CZ308176B6 - Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours - Google Patents

Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours Download PDF

Info

Publication number
CZ308176B6
CZ308176B6 CZ2014-227A CZ2014227A CZ308176B6 CZ 308176 B6 CZ308176 B6 CZ 308176B6 CZ 2014227 A CZ2014227 A CZ 2014227A CZ 308176 B6 CZ308176 B6 CZ 308176B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
liquid nitrogen
seed
capacity system
box
small
Prior art date
Application number
CZ2014-227A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CZ2014227A3 (en
Inventor
Petra Přenosilová
Věra Kopecká
Monika Kunetková
Jaroslav Šípek
Original Assignee
VÝZKUMNÝ ÚSTAV VETERINÁRNÍHO LÉKAŘSTVÍ, v.v.i.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by VÝZKUMNÝ ÚSTAV VETERINÁRNÍHO LÉKAŘSTVÍ, v.v.i. filed Critical VÝZKUMNÝ ÚSTAV VETERINÁRNÍHO LÉKAŘSTVÍ, v.v.i.
Priority to CZ2014-227A priority Critical patent/CZ308176B6/en
Publication of CZ2014227A3 publication Critical patent/CZ2014227A3/en
Publication of CZ308176B6 publication Critical patent/CZ308176B6/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02Preservation of living parts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02Preservation of living parts
    • A01N1/0236Mechanical aspects
    • A01N1/0263Non-refrigerated containers specially adapted for transporting or storing living parts whilst preserving, e.g. cool boxes, blood bags or "straws" for cryopreservation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02Preservation of living parts
    • A01N1/0236Mechanical aspects
    • A01N1/0263Non-refrigerated containers specially adapted for transporting or storing living parts whilst preserving, e.g. cool boxes, blood bags or "straws" for cryopreservation
    • A01N1/0268Carriers for immersion in cryogenic fluid, both for slow-freezing and vitrification, e.g. open or closed "straws" for embryos, oocytes or semen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61DVETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
    • A61D1/00Surgical instruments for veterinary use

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Small capacity seed cryoconservation system in liquid nitrogen vapour consisting of two serrated saw blades (1) mounted in a structure (2) in which two pivot arms (3) with meshes (4) are built on opposite sides, and all this is placed in a sealable two-part liquid nitrogen container consisting of a box (6) with notches (5) and a lid (7) and equipped with a nitrogen level meter (8).

Description

Oblast technikyTechnical field

Řešení se týká malokapacitního systému kryokonzervace (zmrazování) semene pro účely výzkumných pracovišť, veterinárních klinik a malokapacitních spermabank v parách tekutého dusíku.The invention relates to a small-capacity cryopreservation system for the purpose of research institutes, veterinary clinics and small-capacity spermabanks in liquid nitrogen vapors.

Dosavadní stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION

V současné době se inseminační dávky zmrazeného semene zvířat i člověka zmrazují a uchovávají v prostředí tekutého dusíku. Při jednom z běžně užívaném systému kryokonzervace je semeno skladováno v plastových dutinkách - pejetách. Pejety se dále mohou skladovat v tzv. gobletách (plastových různobarevných pouzdrech) naplněných tekutým dusíkem, které obsahují (podle své velikosti) různý počet pejet a umožňují oddělit semeno jednotlivých dárců či z jednotlivých odběrů a zároveň usnadňují lepší orientaci ve skladovacím systému kontejneru.Currently, insemination doses of frozen seed of both animals and humans are frozen and stored in liquid nitrogen. In one of the commonly used cryopreservation systems, the seed is stored in plastic tubes. The straws can also be stored in so-called goblets (plastic multicolored shells) filled with liquid nitrogen, which contain (according to their size) a different number of straws and allow to separate the seeds of individual donors or individual donations while facilitating better orientation in the container storage system.

