CZ2016804A3 - Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití - Google Patents
Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2016804A3 CZ2016804A3 CZ2016-804A CZ2016804A CZ2016804A3 CZ 2016804 A3 CZ2016804 A3 CZ 2016804A3 CZ 2016804 A CZ2016804 A CZ 2016804A CZ 2016804 A3 CZ2016804 A3 CZ 2016804A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- oxycellulose
- docetaxel
- taxol derivative
- matrix
- complex
- Prior art date
Links
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 150000004579 taxol derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 33
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 claims abstract description 115
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 claims abstract description 115
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims abstract description 32
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims abstract description 28
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 51
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 51
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims description 16
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 14
- 229920002201 Oxidized cellulose Polymers 0.000 claims description 13
- 229940107304 oxidized cellulose Drugs 0.000 claims description 13
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 10
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 claims description 10
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 claims description 10
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 9
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 claims description 8
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000004753 textile Substances 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 claims 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 abstract description 14
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 abstract description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 47
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 7
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 241001471187 Patu Species 0.000 description 5
- 238000001237 Raman spectrum Methods 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 5
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 5
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 4
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 4
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 3
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- -1 naphthifine Chemical compound 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(diethylamino)-3-(diethyliminiumyl)-3h-xanthen-9-yl]-5-sulfobenzene-1-sulfonate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000002122 magnetic nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- MQHLMHIZUIDKOO-OKZBNKHCSA-N (2R,6S)-2,6-dimethyl-4-[(2S)-2-methyl-3-[4-(2-methylbutan-2-yl)phenyl]propyl]morpholine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)CC)=CC=C1C[C@H](C)CN1C[C@@H](C)O[C@@H](C)C1 MQHLMHIZUIDKOO-OKZBNKHCSA-N 0.000 description 1
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000014061 Extranodal Extension Diseases 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123457 Free radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010091175 Matriptase Proteins 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010029098 Neoplasm skin Diseases 0.000 description 1
- 208000010195 Onychomycosis Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000497386 Silveira Species 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 102100037942 Suppressor of tumorigenicity 14 protein Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- 208000031737 Tissue Adhesions Diseases 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- YADZBEISHVCBSJ-UHFFFAOYSA-N [I].OCC(O)CO Chemical compound [I].OCC(O)CO YADZBEISHVCBSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 1
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960003204 amorolfine Drugs 0.000 description 1
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002927 anti-mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000011173 biocomposite Substances 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229960002962 butenafine Drugs 0.000 description 1
- ABJKWBDEJIDSJZ-UHFFFAOYSA-N butenafine Chemical compound C=1C=CC2=CC=CC=C2C=1CN(C)CC1=CC=C(C(C)(C)C)C=C1 ABJKWBDEJIDSJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 230000005773 cancer-related death Effects 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 1
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 102000006815 folate receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005243 folate receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 239000000320 mechanical mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000003232 mucoadhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical class [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001855 preneoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108010031970 prostasin Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229960002722 terbinafine Drugs 0.000 description 1
- DOMXUEMWDBAQBQ-WEVVVXLNSA-N terbinafine Chemical compound C1=CC=C2C(CN(C\C=C\C#CC(C)(C)C)C)=CC=CC2=C1 DOMXUEMWDBAQBQ-WEVVVXLNSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 201000005882 tinea unguium Diseases 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 208000010531 varicella zoster infection Diseases 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Řešení se týká supramolekulárního komplexu oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu, který obsahuje 5 až 30 % hm. taxolového derivátu, kterým je s výhodou docetaxel, nekovalentně vázaného na oxycelulózovou matrici, která je tvořena oxidovanými formami celulózy s vysokými terapeutickými účinky při topických vnitrotělových aplikacích do reziduální nádorové tkáně po chirurgickém odstranění.
Description
Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití s postupným
Oblast techniky
Vynález se týká nových supramolekulámích komplexů oxycelulózových matric s protinádorovými léčivy na bázi taxolových sloučenin a jejich pooperační vnitrotělové aplikace pro eliminaci reziduálních nádorových buněk/tkáně po chirurgickém zákroku.
Předložená metodika eliminuje riziko jak metastáz^tak opakovaného růstu nádoru v původním místě.
Stav techniky
Komplikace při chirurgickém odstranění solidních tumorů jsou jak metastáze (pozdní diagnosa), tak neúplné odstranění tumoru. Obě vedou k následným komplikacím a často končí úmrtím pacienta. Obvyklá následná terapie zahrnuje ozařování, fotodynamická^ terapie, cytostatickou léčbou s použitím jiných léčiv.
Metastázy, tedy šíření nemocných buněk z nádoru do celého těla, mohou podle odhadů až za 90 procent všech úmrtí spojených s rakovinou. Cílem je tak najít cestu, jak jejich šíření po těle omezit nebo mu zabránit úplně. Nová ložiska nádorů na dalších místech těla (často to bývají například plíce, játra nebo kosti) mají obvykle dvě nepříjemné vlastnosti - bývají agresivnější (rychleji rostou) a jsou hůře léčitelné.
V závislosti na typu a stadiu karcinomu obecně léčíme chirurgicky, pomocí chemoterapie nebo radioterapie. U každého pacienta připadá v úvahu jedna nebo kombinace více uvedených léčebných metod. Chemoterapie se používá jako systémová léčba, která postihuje nádorové buňky v celém těle a je možno ji aplikovat po chirurgickém odstranění nádorové tkáně za účelem zabránění vzniku metastáz. Tato léčba se nazývá doplňková neboli adjuvantní. Chemoterapii používáme také ke zmírnění příznaků nemoci, pokud nelze nádor chirurgicky odstranit, a ke kontrole jeho růstu. Chemoterapii podáváme v cyklech, mezi jednotlivými sériemi následuje různě dlouhé období na zotavení.
< » · » ♦ 9 « 4 · ·· · ♦ ··»· · · · * »··· » · · · ·
4 4 · · · · » · ·· « ♦ · · · · · · · ·
V současné době byla vyvinuta řada účinných protinádorových léčiv. Nicméně velmi vážný problém jejich klinické aplikace jsou velmi silné nepříznivé vedlejší účinky. Jednou z možností| jak daný problém řešit) je jejich formulace pomocí vhodných excipientů. Tato strategie by mohla potencionálně zlepšit terapeutické vlastnosti řady používaných protinádorových léčiv. Systémy pro cílený transport léčiv s řízeným uvolňováním a účinkem léčiva představují velmi slibné látky pro současnou farmakoterapii. Cílem jejich aplikace je dosáhnout použití správného množství léčiva, ve správném čase a na správném místě. Mají schopnost přivést léčivo v nezměněné podobě na místo jeho účinku při snížené distribuci do nežádoucích částí organizmu. Cílením léčiva na místo interakce se snižuje jeho podaná dávka a s tím nežádoucí vedlejší účinky. Vzniká tak možnost aplikace vysoce účinných léčiv, ale s velmi nízkou rozpustností, jakoú jsou taxolové deriváty (např. docetaxel)( a tudíž omezenou aplikovatelností nebo s vysokými vedlejšími účinky^ jako jsou antracykliny (např. doxorubicin) nebo platinové metalokomplexy. Docetaxel (L01CD02) a doxorubílcin (L01DB01) patří mezi velmi intenzivně studovaná léčiva pro tyto aplikace. Jejich vhodná formulace by mimo jiné umožnila jejich šetrnější podávání v případě docetaxelu a cisplatiny a podstatnou redukci kardiotoxicity doxorubicinu.
