CZ284920B6 - Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem - Google Patents

Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem Download PDF

Info

Publication number
CZ284920B6
CZ284920B6 CZ96421A CZ42196A CZ284920B6 CZ 284920 B6 CZ284920 B6 CZ 284920B6 CZ 96421 A CZ96421 A CZ 96421A CZ 42196 A CZ42196 A CZ 42196A CZ 284920 B6 CZ284920 B6 CZ 284920B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
caffeine
type
herpes simplex
hsv
effect
Prior art date
Application number
CZ96421A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ42196A3 (en
Inventor
Vladimír Prof. Mudr. Drsc. Vonka
Hans Peter Prof. Dr. Med. Breuel
John Horkulak
Original Assignee
Vladimír Prof. Mudr. Drsc. Vonka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vladimír Prof. Mudr. Drsc. Vonka filed Critical Vladimír Prof. Mudr. Drsc. Vonka
Priority to CZ96421A priority Critical patent/CZ284920B6/cs
Priority to DE1997105277 priority patent/DE19705277C2/de
Priority to GB9703085A priority patent/GB2310139B/en
Publication of CZ42196A3 publication Critical patent/CZ42196A3/cs
Publication of CZ284920B6 publication Critical patent/CZ284920B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Předmětem řešení jsou preparáty pro lokální terapii rekurentního herpesu založené na kombinaci kofeinu se syntetickými inhibitory množení viru herpes simplex. Vychází z laboratorního pozorování, že v přítomnosti kofeinu se inhibiční účinek těchto substancí výrazně zvyšuje. Vzhledem k tomu, že nedávná klinická studie, v níž byla zkoušena lokální terapie pomocí interferonu a kofeinu prokázala, že jejich směs má výraznější léčebný efekt než jejich samostatné podání (Vonka, V, et.al., Acta Virol., 39: 125), lze očekávat podobný příznivý účinek mastí, krémů či roztoků obsahujících kombinaci syntetických inhibitorů a kofeinu.ŕ

