyladenosin

CV 1808= 2-fenylaminoadenosin (Carbohydrates,sv.81, 1974, ref.91898 K)

CGS21680= 2-/p-(2-karboxyethyl)fenethyIamino/-5'-N-ethylkarboxamido-adenosin (Faser J.,1989,3(4),ref.4770/3).

Z literatury je známo, že prcdukt T?A je pctenc.ním a vysoce selektivním vytěsňujícím činidlem vazby k receptoru a produkt CVI303 je relativně slabým avšak selektivním ligandem receptorů A-,, přičemž produkt CG32’ó30 vykazuje vysokou potenci a selektivitu oro recector A...

*· - - z

Sloučenina M vykazuje ve formě 1,5-hydrátu dobrou afinitu a vysokou selektivitu pro receptor Aj ve srovnání s receptorem a^.

Známé sloučeniny obecného vzorce I jsou známé jako antihypertensní činidla a jako koronární vasodilatátory.

Kromě toho je známo, že sloučeniny obecného vzorce I chrání vaskulární endotel tím, že inhibuje jak agregaci trombocytů,tak i aktivaci leukocytů. Tyto sloučeniny rovněž snižují hladinu lipidů v krvi. Navíc mají sloučeniny obecného vzorce I ochranný účinek proti nemocem způsobeným nyoertensí, jakými jsou kongestivní srdeční selhání, infarkt myokardu nebo náhlá srdeční smrt nebo renální i.osuficience (viz evropské patentové přihlášky ΞΡ-0-373 513 a EP-Q-269 574) .

Tyto sloučeniny jsou rovněž známé jako léčiva pro léčení neurodegenerativních poruch, periferních neuropatií, jakou je diabetická neuropatie, a poruch sdružených s periferními vaskulárními chorobami nebo/a poruch sdružených s neuronální degenerací, hyperglyceridemie/nízké hladiny KDL cholesterolu, lipidové dysfunkce, zvýšené hladiny volných mastných kyselin nebo diabetes typu I nebo typu II, včetně insulino-nedependentní cukrovky, arytmií, zejména paroxysmální supraventrikulární tachykardie a tachykardiální atriální fibr láce a jako prostředky chránící proti infarktu myokardu.

Přihlašovatel nyní nově zjisc ho vzorce I jsou mimořádně zajímavým , že sloučeniny obecnéanalgetiky, například pro tišení oiesti, například akutn nebo chronické bolesti.

Anč iticka účinnost :e I oy· ia prokázána jejich anaigetickou účinnost při standardních testech s pokusnými zvířaty, například za použití zánětových a neuropatických modelů, například snížením persistentní záně tové mechanické hyperanalgesie /testy a) a b))/ a persistentní neurcpatické termální hyperanalgesie /test c)/, která před stavuje chronickou neuropatickou bolest.

Zánětová hyperanalgesie

Test a)

Hyperanalgesie indukovaná Freundovým činidlem

Krysám se injikuje nitrokloubově do jednoho kolenního kloubu kompletní Freundovo adjuvans (100 mikrolitrů).

CJ krysy klesá snesitelná zatížitelnost ošetřené končetiny a tato zatížitelnost je potlačena po dobu až 5 dnů: Tento jev je ukazatelem mechanické hyperanalgesie, přičemž tato hyperanalgesie jeví odezvu na podávání NSAID a opiátů. Sloučeniny obecného vzorce I se podávají injekcí a výhodné perorálně v dávkách od asi 3 do 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti pokusného zvířete. Za účelem stanovení reverze hyperanalgesie se měří schopnost pokusného zvířete snášet zvýšené zatížení ošetřené končetiny.

Sloučenina M vykazuje při tomto testu obzvláště zajímavou účinnost při perorálním podání dávek od asi 3 do asi 60 mikrogramů na kilogram těLesné hmotnosti pokusného zvířete při trvání účinku po dobu asi jedné hodiny. Neexistuje zde žádný významný rozdíl v odezvě mezi dávkami 3, 30 a 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti, což vede k závěru, že maximálního účinku se dosahuje v rozmezí 3 až 30 mikrogramů na kilogram těLesné hmotnosti.

Test b) • Mechanická hyperanalgesie indukovaná terpentýnem

Lokální intraplantární injekce směsi terpentýnu a parafinu do krysí tlapky (levá zadní končetina) má za následek lokální zánětovou odezvu a snížení prahu snesitelnosti při mechanickém stimulu (tlak na tlapku, mezní zátěž 340 g). Sloučeniny obecného vzorce I jsou při tomto účinné při dávkách od asi 1 do 100 mikrogramů na kilogram tělesnéhmotnosti podaných peroráíně nebo subkutánně tři dny po výše uvedené intraplantární injekci, přičemž se meze snesitelnost mechanické zátěže měří 1 a 3 hodinv po aolikaci účinné sloučeniny.

Sloučenina M vykazuje významnou účinnost v rámci tohoto testu při dávkách 30 a 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti při perorálním podání. Morfium má při tomto testu hodnotu rovnou 1,2 mg/kg tělesné hmotnosti při subkutánním podání.

Neuropatická hyperanalgesie

Test c)

Neuropatická termální hyperanalgesie (podle metodiky Z.Seltzera a kol., Pain, 1990, 43, 205-213)

Unilaterální parciální ligace ischiatického nervu eliminuje vlákna v průběhu inervace krysí tlapky. U krysy dojde k rozvoji hyperalgesie k mechanickým a tepelným stimulům a k allodynii částečně denervované tlapky, aniž by přitom došlo k autotomii. Pokusná zvířata se umístí do boxu z plexiskla na tenkou skleněnou desku a na povrch chodidla tlapky se aplikují rostoucí tepelné stimuly. Přicom se měří reakční doba uplynulá mezi aplikací tepelného stimulu a odtažení ,3 tiap<y. bícucer.i.T/ coecr.sr.c vzoroe i jsou pri tomto testu účinné při dávkách od asi 1 do asi 100 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti (při subkuzánním nebo výhodně perorálním podání) podaných 12 až 15 dnu po uvedené ligaoi nervu. Sloučenina >! je obzvláště účinná proti termální hyperalgesii. Sloučenina M vykazuje významnou účinnost při dávkách 30 az 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti, přičemž maximální účinek vykazují při dávce 30 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti. Její činí asi 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti při perorálním podání.· Morfium má při tomto testu hodnotu Εϋ₅θ rovnou při subkután ním podání asi 3 mg/kg.

Klinické testy ⁷ · * A j·»' <r*' S*- ' k 'L'^<

Klinické testy mohou být provedeny následujícím způsobem. Pacientům trpícím bolestí mající formu postoperační bolesti nebo postherpeticke neuralgesie se podají sloučeniny obecného vzorce I, zejména sloučenina M, v dávce cd 0,02 do 5 mg. Lze pozorovat utišení bolesti. ’

Sloučeniny podle vynálezu jsou proto užitečné jako analgetika, například proti akutní nebo chronické bolesti, například proti chronické neuropatické bolesti.

Předmětem vynálezu je proto skutečnost, že je poskyt nut způsob léčení bolesti, jehož podstata spočívá v tom, že se subjektu, který takové léčení potřebuje, podá terapeutic ky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I, která byla definována výše.

Dalším předmětem vynálezu je použití sloučeniny obec ného vzoroe I, která byla definována výše, jako analgetika při přípravě léčiva vhodného pro léčení bolesti.

Dalším předmětem vynálezu je poskytutí analgetické kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje výše definovanou sloučeninu obecného vzorce I jako analgetikum v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem .

Farmakologické indikace sloučenin obecného vzorce I zahrnují bolest, například akutní bolest spojenou s poškozením tkáně a zánětem (například postoperační bolest, bolest způsobená popáleninami, úrazy a pod.), chronickou zánětovou bolest (například při artritidě) a chronickou neuropatickqu bolest (například bolest při diabetické neuropatii, herpetické neuralgii, roztroušené sklerose, kausalgii, atd.).

Dávky sloučeniny použité v rámci výše uvedenycn indikacích budou samozřejmě závislé na konkrécní použité sloučenině, na vážnosti léčeného stavu, na stavu léčeného subjektu a na jeho tělesné hmotnosti, na způsobu podání a na relativní účinnosti použité sloučeniny. Nicméně obecně se uspokojivých výsledků u zvířat dosáhne při podání tří denních dávek od asi 1 do asi 100 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti, například 3 až 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti, zejména 10 až 60 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti.

U větších savců, například u lidí, se podává denní dávka od asi 0,1 do asi 10 mg, vhodné podaná v jednotkových dávkách od asi 0,02 do asi 5 mg, přičemž takové jednotkové dávky vícekrát než jednou denně, například dvakrát, třikrát, čtyřikrát, pětkrát nebo šestkrát denně, avšak výhodné jednou nebo dvakrát denně.

Při výše uvedeném testu a) má NSAID ibuprofen hodnotu ED^q rovnou asi 4 mg/kg při perorálním podání, přičemž indomethacin má hodnotu Εϋ^θ rovnou 13 mg/kg při perorálním podání. Sloučenina M je asi třistakrát účinnější. U sloučeniny M se výhodné dávkové rozmezí pohybuje od asi 0,1 mg/den do asi 10 mg/den, například mezi 3 a 30 mikrogramy na kilogram tělesné hmotnosti u dospělého pacienta s tělesnou hmotností co v závislosci na vážnoscí Léčeného stavu kilogramů, a a četnosti oodání.

