CZ20033123A3

CZ20033123A3 - Farmaceutické prostředky, které inhibují proliferaci adenomů hypofýzy

Info

Publication number: CZ20033123A3
Application number: CZ20033123A
Authority: CZ
Inventors: Michael D. Culler; Ettore C. Degli Uberti; Maria C. Zatelli
Original assignee: Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S.
Priority date: 2001-06-25
Filing date: 2002-06-25
Publication date: 2004-11-10
Also published as: HUP0400367A2; MXPA03012042A; EP1399179A4; JP2005518335A; PL374174A1; RU2004101971A; US20040198653A1; WO2003000196A2; EP1399179A2; WO2003000196A3; CA2450446A1; IL158924A0

Description

Farmaceutické prostředky, které inhibují proliferaci adenomů hypofýzy

Oblast techniky

Předkládaný vynález je zaměřen na přípravu léčiva pro snížení rychlosti proliferace buněk adenomu hypofýzy.

Dosavadní stav techniky

Somatostatin (dále jen SRIF), tetradekapeptid, který objevil Brazeau a kol., prokázal, že má silné inhibiční účinky na různé sekreční procesy v tkáních jako jsou hypofýza, slinivka břišní a gastrointestinální trakt. SRIF také působí jako neuromodulátor v centrálním nervovém systému. Tyto biologické účinky SRIF, všechny inhibiční z hlediska povahy, jsou vyvolány prostřednictvím řady G proteinem vázaných receptorů, z nichž bylo charakterizováno pět různých podtypů (SSTR-1 až SSTR-5) (Reubi J. C. a kol., Cancer Res., 47, 551 až 558; Reisine T. a kol., Endocrine Review, ljo, 427 až 442; Lamberts S. W. a kol., Endocr. Rev., 12, 450 až 482; Patel Y. C., Front Neuroendocrinology, 20, 157 až 198 (1999)). Těchto pět podtypů má podobné aifinity pokud jde o endogenní ligandy SRIF, ale v různých tkáních vykazuje odlišnou distribuci. Somatostatin se váže k pěti odlišným podtypům receptorů (SSTR) s relativně vysokou a stejnou afinitou pro každý podtyp.

Existuje důkaz, že somatostatin (SRIF) reguluje proliferaci buňky zastavením růstu buňky prostřednictvím podtypů SSTR-1, -2, -4 a -5 (Buscail L. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 92, 1580 až 1584 (1995); Buscail L. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 91,

2315 až 2319 (1994); Florio T. a kol., Mol. Endocrinol., 13, 24 až 37 (19999); Sharma K. a kol., Mol. Endocrinol., 13, 82 až 90 (1999)) nebo vyvoláním apoptózy prostřednictvím podtypu SSTR-3 (Sharma K. a kol., Mol. Endocrinol., 10, 1688 až 1696 (1996)). SRIF a různé analogy prokázaly, že inhibují proliferaci normální a neoplastické buňky in vitro a in vivo (Lamberts S. W. a kol., Endocr. Rev., 12,

450 až 482) prostřednictvím specifických receptorů SRIF (SSTR's) (Patel Y. C., Front Neuroendocrinology, 20, 157 až 198(1999)) a možných postrecepčních působení (Weckbecker G. a kol., Pharmacol. Ther., 60, 245 až 264; Bell G. I., Reisine T., Trends Neurosci., 16, 34 až 38 (1993); Patel Y. C. a kol., Biochem. Biophys. Res. Coramun., 198, 605 až 612; Law S. F. a kol., Cell Signál, 7, 1 až 8). Navíc existuje důkaz, že rozdílné podtypy SSTR jsou exprimovány v normálních a neoplastických lidských tkáních, což potvrzuje různé afinity tkáně vůči různým analogům SRIF a proměnnou klinickou reakci na jejich léčebná působení.

Jak je dobře známo odborníkovi v oboru, somatostatin a jeho analogy jsou užitečné při léčení široké škály nemocí a/nebo stavů.

Příkladný, ale nikterak vyčerpávající seznam takových nemocí a/nebo stavů zahrnuje: Cushingův syndrom (viz Clark R. V. a kol., Clin. Res., 38, 943A (1990)), gonadotropinomii (viz Ambrosi B. a kol.,

Acta Endocr., Kodaň, 122, 569 až 576 (1990)), hyperparatyreidismus (viz Miiler D. a kol., Canad. Med. Ass. J., 145, 227 až 228 (1991), Pagetovu nemoc (viz Palmieri G. M. A. a kol., J. of Bone and Minerál Research, Ί_ (dodatek 1), S240 (abstrakt 591) (1992)), VlPomii (viz Koberstein B. a kol., Z. Gastroenterology, 28, 295 až 301 (1990) a Christensen C., Acta Chir. Scand., 155, 541 až 543 (1989)), nesidioblastomii a hyperinzulinismus (viz Laron Z., Israel J. Med. Sci., 26 (1), 1 až 2 (1990), Wilson D. C., Irish J. Med. Sci., 158 (1) , 31 až 32 (1989) a Micic D. a kol., Digestion, 16 (dodatek 1), 70 (abstrakt 193) (1990), gastrinómii (viz Bauer F. E. a kol.,