Dosud užívané malokapacitní systémy zmrazování semene neumožňují závěrečné ultrarychlé a bezkontaktní zanoření pejet pod hladinu tekutého dusíku po uplynutí procesu zmrazování v parách tekutého dusíku. Zpomalení procesu přenosu pejet z par dusíku pod hladinu dusíku a jakákoli přímá manipulace s pejetami je však příčinou výkyv teploty semene, a tím dochází k narušení procesu krystalizace vzorku, jehož dopadem může být snížení přežitelnosti kryokonzervovaných spermií, což je nežádoucí.The previously used small-capacity seed freezing systems do not allow the ultra-fast and non-contact plunging of the liquid below the liquid nitrogen level after the liquid nitrogen vapor freezing process has elapsed. However, slowing down the transfer process of nitrogen vapors below nitrogen level and any direct manipulation of the packages causes the seed temperature to fluctuate, thereby disrupting the sample crystallization process, which may result in reduced survival of cryopreserved sperm, which is undesirable.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Výše uvedený nedostatek odstraňuje malokapacitní systém pro kryokonzervaci semene v parách tekutého dusíku, podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se skládá ze dvou pilovitých listů pro zachycení pejet, upevněných do konstrukce, ve které jsou v protilehlých stranách zabudována dvě otáčivá ramena s oky, a to celé je umístěno do uzavíratelné dvoudílné nádoby s tekutým dusíkem, která se skládá z boxu se zářezy a víka a je vybavená měřidlem hladiny dusíku.The above drawback removes the small capacity nitrogen cryopreservation system of the present invention, which consists of two sawtooth-retaining saw blades mounted in a structure in which two pivoting arms with eyes are mounted on opposite sides. , all of which is placed in a sealable two-part liquid nitrogen container consisting of a box with notches and a lid and equipped with a nitrogen level meter.

Malokapacitní systém podle vynálezu je charakterizován tím, že konstrukce je obdélníková a je vložena do odpovídající obdélníkové nádoby.The small capacity system of the invention is characterized in that the structure is rectangular and is inserted into a corresponding rectangular container.

Malokapacitní systém podle vynálezu je dále charakterizován tím, že v konstrukci s otáčivými rameny a oky jsou celkem uchyceny dvě goblety.The small capacity system according to the invention is further characterized in that two goblets are held in total in a rotating arms and mesh construction.

Celý malokapacitní systém podle vynálezu je tvořen z ocelového držáku pejet a goblet a dále z polystyrénového boxu se zářezy a s integrovaným měřítkem a víkem. Držák pejet a goblet se skládá z nosné plochy pro pejety, kterou tvoří dva 2 pilové listy upevněné do obdélníkové konstrukce znemožňující pejetám boční posun a bránící tak nechtěnému předčasnému pádu pejet pod hladinu tekutého dusíku, který by byl příčinou znehodnocení konzervovaného semene. Podstatnou součástí držáku jsou dvě otáčivá ramena (rozsah rotace až 360°) s oky a jsou připevněná ve dvou protilehlých rozích konstrukce, která umožňují upevnit držák na uzavíráteIný box nebo uložení držáku na dno boxu.The whole small-capacity system according to the invention consists of a steel rod and goblet holder and a polystyrene box with notches and an integrated scale and lid. The straw holder and goblet consists of a support surface for straws, consisting of two 2 saw blades fixed in a rectangular construction preventing lateral movement of the straws and preventing unwanted premature dropping below the level of liquid nitrogen, which would cause the canned seed to deteriorate. An essential part of the bracket are two swivel arms (rotation range up to 360 °) with lugs and are attached at two opposite corners of the structure that allow the bracket to be attached to the closable box or the bracket to the bottom of the box.

V průběhu kryokonzervace semene jsou otočná raménka nejprve zachycena v horní části polystyrénového boxu ve vytvořených zářezech, čímž umožní umístění pejet se semenem v parách tekutého dusíku v požadované výšce nad jeho hladinou. Poté je možno pouhým otočenímDuring seed cryopreservation, the swivel arms are first trapped at the top of the polystyrene box in the formed slots, thereby allowing placement of the seed with the seed in vapors of liquid nitrogen at the desired height above its surface. Then it is possible by simply turning

- 1 CZ 308176 B6 ramének o 90° zasunout celý držák s pejetami dovnitř boxu a celou konstrukci tak rychle ponořit pod hladinu tekutého dusíku, aniž by došlo ke kontaktu uživatele s vlastními pejetami.90 ° of the arm by 90 ° to insert the entire holder with the seals into the box and so quickly submerge the whole structure below the level of liquid nitrogen without the user contacting the seals.