(J sloučeniny M bylo prokázáno, že při jednorázových dávkách dosahují' cházi k žádným vážným ích až 5 mg při perorálním podání nepříznivým účinkům.

nedoV případě, že je zde použit výraz farmaceuticky přijatelný, potom se tento výraz vztahuje k materiálům, které jsou vhodné pro použití v humánní a veterinární medicíně.

•s*:

Sloučeniny podle vynálezu mohou být formulovány za úče lem podání libovolným vhodným způsobem, přičemž volba výhod' ·'něho zpu^bu' ‘ podaní závisí 'ná po*řušé,' která 'je podáním léčena a výhodně se slouč dávkové formě nebe ve podána v jediné dávce orální, rektální, top intramuskulární podán ni.na podle vynálezu podává v jednotkové formě, která může být lidskému pacientu

Výhodné je kompozice vhodná pro percké, parenterální, intravenosní nebo

Kompozice podle vynálezu mohou mít formu tablet, kapslí, tobolek, lékovek, prášků, granulí, pastilek, čípků, rekonstituovatelnýcn prášků nebo kapalných přípravků, jakými jsou sterilní parenterální roztoky nebo suspenze. Uvažuje se rovněž o topických formulacích v případě, kdy budou takové přípravky vhodné.

Za účelem dosažení reprodukovatelnosti podání je výhod né, když kompozice podle vynálezu má formu jednotkové dávky.

Jednotkovými dávkovými formami mohou být v případě perorálního podání tablety a kapsle obsahující 0,02 až 5 mg sloučeniny podle vynálezu, přičemž tyto tablety a kapsle mohou obsahovat konvenční pomocné látky, jakými jsou pojivá, jako například sirup, akácie, želatina, sorbitol, tragant nebo polyvinylpyrreíidon, plniva, jako například laktosa, cukr,

1 vápenatý, sorbitol nebo giycin, říklad stearát hořečnatý, desi.clad škrob, zesitovany polyvr— sodný nebo mikrokrysoalická přijatelná smáčedla, jako nakukuřičný škrob, fosforečnan tabletizační maziva, jako nap integrační činidla, jako např nylpyrroiidon, škrob-glykolát celulosa, nebo farmaceuticky příklad laurylsulfát sodný.

Uvedené pevné perorální kompozice mohou být připraveny konvenčními postupy zahrnujícími, směšování, plnění, tabletování a pod.. Za účelem distribuce účinné látky v kompozicích, ve kterých je použito velké množství plniv, mohou být použity opakované směšovací operace.

,».C ‘ Takové operace ovsem patři mezi konvenčni operace dosavadního stavu techniky. Uvedené tablety mohou být ovrstveny za použití velmi dobře známých metod v normální farmaceutické praxi, přičemž se tablety ovrství zejména enterickým povlakem .

Perorální kapalné přípravky mohou mít například formu emulzí, sirupů nebo elixírů anebo mohou mít formu suchého produktu určeného pro rekonstituci s vodou nebo jiným vhodným kapalným vehikulem bezprostředně před vlastním podáním. Takové kapalné přípravky mohou obsahovat konvenční přísady, jakými jsou suspendační činidla, například sorbitol, sirup, methylcelulosa, želatina, hydroxyethylcelulosa, karboxymethylcelulosa, gel stearátu hlinitého, hydrogenované jedlé tuky, dále emulgační činidla, jako například lecitin, sorbitanmonooleát nebo akácie, nevodná vehikula (která mohou zahrnovat jedlé oleje), například mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, estery olejů, jako estery glycerinu, propylenglykol nebo ethylalkohol, konzervační činidla, jako například methyl nebo propyl-p-hydroxybenzoát nebo kyselina askorbová, a případně konvenční ochucovací činidla nebo barviva.

Dále jsou uvedeny příklady pevných perorál.ních kompozic, napřilátu s ření slouř i Č 6 ΓΠ ž v í formuiaklad tablety nebo kapsle.

Tablety jsou vylisovány z kapslového granu odpovídajícím množstvím účinné látky. Pro zapcuzd ceniny M jsou použity žluté kapsle velikosti 3, p následující tabulce jsou uvedena příslušná složen cí s obsahem účinné látky 0,7 resp. 5 mg.

Složka :···„./, . ·_______' ' .i,·.. ,·-. ·*···«-«-·> .,>·.> ··>'' ·’, ·.··· '·-··'·. v.' AM·····.· .	Obsah v tabletě/kapsli s obsahem účinné látky
0,7 mg v t .-----. ··. . v	, _ . < , 5? 0. mg,. _
Sloučenina M	0, 1	A ,n f --s
Mikrokrystalická celu-
losa	76,92	74,96
Hydratovaná laktosa	87,63+	34,694-
Polyvinylpyrrolidon	7,4	7,4
Krospovidon	7,4	“7 t / f t
Stearát hořečnatý	0,925	0,925
Zadržená vlhkost	4,625	4,625
Kapsle velikosti tři	50	50
Teoretická hmotnost
náplně kapsle nebo
tablety	7 8 5	185
Teoretická hmotnost
kapsle	235	235
+) množství laktosy je	nastaveno	pro kompenzaci množství

vlhkosti v účinné látce.

Uvedené sloučeniny mohou být rovněž podány ve formě galenioké formy s regulovaným pozvolným uvolňováním účinné látky za účelem dosažení prolongovaného trvání účinku účinné látky. Pro zajištění takového pozvolného uvolňování účinné látky lze použít libovolný konvenční systém regulovaného uvolňování účinné látky, jakým jsou například ovrstvěné pelety nebo osmotické systémy typu push-pull.

Pro parenterální podání se kapalné jednotkové dávkové formy připraví za použití účinné sloučeniny a sterilního vehikula, přičemž v závislost na použité koncentraci může být účinná sloučenina v daném vehikulu bu<3 suspendována nebo rozpuštěna. Při přípravě roztoků může být sloučenina rozpuštěna v póiyébhýlénglýkolu nebo ethanolu, zredena vodou pro injekci a sterilizačně zfiltrována před naplněním do vhodné iékovky nebo ampule, ve které se potom vzduchotěsně uzavře resp. zataví. Výhodně mohou být ve vehikulu rozpuštěny přísady, jakými jsou lokální anestetika a konzervační a pufrovací činidla. Parenterální suspenze se připraví v podstatě stejným způsobem s výjimkou spočívající v tom, že se účinná sloučenina namísto rozpuštění ve vehikulu v tomto vehikulu suspenduje, přičemž sterilizace nemůže být provedena sterilizační filtrací. Účinná sloučenina může být v tomto případě sterizilována vystavením účinku ethylenoxidu a to ještě před suspendováním ve sterilním v ehikulu. Výhodně kompozice obsahuje povrchově aktivní nebo smáčecí činidlo a to za účelem usnadnění jednotné distribuce účinné sloučeniny.

Uvedené kompozice mohou obsahovat od asi 0,1 do asi 99 % hmotnosti, výhodně od 10 do 60 % hmotnosti účinné látky a to v závislosti na způsobu podání.

Sloučenina M podle vynálezu nebo její hydrát nebo adiční produkt s ostatními rozpouštědly nebo její soli mohou být rovněž použity ve formě topické formulace v kombinaci s konvenčními topickými pomocnými látkami.

Topické formulace mohou míz nap krémů nebo lotionů, impregnovaných ebv tvcinek, sorejů a aerosolu, oricemz z v obsahovat příslušné konvenční přísady vační činidla, rozpouštědla podporují-; látky a tišící prostředky pro masti a ce mohou obsahovat slučitelné konvenč: krémové a mastové základy a ethanol rn loutiony.

• 3 -· · 7 _:-*o 3 · τ . r* λ ’ .-i ”·/ — -> “ r τι h ¹ η <~· o T C Γ ^1! jakými jsoa kcr.zerí oanalraci účinná krémy. Tyto formuiaí nosiče, jakými jsou bo oieylalkohoi pro

Vhodné krémy, lotiony, gely, masti, spreje nebo aerosolové formulace, které mohou být použity v případě sloučenin obecného vzorce I nebo jejich hydrátů nebo adičních pro‘ů^Óstatňrmi^řčzpďúšťédlý^áhébo‘jejich solí, jsóu konvenčními formulacemi, které jsou ve farmaceutická praxi veimi dobře známé a která jsou například popsané ve standardních farmaceutických nebo kosmetických publikacích, jakými jsou například Harryů Cosmeticology, publ. Leonard Hill Books, Remingtonů Pharmaceutical Sciences a Lékopisy Velké 3ritánie a Spojených států amerických. »

Dalším předmětem vynálezu jsou adenosinové deriváty obecného vzorce Ta

(Ia) vs krerém

R^' znamená cykloalkylovou skupinu obsahující 4 až S uhlíkových atomů a substituovanou hydroxy-skupinou,

R? má výše uvedený význam nebo výhodně znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy nebo halogen s atomovým číslem 9 až 35 a

R^ má výše uvedený význam.

Sloučeniny obecného vzorce la mohou existovat ve formě enantiomerů nebo ve formě diastereomerních směsí.

V obecném vzorci la halogenem s atomovým číslem 9 až 35 je fluor, chlor nebo brom, alkylovou skupinou obsahující í‘až 4 ^í,rúh’likc>vě a torný 'Je 'methylová “-skupina-ethylová ''skupina/ n-prcpylová skupina, i-propylová skupina, n-butylová skupina, i-butylová skupina a terč.butylová skupina a zejména methylová skupina, a cykloalkylovou skupinou obsahující 4 až 8 uhlíkových atomů je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, cykloheptylová skupina nebo cyklooktylová skupina a zejména cyklohexylová skupina nebo cyklopentylová skupina.

