CZ281130B6

CZ281130B6 - Deriváty 4-alkyloxy-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu

Info

Publication number: CZ281130B6
Application number: CZ931214A
Authority: CZ
Inventors: Miroslav Ing. Csc. Kuchař; Kateřina Rndr. Čulíková; Bohumila Ing. Csc. Brůnová; Eva Rndr. Anděrová; Marie Rndr. Švorcová; Roman Rndr. Csc. Lapka
Original assignee: Galena, A.S.
Priority date: 1993-06-18
Filing date: 1993-06-18
Publication date: 1996-06-12
Also published as: CZ121493A3

Abstract

Deriváty 4-alkoxy-2-hydroxy-3-propylacetofenonu obecného vzorce i, ve kterém Y znamená O nebo S, Q znamená CH.sub.2.n.COOR nebo COOR kde R je vodík nebo nižší alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku; pokud P je vodík nebo halogen, pak Z znamená (CH.sub.2.n.).sub.n.n., kde n = 2 až 4, když je vodík, může Z značit rovněž CH.sub.2.n.CH(OH)CH.sub.2.n.. Jsou rovněž popsány způsoby přípravy těchto sloučenin a farmaceutické přípravky, které tyto sloučeniny obsahují jako účinnou látku. ŕ

Description

Deriváty 4-alkyloxy-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů 4-alkyloxy-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu, jejich způsobů přípravy a farmaceutických přípravků s protizánétlivou a antiastmatickou účinností.

Dosavadní stav techniky

Ovlivnění enzymů, které katalyzují oxidativní metabolismus arachidonové kyseliny představuje velmi plodný základ pro vývoj účinných léčiv, zvláště s protizánétlivou, po případe imunomodulační aktivitou. Původně to byly především inhibitory cyklooxygenasy, zabraňující biosyntéze prostaglandinú a thromboxanů, které se uplatňuji jako protizánétlivé látky a periferní analgetika. Později byla objevena alternativní biotransformace arachidonové kyseliny, při niž vznikají působením 5-lipoxygenasy další významné metabolity arachidonové kyseliny, leukotrieny (Taylor G. W., Clarke S. R.: Trends Pharmacol. Sci. 7, 100 (1986). Leukotrieny (LT) C₄ a D₄ byly charakterizovány (Samuelsson B.: Science 220, 568 (1983) jako složky tzv. pomalu reagující substance (SRS-A) indukující anafylaktickou reakci a známé již téměř půl století (Bocklehurst W.E.: J. Physiol. 120, 16P (1953). Bylo konstatováno, že SRS-A je radiátorem zánětu při bronchiální konstrikci a způsobuje cévní permeabilitu při chorobách spojených s okamžitou přecitlivělosti (Dahlen S. a spol. Nátuře (London) 288, 484 (1980). Dále bylo zjištěno, že jiný leukotrien B₄ je významnou chemotáktickou látkou pro různé typy buněk včetně těch, které se podílejí na vzniku a rozvoji zánětlivého procesu. Stimuluje agregaci a degranulaci lidských neutrofílů, je mediátorem uvolňování lysosomálních enzymů a podporuje tvorbu superoxidu (Ford-Hutchinson A.W. a spol.: J. Immunol. 125, 1789 (1980). Je proto považován za významný mediátor řady zánětlivých onemocnění (Bray M.A.: Agents Actions 19, 1 (1986).

V posledním desetiletí byl zaznamenán výrazný pokrok ve výzkumu antagonistů leukotrienů. Objev látky FPL 55712 (Augstein J. a spol.: Nátuře (London) New Biol. 245, 215 (1973), odvozené od

2,4-dihydroxy-3-propylacetofenonu, otevřel cestu k vývoji řady účinných antagonistů tzv. cysteinových leukotrienů, obsahujících v molekule fragment hydroxyacetofenonu. Strukturní modifikace původní látky poskytly řadu významně účinných antagonistů LT C₄a D₄. Mezi nejznámnějši patří LY 171,883 nesoucí v molekule tetrazolový skelet (Fleisch J.H. a spol.: J. Pharmacol.Exptl.Ther. 233, 148 (1985) a L 649,923, obsahující kromě dihydroxyacetofenonového fragmentu zbytek fenylhydroxybutanové kyseliny (Jones T.R. a spol. : Can. J. Physiol: Pharmacol. 64, 1068 (1986). Jednou z nejnovéjších látek, obsahujících fragment dihydroxyacetofenonu, je derivát CGP 45715 A, jehož strukturu lze současně považovat za analogickou LT D₄ (von Sprecher A. a spol.: Drugs Fut. 16, 827 (1991). Přestože dosud nebylo vyvinuto léčivo v této skupině látek, zůstávají deriváty, obsahující uvedený fragment hydroxyacetofenonu, ve středu zájmu výzkumu antiflogistik a antiastmatik.

