CZ306322B6 - Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující - Google Patents
Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující Download PDFInfo
- Publication number
- CZ306322B6 CZ306322B6 CZ2014-925A CZ2014925A CZ306322B6 CZ 306322 B6 CZ306322 B6 CZ 306322B6 CZ 2014925 A CZ2014925 A CZ 2014925A CZ 306322 B6 CZ306322 B6 CZ 306322B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- substituted
- pyrazine
- general formula
- phenylhydrazinyl
- preparation
- Prior art date
Links
- JCJKFBPNPZRQAM-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-2-pyrazin-2-ylhydrazine Chemical class C1(=CC=CC=C1)NNC1=NC=CN=C1 JCJKFBPNPZRQAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title abstract 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 29
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 21
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 229940067157 phenylhydrazine Drugs 0.000 claims abstract description 6
- GELVZYOEQVJIRR-UHFFFAOYSA-N 2-chloropyrazine Chemical class ClC1=CN=CC=N1 GELVZYOEQVJIRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000004031 phenylhydrazines Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 claims description 12
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims description 11
- 241000186367 Mycobacterium avium Species 0.000 claims description 7
- 229910004013 NO 2 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 241000186363 Mycobacterium kansasii Species 0.000 claims description 5
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 4
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims description 4
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 3
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 claims description 3
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 48
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 32
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 abstract 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 20
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 20
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 11
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 11
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 11
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 11
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 10
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 9
- FMSRCHYXAOIQFU-UHFFFAOYSA-N 5-chloro-6-methylpyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound CC1=NC(C#N)=C(C#N)N=C1Cl FMSRCHYXAOIQFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- NZTHDEBIUKWGSX-UHFFFAOYSA-K [Na+].[Mg++].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O Chemical compound [Na+].[Mg++].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O NZTHDEBIUKWGSX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 8
- YHPMRHPLAQSPHJ-UHFFFAOYSA-N 3-chloropyrazine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=NC=CN=C1Cl YHPMRHPLAQSPHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 6
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 6
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 6
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 6
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 6
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 6
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 6
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 6
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 6
- DSSWAKDDLJDNQL-UHFFFAOYSA-N 5-[2-(3-chlorophenyl)hydrazinyl]-6-methylpyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound Cc1nc(C#N)c(nc1NNc1cccc(Cl)c1)C#N DSSWAKDDLJDNQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 5
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 5
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 5
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 5
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 5
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 5
- SXPOZFPRLGAWIL-UHFFFAOYSA-N 3-(2-phenylhydrazinyl)pyrazine-2-carboxamide Chemical compound C1(=CC=CC=C1)NNC=1C(=NC=CN=1)C(=O)N SXPOZFPRLGAWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GOMCIELYDUWWBM-UHFFFAOYSA-N 5-[2-(4-chlorophenyl)hydrazinyl]-6-methylpyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound Cc1nc(C#N)c(nc1NNc1ccc(Cl)cc1)C#N GOMCIELYDUWWBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GMRLGNZXYWNIAW-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-6-[2-(2-nitrophenyl)hydrazinyl]pyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound Cc1nc(C#N)c(nc1NNc1ccccc1[N+]([O-])=O)C#N GMRLGNZXYWNIAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710172176 Fasciclin-1 Proteins 0.000 description 4
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 4
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 4
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- CQNLCKDRJWALLN-UHFFFAOYSA-N 3-[2-(2-nitrophenyl)hydrazinyl]pyrazine-2-carboxamide Chemical compound [N+](=O)([O-])C1=C(C=CC=C1)NNC=1C(=NC=CN=1)C(=O)N CQNLCKDRJWALLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YUUPPVLDKLUIGC-UHFFFAOYSA-N 5-[2-(2-chlorophenyl)hydrazinyl]-6-methylpyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC=C1)NNC=1N=C(C(=NC=1C)C#N)C#N YUUPPVLDKLUIGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 5-chloropyrazinamide Chemical class 0.000 description 3
- WWPFCEIBIOQFKT-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-6-(2-phenylhydrazinyl)pyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical compound CC=1N=C(C(=NC=1NNC1=CC=CC=C1)C#N)C#N WWPFCEIBIOQFKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001355 anti-mycobacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000005102 attenuated total reflection Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 3
- 150000003857 carboxamides Chemical group 0.000 description 3
- 229960003496 delamanid Drugs 0.000 description 3
- XDAOLTSRNUSPPH-XMMPIXPASA-N delamanid Chemical compound C([C@]1(C)OC2=NC(=CN2C1)[N+]([O-])=O)OC(C=C1)=CC=C1N(CC1)CCC1OC1=CC=C(OC(F)(F)F)C=C1 XDAOLTSRNUSPPH-XMMPIXPASA-N 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- ZCGNOVWYSGBHAU-UHFFFAOYSA-N favipiravir Chemical compound NC(=O)C1=NC(F)=CNC1=O ZCGNOVWYSGBHAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229950008454 favipiravir Drugs 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 3
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N hydrazine group Chemical group NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000003216 pyrazines Chemical class 0.000 description 3
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 3
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 3
- BBAWEDCPNXPBQM-GDEBMMAJSA-N telaprevir Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@@H]2CCC[C@@H]2[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC)C(=O)C(=O)NC1CC1)C(C)(C)C)C1CCCCC1)C(=O)C1=CN=CC=N1 BBAWEDCPNXPBQM-GDEBMMAJSA-N 0.000 description 3
- 229960002935 telaprevir Drugs 0.000 description 3
- 108010017101 telaprevir Proteins 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- GHGPIPTUDQZJJS-UHFFFAOYSA-N (2-chlorophenyl)hydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1Cl GHGPIPTUDQZJJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FRBUNLLUASHNDJ-UHFFFAOYSA-N (2-nitrophenyl)hydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O FRBUNLLUASHNDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GFPJLZASIVURDY-UHFFFAOYSA-N (3-chlorophenyl)hydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC(Cl)=C1 GFPJLZASIVURDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XXNOGQJZAOXWAQ-UHFFFAOYSA-N 4-chlorophenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=C(Cl)C=C1 XXNOGQJZAOXWAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GFEFMHWOSWUJSO-UHFFFAOYSA-N 5-chloropyrazine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=C(Cl)C=N1 GFEFMHWOSWUJSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022089 Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Human genes 0.000 description 2
- 241001432959 Chernes Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710172177 Fasciclin-2 Proteins 0.000 description 2
- 241000701087 Felid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 2
- LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N Hydrocyanic acid Chemical group N#C LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 2
- 241001646725 Mycobacterium tuberculosis H37Rv Species 0.000 description 2
- 241001302239 Mycobacterium tuberculosis complex Species 0.000 description 2
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N Phenanthrene Natural products C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Natural products C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 2
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 2
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 2
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 2
- 238000007908 dry granulation Methods 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 2
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 229940045505 klebsiella pneumoniae Drugs 0.000 description 2
- TYZROVQLWOKYKF-ZDUSSCGKSA-N linezolid Chemical compound O=C1O[C@@H](CNC(=O)C)CN1C(C=C1F)=CC=C1N1CCOCC1 TYZROVQLWOKYKF-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 229960003907 linezolid Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 208000015688 methicillin-resistant staphylococcus aureus infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N phenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1 HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229960000888 rimantadine Drugs 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000005550 wet granulation Methods 0.000 description 2
- ARAIBEBZBOPLMB-UFGQHTETSA-N zanamivir Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](N=C(N)N)C=C(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO ARAIBEBZBOPLMB-UFGQHTETSA-N 0.000 description 2
- 229960001028 zanamivir Drugs 0.000 description 2
- UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 1-(1-adamantyl)ethanamine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- IZXIZTKNFFYFOF-UHFFFAOYSA-N 2-Oxazolidone Chemical class O=C1NCCO1 IZXIZTKNFFYFOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPPOVKLYUDRLBI-UHFFFAOYSA-N 3-amino-5-pyridin-2-ylpyrazine-2-carbonitrile Chemical class C1=CC=NC(=C1)C2=CN=C(C(=N2)N)C#N LPPOVKLYUDRLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIDBCFIWXADMDI-UHFFFAOYSA-N 5-(pyridin-2-ylamino)pyrazine-2-carbonitrile Chemical class C1=NC(C#N)=CN=C1NC1=CC=CC=N1 IIDBCFIWXADMDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPOFSDHJNNWQL-UHFFFAOYSA-N 6-chloropyrazine-2-carbonitrile Chemical compound ClC1=CN=CC(C#N)=N1 CZPOFSDHJNNWQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 101150050673 CHK1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N Ciprofloxacin Natural products C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000709673 Coxsackievirus B4 Species 0.000 description 1
- 101710198510 Enoyl-[acyl-carrier-protein] reductase [NADH] Proteins 0.000 description 1
- 241001495410 Enterococcus sp. Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010039731 Fatty Acid Synthases Proteins 0.000 description 1
- 241000725579 Feline coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101000582767 Homo sapiens Regucalcin Proteins 0.000 description 1
- 101000777293 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase Chk1 Proteins 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 241001480504 Mammalian orthoreovirus 1 Species 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 101710155616 Nicotinamidase/pyrazinamidase Proteins 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Natural products N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000235645 Pichia kudriavzevii Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241000713126 Punta Toro virus Species 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100030262 Regucalcin Human genes 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 102100031081 Serine/threonine-protein kinase Chk1 Human genes 0.000 description 1
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 102000000551 Syk Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010016672 Syk Kinase Proteins 0.000 description 1
- 241001045770 Trichophyton mentagrophytes Species 0.000 description 1
- 241001634961 Trichosporon asahii Species 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000222126 [Candida] glabrata Species 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940091771 aspergillus fumigatus Drugs 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 208000032343 candida glabrata infection Diseases 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000005392 carboxamide group Chemical group NC(=O)* 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N cyanopyrazine Chemical group N#CC1=CN=CC=N1 PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005695 dehalogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000005672 electromagnetic field Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229960004884 fluconazole Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000012105 intracellular pH reduction Effects 0.000 description 1
- 125000003010 ionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 description 1
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 238000007144 microwave assisted synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 201000009671 multidrug-resistant tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229940053050 neomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid amide Natural products NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004957 nitroimidazoles Chemical class 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000003444 phase transfer catalyst Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- OTVZGAXESBAAQQ-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2,3-dicarbonitrile Chemical class N#CC1=NC=CN=C1C#N OTVZGAXESBAAQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 108091006091 regulatory enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011268 retreatment Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 101150008822 rpsA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- JJICLMJFIKGAAU-UHFFFAOYSA-M sodium;2-amino-9-(1,3-dihydroxypropan-2-yloxymethyl)purin-6-olate Chemical compound [Na+].NC1=NC([O-])=C2N=CN(COC(CO)CO)C2=N1 JJICLMJFIKGAAU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000006561 solvent free reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003463 sulfur Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- FNDDDNOJWPQCBZ-ZDUSSCGKSA-N sutezolid Chemical compound O=C1O[C@@H](CNC(=O)C)CN1C(C=C1F)=CC=C1N1CCSCC1 FNDDDNOJWPQCBZ-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229950000448 sutezolid Drugs 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000001549 tubercolostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
- C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
- C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
- A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I, kde každé R.sup.1.n., R.sup.2.n. znamená nezávisle H nebo CN; R.sup.3.n. znamená CH.sub.3.n. nebo CONH.sub.2.n.; každé R.sup.4.n., R.sup.5.n., R.sup.6.n., R.sup.7.n., R.sup.8.n. znamená nezávisle H, Cl, nebo NO.sub.2.n.. Vynález dále řeší způsob přípravy těchto látek spočívající v tom, že se na příslušný substituovaný chlorpyrazin působí substituovaným fenylhydrazinem za podmínek mikrovlnné syntézy. Sloučeniny obecného vzorce I se vyznačují nízkou toxicitou a vysokou účinností proti mykobakteriím. Lze je také využít ve farmaceutických přípravcích jako antituberkulotikum.