V současné době patří mezi nejvíce perspektivní excipienty pro formulaci protinádorových léčiv polysacharidové polymery) např. oxycelulóza. Aktivní látka je v nich přítomna jako disperze v polymemí matrici, nebo lépe jako komplexované léčivo polymemí matricí. Jejich V , / aplikace vede k snadnější kontrole hladiny léčiva/krvi a tím i jeho efektivnějšímu dávkovaní oproti podání volného léčiva. Na bázi polysacharidových polymerů^ včetně oxyc^úlózy byla připravena a studována celá řada slibných excipientů včetně multifukčních (někdy zvaných smart excipients). Potencionální výhoda vhodně aplikovaných polymemích excipientů( např. polysacharidových. by mohla být také snadnější kontrola vstupu léčiva do cílové nádorové buňky.
Oxidovaná celulóza (Oxycelulóza, Okcel) je známa jako vysoce slibná látka pro nejrůznější farmaceutické a medicínské aplikace. Oxycelulóza vykazuje vysokou biokompatibilitu a biodegradovatelnost za fyziologických podmínek vedoucí k netoxickým produktům. Oxycelulóza je dlouhodobě studována a používána v medicíně pro podporu krevní srážlivosti, jako prevence pro adhezi tkání po chirurgickém zákroku, pro zlepšení hojení chronickým ran, modulace imunitního systému.
9 •
9 9 *
» 9 •
9 9 »» 9
Pharmatetical and Medical (Jan Gajdziok, David Vetchý^ Oxidized Cellulose and its
Application^ Cellulose and Cellulose Derivařives Syntheses, Modification and Applications ( Nova Science Publishers, lne New York 2015; Schmidt, R., Bogan, D., Moore, J. (2001). Use of oxidized cellulose as free radical scavenger. Eurc$eaí\ Patent EI^ljl53^)18; Watt, P. W., Harvey, W., Lorimer, E., Wiseman, D. (1998). Use of oxidized cellulose and complexes thereof for chronic wound healing. Mezinárodní patentová přihláška WC^sjotfSO.; Jelínková, M., Briestenský, J., Santar, I, Říhová, B. (2002). In vitro and in vivo immunomodulatory effects of microdispersed oxidized cellulose. Int. Immunopharmacol. 2 (10), 1429-1441; Santar, I, Kiss, F., Briestenský, J. (1998). Cellulose derivatives. Mezinárodní patentová přihláška WŮ983^22; Dimitrijevich, S. D., Tatarko, M., Gracy, R. W. (1990). Biodegradation of oxidized regenerated/ cellulose. Carbohydr. Res. 195 (2), 247-256;
Dimitrijevich, S. D., Tatarko, M., Gracy, R. W., Wise, G. E., Oakford, L. X. (1990). In vivo degradation of oxidized, regenerated cellulose. Carbohydr. Res. 198 (2), 331-341; Bankéř, S. G., Kumar, V. (1995). Microfibrillated oxycellulose. !IJnlted~~Stuíes~PatFni 3;
Otterlei, M., Espvik, T, Skjak-Braek, G., Smidsrod, O. (1992) Diequatorially bound beta 1-4 polyuronates and use of same for cytokine stimulation. UnitedStates--Patentl USm 69840; Doyle P. J., Saferstein L., Lorimer E., Watt P. W. (1998). Oxidized Oligosaccharides. Mezinárodní patentová přihláška WC^)8^146; Bajerová, M., Krejčová, K, Rabišková, M., Gajdziok, J., Masteiková, R. (2009). Oxycellulose - significant characteristics in relation to its pharmaceutical and medical applications. Adv. Polym. Těch. 28(3), 199-208; Bankéř, G.
S., Kumar, V. (1998) Oxidized cellulose. ‘Umted—Štates-Patenq USf78(fl8f, (Leidgens V, Seliger C„ Jachnik B, Welz T, Leukel P„ Vollmann-Zwerenz 1, Bogdahn U, Kreutz Mj Grauer QM, Hau B Ibuprofen and Diclofenac Restrict Migration and Proliferation of Human Glioma Cells by Distinct Molecular Mechanisms. PLoS One. 2015^ pGfJ^;10(10):e0140613; Chai aÍj, Robinson AL, Chai KK Chen fyi. Ibuprofen regulates the expression and function of '* Λ JÍ» membrane-associated serine proteases prostasin and matriptase^ BMC Cancer. 2015, Ded \2$;15:1025. doi: 10.1186/sl2885-015-2039-6; da Silveira e1f1, Chassot JM, Teixeira F^J, ' v . ' * . > ’ ’Λ r
Azambuja JH, Debom G, Beira Ff, Del Pino Fkí, Lourengo A, Horn ΑΪ?, Cruz L, Spanevello $M, Braganhol E. Ketoprofen-loaded polymeric nanocapsules selectively inhibit cancer cell growth in vitro and in preclinical model of glioblastoma multiforme. Invest New Drugs. 2013 ýr r Λ *r- .‘aVI
Deč;;31 (6): 1424-35. doi: 10.1007/sl0637-013-0016-y. Epub 201 \ Sep~~2f Damnjanovic I, Najman S, Stojanovic S, Stojanovic D, Veljkovic A, Kocic H, Langerholc 1), Damnjanovic Z Pesic S. Crosstalk between possible cytostatic and antiinflammatory potential ofketoprofen in
3'
the treatment of culture of colon and cervix cancer cell linešj Bratisl Lek Listy. 2015;l 16(4):227-32)
Aplikace oxycelulózových derivátů pro cílený transport léčiv bylí popsány v jejich kombinaci s magnetickými nanočásticemi (Sivakumar, Balasubramanian; Aswathy, Ravindran Girija; Nagaoka, Yutaka; Suzuki, Masashi; Fukuda, Takahiro; Yoshida, Yasuhiko; Maekawa, Toru; Sakthikumar, Dasappan Nain Multifunctional Carboxymethyl Cellulose-Based Magnetic Nanovector as a Theragnostic Systém for Folate Receptor Targeted Chemotherapy, Imaging, and Hyperthermia against Cancer, Langmuir (2013), 29(10), 3453-3466), nebo jejich kombinaci s chitosanem a magnetickými nanočásticemi (Synthesis, characterization and in vitro assessment of the magnetic chitosan-carboxymethylcellulose biocomposite interactions with the prokaryotic and eukaryotic cells, Grumezescu, Alexandru Mihai; Andronescu, Ecaterina; Ficai, Anton; Bleotu, Coralia; Mihaiescu, Dan Eduard; Chifiriuc, Mariana Carmenfnternational Joumal of Pharmaceutics (Amsterdam, Netherlands) (2012), 436(1-2), 771-777), nebo kombinaci oxycelulózy s nanočásticemi, či její konjugáty s léčivy (Soo, B. Chia; Ting, Kang; Wu, Ben; Zhang, Ke vin Transcutaneous multimodal delivery systems comprising dissolvable microneedles PCT InfÝÁpph (2012), WO 201210^257 A2.20120802), nebo její kombinaci s chitosanem (Viieira, D. B.; Kim, V.; Petři, D. F. S.; Menck, C. F. M.;
Carmona-Ribeiro, A. M.'Edtted~By:Laudon, Matthew; Romanowicz, Bart Polymer-based u. ' delivery vehicle for cisplatin Nanotech Conference & Expo 2011: An Interdisciplinary
Integrative Fórum on Nanotechnology, Biotechnology and Microtechnology, Boston, MA, \Umied-~StateL 'June—13-L6\ 2011 (2011), 3, 382-385), nebo aplikace oxycelulózového hydrogelu pro uvolňování léčiv pro léčbu močových cest (Konorty, Marina; Hakim, Gilt Mucoadhesive thermoreversible topical hydrogels and method for treating internát cavities t
Al 20140417).