-1CZ 281130 B6

Většina těchto látek se vyznačuje především významným antagonistním efektem vůči cysteinovým leukotrienům C₄ - e₄ s nevýrazným inhibičním efektem vůči 5-lipoxygenase. Výjimečně byl zaznamenán antagonismus vůči LT B₄, např. u látky SC-41930 (Djuric S.W. a spol.: J. Med. Chem 32, 1145 (1989), kde však fragment dihydroxyacetofenonu je modifikován methylací volného hydroxylu. Inhibice 5-lipoxygenasy byla u derivátů 2,4-dihydroxyacetofenonu popsána pouze výjimečně, např. u látky WY-44329 (Lewis A. J. a spol.: Int. J. Immunopharmacol. 7, 384 (1986), u níž byl současně zaznamenán antagonistní efekt vůči LT D₄.

Podstata vynálezu

Podstata vynálezu spočívá v nových derivátech 4-alkyloxy-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu obecného vzorce I

v němž Y značí O nebo S, Q značí CH₂COOR nebo COOR, kde R je vodík nebo nižší alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, po případě kation alkalického kovu nebo organické báze, pokud P je vodík nebo halogen, pak Z značí (CH₂)_n, kde n = 2 až 4, pokud P je vodík, může Z značit rovněž CH₂CH(0H)CH₂.

K přípravě těchto látek lze použit metod organické syntézy, při čemž za výhodnou lze považovat reakci 4-(ώ^-halogenalkyloxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu obecného vzorce II

(II) , v němž n značí 2 až 4a Hal značí chlor, brom nebo jod, nebo

4-(3-epoxypropoxy)-2-hydroxy-3-propylacetofenon obecného vzorce

III

(III),

-2CZ 281130 B6 s derivátem merkaptobenzoové nebo hydroxyaryloctové kyseliny obecného vzorce IV

P v němž P. Q a Y mají výše uvedený význam.

Reakce látek II a IV probíhá obvykle ve vroucím nižším ketonu, např. acetonu nebo 2-butanonu v přítomnosti vhodné báze, s výhodou bezvodého uhličitanu draselného. Kondenzace látek IV s epoxyderivátem III se provádí obvykle ve vroucím nižším alkoholu, s výhodou v methanolu. Získané estery lze převést na volné kyseliny I (R = H) obvyklými metodami hydrolýzy, např. působením vodně-alkoholického roztoku alkalického hydroxidu při teplotě 60 - 110 °C, s výhodou při teplotě varu použité směsi alkoholu a vody. Vznikající alkalická sůl se převede na volnou kyselinu okyselením vhodnou organickou nebo anorganickou kyselinou.

Látky I lze rovněž s výhodou přepravit kondenzací 2,4-dihydroxy-3-propylacetofenonu vzorce V

s halogenalkythio- nebo s halogenalkyloxy derivátem benzoové nebo aryloctové kyseliny obecného vzorce VI

Hal(CH₂

P (VI) , v němž P. Q, Y a n mají výše uvedený význam a Hal značí chlor, brom nebo jod.

Látky I, včetně farmaceuticky nezávadných solí s anorganickými nebo organickými bázemi, které jsou předmětem vynálezu, se vyznačuji významnou účinností v inhibici biosyntézy leukotrienů a rovněž mají značnou afinitu k vazebným místům leukotrienových receptorú, především leukotrieny LT B₄ a LT . Kombinace těchto

-3CZ 281130 B6 efektů je důležitým předpokladem pro jejich protizánětlivou a antiastmatickou účinnost ve farmaceutických přípravcích, které jsou dalším předmětem vynálezu. Současně se tyto látky vyznačují nízkou toxicitou včetně absence ulcerogenního efektu. Lze je používat k přípravě terapeutických kompozic, které mohou obsahovat účinnou látku ve směsi s farmaceuticky vhodnými přísadami, tekutými nebo tuhými, které jsou obvyklé při výrobě lékových forem. Zmíněné biologické účinnosti látek I byly hodnoceny v následujících testech.

Inhibice tvorby LT B₄ ex vivo

K hodnocení byla použita značně modifikovaná metoda (Palmer R.M.J., Salmon J. A.: Immunology 50, 65 (1983), při niž byl použit jiný zdroj buněk.

Krysím samicím Wistar se intrapleurálně aplikuje 1 ml teplem inaktivovaného krysího sera. Za 4 h se krysy usmrtí a exudát se odtáhne. Naředí se pufrem balanced HEPES v poměru 1:1 a 5 min se centrifuguje při 150 g. Poté se buňky promyji stejným objemem 0,87% ledového chloridu amonného a opět se centrifugují za stejných podmínek. Resuspendují se ve stejném objemu pufru a opét centrifugují. Postup se opakuje 2-3 krát. Změří se koncentrace buněk a pufrem upraví na hodnotu 10 milionů buněk/ml.