Description

Oblast techniky
Vynález se týká farmaceutických přípravků pro léčbu rekurentního herpesu
Dosavadní stav techniky
Infekce virem herpes simplex typu 1 (HSV-1, orální) a typu 2 (HSV-2, genitální) představují závažný zdravotní problém. I když zpravidla neohrožují život, a i když se nepotvrdilo podezření, že by HSV-2 byl původcem rakoviny děložního čípku, kožní projevy infekce - zvláště ve své rekurující formě - výrazně zhoršují kvalitu života. Při tom problém rekurujícího herpesu narůstá. V důsledku změn životního stylu a zvláště sexuálních zvyklostí dochází v posledních 20 letech k epidemickému šíření genitálního herpesu. Tak např. ve Spojených státech se ročně registruje okolo půl milionu nových případů a ve Velké Británii vzrostl počet hlášených případů mezi lety 1976 a 1991 čtyřnásobně (Kinghom, G. R., 1994 J.Intem. Med. Res., 22 (Suppl 1): 14A). Počet a tíže klinických projevů infekcí HSV narůstají též v souvislosti s přibývajícím počtem imunosuprimovaných osob v důsledku infekcí virem HIV, chemoterapie nádorových onemocnění a transplantačních programů.
Po dlouhou dobu byla terapie kožních leží vyvolaných HSV-1 a HSV-2 téměř výlučně symptomatická. K. zmírnění potíží se používaly různé mastě, krémy či roztoky. V současné době se k léčbě používá ve vzrůstající míře chemotherapeutik, která tlumí replikaci viru, a při tom neinterferují s metabolismem neinfikovaných buněk. Mezi nimi je na prvním místě acyklický derivát guanosinu označovaný jako acyclovir (Darby, G., 1995, Antiviral Chem. Chemother, 5 (Suppl 1 ):3). Je znám pod firemním názvem Zovirax. Nedávno se objevily jeho deriváty, z nichž zejména valin-ester acycloviru označený jako valcyclovir skýtá řadu výhod oproti acycloviru (Darby, G., 1995, Antiviral Chem.Chemother., 5 (Suppl 1) 3). Jiným derivátem získaným připojením hydroxymethylové skupiny v acyclickém postranním řetězci je gancyclovir (Field, A. K., et al., 1983, Proč. Nati. Acad. Sci, USA 80: 4139), který má širší působnost než acyclovir, ale je toxičtější (Faulds, D., Heel, R.C., 1990, Drug Eval., 39: 587). V daleko menším měřítku se užívá k léčbě infekcí HSV a jejich komplikací jiných protivirových substancí jako eduxin (5ethyl-2'-deoxyuridin, EO), adenin-arabinosid (AraA) vidarabin, 9-[3-arabinofuranosyladenin), IDU (5-jodo-2'-deoxyuridin) a kyselina fosfonomravenčí a její deriváty. Vzrůstající pozornosti se v poslední době těší bromovinyl-deoxyuridin (BVDU), (E)-5 (2-bromovinyl)-2'-deoxyuridin) (Jones, A.S., et al., 1979, Tetrahedr. Letts, 4415; de Clerq, E. et al., 1979, Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 76::2983), který je však účinný pouze proti HSV-1, ale nikoli HSV-2. Perorální podání acycloviru zahájené v době prodromů výrazně zkracuje a zmírňuje průběh nemoci. Dlouhodobé podávání je s to redukovat výskyt rekurencí na minimum (Douglas, J. M., et al., 1984; New Engl. J. Med. 310: 1551; Strauss, S. E., et al., 1986, Antiviral Res., 6: 151; Baker, D. A., J.Intem.Med. Res., 1994 (Supp 1):24A). Acyclovir ani žádné jiné látky s podobným účinkem nejsou však s to vyléčit latentní virovou infekci. I po dlouhodobém užívání se při přerušení léčby rekurence znovu objeví. Ačkoli zavedení acycloviru znamenalo výrazný pokrok v léčbě rekurentního herpesu, nelze jej pokládat za ideální lék, a to hned z několika důvodů. Za prvé, i když prozatím nejsou známy jeho závažnější vedlejší účinky, při dlouhodobém systémovém užívání látky, která je analogem nukleosidu, je nelze zcela vyloučit. Za druhé, acyclovir je lék drahý a proto těžko přijatelný pro velmi rozsáhlé či dokonce všeobecné použití. Za třetí, se vzrůstajícím užíváním acycloviru přibývá mutant, které jsou k němu resistentní.
- 1 CZ 284920 B6
Zvýšená pozornost je věnována lokální léčbě herpetických leží formou mastí, krémů či roztoků. Lokální léčba antivirovými substancemi má podstatné výhody. K dosažení kritických koncentrací v místech leží je zapotřebí daleko menších množství užívaných látek než při jejich perorálním či parenterálním podání, což podstatně léčbu zlevňuje. Další výhodou je docílení podstatně vyšších lokálních koncentrací těchto látek, než je možné při celkovém podání. Tím se též odstraňují rizika spojená s celkovým podáním. Stav problému nedávno shrnuli Spruance a Freedman (Spruance, A. L., Freeman, D. Y., 1990, Antiviral Res., 4:305). Význam velké části dosud povedených studií snižují malé počty pacientů nebo nezahrnutí kontrolní skupiny s placebem. V žádné z těchto studií se nepodařilo topickou léčbu započatou v době prodromů zabránit vzniku leží, nicméně podání protivirových substancí formou mastí či krémů opakovaně zmírnilo průběh nemoci a urychlilo hojení. Největší pozornost byla věnována acycloviru (Fiddian, A. P. et al., 1983, Br. J. Dermatol., 109: 321; Van Vloten, W. A. et al. 1983, Antimicrob. Chemother. 