Description
Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující
Oblast techniky
Předložený vynález se týká nových sloučenin na bázi substituovaných fenylhydrazinyl-pyrazinů, způsobu jejich přípravy, jejich použití jako antituberkulotika a farmaceutických přípravků s jejich obsahem.
Dosavadní stav techniky
Substituované deriváty pyrazinu patří ke sloučeninám s významnou biologickou aktivitou, používají se jako důležitá léčiva (Miniyar P.B., Murumkar P.R., Patil P.S., et al.: Mini Rev. Med. Chem. 13, 1607-25, 2013; Ferreira S.B., Kaiser C.R. Exp. Opin. Ther. Patents 22, 103351,2012).
Tuberkulóza (TB), způsobená Mycobacterium tuberculosis complex (MTB), patří již řadu let k nejrozšířenějším infekčním onemocněním na světě. Její incidenci ani mortalitu se dosud nepodařilo i přes dosavadní antituberkulotickou léčbu snížit (World Health Organization, Stop TB Partnership. Tuberculosis Global Facts 2014). Důvodem je i vznik a vývoj čím dál více rezistentních forem původce tohoto onemocnění a spoluinfekce s HIV, jejichž výskyt je v České republice na vzestupu (Ústav zdravotnických informací a statistiky ČR. Tuberkulóza a respirační nemoci 2012. Praha: ÚZIS, 2013. 111 s.). Z těchto důvodů je potřeba vyvíjet nová účinnější nízkomolekulámí antituberkulotická léčiva, aktivní i na stále častěji se vyskytující rezistentní kmeny původce tohoto onemocnění.
Mezi nejdůležitější protituberkulózní léčiva první linie (spolu s isoniazidem, rifampicinem a ethambutolem) pro léčbu TBC patří pyrazinamid (PZA). Proti latentním formám TB (tzv. polospící, spící mykobakterie vyskytující se v kyselém prostředí tkání) jsou aktivní pouze PZA, popř. rifampicin. Díky PZA dochází ke zkrácení léčby z 9 až 12 na 6 měsíců, což je způsobeno schopností zabíjet perzistující mykobakteria v kyselém prostředí. (Zhang H., et al. The FEBS Journal 275, 753-762, 2008). Pyrazinamid nepůsobí jedním mechanismem, ale nacházejí se stále nové cesty jeho účinku: a) PZA je proléčivo, které je převedeno pomocí enzymu nikotinamidasy/pyrazinamidasy (PncA) na kyselinu pyrazinkarboxylovou (POA), jako jeho aktivní formu. Dochází k akumulaci POA a intracelulámí acidifikaci (Doležal M., Kešetovič D., Zitko J. Curr. Pharm. Design, 2011, vol. 17, no. 32, p. 3506-3514). Narušení prostředí vede k ovlivnění aktivity enzymatických systémů a narušuje procesy, které jsou závislé na gradientu pH na rozhraní organela/cytoplazmatický prostor (Zhang H., et al. The FEBS Journal 275, 753-762, 2008). Dále působí prostřednictvím inhibice syntézy proteinů a RNA, vychytávání šeřinu narušení membránového potenciálu v kyselém pH (Wright H.T., Reynolds K.A. Curr. Opin. Microbiol. 10, 447-453, 2007); b) ovlivňuje RpsA - regulační enzym odpovědný za biologické procesy, včetně adheze buňky, diferenciace či migrace (Zimic M., et al. Microb. Drug Resist. 18, 372-375, 2012; Sayahi H., et al. Chemistry & Biodiversity 9, 2582-2596, 2012). Jeho prostřednictvím inhibuje transtranslaci, což je proces zabraňující vytvoření nefunkčních proteinů a je spojený se stresovým přežitím, virulencí a zotavení z nutričního hladovění (Shi W., Zhang X., Jiang X., et al. Science 333, 1630-1632, 2011); c) předpokládaná kompetice PZA (a 5-chlorpyrazin-2-karboxamidu) sNADPH o navázání na komplex FAS I (Fatty Acid Synthase). Dochází k inhibici syntézy mykolových kyselin, které jsou součástí buněčné stěny mykobakteria. I POA se váže na FAS I, ale v jiném místě (Zimic M., et al. Microb. Drug Resist. 18, 372-375, 2012; Sayahi H., et al. Chemistry & Biodiversity 9, 2582-2596, 2012). Později bylo zjištěno, že FAS I je především cílem derivátů pyrazinamidu, mimo jiné 5-chlorpyrazinamidu, který inhibuje také komplex FAS II. FAS I se podílí na syntéze mykolových kyselin s krátkým řetězcem, FAS II zprostředkovává
-1 CZ 306322 B6 syntézu mykolových kyselin s dlouhým řetězcem. Jedním z klíčových enzymů FAS 11 je enoylACP-reduktasa (Ngo S.C., et al. Antimicrob. Agents Chemother. 51, 2430-2435, 2007).
conh2 pyrazinamid 5-ch lorpy razí n-2-karboxamid
Farmaceutický výzkum a vývoj zanedbal oblast antituberkulotik (AT), prakticky 40 let nebylo na trh uvedeno nové léčivo z této indikační skupiny, v současné době (2014) jsou ve světě ve třetím stadiu klinických zkoušek pouze 2 nová antituberkulotika (zcela nových struktur) bedachilin a delamanid. Tato nová AT se však musí kombinovat např. s PZA nebo rifampicinem. Vzhledem k problémům léčby TBC je každá nová látka velmi očekávaná, neboť na současně používaná AT vzniká postupně rezistence a je pouze otázkou času, kdy nebudou k dispozici proti TB žádná účinná léčiva (Matthias Stehr M., Elamin A.A., Singh M. Curr. Top. Med. Chern. 14, 110-129, 2014).
bedachilin
delamanid
Z důvodů výše uvedených je snaha nalézt AT, která by působila vůči MDR-TB kmenům, případně vůči latentním formám TB. Musí se jednat o strukturně nové sloučeniny, které působí jiným mechanismem než současně používaná AT, popř. s vylepšeným farmakokinetickým profilem. Nová potenciální AT, která jsou nyní v preklinické a klinické fázi vývoje, jsou často látky, které obsahují ve své molekule nitroskupinu. Jedná se například o nitroimidazoly PA-824, OPC67683 a delamanid. Další perspektivní skupinou AT jsou oxazolidinony, např. linezolid a sutezolid, obsahující mj. i karboxamidovou funkční skupinu (Matthias Stehr M., Elamin A.A., Singh M. Curr. Top. Med. Chern. 14, 110-129, 2014).
linezolid sutezolid _ 2 .