Buňky se nechají ekvilibrovat 15 minut při 37 °C. Ke stanoveni se pipetuje vždy 450 μΐ suspenze buněk k 50 μΐ roztoku zkoumaných látek. Vzorek pouze s pufrem slouží k zjištění neovlivněné syntézy, vzorek se 100 μg NDGA/ml k její úplné inhibici. Inkubace probíhá 15 min při 37 ’C. Poté se přidá 50 μΐ roztoku Ca ionoforu A 23187 na výslednou koncentraci 0,5 μg/ml a inkubace pokračuje dalších 15 min. Reakce je ukončena jednominutovou centrifugací při 2000 g. Odebere se 500 μΐ suspernatantu na stanoveni LT B₄. Obsah LT B₄ ve vzorcích se stanoví RIA kitem firmy Amersham. Ovlivněni vazby na LT B₄ receptor

Bylo použito metody, vycházející z práce (Cheng J.B. a spol.: J. Pharm. Exp. Ther. 236, 126 (1986) s malými úpravami. Ze samců morčat byly vyjmuty sleziny a běžným způsobem z nich připravena membránová frakce. 2 mg membrán (v přepočtu na vlhkou tkáň) byly inkubovány s 0,3 nM ³H LT B4 po dobu 30 min při 25 °C v inkubační směsi o objemu 100 μΐ. Nespecifická vazba je určena v přítomnosti 0,1 μΜ LT B4. Membrány byly filtrovány přes filtr Whatman GF/C, třikrát promyty pufrem, radioaktivita změřena kapalně scintilační spektrometrii a určena specifická vazba ³H LT B4 na receptor. Ovlivněni vazby na LT D₄ receptor

Bylo použito metody, vycházející z práce (Bruns R.F. a spol.: Life Sci. 33, 645 (1983). Ze samců morčat byly vyjmuty plíce a běžným způsobem z nich připravena membránová frakce. 4 mg membrán

O (v přepočtu na vlhkou tkáň) byly inkubovány s 0,4 nM H LT D₄ po dobu 60 min při 25 ³C v inkubační směsi o celkovém objemu 100 μΐ. Nespecifická vazba je určena v přítomnosti 0,1 μΜ LT D₄. Membrány byly zpracovány stejné jako v předchozím testu a specifická vazba

-4CZ 281130 B6

H LT D₄ na receptor stanovena změřením radioaktivity kapalně scintilační spektrometrii.

Inhibice carrageeninového edému (Winter J.: Proč.Soc.Exptl.Biol.Med. 111, 544 (1962) byla hodnocena vyvoláním edému injekci 0,5% roztoku carrageeninu u krys Wistar Han. Testované látky byly podány p.o. v jedné dávce v suspenzi s arabskou gumou 1 hod před vyvoláním edému. Objem edému byl měřen volumometrem (Ugo Basile) v intervalech 1.5, 3, 4.5 a 6 hod po injekci carrageeninu. Efekt byl vyjádřen inhibicí edému ve srovnáni s neléčenou kontrolní skupinou. Každá skupina obsahovala minimálně 6 zvířat.

Inhibice experimentální pleuritidy (Hidaka T.: J.Pharm.Pharmacol. 38, 242 (1986) byla hodnocena ve skupině krysích samic Wistar Han, jimž byl intrapleurální injekcí vpraven 0,5% carrageenin ve fyziologickém roztoku. Testované látky byly podány p.o. v jedné dávce v suspenzi s arabskou gumou 1 hod před injekcí carrageeninu. Po 4 hod byla zvířata zabita, exudát s pleurálni dutiny shromážděn a změřen jeho objem. Buněčnost a obsah buněk byly stanoveny pomoci počítače buněk zn. Sysmex v porovnáni s neléčenou kontrolní skupinou.

Inhibice ušního edému (Opas E.E. a spol.: J. Invest. Dermatol. 84, 253 (1985), vyvolaného u myších samců aplikací kyseliny arachidonové v dávce 2 mg na jedno ucho (ve formě roztoku 100 mg v 1 ml acetonu). Testované látky byly podány 1 hod před vyvoláním edému. Po 1 hod byla zvířata zabita a stanoven stupeň hyperemie ušního boltce a jeho váha ve srovnání s kontrolou.

Inhibice alergického bronchospasmu indukovaného LT D₄ byla hodnocena modifikovanou metodou (Kreutner W. a spol.: Agents and Actions 28, 173 (1989), při níž byla bronchokonstrikční odpověď vyvolána u morčat aplikací 1 |j.g/kg LT D₄ i.v. Zvířata byla předléčena indometacinem, mepyraminem a propranololem a testovaná látka aplikována v dávkách 10, 30 a 100 mg/kg. p.o. 5 min před podáním LT D₄. Účinek vyjádřen % inhibice bronchospasmu ve srovnáni s kontrolní neléčenou skupinou.

Výsledky hodnoceni vybraných látek v uvedených testech jsou shrnuty v tabulkách I, II a III. Řada látek, které jsou předmětem vynálezu, nejen inhibuje 5-lipoxygenasu, ale současně má afinitu k vazebným místům leukotrienů B₄ a D₄. Dichotomní charakter působeni těchto látek na biosyntézu i biologickou funkci leukotrienů se projevuje jejich protizánětlivým i antiastmatickým efektem.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady vynález dostatečně ilustrují, ale nijak jej neomezuji.

