CZ301541B6 - Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum - Google Patents

Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum Download PDF

Info

Publication number
CZ301541B6
CZ301541B6 CZ20080402A CZ2008402A CZ301541B6 CZ 301541 B6 CZ301541 B6 CZ 301541B6 CZ 20080402 A CZ20080402 A CZ 20080402A CZ 2008402 A CZ2008402 A CZ 2008402A CZ 301541 B6 CZ301541 B6 CZ 301541B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
ferritin
fer2
tick
ticks
acid sequence
Prior art date
Application number
CZ20080402A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2008402A3 (cs
Inventor
Kopácek@Petr
Hajdušek@Ondrej
Original Assignee
Biologické centrum AV CR, v.v.i., Parazitologický ústav
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biologické centrum AV CR, v.v.i., Parazitologický ústav filed Critical Biologické centrum AV CR, v.v.i., Parazitologický ústav
Priority to CZ20080402A priority Critical patent/CZ301541B6/cs
Priority to EP09768811.3A priority patent/EP2324053B1/en
Priority to US13/000,813 priority patent/US8168763B2/en
Priority to AU2009264468A priority patent/AU2009264468A1/en
Priority to MX2011000003A priority patent/MX341928B/es
Priority to BRPI0914673A priority patent/BRPI0914673A2/pt
Priority to PCT/CZ2009/000085 priority patent/WO2009155886A2/en
Publication of CZ2008402A3 publication Critical patent/CZ2008402A3/cs
Publication of CZ301541B6 publication Critical patent/CZ301541B6/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C07K14/43513Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae
    • C07K14/43527Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae from ticks
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00Antiparasitic agents
    • A61P33/14Ectoparasiticides, e.g. scabicides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies

Abstract

Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum, který má primární strukturu bez signální sekvence minimálne z 85 % shodnou se sekvencí aminokyselin FER2-IR nebo FER2-IS nebo FER2-RM nebo FER2-DV a v nativním prostredí tvorí kvartérní strukturu, která transportuje nehemové železo ze strev do periferních tkání klíštete. Je využitelný jako antigen pro vytvorení protilátek v organismu, které by jej zpetne v klíšteti blokovaly a klíšte prisáté na hostiteli by nemelo funkcní mechanismus prenosu nehemového železa ze streva do periferních tkání, který je pro jeho další vývoj nezbytný a zároven by se eliminoval prenos patogenu prenášených klíštaty.