12 (Suppl.B): 89; Shaw, M. et al., 1985, Br. Med. J., 291:7). Léčebné účinky měla i lokální aplikace edoxudinu (Sacks, S. I. et al., 1989, J.Inf.Dis., 161.: 191). Ani vjednom případě však nebyl účinek zvláště výrazný. K lokální léčbě byl též užit interferon, substance, o níž se ví; že inhibuje replikaci viru herpes simplex in vitro, ale která se neosvědčila při systémovém podání (Eron, L. J. et al., 1986, Antimicrob. Agents Chemother., 30: 608; Ho, M., 1990, J. Investig. Dermatol., Suppl., 95: 158 S). Interferon alfa nebyl účinný ani při lokálním podání ve formě roztoku (Eron, L. J. et al., 1987, Antimicrob. Agents Chemother., 31: 1137). Příznivé účinky lokální aplikace rekombinantního interferonu alfa popsali Lebwohl et al. (1992, Antiviral Res., 17: 235-243), Sacks et al (Sacks, S. L. et al., 1990, J. Inf. Dis., 161: 692) pozorovali statisticky významné, i když ne zvlášť výrazné zlepšení průběhu nemoci po lokální aplikaci methylcelulosového gelu, který obsahoval přirozený interferon alfa v kombinaci s monoxylolem. Daleko lepších výsledků dosáhli Isacson et al., (Isacson, M. et al., 1983, Isr. J.Med.Sci., ]9: 959), Moskowitz a spol., (Moskowitz, M. et al., 1986, Herpes and Papilloma Viruses, Soreno Symp. Publ., 31: 333) a Glezerman a spol. (Glezerman, M. et al, Herpes and Papilloma Viruses, Soreno Symp. Publ., 33: 245) s lokální aplikací přirozeného interferonu beta. Jednotlivé provedené studie je však možné jen obtížně srovnávat nejen vzhledem k tomu, že v nich byly použity různé preparáty, ale i vzhledem k odlišnému režimu léčby a způsobu hodnocení.
Nedávno byl prokázán příznivý účinek lokální léčby interferonem alfa v studii, do které bylo zahrnuto 115 pacientů, trpících dlouhodobě (2-12 let) rekurentním orálním či genitálním herpesem (Vonka, V. et al., 1995, Acta virol., 39: 125). Současně bylo ukázáno, že léčebný účinek byl potencován kofeinem, o němž je známo, že je slabým inhibitorem množení HSV in vitro (Yamazaki, Za Tagaya, I., 1980, J. gen. Virol., 61: 255, Shiraki, K. a Rapp. F., 1988, Intervirology 29: 235). U pacientů bylo zvýšení léčebného účinku interferonu kofeinem patrné při užití obou ukazatelů průběhu nemoci, a to doby hojení (interval mezi prvními příznaky a úplným vyhojením) a doby šíření leží (interval mezi prvními příznaky a objevením se poslední nové leze). K provedení studie vedlo předchozí zjištění, že kofein i v koncentracích menších než 0.3 mg/ml silně zvyšuje inhibiční účinek leukocytámího interferonu na množení HSV v tkáňových kulturách (Vonka, V.et al., 1995, Acta Virol., 39: 125).
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou farmaceutické přípravky určené k léčbě leží vyvolaných viry herpes simplex typu 1 a typu 2, spočívající vtom, že obsahují směs kofeinu v koncentraci 0,03 až 10,0 % hmotn. a syntetického inhibitoru replikace virů herpes simplex typu 1 či typu 2 vybraným ze souboru, který zahrnuje deriváty purinů a pyrimidinů, a to v koncentraci 0,0001 až 5,0% hmotn. Farmaceutické přípravky podle tohoto nároku spočívají vtom, že směsi substancí jsou rozmíchány ve farmaceuticky nezávadném masťovém či krémovém základu anebo rozpuštěny ve fosfátovém ůstojném roztoku či jiném farmaceuticky nezávadném rozpouštědle.
-2 CZ 284920 B6
Kofein, a to v koncentracích, které samy o sobě nemají výrazný inhibiční účinek na množení HSV, silně zvyšuje účinek jiných virostatik.
V provedených pokusech bylo použito těchto substancí:
(i) 9 (2-hydroxyethoxymethyl)-guanine, acyclovir, Zovirax, Wellcome (ACV) (ii) (E)-5(2-bromovinyl)2'-deoxyuridin (BVDU), Brivudin-Referenz Substanz, BerlinChemie, SRN (iii) 9-(2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)-ethoxy)methylguanin, gancyclovir, (GCV), Syntex Labs, USA (iv) 9-P-D-arabinofuranosyl-adenin (ara A) (Lee, W. W. et al., 1960, J. Am. Chem. Soc., 82: 2684, North, T. W., Cohen, S., 1979, Pharmac. Ther., 4: 81) (v) 9-(2-fosfonylmethoxyethyl) adenin (PMEA); Holý, A. et al., Antiviral Res., 13: 295, de Clerq, E., 1987, Antiviral Drug Development: A Multidisciplinary Approach, Plenům Press, New York, 1987, p. 97 (vi) 9-(S)-(3-hydroxy-2-fosfonyl-methoxypropyl) adenin (HPMPA) Holý A., et al., 1990, Antiviral Res., 13: 295, de Clerq, E., 1987, Antiviral Drug Development: A Multidisciplinary Approach, Plenům Press, New York, 1987, p. 97 (vii) 9-(S)-(3-hydroxy-2-fosfonyl-methoxypropyl) cytosin (HPMPC) Holý, A. et al., 1990, Antiviral Res., 13: 295, de Clerq, E., 1987, Antiviral Drug Development: A Multidisciplinary Approach, Plenům Press, New York, 1987, p. 97 (viii) kofein (Sigma) (KF)
V dalším textu jsou všechny substance uvedené pod (i)—(vii) označovány pouze jako inhibitory. Inhibitory od (iii) do (viii) byly laskavě poskytnuty A. Holým (Ustav organické chemie a biochemie AV ČR).
Inhibitory byly naředěny v redestilované vodě v koncentraci 1 mg/ml. KF byl naředěn ve vodě v koncentraci 30 mg/ml. Roztoky byly sterilizovány přes filtr Millipore a uloženy v objemu 1 ml při -20 °C. Těsně před použitím byly roztoky rozmraženy, opticky zkontrolovány, zda se substance beze zbytku rozpustily a posléze příslušně naředěny v kultivačním médiu. V popsaných pokusech bylo použito i buněk REF (rabbit embryo fibroblasts, kontinuální buněčná linie odvozená od králičího embrya, Roubal, J., Vonka, V., 1973, Intervirology 1:73). Tyto buňky jsou vysoce vnímavé k virům HSV-1 a HSV-2. Buňky byly nasazeny do plastických panelů buď Nuclon Delta, či Microwell-Nunc, Dánsko a udržovány v atmosféře s 5 % CO? při 37 °C. Použity byly kmen K.O.S. HSV-1 a kmen 196 HSV-2. Pro přímé testování vlivu KF na virostatický účinek inhibitorů bylo užito kultur narostlých v šestimiskových panelech Nuclon Delta. Testované substance byly přidány do média 24 hodin před infekcí a pak (v stejné koncentraci) bezprostředně po infekci anebo jen po infekci. Virové inokulum obsahovalo 100 TCD50 viru a před přidáním media bylo drženo 30 min. při 37 °C. V předem stanovených intervalech byly odebírány vzorky, které byly ukládány při -70 °C. Současně byl sledován rozvoj cytopatických změn. Titrace vybraných vzorků byly provedeny v destičkách Microwell (96 jamek). Titry virů byly stanoveny dle Kárbera.
Výsledky representativních pokusů, v nichž byl zjišťován vliv ACV a BVDU (v koncentraci 0,5 a 0,12 pg/ml) a kofeinu (0,5 mg/ml) při replikaci HSV-1 jsou v horní části Tabulek č. 1 a č. 2.
-3 CZ 284920 B6
Ukazují, že samotný KF z užité koncentrace vykazoval jen malý či žádný inhibični účinek. Oba inhibitory výrazně potlačily množení viru. Jejich účinek byl podstatně zvýšen v kulturách, které obsahovaly kromě ACV (Tabulka č. 1) či BVDU (Tabulka č. 2) také KF. Jak ukazují spodní části tabulek, inhibiční účinek ACV a BVDU a jeho zvýraznění KF byly dobře patrné i podle cytopatických změn (CPE).
Přes určitou variaci byl základní jev, tedy podstatná potenciace účinku obou inhibitorů kofeinem, reprodukovatelný v opakovaných pokusech. Preinkubace v přítomnosti zkoušených substancí neměla podstatný účinek.
Vzhledem ke shodě mezi produkcí infekčního viru a rozvojem CPE byl zaveden zjednodušený test, který umožnil prověřit rychle a reprodukovatelně širší okruh inhibitorů. Test byl prováděn na destičkách Microwell (96 jamek, v 12 svislých řadách po 8 jamkách) tak, že vždy byly testovány 3 různé koncentrace KF a 10 různých koncentrací inhibitorů. Ke kulturám buněk REF narostlých v jamkách destiček bylo přidáno: do prvních dvou řad médium (kontrola), do třetí a čtvrté řady KF v konečné koncentraci 1 mg/ml, do páté a šesté řady KF do konečné koncentrace 0,5 mg/ml, a do sedmé a osmé řady KF do konečné koncentrace 0,25 mg/ml. Do prvních dvou svislých řad bylo přidáno medium (kontrola), do dalších 10 klesající koncentrace zkoušeného inhibitoru, při čemž nejvyšší užitá koncentrace kolísala mezi 3-100 pg/ml. Poté, bylo do všech jamek, s výjimkou prvního sloupce, přidáno 1OOTCD5o viru. Kultury byly uloženy při 37 °C v prostředí s 5 % CO2 a opakovaně odečítány. V přítomnosti určitých koncentrací inhibitorů došlo k odkladu či úplné zábraně rozvoje CPE. KF jejich rozvoj dále oddaloval či zabránil jejich vzniku v koncentracích základního inhibitoru výrazně nižších než v jeho nepřítomnosti. Postupně byly kromě ACV a BVDU otestovány též další inhibitory: GCV, Ara A, PMEA, HPMPA, HPMPC. Jejich účinek byl vesměs zvýrazněn v přítomnosti KF.