Europ. J. Pharmacol., 183, 55 (1990)), syndrom Zollinger-Ellison (viz Mozell E. a kol., Surg. Gynec. Obstet., 170, 476 až 484 (1990)), hypersekreční diarheu příslušnou k AIDS a jiné stavy (způsobené AIDS, viz Cello J. P. a kol., Gastroenterology, 98 (5), část 2, dodatek, A163 (1990)), způsobené zvýšeným obsahem peptidů uvolňujícím gastrin, viz Alhíndawi R. a kol., Can. J. Surg., 33, 139 až 142 (1990), druhotnou k střevnímu štěpu versus onemocněni hostitele, viz Bianco J. A. a kol., Transplantation, 49, 1194 až 1195 (1990), diarheu spojenou s chemoterapií, viz Petrelli N. a kol., Proč. Amer. Soc. Clin. Oncol., 10, 138 (abstrakt č. 417) (1991)), dráždivě onemocnění střev (viz O'Donnel L. J. D. a kol., Aliment. Pharmacol. Therap., 4, 177 až 181 (1990)), akutní nebo chronickou pankreatitidu (viz Tulassay Z. a kol., Gastroenterology, 98 (5), (část 2), (dodatek), A238 (1990)), Crohnovu nemoc (viz Fedorak R. N. a kol., Can. J. Gastroenterology, _3 (2), 53 až 57 (1989)), systémovou sklerózu (viz Soudah H. a kol.,

Gastroenterology, 98 (5), část 2, (dodatek), A129 (1990)), rakovinu štítné žlázy (viz Modigliani E. a kol., Výroční endokrinologické sympozium (Ann., Endocr.) (Paříž), 50, 483 až 488 (1989)), psoriázu (viz Camisa C. a kol., Cleveland Clinic J. Med., 57 (2), 71 až 76 (1990)), hypotenzi (viz Hoeldtke R. D. a kol., Arch. Phys. Med. Rehabil., 65», 895 až 898 (1988) a Kooner J. S. a kol., Brit. J.

Clin. Pharmacol., 28, 735P až 736P (1989)), záchvaty úzkosti (viz Abelson J. L. a kol., Clin. Psychopharmacol., 10, 128 až 132 (1990)), skleredém (viz Soudah H. a kol., Clin. Res., 39, 303A (1991)), malou střevní obstrukci (viz Nott D. M. a kol., Brit. J. Surg., 77, A691 (1990)), gastroesofagální reflux (viz Branch M. S. a kol., Gastroenterology, 100 (5), část 2, (dodatek), A425 (1991)), duodenogastrický reflux (viz Hasler W. a kol., Gastroenterology, 10, (5), část 2, (dodatek), A448 (1991)), Gravesovu nemoc (viz Chang T.

C. a kol., Brit. Med. J., 304, 158 (1992)), polycystické onemocnění vaječníku (viz Prelevic G. M. a kol., Metabolism Clinical and Experimental, 21' dodatek 2, 76 až 79 (1992)), krvácení z horního gastrointestinálního traktu (viz Jenkins S. A. a kol., Gut., 33, 404 až 407 (1992) a Arrigoni A. a kol., American Journal of Gastroenterology, 87, 1311 (abstrakt 275) (1992)), pankreatické nepravé cysty a ascites (viz Hartley J. E. a kol., J. Roy. Soc.

Med., 85, 107 až 108 (1992)), leukémii (viz Santini a kol., 78 (dodatek 1), 429A (abstrakt 1708) (1991), meningiom (viz Koper J. W. a kol., J. Clin. Endocr. Metab., 74, 543 až 547 (1992) a rakovinnou kachexii (viz Bartlett D.L. a kol., Surg. Fórum, 42, 14 až 16 (1991)).

Vázáni k různým typům podtypů receptorů somatostatinu je spojováno s léčením různých stavů a/nebo nemocí. Například inhibice růstového hormonu je přičítána receptoru somatostatinu typu-2 („SSTR-2), viz např. Raynor a kol., Molecular. Pharmacol., 4_3, 838 (1993); Lloyd a kol., Am. J. Physiol., 268, G102 (1995), zatímco inhibice insulinu je připisována receptoru somatostatinu typu-5, viz např. Coy a kol., 197, 366 až 371 (1993). Jinými indikacemi spojovanými s aktivací podtypů receptoru somatostatinu jsou inhibice insulinu a/nebo glukagonu a podrobněji cukrovky, angiopatie, proliferativní retinopatie, Downovy choroby a nefropatie; inhibice sekrece žaludeční kyseliny a podrobněji peptických vředů, enterokutánniho a pankreatikokutánniho píštěle, dráždivého onemocnění střev, dumping syndromu, syndromu vodové stolice a nádorů vylučujících gastrointestinální hormon.; léčení rakoviny jako je hepatom; inhibice angiogeneze, léčení zánětlivých poruch jako je artritida; retinopatie; chronické odmítnutí štěpu; angioplastie; odmítnutí cévního štěpu a gastrointestinální krvácení.

Je výhodné mít analog, který je selektivní pro specifický podtyp nebo podtypy receptoru somatostatinu zodpovědné za požadovanou biologickou reakci, a tak snižující interakci s ostatními podtypy receptoru, které mohou vést k nežádoucím vedlejším účinkům. Dále byly z důvodu krátkého poločasu rozkladu přírodního somatostatinu vyvinuty různé analogy somatostatinu např pro léčení akromegalie (Raynor a kol., Molecular Pharmacol., 43, 838 (1993)).

Aktivace podtypů 2 a 5 receptoru somatostatinu je spojována se supresí růstového hormonu a podrobněji adenomů vylučujících růstový hormon (GH) (akromegalie) a adenomů vylučujících tyreostimulační hormon (TSH). Studie na kultivovaných buňkách adenomů hypofýzy ukázaly, že podtypy 2 a 5 SSTR působí při supresi sekrece růstového hormonu a prolaktinu synergicky (Shimon I. a kol., J. Clinical Invest., 100, 2386 až 2392 (1997); Jaquet P. a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 85, 781 až 792 (2000)). Aktivace typu 2, ale nikoliv typu 5, je spojována s léčením adenomů vylučujících prolaktin. Avšak, zatímco o adenomech hypofýzy je známo, že exprimují specifické receptory SRIF (SSTR's), antiproliferativní působení analogů SRIF na nádorové buňky nebylo jasně prokázáno (Mahler C. a kol., Clin. Endocrinol., 33, 261 až 269; Lupoli G. a kol., Cancer, 78, 1114 až 1118; Smid W. M. a kol., Neth. J. Med., 40, 240 až 243).