Pro omezení úniku par tekutého dusíku při kryokonzervaci je možné celý systém uzavřít pomocí polystyrénového víka, které těsně přiléhá na horní část boxu.To reduce the leakage of liquid nitrogen vapors during cryopreservation, the entire system can be sealed with a polystyrene lid that fits snugly against the top of the box.

Vlastní umístění držáku nad hladinou tekutého dusíku je měnitelné mírou naplnění boxu tekutým dusíkem, proto je uvnitř integrováno měřítko hladiny tekutého dusíku, které poskytne uživateli přehled o výšce hladiny.The actual positioning of the holder above the liquid nitrogen level is variable by the degree of liquid nitrogen filling of the box, therefore a liquid nitrogen level measure is integrated inside to provide the user with an overview of the level.

Na konci otáčivých ramen jsou vytvořeny držáky goblet ve tvaru ok (vhodné pro goblety o menším až středním průměru), ve kterých mohou být goblety po ukončení zmrazovacího procesu upevněny (zasunutím goblety do kovového oka) a zmrazené pejety do nich přemístěny. Goblety s pejetami jsou poté přeneseny do zásobních kontejnerů s tekutým dusíkem pro dlouhodobé skladování vytvořených inseminačních dávek, aniž by tím došlo k nežádoucímu narušení procesu krystalizace vzorku, jehož dopadem může být snížení přežitelnosti kryokonzervovaných spermií, jak se dříve stávalo. Celý malokapacitní systém podle vynálezu je velikostně variabilní a lehce přenosný.Mesh-shaped goblets (suitable for small to medium diameter goblets) are provided at the end of the pivoting arms, in which the goblets can be fixed (by inserting the goblets into the metal eye) after the freezing process has been completed and the frozen straws moved there. Goblets with straws are then transferred to liquid nitrogen storage containers for long-term storage of the produced semen collection, without unduly disrupting the crystallization process of the sample, which may have the effect of reducing the survival of cryopreserved sperm as previously occurred. The entire small-capacity system of the invention is variable in size and easily portable.

Objasnění výkresůClarification of drawings

Na přiložených výkresech je na Obr. 1 schematicky znázorněn detail vlastní konstrukce držáku pejet a goblet s otočnými raménky s oky.In the accompanying drawings, FIG. 1 schematically shows a detail of the actual construction of the straw and goblet holder with pivoting arms with eyes.

Na Obr. 2 je schematicky znázorněn celý malokapacitní systém pro kryokonzervaci semene držák pejet a goblet s otočnými raménky - umístěný v nádobě s tekutým dusíkem (polystyrénovém boxu se zářezy a s integrovaným měřítkem a víkem).In FIG. 2 is a schematic illustration of the entire seed cryopreservation system of a straw holder and a goblet with swivel arms positioned in a liquid nitrogen container (a polystyrene box with notches and an integrated scale and lid).

Následující příklady provedení malokapacitní systém podle vynálezu pouze dokládají, ale neomezují.The following examples illustrate, but do not limit, the small capacity system of the invention.

Příklady uskutečnění vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Příklad 1Example 1