Sloučeniny obecného vzorce la mohou být připraveny způsobem, jehož podstata spočívá v tom, že se sloučeniny obecného vzorce Ha

ve kterém a mají výše uvedené významy a X znamená chlor nebo brom, uvedou v reakci se sloučeninou obecného vzorce Žíla

R,'-NK₂ íllla) ve kterém

Rj' má výše uvedený význam.

Výše uvedený způsob se vhodně provádí zahříváním sloučeniny obecného vzorce Ila společně se sloučeninou obec ného vzorce lila v přítomnosti rozpouštědla, jakým je dioxan, při teplotě mezi asi 80 a 120 °C, výhodně pří zeplotě varu reakční směsi.

Ve sloučeninách obecného vzorce Ila, které jsou použity jako výchozí sloučeniny při uvedeném způsobu, X zejmé na znamená chlor. Sloučeniny obecného vzorce Ila, .stejně jako způsob jejich přípravy jsou popsány ve zveřejněné evropské patentové přihlášce 269 574.

Další způsob přípravy sloučenin obecného vzorce la spočívá v tom, še se sloučeniny obecného vzorce IVa

Si

( IVa)

O

Si

c.%

ve kverem R^', R_? a R^ mají výše uvedené významy, uvedou v reakci s trihvdrátem tevrabutviamoniumfluoridu.

Vyse uvedená cušoědie, jakým reakce může být provedena v organickém je například tetrahydrofuran, při okolní teplotě a za míchání. Sloučeniny obecného vzorce IVa mohou být získány reakcí sloučenin obecného vzorce Ila s 1,3dichlor-1,1,3,3-tetraisopropyldisiloxanem v alkalickém rozpouštědle, jakým je například pyridin, a reakcí takto získaných sloučenin obecného vzorce Va

ve kterém X, R₂ a R^ mají výše uvedené významy, se sloučeninami obecného vzorce lila.

V následujících příkladech 1 až 8 jsou teploty uvedené ve stupních Celsia nekorigovanými teplotami.

Příklad 1

6-/(trans)-4-Hydroxycyklohexyl/-2'-O-methyladenosin g 6-/(trans)-4-hydroxycyklohexyl/-9-purinyl-2'-0methy1-3',5'-0-(1,1,3,3-tetraisopropyldis ilox-1,3-diyl)-D-ri

- 18 bosy se míchá po dobu 15 minut při okolní teplotě se 2 g trihydrátu tetrabutylamoniumfluoridu ve 20 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se potom odpaří k suchu a zbytek se eluuje na silikagelu za použití eluční soustavy tvořené směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 35:15. Přečištěný produkt se krystalizuje ze směsi methanolu a ethyiacstátu. Požadovaná sloučenina krystalizuje s jedním ekvivalentem methanolu.

Teplota tání: 121-124 °C, /alfa/^Op = -50,2° (c = 1 v dimethylformamidu).

Uvedená sloučenina múze být rovněž rekrystalizována z ethanolu, načež po odstavení na vlhkém vzduchu krystalizuje s jedním ekvivalentem vody.

Teplota tání: 114-117 °C, /alfa/^ = -46,9° (c = 1, dimethyl formamid) .

6-/(trans)-4-hydroxycyklohexyl/-9-purinvl-2'-O-methyl3',5'-O-(1,1,3,3-tetraisopropy1-disiiox-1,3-diyl)-D-rl bosa, použitá při výše popsaném způsobu jako výchozí látka/ může být připravena následujícím způsobem.

g 6-chlor-9-purinyl-2'-O-methyl-3',5'-O-(1,1,3,3tetraisopropyldisilox-1,3-diyl)-D-ribosy se míchá společně s 1,32 g trans-4-hydroxycyklohexylaminu a 1,4 ml N-ethyldiiso propylaminu v 80 ml dioxanu po dobu 6 hodin na olejové lázni mající teplotu 105 °C. Reakční směs se potom ochladí na okolní teplotu, zfiltruje a filtrát se zahustí k suchu. Za účelem přečištění se takto získaná směs se chromatografuje na silikagelu, přičemž se jako eluční soustava použije nejdříve směs hexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 7:3 a potom směs ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 95:5. Takto přečištěná olejovitá sloučenina má hodnotu R^ 0,3 (směs ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 95:5).

6-/( cis ) -4-Hydroxycykiohexyl.·

2’-O-methvladenosin

Příklad 2

Sloučenina uv ;á v ulu oříkladu se získá způsobem, kcerý je analogický se způsobem popsaným v příkladu 1, s výjimkou spočívající v tom, že se namísto trans-4-hydroxyc y k1o he xy1ami n u použije c i s - 4 - h y d r o x y c y k i o h e x y i a m i n.

Takto získaná požadovaná sloučenina krystalizuje s polovinou ekvivalentu ethylacetátu a má teplotu tání rovnou 110 až 111 °C.

/Alfa/^®_D = -48,6° (c = 1 v dimethylformamidu).

Příklad 3

6-/(1S,trans)-2-Hydroxycyklopentyl/-2'-O-methyladenosin

Požadovaná sloučenina se získá postupem, který je analogický s postupem popsaným v příkladu 1, s výjimkou spočívající v tom, že se namísto trans-4-hydroxycyklohexylaminu použije 1S,trans-2-hydroxycyklopentylamin. Takto získaná požadovaná sloučenina má formu pěny.

Rf ve směsi ethylacetátu a ethanolu v objemovém poměru 75:25 0,44, /alSa/ZO^ = 25,5° (c=1 v dimethylformamidu).

Příklad 4

6-/(IR,trans)-2-Hydroxycyklopentyl/-2'-O-methyladenosin

Požadovaná sloučenina se získá způsobem, který je analogický se způsobem popsaným v příkladu 1, s výjimkou, že se namísto trans-4-hydroxycyklohexylaminu použije IR,trans2-hydroxycyklopentylamin. Takto získaná sloučenina má následující charakteristiky: teplota tání: 164 až 166 °C,

R^: 0,44 (směs ethylacetátu a ethanolu v objemovém poměru 75 : 25) , /alfa/^®_D = -80,2° (c = 1 v dimethylformamidu).

Příklad 5

6-/(1S,trans)-2-Hydroxycyklohexyl/-2'-O-methyladenosin

Požadovaná sloučenina se získá způsobem, který je í,analogický se způsobem popsaným v příkladu · 1 , s výjimkou spočívající v tom, že se namísto trans-4-hydroxycýkiohexylaminu použije 15,trans-2-’nydroxycyklohexylamin. Takto získá ná sloučenina má formu pěny.

R^: 0,42 (směs ethylacetátu a ethanolu v objemovém poměru 75:25), /alfa/^Og = -26,2° (c = 1 v dimethylformamidu). ,

Příklad 6

6-/(trans)-4-Hydroxycyklohexyl/-2'-O-ethyladenosin

Tato sloučenina se připraví způsobem, který je analo gický se způsobem popsaným v příkladu 5. Získá se ve formě 0,4-hydrátu.

Teplota tání: 98 °C (zkapalní), /alfa/2Q = -58° (c = 1 v dimethylformamidu).

Příklad 7

6-/1S,(trans)-2-nydroxycyklohexyl/-2'-O-ethyladenosin e připraví způsobem, který je anaaným v příkladu 5.

Tato 3Loučenina logický se způsobem pc

Příklad 3

6-/( IR, trans ) -2-Rydroxycykiohexyl/-2 ' -O-methyladenosin

Požadovaná sloučenina se získá způsobem, který je analogický se způsobem popsaným v příkladu 1, s výjimkou spočívající v tom,žesenamísto t^,rans-4-hydroxycyklohexylaminu použije 1R,trans-2-hydroxycyklohexylamín. Takto získaná požadovaná sloučenina má formu pěny.

R-: 0,42 (směs ethylacetátu a ethanolu v objemovém poměru

75:25),

0 0 /alfa/“ _D = -69,5 (c = 1 v dimethylformamidu).

Sloučeniny podle vynálezu mají zajímavé farmakologické vlastnosti. Mohou být proto užitečné jako léčiva. Za tímto účelem mohou být sloučeniny podle vynálezu použity jako takové nebo ve formě hydrátů nebo adičních produktů s organickými rozpouštědly, jakými jsou například methanol, ethanol nebo ethylacetát. Nejzajímavější sloučeninou obecného vzorce la je sloučenina z příkladu 1, která je v dalším textu uváděna jako sloučenina č.1.

Sloučeniny obecného vzorce la jsou zajímavé jako anal getika, jak již to bylo uvedeno výše. Pokud jde o jejich další účinky, lze uvést, že sloučeniny podle vynálezu mají antihypertensní účinnost, jak je to patrné z výsledků následujících výzkumů.

Měření vazby k adenosinovým receptorům Al a A2 v membránách z krysí kůry mozkové nebo z kůry nebo striata z prasečího mozku za použití metody podle R.F.Brunse, G.H.Lu a T.A-Pugsleye, která je popsána v Moiec,Pharmacol.29,331-346 (1986).

Další testování účinnosti v izolovaných na následující sekrece renální promývaných parametry:

reninu, hemodynami uvedených siouče.krysích ledvinácř se zaměřením kv inhibice uvolňování noradrelinu z nervových zakončení po elektrostimulaci renálních nervů podle metody P.M.Vanhoutteho, D.Browninga, E.Coena, T.J.Verbeurena, L.Zonnekeyena a M.G.Collise, popsané v Hypertension 4, 251-256 (1982), měření krevního tlaku, srdečního rytmu, produkce moči a aktivity reninu v plasmě bdělých, NaCl-zbavených a nasycených normotensních nebo spontánně hypertensních krys s katetrem implantovaným do abdomináiní aorty a do duté žíly po intravenosním podání nebe podání ve formě infuse nebo bolusu sloučenin podle vynálezu metodou J.F.M.Smotse a J.M.Brody-ho, popsané v Am.J.Physiol.247,R1003-R1003 (1984).