Description

Ferítin 2 pro imunizaci organismu proti klíšťatům
Oblast techniky s
Antigenní protein pro imunizaci organismu - vytvoření protilátek, které zablokují přenos železa v těle klíštěte a znemožní tak jeho dlouhodobé přisátí na organismu, popřípadě znemožni přenos patogenů z klíštěte do hostitele.
Dosavadní stav techniky
Doposud byla u klíšťat známa existence intracelulámího feritinu tzv. feritinu 1, který jsme poprvé izolovali, klonovali a osekvenovali v naší laboratoři u dvou druhů klíšťat Ixodes ricinus a
Omithodoros moubata. Později byl ferítin 1 osekvenován a částečně charakterizován i u ostatních druhů klíšťat v zahraničních laboratořích. Klíštěcí ferítin 1 je regulován na translační úrovni prostřednictvím tzv. IRP (iron-regulatory protein) vázajícího se na tzv. IRE („iron-responsive element) regulační smyčku příslušné mRNA, Ferítin 1 je oligomer (složený z 24 podjednotek) a jeho funkce je v uskladnění intracelulámího železa a zabránění nežádoucím oxidativním efektům volného železa.
Podstata vynálezu
Ferítin 2 je nově identifikovaný a charakterizovaný protein sekretovaný do plasmy klíštěte. Byl nalezen u klíšťat Ixodes ricinus, Ixodes scaptdaris, Dermacentor variabilis a Rhipicephalus microplus (dříve Boophilus microplus). Byly stanoveny nukleotidové sekvence genů feritinu 2 a byla určena jejich primární struktura. Ferítin 2 v těle klíštěte plní funkci přenašeče železa, které získává z krve (proteiny plazmy) hostitele. Jestliže se jej podaří blokovat, nebude schopno přisáté klíště parazitovat na hostiteli, protože jeho mechanismus přenosu nehemového železa ze střeva do periferních tkání nebude funkční, což je pro jeho parazitující život nezbytné. Blokování feritinu 2 lze provést reakcí se specifickou protilátkou za vzniku imunokomplexu. Specifické protilátky vzniknou v organismu imunizací antigenem, tedy feritinem 2. Jako vhodný antigen pro imunizaci lze použít rekombinantní ferítin 2 nebo jeho fragment připravený jak v prokaryo35 tických (EschericMa coli, bakuloviry) tak eukaryotických (Pichia pastoris, hmyzí buňky aj.) expresních systémech. Exprimovaný a purifikovaný rekombinantní ferítin 2 lze použít pro vakcinaci ve vhodném adjuvans nebo formulačním médiu. Výhodou feritinu 2 je jeho významná odlišnost od savčích těžkých (H) i lehkých (L) typů feritinu v aminokyselinové sekvenci. To významně snižuje riziko nežádoucích vedlejších účinků při imunizaci hostitele.
Klíšťata s potlačenou expresí feritinu 2 pomocí RNA interference nejsou schopna plně dokončit sání a většinou zasychají přímo na hostiteli. Právě tato skutečnost dělá z feritinu 2 ideálního kandidáta pro vývoj vakcíny či jiné látky, které by mohly s feritinem 2 interferovat. Narušení sání na imunizovaných hostitelích by znemožnilo normální vývoj klíštěte a mohlo by vést k eliminaci přenosu patogenů přenášených klíšťaty (např, spirochet Lymské boréliózy), které jsou na úspěšném sání klíštěte závislé.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Ferítin 2 označený jako FER2-IR je protein produkovaný klíšťaty Ixodes ricinus jehož primární 55 struktura je daná sekvencí aminokyselin:
CZ 301541 Bó
MKQFWIIAIiIGAATSGNNLFENLDKYPLQDECQAALQEHINVEMHASLVYMQMAAHFDNNKVARKGFSTFFAEN sxeerehaqkiidyinkrgstvslvnidmflittwksvlqalrdaislenkvtnklhavhkiadeeckdpqlmdf
ISSEFLEEQVNSIDKLQRMITVLSNMDSGTGEYLLDRELLGDKKEF.
Zvýrazněná část obsahuje signální sekvenci odpovědnou za sekreci proteinu vně buněk. Primární struktura zajišťuje sbalení proteinu do kvartémí struktury, která transportuje nehemové železo ze střev do periferních tkání. V nepřítomnosti feritinu 2 nebo při jeho účinné blokaci nejsou klíšťata schopná dokončit sání a zasychají přímo na hostiteli.
io Příklad 2
Feritin 2 označený jako FER2-IS je protein produkovaný klíšťaty Ixodes scapularis jehož primární struktura je daná sekvencí aminokyselin:
MKQFWLIALXGAATSGNNLFENLDKYPLQDECQAALQEHINVEMHASLVYMQMAAHFDNNKVARKGFSTFFAEN
SKEEREHAQKÍIDYINKRGSTVSLVNIDMPQITTWKSVLQALRDAISLENKVTNKLHAVHKTADEECKDPQLMDF ,5 IESEFLEEQVTSIDKLQRMITVLSNMDSGTGEYLLDRELLGDKKEF.
Zvýrazněná část obsahuje signální sekvenci odpovědnou za sekreci proteinu vně buněk. Primární struktura zajišťuje sbalení proteinu do kvartémí struktury, která transportuje nehemové železo ze střev do periferních tkání. V nepřítomnosti feritinu 2 nebo při jeho účinné blokaci nejsou klíšťata schopná dokončit sání a zasychají přímo na hostiteli.
Příklad 3
Feritin 2 označený jako FER2-RM je protein produkovaný klíšťaty Rhipicephalus microplus jehož primární struktura je daná sekvencí aminokyselin:
MLRIVLWLAASVMAGNNLN DQVNKYI LPDRCRAGLQEQLNLELHASLVYMQE-dAAHLANNKVARGG FARFFRDQ sseerehaqkiidylnlrggtvsavnvdmpptaiwmsvldalqaalalehrvtnrlyelhrlaeeydaqmadfle QEFLAEQVRSIDQLQRLITQLQNMETGLGEFLLDQQLRA.
Zvýrazněná část obsahuje signální sekvenci odpovědnou za sekreci proteinu vně buněk. Primární struktura zajišťuje sbalení proteinu do kvartémí struktuiy, která transportuje nehemové železo ze střev do periferních tkání. V nepřítomnosti feritinu 2 nebo při jeho účinné blokaci nejsou klíšťata schopná dokončit sání a zasychají přímo na hostiteli*
Příklad 4
Feritin 2 označený jako FER2-DV je protein produkovaný klíšťaty Dermacentor variabilis jehož primární struktura je daná sekvencí aminokyselin:
mlrialliaiasaawagnnlneqvnqnryflhdrcriglqeqvnlelhaslvymqmaahlannkvarngfarffr
DQS3SEREEAQKLVDYVNLRGGTVSAVSVDMPATATWMSVLDALQAAIALEHRVTNRLHELHRLADDSQDPQMAD
FLEQEFLAEQVRSIDQLQRLITQLQNMDTGLGEFLLDQQLRA.
-2CZ 301541 B6
Zvýrazněná část obsahuje signální sekvenci odpovědnou za sekreci proteinu vně buněk. Primární struktura zajišťuje sbalení proteinu do kvartémí struktury, která transportuje nehemové železo ze střev do periferních tkání. V nepřítomnosti feritinu 2 nebo při jeho účinné blokaci nejsou klíšťata schopná dokončit sání a zasychají přímo na hostiteli.
Průmyslová využitelnost
Příprava rekombinantního proteinu feritinu 2 a jeho využití jako antigenů pro imunizaci organisio mu proti klíšťatům a zabránění přenosu klíšťaty přenášených patogenů.
Sekvence aminokyselin feritinu 2:
FER2-IR z Ixodes ricinus bez signální sekvence 15
GNNLFENLDKYPLQDECQAALQEHINVEMHASLVYMQMAAHFDNNKVARKGFSTFFAENSKEEREHAQKIIDYIN
KRGSTVSLVNIDMPLITTWKSVLQALRDAISLENKVTNKLHAVHKIADEECKDPQLMDFIESEFLEEQVNSIDKL
QRMITVLSNMDSGTGEYLLDRELLGDKKEF.
FER2-IS z Ixodes scapularis
GNNLFENLDKYPLQDECQAALQEHINVEMHASLVYMQMAAHFDNNKVARKGFSTFFAENSKEEREHAQKIIDYIN
KRGSTVSLVNIDMPQITTWKSVLQALRDAISLENKVTNKLHAVHKTADEECKDPQLMDFIESEFLEEQVTSIDKL 20 QRMITVLSNMDSGTGEYLLDRELLGDKKEF.
FER2-RM z Rhipicephalus microplus
GNNLNDQVNKYILPDRCRAGLQEQLNLELHASLVYMQMAAHLANNKVARGGFARFFRDQSSEEREHAQKIIDYLN
LRGGTVSAVNVDMPPTAIWMSVLDALQAALALEHRVTNRLYELHRLAEEYDAQMADFLEQEFLAEQVRSIDGLQR
LITQLQNMETGLGEFLLDQQLRA.
FER2-DV z Dermacentor variabilis
GNNLNEQVNQNRYFLHDRCRIGLQEQVNLELHASLVYMQMAAHLANNKVARNGFARFFRDQSSEEREHAQKLVDY
VNLRGGTVSAVSVDMPATATWMSVLDALQAALALEHRVTNRLHELHRLADDSQDPQMADFLEQEFLAEQVRSIDQ
LQRLITQLQNMDTGLGEFLLDQQLRA.