Patentový-dokumentl WO 2007147052 popisuje farmaceutickou kompozici pro topické použití tvořenou filmem z celulózy nebo jejich derivátů, obsahující biologicky aktivní činidlo v přesyceném stavu, kterým je např. terbinafin, naftifin, amorolfin, butenafin, jejich deriváty, acyklovir, nepolymemí inhibitor krystalizace - hydroxykarboxylovou kyselinu, těkavé rozpouštědlo^ Kompozice je určena pro antifugální léčbu, pro léčbu nebo prevenci varicella zoster infekce, HSV-I infekce nebo HSV-2 infekce, nebo prevenci onychomykózy.
Vynález CN 1843332 A popisuje protinádorové injekce s prodlouženým uvolňováním obsahující angiogenezní inhibitory a cytotoxická činidla, které sestávají z mikrokuliček
obsahujících protinádorové účinné látky 0,5 až 60 %, pomocné látky s prodlouženým uvolňováním 40 až 99 % jako je kyselina polymléčná; kopolymerů kyseliny polyglykolové a karboxymethylcelulózy, jod^ glycerin, dimetyikon, propylenglykol, karbomer, mannitol, sorbitol,/ povrchově aktivní látky, jeden z Tween 20, Tween 40 a Tween 80, nebo jejich
i !
Přihláška vynálezu Eljlj491|188 Al popisuje farmaceutický prostředek pro prevenci nebo A A A léčbu kožních poruch s obsahem alespoň 0,1 % účinné látky, tvořené VPA a nebo jejich solí, která obsahuje také chemoterapeutické léčivo, kterým je 5-fluorouracil| a dále obsahuje nosiče ve formě krémů, mastí, past a gelů. Přípravku má být použito pro léčbu kožních nádorů, preneoplastických kožních onemocnění, zánětů kůže a / nebo sliznice a phbteagm^.
Výběžky nádoru do okolní tkáně a jeho složitá topologie v praxi téměř znemožňují chirurgické odstranění celého nádoru. Následná chemoterapie nebo systémové podávání léčiv je často neúčinné, jelikož koncentrace léčiva v místě původního nádoru je příliš nízká.
Podstata vynálezu
Kvůli málo účinné postoperační léčbě reziduální nádorové tkáně byly vyvinuty nové postupy aplikace cytotoxického léčiva, na bázi taxolových sloučenin, nekovalentně vázaných na oxycelulózovou matrici, a to topicky přímo do rány po odstranění tumoru.
Vynález se týká nové metody topické vnitrotělové aplikace stabilních supravmolekulámích komplexů oxycelulózových matric s taxolovými deriváty - cytostatiky, jako je docetaxel a paclitaxel.
Byla vytvořena kompozice pro pooperační vnitrotělové topické aplikace sestávající z modifikované oxycelulózy s taxolovými deriváty pro eliminaci nádorové tkáně/buněk po chirurgickém zákroku. Kompozice umožňuje řízené postupné uvolňování léčiva v nádoru nebo jeho reziduí/'a tím vede k eliminaci zbytkové nádorové tkáně a zabraňuje jejímu rapidnímu nárůstu po klasickém i laparoskopickém zákroku.
Kompozice je tvořena supraxmolekulárními komplexy oxycelulózových matric s výhodou ve formě HD, HL a CaL s taxoly, s výhodou docetaxelem a paclitaxelem.
Oxycelulózová matrice CaL je prášková forma vápenaté soli oxidované celulózy, je organismem dobře snášena a rychle se vstřebává, HD je pletená verze vstřebatelného hemostatického materiálu oxidované celulózy v textilní formě a HL je lintrová kyselá forma oxidované celulózy ve formě prášku^ který je nerozpustný ve vodě. V lidském těle se oxycelulózové matrice vstřebávají bez jakýchkoli zbytků, jsou biologicky odbouratelné, v průběhu rozkladu vznikají netoxické produkty a jsou plně biokompatibilní. Díky nízkému pH působí antibakteriálně. Pomáhají s regenerací tkáně, tedy i se zvýšením léčebných účinků.
Docetaxel a paclitaxel je rostlinný alkaloid ze skupiny taxanů, používaných v medicíně jako cytostatikum. Jedná se o anti-mitotické léčivo pro chemoterapii používané zejména pro léčbu rakoviny prsu, vaječníků* a nemalobuněčného karcinomu plic. Docetaxel a paclitaxel se váží reverzibilně na mikrotubuly buněk, čímž zabrání jejich depolymeraci během buněčného dělení a tím transportu chromosomů. Výsledkem je inhibice mitózy. Docetaxel je považován za dvakrát silnější léčivo než paclitaxel. V dnešní době se dá připravovat semisynteticky z látek obsaženích v kůře různých druhů tisů.
V případě hydrofobních taxolových derivátů je proces přípravy suprartnolekulámího komplexu založen na aktivaci absorpční schopnosti oxycelulózové matrice ponořením do vody a následném přidání roztoku rozpouštědla obsahujícího dané léčivo. Rozpouštědlo je vybráno ze skupiny obsahující methanol, e$nol, isopropanol, 2-methoxyethanol, Ν,Ν-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, tetrahydrofuran, acetonitril, aceton nebo jejich směs a jako další voda. Dané míšení je kontrolované prováděno tak, aby léčivo obsažené v rozpouštědle zůstalo rozpuštěné i ve vzniklé směsi vody případně s daným organickým rozpouštědlem. Následně jsou vodné systémy s organickým rozpouštědlem obsahující oxycelulózovou matrici a dané léčivo třepány s výhodou po dobu 24 hodin. Poté je modifikovaná matrice, tedy s nekovalentně vázaným léčivem, izolovaná pomocí filtrace, následně promyta použitým rozpouštědlovým systénya nakonec vakuově sušena. Celý proces přípravy je kontrolované prováděn tak, aby teplota oxycelulózových matric nebo jejich ť roztoků nebyla vyšší než 2(ÚC.