Z výsledků uvedených výzkumů lze odvodit, že v rámci antihypertensní účinnosti sloučenin obecného vzorce Ia dochází jak k inhibici sekrece reninu a uvolňování noradrenalinu z nervových zakončení, tak i k přímé vasodilataci Na rozdíl od snížení krevního tlaku zůstávají produkce a exkrece elektrolytu nezměněny. Z toho vyplývá, že sloučeniny obecného vzorce Ia nemusí být použity pouze jako antihypertensní činidla, nýbrž také jako činidla způsobující koronární vasodilataci. Kromě toho chrání tyto sloučeniny vaskulární endotel mechanismem inhibice agregace trombocytů a aktiva ce leukocytů. Tyto sloučeniny rovněž snižují hladinu Lipidů v krvi.

Pro výše uvedené ind obecného vzorce la sloučeni kacemi jsou kardioprotekč.ní kace je výhodnou sloučeninou a z příkladu 1. Výhodnými India analuehická indikace.

Sloučeniny obecného vzorce la jsou rovněž účinné při léčení arytmií, což je stanoveno jejich agonizující účinností vůči adenoslnovému receptoru Aj, která je selektivní ve srovnání s jejich účinností vůči receptoru A2, jak to bude stanoveno například v dále popsaném testu a), a například jejich schopností prolongovat kondukci skrze atrioventrikulární (A-V) nodus srdce, jak je to prokázáno v dále zařazeném testu b). Uvedené sloučeniny takto restaurují sinusový rytmus při supraventrikulární tachykardii, zejména při paroxvsmální supraventrikulární tachykardii, snižují srdeční frekvenci při tachykardiáiní atriáiní fibrilaci a vrací ventrikulární tachykardii indukovanou beta-aárenergní stimulací do normálního rvtmu.

Sloučeniny obecného vzorce la napodobují prekondicionační efekt, což je mechanismus, při kterém krátkodobá ische mie činí srdce odolným proti infarktu, ke kterému by mohlo dojit v případě následné ischemie. Tyco sloučeniny jsou proto použitelné pro ochranu srdce v průběhu nestabilizované anginý, proti infarktu myokardu při podpůrné adjuvantní tera pii nebo bez ní, nebo proti ischémické lézi u pacientů, kteří například podstupují chirurgické implantování koronárního arteriálního bypassu, angioplastii, transplantaci srdce nebo jiný nesrdeční chirurgický zákrok.

Sloučeniny obecného vzorce la jsou zejména použitelné pro podávání subjektům náchylným k infarktům myokardu, například jako důsledek stanovení diagnózy u pacientů, kteří ještě infarkt myokardu neprodělali, nebo u pacientů, kteří již infarkt myokardu v minulosti prodělali.

Sloučeniny obecného vzorce la dále snižují hladinu inzulínu v plasmě, aniž by ovlivňovaly glukosovou toleranci.

Tyco sloučeniny potenciálizuji účinek inzulínu za účelem zvýšení absorpce glukosy a snižují lipolýzu v aalposní tkání, což vede ke snížení plasmových koncentrací volných mastných kyselin (viz dále zařazený test d)). Snížení plasmové koncentrace volných mastných kyselin zase vede ke snížení hladiny triglyceridú, což dále vede ke zvýšení HDL cholesterolu .

Inzulín-šetřící účinek nebo/a schopnost snížit hladinu mastných kyselin činí sloučeniny obecného vzorce Ia způsobilými pro použití při léčení cukrovky typu I a cukrovky typu II, tj. inzulino-nedependentní cukrovky.

Sloučeniny obecného vzorce Ia snižují hladinu triglyceridů a volných mastných kyselin v plasmě (viz dále zařazený test e)) a zvyšují hladinu HDL cholesterolu a jsou takto užitečné při léčení lipidové dysfunkce a stavu sdružených se zvýšenými hladinami volných mastných kyselin a triglycetidů a všude tam, kde je žádoucí zvýšení HDL cholesterolu.

r

Sloučeniny obecného vzorce Ia vykazují dobrou metabolickou stabilitu.

Dalším předmětem vynálezu je takto použití sloučenin obecného vzorce Ia pro léčení bolesti nebo pro přípravu léčiv vhodných pro léčení bolesti.

Ještě dalším předmětem vynálezu je výše definovaná sloučenina obecného vzorce Ia pro použití při léčení bolesti

Dalším předmětem vynálezu je analgetické kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje výše definovanou sloučeninu obecného vzorce Ia v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. Přihlašovatel zamýšlí použít sloučeniny obecného vzorce Ia i pro indikace, které byly uvedeny výše pro sloučeniny obecného vzorce I.

Následující farmakologické :35:7 ilustrují výše uvedenou účinnost sloučenin obecného 72:::3 le.

a) Afinita k adenosinovýcnt receptorům

Metodou popsanou H.Brunsem a kol. v MoLecular Pharmacology 29 (1986), str.331-344 se připraví prasečí striatální membrány. K označení jak receptorů A^, tak i receptorů A_ se použije neselektivní agonizující činidlo adenosinového receptorů, kterým je H-NECA. Hodnoty IC-θ jsou odvozeny · z vytěsňovacích křivek za použití vážené nelineární metody nejmenších čtverců v souladu s Langmuirovou rovnice, načež se vypočtou hodnoty pK_D·

Sloučeniny obecného vzorce la vykazují afinitu k recep torům Aj například v rozmezí od 1 do 500 nM.

b) Arytmie

Aktivace adenosinového receptorů Aj snižuje»výskyt například paroxysmální supraventrikulární tachykardie, tachykardiální atriální fibrilace a dalších arytmií zpomalením kondukce skrze atrio-ventrikulární (AV) nodus srdce detekované zvýšením v intervalu P-R. Použitá testovací metoda zahrnuje zaznamenávání změn EKG u dospělých opic Rhesus při vědomí. Sloučeniny obecného vzorce la jsou podávány v dávkovém rozmezí od asi 0,1 mg/kg do asi 1000 mg/kg při perorálním podání nebo v dávkovém rozmezí od 0,03 do 30 mg/kg při intravenosní aplikaci v rámci testu popsaného C.Clarkem a kol v The Pharmaceutical Journal 244, 595-597 (1990). Tak například sloučenina č.1 prolonguje při tomto testu interval PR povrchového elektrokardiogramu (EKG), což indikuje zpomalení kondukce skrze AV nodus při dávkách 0,1 a 0,6 mg/kg při perorálním podání. Jak již bylo uvedeno výše, vede takový účinek k ukončení AV nodální recidivní tachykardie a snížení srdeční frekvence oři tachvkardiálni atriální fibrilaci.

Ochrana proti infarktu prekondicionačním mechanismem

Prekondicionace (5 minutová idchemie následovaná 10 minutovým zotavením) činí srdce velmi odolným proti infarktu z následné isohemie (30 minut) a reperfuzi (3 hodiny). Testovací metodika je popsána v článku G.S.Liu a kol.,1991Circulation (84),1, 350-356 a J.D.Thorntona a kol. v 1992Circulation (85), 659-665. Sloučeniny obecného vzorce la se podávají intravenosně v dávce od asi 0,01 do 10 mg/kg králíkům. Při tomto testu jsou králíci, kterým byla podáno 100/ug/kg sloučeniny č.1, chráněni téměř stejně jako při endogenní prekondicionaci proti infarktu indukovanému 30 minutovou .koronární okluzí. .....‘ .

d) Transport glukosy a lipolysa v krysích adipocytech

i) Adipocyty se izolují z epididymálních tukových polštářků normálně krmených krys digescí kolagenázou. Získané buňky (finální koncentrace 2 % obj./obj.) se předinkubují s adenosin-deaminázou (1 U/ml) a s testovanými sloučeninami, například se sloučeninou č.1, as ostatními přísadami předepsanými k měření transportu glukosy při teplotě 37 °C

Po 30 minutách se potom přidá /3-^H-glukosa (finální koncentrace 50/UM, 0,5/UCi/ml) a v inkubaci se pokračuje po dobu dalších 60 minut. Zabudování radioaktivity z /3-^H/glukosy do buněčných lipidů (měření transportu glukosy) se vyhodnotí extrakcí buněčné suspenze (0,5 ml) 5 ml scintilační kapaliny na bázi toluenu a následnou kapalinovou scintilograf ií. Ve vodě rozpustné metabolity a zbytková /3-^H/glukosa zůstanou ve vodné fázi a nejsou detekovány.

Lipolýza se měří konvenčním způsobem. Při jedné metodě se buňky inkubují s 1_zuM isoproterenolu a bez něho, načež se v inkubaci pokračuje po dobu 60 minut. Supernatant se

ΊΊ od buněk oddělí po předcházejícím odstředění skrze dincnylftalát a lipolýza se vyhodnotí enzymatickým stanovením glycerolu uvolněného do supernatantu.

Sloučeniny obecného vzorce la jsou při tomto tešou účinné při koncentraci od 0,1 do 1000 nM.

Sloučenina č.1 potlačila lipolýzu v krysích adipocytech při koncentracích od 0,1 do 100 nM.