U všech těchto látek se nitro skupina, popř. karboxamidová skupina ukázaly jako esenciální pro jejich antimykobakteriální aktivitu, avšak mechanismem účinku se navzájem lišily (Matthias Stehr M., Elamin A.A., Singh M. Curr. Top. Med. Chem. 14, 110-129, 2014).
Motiv pyrazinkarboxamidu najdeme v celé řadě moderních léčiv, jako jsou antineoplastikum bortezomib (Palle Raghavendracharyulu Venkata, Kadaboina Rajasekhar, Murki Veerendeer et al. Bortezomib and proces for producing same. LJS2010226597 (2010)), antivirotika favipiravir (Furuta Y, Takahashi K, Shirakib K, et al. T-705 (favipiravir) and related compounds: Novel broad-spectrum inhibitors of RNA viral infections. Antiviral Res. 82, 95-102, 2009) či telaprevir (Zeuzem S., Andreone P., Pol S., et al. Telaprevir for Retreatment of HCV Infection. New Engl. J. Med. 25,2417-28, 2011).
FL
N ΌΗ bortezomib favipiravir telaprevir
Fragment PZA obsahuje rovněž velký počet léčiv v klinické fázi testování, příkladem jsou deriváty pyrazinu patentované jako inhibitory kinas (Charrier J.D., Durrant S.J., Kay D., et al. Compounds useful as inhibitors of ATR kinase; US2014113005 (2014); Song Y., Xu Q., Jia Z., et al. Preparation of pyrazine derivatives for use as Syk kinase activity inhibitors. US20130131040 (2013); Boyle R.G., Boyce R.J. Preparation of 1-(substituted phenyl)-3-(5-cyano-pyrazin-2-yl) urea compounds as Chk-1 kinase inhibitors. WO2013072502 (2013); Collins I., Lainchbury M., Matthews T.P., Reader J.C. Preparation of 5-(pyridin-2-ylamino)pyrazine-2-carbonitrile compounds as CHK1 inhibitors. WO2013068755 (2013); Collins I., Lainchbury M., Matthews T.P., Reader J.C. 5-(pyridine-2-yl-aminopyrazine-2-carbonitrile compounds and their therapeutic use. AU2012335409 (2014)).
V posledních desetiletích se do popředí zájmu farmaceutických chemiků dostaly metody mikrovlnné syntézy a jejich aplikace vhodné pro vývoj nových léčiv. Tyto reakce obvykle poskytují vyšší výtěžek, vyžadují výrazně kratší reakční dobu a snižují spotřebu rozpouštědel ve srovnání s konvenčními metodami organické syntézy. V některých případech lze požadované produkty získat pouze pomocí mikrovlnné syntézy. Výhody těchto reakcí lze vysvětlit interakcí mikrovln a molekul, velmi výhodná je rovněž možnost dosažení teploty vyšší než bod varu rozpouštědla za normálního tlaku (v uzavřeném systému) (Hayes B.L. Microwave Synthesis: Chemistry at the Speed of Light; CEM Publishing: Matthews, NC, USA, 2002; De la Hoz A., Diaz-Ortiz A., Moreno A. Microwaves in organic synthesis. Thermal and non-thermal microwave effects. Chem. Soc. Rev. 34, 164-178, 2005). Při mikrovlnném ohřevu mikrovlny působí přímo na mole
-3 CZ 306322 B6 kuly přítomné v reakční směsi a ohřev tak není závislý na tepelné vodivosti nádoby, na rozdíl od klasického zahřívání. Přenos energie z mikrovln na zahřívanou látku probíhá dvěma základními mechanismy a to buď dipólovou rotací, nebo iontovou vodivostí. Dipólová rotace je interakce, při které se polární molekuly pokouší sladit s rychle se měnícím elektrickým polem mikrovln. Tento rotační pohyb molekul vede k přenosu energie. Druhým způsobem je přenos energie prostřednictvím iontového vedení. Pokud se v reakční směsi nachází volné ionty nebo iontové skupiny, budou se pohybovat v roztoku pod vlivem elektrického pole, což vede k výdeji energie v důsledku zvýšené míry srážek a dochází k převodu kinetické energie na teplo. Teplota látky také ovlivňuje iontovou vodivost - jak teplota stoupá, přenos energie se stává efektivnějším (Hayes B.L. Microwave Synthesis: Chemistry at the Speed of Light; CEM Publishing: Matthews, NC, USA, 2002; Lidstrom P., Tierney J., Wathey B., Westman J. Microwave assisted organic synthesis - a review. Tetrahedron. 57, 9225-9283, 2001). Rovněž výběr rozpouštědla pro mikrovlnami asistovanou syntézu může mít klíčovou roli pro výsledek reakce. Důležitou vlastností používaných rozpouštědel je jejich polarita, kdy platí, že čím více polární rozpouštědlo, tím vyšší bude schopnost interagovat s mikrovlnami. Při této syntéze se mohou používat i rozpouštědla s nízkou teplotou varu, protože mikrovlnná energie dosáhne a překročí bod varu většiny rozpouštědel v několika sekundách. Užití tlakových reakčních nádob zajistí další využití rozpouštědel s nízkým bodem varu. Dalším důležitým faktorem při výběru rozpouštědla je, jak efektivně se molekuly rozpouštědla s mikrovlnami interagují a konvertují mikrovlnnou energii na energii tepelnou. Mikrovlnnou syntézu můžeme aplikovat i v systému bez užití rozpouštědel. Existují tři hlavní typy reakcí bez použití rozpouštědla: reakční směsi adsorbované na minerální oxidy, reakce katalyzátoru fázového přenosu a čisté reakce (Hayes B.L. Microwave Synthesis: Chemistry at the Speed of Light; CEM Publishing: Matthews, NC, USA, 2002).
Sloučenina 5-chlor-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitril (II) byla v minulosti využita pro přípravu série substituovaných 5-benzylamino-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitrilů, získané produkty nevykazovaly v testech významnější biologické vlastnosti (Jandourek, O.; Doležal, M.; Páteřová, P.; Kubicek, V.; Pesko, M.; Kunes, J.; Coffey, A.; Guo, L; Kraiova, K. Molecules 19, 651671,2014). Rovněž sloučenina, 3-chlorpyrazin-2-karboxamid (111) byla v minulosti využita pro přípravu série substituovaných 3-(alkylamino)pyrazin-2-karboxamidů, získané produkty nevykazovaly v testech významnější biologické vlastnosti (Jandourek, O.; Doležal, M.; Kunes, J.; Kubicek, V.; Páteřová, P.; Pesko, M.; Buchta, V.; Kraiova, K.; Zitko, J. Molecules 19, 9318— 9338, 2014).
Podstata vynálezu
Vynález se týká nového substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I
kde každé R1, R2 znamená nezávisle H nebo CN; R3 znamená CH3 nebo CONH2; každé R4, R5, R6, R7, R8 znamená nezávisle H, Cl, nebo NO2.
Dalším předmětem vynálezu je způsob přípravy substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I spočívající v tom, že na substituovaný chlorpyrazin obecného vzorce
kde každé R1, R2 znamená nezávisle H nebo CN; R3 znamená CH3 nebo CONH2, se nechá působit substituovaným fenylhydrazinem obecného vzorce
kde každé R4, R5, R6, R7, R8 znamená nezávisle H, Cl, nebo NO2, v polárním rozpouštědle, za podmínek mikrovlnné syntézy za vzniku substituovaného fenylhydrazinylpyrazinu vzorce I.
Z uvedených fyzikálních podmínek mikrovlnné syntézy jsme jako nej výhodnější vybrali následující podmínky: jako polární rozpouštědlo metanol, čas 30 min., teplotu 140 °C, tlak 15 kPa a výkon 120 W.
Dalším předmětem vynálezu je použití výše uvedeného substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle vynálezu pro použití jako antituberkulotikum proti Mycobacterium tuberculosis i proti atypickým kmenům (původcům mykobakterióz), včetně patogenních kmenů izolovaných z nemocných pacientů.
Všechny sloučeniny podle obecného vzorce I obsahují ve své molekule hydrazinovou skupinu, avšak jejich toxicita v provedených testech je velmi nízká. Tyto látky jsou svou nízkou toxicitou výjimečné, neboť hydrazinová skupina v molekule léčívaje obvykle nositelem vyšší toxicity či dráždivosti. Dle dosavadních poznatků farmaceutické chemie byla tato substituce v oblasti syntézy nových perspektivních léčiv doposud vždy považována za nežádoucí.
Nezastupitelnou roli pro účinek má také vybraný šestičlenný heterocyklopyrazin, resp. pyrazinkarboxamidový či pyrazinkarbonitrilový fragment, neboť představuje azaanalog nikotinamidu, který hraje v metabolismu mykobakterií zcela zásadní roli.
Podstatou vynálezu je kombinace šestičlenného heterocyklu pyrazinu a aromatické části spojené hydrazinovým spojovacím můstkem. Heteroaromatický kruh je substituován karboxamidovou či karbonitrilovou skupinou, zatímco aromatický kruh je nesubstituovaný, příp. je substituován v různých polohách nitroskupinou nebo atomem chloru.