Tabulka č. 3 shrnuje výsledky získané při měření vlivu zkoušených inhibitorů na CPE vyvolávaný HSV-1. Účinky jsou vyjádřené jako koncentrace inhibitoru (v pg/ml), která kompletně inhibovala CPE v nepřítomnosti a přítomnosti KF (0,5 mg/ml a 1,0 mg/ml), a to v den, kdy v přítomnosti stejné koncentrace samotného KF byl CPE úplný. Z tabulky je zřejmé, že účinná koncentrace inhibitoru v přítomnosti KF byla 4 až 128x nižší než v jeho nepřítomnosti. Vliv KF byl výraznější při jeho vyšší koncentraci. Potenciační účinek kofeinu byl stejně patrný i při užití jiných kriterií, např. při měření 50% inhibice CPE, doby objevení prvních cytopatických změn a pod. Jak ukazuje Tabulka č. 4 obdobné výsledky byly získány i s HSV-2, s výjimkou BVDU, o němž je známo, že replikaci kmenů HSV-2 neinhibuje.
Závěr: Popsané výsledky ukazují, že účinek širokého spektra inhibitorů na replikaci HSV-1 i HSV-2 lze potencovat kofeinem. Tato kombinace se stane základem nové generace farmaceutických přípravků ve formě mastí, krémů a roztoků pro lokální léčbu rekurentního herpesu.
Následující příklad přípravy a aplikace preparátu podle vynálezu pouze dokládá, ale nikterak neomezuje jeho využití.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Acyclovir či jeho deriváty, další deriváty purinů a pyrimidinů, či jiné synteticky připravené látky s inhibičním účinkem na viry herpes simplex typu 1 a nebo typu 2 se rozpustí ve fosfátovém ústojném roztoku (PBS) či jiném vhodném rozpouštědle. Oba roztoky jsou sterilizovány filtrací přes membránový filtr, např. filtr obchodního názvu Millipore. Oba roztoky jsou za sterilních
-4CZ 284920 B6 podmínek vmíchány do vhodného masťového či krémového základu (např. Ambiderman, Spofa) či naředěny v PBS či jiném vhodném rozpouštědle tak, aby jejich výsledná koncentrace byla v případě derivátů purinů a pyrimidinů 0,0001 až 5,0% hmotn. a v případě kofeinu 0,03 až 10,0 % hmotn. Výsledná mast, krém či roztok jsou zkoušeny na přítomnost mikrobů. Výsledek musí odpovídat požadavkům ČSL-4 (str. 118, skupina 3) na mikrobiologickou nezávadnost. Mast, krém či roztok, se skladují při 4 °C. Aplikují se co nejdříve po objevení prodromů herpetických leží, a to nejméně 6x denně až do úplného vyhojení. Mast či krém se aplikují nanášením na postiženou oblast kůže a její bezprostřední okolí, roztok se aplikuje formou obkladu.
Příklad 2
Jako příklad 1, ale obsahující kromě kofeinu dva či více inhibitorů.
Tabulka 1
Inhibiční účinek ACV a KF na replikaci viru HSV-I v buňkách REF
Přidaná substance (v ug/ml Titr viru (logio/ml) v udaný den po infekci 5
0 7.25
KF 7.5
ACV (0.5) 4.25
ACV (0.5) + KF 1.5
ACV (0.12) 6.0
ACV (0.12)+ KF 3.0
CPE v udaný den po infekci
2 5 6 7 8 9
0 + ++ ++++
KF + ++ ++++
ACV (0.5) 0 0 0 +- + ++ +++
ACV (0.5) + KF 0 0 0 0 0 0 0
ACV (0.12) + ++ ++ ++ +++ +++ +++
ACV (0.12)+ KF 0 0 0 0 0 0 +-
Vysvětlivky: KF 0.5 mg/ml CPE: cytopatický efekt; +: CPE méně než 25 %; ++: CPE 25-50 %; +++; CPE více než 50 %, ale ještě nikoli kompletní; ++++: kompletní CPE
Tabulka 2
Inhibiční účinek BVDU a KF na replikaci viru HSV-I v buňkách REF
Přidaná substance (v ug/ml) Titr viru (log 10/ml) v udaný den po infekci
3 4 8
0 6.25 >7.5
KF 6.0 6.75
BVDU (0.5) 2.75 4.75
BVDU (0.5) + KF <1.5 <1.5 3.0
BVDU (0.12) 2.75 4.75
BVDU (0.12) + KF <1.5 2.25 4.75
CPE v udaný den po infekci
1 2 3 4 6 8
0 + ++ +++ ++++
KF +- + +++ +++ ++++
BVDU (0.5) 0 0 + + +++ ++++
BVDU (0.5) + KF 0 0 0 0 + +
BVDU (0.12) +- + ++ ++ ++++
BVDU (0.12)+ KF 0 0 0 0 + ++
Vysvětlivky: viz Tabulka 1
Tabulka 3
Inhibice replikace viru HSV-I různými inhibitory v nepřítomnosti a přítomnosti KF podle potlačení cytopatického efektu (CPE)
Inhibitor Koncentrace inhibitoru (pg/ml) kompletně potlačující CPE
bez KF KF (0.5 mg/ml) KF (Img/ml)
ACV 0.42 0.1 (4x) 0.01 (32x)
BVDU 0.8 0.05 (16x) 0.025 (32x)
GCV 0.1 <0.01 (>8x) <0.01 (>8x)
AraA > 6.8 1.7 (>4x) 0.8 (>8x)
PMEA >13.4 0.2 (>64x) 0.2 (>64x)
HPMPA 3.3 0.2 (16x) 0.02 (128x)
HPMPC 1.66 0.4 (4x) 0.4 (4x)
v závorkách - násobný vzestup účinnosti v přítomnosti KF
-6CZ 284920 B6
Tabulka 4
Inhibice replikace viru HSV-2 různými inhibitory v nepřítomnosti a přítomnosti KF podle potlačení cytopatického efektu (CPE)
Inhibitor Koncentrace inhibitoru (pg/ml) kompletně potlačující CPE
bez KF KF (0.5me/ml) KF 1 mg/ml)
10 ACV 0.83 0.2 (4x) 0.03 (32x)
BVDU >33.3 33.3 (+-) 33.3 (—)
GCV 0.13 <0.03 (>4x) <0.03 (>4x)
AraA >16.6 4.2 (>4x) 0.3 (64x)
PMEA 4.2 1.04 (4x) 0.26 (16x)
15 HPMPA >8.3 1.04 (8x) 0.03 (>256x)
HPMC 6.7 1.7 (4x) 0.4 (16x)