Tudíž vývoj a hodnocení analogů podtypu SSTR selektivních na růst buněk adenomu hypofýzy poskytuje užitečný nástroj pro klinickou aplikaci. Předkládaný vynález se týká zjištění, že adenomy hypofýzy reagují na aktivaci SSTR-1, SSTR-2 a SSTR-5 podtypem selektivních agonistů za podmínek zabudování [³H]thy a vyřazení buňky. Každý z podtypů selektivních agonistů SSTR-1, SSTR-2 a SSTR-5 významně potlačuje zabudování [³H]thy tj. inhibují syntézu DNA a snižují buněčnou proliferaci s tím, že selektivní agonisté SSTR-1 vykazuji nej silnější účinek z těchto tři. Dále preferenční agonisté SSTR-2 podávaní v kombinaci s preferenčními agonisty SSTR-5 mají za následek synergický účinek, jehož výsledkem je větší suprese proliferace než suprese, kterou by jinak bylo možno očekávat.

Podstata vynálezu

Vynález se týká použití alespoň jednoho agonisty SSTR1 a/nebo agonisty SSTR2 a/nebo agonisty SSTR5, nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, buď samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro snížení rychlosti proliferace buněk adenomu hypofýzy ve styku s nimi. Pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se může v jednom z možných provedení vynálezu vybrat preferenční agonista SSTR1. Alternativně se může vybrat selektivní agonista SSTR-1. Agonista SSTR-1 může být tvořen Caeg-cyklo(D-Cys-Pal-D-TrpLys-D-Cys) -Thr(Bzl)-Tyr-NH₂ nebo jeho farmaceuticky přijatelnou soli Agonista SSTR1 má pro SSTR-1 Kj menší než 10 nM nebo menší než 1 nM.

Další alternativou je přivedení uvedených buněk adenomu hypofýzy do kontaktu s preferenčním agonistou SSTR-2, případně selektivním agonistou SSTR-2, kterým může být D-Nal-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-ValCys)-Thr-NH₂, cyklo(Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe), 4-(2-hydroxyethyl)-1 piperazinyl-acetyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂nebo 4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂ nebo jejich farmaceuticky přijatelnou solí,ve které „4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinyl-acetyl- označuje strukturu:

„4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-„ označuje strukturu:

Agonista SSTR2 má pro SSTR-2 Kj menší než 10 nM nebo menší než 1 nM.

Další alternativou je přivedeni uvedených buněk adenomu hypofýzy do kontaktu s preferenčním agonistou SSTR-5, případně selektivním agonistou SSTR-5, kterým může být D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂ nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl. Agonista SSTR5 má pro SSTR-5 Kj menší než 10 nM nebo menší než 1 nM.

Dalším alternativou je přivedeni uvedených buněk adenomu hypofýzy do kontaktu s jedním nebo více preferenčními agonisty SSTR-2 společně s jedním nebo více preferenčními agonisty SSTR-5. V jednom možném provedení obsahuje uvedený agonista SSTR-1 Caeg-cyklo(D-Cys-Pal-DTrp-Lys-D-Cys)-Thr-(Bzl)-NH₂ nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl uvedený agonista SSTR-2 obsahuje D-Nal-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH₂, cyklo(Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe), 4-(2-hydroxy-ethyl)· 1-piperazinylácetyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NHo nebo 4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-DPhe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂ nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl a uvedený agonista SSTR-5 obsahuje DPhe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂ nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

Adenom hypofýzy je adenomem vylučujícím růstový hormon, adenomem vylučujícím adenokortikotropní hormon (ACTH), adenomem vylučujícím prolaktín, adenomem vylučujícím tyreostimulační hormon (TSH), adenomem vylučujícím gonadotropin, adenomem se směsnou sekrecí nebo nefunkčním adenomem.

Předmětem tohoto vynálezu je dále použití účinného množství agonisty SSTR1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy. Agonista SSTR1 obsahuje selektivního agonistů SSTR1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

Alternativou je použití účinného množství agonisty SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelné solí pro přípravu léčiva pro léčeni adenomu hypofýzy. Agonista SSTR2 obsahuje selektivního agonistů SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

Předmětem tohoto vynálezu je rovněž použití účinného množství agonisty SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy. Agonista SSTR5 obsahuje selektivního agonistů SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

Vynálezem je dále použití účinného množství agonisty SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli v kombinaci s agonistou SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy. Agonista SSTR2 obsahuje selektivního agonistů SSTR2 a agonista SSTR5 obsahuje selektivního agonistů SSTR5. Agonistou SSTR1 může být Caeg-c(D-Cys-Pal-D—Trp-Lys-D-Cys)-Thr(Bzl)Tyr-NHj nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

Selektivním agonistou SSTR-2 může být sloučenina vybraná ze seznamu který zahrnuje:

D-Nal-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH₂, cyklo(Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe),

4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinylacetyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂, a

4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-D-Phe-cyklo-(Cys-TyrD-Trp-Lys-Abu-Cys) -Thr-NH₂, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli <5 <í

Selektivním agonistou SSTR5 může být sloučenina D-Phe-Phe-Trp-D-TrpLys-Thr-Phe-Thr-NH₂ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

Předmětem vynálezu je dále použití účinného množství jednoho nebo vice agonistů SSTR1 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR2 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR5 nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, buď samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro snížení sekrece jednoho nebo více z růstového hormonu, adenokortikotropního hormonu (ACTH), prolaktinu, tyreostimulačního hormonu (TSH) a/nebo gonadotropinů, kde účinným množstvím je množství, které je účinné pro snížení uvedené sekrece.