Příklad 1: 4-(4-Brombutoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon

39,0 g (0,2 mol) 3-propyl-2,4-dihydroxyacetofenonu se po rozpuštění ve 230 ml acetonu přidá za mícháni během 2,5 h do vroucí směsi 172,4 g (0,8 mol) 1,4-dibrombutanu, 3,0 g (0,02 mol) jodidu draselného a 28,0 g (0,2 mol) bezvodého uhličitanu draselného v

-5CZ 281130 B6

390 ml acetonu. Ve varu se pokračuje dalších 9,5 h. Poté se aceton odpaří ve vakuu a při cca 70 °C/1,33 kPa se oddestiluje přebytečný 1,4-dibrombutan. Zbytek (který ochlazením pod 0 °C tuhne) se podrobí vakuové destilaci, jako produkt se jímá frakce s t.v. 175-180 °C/40 Pa. Získá se 57,8 g (87,0 %) žádané látky, která je dle GLC 95% čistoty; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(O) 12,78 s, CH₃(CO) 2,58 s; CH₂(O) 4,08 t, CH₂(Br) 3,50 t.

Příklad 2: 4-(3-Chlorpropoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon

15,5 g (0,08 mol) 3-propyl-2,4-dihydroxyacetofenonu v 80 ml acetonu se zvolna přidá k vroucí směsi 50,4 g (0,32 mol) l-chlor-3-brompropanu, 11,1 g (0,08 mol) bezvodého uhličitanu draselného a 1,2 g (0,008 mol) jodidu draselného v 70 ml acetonu. Po celkem 5 h varu se směs ochladí na 20 C a za míchání vlije do 300 ml ledové vody. Vyloučený olej se extrahuje do dichlormethanu, po vysušení chloridem vápenatým se dichlormethan odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí za varu v minimálním množství 2-propanolu, zfiltruje s aktivním uhlím a z filtrátu se po ochlazení vyloučí krystalický produkt. Po filtraci, promytí 2-propanolem a vysušení se získá 14,6 g (67,4 %) produktu s t.t. 39-41 ’C, jednotného dle GLC. Pro C₁₄H₁₉C1O₃ (270,75) vypočteno: 62,10 % C, 7,07 % H; 13,10 % Cl; nalezeno: 62,36 % C; 7,40 % Η;, 12,82 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(O) 12,76 s; CH₃(CO) 2,58 s; CH₂(O) 4,10 t; CH₂(C1) 3,77 t.

Přiklad 3: 4-(2-Chlorethoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon

Směs 54,7 g (0,23 mol) 2-chlorethyltosylátu, 45,3 g (0,23 mol) 2,4-dihydroxy-3-propylacetofenonu, 32,0 g bezvodého uhličitanu draselného a 3,5 g (0,023 mol) jodidu draselného ve 300 ml acetonu se zahřívá 16 h k varu za míchání. Po ochlazeni na 20 C se odfiltruje tuhý podíl a filtrát se odpaří k suchu. Zbytek se rozpustí ve 400 ml dichlormethanu a roztok se promyje 100 ml 2% hydroxidu sodného a 2x 100 ml vody. Po vysušeni síranem hořečnatým se roztok zahustí ve vakuu na krystalický zbytek. Surový produkt se krystaluje z methanolu a získá se 21,0 g (35,6 %) produktu s t.t. 72 - 73,5 °C, jednotného dle GLC. Pro ^C13^H17^C^°3 (256,73) vypočteno: 60,81 % C; 6,67 % H; 13,81 % Cl; nalezeno: 60,94 % C; 6,72 % H; 13,80 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(O) 12,75 s; CH₃(CO) 2,59 s; CH₂(O) 4,30 t; CH₂(C1) 3,84 t.

Příklad 4: 4-(3-Epoxypropoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon

Do roztoku 19,4 g (0,1 mol) 2,4-dihydroxy-3-propylacetofenonu ve 100 ml 2-butanonu se přidá 20,7 g (0,15 mol) bezvodého uhličitanu draselného a poté během 15 min 27,8 g (0,3 mol) epichlorhydrinu v 30 ml 2-butanonu. Po 10 h zahříváni k varu se odfiltruje nerozpuštěný podíl a filtrát se odpaří ve vakuu. Částečné krystalický zbytek se přelije 50 ml vody a 100 ml chloroformu, organická vrstva se po protřepání oddělí a vodná se promy

-6CZ 281130 B6 je 100 ml chloroformu. Spojené extrakty se po vysušení síranem horečnatým odpaří ve vakuu a zbytek se čistí krystalizací z 25 ml

2-propanolu. Získá se 14,5 g (62,0 %) žádané látky s t.t. 54-56,5 °C o čistotě (dle GLC 98,0) % ; ^XH-NMR (C²HC1₃): H(O) 12,75 s; CH₃ (CO) 2,55 s; CH₂(O) 4,10 t; CH₂(epoxy) 3,77 t.