Claims (1)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Farmaceutické přípravky určené k léčbě leží vyvolaných viry herpes simplex typu I a 25 typu 2, vyznačující se tím, že obsahují ve směsi kofein v koncentraci 0,03 až
    10,0% hmotn. se syntetickým inhibitorem replikace virů herpes simplex typu 1 či typu 2 vybraným ze souboru, který zahrnuje deriváty purinů a pyrimidinů, a to v koncentraci 0,0001 až 5,0 % hmotn.
    30 2. Farmaceutické přípravky podle nároku 1, vyznačené tím, že směsi substancí jsou rozmíchány ve farmaceuticky nezávadném masťovém či krémovém základu anebo rozpuštěny ve fosfátovém tlumivém roztoku či jiném farmaceuticky nezávadném rozpouštědle.
CZ96421A 1996-02-14 1996-02-14 Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem CZ284920B6 (cs)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ96421A CZ284920B6 (cs) 1996-02-14 1996-02-14 Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem
DE1997105277 DE19705277C2 (de) 1996-02-14 1997-02-12 Arzneimittel zur Behandlung von rekurrierenden Herpes-Erkrankungen, enthaltend synthetische antivirale Substanzen und Coffein
GB9703085A GB2310139B (en) 1996-02-14 1997-02-14 Preparations for treatment of recurrent herpetic lesions