V přítomnosti adenosin-deaminázy (1 U/ml) nemá sloučenina č.1 žádný významný účinek na inkorporaci radioaktivity z /3-^H/-glukosy do buněčných lipidů při absenci inzulínu a pouze okrajový účinek v přítomnosti maximálně stimulující inzulínové koncentrace (8 nM) , avšak významně zvyšuje stimulaci inkorporace radioaktivity koncentračně závislým způsobem při koncentracích od 0,1 do 50 nM inzulínu. Tato pozorování indikují, že uvedená sloučenina zvyšuje citlivost transportu glukosy na inzulín. V přítomnosti téměř maximálně účinné koncentrace sloučeniny č.1 se hodnota EC-θ pro inzulínovou stimulaci /3-^H/-glukosové inkorporace do lipidů sníží 2- až 3-krát. V přítomnosti adenosin-deaminázy a 1/UM isoproterenolu, 10-50 nM sloučeniny č.1 zvýší jak citlivost, tak i míru odezvy na inzulín. Hodnota EC^g pro inzulín se sníží až pětkrát a stimulace při maximální inzulínové koncentraci se významně zvýší.

ii) Lipidy a glukosa u normálních krys v režimu 18 hodinového půstu

Krysy 2 až 3 měsíce staré s tělesnou hmotností asi 250 gramů se přechovávají v prostoru s regulovanou okolní teplotou 22 °C s režimem cyklů 12 hodin světla a 12 hodin tmy po dobu sedm dnů.

Krysí potrava a voda jsou pro krysy dostupné pcdie ·? ς libosti. Po !3 hodinovém pásnu je krysám ( r n c u ve Siíuoma) poctěna testovaná s-oucenrna v ramct piti v 0,5% CMC. Pokusná zvířata přijmou 1,0 mi/IOQ g tělesné hmotnosti. Tři hodiny po podání se krysy anestetizují působením oxidu uhličitého a odebere se jim kardiální punkcí krev. Izoluje se krevní sérum, které se použije pro stanovaní glukosy, volných mastných kyselin a beta-hydroxybutyrátu. Obsah volných kyselin se stanoví kalorimetrickým enzymatickým stanovením za použití acyl-COA-peroxidázy, glukosa se stanoví .metodou glukoso-oxidázy (YSI model 27, Yellow Spring, Ohio) a beta-hydroxybutyrát se stanoví enzymatickým stanovením za použití enzymové vazby beta-hydroxybutyrát-dehydrogenáza'(SigmaKit’310-A, SŤ.Louis, Mo). SLoučeniny obecného vzorce la jsou účinné v dávce cd asi 1 do asi 5000 /ug/kg.

Dávky nezbytné pro snížení hladiny volných mastných kyselin (primární důsledek účinku na adipocyty) činí pro sloučeninu č.l 5 až lOO^ug/kg 2 hodiny po podání dávky. To má za následek dávkově-depe.ndentní snížení beta-hydroxybutyrátu a hladiny glukosy v krvi.

ii) Účinky na inzulino-nedependentní cukrovku (NIDD) u krys

V rámci tohoto testu konzumují krysy s tělesnou hmotností 200 až 220 g vysokotučnou dietu podle libosti.

Ve stavu nakrmení se krysám injikuje do ocasní žíly 40 mg streptozotocinu na kilogram tělesné hmotnosti.

Po jednom týdnu jsou ty krysy považovány za diabetické, které mají hladinu krevní glukosy vyšší než 200 mg/dl a které mají po půstu přes noc a podrobení tolerančnímu testu s peroráiním podání glukosy hladinu glukosy 40 až 80 mg/dl oři hodiny po tomto testu. Čtyři dny později jsou tato pokusná zvířata použita pro účely testu v případě, že mají hladinu krevní glukosy vyšší než 130 mg/dl. Krevní glukosa se stanovuje za použití glukosového analyzátoru Y3I.- Chromický skríningový test se provádí následujícím způsobem.

V den 1 se krysám odebere potrava v 9 hodin dopoledne a po výchozím odečtení krevní glukosy v krvi odebrané ze špičky ocasu se pokusným zvířatům perorálně podá buď vehikulum (kontrolní skupina zvířat) nebo testovaná sloučenina (9 krys na každou aplikaci). Šest hodin později se stanoví obsah glukosy v krvi a bezprostředně potom se krysám opět podá potrava.

Stejným krysám se podává buď vehikulum nebo účinná látka jednou denně po dobu 11 následujících dnů. Krevní glukosa se stanoví v hodinu 0 a po šestihodinovém půstu po podání dávky účinné sloučeniny 4., 8. a 11.den. Dávka 100 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti slou ceniny obecného vzorce la, například sloučeniny č.1, má za následek významné snížení hladiny glukosy v krvi.

e) Dyslipidemie charakterizovaná zvýšenou hladinou triglyceridů v krevním séru

Některé studie prokázaly pozitivní korelaci mezi hladinou triglyceridu v séru (a přidruženým poklesem hladiny HDL cholesterolu) a rizikem koronárního onemocnění srdce (Grundy v Cholesterol a Aťnerosclerosis: Diagnosis and Treatment, Lippincott, Philadelphia (1990)). Snížení zvýšené hladiny triglyceridu jako nový přístup ke snížení rizika koronárního onemocnění srdce, se poprvé objevilo ve zprávě Helsinky Heart Study, kde se uvádí, že po léčení gemfibrozilem se největšího omezení vážných koronárních příhod dosáhlo u pacientů s hyperlipidemií typu IIB, u kterých byly obecně zvýšeny jak LDL-cholesterol, tak i celkové se30 rové triglyceridy a sníženy hladiny HOL cholesterolu. Sloučeniny obecného vzorce la jsou účinné u opic Rhesus v dávkách od asi 0,03 do 30 {.například v távkách od 0,1 do 30) mg/kg při intravenosním podání a v dávkách 0,1 až 100 (například v dávkách 0,1 až 10) mg/kg při perorál.ním podání. Sloučenina č.l poskytuje dávkově závislý a dlouhotrvající pokles hladiny volných mastných kyselin v plasmě a tríglyceridů v plasmě u opis Rhesus při dávkách od 0,03 do 0,6 mg/kg při intravenosním podání a při dávkách 0,1 až 1,2 mg/kg při .perorálním podání. Reprezentační výsledky pro sloučeninu č.1 při perorální dávce 0,6 mg/kg poskytují snížení obsahu volných mastných kyselin o asi 60 % ve srovnání s kontrolní skupinou zvířat po 300 minutách a snížení obsahu tríglyceridů o 40 %.

Sloučeniny podle vynálezu jsou rovněž účinné při testech stanovujících střední arteriální krevní vlak, bradykardii a periferní vasodilataci u anestetizovaných krys.

Tyto pokusy se provádí na krysích samečcích Wistar majících tělesnou hmotnost mezi 300 a 350 g pod anestezií Pentothalem (120 mg/kg intraperotoneálně) podle metody Salzmanna a kol. (J.Cardiovasc.Pharmacol.12, 451-460,1988). Pokusným zvířatům se zavedou katetry do pravé jugulární a pravé femorální žíly, do levé komory (skrze tepnu krční), do levé femorální arterie a aorty (skrze pravou femorální aterii). Potom se měří nebo vypočtou následující proměnné veličiny: systolický a diastolický, jakož i střední arteriální krevní tlak (mm Hg, levá femorální arterie, Stathamův snímač krevního tlaku P 23 Gb), pulzní tlak (mm Hg), srdeční frekvence (tepy za minutu, z křivky krevního flaku), míra zvvšení tlaku v levé komoře (dP/dt , mm HG, max

Stathamův snímač tlaku P 23 Gb), srdečný výstup (ml/ min/100 g tělesné hmotnosti, termodíluční metoda, pravá jugulární žíla a aorta), celková periferní resistence (dyn.s.cm ~^/100 g tělesné hmotnosti) a povrchový EKG. Arteriální krevní tlak, tlak v levé komoře, d?/dt max srdeční frekvence a elektrokardiograf jsou plynule zaznamenávány Schwarzerovým polygrafem. Uvedené parametry se měří 30, 20, 10 a 2 minuty před podáním testované sloučeniny a 1, 5, 10 a 15 min před podáním účinné látky do pravé femorální žíly. Sloučeniny obecného vzorce la se injikují v dávkách od asi 0,001 do asi 10 mg/kg tělesné hmotnosti. Sloučenina č.1 se testuje v kumulativních dávkách 0,0003 a 0,03 mg/kg, přičemž se pro každou dávku poOí - «'pň^uži jí 'tři pokusná'-‘zví řátá Sloučenině č. V‘induku je ’ pokles krevního tlaku ,/Ξϋ^θ = 49 mikrogramů na kilogram tělesné hmotnosti při intravenosní aplikaci/ a srdeční frekvence a zvýšení systemické vaskulární kon duktance.