Předmětem vynálezu je dále použití účinného množství jednoho nebo více agonistů SSTRl a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR2 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR5 nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, buď samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro léčení adenomů, kde účinným množstvím je množství, které je účinné pro vyvoláni žádoucího léčebného účinku.

Má se za to, že odborník v oboru může, na základě zde uvedeného popisu, využít předkládaný vynález v jeho nejúplnějším rozsahu. Následující popisovaná typická provedení jsou proto pouze ilustrativní a nejsou omezením práv z tohoto vynálezu.

Pokud není jinak uvedeno, všechny zde použité technické a vědecké termíny mají stejný význam jako běžně chápaný odborníkem v oboru, do kterého tento vynález patří. Také všechny publikace, patentové přihlášky, patenty a jiné odkazy zde zmíněné jsou zahrnuty formou odkazů, každý ve své úplnosti.

Agonistou somatostatinu může být jeden nebo více agonistů SSTR-1, agonistů SSTR-2, agonistů SSTR-3, agonistů SSTR-4 nebo agonistů SSTR-5.

To, co je míněno agonistou receptoru somatostatinu typu-1 (tj. agonistou SSTR-1), je sloučenina, která (1) má vysokou vazebnou afinitu (např. Κχ menší než 100 nM nebo výhodně menší než 10 nM nebo menší než 1 nM) pro SSTR-1 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázání receptoru popsané dále) a (2) snižuje rychlost proliferace buněk adenomů hypofýzy (např. jak prokazuje biologická zkouška popsaná dále). To, co je míněno agonistou selektivního receptoru somatostatinu typu-1, je agonista receptoru somatostatinu typu-1, který má vyšší vazebnou afinitu (tj . nižší Κχ) pro SSTR-1 než pro SSTR-2 nebo SSTR-5.

To, co je míněno agonistou receptoru somatostatinu typu-2 (tj. agonistou SSTR-2), je sloučenina, která (1) má vysokou vazebnou afinitu (např. Κχ menší než 100 nM nebo výhodně menší než 10 nM nebo menší než 1 nM) pro SSTR-2 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázáni receptoru popsané dále) a (2) snižuje rychlost proliferace buněk adenomů hypofýzy (např. jak prokazuje biologická zkouška popsaná dále). To co je míněno agonistou selektivního receptoru somatostatinu typu-2 je agonista receptoru somatostatinu typu-2, který má vyšší vazebnou afinitu (tj . nižší Κχ) pro SSTR-2 než pro SSTR-1 nebo SSTR-5.

To, co je míněno agonistou receptoru somatostatinu typu-5 (tj. agonistou SSTR-5), je sloučenina, která (1) má vysokou vazebnou afinitu (např. Κχ menši než 100 nM nebo výhodně menší než 10 nM nebo menší než 1 nM) pro SSTR-5 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázání receptoru popsané dále) a (2) snižuje rychlost proliferace buněk adenomů hypofýzy (např. jak prokazuje biologická zkouška popsaná dále). To co je míněno agonistou selektivního receptoru somatostatinu typu-5 je agonista receptoru somatostatinu typu-5, který má vyšší vazebnou afinitu (tj. nižší Κχ) pro SSTR-5 než pro SSTR-1 nebo SSTR-2.

V jednom ztělesnění je agonistou SSTR-1 také selektivní agonista SSTR-1. V jiném ztělesnění má selektivní agonista SSTR-1 hodnotu K₁pro SSTR-1 takovou, že je přinejmenším dvakrát (např. nejméně 5-krát nebo nejméně 10-krát) nižší než hodnota, kterou má pro receptor SSTR-2 nebo receptor SSTR-5 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázání receptoru popsané dále).

V jiném ztělesnění je agonistou SSTR-2 také selektivní agonista SSTR-2. V jiném ztělesnění má selektivní agonista SSTR-1 hodnotu Kj pro SSTR-2 takovou, že je při nejmenším dvakrát (např. nejméně 5krát nebo nejméně 10-krát) nižší než hodnota, kterou má pro receptor SSTR-1 nebo receptor SSTR—5 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázání receptoru popsané dále).

V ještě jiném ztělesnění je agonistou SSTR-5 také selektivní agonista SSTR-5. V jiném ztělesnění má'selektivní agonista SSTR-5 hodnotu Ki pro SSTR-5 takovou, že je při nejmenším dvakrát (např. nejméně 5-krát nebo nejméně 10-krát) nižší než hodnota, kterou má pro receptor SSTR-1 nebo receptor SSTR-2 (např. jak je stanoveno pomocí zkoušky vázání receptoru popsané dále).

Příklady agonistů SSTR-1, které mohou být použity v praktickém provedení předkládaného vynálezu zahrnují, ale nejsou omezeny na Caeg-cyklo(D-Cys-Pal-D-Trp-Lys-D-Cys)-Thr(Bzl)-Tyr-NH₂ (sloučenina 1), která má následující strukturu:

kl o

N

Ι Λ

Příklady agonistů SSTR-2, které mohou být použity v praktickém provedení předkládaného vynálezu zahrnují, ale nejsou omezeny na:

D-Nal-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH₂ tj . Lanreotid, cyklo(Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe), (sloučenina 2),

4-(2-Hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-D-Phe-cyklo-(Cys-TyrD-Trp-Lys-Abu-Cys) -Thr-NH₂.

Příklad agonisty SSTR-5, který může být použit v praktickém provedení předkládaného vynálezu zahrnuje, ale bez omezení na: D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂ (sloučenina 3).

Dalšími příklady agonistů somatostatinu jsou ty, které jsou dány vzorcem nebo ty, které jsou výslovně popsány v níže uvedených publikacích, z nichž všechny jsou zde zahrnuty formou odkazu.