Celý malokapacitní systém podle vynálezu (obr. 2) je tvořený dvěma pilovitými listy 1 upevněnými v konstrukci 2 a dvěma otočnými rameny 3 s koncovými oky 4 pro uchycení goblet, a dále polystyrénovým boxem 6 s víkem 7, jejichž velikost lze měnit. Box 6 s víkem 7 mohou být vytvořeny i z jiných tepelně izolačních materiálů. V horní části uvnitř boxu 6 se nacházejí zářezy 5 pro umístění otočných ramen 3 a také uvnitř je integrováno měřítko 8 hladiny tekutého dusíku. Po naplnění boxu 6 tekutým dusíkem do výšky podle požadavku uživatele, se zavěsí do zářezů 5 v horní části boxu 6 vlastní konstrukce 2 pomocí dvou otočných ramen 3. Box 6 se poté uzavře víkem 7. Po požadované době ekvilibrace semene v parách tekutého dusíku se při mírném nadzvednutí a otočení ramen 3 o 90 ° naráz celou konstrukci 2 zasune dovnitř boxu 6 pod hladinu tekutého dusíku. Výšku hladiny tekutého dusíku lze upravovat. Nakonec je možno využít koncových ok 4 na otočných ramenech 3 k zafixování goblet (zasunutím goblety do kovového oka 4) a přemístit do takto upevněných goblet pejety se zmrazeným semenem, a to vše provést pod hladinou tekutého dusíku.The whole small-capacity system according to the invention (FIG. 2) consists of two saw blades 1 fixed in the structure 2 and two pivot arms 3 with end eyes 4 for receiving goblets, and a polystyrene box 6 with a lid 7, which can be resized. The box 6 with the lid 7 may also be formed of other thermal insulation materials. In the upper part inside the box 6 there are notches 5 for accommodating the pivot arms 3 and also inside is a scale 8 of the liquid nitrogen level. After filling the box 6 with liquid nitrogen to a height as required by the user, it is suspended in the slots 5 in the upper part of the box 6 of the actual structure 2 by means of two pivot arms 3. The box 6 is then closed with the lid. by slightly lifting and turning the arms 3 90 ° at once, the entire structure 2 is inserted inside the box 6 below the level of liquid nitrogen. The liquid nitrogen level can be adjusted. Finally, the end eyelets 4 on the pivot arms 3 can be used to fix the goblets (by inserting the goblets in the metal eye 4) and move them to the frozen seed goblets thus fixed, all below the level of liquid nitrogen.

Malokapacitní systém podle vynálezu, s kapacitou pro 30 pejet, je prakticky používán v prostředí andrologické laboratoře na Výzkumném ústavu veterinárního lékařství, v.v.i. Brno, CZ, kde se plně osvědčil při kryokonzervaci semene různých druhů hospodářských, zájmových i exotických druhů zvířat. Jeho použití zefektivnilo práci při zpracování inseminačních dávek a snížilo rizikoThe small capacity system of the present invention, with a capacity for 30 straws, is practically used in an Andrological Laboratory environment at the Veterinary Research Institute, v.v.i. Brno, CZ, where it has proved itself in cryopreservation of seeds of various types of farm, hobby and exotic animal species. Its use has streamlined the work of processing insemination doses and reduced the risk

-2CZ 308176 B6 práce s genetickým materiálem v rizikovém prostředí za přítomnosti tekutého dusíku. Využití systému snižuje riziko předčasného pádu pejet se semenem pod hladinu tekutého dusíku a eliminuje negativní dopad teplotních výkyvů na přežitelnost zmrazovaných spermií, ke kterým by docházelo při přímé manipulaci s pejetami v parách tekutého dusíku.Working with genetic material in hazardous environments in the presence of liquid nitrogen. The use of the system reduces the risk of premature dropping of seed straws under liquid nitrogen and eliminates the negative impact of temperature fluctuations on the survival of frozen sperm that would occur when handling straws directly in liquid nitrogen vapors.

Průmyslová využitelnostIndustrial applicability

Nový malokapacitní systém pro kryokonzervaci semene v parách tekutého dusíku je možné velikostně zvolit podle kapacity pracoviště. Podle požadovaného počtu pejet je zvolena velikost držáku pejet i polystyrénového boxu tak, aby byla práce co nej efektivnější, tj. aby nedocházelo k zbytečným ztrátám tekutého dusíku.The new small-capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapors can be selected according to the capacity of the workplace. Depending on the required number of straws, the size of the straw holder and the polystyrene box is chosen so that the work is as efficient as possible, ie to avoid unnecessary loss of liquid nitrogen.

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS

Claims (3)