6'
4
4»
Připravené kompozice sestávají z supramolekulárních struktur oxycelulózových matric a taxolových derivátů, přičemž taxolové deriváty jsou v matrici v množství 5 až 30 % hnyZe strukturních analýz vyplynulo, že taxolové deriváty jsou skutečně nedílnou součástí oxycelulózové matrice a nejedná se tedy o pouhou mechanickou směs, ale supraůnolekulámí strukturu. Také byly ověřeny vysoké stability vytvořených struktur, což dokazuje, že k uvolnění cytotoxických taxolů nedochází předčasně do okolní zdravé tkáně. Dále byla ověřena zvýšená průchodnost přes simulované biologické membrány oproti průchodnosti samotných taxolů, což je přisuzováno právě suprayfnolekulární struktuře( a zvyšuje se efektivita transportu léčiva přímo dovnitř nádorové tkáně.
Pro celulózové matrice jsou známy dva základní mechanismy uvolňování léčiv. Ve vodném prostředí se nejprve matrice zvlhčí vodou, čímž dojde k uvolnění počáteční koncentrace rozpuštěného léčiva z povrchu matrice. Díky této gelové vrstvě může voda z matrice uvolňovat léčivo, aniž by došlo k jejímu rozrušení (preferováno hydrofilními léčivy jako je doxorubicin). V následné fázi dojde k hydrataci povrchu matrice, zvýšení pohyblivosti V ( polymerových řetězců a vzniku nabobtnalého gelu. Další fázi dochází k rozvolnění polymerových řetězců a jejich uvolnění do okolí. Na novém povrchu matrice vznikne další gelová vrstva a celý proces se opakuje až do jejího zániku (preferováno pro hydrofobní léčiva, např. docetaxel). V případě omezeně rozpustných léčiv se na jejich uvolnění z matrice podílejí oba mechanismy. Na daný proces má velký vliv stabilita použité matrice. V případě stabilnějších matric bude preferováno vymývání léčiva. Naproti tomu v případě méně stabilních matric dojde k uvolnění většiny vázaného léčiva již během rozpadu samotné matrice. Dochází tedy k postupnému uvolňování léčiva z modifikované oxycelulózy( a to pouze v místě po vyoperovaném nádoru, čímž se rapidně snižují nežádoucí účinky použitých cytostatik.
Bylo prokázáno, že při standardních testech za podmínek 25 °C ± 2 °C a relativní vlhkosti 60 % ± 5 % i při zrychlených testech (podmínky 40 °C ± 2 °C/75 % RV ± 5 % RV) jsou připravené komplexy modifikovaných celulózových matric stabilní po dobu nejméně 6 měsíců.
K výhodnosti vnitrotělové topické aplikace byle-dospěn€| až na základě řady experimentů, kdy byly prováděny preklinické testy na myších nu-nu modelech po odstranění nádorové tkáně karcinomu prsu a karcinomu pankreatu a následné aplikaci kompozice jak orálně, v každodenních dávkách, tak jednorázově topicky přímo do místa po vyoperovaném nádoru
7' ve stejné dávce. Porovnání aplikace ve formě orální a vnitrotělové topické pooperační aplikace prokázal/· výhodnost topické aplikace, protože orální aplikace byla spojena s mortalitou o 24^3 5 % vyšší a především pozorovaný nárůst velikosti tumoru byl o 27 až 48 % vyšší.
lU
Bylo zjištěno, že supfefmolekulámí komplex oxycelulóz s docetaxelem při vnitrotělové topické aplikaci má schopnost inhibovat nárůst karcinomu prsu a pankreatu až na 11 % oproti pouze chirurgické léčbě a až na 21 % oproti chirurgické léčbě s následným podáním samotného docetaxelu. Také mortalita komplexu je poměrně nízká v rozmezí 11 až 14 %.
Teprve na základě těchto výsledků bykrďoSpěfí^) k závěrům použití pouze vnitrotělové topické aplikace taxolových derivátů a pouze ve formě supramolekulámích oxycelulózových struktur, které byly prokázány jako nej šetrnější a nej účinnější.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1. Tabulka přehledu navážek docetaxelu vzhledem k navážkám oxycelulózy, procentuální obsah léčiva v oxycelulóze a loadin^ léčiva do oxycelulózy, kdy jako rozpouštědlo byla použita voda
Obr. 2. Tabulka přehledu navážek docetaxelu vzhledem k navážkám oxycelulózy, procentuální obsah léčiva v oxycelulóze a Joading léčiva do oxycelulózy, kdy jako rozpouštědlo byla použita směs EtOH/voda (2:1, V/V)
Obr. 3. Kinetika uvolňování docetaxelu pro HD s 10 % docetaxelu při pH 7,4 (A) a 5,5 (B)
Obr. 4. Kinetika uvolňování docetaxelu pro HL s 10 % docetaxelu při pH 7,4 (A) a 5,5 (B)
Obr. 5. Kinetika uvolňovaní docetaxelu pro CaL s 10 % docetaxelu při pH 7,4 (A) a 5,5 (B)
Obr. 6. Vliv oxycelulázové matrice na transport docetaxelu přes fosfolipidovou PAMPA membránu
Obr. 7. Vnitrotělová topická aplikace supramolekulámích komplexů oxycelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s PATU lidský karcinomem pankreatu
Obr. 8. Orální aplikace supramolekulámích komplexů oxycelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s PATU lidský/ karcinomem pankreatu
8'
Obr. 9.
Obr. 10.
Obr. 11.
Obr. 12.
Obr. 13.
Obr. 14.
Obr. 15.