Evropská přihláška č. P5 164 ED (vynálezce G. Keři),

Van Binst G. a kol., Peptide Research, 5, 8 (1992),

Horvath A. a kol., anotace, „Conformations of Somatostatin Analogs Having Antitumor Activity, 22. Evropské sympozium o peptidech (22^ndEuropean peptide Sympozium), 13. až 19. září 1992, Interlaken, Švýcarsko,

US	patent	č.	4	904	642	(1990)
US	patent	č.	4	871	717	(1989)
US	patent	č.	4	853	371	(1989)
US	patent	č.	4	725	577	(1988)
US	patent	č.	4	684	620	(1987)

US	patent é.	4 650	787	(1987),
US	patent č.	4 603	120	(1986),
US	patent č.	4 585	755	(1986),
Evropský patent EP	0 203 031 (1986),
US	patent č.	4 522	813	(1985),
US	patent č.	4 486	415	(1984),
US	patent č.	4 485	101	(1984),
US	patent č.	4 435	385	(1984),
US	patent č.	4 395	403	(1983),
US	patent č.	4 369	179	(1983),
US	patent č.	4 360	516	(1982),
US	patent č.	4 358	439	(1982),
US	patent č.	4 328	214	(1982),
US	patent č.	4 316	890	(1982),
US	patent č.	4 310	518	(1982),
US	patent č.	4 291	022	(1981) ,
US	patent č.	4 238	481	(1980) ,
US	patent č.	4 235	886	(1980),
US	patent č.	4 224	199	(1980),
US	patent č.	4 211	693	(1980) ,
US	patent č.	4 190	648	(1980),
US	patent č.	4 146	612	(1979),
US	patent č.	4 133	782	(1979),
US	patent č.	5 506	339	(1996),
US	patent č.	4 261	885	(1981),
US	patent č.	4 728	638	(1988),
US	patent č.	4 282	143	(1981) ,
US	patent č.	4 215	039	(1980),

US patent č. 4 209

US patent č. 4 190

426 (1980),

575 (1980),

Evropský	patent	č.	EP	389	180	(1990),
Evropský	patent	č.	EP	505	680	(1982),
Evropský	patent	č.	EP	083	305	(1982),
Evropský	patent	č.	EP	030	920	(1980),

PCT přihláška č. WO 88/05052 (1988),

PCT přihláška č. WO 90/12811 (1990),

PCT přihláška č. WO 97/01579 (1997),

PCT přihláška č. WO 91/18016 (1991),

PCT přihláška č. WO 00/75186 (2000), Britský patent č. GB 2 095 261 (1981) a

Francouzský patent č. FR 2 522 655 (1983).

Pro všechny zde popsané agonisty somatostatinu představuje každý zbytek aminokyseliny obecný strukturální vzorec -NH-C(R)H-CO-, ve kterém R je vedlejším řetězcem (např. CH₃ pro Ala). Čáry mezi zbytky aminokyselin představují peptidové vazby, které spojují aminokyseliny. Kde je zbytek aminokyseliny opticky aktivní, je to L-forma konfigurace. Pokud není výslovně označena, jedná se o Dformu. Disulfidové vazby (např. disulfidový můstek), které existují mezi dvěmi volnými thioly ze zbytků Cys, nejsou zobrazeny. Zkratky běžných aminokyselin jsou v souladu s doporučeními IUPAC-IUB.

Příklady provedeni vynálezu

Syntéza agonistů somatostatinu

Způsoby pro syntézu agonistů somatostatinu jsou dobře doloženy a nacházejí se v rámci schopnosti odborníka v oboru.

Syntéza krátkých aminokyselinových sekvenci je v oboru peptidů dobře zavedena. Například syntéza H-D-Phe-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-ThrNH₂, popsaná výše, se může provést podle následujícího protokolu uvedeného v příkladu 1 Evropského patentu 0 395 417. Tato syntéza agonistů somatostatinu se substituovaným N-koncem se může provést například podle následujícího protokolu uvedeného ve WO 88/02756, Evropském patentu 0 329 295 a PCT přihlášce č. WO 94/04752.

Některé ze sloučenin podle současného vynálezu mohou obsahovat při nejmenším jedno asymetrické centrum. V molekule mohou být přítomna vedlejší asymetrická centra v závislosti na povaze různých substituentů v molekule. Každé takové asymetrické centrum vytváří dva optické isomery a jsou myšleny tak, že všechny takové optické isomery, jak se separují, čisté nebo částečně čištěné optické isomery, racemické směsi nebo jejich diastereomerní směsi, se zahrnuji do rámce současného vynálezu.

Sloučeniny podle současného vynálezu se mohou obecně izolovat ve formě jejich farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinou, jako jsou soli odvozené od použiti anorganických a organických kyselin. Příklady takových kyselin jsou chlorovodíková, dusičná, sírová, fosforečná, mravenčí, octová, trifluoroctové, propionová, maleinová, jantarová, D-vinná, L-vinná, malonová, methansulfonová kyselina a podobné. Navíc určité sloučeniny, které obsahují kyselé funkční skupiny jako je karboxyskupina se mohou izolovat ve formě jejich anorganické soli, ve které se protiion může vybrat ze sodíku, draslíku, lithia, vápníku, hořčíku a podobných, stejně jako z organických bází.

Farmaceuticky přijatelné soli se mohou vytvářet tím, že se vezme asi 1 ekvivalent např. agonisty SSTR-1, např. sloučeniny 1 a přivede se do kontaktu s jedním nebo více ekvivalenty vhodné odpovídající kyseliny podle soli, která je požadovaná. Zpracování a izolace výsledné soli je odborníkovi v oboru dobře známo.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou podávat orálně, parenterálně (např. nitrosvalovými, nitropobřisnicovými, nitrožilními nebo subkutánimi injekcemi nebo implantáty), nasálními, vaginálními, rektálními, subligválními nebo lokálními způsoby podávání a mohou se formulovat s farmaceuticky přijatelnými nosiči pro získání dávkových forem vhodných pro každý způsob podávání.