Výchozí sloučeniny II a III jsou přístupné běžnými postupy organické syntézy (Takematsu T., Segawa H., Miura, T. et al. A. 2,3-Dicyanopyrazines. USP4259489, 1981; Dlabal K., Palat K.., Lycka A., Odlerova Z. Synthesis and 'H- and l3C-NMR spectra of sulfur derivatives of pyrazine derived from amidation product of 2-chloropyrazine and 6-chloro-2-pyrazinecarbonitrile. Tuberculostatic activity. Collect. Czechoslov. Chem. Commun. 55, 2493-2500, 1990).
-5CZ 306322 B6
ΠΙ
Finální produkty obecného vzorce I pak byly získány amino(hydrazino)dehalogenací z odpovídajícího substituovaného chlorpyrazinu reakcí s vhodně substituovaným fenylhydrazinem 5 (Schéma 1), kde R1 a R2 znamená atom vodíku nebo -CN (karbonitrilovou skupinu), R3 znamená
-CH3 (methylovou) nebo -CONH2 (karboxamidovou) skupinu a R4, R5, R6, R7, R8 znamenají atom vodíku, Cl (chloru) nebo -NO2 (nitroskupinu), za podmínek mikrovlnné syntézy. Jejich příprava není synteticky náročná a suroviny, ze kterých jsou připraveny, jsou snadno přístupné a levné.
Schéma 1
Syntéza produktů obecného vzorce I probíhala v mikrovlnném zařízení s fokusovaným polem 15 CEM Discover (CEM Corporation, Matthews, NC, USA). Použití mikrovln, což je součást elektromagnetického vlnění s vlnovou délkou 1 cm až 1 m (hlavně se používá frekvence 2450 MHz), výrazně usnadní a urychlí průběh reakce. Mikrovlny totiž snadno a rychle mění polaritu elektromagnetického pole. Takto vzniklé oscilace působí na polární látku a rozkmitáváním jí dodávají energii. To se může projevit rozrušováním vazeb a zvyšováním pohybové energie molekul. Zvy20 šuje se tak vlastně i teplota, právě termický efekt je významným přínosem použité metodiky (Hayes B.L. Microwave Synthesis: Chemistry at the Speed of Light; CEM Publishing: Matthews, NC, USA, 2002; De la Hoz A., Diaz-Ortiz A., Moreno A. Microwaves in organic synthesis. Thermal and non-thermal microwave effects. Chem. Soc. Rev. 34, 164-178, 2005). Použitý přístroj je vybaven takzvaným fokusovaným polem, což je výhodné, neboť mikrovlny jsou smě25 rovány přímo do reakční směsi umístěné ve vlnovodu. Dalším pozitivním aspektem použité metody je i úspora energie a rozpouštědel.
Připravené sloučeniny odpovídající obecnému vzorci 1 byly testovány in vitro na kmenech M. kansasii 235/80, M. avium 80/72, M. avium 152/73 a M. tuberculosis H37Rv za použití teku30 tého média Šulovy půdy zřeďovací metodou ve srovnání s pyrazinamidem (PZA) při pH 5,6.
Testované látky byly rozpuštěny v DMSO v koncentracích 100, 50, 25, 12,5, 6,25, 3,125 a 1,563 pg/ml. Výsledky byly odečítány po dvou a třech týdnech. Jako standard byl použit pyrazinamid (PZA). Výsledky jsou uvedeny v Tab. 1. Z výsledků vyplývá vysoká antimykobakteriální aktivita, u všech testovaných sloučenin obecného vzorce 1 byla 2—16x vyšší než u použitého standardu PZA. Byla objevena vysoká aktivita vůči M. kansasii u sloučenin 1 až 15 obecného vzorce I a proti M. avium v případě sloučenin 2 až 4 obecného vzorce I.
Tab. 1 Antimykobakteriální aktivita sloučenin obecného vzorce 1
| Kmen | TESTOVANÁ LÁTKA (kód) Mic/gg.r1) | ||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | PZA | |
| M. tuberculosis H37Rv | 6,25 | 12,5 | 12,5 | 1,56 | 12,5 | 12,5 | 6,25 | 12,5 | 12,5 | 12,5 | 25 |
| M. kansasii My 235/80 | 1,56 | 12,5 | 12,5 | 12,5 | 12,5 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 |
| M. avium 80/72 | >100 | 50 | 50 | 50 | 100 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 |
| M. avium 152/73 | >100 | 25 | 12,5 | 12,5 | 100 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 |
Všechny látky odpovídající obecnému vzorci I byly také testovány na antifungální aktivitu in vitro, použit byl mikrodiluční bujónový test.
Použité médium: RPMI 1640 s glutaminem
Délka inkubace: 24 až 48 hod. (u TM 48 až 72 hod.)
Způsob inkubace: statický, ve tmě, humidní atmosféra
Odečítání: vizuální / fotometrické (OD 540 nm); MIC = IC80, u vláknitých hub IC50 (inhibice kontroly) pH / pufr: 7,0 / MOPS (0,165 M)
Teplota: 35 °C
Testované kmeny (kód, číslo):
CA - Candida albicans ATCC 44859
CT - Candida tropicalis 156
CK - Candida krusei E28
CG - Candida glabrata 20/1
TA - Trichosporon asahii 1188
AF - Aspergillus fumigatus 231
AC -Absidia corymbifera 272
TM - Trichophyton mentagrophytes 445
Standardy: FLZ - flukonazol, AMB - amfotericin B
Výsledky jsou uvedeny v Tab. 2. Z výsledků vyplývá antimykotická aktivita prakticky u většiny testovaných sloučenin obecného vzorce I. Byla objevena vysoká antifungální aktivita u sloučenin 1,2 a 4 obecného vzorce I proti kvasinkám a vláknitým houbám.
- 7 CZ 306322 B6
Tab. 2 Antimykotická aktivita sloučenin obecného vzorce I
| KMEN (kód) | TESTOVANÁ LÁTKA (kód) MIC/ICm/ICm (gmol.l'') | |||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | FLZ | AMB | |
| CA 24h | 15,62 | 125 | >500 | 125 | >500 | >500 | 500 | 500 | >250 | >125 | 0,25 | 0,016 |
| 48h | 31,25 | 500 | >500 | 250 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | 0,5 | 0,063 |
| CT 24h | 62,5 | 250 | >500 | 250 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | 0,5 | 0,063 |
| 48h | 250 | >500 | >500 | 500 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | >128 | 0,063 |
| CK 24h | 3,9 | 0,49 | 7,81 | 31,25 | >500 | >500 | 500 | 500 | >250 | >125 | 16 | 0,125 |
| 48h | 7,81 | 3,9 | 15,62 | 250 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | 32 | 0,125 |
| „„ 24h | 62,5 | 250 | >500 | 15,62 | >500 | >500 | 500 | >500 | >250 | >125 | 4 | 0,031 |
| 48h | 62,5 | 250 | >500 | 31,25 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | 16 | 0,125 |
| 24h 1A | 62,5 | 250 | >500 | 15,62 | >500 | 500 | 500 | >500 | >250 | >125 | 0,25 | 1 |
| 48h | 125 | 250 | >500 | 62,5 | >500 | 500 | >500 | >500 | >250 | >125 | 0,5 | 2 |
| AF 24h | 31,25 | 15,62 | 62,5 | 3,9 | >500 | >500 | 500 | 250 | >250 | >125 | >128 | 0,25 |
| 48h | 62,5 | 250 | >500 | 15,62 | >500 | >500 | >500 | >500 | >250 | >125 | >128 | 0,125 |
| 24h At | 31,25 | 15,62 | 125 | 7,81 | >500 | 500 | 500 | 125 | >250 | >125 | >128 | 1 |
| 48h | 31,25 | 15,62 | >500 | 15,62 | >500 | >500 | 500 | 250 | >250 | >125 | >128 | 2 |
| TM 72h | 500 | 0,49 | 1,65 | 0,49 | 250 | 500 | 500 | 500 | >250 | >125 | 8 | 1 |
| 120h | 500 | 7,81 | 7,81 | 3,9 | 250 | 500 | 500 | 500 | >250 | >125 | 16 | 1 |
Připravené deriváty odpovídající obecnému vzorci I byly testovány na antibakteriální aktivitu in vitro, za použití mikrodilučního bujónového testu.
Použité médium: Miieller Hintonův bujón
Délka inkubace: 24 až 48 hod.
Způsob inkubace: statický, ve tmě, humidní atmosféra
Odečítání: vizuální / fotometrické (OD 540 nm); MIC = IC80 (80 % inhibice kontroly)
Teplota: 35 °C
Testované kmeny (kód, číslo):
SN-Staphylococcus aureus CCM 4516/08
MRSA- Staphylococcus aureus (methicilin rezistentní) H 5996/08
SE - Staphylolcoccus epidermis H 6966/08
EF - Enterococcus sp. J 14365/08
EC - Escherichia coli CCM4517
KP - Klebsiellapneumoniae D 11750/08
KP-E - Klebsiella pneumoniae (ESBL pozitivní) J 14368/08
PA - Pseudomonas aeruginosa CCM 1961
- 8 CZ 306322 B6
Standardy: NEOM - neomycin-sulfát, BAC - bacitracin, PEN - penicilín G, CIPR - ciprofloxacin, PHEN - fenoxymethylpenicilin.
Výsledky jsou uvedeny v Tab. 3. Z výsledků vyplývá, že byla objevena selektivní antibakteriální aktivita prakticky u většiny testovaných sloučenin obecného vzorce I proti stafylokokům a enterokokům.