Dávky sloučeniny obecného vzorce la použité’ při výše uvedených indikacích se budou měnit obvyklým způsobem v závislosti na závažnosti léčeného stavu, na tělesné hmotnosti léčeného subjektu a na relativní účinnosti dané konkrétní sloučeniny. Nicméně obecným vodítkem pro volbu vhodných jednotkových dávek mohou být dávky 0,1 až 100 mg, jako 0,1 až 10, 0,5 až 200, 0,5 až 100 nebo 0,5 až 10, například 0,1, 0,5, 1, 2, 3, 4 nebo 5 mg, přičemž takové jednotkové dávky mohou být podávány více než jednou denně, například 2-, 3-,

4-, 5- nebo 6-krát denně, avšak výhodně 1- nebo 2-krát denně tak, aby celková denní dávka pro 70 kg těžkého savce, zahrnujícího i člověka, se pohybovala v rozmezí od asi 0,1 do 1000 mg, například při peorálním podání, nebo v rozmezí od 0,003 do 300 mg při intravenosním podání, tj. v rozmezí od asi 0,001 do 20 mg/kg/den, jako například 0,007 až 3, 0,007 až 1,4, 0,007 až 0,14 nebo 0,01 až 0,5 mg/kg/den, zejména 0,01, 0,02, 0,04, 0?05, 0,06, 0,08, 0,1 nebo 0,2 mg/kg/den,

z) a tato terapie může trvat po dobu něxolika týdnů nebo několika měsíců. Pro sloučeninu č.l činí výhodná dávka pro všechny indikace podle vynálezu 0,1 až 10 mg/denpro 70 kg dospělce. Pro výhodnou indikaci inzul i.no-nedepentní cukrovky a pro hypertriglyceridemii činí indikované dávky pro člověka 0,2 až 2 mg denně při perorálním podání a pro léčení srdečního selhání nebo jiných srdečních poruch 0,2 až 10 mg denně, zejména 0,5 až 5 mg denně při perorálním podání nebo 0,25 až 5 mg při intravenosném podání v případě arytmie, například při tachykardiální atriální fibrilaci.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce Ia mohou být formulovány pro podání libovolným vhodným způsobem a to v závislosti -ná porůše', která jeřléčena, a výhodné .vyjed no tikové ’ dávkové formě nebo ve formě, která může být lidskému pacientovi podána jim samotným v jediné dávce. Výhodně je uvedená kompozice vhodná pro perorální, rektální, parenterální, intravenosní nebo intramuskulární podání, jak to již bylo popsáno výše v souvislosti s použitím sloučenin podle vynálezu ve funkci analgetik. ,

Jednotkovými dávkovými formami pro perorální podání mohou být tablety nebo kapsle obsahující 0,05 až 20 mg sloučeniny obecného vzorce Ia.

Vhodně budou sloučeniny podle vynálezu nebo jejich hydráty nebo adiční produkty s organickými rozpouštědly tvořit od asi 0,5 do asi 20 hmotnostních %, výhodně asi 1 až asi 10 hmotnostních %, například 2 až 5 hmotnostních %, z celkové hmotnosti formulace.

Sloučeniny obecného vzorce Ia, ve kterém R^' znamená hydroxycykloalkylovou skupinu obsahující 4 až 8 uhlíkových atomů, jsou detekovány jako metabolity po podání sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R znamená cykloalkylovou skupinu obsahující 4 až 8 uhlíkových atomů a R^ znamená alkylovou skupinu, a lidem.

teplokrevným živočichům, například krysám, psům

Podání sloučeniny M takto vede k produkci hydroxyoyklohexyi-2'-O-methyladenosinu.

Dalším předmětem vynálezu je takto způsob podání N^cyklohexyl-2'-O-methyladenosinu teplokrevnému živočichu za účelem produkce N -hydroxycyklohexyl-2'-O-methyladenosinu.

i

Podle dalšího předmětu vynálezu vynález poskytuje N⁶hydroxycykloalkyl-2'-O-alkyladenosin v čisté formě, například s čistotou vyšší než 95 %. Dále popsané příkladné sloučeninysplňu jí toto kritérium¹; 4·’·· '·’·.....' ·' - ‘ ~

Dalším předmětem vynálezu je N^-hydroxycykloalkyl-2'-0 alkyladenosin prostý cyklohexyl-2'-O-methyladenosinu.

Podle dalšího předmětu vynálezu poskytuje vynález způsob přípravy 2'-O-alkyladenosinů, jehož podstata spočívá v tom, že se adenosin uvede v reakci s příslušným alkylsulfátem v přítomnosti katalyzátoru fázového přechodu.

Výhodně je 2'-O-alkyladenosinem libovolná z výše uvedených sloučenin.

Podle dalšího předmětu vynálezu vynález poskytuje způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I, které byly definovány výše, .jehož podstata spočívá v tom, že se sloučenina obecného vzorce VI \/^R'

uvede v reakci s bazickým roztokem sloučeniny obecného vzorce (R₃)₂SO₄ v přítomnosti tetrabutylamoniumhydrogensulřácu a nepolárního rozpouštědla, načež se získaný produkt přečistí rekrystalizací .

V případě, že je to žádoucí, mohou být reaktivní skupiny dočasně opatřeny ochrannými skupinami.

Výhodně je alkylsulfátem dialkylsulfát, ve kterém kaž dý alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy.

Výhodně je katalyzátorem fázového přechodu tetrabutylamoniumhydrogensulřát.

Výhodně se reakce provádí v nepolárním rozpouštědle, jaké bude například popsáno dále.

Je definována skupina sloučenin obecného vzorce 1, ve obsahující 3 až 8 kterém R^ znamená cykloalkylovou sk'.. uhlíkových aoomů, R_? znamená azom vo pinu obsahující 1 až 4 uhlíkové arem skupinu obsahující ’ až 4 uhlíkové =.

íku nebo alkylovou skue R, znamená alkylovou cm v.

Až dosud příprava sloučenin cbec.ného vzorce I typicky zahrnovala šest reakčních stupňů, kzerými jsou příprava 2',3',5'-triacetylinosinu, chlorace beta-D-ribofuranosyl-9H-purinu, ochr tetraisopropyldisiloxanem (TIPDS-CL^ tění chromatografií na silikagelu, deprotekce 3'-0- a 5'-0polohy a reakce se sloučeninou obecného vzorce R-jN^ a rekrystalizace za účelem získání sloučeniny obecného vzorce I.

a hydrolýza 6-chlor-9ana 3'-0- a 5'-0-polohy ), 2'-O-alkylace a přečisPřihlašovatel nyní nové zjisz ného vzorce I mohou být připraveny 7 brou čistotou, aniž by bylo zapotřeb protekci 3'-0- a 5'-0- polohy za pou loxanu nebo chromatografií na silika til, že výchozí látka dosavadního st inosin-235'-triacetát může být v ním inosin-2', 3',5'-tripropionátem, bit prosazení a eliminaci nežádoucíh tšdla.

ii, že sloučeniny obecdobrých výtěžcích a s doí provést ochranu a dežití výše uvedeného disigelu. Přihlašovatel zjisavu techniky, kterou je ýhodně nahrazenalipofilkterý umožňuje zdvojnásoo pyridinového rozpoušV rámci vynálezu se sloučeniny obecného vzorce I připra vují za podmínek katalýzy fázového přechodu podle následujícího reakčního schématu:

H R,

xc

1'

R2 a R^ mají výše uvedené významy.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být připraveny reakcí bazického vodného roztoku sloučeniny obecného vzorce VI 3 dialkylsulfátem, ve kterém každý alkylový zbytek r

obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy, v přítomnosti tetrabutylamoniumhydrogensulfátu a organického s vodou-nemísitelného rozpouštědla. Bázi použitou pro přípravu uvedeného bázického vodného roztoku je výhodně hydroxid alkalického kovu, jakým je například hydroxid sodný nebo hydroxid draselný. Rozpouštědlem může být libovolné s vodou nemísitelné rozpouštědlo, ve kterém je sloučenina obecného vzorce I rozpustná, přičemž tímto rozpouštědlem je například methylenchlorid nebo terc.amylalkohol. Je rovněž výhodné, když se reakce provádí při teplotě z teplotního rozmezí mezi -20 °C a 50 °C, zejména při okolní teplotě. Reakční doba není kritickým parametrem, i když je výhodné, když se reakce provádí po dobu asi 5 až 10 hodin, zejména po dobu asi 7 až 8 hodin. Surová sloučenina obecného vzorce I se izoluje odpařením a následným rozmí oháním zbytku se směsí vody a inertního rozpouštědla, výhodně toluenu, v objemovém poměru 1:1, při okolní teplotě po

3’ dobu 5 až 7 hodin a til může být získána frakčn

rekrystalizací z inertního rozpouštědla, ja luen, rozpuštěním surové sloučeniny v tomto tědle při teplotě 30 °C, zahříváním roztoku tu asi .oo po aoou prtonzne i noamy, oc na okolní teplotu, zaočkováním roztoku záro krystalem čisté sloučeniny a odfiltrováním ných krystalů, kým je torozpoušna teplohla zením dečnýrn vylouče2) opakováním krystalizačního postupu ze stupně 1), přičemž se však roztok zahřívá před ochlazením na teplotu 65 °C, a

3) rekrystalizací ze 100% e teplotě varu pod zpětným zaočkováním zárodečným k.

nylálkoholu rozpust chladičem, zředěním vstalém a následnou ním při vodou, filtrací a vysušením.

Značná část sloučenin obecného vzorce VI představuje známé sloučeniny, které mohou být připraveny způsoby popsanými v literatuře, například ve výše zmíněných patentech US 4,843,066 a 4,985,409. Sloučenina obecného vzorce VI může být rovněž připravena výhodně podle následujícího výhodného reakčního schématu

(C₂H_sCO)₂O vii

VIII

O

O

Wš$fi

,;**í >.,-‘*'«Ά ' r,nh₂

..............> VI ,Ά*» kde R^ a R₂ mají výše uvedené významy.

Sloučeniny obecného vzorce VI mohou být připraveny acylací inosinu obecného vzorce VII anhydridem kyseliny propionové za vzniku 2'-0-, 3'-0-, 5'-O-chráněné sloučeniny obecného vzorce VIII, dále halogenací sloučeniny obecného vzorce VIII thionylchloridem za vzniku meziproduktu obecného vzorce IX a současnou aminací a hydrolýzou sloučeniny obecného vzorce IX. Acylace inosinu se výhodně provádí ve směsi toluenu, tributylaminu a 4-dimethylaminopyridinu při teplotě od 100 do 110 °C po dobu 4 až 5 hodin. Sloučenina obecného vzorce VIII se izoluje vysrážením heptanem. Halogenace sloučeniny obecného vzorce VIII se výhodně provádí ve směsi toluenu a N,N-dimethylformamidu při teplotě od asi 60 do 70 °C po dobu 3 až 4 hodin, přičemž roztok sloučeniny obecného vzorce IX může být dále použit po promytí vodou a solankou. Aminace a současná hydrolýza meziproduktu obecného vzorce IX se výhodně provádí přidáním aminu obecného vzorce a zahříváním reakční směsi na teplotu 100 až 110 °C po dobu 15 až 20 hodin. Sloučenina obecného vzorce VI se izoluje filtrací při okolní teplotě a přečistí rekryscalizací.