Vnitrotělová topická aplikace supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s BT-474 lidskýícarcinomem prsu
Orální aplikace supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s BT-474 lidský/karcinomem prsu a její porovnání se samotným docetaxelem a oxycelulózovýbhl matrice
In vitro studie mortality nádorových buněk tkáňových kultur působením samotného docetaxelu v porovnání s jeho oxycelulózovým komplexem
Porovnání Ramanových spekter pro modifikovanou oxycelulosu CaL docetaxelem („doce.Voda:EtOH“, obsah 5 hm. % docetaxelu), čisté léčivo („docetaxel“) a nemodifikovanou oxycelulózu („CaL“)
Porovnání Ramanových spekter pro modifikovanou oxycelulosu HD docetaxelem („doce.Voda:EtOH“, obsah 5 hm. % docetaxelu), čisté léčivo („docetaxel“) a nemodifikovanou oxycelulózu („HD“)
Porovnání Ramanových spekter pro modifikovanou oxycelulosu HL docetaxelem („doce.Voda:EtOH“, obsah 5 hm. % docetaxelu), čisté léčivo („docetaxel“) a nemodifikovanou oxycelulózu („HL“)
Porovnání Ramanových spekter pro modifikovanou oxycelulosu HD docetaxelem („doce.Voda“, obsah 5 hm. % docetaxelu), čisté léčivo („docetaxel“) a nemodifikovanou oxycelulózu („HD“) >
» 9
• 4 ·# ♦ * » »
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava a charakterizace supraymolekulámích komplexů oxycelulózových matric (HD, HL a CaL) s docetaxelem
Příklad 1A
Použití rozpouštědla ethanol/voda (2:1, V/V) mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve směsi ethanol/voda (2:1, V/V; 5 ml) a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 24 hodinách třepání při teplotě 20 °C byla modifikovaná oxycelulóza odfiltrována, promyta směsí ethanol/voda (2:1, V/V; 3 ml), vodou (3 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 20 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 5 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 2.
mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve směsi ethanol/voda (2:1, V/V; 5 ml) a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 24 hodinách třepání při teplotě 20 °C byla modifikovaná oxycelulóza odfiltrována, promyta směsí ethanol/voda (2:1, V/V; 3 ml), vodou (3 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 20 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 10 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 2.
mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve směsi ethanol/voda (2:1, V/V; 5 ml) a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 36 hodinách třepání při teplotě 19 °C byla modifikovaná oxycelulóza odfiltrována, promyta směsí ethanol/voda (2:1, V/V; 3 ml), vodou (3 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 19 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 30 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 2.
Příklad 1B
Použití rozpouštědla voda mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve vodě 5 ml a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 24 hodinách třepání při teplotě 20 °C byla modifikovaná oxycelulóza
10' • * odfiltrována, promyta vodou vodou (6 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 20 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 5 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 1.
mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve vodě 5 ml a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 24 hodinách třepání při teplotě 20 °C byla modifikovaná oxycelulóza odfiltrována, promyta vodou (6 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 20 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 10 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 1.
mg docetaxelu bylo rozpuštěno ve vodě 5 ml a přidáno k oxycelulóze (HL, HD nebo CaL) (100 mg). Po 36 hodinách třepání při teplotě 19 °C byla modifikovaná oxycelulóza odfiltrována, promyta vodou (6 ml) a následně vysušena za vysokého vakua při teplotě 19 °C. Elementární analýzou bylo stanoveno, že na oxycelulózu bylo navázáno přibližně 30 % docetaxelu s přesnými hodnotami hmotnostních koncentrací dle obr. 1.
Pro takto připravené modifikované oxycelulózy byla změřena jejich Ramanova spektra a porovnána se spektrem čistého docetaxelu a nemodifikované oxycelulózy. Porovnáním pozice píků a jejich poměru intensit modifikovaných oxycelulóz, samotného docetaxelu a nemodifikovaných oxycelulózy lze usoudit, že účinná látka docetaxelu není vázána čistě fyzikální absorpcí, ale tvoří inklusní komplex s danou matricí.
Příklad 2 A
Stabilita supra^molekulámích komplexů celulózových matric HD s docetaxelem f
Kinetika uvolňovaní docetaxelu z celulózových matric HD a jejich stabilita byla sledována
MU pomocí absorpční spektroskopie v intervalu 220 nm dď 500 nm. Délka kroku byla 1 nm a rychlost 100 nm/min. Pro měření byly použity plastové kyvety pro UV oblast. Měření bylo provedeno při pH 7,4 a 5,5 v PBS (lOmM fosfátový pufr, 0,137M NaCl a 0,0027M KC1). Do jednotlivých kyvet bylo naváženo 8 mg modifikovaných matric s obsahem 10 hm. % docetaxelu, zalito 19,2 ml PBS a následně uzavřeno parafilmem. Byla pozorována vysoká stabilita vázaného docetaxelu (viz obr. 3).
lť ·> » * •i •·
9· » » ··
Příklad 2 B
Stabilita supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric HL s docetaxelem a kinetika uvolňování docetaxelu v HL s 10 % docetaxelu
Kinetika uvolňovaní docetaxelu z celulózových matric HL a jejich stabilita byla sledována pomocí absorpční spektroskopie v intervalu 220 nm de 500 nm. Délka kroku byla 1 nm a rychlost 100 nm/min. Pro měření byly použity plastové kyvety pro UV oblast. Měření bylo provedeno při pH 7,4 a 5,5 v PBS (lOmM fosfátový pufr, 0,137M NaCl a 0,0027M KC1). Do jednotlivých kyvet bylo naváženo 8 mg modifikovaných matric s obsahem 10 hm. % docetaxelu, zalito 19,2 ml PBS a následně uzavřeno parafilmem. Byla pozorována stabilita vázaného docetaxelu (viz obr. 4).
Příklad 2 C
Stabilita supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric CaL s docetaxelem a kinetika uvolňování docetaxelu v CaL s 10 % docetaxelu
Kinetika uvolňování docetaxelu z celulózových matric CaL a jejich stabilita byla sledována pomocí absorpční spektroskopie v intervalu 220 nm dó 500 nm. Délka kroku byla 1 nm a rychlost 100 nm/min. Pro měření byly použity plastové kyvety pro UV oblast. Měření bylo provedeno při pH 7,4 a 5,5 v PBS (lOmM fosfátový pufr, 0,137M NaCl a 0,0027M KC1). Do jednotlivých kyvet bylo naváženo 8 mg modifikovaných matric s obsahem 10 hm. % docetaxelu, zalito 19,2 ml PBS a následně uzavřeno parafilmem. Byla pozorována vysoká stabilita vázaného docetaxelu (viz obr. 5).
Během rozpadu celulózových matric dochází k uvolňování jednotlivých vláken do roztoku. Daný jev se projeví změnou absorpčního spektra oproti spektru naměřenému v čase to. Pokud
Ůí-í- Λ nejsou vdaném čase pozorovaný významné změny oproti toi,, lze danou matrici považovat v tomto čase za stabilní. Stabilita testovaných matric je dostatečně velká pro uplatnění obou mechanismů uvolňování léčiv. Kompletní uvolnění léčiva v organismu lze očekávat do jednoho měsíce po aplikaci oxycelulózy do organismu.
Pro všechny typy matric byla pozorována vysoká stabilita vázaného docetaxelu. Během studované doby bylo pozorováno uvolnění docetaxelu z oxycelulózy pouze pro HL při pH 5,5,
-* » a · a to v průběhu 94 hodin (viz obrázek 4B). Množství volného docetaxelu odpovídající dané absorbanci se však v PBS rozpustí již během 2 hodin.