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ96421A CZ284920B6 (cs) 1996-02-14 1996-02-14 Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ42196A3 CZ42196A3 (en) 1997-12-17
CZ284920B6 true CZ284920B6 (cs) 1999-04-14

Family

ID=5461686

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ96421A CZ284920B6 (cs) 1996-02-14 1996-02-14 Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem

Country Status (3)

Country Link
CZ (1) CZ284920B6 (cs)
DE (1) DE19705277C2 (cs)
GB (1) GB2310139B (cs)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU226058B1 (en) * 2000-06-14 2008-04-28 Egis Gyogyszergyar Nyilvanosan Process for producing sterile acyclovir cream
DE10108851A1 (de) 2001-02-23 2002-09-12 Resprotect Gmbh Verwendung von 5'-substituierten Nukleosiden und/oder deren Prodrugs zur resistenzfreien Therapie von Infektionskrankheiten
KR20100005063A (ko) * 2006-09-18 2010-01-13 패트릭 티. 프렌더게스트 바이러스 감염을 치료하기 위한 스타틴 및 카페인을 포함하는 조성물
EP2155209A4 (en) * 2007-04-26 2012-06-13 Univ Pennsylvania DNA polymerase inhibitor composition and method
US20150080390A1 (en) * 2013-09-19 2015-03-19 Drexel University Compositions useful for treating herpes simplex keratitis, and methods using same
US10071098B2 (en) 2014-09-26 2018-09-11 Drexel University Compositions useful for treating herpes simplex labialis and/or herpes esophagitis, and methods using same