Způsob podle vynálezu bude ilustrován následujícími příklady

Způsobový příklad 1

N-Cyklohexyl-2'-O-methyladenosin í·’ ‘ ιγμ&υρ,· - y λ.

Stupeň A

Lnosm-2 /3', 5'-trrpropionat

Směs 271,2 g inosinu, 966 ml tributylaminu, 3,30 g

4-dimethylaminopyridinu a 600 ml toluenu se zahřívá na teplotu uvnitř reakční směsi 104 až 105 °C po dobu 35 minut, načež se k reakční směsi přidá 453 ml anhydridu kyseliny propionové a to rychlostí, při které se udržuje te’plóta uvnitř reakční směsi mezi 104 a 105 °C. Po míchání reakční směsi při uvedené teplotě po dobu dalších 4 hodin se směs ochladí na teplotu 5 až 10 °C na ledu a k takto ochlazené směsi se potom přidá 1000 ml heptanu. Získaná suspenze se míchá při okolní teplotě (20 až 22 °C) po dobu 30 minut,' načež se zfilruje, například v Bůchnerově nálevce. Oddělený pevný podíl se promyje celkem 450 ml heptanu ve třech stejných porcích o objemu 150 ml a vysuší při teplotě 45 až 50 °C (3,3 kPa), přičemž se získá 425,9 g inosin-2',3',5'tripropionátu ve formě bílého pevného produktu.

Teplota tání: 171 až 172 °C, výtěžek: 96,5 %.

Stupeň B g

N -Cyklohexyladenosin

Směs 270,6 g inosin-2',3',5'-tripropionátu, 240 ml M,N-dimethylformamidu a 600 ml toluenu se zahřívá na teplotu 65 °C po dobu 1 hodiny, načež se přidá 67,84 ml thionylchloridu a to rychlostí, p

- o.

při které se udržuje teplota uvnitř reakcm smést 62 az do ~C. Reakční směs se míchá při této teplotě po dobu dalších dvou hodin a třiceti minut, načež se ochladí na teplotu 10 °C na ledu. Po přidání 600 ml vody předchiazené na teplotu 10 až 15 °C na ledu a to rychlostí, při které se udržuje teplota nižší než 20 °C, se organická vrstva oddělí a promyje celkem 800 ml 10% vodného roztoku _;o,objemu 200 ml.

Organická vrstva obsahující surový 6-chlor-9-(2,3,5-tri-Opropionyl-beta-ribofuranosyl)-9H-purin se za míchání přidá i/jLýX^^vg^Qř.^mrVčykíbheScýlamihuNóhřátého na’*teplotáM 05 v -prů- ’ běhu 2 hodin a rychlostí, při které se udržuje teplota uvnitř reakční směsi 105 °C. Po míchání této směsi při uvedené teplotě po dobu dalších 17 hodin se reakční směs ochladí na okolní teplotu (25 °C) v průběhu přibližně 2 hodin za účinného míchání, načež se zfiltruje, například za použití Biíchg nerovy nálevky, za sání. Pevný podíl obsahující N ,-cyklohexyladenosin a cyklohexylaminhydrochlorid se promyje celkem 460 mi toluenu ve čtyřech stejných porcích o objemu 115 ml a převede ve vlhkém stavu do pětilitrové baňky vybavené mechanickým míchadlem. Po přidání 2 litrů vodného nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 2,5 litru ethylacetátu se směs míchá až do doby, kdy se veškerý pevný podíl rozpustí (přibližně 10 až 15 minut). Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 1,5 1 ethylacetátu a to ve dvou porcích majících objem 1 litru resp. 500 ml.

Organické vrstvy se sloučí a odpařují až do doby, kdy se dosáhne odpaření asi 3 litrů ethylacetátu (při teplotě 40 °C, 10-20 k?a). Ke zbytku se přidá 500 ml heptanu a získaná směs se míchá po dobu 30 minut. Pevný podíl se oddělí za použití Buchnerovy nálevky a promyje celkem 300 ml heptanu ve třech stejných porcích o objemu 100 ml. Pevný podíl se potom vysuší při teplotě 45 až 50 C (3-3,5 kPa) po dobu přibližně 3 hodin, přičemž se získá 143 g surového θ

N -cyklohexyladenosinu ve formě bílého pevného produktu. Tento produkt se převede do jednolitrové baňky s kulatým dnem vybavené mechanickým míchadlem, načež se do baňky přidá 175 ml 95% ethanolu. Získaná suspenze se míchá po dobu 15 až 20 minut, načež se k ní přidá 175 ml terč.butylethyletheru. Po pětiminutovém míchání se suspenze ochladí na ledu a míchá po dobu dalších 15 minut. Tato suspenze se zfiltruje za použití Bíichnerovy nálevky a oddělený pevný podíl se pro/7XYje^c^lkem .50*ig'l»'fce’ťc/bVtylme thýlethéřu-'ve';dvou .stejných . porcích o objemu 25 ml.

W^^^^xjafilttovany^pevTÍy^podiVseXysusi pn teplota 4S^xaz 50 °C (3-3,5 kPa) v průběhu 14 hodin, přičemž se získá 130 g g

N -cyklohexyladenosinu ve formě bílého pevného produktu. Teplota tání: 185 až 187 °C, ' výtěžek: 60,0 %.

jí·»*'

Stupeň C

N-Cyklohexyl-2'-O-methyladenosin

Suspenze 94,33 g N -cyklohexyladenosinu a 720 g 5% vodného roztoku hydroxidu sodného se míchá při okolní teplotě (24 až 25 °C) až do doby, kdy se dosáhne rozpuštění veškerého pevného podílu (přibližně 5 minut). Za použití nálevky pro přidáni reakčničh složek se přidá 850 ml dichlormethanu a 5,5 g tetrabu^tylamoniumhydrogensulffátu a potom ještě 61,3 g dimethylsulfátu v průběhu 5 až 10 minut, zatímco se udržuje teplota uvnitř reakční směsi mezi 24 a 25 °C. Nálevka se potom promyje dalšími 50 ml dichlormethanu, který se potom přidá do reakční nádoby. Po míchá dvoufázové směsi při teplotě 24 až 25 °C (teplota uvnitř směsi) po dobu 7,5 hodiny se organická vrstva oddělí a odpaří při teplotě 40 °C (27-29 kPa) až do doby, kdy již nedestíluje žádné rozpouštědlo.

Zbytek se rozpustí ve 200 ml toluenu a roztok se potom znovu odpařuje při teplotě 45 až 50 °C (4 kPa) až do doby, kdy již nedastiluje žádné rozpouštědlo.

Směs výše uvedeného surového materiálu a 2470 ml toluenu se míchá při okolní teplotě po dobu 10 minut a potom se ke směsi přidá 2470 ml vody v průběhu 22 minut. Získaná suspenze se míchá při okolní teplotě po dobu dalších 6 hodin a pevný podíl se izoluje filtrací, například za použití Buchnerovy nálevky,, za sání. Po promytí pevného podílu 114 ·* ý^^ml.^toluenu a .celkem 285-ml vodyTve Vtřech^stejných porcích . ‘ o objemu 95 ml se pevný podíl vysuší při teplotě 48 až 50 °C

397 ml toluenu se zahřívá na teplotu 80 °C za míchání za vzniku čirého roztoku, který se ochladí na teplotu 56 °C v průběhu 45 minut a zaočkuje zárodečnými krystaly (10 mg) čistého produktu. Směs .se míchá při teplotě 55 až 56 °C po dobu 45 minut,'načež se ochladí na okolní teplotu v průběhu jedné hodiny. Po dalším jednohodinovém míchání při'uvedené teplotě sa pevný podíl izoluje filtrací, například za použití Buchnerovy nálevky, za sání. Pevný podíl se promyje celkem 75 mi toluenu ve třech stejných porcích o objemu 25 ml, přičemž se získá 60 g bílého pevného produktu. Suspenze tohoto pevného podílu ve 159 ml toluenu se znovu zahřeje na teplotu 80 °C a zaočkování zárodečnými krystaly se provádí při teplotě 65 až 66 °C.

Po ochlazení na okolní teplotu v průběhu jedné hodiny a míchání při uvedené teplotě po dobu další jedné hodiny se pevný podíl odfiltruje a promyje 42 ml toluenu ve třech rovných porcích o objemu 14 ml, načež se vysuší při teplotě 48 až 50 °C (3,3 k?a) v průběhu noci (14 hodin), přičemž se získá 57,7 g bílého pevného produktu. Pevný podíl a 122 ml 100% ethanolu se zahřívají na teplotu varu pod zpětným chladičem za míchání za vzniku čirého roztoku, načež se k tomuto «

jtei-íA:.'