Příklad 3
PAMPA studie supramolekulámích komplexů celulózových matric (HD, HL a CaL) s docetaxelem
Vliv oxycelulózových matric na propustnost léčiv přes buněčnou membránu byl studován pomocí PAMPA testu (Paralelní umělý membránový systém pro stanovení propustnosti). PAMPA obsahuje umělou fosfolipidovou membránu používanou jako model buněčné membrány. Propustnost látek, např. léčiv přes PAMPA membránu silně koreluje s propustností přes buněčnou membránu. Do spodní (akceptorové) části PAMPA bylo přidáno 300 μΐ PBS (lOmM fosfátový pufr, 0,137 M NaCl a 0,0027M KC1). Poté do vrchní (donorové) části PAMPA byla přidána modifikovaná oxycelulóza s 1 docetaxelu, nebo nemodifikovaná oxycelulóza či samotný docetaxel a 200 μΐ PBS. Po 5 hodinách experimentu byl odebrán alikvotní podíl roztoků z akceptorové a donorové části PAMPA a poté byla změřena jejich absorbance v maximu vlnové délky docetaxelu. Procentuální obsah prošlého léčiva, nebo oxycelulózové matrice byl/ spočítán/ pomocí následující rovnice.
roztoku + Ahomího roztoku)
Výsledky provedených experimentů ukazují, že oxycelulózová matrice má pozitivní vliv na průchod léčiv přes PAMPA membránu (viz obrázek 6), a tudíž i velmi pravděpodobně přes buněčnou membránu. Tím pádem lze očekávat, že in vivo po enzymatickém rozkladu oxycelulózové matrice taxolové léčivo ve formě supramolekulamího rozpustného komplexu bude efektivně vstřebáváno buňkami tumorové tkáně i z toho důvodu, že rakovinné buňky, které tvoří menšinu z celkové buněčné populace^ mají lepší prostupnost pro biopolymery než normální^ zdravé buňky. Dá se tedy předpokládat, že tato formulace může dále výrazně přispět k selektivitě použitých léčiv. Výše jednoznačně ukazuje výrazně pozitivní vliv testovaných oxycelulózových matric na terapeutickou efektivitu použitých léčiv. Propustnost docetaxelu v supramolekulámím komplexu s oxycelulózou byla zvýšena o 6 %.
13'
Příklad 4
G«—' : <;t. ( • 3 · · · » » « * · > · « » » β · 9 9· • · · · « « 1» · · * · ···· • · · · · «· a · · ·· · · · · · · a*a ·
Příprava Nu-nu myší s lidským karcinomem a následná chirurgická léčba.
Holé imunodeficientní myši postrádají T-lymfocyty v důsledku absence brzlíku, takže nemohou vytvořit imunologickou odezvu na cizí tkáně. Proto je možná xenotransplantace buněk lidského karcinomu.
Buněčné rakovinné linie (lidský nádor prsu - BT-474, slinivky - PATU) byly vytvořeny transfekcí buněk. Buňky karcinomu prsu a slinivky byly udržovány v T-mediu doplněném 5% fetálním bovinním sérem. Všechny buňky byly udržovány při 5 % CO2 (V/V) při 37 °C ve zvlhčené atmosféře. Všechny experimenty byly prováděny na buňkách v exponenciální růstové fázi.
Podkožní implantace buněk lidského karcinomu do boků imunodeficientních nahých nu-nu myší (Samice, bezthymové, věk 6 týdnů, váha 18(-20 g).
Nádorové buňky (lxlO7) byly resuspendovány v 0,1 ml PBS a 0(l ml Matrigelu (BD Biosciences) a aplikovány podkožně do boku myší pomocí inzulínové stříkačky a jehly velikosti 27.
Jakmile dosáhla nádorová masa velikosti cca 5x5 až 5x8 mm, bylo zahájeno operativní chirurgické odstranění nádoru z 95*97 % a měření velikosti nádorů.
Příklad 5
Aplikace supramolekulámích komplexů oxvcelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s PATU lidskýkarcinomem pankreatu
Příklad 5 A
Vnitrotělová topická aplikace
Imunodeficientní holé nu-nu myši, připravené a chirurgicky léčené dle příkladu 4, tedy s odstraněným nádorem pankreatu, byly rozděleny do 10 experimentů po 6 myších. Skupina A tvořila 2 experimenty, byla jako kontrolní bez jakékoli další aplikace. Ostatním skupinám byly látky podány lokálně, ve formě prášku do místa vyoperovaného nádoru. Skupině B byl podán samotný docetaxel v množství 0,5 mg, tvořila také 2 experimenty. Skupině C byla v experimentu 1 podána oxycelulóza HL a v experimentu 2 oxycelulóza CaL, vždy
14'
Λ · • ·
v množství 4,5 mg. Skupině D8 byl ve dvou experimentech podán supeímolekulámí komplex oxycelulózy CaL s docetaxelem a ve skupině D9 ve dvou experimentech podán supbjínolekulární komplex oxycelulózy HL s docetaxelem, v množství 5 mg s 10 % obsahem docetaxelu, což odpovídá množství samotného docetaxelu.
Následně byla velikost nádoru monitorována a měřena po 50 dnech po chirurgickém zákroku.
Byla sledována inhibice opětovného růstu nádoru v závislosti na podané látce. Byl vyhodnocen vliv lokální vnitrotělové topické aplikace supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric s cytostatiky, samotnou oxycelulózou a samotnými cytostatiky na opětovný růst nádoru, resp. případnou eliminaci residuální nádorové tkáně. Výrazný terapeutický efekt byl pozorován pro topickou vnitrotělovou aplikaci oxycelulózových komplexů projevující se výrazně omezeným růstem nádoru. Tento přístup představuje významný přínos oproti kontrolním experimentům v konečném objemu nádoru. Změny ve velikosti tumoru byly použity pro stanovení protinádorové aktivity. Bylo zjištěno, že rt.V supeímolekulámí komplex oxycelulóz s docetaxelem při vnitrotělové topické aplikaci má schopnost omezovat nárůst karcinomu až na 18 % oproti pouze chirurgické léčbě a až na 29 % oproti chirurgické léčbě s následným podáním samotného docetaxelu. Také mortalita komplexu je poměrně nízká v rozmezí 22 až 28 %. Podrobné výsledky prezentuje tabulka na obr 7.
Příklad 5 B
Perorální aplikace
Imunodeficientní holé nu-nu myši, připravené a chirurgicky léčené dle příkladu 4, tedy s odstraněným nádorem pankreatU) byly rozděleny do 5 experimentů po 3 myších. Skupina A byla jako kontrolní bez jakékoli další aplikace. Ostatním skupinám byly látky podávány orálně přímo do žaludku. Skupině B byl podáván samotný docetaxel v množství 0,5 mg, skupině C byla v experimentu 1 podána oxycelulóza HL a v experimentu 2 oxycelulóza CaL, vždy v množství 4,5 mg. Skupině D8 byl podáván supeímolekulámí komplex oxycelulózy CaL s docetaxelem a ve skupině D9 podán supeímolekulámí komplex oxycelulózy HL s docetaxelem, v množství 5 mg s 10 % hm. obsahem docetaxelu, což odpovídá množství samotného docetaxelu.