Podle toho předkládaný vynález ve svém rozsahu zahrnuje farmaceutické prostředky, které jako aktivní složku obsahují nejméně jednoho agonistů 5STR-2 ve spojení s farmaceuticky přijatelným nosičem.

Dávkové formy v pevném stavu pro orální podávání zahrnují kapsle, tablety, pilulky, prášky a granule. V takových dávkových formách v pevném stavu se aktivní sloučenina smíchá s nejméně jedním inertním farmaceuticky přijatelným nosičem jako jsou sacharóza, laktóza nebo škrob. Takové dávkové formy mohou také obsahovat, jak je běžné v praxi, pomocné látky jiné než taková inertní ředidla, např. lubrikační činidla, jako je stearát hořečnatý. V případě kapslí, tablet nebo pilulek, mohou dávkové formy také obsahovat pufrovací činidla. Tablety a pilulky se mohou navíc připravovat s enterickými povlaky.

Kapalné dávkové formy pro orální podávání zahrnuji farmaceuticky přijatelné emulze, roztoky, suspenze, sirupy a elixíry obsahující inertní ředidla běžně používaná v oboru, jako je voda. Kromě takových inertních ředidel, může kompozice také obsahovat adjuvans, jako jsou zvhlčovací činidla, emulgační a suspenzační činidla, a sladidla, příchuti a parfumační činidla.

Prostředky podle tohoto vynálezu pro parenterální podávání zahrnují sterilní vodné nebo nevodné roztoky, suspenze nebo emulze. Příklady nevodných rozpouštědel nebo vehikul jsou propylenglykol, polyethylenglykol, rostlinné oleje, jako jsou olivový olej a kukuřičný olej, želatina, a injektovatelné organické estery, jako je ethyl-oleát. Takové dávkové formy mohou také obsahovat adjuvans, taková jako jsou konzervační činidla, zvlhčovadla, emulgační a dispergačni činidla. Mohou se sterilizovat, například filtrací přes bakterie zadržující filtr, začleněním sterilizačního činidla do prostředku, pomocí ozařováni prodstředku nebo zahříváním prostředku. Mohou se také vyrábět ve formě sterilních prostředků v pevném stavu, které mohou být rozpuštěny v sterilní vodě nebo některých jiných sterilních injektovatelných mediích bezprostředně před použitím.

Prostředky pro rektální nebo vaginální podávání jsou výhodně čípky, které mohou obsahovat, navíc k aktivní látce, excipiens, jako je kakaové máslo nebo čípkový vosk.

Prostředky pro nasální nebo sublingvální podávání se také připravují se standarními excipienty dobře známými v oboru.

Obecně, účinná dávka aktivní složky v prostředcích podle tohoto vynálezu se může lišit, avšak je nezbytné, aby množství aktivní složky bylo takové, že se získá vhodná dávková forma. Zvolená dávka závisí na požadovaném léčebném účinku, na způsobu podávání a na době trváni léčení. Obecně jsou lidem nebo jiným živočichům, např. savcům podávány úrovně dávek mezi 100 pg/kg a 100 mg/kg tělesné hmotnosti denně.

Výhodný rozsah dávek je od 0,01 do 10 mg/kg tělesné hmotnosti denně, který se může podávat jako jedna dávka nebo rozdělený do více dávek.

Selektivní agonisté a antagonisté SSTR

Funkční zkoušky

Každá sloučenina se pro získání homogenní rozpustnosti a zabránění nespecifického vázání k různým povrchům preparátu resuspenduje v 0,01 N kyselině octové, která obsahuje 0,1 % albuminu hovězího séra (BSA). Specificita a selektivita analogů se stanovuje zkouškou vázání radioligandů v buňkách CHO-K1 trvale tranfekovaných s každým z podtypů SSTR, jak je uvedeno dále.

Úplné kódující sekvence genomického fragmentu genů SSTR-1, 2, 3 a 4 a klon cDNA pro SSTR-5 se subklonují do savčího vektoru exprese pCMV (Life Technologies, Milano, Italy). Linie klenových buněk trvale exprimující selektivní receptory SSTR-1 až 5 (SSTR's 1-5) se získají transfekci do buněk CHO-K1 (ATCC, Manassas, Va, USA) za použití kalciumfosfátového koprecipitačního způsobu (Davis L. a kol., Basic Methods in Molecular Biology, 2. vydání, Appleton & Lange, Norwalk, CT, USA, 611 až 646 (1994)). Plasmid pRSV-neo (ATCC) se vloží jako selekci pomáhající signální znak. Linie klonových buněk se selektují v prostředí RPMI 1640 obsahujícím 0,5 mg/ml G418 (Life Technologies, Milano, Italy), kruhově se klonují a expandují do kultury.

Membrány pro in vitro zkoušky vázání receptoru se získají homogenizováním buněk CHO-K1 exprimující podtypy selektivních receptorů SSTR (SSTR's) v ledově studené 50mM tris-HCl a odstřeďovaných dvakrát při 39 000 g (10 min), s resuspenzací meziproduktu v čerstvém pufru. Finální pelety se pro zkoušku resuspendují v lOmM tris-HCl. Pro zkoušky SSTR-1, 2, 3, 4 a 5 se stejné díly membránových přípravků inkubují 90 min při 25 °C s 0,05mM [¹²⁵I-Tyrll] SRIF-14 v 50mM HEPES (pH 7,4) obsahujícího 10 mg/ml BSA, mM chloridu horečnatého, 200 000 mezinárodních jednotek/ml Trasylolu, 0,02 mg/ml bacitracinu a 0,02 mg/ml fenylmethylsulfonylfluoridu. Konečný objem zkoušky je 0,3 ml. Pro zkoušku SSTR-2 se jako radioligand použije 0,05 nM [¹²⁵I]MK-678 a doba inkubace je 90 min při 25 °C. Inkubace se zastaví rychlou filtrací přes Brandelův filtrační rozvod. Každá trubice a filter se potom třikrát promyjí 5 ml díly ledově studeného pufru. Specifické vázáni se stanovuje jako celkově vázaný radioligand mínus radioligand vázaný za přítomnosti 1000 nM SRIF-14 pro SSTR-1, 3, 4 a 5 nebo 1000 nM MK-678 pro SSTR-2.