Claims (5)

PATENTOVÉ NÁROKY
1. Feritín 2, který má primární strukturu bez signální sekvence minimálně z 85 % shodnou se sekvencí aminokyselin FER2-IR nebo FER2-IS nebo FER2-RM nebo FER2-DV a v nativním prostředí tvoří kvartémí strukturu, která transportuje nehemové železo ze střev do periferních
40 tkání klíštěte pro imunizaci organismu proti klíšťatům.
2. Feritín 2 podle nároku 1, který má primární strukturu bez signální sekvence tvořenou sekvencí aminokyselin FER2-IR.
-3CZ 3U1541 B6
3. Feritin 2 podle nároku 1, který má primární strukturu bez signální sekvence tvořenou sekvencí aminokyselin FER2-IS,
5
4. Feritin 2 podle nároku 1, který má primární strukturu bez signální sekvence tvořenou sekvencí aminokyselin FER2-RM.
5. Feritin 2 podle nároku 1, který má primární strukturu bez signální sekvence tvořenou sekvencí aminokyselin FER2-DV.
CZ20080402A 2008-06-25 2008-06-25 Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum CZ301541B6 (cs)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20080402A CZ301541B6 (cs) 2008-06-25 2008-06-25 Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum
EP09768811.3A EP2324053B1 (en) 2008-06-25 2009-06-18 Ferritin 2 for the host immunization against ticks
US13/000,813 US8168763B2 (en) 2008-06-25 2009-06-18 Ferritin 2 for the host immunization against ticks
AU2009264468A AU2009264468A1 (en) 2008-06-25 2009-06-18 Ferritin 2 for the host immunization against ticks
MX2011000003A MX341928B (es) 2008-06-25 2009-06-18 Ferritina 2 para la inmunizacion del hospedero contra las garrapatas.
BRPI0914673A BRPI0914673A2 (pt) 2008-06-25 2009-06-18 ferritina 2 para imunização de hospedeiro contra carrapato
PCT/CZ2009/000085 WO2009155886A2 (en) 2008-06-25 2009-06-18 Ferritin 2 for the host immunization against ticks