Velikost nádoru byla monitorována a měřena po 50 dnech po chirurgickém zákroku.
• *« · * ·· » ·· • · · · ·
9·» »· •· • « ··
Byla sledována inhibice opětovného růstu nádoru především jako porovnání vůči vnitrotělové topické aplikaci.
Byl vyhodnocen vliv orálníma vnitrotělové topické aplikace supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric s cytostatiky, samotnou oxycelulózou a samotnými cytostatiky na opětovný růst nádoru, resp. případnou eliminaci residuální nádorové tkáně. Změny ve velikosti tumoru byly použity pro stanovení protinádorové aktivity. Bylo zjištěno, že supermolekulámí komplex oxycelulóz s docetaxelem při orální aplikaci má pouze 48% schopnost omezovat nárůst karcinomu oproti pouze chirurgické léčbě a inhibice nárůstu karcinomu oproti aplikaci docetaxelu v supramolekulámím komplexu s oxycelulózou se snížila pouze na 76 %. Mortalita komplexu při orálním podání byla poměrně značná, a to 52 %. Podrobné výsledky prezentuje tabulka na obr. 8.
Porovnání aplikace ve formě orální a vnitrotělové topické pooperační aplikace prokázali výhodnost topické aplikace, protože orální aplikace byla spojena s mortalitou o 24γ30 % vyšší •f a především pozorovaný nárůst velikosti tumoru byl cca 25 až 31% oproti topické aplikaci.
Příklad 6
Aplikace supramolekulárních komplexů oxycelulózových matric s docetaxelem po chirurgické léčbě nu-nu myší s BT-474 lidský ícarcinomem prsu
Příklad 6 A
Vnitro tělová topická aplikace
Imunodefícientní holé nu-nu myši, připravené a chirurgicky léčené dle příkladu 4, tedy s odstraněním nádoru prsu(byly rozděleny do 10 experimentů po 6 myších. Skupina A tvořila 2 experimenty, byla jako kontrolní bez jakékoli další aplikace. Ostatním skupinám byly látky podány lokálně, ve formě prášku do místa vyoperovaného nádoru. Skupině B byl podán samotný docetaxel v množství 0,5 mg, tvořila také 2 experimenty. Skupině C byla v experimentu 1 podána oxycelulóza HL a v experimentu 2 oxycelulóza CaL, vždy v množství 4,5 mg. Skupině D8 byl ve dvou experimentech podán supermolekulární komplex oxycelulózy CaL s docetaxelem a ve skupině D9 ve dvou experimentech podán supermolekulámí komplex oxycelulózy HL s docetaxelem, v množství 5 mg s 10 % hn# obsahem docetaxelu, což odpovídá množství samotného docetaxelu.
»
Následně byla velikost nádoru monitorována a měřena po 50 dnech po chirurgickém zákroku.
v
Byla sledována inhibice opětovného růstu nádoru X závislosti na podané látce. Byl vyhodnocen vliv lokální vnitrotělové topické aplikace supramolekulámích komplexů oxycelulózových matric s cytostatiky, samotnou oxycelulózou a samotnými cytostatiky na opětovný růst nádoru, resp. případnou eliminaci residuální nádorové tkáně. Výrazný terapeutický efekt byl pozorován pro topickou vnitrotělovou aplikaci oxycelulózových komplexů projevující se výrazně omezeným růstem nádoru. Tento přístup představuje významný přínos oproti kontrolním experimentům v konečném objemu nádoru. Změny ve velikosti tumoru byly použity pro stanovení protinádorové aktivity. Bylo zjištěno, že supfermolekulární komplex oxycelulóz s docetaxelem při vnitrotělové topické aplikaci má schopnost omezovat nárůst karcinomu až na 11 % oproti pouze chirurgické léčbě a až na 21 % oproti chirurgické léčbě s následným podáním samotného docetaxelu. Také mortalita pokusných myší po vnitrotělové topické aplikaci komplexu je poměrně nízká, v rozmezí 24 až 28 %. Podrobné výsledky prezentuje tabulka na obr. 9.
Příklad 6 B
Perorální aplikace
Imunodeficientní holé nu-nu myši, připravené a chirurgicky léčené dle příkladu 8, tedy s odstraněním nádoru prsu byly rozděleny do 5 experimentů po 3 myších. Skupina A byla jako kontrolní bez jakékoli další aplikace. Ostatním skupinám byly látky podávány orálně přímo do žaludku. Skupině B byl podáván samotný docetaxel v množství 0,5 mg, skupině C byla v experimentu 1 podána oxycelulóza HL a v experimentu 2 oxycelulóza CaL, vždy v množství 4,5 mg. Skupině D8 byl podáván supérmolekulámí komplex oxycelulózy CaL
Γ-JL· s docetaxelem a ve skupině D9 / podán supéfřnolekulámí komplex oxycelulózy HL s docetaxelem, v množství 5 mg s 10 % hn^obsahem docetaxelu, což odpovídá množství samotného docetaxelu.
Velikost nádoru byla monitorována a měřena po 50 dnech po chirurgickém zákroku.
Byla sledována inhibice opětovného růstu nádoru především jako porovnání vůči vnitrotělové topické aplikaci.
Byl vyhodnocen vliv orální a vnitrotělové topické aplikace supramolekulámích komplexů oxycelulózových matric s cytostatiky, samotnou oxycelulózou a samotnými cytostatiky na *999 opětovný růst nádoru, resp. případnou eliminaci residuální nádorové tkáně. Výrazný terapeutický efekt byl pozorován pro topickou vnitrotělovou aplikaci oxycelulózových komplexů projevující se výrazně omezeným růstem nádoru. Tento přístup představuje významný přínos oproti kontrolním experimentům v konečném objemu nádoru. Změny ve velikosti tumoru byly použity pro stanovení protinádorové aktivity. Bylo zjištěno, že supHmolekulámí komplex oxycelulóz s docetaxelem při orální aplikaci má pouze 27% schopnost inhibovat nárůst karcinomu oproti pouze chirurgické léčbě a o 47 až 53 % vyšší schopnost inhibovat nárůst karcinomu oproti aplikaci samotného docetaxelu.^. Mortalita komplexu při orálním podání byla poměrně značný a to 59 až 61 %. Podrobné výsledky prezentuje tabulka na obr. 10.
Porovnání aplikace ve formě orální a vnitrotělové topické pooperační aplikace prokázal/ výhodnost topické aplikace, protože orální aplikace byla spojena s mortalitou o 33 až 35 % vyšší a především pozorovaný nárůst velikosti tumoru byl cca 1 až 10% oproti topické aplikaci.