Přiklad 5: 3-(-3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propylthio)benzoová kyselina

Ke směsi 6,7 g (0,026 mol) 4-(3-chlorpropoxy(-2-hydroxy-3-propylacetofenonu, 7,2 g (0,052 mol) bezvodého uhličitanu draselného a 0,39 g jodidu draselného v 50 ml 2-butanonu se přidá roztok 4,0 g (0,026 mol) 3-merkaptobenzoové kyseliny v atmosféře dusíku. Reakční směs se zahřívá 24 h za míchání k varu, poté se rozpouštědlo odpaří a kašovitý zbytek se rozpustí ve 100 ml vody. Zakalený roztok se po filtraci s aktivním uhlím okyselí za chlazeni v ledové lázni kyselinou chlorovodíkovou zředěnou 1:1. Krystalizací surového produktu z methanolu se získá 7,3 g (73,0 %) žádané látky s t.t. 136-138 ’C. Pro ^C21^H24°5^S (³⁸⁸z⁴⁷) vypočteno:

64,92 % C; 6,83 % H; 8,25 % S; nalezeno: 64,95 % C; 6,48 % H; 7,94 % S; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(0) 12,86 s; CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(O)

4,17 t; CH₂(S) 3,22 t.

Obdobným způsobem jako v přikladu 5 byly připraveny:

Příklad 6: 2-(3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propylthio)benzoová kyselina připravena v 41,0 % výtěžku s t.t. 161-163 ’C (po krystalizací z methanolu). Pro ^C21^H24°5^S (388,47) vypočteno:

64,92 % C; 6,83 % H; 8,25 % S; nalezeno: 64,79 % C; 6,41 % H; 8,03 % S; ¹H-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(0) 4,22 bt; CH₂(S) 3,12 bt.

Příklad 7: 2-(2-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)ethylthio)benzoová kyselina připravena v 45,2% výtěžku s t.t. 153-155 C (po krystalizací z kyseliny octové). Pro ^c20^H22°5^s (³⁷⁴/⁴⁴) vypočteno: 64,15 % C; 5,92 % H; 8,56 % S; nalezeno: 63,93 % C;

5,88 % H; 8,62 % S; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(0) 12,85 s; CH₃(CO) 2,58 s; CH₂(O) 4,36 bt; CH₂(S) 3,42 bt.

Příklad 8: 2-( 4-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butylthio)benzoová kyselina připravena v 54,5% výtěžku s t.t. 111-113 C (po krystalizací z chloroformu). Pro ^C22^H26°5^S (402,49) vypočteno: 65,64 % C; 6,51 % H; 7,97 % S; nalezeno: 65,39 % C; 6,51 % H;

7,97 % S; ¹H-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(O) 4,08 bt; CH₂(S) 3,05 bt.

Přiklad 9: 3-(4-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butylthio)benzoová kyselina připravena v 47,1% výtěžku s t.t. 113-115 °C

-7CZ 281130 B6 (po krystalizaci z methanolu). Pro C₂₂ ^H26^O5^S (402,49) vypočteno:

65,64 % C; 6,51 % H; 7,97 % S; nalezeno: 65,81 % C; 6,72 % H;

7,33 % S; ^XH-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,55 s; CH₂(O) 4,06 bt; CH₂(S) 3,10 bt.

Přiklad 10: 4-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)-3-chlorfenyloctan methylnatý

K roztoku 7,1 g (0,035 molu) 3-chlor-4-hydroxyfenyloctanu methylnatého v 50 ml 2-butanonu se přidá 0,32 g jodidu draselného a 9,7 g (0,07 molu) bezvodého uhličitanu draselného a k suspenzi se za mícháni zvolna přidá roztok 12,5 g (0,035 molu) 4-(4-brombutoxy)-2-hydroxy-3-propylacetofenonu v 50 ml butanonu. Směs se poté zahřívá 24 h k varu. Po ochlazení se nerozpuštěný podíl odfiltruje, na filtru promyje acetonem a filtrát se odpaří k suchu. Zbytek se rozpustí ve 120 ml dichlormethanu, roztok se promyje 2x 50 ml vody a po vysušení síranem hořečnatým se rozpouštědlo odpaří ve vakuu. Olejovitý zbytek stáním zkrystaluje na surový produkt (ve výtěžku 93,0 %) s t.t. 67,5-71,5 “C, přímo použitelný na přípravu odpovídající kyseliny. Krystalizaci z methanolu se získá produkt s t.t. 71-72,5 ’C ve výtěžku 58,6 %. Pro ^C24^H29^C1O6 (⁴⁴⁸/⁹⁴) vypočteno: 64,20 % C; 6,51 % H; 7,90 % Cl; nalezeno: 64,36 % C; 6,63 % H; 8,39 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(O)

12,76 s; CH₃(CO) 2,58 s; CH₂(O) 4,12 bm; CH₂(COO) 3,53 s.

Obdobným způsobem jako v příkladu 10 byly připraveny:

Přiklad 11: 4-(3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propoxy)-3-chlorfenyloctan methylnatý připraven v surovém stavu ve výtěžku

82,5 %, po krystalizaci z 2-propanolu získán produkt s t.t.

75-76,5 ’C v 58,6% výtěžku. Pro C₂₃H₂₇C1O₆ (434,91): vypočteno: 63,52 % C; 6,26 % H; 8,15 % Cl; nalezeno: 63,41 % C; 6,40 % H;

8,13 % Cl; ^XH-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(O) 4,20 t; 4,22 t; CH₂(COO) 3,54 s.