Tab. 3 Antibakteriální aktivita sloučenin obecného vzorce I
| KMEN (kód) | TESTOVANÁ LÁTKA (kód) MIC/ICm (μοοΙΤ1) | |||||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | NEOM | BA | PEN | CIPR | PHEN |
| SA 24h 48h 24h MRSA 48h SE 24h 48h EF 24h 48h EC 24h 48h KP 24h 48h KP-E 24h 48h PA 72h 120h | 62,5 15,62 62,5 7,81 62,5 >500 500 500 500 >250 62,5 62,5 125 15,62 250 >500 500 500 500 >250 62,5 7,81 125 15,62 62,5 >500 500 500 500 >250 62,5 62,5 125 15,62 250 >500 >500 >500 500 >250 15,62 31,25 62,5 7,81 31,25 500 31,25 62,5 62,5 31,25 15,62 62,5 62,5 15,62 31,25 500 31,25 62,5 62,5 31,25 250 250 125 500 500 500 250 62,5 250 62,5 250 >500 125 500 500 >500 250 62,5 500 62,5 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 >500 >500 >500 500 >500 >500 >500 >500 >500 >250 | 3,9 15,3 0,24 0,98 0,24 3,9 31,2 0,24 0,98 0,24 0,98 15,3’ 125 500 250 0,98 31,2' 125 500 500 3,9 15,631,25 250 62,5 7,81 31,2* 125 250 250 250 31,2’ 7,81 0,98 7,81 250 31,2’15,62 0,98 7,81 0,98 >500 125 0,06 >500 0,98 >500 125 0,06 >500 0,98 >500 250 0,12 >500 0,98 >500 500 0,12 >500 0,98 >500 >500 >500 >500 0,98 >500 >500 >500 >500 7,81 >500 >500 3,9 >500 15,62 >500 >500 7,81 >500 |
Připravené deriváty odpovídající obecnému vzorci I byly testovány rovněž na antivirovou aktivitu v Rega Institute for Medical Research, Katholieke Universiteit, Leuven, Belgie, Prof. Dr. Lieve Naesens a spolupracovníky. Mezi virové infekce, vůči kterým byla zjišťována účinnost, patřily: Influenza virus A (H1N1; H3N2) a B, Herpes simplex virus-1 a-2, Vesicular stomatitis virus, Vaccinia virus, Parainfluenza-3 virus, Reovirus-1, Sindbisvirus, Coxsackie virus B4, Punta Toro virus, Respiratory syncytial virus, Feline corona virus, Feline herpes virus. Jako standardy byly použity mj. zanamivir, ribavirin, amantadin, rimantadin, ribavirin a ganciklovir. Výsledky jsou uvedeny v Tab. 4, uvedená hodnota EC50 [μΜ] je efektivní koncentrace při které dochází k 50% inhibici příslušným virem indukovaného cytopathického efektu. Pouze u látek 5 a 6 odpovídajícím obecnému vzorci I byly objeveny antivirové účinky.
-9CZ 306322 B6
Tab. 4 Antivirová aktivita sloučenin obecného vzorce I
| kód látky | ECso [μΜ] | |||
| Influenza A/H1N1 | Vesicular stomatitis virus | Feline herpes virus | ||
| vizuální CPE skóre | MTS | |||
| 5 | 4,0 | 2,4 | 8,9/8,9 | 5,0/9,2 |
| 6 | - | - | - | 4,0/8,2 |
| zanamivir | 4,0 | 1,5 | - | - |
| ribavirin | 12 | 10 | - | - |
| amantadin | 100 | 201 | - | - |
| rimantadin | 20 | 7,3 | - | - |
| ribavirin | - | • | 25,0/112,0 | - |
| ganciklovir | - | - | 0,9/3,8 |
Nejúčinnější sloučeniny obecného vzorce I, byly podrobeny základním toxicitním MTT testům na lidských hepatocytech, resp. buněčné kultuře CRFK (Crandel-Ress feline cells - buňky kočičích ledvin). Výsledky jsou uvedeny v Tab. 5 a 6. Z výsledků vyplývá, že ani při nejvyšší testované koncentraci (20 μΜ) testovaných potenciálních antituberkulotik odpovídajících obecnému vzorci I nebyla viabilita hepatocytů ovlivněna. Byla použita standardní metodika (Owen T.C. USP5185450, 1993; Crandell R.A., Fabricant C.G., Nelson-Rees W.A. In Vitro 9, 176-185, 1973).
Tab. 5 Cytotoxicita vybraných sloučenin obecného vzorce I testovaná na lidských hepatocytech Hep G2 (údaje jsou seřazeny od nejvyšší toxicity k nejnižší)
| Sloučenina | cytotoxicita ICso (uM) |
| 3 5 7 6 | 21,9 27,8 481,4 863,7 |
Tab. 6 Cytotoxicita vybraných sloučenin obecného vzorce I testovaných na buněčné kultuře CRFK (buněčná linie odvozená z buněk ledvin kočky domácí)
| Sloučenina | cytotoxicita CCsn (uM) |
| 1 3 4 5 6 10 | 37 54 33 48 24 >100 |
Příklady uskutečnění vynálezu
Následující příklady ilustrují postup předkládaného vynálezu, týkajícího se přípravy a použití substituovaných 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinů obecného vzorce I
(I), kde symboly R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 a R8 mají výše uvedený význam.
Pro sledování a kontrolu průběhu syntetických reakcí a ověření čistoty produktů byla použita metoda tenkovrstvé chromatografie (TLC). Jako mobilní fáze byla využita soustava typu hexan:ethyl-acetát (1:1). Vlastní analýza byla provedena na TLC deskách Merck (Darmstadt, Německo), Silica gel 60 F254. Detekce výsledků TLC byla prováděna pod UV lampou emitující záření o vlnové délce 254 nm.
U chemikálií, použitých u dále uvedených reakcí, byly ověřeny základní fyzikální konstanty. Rozpouštědla použitá pro přípravu VL II a III (aceton, toluen, chloroform) byla řádně vyčištěna a vysušena. Pro přípravu finálních syntetizovaných produktů byl použit běžný, komerčně dostupný, bezvodý methanol.
Nově syntetizované produkty byly separovány pomocí preparativního chromatografu CombiFlash® Rf (Teledyne Isco, lne. Lincoln, Nebraska, USA). Teplota tání potvrzeného čistého produktu byla stanovena pomocí otevřené kapiláry na přístroji Stuart Scientific, SMP30 (Bibby Sterling STD, UK). Hodnoty jsou nekorigované.
Totožnost připravených látek byla ověřována pomocí analýzy 'H-NMR a 13C-NMR spekter za využití spektrometru Varian Mercury VX-BB 300 a Varian VNMR S500 (Varian Corp., Palo Alto, CA, USA). Spektra byla zaznamenána v deuterovaném CDC13 nebo DMSO při správné laboratorní teplotě a frekvenci 300 MHz pro *H a 75 MHz pro 13C, respektive 500 MHz pro ]H a 125 MHz pro l3C. Chemické posuny byly zaznamenány jako hodnoty δ v jednotkách ppm a jsou nepřímo vztaženy k tetramethylsilanu (TMS).
Infračervená spektra připravených látek byla získána pomocí zeslabené totální reflektance (ATR) na Ge krystalu na přístroji Nicolet Impact 400 (Nicolet, Madison, WI, USA). Elementární analýza byla provedena na přístroji CE Instruments EA-1110 CHN analyser (CE Instruments, Wigan, United Kingdom). Všechny naměřené hodnoty jsou uvedeny v procentech.
Ke zjištění míry lipofility získaných sloučenin byly vypočteny jejich hodnoty log P pomocí programu CS ChemDraw Ultra ver. 13.0 (CambridgeSoft, Cambridge, MA, USA). Pro získání experimentálních hodnot lipofility (log k) byl použit kapalinový chromatograf Agilent Technologies 1200 SL s detektorem diodového pole SL G1315C (Agilent Technologies lne., Colorado Springs, CO, USA). Při měření byla použita předkolona ZORBAX XDB-C18 5 pm, 4x4 mm, Part No. 7995118-504 (Agilent Technologies lne.), jako kolona pak ZORBAX Eclipse XDB-C18 5 pm, 4,6 x 250 mm, Part No. 7995118-585 (Agilent Technologies lne.). Proces rozdělování byl monitorován pomocí Agilent ChemStation (verze B.04.02), zahrnující spektrální modul (Agilent Technologies lne.). Mobilní fází byla směs MeOH (70 %) a vody (30 %). Pro samotný experiment byly nastaveny následující parametry: průtok kolonou 1,0 ml/min, nástřik vzorku 20 pl,
-11CZ 306322 B6 teplota kolony 30 °C, detekce při vlnové délce 210 nm a nastavení monitorovací vlnové délky 270 nm. Retenční čas (tR) byl měřen v minutách. Kapacitní faktor k byl vypočten podle vzorce k = (tR - tD), kde tR je retenční čas dané látky a tD je mrtvý čas kolony měřený jako retenční čas methanolického roztoku jodidu draselného. Log £ je dekadickým logaritmem kapacitního faktoru k.