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ20080402A CZ301541B6 (cs) 2008-06-25 2008-06-25 Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2008402A3 CZ2008402A3 (cs) 2010-01-06
CZ301541B6 true CZ301541B6 (cs) 2010-04-07

Family

ID=41445006

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20080402A CZ301541B6 (cs) 2008-06-25 2008-06-25 Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum

Country Status (7)

Country Link
US (1) US8168763B2 (cs)
EP (1) EP2324053B1 (cs)
AU (1) AU2009264468A1 (cs)
BR (1) BRPI0914673A2 (cs)
CZ (1) CZ301541B6 (cs)
MX (1) MX341928B (cs)
WO (1) WO2009155886A2 (cs)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6327699B2 (ja) * 2014-02-28 2018-05-23 国立大学法人 鹿児島大学 抗マダニワクチン
JP2021519599A (ja) * 2018-04-03 2021-08-12 サノフイSanofi 抗原性ospaポリペプチド

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Hajdusek a kol. (2009) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106, 1033-1038 *
Kopacek a kol. (2003) Insect Biochem. Mol. Biol. 33, 103-113 *
Kopacek a kol., GenBank accession number AAC19131, 20.12.2002 *
Ong a kol., GenBank accession number AAW22505 , 3.1.2006 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2324053A2 (en) 2011-05-25
MX341928B (es) 2016-09-08
AU2009264468A1 (en) 2009-12-30
CZ2008402A3 (cs) 2010-01-06
WO2009155886A3 (en) 2010-04-08
EP2324053B1 (en) 2015-08-12
MX2011000003A (es) 2011-06-01
BRPI0914673A2 (pt) 2016-05-17
US8168763B2 (en) 2012-05-01
US20110118449A1 (en) 2011-05-19
WO2009155886A2 (en) 2009-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hajdusek et al. Characterization of ferritin 2 for the control of tick infestations
AU2011252850B2 (en) OspA chimeras and use thereof in vaccines
Raida et al. Temperature-dependent expression of immune-relevant genes in rainbow trout following Yersinia ruckeri vaccination
Almazán et al. Vaccination with recombinant tick antigens for the control of Ixodes scapularis adult infestations
Yan et al. Vaccination of goats with DNA vaccine encoding Dim-1 induced partial protection against Haemonchus contortus: A preliminary experimental study
Nakao et al. Structural and functional identification of complement components of the bony fish, carp (Cyprinus carpio)
WO2007115059A2 (en) Vaccine against streptococci
BR112013007662B1 (pt) Composições imunogênicas para o controle de infestações por ectoparasitas, uso de ácidos nucleicos naked que codificam um polipeptídeo da proteína ribossômica po dos ectoparasitas e uso do referido polipeptídeo
EA034554B1 (ru) МУТАНТНЫЕ ФРАГМЕНТЫ OspA И СВЯЗАННЫЕ С НИМИ СПОСОБЫ И ПРИМЕНЕНИЕ
Pérez-Sánchez et al. Function-guided selection of midgut antigens from Ornithodoros erraticus ticks and an evaluation of their protective efficacy in rabbits
Githaka et al. Identification and functional analysis of ferritin 2 from the Taiga tick Ixodes persulcatus Schulze
CZ301541B6 (cs) Feritin 2 pro imunizaci organismu proti klíštatum
Oleaga et al. First molecular and functional characterisation of ferritin 2 proteins from Ornithodoros argasid ticks
Silva et al. Babesia bovis expresses Bbo-6cys-E, a member of a novel gene family that is homologous to the 6-cys family of Plasmodium
Madar et al. Exploitation of complement regulatory proteins by Borrelia and Francisella
EP0527977B1 (en) Nematode vaccine
JP5980810B2 (ja) イヌバベシア症ワクチン抗原
Saimo et al. Recombinant Rhipicephalus appendiculatus gut (ra86) and salivary gland cement (trp64) proteins as candidate antigens for inclusion in tick vaccines: Protective effects of ra86 on infestation with adult R. appendiculatus
AU676828B2 (en) Antigens protective against (echinococcus granulosus) infection and vaccines containing such antigens
CA2873599A1 (en) Peptides inducing an immune response against copepods and/or the development of a mucous shield in fish; vaccines, uses and methods for modulating the fish immune response and/or for inducing development of a mucous shield in fish
WO2016059502A1 (en) In vivo induced toxoplasma gondii protein for application in diagnosis, vaccine and therapy
US6277973B1 (en) Cloning and expression of a DNA sequence encoding a 41 kDa cryptosporidium parvum oocyst wall protein
JP6327699B2 (ja) 抗マダニワクチン
EP1539810A1 (en) Immunogenic polypeptide isolated from mycobacterium avium subspecies paratuberculosis and uses thereof
Osebe et al. Molecular cloning, sequencing and recombinant expression of a putative tick protective antigen from three ixodid ticks

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20150625