Příklad 12: 4-(3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propoxy)fenyloctan methylnatý připraven v surovém stavu ve výtěžku 91,5 %, po krystalizaci z methanolu získán produkt s t.t. 64-65,5 °C v 48,0% výtěžku. Pro ^C23^H28°6 (⁴⁰°z⁴⁵) vypočteno: 68,98 % C;

7,05 % H; nalezeno: 68,85 % C; 7,18 % H; ¹H-NMR (C²HC1₃):

CH₃(CO) 2,55 s; CH₂(O) 4,16 t; 4,22 t; CH₂(COO) 3,56 s.

Přiklad 13: 4-(2-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)ethoxy)-3-chlorfenyloctan methylnatý připraven v surovém stavu ve výtěžku

85,7 %, po krystalizaci z 2-propanolu získán produkt s t.t. 90-91,5 ³C. Pro C₂₂H₂₅C1O₆ (420,89) vypočteno: 62,78 % C; 5,99 % H; 8,42 % Cl; nalezeno: 62,87 % C; 6,09 % H; 8,51 % Cl; ^XH-NMR

-8CZ 281130 B6 (C²HC1₃): H(O) 12,85 s; CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(O) 4,40 s; CH₂(COO) 3,75 s.

Příklad 14: 4-(4-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)fenyloctová kyselina

Do baňky se předloží 11,0 g (0,04 mol) bezvodého uhličitanu draselného, 0,6 g jodidu sodného a 17,3 g (0,08 mol) 1,4-dibrombutanu v 35 ml 2-butanonu. Směs se zahřeje k varu a připustí se roztok 3,3 g (0,02 mol) 4-hydroxyfenyloctanu methylnatého v 35 ml

2-butanonu. Poté se pokračuje ve varu celkem 14 h, po ochlazení se oddělí nerozpuštěný podíl filtrací a filtrát se ve vakuu zahustí na olejovitý zbytek, který ochlazením krystaluje. Získá se

5,7 g (95 % th.) surového 4-(4-brombutoxy)fenyloctanu methylnatého, který je dle GLC 95% čistoty, -Lh-NMR (C²HC1₃): CH₃(ester) 3,68 s; CH₂(O) 3,98 d; CH₂ (Br) 3,48 t. Pro C₁₃H_1?BrO₃ (301,2) vypočteno: 26,53 % Br; nalezeno: 26,71 % Br.

5,5 g (0,018 mol) předchozího produktu se rozpustí v 50 ml 2-butanonu a roztok se přidá ke směsi 3,5 g (0,018 mol) 3-propyl-2,4-dihydroxyacetofenonu, 0,16 g jodidu sodného a 5,0 g bezvodého uhličitanu draselného v 50 ml 2-butanonu. Po 24 h varu za míchání se po ochlazeni z reakční směsi odfiltruje nerozpuštěný podíl, na filtru promyje acetonem a filtrát se odpaří k suchu. Zbytek se rozpustí ve 100 ml dichlormethanu, promyje 50 ml 2% kyselého uhličitanu sodného, 50 ml vody a po vysušeni síranem horečnatým se odpaří na olejovitý zbytek. Získá se 6,4 g (86,3 % th. ) 4-(4-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)fenyloctanu methylnatého , (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,54 s; CH₂ (0) 4,05 bm; CH₂(COO)

3,55 s.

Předchozí ester (6,0 g, 0,014 mol) se rozpustí v 35 ml methanolu a k roztoku se přidá roztok 3,9 g (0,07 mol) hydroxidu draselného ve směsi 55 ml methanolu a 15 ml vody. Směs se zahřívá za mícháni 4 h k varu a poté se ochladí na 20 °C pomalu se vlije za mícháni do 170 ml ledové vody. Zakalený roztok se filtruje s aktivním uhlím a filtrát okyselí kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Vyloučená sraženina se zfiltruje, promyje vodou a po vysušeni krystaluje z nitromethanu. Získá se 3,3 g (56,4 %) žádané kyseliny s t.t. 74-76 ’C. Pro ^C23^H28°6^H2° (418,46) vypočteno: 66,02 % C;

7,22 % H; nalezeno: 66,12 % C; 7,08 % H; ¹H-NMR (C²HC1₃):

CH₃(CO) 2,54 s; CH₂(O) 4,02 bm; CH₂(COOH) 3,55 s.

Obdobným způsobem jako v přikladu 14 byly připraveny:

Přiklad 15: 4-(4-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)-3-chlorfenyloctová kyselina přepravena v 56,4% výtěžku (hydrolýza) s t.t. 108 - 109 ’C (po krystalizaci z methanolu). Pro ^C23^H27^C1O6-^CH3^0H (466,95) vypočteno: 61,73 % C; 6,69 % H; 7,59 % Cl; nalezeno: 62,02 % C; 6,60 % H; 7,92 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(0) 12,72 s; CH₃(CO) 2,54 s; CH₂(O) 4,10 m; CH₂(COOH) 3,55 s.

-9CZ 281130 B6

Přiklad 16: 4-(2-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)ethoxy)-3-chlorfenyloctová kyselina připravena v 70,5% výtěžku s t.t. 128130 °C (po krystalizaci z méthanolu). Pro ^c2i^H23^cl06 (406,85) vypočteno: 62,00 % C; 5,70 % H; 8,71 % Cl; nalezeno: 62,16 % C;

5,92 % H; 8,61 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,58 s; CH₂(O)

4,41 s; CH₂(COOH) 3,58 s.