Příklad 1: 5-methyl-6-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin-2,3-dikarbonitril (1)
Sloučenina 1 se připravuje reakcí fenylhydrazinu (3 mmol) s 5-chlor-6-methylpyrazin-2,3- dikarbonitrilem (II, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 1 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 29 %. Analytická data pro sloučeninu 1: hnědočervená krystalická sloučenina s t.t. = 158,1 až 159,7 °C; elementární analýza vypočteno pro C13H10N6 (m.h. 250,26): 62,39 % C, 4,03 % H, 33,58 % N; nalezeno 62,49 % C, 4,30 % H, 33,31 % N; IR (ATR-Ge, cm1): 3398 (-NH-), 3297 (-NH-), 2238 (-CN), 1603, 1554, 1485, 1445, 1393 (pyr); ’H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,03 (1H, bs, NH), 8,16 (1H, bs, NH), 7,217,06 (2H, m, H2', H6'), 6,84-6,65 (3H, m, H3', H4', H5'), 2,50 (3H, s, CH3); nCNMR (75 MHz, DMSO) δ 153,8, 148,2, 146,7, 130,1, 129,1, 119,3, 119,0, 115,5, 114,8, 112,6, 21,2; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 2,07; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,2218.
Příklad 2: 5-(2-(3-chlorfenyl)hydrazinyl)-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitril (2)
Sloučenina 2 se připravuje reakcí 3-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 5-chlor-6-methylpyrazin2,3-dikarbonitrilem (11, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 2 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 65 %. Analytická data pro sloučeninu 2: zeleno-hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 177,0 až 177,8 °C; elementární analýza vypočteno pro Ci3H9C1N6 (m.h. 284,70): 54,84 % C, 3,19 % H, 29,52 % N; nalezeno 54,95 % C, 2,95 % H, 29,54 % N; IR (ATR-Ge, cm’1): 3314 (-NH-), 3285 (-NH-), 2231 (-CN), 1599, 1549, 1485, 1430, 1398 (pyr); 'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,05 (1H, bs, NH), 8,46 (1H, bs, NH), 7,16 (1H, t, J=8,0 Hz, H5'), 6,89-6,71 (3H, m, H2', H4', H6'), 2,52 (3H, s, CH3); l3C NMR (75 MHz, DMSO) δ 153,6, 149,9, 147,0, 133,9, 130,7, 130,0, 119,3, 118,8, 115,5, 114,8, 111,8, 111,2, 21,3; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 2,63; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,2499.
. 19 .
Příklad 3: 5-(2-(2-chlorfenyl)hydrazinyl)-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitril (3)
CH3 H
H
Sloučenina 3 se připravuje reakcí 2-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 5-chlor-6-methylpyrazin2,3-dikarbonitrilem (Π, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 3 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 67 %. Analytická data pro sloučeninu 3: zeleno-hnědá krystalická sloučenina s t.t. > 250,0 °C (za rozkladu); elementární analýza vypočteno pro C13H9CIN6 (m.h. 284,70): 54,84 % C, 3,19 % H, 29,52 % N; nalezeno 54,78 % C, 3,22 % H, 29,34 % N; IR (ATR-Ge, cm j: 3289 (-NH-), 2231 (-CN), 1594, 1564, 1488, 1442, 1398 (pyr); 'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,17 (1H, bs, NH), 7,90 (1H, bs, NH), 7,34 (1H, dd, J=7,8 Hz, J=L1 Hz, H3'), 7.12 (1H, t, J=7,8 Hz, H5'), 6,88 (1H, dd, J=7,8 Hz, J=l,l Hz, H6'), 6,83-6,75 (1H, m, H4'), 2,54 (3H, s, CH3); 13C NMR (75 MHz, DMSO) δ 153,6, 146,8, 143,7, 130,0, 129,5, 128,0, 120,3, 119,4, 117,7, 115,4, 114,8, 113,4,21,2; lipofilita: vypočítaná hodnota logP = 2,63; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,1793.
Příklad 4: 5-(2-(4-chlorfenyl)hydrazinyl)-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitril (4)
Sloučenina 4 se připravuje reakcí 4-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 5-chlor-6-methylpyrazin2,3-dikarbonitrilem (II, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 4 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 21 %. Analytická data pro sloučeninu 4; světle hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 152,0 až 152,8 °C; elementární analýza vypočteno pro C13H9C1N6 (m.h. 284,70): 54,84 % C, 3,19 % H, 29,52 % N; nalezeno 55,11 % C, 2,89 % H, 29,32 % N; IR (ATR-Ge, cm’1): 3355 (-NH-), 3306 (-NH-), 2225 (-CN), 1598, 1557, 1491, 1437, 1397 (pyr); 'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,06 (1H, bs, NH), 8,36 (1H, bs, NH), 7,227,13 (2H, m, AA', BB1, H2', H6'), 6,86-6,77 (2H, m, AA', BB’, H3’, H5’), 2,51 (3H, s, CH3); 13CNMR (75 MHz, DMSO) δ 153,7, 147,3, 146,9, 130,0, 128,9, 122,6, 119,2, 115,5, 114,8, 114,2, 21,2; lipofdita: vypočítaná hodnota log P = 2,63; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,2333.
Příklad 5: 5-(2-(2-nitrofenyl)hydrazinyl)-6-methylpyrazin-2,3-dikarbonitril (5)
H
- 13 CZ 306322 B6
Sloučenina 5 se připravuje reakcí 2-nitrofenylhydrazinu (3 mmol) s 5-chlor-6-methylpyrazin2,3-dikarbonitrilem (II, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 5 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 38 %. Analytická data pro sloučeninu 5: tmavě hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 189,94 až 190,6 °C; elementární analýza vypočteno pro CI3H7N7O2 (m.h. 295,26): 52,88 % C, 3,07 % H, 33,21 % N; nalezeno 52,99 % C, 2,90 % H, 33,21 % N; IR (ATR-Ge, cm1): 3410 (-NH-), 3327 (-NH-), 2232 (-CN), 1614, 1558, 1489, 1445, 1401 (pyr), 1516, 1341 (-NO2); 'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,40 (1H, bs, NH), 9,58 (1H, bs, NH), 8,22-8,06 (1H, m, Ar), 7,62-7,47 (1H, m, Ar), 7,32-7,19 (1H, m, Ar), 6,98-6,84 (1H, m, Ar), 2,36 (3H, s, CH3); l3C NMR (75 MHz, DMSO) δ 154,8; 146,4; 144,6; 136,7; 132,5; 130,5; 126,1; 118,6; 117,4; 115,7; 115,3; 114,7; 21,2; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 1,15; experimentálně zjištěná hodnota log k = -0,0512.
Příklad 6: 3-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin-2-karboxamid (6)
conh2
Sloučenina 6 se připravuje reakcí fenylhydrazinu (3 mmol) s 3-chlorpyrazin-2-karboxamidem (lil, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 6 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 42 %. Analytická data pro sloučeninu 6: oranžová krystalická sloučenina s t.t. = 161,3 až 62,0 °C; elementární analýza vypočteno pro CiiHhN5O (m.h. 229,24): 57,63 % C, 4,84 % Η, 30,55 % N; nalezeno 57,88 % C, 4,94 % H, 30,52 % N; IR (ATR-Ge, cm'): 3444 (-NH-), 3292 (-CONH2), 1669 (-C=O), 1604, 1533, 1482, 1413 (pyr); ’H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,01 (1H, bs, NH), 8,30 (1H, bs, NH), 8,24 (1H, d, J=2.3 Hz, H5), 7,95-7,90 (2H, H6, NH2), 7,87 (1H, bs, NH2), 7,16-7,04 (2H, m, H2, H6'), 6,76-6,62 (3H, m, H3', H4', H5'); l3C NMR (75 MHz, DMSO) δ 168,7, 155,7, 149,6, 146,7, 132,2, 129,0, 127,2, 118,7, 112,2; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = -0,22; experimentálně zjištěná hodnota log k = -0,2382.
Příklad 7: 3-(2-(2-chlorfenyl)hydrazinyl)pyrazin-2-karboxamid (7)
CONH2
Sloučenina 7 se připravuje reakcí 2-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 3-chlorpyrazin-2-karboxamidem (III, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 7 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 17 %. Analytická data pro sloučeninu 7: hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 193,6 až 194,7 °C; elementární analýza vypočteno pro ChHi0C1N5O (m.h. 263,68): 50,10 % C, 3,82 % H, 26,56 % N; nalezeno 50,36 % C, 3,94 % H, 26,68 % N; IR (ATR-Ge, cm’1): 3448 (-NH-), 3315 (-CONH2), 1679 (-C=O), 1595, 1536, 1490, 1412 (pyr); ’H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,06 (1H, bs, NH), 8,31 (1H, bs, NH), 8,26 (1H, J=2,4 Hz, H5), /1
7,96 (1H, d, >2,4 Hz, H6), 7,88 (1H, bs, NH2), 7,67 (1H, bs, NH2), 7,28 (1H, dd, >7,8 Hz, >1,5 Hz, H3'), 7,10-7,05 (1H, m, H5'), 6,78 (1H, dd, J=7,8 Hz, >1,5 Hz, H6'), 6,72 (1H, dt, >7,8 Hz, >1,5 Hz, H4'); l3C NMR (75 MHz, DMSO) δ 168,5, 155,3, 146,4, 145,1, 132,6, 129,4, 128,0, 127,5, 119,5, 117,4, 113,0; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 0,34; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,0872.