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0101441B1 (en) * 1982-02-12 1987-01-14 Syntex (U.S.A.) Inc. Anti-viral compositions
GB8926595D0 (en) * 1989-11-24 1990-01-17 Surtech Int Ltd Pharmaceutical compositions for use in the treatment herpes simplex virus infections

Also Published As

Publication number Publication date
GB2310139A (en) 1997-08-20
CZ42196A3 (en) 1997-12-17
GB2310139B (en) 1999-07-28
DE19705277C2 (de) 1999-02-18
GB9703085D0 (en) 1997-04-02
DE19705277A1 (de) 1997-11-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jacobson et al. Acyclovir-resistant varicella zoster virus infection after chronic oral acyclovir therapy in patients with the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)
STRAUS et al. Acyclovir for chronic mucocutaneous herpes simplex virus infection in immunosuppressed patients
Lalezari et al. (S)-1-[3-hydroxy-2-(phosphonylmethoxy) propyl] cytosine (cidofovir): results of a phase I/II study of a novel antiviral nucleotide analogue
Field et al. Effect of acycloguanosine treatment on acute and latent herpes simplex infections in mice
Colin et al. Ganciclovir ophthalmic gel (Virgan; 0.15%) in the treatment of herpes simplex keratitis
Lalezari et al. Treatment With Intravenous (S)-1-[3-Hydroxy-2-(Phosphonylmethoxy) Propyl]-Cytosine Of Acyclovir-Resistant Mucocutaneous Infection With Herpes Simplexvirus In A Patient With Aids
Park et al. Acyclovir in oral and ganglionic herpes simplex virus infections
US20200069708A1 (en) Topical antiviral formulations
Bourinbaiar et al. The effect of gramicidin, a topical contraceptive and antimicrobial agent with anti-HIV activity, against herpes simplex viruses type 1 and 2 in vitro
IL91415A (en) Antiviral preparations containing a history of adenosine, their salts or metabolites
CZ284920B6 (cs) Preparáty pro léčbu rekurentního herpesu založené na potenciaci účinků syntetických virostatik kofeinem
Alché et al. Treatment with meliacine, a plant derived antiviral, prevents the development of herpetic stromal keratitis in mice
RU2573977C2 (ru) 4,6-ди(3,12-диаза-6,9-диазониадиспиро[5.2.5.2]гексадекан-1-ил)-2-метил-5-нитропиримидин тетрахлорид дигидрохлорид гексагидрат для лечения герпетической инфекции, фармацевтическая композиция для местного применения
Herne et al. Antiviral therapy of acute herpes zoster in older patients
Lalezari et al. A preclinical and clinical overview of the nucleotide-based antiviral agent cidofovir (HPMPC)
McGrath et al. Genital herpes simplex infections in patients with the acquired immunodeficiency syndrome
Maudgal et al. Efficacy of (S)-HPMPA against thymidine kinase-deficient herpes simplex virus-keratitis.
KR19980701957A (ko) 신규 제약 조성물
Bravo et al. Evaluation of HPMPC therapy for primary and recurrent genital herpes in mice and guinea pigs
KR101717280B1 (ko) 게르마늄의 착체 화합물, 이를 제조하는 방법, 및 약물
EP0739208A1 (en) Flavin derivatives as anti-viral agents
Alder et al. Efficacy of A-73209, a potent orally active agent against VZV and HSV infections
Safrin et al. Topical treatment of infection with acyclovir-resistant mucocutaneous herpes simplex virus with the ribonucleotide reductase inhibitor 348U87 in combination with acyclovir
US5002932A (en) Antiviral pharmaceutical compositions and method of treating herpes
CN117205221B (zh) 锥丝碱在制备抗疱疹病毒药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20010214