Příklad 17: 4-(3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propoxy-3-chlorfenyloctová kyselina připravena v 49,0% výtěžku s t.t. 123124 ’C (po krystalizaci z 2-propanolu). Pro ^C22^H25^C1°6 (⁴²°,⁸⁸) vypočteno: 62,78 % C; 5,99 % H; 8,43 % Cl; nalezeno: 62,49 % C; 6,03 % H; 8,47 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): CH₃(CO) 2,56 s; CH₂(O) 4,23 t; 4,28 t; CH₂(COOH) 3,56 s.

Přiklad 18: 4-(3-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propoxyfenyloctová kyselina připravena v 75,3% výtěžku s t.t. 110-112 C (po krystalizaci z méthanolu). Pro ^C22^H26°6 (²⁸⁶,⁴⁴) vypočteno: 68,38 % C; 6,78 % H; nalezeno: 68,21 % C; 6,73 % H; ^XH-NMR (C²HC1₃): H(0) 12,73 s; CH₃(C0) 2,55 s; CH₂(0) 4,16 t; 4,22 t; CH₂(COOH) 3,58 s.

Příklad 19: 2-(3'-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)-2'hydroxypropylthio)benzoová kyselina

Směs 2,5 g (0,01 mol) 4-(3-epoxypropoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenonu a 1,54 g (0,01 mol) thiosalicylové kyseliny v 50 ml méthanolu se zahřívá 20 h k varu za mícháni. Po ochlazeni na 20 ’C se směs filtruje s aktivním uhlím a filtrát se odpaří ve vakuu na olejovitý zbytek, který stáním zkrystaluje. Krystalizaci z nitromethanu se získá žádaný produkt s t.t. 108-110 ’C v 69,3% výtěžku. Pro ^C21^H24°6^S (404,47) vypočteno: 62,35 % C; 5,98 % H;

7,93 % Cl; nalezeno: 61,79 % C; 5,95 % H; 7,66 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(O) arom. 12,80 s; H(0) alif. 6,42 d; CH₃(CO) 2,57 s; CH₂(O) + CH(OH) 4,15 m; CH₂(S) 3,19 m.

Přiklad 20: 3-(3'-(4-Acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)-2’hydroxypropylthio)benzoová kyselina připravena stejným způsobem jako v příkladu 19 v 52,2% výtěžku s t.t. 132-134 °C (po dvojnásobné krystalizaci z nitromethanu). Pro ^C21^H24°6^S (404,47) vypočteno: 62,35 % C; 5,98 % H; 7,93 % Cl; nalezeno: 61,91 % C;

5,92 % H; 7,72 % Cl; ¹H-NMR (C²HC1₃): H(0) arom. 12,72 s; H(0) alif. 6,41 d; CH₃(CO) 2,55 s; CH₂(O) + CH(OH) 4,12 bs; CH₂(S)

3,26 bt.

-10CZ 281130 B6

Příklad 21: Příprava tvrdých želatinových tobolek

Želatinové tobolky se připraví ze směsi následujícího složení :

účinná látka	15 dílu
amylum maydis	4 díly
sacharum lactis	37 dílů
cellulosum microcryst.	45 dílů
silicii oxydum	0,3 dílu
magnesii stearas	0,7 dílu

Příklad 22:

Příprava obduktet

Z předchozí směsi připravená čočkovitá jádra se obalí vodnou lakovou disperzí o složeni:

hypromellosům	67,13	dílu
Macrogolum 6000	9,7	dílu
pigment	2,23	dílu
protipěnová přísada	0,87	dílu
aqua purificata	q.s.

Tabulka I Biologické aktivity in vitro

Čísle Z Y ? Q Inhibice Ξ-LO Inhibice vazby LTB₄ Inhibice vazby LTD₄

	*	inh/dávka^a	^K50^b	i inh/dávka^c	^IC50^b	inh/dávka^c	^Κ50^!
1	(^C32>2	S	=	2-COOH	97/10	2.60	57/10	14.0	57/100	4.3
2	(CH₂)₃	S		2-COOH	100/10	0.42	64/10	12.0	78/100	24.0
3	1¾	S	2	3-COOH	79/30	0.75	56/20	16.0	94/190	3.5
4	(C3₂)₃	S	q	3-COOH	100/10	1.20	98/20	0.9	96/100	2.5
5	(C3₂)₄	S	Ξ	3-COOH	96/30	0.35	53/20	7.3	100/100	4.0
6	()3	0	·»	4-C3₂COOH	100/30	0.39	35/20	3.8	98/100	3.9
7	(úh₂)₄	0	3	4-C3₂COOH	95/30	0.62	34/20	-	48/100	9.5
8	<^CS2>2	0	2-Cl	4-C3₂COOCH₃	98/10	0.23	11/10	-	65/100	19.0
9	<^C32>2	0	2-Cl	4-C3₂COOH	100/30	0.55	32/20	-	95/100	3.2
10	(^C32>4	0	2-Cl	4-C3₂COOH	100/30	0.46	58/20	11.0	100/100	8.1
11	(Ch₂)₄	0	2-C1	4-C3₂COOCB₃	70/100	-	15/100	-	49/100	-
12	CH₂CH(OH)C3₂	S	3	2-COOH	95/30	0.86	-	28.0	-	-
13	LY 171,883				83/10	5.30	52/100	81.0	92/100	5.8
14	Piroxicam				84/100	19.6	-		-