Příklad 8: 3-(2-(3-chlorfenyl)hydrazinyl)pyrazin-2-karboxamid (8)
conh2
Sloučenina 8 se připravuje reakcí 3-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 3-chlorpyrazin-2-karboxamidem (III, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 8 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 24 %. Analytická data pro sloučeninu 8: tmavě hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 119,5 až 120,9 °C; elementární analýza vypočteno pro ChHioC1N50 (m.h. 263,68): 50,10 % C, 3,82 % H, 26,56 % N; nalezeno 50,31 % C, 3,71 % Η, 26,55 % N; IR (ATR-Ge, cm1): 3445 (-ΝΗ-), 3253 (-CONH2), 1671 (-C=O), 1598, 1522, 1476, 1413 (pyr); 'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,34 (2H, bs, NH2), 7,92 (2H, bs, H5, H6), 7,63 - 6,82 (4H, m, H2', H4', H5', H6'), 5,71 (2H, bs, NH); l3C NMR (75 MHz, DMSO) δ 168.89, 152.20, 146.20, 140.24, 134.40, 132.36, 129.72, 126.57, 122.94, 120.26, 118.52; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 0,34; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,5898.
Příklad 9: 3-(2-(4-chlorfenyl)hydrazinyl)pyrazin-2-karboxamid (9)
Sloučenina 9 se připravuje reakcí 4-chlorfenylhydrazinu (3 mmol) s 3-chlorpyrazin-2-karboxamidem (III, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 9 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 23 %. Analytická data pro sloučeninu 9: hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 155,3 až 156,2 °C; elementární analýza vypočteno pro CnH^CINsO (m.h. 263,68): 50,10 % C, 3,82 % H, 26,56% N; nalezeno 50,27 % C, 3,72 % H, 26,35 % N; IR (ATR-Ge, cm1): 3453 (-NH-), 3202 (-CONH2), 1686 (-C=O), 1596, 1527, 1491, 1405 (pyr); ‘H-NMR (300 MHz, CDCI3) δ 11,40 (1H, bs, NH), 8,45 (1H, bs, NH), 8,40 (1H, d, >2,3 Hz, H5), 8,05 (1H, d, >2,3 Hz, H6), 8,01 (1H, bs, NH), 7,75-7,67 (2H, m, AA', BB', H2', H6'), 7,407,32 (2H, m, AA', BB', H3', H5'); 13C NMR (75 MHz, DMSO) δ 168,9, 151,7, 145,8, 138,3, 132,9, 128,9, 127,7, 126,1, 121,4; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 0,34; experimentálně zjištěná hodnota log k = 0,5996.
- 15CZ 306322 B6
Příklad 10: 3-(2-(2-nitrofenyl)hydrazinyl)pyrazin-2-karboxamid (10)
Sloučenina 10 se připravuje reakcí 2-nitrofenylhydrazinu (3 mmol) s 3-chlorpyrazin-2-karboxamidem (III, 1 mmol) ve 3 ml methanolu a pyridinu (1 mmol). Reakce probíhá v mikrovlnném reaktoru při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W po dobu 30 minut. Po skončení reakce byl produkt 10 izolován a purifikován pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: hexan/ethyl-acetát 1:1), výtěžek 17 %. Analytická data pro sloučeninu 10: červeno-hnědá krystalická sloučenina s t.t. = 237,2 až 238,2 °C; elementární analýza vypočteno pro CnHl0N6O3 (m.h. 274,24): 48,18 % C, 3,68 % H, 30,65 % N; nalezeno 48,27 % C, 3,73 % H, 3,73 % N; IR (ATR-Ge, cm 1): 3455 (-NH-), 3279 (-CONH2), 1683 (-ΟΘ), 1615, 1575, 1498, 1439 (pyr); ’H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,24 (1H, bs, NH), 9,53 (1H, bs, NH), 8,35 (1H, bs, NH2), 8,29 (1H, J=l,8 Hz, H5), 8,10 (1H, dd, J=8,l Hz, H3'), 8,03 (1H, d, J=l,8 Hz, H6), 7,92 (1H, bs, NH2), 7,50 (1H, t, J=8,l Hz, H5'), 7,17 (1H, d, J=8,l Hz, H6'), 6,83 (1H, t, J=8,l Hz, H4'); 13C NMR (75 MHz, DMSO) δ 168,3, 155,0, 146,5, 146,4, 136,7, 133,3, 131,7, 128,0, 126,0, 117,7, 115,2; lipofilita: vypočítaná hodnota log P = 0,35; experimentálně zjištěná hodnota log k = -0,3118.
Příklady farmaceutických přípravků - tablet
Při výrobě pevných lékových forem se postupuje technologií v tomto oboru obvyklou, tedy suchou či vlhkou granulací, která je odborníkovi dostatečně známa. Používají se běžné a osvědčené pomocné látky dodávající lékové formě požadované fyzikální vlastnosti.
Příklady na suchou granulaci:
Příklad 11 (obsah účinné látky 100 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) | 100,0 mg |
| Celulóza mikrokrystalická | 75,0 mg |
| Karboxymethylškrob sodná sůl | 3,5 mg |
| Stearan horečnatý | 0,5 mg |
| Oxid křemičitý koloidní | 0,5 mg |
Příklad 12 (obsah účinné látky 200 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) | 200,0 mg |
| Celulóza mikrokrystalická | 95,0 mg |
| Karboxymethylškrob sodná sůl | 7,0 mg |
| Stearan horečnatý | 1,0 mg |
| Oxid křemičitý koloidní | 1,0 mg |
-16 CZ 306322 B6
Příklad 13 (obsah účinné látky 300 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Celulóza mikrokrystalická Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Oxid křemičitý koloidní | 300,0 mg 115,0 mg 10,5 mg 1,5 mg 1,5 mg |
Příklad 14 (obsah účinné látky 400 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Celulóza mikrokrystalická Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Oxid křemičitý koloidní | 400,0 mg 130,0 mg 14,5 mg 2,0 mg 2,0 mg |
Příklad 15 (obsah účinné látky 500 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Celulóza mikrokrystalická Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Oxid křemičitý koloidní | 500,0 mg 140,0 mg 17,5 mg 2,5 mg 2,5 mg |
Léčivá látka se smísí s jednotlivými složkami tabletoviny a směs se obvyklým způsobem tabletuje na tabletovacím lisu.
Příklady na vlhkou granulaci:
Příklad 16 (obsah účinné látky 100 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Škrob bramborový Laktóza Povidon Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Mastek | 100,0 mg 48,0 mg 27,0 mg 3,0 mg 4,0 mg 0,2 mg 1,8 mg |
Příklad 17 (obsah účinné látky 200 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Škrob bramborový Laktóza Povidon | 200,0 mg 60,8 mg 34,2 mg 6,0 mg |
- 17CZ 306322 Β6
| Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Mastek | 8,0 mg 0,4 mg 3,6 mg |
Příklad 18 (obsah účinné látky 300 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Škrob bramborový Laktóza Povidon Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Mastek | 300,0 mg 73,6 mg 41,4 mg 9,0 mg 12,0 mg 0,6 mg 5,4 mg |
Příklad 19 (obsah účinné látky 400 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce 1 (1 nebo6) Škrob bramborový Laktóza Povidon Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Mastek | 400,0 mg 82,3 mg 46,8 mg 12,0 mg 16,0 mg 0,8 mg 7,2 mg |
Příklad 20 (obsah účinné látky 500 mg):
| Léčivá látka obecného vzorce I (1 nebo 6) Škrob bramborový Laktóza Povidon Karboxymethylškrob sodná sůl Stearan horečnatý Mastek | 500,0 mg 96,0 mg 54,0 mg 15,0 mg 20,0 mg 1,0 mg 9,0 mg |
Léčivá látka se postupně smíchá s laktózou, bramborovým škrobem, směs se zgranuluje povidonem ve vodném roztoku, vysušený granulát se smíchá se sodnou solí karboxymethylškrobu, stearanem horečnatým a s mastkem a vzniklá směs se obvyklým způsobem tabletuje na tabletovacím lisu.
Claims (13)
1. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I
(I), kde každé R1, R2 znamená nezávisle H nebo CN; R3 znamená CH3 nebo CONH2; každé R4, R5, R6, R7, R8 znamená nezávisle H, Cl, nebo NO2.
2. Způsob přípravy 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že na substituovaný chlorpyrazin obecného vzorce
kde každé R1, R2 znamená nezávisle H nebo CN; R3 znamená CH3 nebo CONH2, se nechá působit substituovaným fenylhydrazinem obecného vzorce
kde každé R4, R5, R6, R7, R8 znamená nezávisle H, Cl, nebo NO2, v polárním rozpouštědle, za podmínek mikrovlnné syntézy za vzniku substituovaného 2—(2—fenylhydrazinyljpyrazinu vzorce I.
3. Způsob přípravy podle nároku 2, vyznačující se tím, že mikrovlnná syntéza probíhá s výhodou v polárním rozpouštědle zejména v metanolu, po dobu 30 min., při teplotě 140 °C, tlaku 15 kPa a výkonu 120 W.
4. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčivo.
5. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako antituberkulotikum.
6. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčivo k léčení mykobakterióz způsobených M. kansasii a M. avium.