-Λ». ώ roztoku přidá 288 ml vody předehřáté na zeplotu 55 °C v průběhu 25 minut. Směs se ochladí na teplotu 55 °C a zaočkuje 20 mg zárodečných krystalů čistého produktu. Tato směs sa ochladí na okolní teplotu v průběhu jedné hodiny a míchá při této teplotě přes noc (16 hodin). Pevný podíl se izoluje filtrací za sání za použití Buchnerovy nálevky a promyje celkem 57 ml směsi 100% ethanolu a vody (objemově 1:2,36) ve třech stejných porcích o objemu 19 ml. Pevný podíl se vysuší při okolní teplotě (3,8 kPa), přičemž se získá 62,2 g produktu ve formě bílé pevné látky ve formě 1,5 hydrátu.

>ta*tání: ^88₄až-91^C,'E-'.u ú ¹ ,; . -..’ί'-» .výtěžek: 42,5 %.

Způsobový příklad 2

Opakuje se výše uvedený postup s výjimkou spočívající y .tom, že se použije ekvivalentní množství N -cyklopentyladenosinu, přičemž se získá N -cyklopentyl-2'-0-methyladenosin. ♦ Způsobový příklad 3

Opakují se reakční stupně příkladu 1 s výjimkou spočívající v tom, že se v reakčním stupni C) dichlormethan nahradí terč.amylalkoholem a po prvotní krystalizací ze směsi ethanolu a vody se produkt rekrystalizuje z ethanolu a vody. Získá se 32,1 g (výtěžek přibližně 30 %) N -cyklohexyl-2'-Ov - * methyladenosinu majícího čistotu vyšší než 98 %.

Způsob podle vynálezu je, pokud jde o čas a náklady, hospodárnější než dosud známé způsoby. Způsob podle vynálezu poskytuje vhodnou metodu pro selektivní 2'-O-methyLací

N -cyklohexyladenosinu za podmínek katalýzy fázového přechodu a metodu čistění 2'-O-methylového derivátu. Při způsobu ροο-a vynálazc ηβπ oiny a chromá cocrr a zsoo^sql ooužíc nákladné ochranné sku*“

Claims (18)

1. Ρ A Τ E-..N Τ O V Ε

   Použití sloučeniny obecného vzorce I

   V V* -.·< - '-«7

   Ri

   HN

   (I) ve kterém znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, allylovou skupinu, methallylovou skupinu, přímou nebo rozvětvenou alkinylovou skupinu obsahující 3 až 7 uhlíkových atomů, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 8 uhlíkových atomů, hydroxycykloalkylovou skupinu, ve které cykloalkylový zbytek obsahuje 4 až 8 uhlíkových atomů, fenylovou skupinu mono- nebo -vzájemně nezávisle di-substituovanou halogenem s atomovým číslem 9 až 35, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy nebo skupinou CFp nebo fenylalkylovou skupinu, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy a fenvlo45 •íáM&š ~ i'Z^.

   :·μ~ \wisS vv kruh je nesubstizuovan nebo mor.o- nebo vzájemně nezávisle di-substituován halogenem s atomovým číslem 9 až 35, alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, alkoxy-skupinou obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy nebo skupinou C?^, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4. uhlíkové atomy a mající alespoň jednu hydroxy-skupinu nebo alespoň dvě fenylové skupiny, bicykloalkylovou skupinu, jakou je endo- nebo exo-bicyklo/2,2,1/heptylová skupina, naftylalkylovou skupinu, ve které alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 _f*} uhlíkové·.·,atomy, acenaftylenylalkylovou skupinti, ve · . které alkylový zbytek obsahuje 1 až 4 uhlíkové atomy, nebo skupinu obecného vzorce A nebo B (B) ve kterých

   Z

   Q

   A

   Y n

   znamena atom vodíku, hydroxy-skupinu nebo alkoxy-skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, znamená atom vodíku nebo hydroxy-skupinu, znamená skupinu -C^^-, -0-, -S- nebo přímou vazbu, znamená skupinu -(CH_?) - nebo přímou vazbu, znamená celé číslo od 1 do 3 a přerušovaná čára ve vzorci A znamená případnou vazbu, znamená azom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až

   4 uhlíkové atomy, amino-skupinu, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 5 uhlíkových atomu nebo atom halogenu s atomovým číslem 9 až 35 a .....

   R^ znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, jako analgetika pří výrobě léčiva vhodného pro léčení bolesti .
2. 2. Použití podle nároku 1, vyznačené tím, slpučenina-obecného_x vzorce: I - je zvolena?z množiny zahrnující 6'-hydroxycykloalkyl-2'-0-methyladenosiny, ve kterých
3. 3. Použití podle nároku 1, vyznačené tím, že v obecném vzorci I R^ má jiný význam než hydroxycykloaikylová skupina. .? ...........
4. 4. Použití podle nároku 3,vyznačené tím, že sloučeninou obecného vzorce I je 6-cyklohexyl-2'-O-methyladenosin.
5. 5. Použití podle některého z předcházejících nároků 1 až 4,vyznačené tím, že je určeno pro akutní bolest.
6. 6. Použití podle některého z předcházejících nároků 1 až 4,vyznačené tím, že je určeno pro chronickou neuropatickou bolest.
7. 7.

   Použití sloučeniny definované v některém z předcháze43 jících nároků 1 až 4 při léčení bolesti definované v některém z předcházejících nároků nebo způsob léčení bolesti defino váné v některém z předcházejících nároků, vyznačený t í m , že se subjektu, který potřebuje takové léčení, podá sloučenina podle některého z předcházejících nároků 1 až 4 nebo analgetická kompozice obsahující sloučeninu podle některého z předcházejících nároků 1 až 4 jako analgetikum v kombinaci s farmaceutickým nosičem nebo ředidlem.

   ) Λ * / * *J?* $ \ / f V ? * ** * «ί^-* ¹ í'*“*' ** *~ '* » * *' ^ř* ί» ** *

   -«Mů
8. 8.

   Sloučenina obecného vzorce la

   HN z^R/ ve kterém

   R^^z znamená cykloalkylovou skupinu obsahující 4 až 8 uhlí, kových a^tomů a substituovanou hydroxy-skupinou,

   R2 má význam uvedený v nároku 1 a

   R-j má význam uvedený v nároku 1.
9. 9. Sloučenina podle nároku 8 obecného vzorce la, ve kterém R^ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy nebo atom halogenu 5 atomovým číslem od 9 do 35.
10. 10. Sloučenina zvolená z množiny zahrnující

    6-/(trans)-4-hydroxycyklohexyl/-2'-O-methyladenosin,

    6-/(cis)-4-hydroxycyklohexyl/-2'-O-methyladenosin,

    6—/(1S,trans)-2-hydroxycyklopentyl/-2'-O-methyladenosin 6-/(1R,trans)-2-hydroxycyklopentyl/-2'-O-methyladenosin, 6-/( 1S, trans) -2-hyd’roxycyklohexyl/-2' -O-methyladenosin, 6-/(IR,trans)-2-hydrúxycyklohexyl/-2'-O-methyladenosin, 6-/( trans)-4’-hydróxyčýklóhexyl/-2^/-O-ethyladenosin a 6-/1S,(trans)-2-hydroxycyklohexyl/-2'-O-ethyladenosin./ ? > ' ·, >.· -
11. 11. Sloučenina podle nároku 8, 9 nebo 10 mající čistotu 95 %.

    2./Iv,.·Sloučenina podleJnároku’8, 9 nebo 10 prostá ír-cyklo alkyl-2' -O-methyladenosinu.
12. 13. Použití sloučenin obecného vzorce Ia podle některého z nároků 8 až 12 pro přípravu léčiv vhodných pro léčení bolesti, pro použití proti vysokému krevnímu tlaku, jako koronární vasodilatátor, pro inhibici agragace trombocytů nebo aktivace leukocytů, pro snížení hladiny lipidů v krvi, proti kongestivnímu srdečnímu selhání, infarktu myokardu, náhlé kardiální smrti, renální insuficienci, dále pro léčení hypertriglyceridemie/nízké hladiny HDL čolesterolu, lipidové dysfunkce, zvýšené hladiny volných mastných kyselin nebo/a cukrovky typu I nebo typu II, arytmií nebo pro ochranu proti infarktu myokardu.
13. 14. Farmaceutická kompozice, vyznačená tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučenin obecného vzorce la podle některého z nároků 8 až 12 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
14. 15. Sloučenina podle některého z nároků 8 až 12 pro použití při léčení bolesti, vysokého krevního tlaku, koronární vasokonstrikce, agregace trombocytů, vysoké hladiny lipidů v krvi, kongestivního srdečního selhání, náhlé kardiální smrti, renální insuficience, hypertriglyceridemie/nízké hladiny HDL cholesterolu, lipidové dysfunkce, zvýšené hladiny, vol ných mastných kyselin, cukrovky typu I nebo typu II, arytmií .a pro ochranu proti infarktu myokardu, nebo způsob použití '«A 4\^kové /sloučeniny, který (.zahrnu je podání sloučeniny^obecného vzorce la subjektu, který uvedené léčení potřebuje.· _íS ,,

    Způsob přípravy 2'-O-alkyladenosinú, v y z n a č e n ý tím ,_}že se adenosin uvede v .reakci s.příslušným alkylsulfátem-v přítomnosti katalyzátoru fázového převodu.

    -fy o
15. 17. Způsob podle nároku 16, vyznačený tím, , .že se připraví sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1.^; a ' ý ‘ >

    »
16. 18. Způsob podle nároku 16 nebo 17, vyznačený t í m, že připravenou sloučeninou je N-cyklohexyl-2'-0-methyladenosin.

    \ . . ' . Λ
17. 19. Sloučenina připravená způsobem podle nároku 16, 17 nebo 18.
18. 20. Způsob podání N^-cyklohexyl-2’-O-methyladenosinu > M W Z W 6 teplokrevnému živočichovi za účelem produkce N -hydroxycyklohexyl-2'-O-methyladenosinu.