-11CZ 281130 B6 ^aDávka v mg; ^b v μΜ; ^cdávka v μΜ

Tabulka II Protizánětlivá účinnost in vivo

Číslo	Carrag. edém^a (% inh.)^b	Pleuritis (% inh.)^a Obj·exud.Poč.buněk/ Buněčnost	Ušní zánět (% ing.)^a Edém Hyperemie
1	22	12	7ⁿ/2ⁿ	10	4ⁿ
2	6ⁿ	17	28/17ⁿ	8	₃n
3	30	34	37/3ⁿ	25	0
4	14	20	20/3ⁿ	9	₇n
5	25	38	33/9ⁿ	18	0
6	56	32	54/33	18	0
7	39	23	17/7ⁿ	?n	5ⁿ
8	26	18	36/32	0	0
9	21	9ⁿ	15/8ⁿ	16	2ⁿ
10	36	20	41/26	3ⁿ	3ⁿ
11	34	25	26/8ⁿ	5ⁿ	2ⁿ
12	34	0	37/38	10	5ⁿ
14^c	68	54	41/13	22	68

^aLátky byly hodnoceny v dávce 100 mg/kg; ^bn značí statisticky nesignifikatní (hladina významnosti a > 0.05); ^cpiroxicam hodnocen v dávce 10 mg/kg.

-12CZ 281130 B6

Tabulka III Inhibice bronchospasmu morčat

Číslo	Dávka (mg/kg)	% inhibice ^a,b
3	10	0
	30	24 (0-73)
	100	8 (0-15)
4	30	15 (5-25)
	100	8 (0-15)
5	10	23
	30	75 (58-85)
	100	95 (90-100)
6	30	78 (68-100)
	40	95 (90-100)
9	30	92 (83-100)
	100	74 (34-94)
10	10	88 (78-97)
	30	83 (48-100)
	100	85 (60-100)
13^c	30	92 (85-100)

^a% inhibice bronchospasmu vypočteno:

ZiP_t(LTD₄) -Zp_t(X) % inh = ------------------------ x 100

A p_t(LTD₄) kde A p.£ (LTD₄) je vzestup tracheálního tlaku po LTD₄, Λ p^.(X) je vzestup tracheálního tlaku po podáni látky; ^v závorkách jsou uvedeny meze experimentálních hodnot; ^cstandard LY 171,883

Claims

1. Deriváty 4-alkoxy-2-hydroxy-3-propylacetofenonu vzorce I v němž Y znáči O nebo S,

Q značí CH₂COOR nebo COOR, kde R je vodík nebo nižší alkyl s 1 až 3 atomy uhlíku, po případě kation alkalického kovu nebo organická báze, pokud P je vodík nebo halogen, pak Z značí (CH₂)_n, kde n = 2 až 4, pokud P je vodík, může Z značit rovněž ch₂ch(oh)ch₂.

2. Sloučeniny podle nároku 1, vybrané ze skupiny, zahrnující:

4-(4-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propoxy)fenyloctovou kyselinu,

4-(4-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)-3-chlorfenyloctovou kyselinu,

3- (4-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butylthio)benzoovou kyselinu,

2-(3-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)propylthio)benzoovou kyselinu,

4- (2-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)ethoxy)-3-chlorfenyloctovou kyselinu,

2-(3'-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)-2'-hydroxypropylthio)benzoovou kyselinu,

4-(4-(4-acetyl-3-hydroxy-2-propylfenyloxy)butoxy)-3-chlorfenyloctan methylnatý.

3. Způsob přípravy sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že 4-(«/-halogenalkoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon obecného vzorce II (II) , v němž n = 2 až 4a

Hal značí chlor, brom nebo jod, nebo

4-(3-epoxypropoxy)-3-propyl-2-hydroxyacetofenon vzorce III

-14CZ 281130 B6 (III) , reaguje s derivátem merkaptobenzoové nebo hydroxyoctové kyseliny obecného vzorce IV j?

v némž P, Q a Y má stejný, význam, jako v nároku 1.

4. Způsob přípravy sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že 2,4-dihydroxy-3-propylacetofenon vzorce v reaguje s halogenalkoxy- nebo zoové nebo aryloctové kyseliny halogenalkylthio derivátem benobecného vzorce VI kde P, Q a Y má stejný význam, jako v nároku 1.

(VI) ,

-15CZ 281130 B6

5. Farmaceutický přípravek s protizánétlivou účinnosti podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou podstatnou složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ve směsi s farmaceuticky vhodnými přísadami.

6. Farmaceutický přípravek s antiastmatickou účinností podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou podstatnou složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ve směsi s farmaceuticky vhodnými přísadami.