1. Malokapacitní systém pro kryokonzervaci semene v parách tekutého dusíku, vyznačující se tím, že se skládá ze dvou pilovitých listů (1) pro zachycení pejet, upevněných do konstrukce (2), ve které jsou v protilehlých stranách zabudována dvě otáčivá ramena (3) s oky (4), a to celé je umístěno do uzavíratelné dvoudílné nádoby s tekutým dusíkem, která se skládá z boxu (6) se zářezy (5) a víka (7) aje vybavená měřidlem (8) hladiny dusíku.Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapors, characterized in that it consists of two sawtooth-retaining blades (1) mounted in a structure (2) in which two pivot arms (3) are incorporated in opposite sides With the lugs (4), the whole is placed in a sealable two-part liquid nitrogen container consisting of a box (6) with notches (5) and a lid (7) and equipped with a nitrogen level meter (8). 2. Malokapacitní systém podle nároku 1, vyznačující se tím, že konstrukce (2) je obdélníková aje vložena do odpovídající obdélníkové nádoby.Small-capacity system according to claim 1, characterized in that the structure (2) is rectangular and is inserted into a corresponding rectangular container. 3. Malokapacitní systém podle nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že v konstrukci (2) s otáčivými rameny (3) a oky (4) jsou celkem uchyceny dvě goblety.Small-capacity system according to claims 1 and 2, characterized in that two goblets are mounted in total in the structure (2) with the pivoting arms (3) and the eyes (4).
CZ2014-227A 2014-04-04 2014-04-04 Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours CZ308176B6 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2014-227A CZ308176B6 (en) 2014-04-04 2014-04-04 Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2014-227A CZ308176B6 (en) 2014-04-04 2014-04-04 Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2014227A3 CZ2014227A3 (en) 2015-10-14
CZ308176B6 true CZ308176B6 (en) 2020-02-05

Family

ID=54259046

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2014-227A CZ308176B6 (en) 2014-04-04 2014-04-04 Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ308176B6 (en)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111034714A (en) * 2020-01-23 2020-04-21 中科宝承生物医学科技有限公司 NK cell cryopreservation equipment and operation method thereof
CN114586771A (en) * 2022-03-16 2022-06-07 上海市农业科学院 Cryopreservation method of pig semen

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS271593B1 (en) * 1988-08-24 1990-10-12 Vladimir Ing Csc Landa Method of mammals' embryos cryopreservation
WO2004110144A2 (en) * 2003-06-12 2004-12-23 21St Century Medicine, Inc. Cryogenic storage system
KR20100092252A (en) * 2009-02-12 2010-08-20 강원대학교산학협력단 An internal organ storage case for animal

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS271593B1 (en) * 1988-08-24 1990-10-12 Vladimir Ing Csc Landa Method of mammals' embryos cryopreservation
WO2004110144A2 (en) * 2003-06-12 2004-12-23 21St Century Medicine, Inc. Cryogenic storage system
KR20100092252A (en) * 2009-02-12 2010-08-20 강원대학교산학협력단 An internal organ storage case for animal

Also Published As

Publication number Publication date
CZ2014227A3 (en) 2015-10-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6114185B2 (en) Improved micromanipulation and storage apparatus and method
MX2021003898A (en) Apparatus to preserve and identify biological samples at cryogenic conditions.
WO2011070973A1 (en) Narrow tube for vitrification preservation of animal embryo or ovum
Ballesteros et al. Cryopreservation of seeds and seed embryos in orthodox-, intermediate-, and recalcitrant-seeded species
ES2969987T3 (en) cryopreservation device
ES2953310T3 (en) Method, system and apparatus for improved micromanipulation and storage
US20150313211A1 (en) A Method of Vitrification
EP2353383A2 (en) Closed ultra-rapid cell vitrification device and sealing procedure of the device
CA2969246A1 (en) A closed system cryopreservation device
CZ308176B6 (en) Small capacity system for seed cryopreservation in liquid nitrogen vapours
Gandhi et al. Appendix A: Cryotech® vitrification thawing
JP5852499B2 (en) Pre-freezing device for biological samples
Somfai et al. Vitrification of porcine oocytes and zygotes in microdrops on a solid metal surface or liquid nitrogen
Hunt et al. Cryopreservation of human embryonic stem cell lines
Vollmer et al. Cryopreservation of potato shoot tips for long-term storage
CZ27073U1 (en) Small-capacity system for cryopreservation of seed
Kenyon et al. Transporting mouse embryos and germplasm as frozen or unfrozen materials
CN105028390A (en) Efficient biological material cryopreservation method
WO2020188598A1 (en) Cryopreservation box
Salma et al. Cryopreservation of date palm pro-embryonic masses using the D cryo-plate technique
CN203877190U (en) Large-diameter liquid nitrogen biopack
ES2459893A2 (en) Method for the vitrification of biological material using closed thermoplastic polymer microcapillaries introduced into cryogenic fluids
de Vries et al. Bulk droplet vitrification for primary hepatocyte preservation
US20160207046A1 (en) Carrier for Biological Materials
JP4498260B2 (en) Method for sealing vitrification tools

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20220404