Ί. Substituovaný 2—(2—fenylhydrazinyljpyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčivo k léčení infekcí způsobených kvasinkami a vláknitými houbami.
- 19CZ 306322 B6
8. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčivo k léčení infekcí způsobených stafylokoky a enterokoky.
9. Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin obecného vzorce I podle nároku 1 pro použití jako léčivo k léčení virových infekcí.
10. Použití substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení tuberkulózy.
11. Použití substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce 1 podle nároku 1 pro přípravu léčiv k léčení mykobakterióz způsobených M. kansasii a M. avium.
12. Použití substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení infekcí způsobených kvasinkami a vláknitými houbami.
13. Použití substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení infekcí způsobených stafylokoky a enterokoky.
14. Použití substituovaného 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazinu obecného vzorce I podle nároku 1 pro přípravu léčiva k léčení virových infekcí.
Konec dokumentu
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-925A CZ306322B6 (cs) | 2014-12-17 | 2014-12-17 | Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující |
| PCT/CZ2015/000127 WO2016095877A1 (en) | 2014-12-17 | 2015-10-26 | Substituted 2-(2-phenylhydrazinyl)pyrazine, process for its preparation, its use and a pharmaceutical composition containing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-925A CZ306322B6 (cs) | 2014-12-17 | 2014-12-17 | Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2014925A3 CZ2014925A3 (cs) | 2016-06-29 |
| CZ306322B6 true CZ306322B6 (cs) | 2016-11-30 |
Family
ID=54608210
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2014-925A CZ306322B6 (cs) | 2014-12-17 | 2014-12-17 | Substituovaný 2-(2-fenylhydrazinyl)pyrazin, způsob jeho přípravy, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ306322B6 (cs) |
| WO (1) | WO2016095877A1 (cs) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2149279A (en) * | 1934-07-07 | 1939-03-07 | Merck & Co Inc | Derivatives of pyrazine carboxylic acid and processes for their production |
| US6329378B1 (en) * | 1999-02-10 | 2001-12-11 | Anadys Pharmaceuticals, Inc. | Hydrazone, hydrazine and thiosemicarbazone derivatives as antifungal agents |
| CN101693696A (zh) * | 2009-10-17 | 2010-04-14 | 西北师范大学 | 含吡嗪肼的酰基硫脲类化合物及其制备和应用 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4259489A (en) | 1977-12-22 | 1981-03-31 | Kyowa Gas Chemical Industry Co. Ltd. | 2,3-Dicyanopyrazines |
| US5185450A (en) | 1991-02-19 | 1993-02-09 | University Of South Florida | Tetrazolium compounds for cell viability assays |
| JP2010539183A (ja) | 2007-09-12 | 2010-12-16 | ドクター・レディーズ・ラボラトリーズ・リミテッド | ボルテゾミブおよびその生成のためのプロセス |
| RU2011123647A (ru) | 2008-11-10 | 2012-12-20 | Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед | Соединения, полезные в качестве ингибиторов atr киназы |
| CA2849566C (en) | 2011-11-09 | 2021-02-09 | Cancer Research Technology Limited | 5-(pyridin-2-yl-amino)-pyrazine-2-carbonitrile compounds and their therapeutic use |
| GB201119799D0 (en) | 2011-11-16 | 2011-12-28 | Sentinel Oncology Ltd | Pharmaceutical compounds |
| CA2856301C (en) | 2011-11-23 | 2020-10-06 | Portola Pharmaceuticals, Inc. | Pyrazine kinase inhibitors |
-
2014
- 2014-12-17 CZ CZ2014-925A patent/CZ306322B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-10-26 WO PCT/CZ2015/000127 patent/WO2016095877A1/en active Application Filing
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2149279A (en) * | 1934-07-07 | 1939-03-07 | Merck & Co Inc | Derivatives of pyrazine carboxylic acid and processes for their production |
| US6329378B1 (en) * | 1999-02-10 | 2001-12-11 | Anadys Pharmaceuticals, Inc. | Hydrazone, hydrazine and thiosemicarbazone derivatives as antifungal agents |
| CN101693696A (zh) * | 2009-10-17 | 2010-04-14 | 西北师范大学 | 含吡嗪肼的酰基硫脲类化合物及其制备和应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Jandourek, Ondrej, et al. "New potentially active pyrazinamide derivatives synthesized under microwave conditions." Molecules 19.7 (2014): 9318-9338. * |
| Jandourek, Ondrej, et al. "N-Substituted 5-amino-6-methylpyrazine-2, 3-dicarbonitriles: Microwave-assisted synthesis and biological properties." Molecules 19.1 (2014): 651-671. * |
| Zitko J.: Deriváty pyrazinkarboxylové kyseliny jako potenciální antituberkulotika (príprava a studium biologických vlastností), disertacní práce, obhajoba 9.2.2012 https://is.cuni.cz/webapps/zzp/detail/104248/ * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2014925A3 (cs) | 2016-06-29 |
| WO2016095877A1 (en) | 2016-06-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP4219508B1 (en) | Substituted polycyclic pyridone derivative and prodrug thereof | |
| Wang et al. | Synthesis and biological evaluation of benzofuroxan derivatives as fungicides against phytopathogenic fungi | |
| Velagapudi et al. | Design and synthesis of poly (ADP-ribose) polymerase inhibitors: impact of adenosine pocket-binding motif appendage to the 3-oxo-2, 3-dihydrobenzofuran-7-carboxamide on potency and selectivity | |
| DK2833973T3 (en) | Compounds useful as ATR kinase inhibitors and combination therapies thereof | |
| Serrao et al. | Discovery of a novel 5-carbonyl-1H-imidazole-4-carboxamide class of inhibitors of the HIV-1 integrase–LEDGF/p75 interaction | |
| Knegtel et al. | Rational design of 5-(4-(Isopropylsulfonyl) phenyl)-3-(3-(4-((methylamino) methyl) phenyl) isoxazol-5-yl) pyrazin-2-amine (VX-970, M6620): optimization of intra-and intermolecular polar interactions of a new ataxia telangiectasia mutated and Rad3-related (ATR) kinase inhibitor | |
| Kalaria et al. | Ultrasound-assisted one-pot four-component synthesis of novel 2-amino-3-cyanopyridine derivatives bearing 5-imidazopyrazole scaffold and their biological broadcast | |
| Chandrakantha et al. | Synthesis and biological evaluation of novel substituted 1, 3, 4-thiadiazole and 2, 6-di aryl substituted imidazo [2, 1-b][1, 3, 4] thiadiazole derivatives | |
| Zheng et al. | Synthesis, biological evaluation, and molecular docking studies of 2-chloropyridine derivatives possessing 1, 3, 4-oxadiazole moiety as potential antitumor agents | |
| Rzuczek et al. | Macrocyclic pyridyl polyoxazoles: selective RNA and DNA G-quadruplex ligands as antitumor agents | |
| Ramadan et al. | Synthesis and anti H5N1 activities of some novel fused heterocycles bearing pyrazolyl moiety | |
| EP2776421A1 (en) | Compounds useful as inhibitors of atr kinase | |
| EP2569287A2 (en) | Compounds useful as inhibitors of atr kinase | |
| Peytam et al. | An efficient and targeted synthetic approach towards new highly substituted 6-amino-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidines with α-glucosidase inhibitory activity | |
| WO2013071090A1 (en) | Compounds useful as inhibitors of atr kinase | |
| WO2013049720A1 (en) | Compounds useful as inhibitors of atr kinase | |
| Payne et al. | Discovery of dual inducible/neuronal nitric oxide synthase (iNOS/nNOS) inhibitor development candidate 4-((2-cyclobutyl-1 H-imidazo [4, 5-b] pyrazin-1-yl) methyl)-7, 8-difluoroquinolin-2 (1 H)-one (KD7332) part 2: Identification of a novel, potent, and selective series of benzimidazole-quinolinone iNOS/nNOS dimerization inhibitors that are orally active in pain models | |
| WO2017114383A1 (zh) | 一类新型的egfr野生型和突变型的激酶抑制剂 | |
| Ahmed et al. | 1, 2, 4-Triazolo-[1, 5-a] pyridine HIF prolylhydroxylase domain-1 (PHD-1) inhibitors with a novel monodentate binding interaction | |
| Li et al. | Design, synthesis, and evaluation of antifungal bioactivity of novel pyrazole carboxamide thiazole derivatives as SDH inhibitors | |
| CN112142675B (zh) | 一种作为jak激酶抑制剂的小分子化合物及其用途 | |
| Barot et al. | Design, synthesis and docking studies of some novel (R)-2-(4′-chlorophenyl)-3-(4′-nitrophenyl)-1, 2, 3, 5-tetrahydrobenzo [4, 5] imidazo [1, 2-c] pyrimidin-4-ol derivatives as antitubercular agents | |
| Shan et al. | Expanding the structural diversity of diarylureas as multi-target tyrosine kinase inhibitors | |
| Kushwaha et al. | Synthesis and anti-HIV activity of a new isoxazole containing disubstituted 1, 2, 4-oxadiazoles analogs | |
| Khonde et al. | 1, 3-diarylpyrazolyl-acylsulfonamides as potent anti-tuberculosis agents targeting cell wall biosynthesis in Mycobacterium tuberculosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20201217 |