Příklad 7
Studium efektivity terapie komplexy oxycelulózové matrice s cytostatiky na tkáňových kulturách nádorových buněk in vitro
Linie nádorových buněk solidních tumorů byly získány od ETCC. Všechny buňky byly pěstovány exponenciálně v médiu RPMI 1640 s 10 % fetálního telecího séra v 35mm Petriho miskách. Pro experimenty byly buňky kultivovány v čistém růstovém médiu po dobu 16feif hodin pro dosažení exponenciální fáze růstu. Poté bylo naočkováno 5 x 105 buněk do l,8y<^ ív r’X
2'cm jamek a inkubováno 16 hodin v růstovém médiu se supéfmolekulámím komplexem oxycelulózy CaL a docetaxelu. Po promytí byla buněčná smrt pozorována s DM IRB Leica mikroskopem s DFC 480 fotoaparátem pomocí imerzního X63 oleje a filtru Leica krychle N2.1.
Sledována byla mortalita buněk v tkáňových kulturách po ovlivnění samotným docetaxelem v porovnání s CaL oxocelulózovým komplexem s 10 % hm. docetaxelu v čase 24 hodin po aplikaci. CaL oxycelulózový komplex s docetaxelem byl v koncentraci 0,1 pmol/ml růstového média. Buněčná mortalita byla stanovena sulforhodaminé B (SRB) testem, alternativně vylučovacím barvením trypanovou modří, výsledky vyjádřeny jako % usmrcených buněk z celkového počtu jednotlivých buněčných linií na obr. 11, kde je viditelné, že protinádorová aktivita v daných podmínkách je u CaL oxycelulózového komplexu s docetaxelem u některých nádorových buněčných linií až třikrát vyšší.
Claims (1)
- Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu vyznačující se tím, že obsahuje 5 až 30 % *paclitaxelu nebo docetaxelu nekovalentně vázaného na oxycelulózovou matrici.Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku ^vyznačující se tím, že oxycelulózová matrice je oxidovaná celulóza.Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným oxidovaná celulóza je v lintrové kyselé formě.Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku 2^vyznačující se tím, že5.5.6.6.7.7.8.8.oxidovaná celulóza je ve formě vápenaté soli.Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku 2/ vyznačuj ící se tím, že oxidovaná celulóza je v textilní pletené formě.Supramolekulámí komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku lj vyznačující se tím, že obsahuje 10 % h axolového derivátu.Použití supramolekulámího komplexu oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku 1 pro přípravu léčiva pro topickou cytostatickou léčbu nádorové tkáně.Použití supramolekulámího komplexu oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu podle nároku 7, kdy topickou cytostatickou léčbou nádorové tkáně je pooperační vnitrotělová topická aplikace na reziduální nádorové buňky/tkáň po chirurgickém zákroku.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2016-804A CZ307237B6 (cs) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2016-804A CZ307237B6 (cs) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2016804A3 true CZ2016804A3 (cs) | 2018-04-18 |
| CZ307237B6 CZ307237B6 (cs) | 2018-04-18 |
Family
ID=62235711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2016-804A CZ307237B6 (cs) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ307237B6 (cs) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5626862A (en) * | 1994-08-02 | 1997-05-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Controlled local delivery of chemotherapeutic agents for treating solid tumors |
| DE102008008522A1 (de) * | 2008-02-11 | 2009-08-13 | Magforce Nanotechnologies Ag | Implantierbare Nanopartikel-enthaltende Produkte |
| US10328095B2 (en) * | 2013-03-15 | 2019-06-25 | Covidien Lp | Resorbable oxidized cellulose embolization microspheres |
| US9956172B2 (en) * | 2015-07-28 | 2018-05-01 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Implant compositions for the unidirectional delivery of therapeutic compounds to the brain |
-
2016
- 2016-12-16 CZ CZ2016-804A patent/CZ307237B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ307237B6 (cs) | 2018-04-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Choukaife et al. | Current advances in chitosan nanoparticles based oral drug delivery for colorectal cancer treatment | |
| Khan et al. | Polymeric nano-encapsulation of curcumin enhances its anti-cancer activity in breast (MDA-MB231) and lung (A549) cancer cells through reduction in expression of HIF-1α and nuclear p65 (REL A) | |
| EP2249804B1 (de) | Implantierbare nanopartikel-enthaltende produkte | |
| Hao et al. | 3D printing‐based drug-loaded implanted prosthesis to prevent breast cancer recurrence post‐conserving surgery | |
| US10272098B2 (en) | Chelated drug delivery systems | |
| CN111686075B (zh) | 一种以纳米胶束为交联剂的原位水凝胶组合物及其应用 | |
| EP2978423A1 (en) | Stable nanocomposition comprising doxorubicin, process for the preparation thereof, its use and pharmaceutical compositions containing it | |
| CN107308457A (zh) | 一种具有肿瘤微环境响应性降解的深层穿透纳米递药系统 | |
| Tariq et al. | Nanogel-based transdermal drug delivery system: A therapeutic strategy with under discussed potential | |
| Wade et al. | Preparation and in vitro assessment of wet-spun gemcitabine-loaded polymeric fibers: Towards localized drug delivery for the treatment of pancreatic cancer | |
| KR20240041285A (ko) | 향상된 2단계 미세입자 기반 국소 치료제 전달 시스템 | |
| Zhu et al. | A doxorubicin and siRNA coloaded nanolamellar hydroxyapatite/PLGA electrospun scaffold as a safe antitumor drug delivery system | |
| Liu et al. | Preparation of ropivacaine-loaded mesoporous bioactive glass microspheres and evaluation of their efficacy for sciatic nerve block | |
| Liu et al. | Potential applications of drug delivery technologies against radiation enteritis | |
| Famta et al. | Exploration of multi-layered nanofiber adjuvant implants of doxorubicin and resveratrol to prevent post-surgery tumor recurrence and invasion | |
| US10376469B2 (en) | Microspheres containing therapeutic agents and related methods of use | |
| Viale et al. | Fibrin gels loaded with cisplatin and cisplatin-hyaluronate complexes tested in a subcutaneous human melanoma model | |
| Guo et al. | Injectable nanocomposite hydrogel with cascade drug release for treatment of uveal melanoma | |
| CZ2016804A3 (cs) | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s taxolovým derivátem s postupným uvolňováním taxolového derivátu a jeho použití | |
| Kumar et al. | A comprehensive guide to hydrogel-based controlled drug delivery for cancer treatment | |
| WO2010072109A1 (zh) | 一种肿瘤治疗药物的缓释体系 | |
| CZ2017634A3 (cs) | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s platinovým metalokomplexem s postupným uvolňováním platinového metalokomplexu a jeho použití | |
| CZ2016802A3 (cs) | Supramolekulární komplex oxycelulózové matrice s antracyklinovým cytostatikem s postupným uvolňováním antracyklinového cytostatika a jeho použití | |
| Gherasim et al. | Pharmacotherapy and nanotechnology | |
| Yu et al. | Natural products applied in acute kidney injury treatment: polymer matters |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20161216 |