«1

Hodnocení biologické aktivity

Biologická aktivita selektivních agonistů a antagonistů SSTR se hodnotí zkouškou mobilizace vápníku v buňkách CH0-K1 exprimujících lidský SSTR-1, SSTR-2 nebo SSTR-5. Buňky se sklízí pomocí inkubace v 0,3% EDTA/fosfát pufrovaném fyziologickém roztoku (25 °C) a dvakrát se promyjí odstředěním. Promyté buňky se resuspenduj! v Hanksově pufrovaném fyziologickém roztoku (HBSS) pro zavedení fluorescenčního indikátoru Ca²⁺ Fura-2AM. Buněčné suspenze (přibližně 10⁶ buněk/ml se inkubuj í s 2 mM Fura-2AM po 30 min při 25 °C. Nezavedený Fura-2AM se odstraní dvojnásobným odstředěním v HBBS a finální suspenze se převedou do spektrofluorometru (Hitachi F-2000) vybaveného magnetickým míchacím mechanismem a držákem kyvet s regulovanou teplotou. Po ekvilibraci na 37 °C se pro měření nitrobuněčné mobilizace Ca²⁺ přidají analogy SRIF. Excitované a emitované vlnové délky jsou 340 a 510 nm, po řadě. Hodnocení nitrobuněčné mobilizace Ca²⁺ ukazuje, že biologická aktivita každého z různých analogů je v souladu s jeho profilem vázání receptorů.

Schopnost analogů SRIF s odlišnou afinitou a specifičností pro podtypy SSTR-1, SSTR-2 a SSTR-5 ovlivňovat proliferační aktivitu buněk se může hodnotit pomocí posouzení zabudováni (³H]thy, nepřímé míry syntetické aktivity DNA a počtu samostatné existence schopných buněk.

Syntéza DNA

Účinky selektivních agonistů a antagonistů SSTR na syntézu DNA buňkou adenomu hypofýzy se hodnotí pomocí stanovení rychlosti zabudováváni [³H]thymidinu, jak dříve popisuje (Davis L. a kol., Basic Methods in Molecular Biology, 2. vydání, Appleton & Lange, Norwalk, CT, USA, 611 až 646 (1994); Uberti E. C. a kol., J. Clin. Endocrinol Metab., 72, 1364 až 1371 (1991)).

Přibližně 10⁵ buněk hypofýzy ze dvou funkčních adenomů se čtyřnásobně plotnují v jamkách v den chirurgického zákroku a zpracují se den poté se SRIF a se sloučeninami 1, 2, 3a LANREOTIDem v koncentraci 10'⁹M. Po 48 hodinách inkubace v prostředí doplněném 10% FBS za přítomnosti [³H]thy {55,5 pBq/ml; 3219 Bq/mmol) s nebo bez každého analogu SRIF. Zpracování se obnoví přidáním Čerstvých analogů do jamek po prvních 24 hodinách inkubace bez odstranění prostředí.

Po inkubaci se buňky třikrát promyjí s ledově studeným PBS a dvakrát s 10% ledově studenou trichloroctovou kyselinou (TCA). Látka vysrážená TCA se solubilizuje v 500 μΐ 0,2 mol/litr hydroxidu sodného a 0,1% SDS. Pomocná radioaktivita buněk se „potom čítá ve scintilačním spektrometru. Výsledky (počty za minutu na jamku) se získají stanovením střední hodnoty z nejméně šesti pokusů ve čtyřnásobném provedení. Schopnost samostatné existence buněk v kontrolních a zpracovaných kulturách se hodnotí barvením trypanovou modří.

Proliferace buněk

Účinky selektivních agonistů SSTR na proliferaci buněk adenomu hypofýzy se hodnotí pomocí neradioaktivní zkoušky proliferace buněk ve vodném prostředí CELLTITER 96 (Promega, Milano, Italy), kolorimetrickým způsobem pokud jde o stanovení počtu buněk schopných samostatné existence při zkouškách proliferace. Zkouška obsahuje roztoky tetrazoliové sloučeniny (Owenovo činidlo; PMS). MTS se buňkami biologicky redukuje na formazan, který je rozpustný v prostředí tkáňové kultury. Absorbance formazanu při 490 nm se může měřit přímo z 96 jamkových zkušebních ploten (Zatelli M. C. a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab., 85, 847 až 852 (2000); Cory A. H. a kol., Cancer Commun., 3, 207 až 212 (1991)). Konverze MTS na vodný rozpustný formazan se dokončí pomocí enzymů dehydrogenázy nalézajících se v metabolický aktivních buňkách. Množství formazanového produktu se měří pomocí velikosti absorbance 490 nm, která je přímo úměrná počtu živých buněk v kultuře.

Stručně, buňky adenomů se plotnují v 96-vícejamkových plotnách (2 x 10¹ buněk/jamku) a inkubují se 4 8 hodin v prostředí doplněném s 10 % FBS za přítomnosti nebo absence každého analogu SRIF {zahrnující jeden v příkladu, sloučeniny 2 a 3 společně) v koncentraci IQ⁹ M. Zpracování se obnoví přidáním čerstvých analogů do jamek po prvních 24 hodinách inkubace. Na konci inkubační periody se do každé jamky opakovači pipetou přidá 20 μΐ kombinovaného roztoku MTS/PMS a plotny se inkubují po další 4 hodiny při 37 °C ve zvlhčované atmosféře 5 % oxidu uhelnatého. Absorbance při 490 nm se potom zaznamenává za použití čtecího zařízení ploten ELISA (EASIA Reader, Medgenix). Výsledky (absorbance při 490 nm) se získají stanovením střední hodnoty z nejméně šesti pokusů při osmi opakováních.

Tabulka 1; Hodnoty zabudování [³H)thy pro preferenční agonisty SRIF, LANREOTIDu, SSTR-1 (sloučenina 1), SSTR-2 (sloučenina 2) a SSTR-5 (sloučenina 3)

Sloučenina	% redukce [³H]thymidinu	% redukce životaschopných buněk
SRIF	10,0	8,0
LANREOTID	25,0	12,0
Sloučenina 1	31,5	28,5
Sloučenina 2	25,0	12,5
Sloučenina 3	15, 5	18,5
Sloučeniny 2+3	68	32,5

Mělo by se chápat, že přestože tento vynález je popisován ve spojení s příklady a jejich podrobným popisem, je předcházející popis zamýšlen jako ilustrace a ne omezení rozsahu tohoto vynálezu definovaného v připojených patentových nárocích. Další aspekty, výhody a modifikace jsou zahrnuty v těchto patentových nárocích.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použiti alespoň jednoho agonisty SSTRl a/nebo agonisty SSTR2 a/nebo agonisty SSTR5, nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, buď samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro sníženi rychlosti proliferace buněk adenomu hypofýzy ve styku s nimi.
2. Použiti podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere preferenční agonista SSTRl.
3. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere selektivní agonista SSTRl.
4. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že agonista SSTRl má pro SSTR-1 Ki menší než 10 nM nebo menší než 1 nM.
5. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere preferenční agonista SSTR2.
6. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere selektivní agonista SSTR2.
7. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že agonista SSTR2 má pro SSTR-2 Ki menši než 10 nM nebo menší než 1 nM.
8. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere preferenční agonista SSTR5.
9. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere selektivní agonista SSTR5.
10. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že agonista SSTR5 má pro SSTR-5 Kj menší než 10 nM nebo menší než 1 nM.
11. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že pro styk s buňkami adenomu hypofýzy se vybere jeden nebo více preferenčních agonistů SSTR-2 a jeden nebo více preferenčních agonistů SSTR-5.
12. Použiti podle nároku 1, vyznačující se tím, že agonistou SSTR1 je Caeg-c (D-Cys-'Pal-D—Trp-Lys-D-Cys) -Tyr (Bzl)-Tyr-NH₂, agonistou SSTR2 je D-Nal-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH₂, cyklo(TicTyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe), 4- (2-hydroxyethyl)-1-piperazinylacetyl-DPhe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH₂ nebo 4-(2-hydroxyethyl)l-piperazin-2-ethansulfonyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)Thr-NH₂ a agonistou SSTR5 je D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.
13. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že adenomem hypofýzy je adenom vylučující růstový hormon, adenom vylučující adenokortikotropní hormon (ACTH), adenom vylučující prolaktin, adenom vylučující tyreostimulační hormon (TSH), adenom vylučující gonadotropin, adenom se směsnou sekrecí nebo nefunkční adenom.
14. Použití účinného množství agonisty SSTR1 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy.
15. Použití podle nároku 14, vyznačující se tím, že agonista SSTR1 obsahuje selektivního agonistů SSTR1 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
16. Použití účinného množství agonisty SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy.
17. Použití podle nároku 16, vyznačující se tím, že agonista SSTR2 obsahuje selektivního agonistů SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
18. Použití účinného množství agonisty SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy.
19. Použití podle nároku 18, vyznačující se tím, že agonista SSTR5 obsahuje selektivního agonistů SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
20. Použití účinného množství agonisty SSTR2 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli v kombinaci s agonistou SSTR5 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí pro přípravu léčiva pro léčení adenomu hypofýzy.
21. Použití podle nároku 20, vyznačující se tím, že agonista SSTR2 obsahuje selektivního agonistů SSTR2 a agonista SSTR5 obsahuje selektivního agonistů SSTR5.
22. Použití podle nároku 15, vyznačující se tím, že agonistou SSTRl je Caeg~c(D-Cys-Pal-D—Trp-Lys-D-Cys)-Thr(Bzl)-Tyr-NHj nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
23. Použití podle nároku 17, vyznačující se tím, že uvedeným selektivním agonistou SSTR-2 je sloučenina vybraná ze seznamu, který zahrnuje:

D-Nal-cyklo (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys) -Thr-NH.·., cyklo(Tic-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Phe),

4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinylacetyl-D-Phe-cyklo(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NHo, a

4-(2-hydroxyethyl)-l-piperazin-2-ethansulfonyl-D-Phe-cyklo-(Cys-TyrD-Trp-Lys-Abu-Cys ) -Thr-Nfh, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
24. Použití poclle nároku 19, vyznačující se tím, že selektivním agonistou SSTR5 je sloučenina D-Phe-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH₂nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
25. Použití účinného množství jednoho nebo více agonistů SSTR1 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR2 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR5 nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, bud' samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro snížení sekrece jednoho nebo více z růstového hormonu, adenokortikotropního hormonu (ACTH), prolaktinu, tyreostimulačniho hormonu (TSH) a/nebo gonadotropinu, kde účinným množstvím je množství, které je účinné pro snížení uvedené sekrece.
26. Použití účinného množství jednoho nebo více agonistů SSTR1 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR2 a/nebo jednoho nebo více agonistů SSTR5 nebo jejich jedné nebo více farmaceuticky přijatelných solí, buď samotných nebo v kombinaci, pro přípravu léčiva pro léčení adenomu, kde účinným množstvím je množství, které je účinné pro vyvolání žádoucího léčebného účinku.