CZ20003704A3 - 15-členné laktamové ketolidy s antibakteriální účinností - Google Patents

Abstract

Nové 15-členné ketoazalidy ze třídy 6-O-methyl-8a-azahomo-a 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A obecného vzorce I, kde A znamenáNH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R1 znamená OH skupinu, Lkladinosylovou skupinu vzorce II nebo společně s R2 znamená keton, R2 znamená atom vodíku nebo společně s R1 znamená keton, R3 znamená atom vodíku nebo C1-C4 alkynoylovou skupinu, ajejich farmaceuticky přijatelné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami.

Description

Nové ketolidy ze třídy 15-členných laktamů

Oblast techniky

Mezinárodní patentové třídění: A 61 K 31/70, C 07 H 17/08

Předkládaný vynález se týká nových sloučenin erythromycinu A ze třídy makrolidových antibiotik. Zvláště se vynález týká nových 15-členných ketoazalidů třídy 6-O-methyl-8a-aza-8a-homo- a 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A, meziproduktů a způsobu jejich přípravy, jejich farmaceuticky přijatelných adičních solí s anorganickými a organickými kyselinami, způsobu přípravy farmaceutických prostředků a rovněž použití farmaceutických prostředků při léčbě bakteriálních infekcí.

Dosavadní stav techniky

Erythromycin A je makrolidové antibiotikum, jehož struktura je charakterizována 14členným laktonovým kruhem majícím C-9 keton a dva cukry, L-kladinosu a Ddesosamin, které jsou glykosidicky vázány v C-3 a C-5 poloze ke aglykonové části molekuly (McGuiere: Antibiot. Chemother., 1952, 2: 281). Erythromycin byl po více než 40 let pokládán za bezpečný a účinný antimikrobiální prostředek pro léčbu infekcí dýchacího a pohlavního ústrojí způsobenými grampozitivními bakteriemi kmenů, jako jsou Legionella, Mycoplasma, Chlamidia a Helicobacter. Hlavními nevýhodami klinického použití erythromycinu A jsou pozorované změny v biologické využitelnosti při orálním podávání, nesnášenlivost zažívacího traktu u mnoha pacientů a ztráta aktivity v kyselém prostředí. Spirocyklizace aglykonového kruhu je však úspěšně inhibována chemickou transformací ketonu C-9 nebo hydroxylových skupin v polohách C-6 a/nebo C-12. Tak například oximací ketonu C-9 erythromycinu A s hydroxylaminhydrochloridem, Beckmannovým přesmykem takto získaného 9(E)oximu a redukcí takto vzniklého 6,9-iminoetheru (6,9-cyklický iminoether 6-deoxy-9deoxo-9a-aza-9a-homoerythromycinu A), se získá 9-deoxo-9a-aza-9ahomoerythromycin A, první polosyntetický makrolid mající 15-členný azalaktonový kruh (Kobrehel G. a kol., US patent 4 328 334, 5/1982). Reduktivní methylací nově zavedené endocyklické 9a-aminoskupiny podle Eschweiler-Clarka byl syntetizován 92

deoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A (AZITHROMYCIN), prototyp nové třídy makrolidových antibiotik, totiž azalidů (Kobrehel G. a kol., BE 892 537, 7/1982). Azithromycin, vedle širokého antimikrobiálního spektra zahrnujícího i gramnegativní bakterie je charakterizován také dlouhým biologickým poločasem, specifickým mechanizmem transportu na místo působení a krátkou dobou nutné terapie. Azithromycin snadno proniká a hromadí se uvnitř fagocytárních buněk, čímž se zesiluje působení na vnitrobuněčné patogenní mikroorganismy tříd Legionella, Chlamidia a Helicobacter.

Je dále známo, že C-6/C-12 spirocyklizace erythromycinu A je také inhibována 0methylací C-6 hydroxylové skupiny aglykonového kruhu (Watanabe Y. a kol., US patent 4 331 803, 5/1982). reakcí erythromycinu A s benzyloxykarbonylchloridem a následnou methylaci získaného 2'-O-3'-N-bis(benzyloxykarbonyl)derivátu, odstraněním chránících skupin a 3'-N-methylací se získá 6-O-methylerythromycin A (KLARITHROMYCIN) (Morimoto S. a kol., J. Antibiotics 1984, 37, 187). Ve srovnání s erythromycinem A, je klarithromycin podstatně stabilnější v kyselém prostředí a vykazuje in vitro lepší působení na kmeny grampozitivních bakterií (Kirst H. A. a kol., Antimicrobial Agents and Chemother., 1989, 1419).

Nedávný výzkum 14-členných makrolidů vedl k objevu nového typu makrolidových antibiotik, totiž ketolidů. Místo neutrální cukerné L-kladinosy, známé pro její nestabilitu i ve slabě kyselém prostředí, mají tyto sloučeniny v poloze C-3 ketoskupinu (Agouridas C. a kol., EP 596802 A1, 5/1994, Le Martret O., FR 2697524 A1, 5/94). Ketolidy vykazují významně lepší působení in vitro proti MLS (makrolidem, linkosamidem a streptograminem B) indukovaných rezistentními organismy (Jamjian C., Antimicrob. Agents Chemother., 1997, 41, 485).

Podle známého stavu techniky, 15-členné ketozalidy ze třídy 6-O-methyl-8a-aza-8ahomo- a 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A a jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s organickými nebo anorganickými kyselinami, způsoby a meziprodukty pro jejich přípravu a rovněž způsoby přípravy farmaceutických preparátů a jejich použití nebylo dosud popsáno.

Předmět předkládaného vynálezu je představován Bekmannovým přesmykem 9(E)a 9(Z)-oximu 6-O-erythromycinu A, hydrolýzou kladinosy v takto získaných 8a- a 9alaktamech, ochranou hydroxylové skupiny v 2'-poloze desoasaminu, oxidací 3hydroxylové skupiny a odstraněním chránících skupin, přičemž jsou získány dosud nepopsané ketoazalidy ze třídy 6-O-methyl-8a-aza-8a-homo- a 6-O-methyl-9a-aza9a-homoerythromycinu A.

Podstata vynálezu

Nové 15-členné ketoazalidy ze třídy 6-O-methyl-8a-aza-8a-homo- a 6-O-methyl-9aaza-9a-homoerythromycinu A obecného vzorce I

kde

A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu,

R¹ znamená OH skupinu, L-kladinosylovou skupinu vzorce II /o

(II) ^OH

OCH₃ • · nebo společně s R² znamená keton,

R² znamená atom vodíku nebo společně s R¹ znamená keton,

R³ znamená atom vodíku nebo C1-C4 alkanoylovou skupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s anorganickými nebo organickými kyselinami se získají následovně.

Krok 1

První krok vynálezu zahrnuje oximaci C-9 ketonu 6-O-methylerythromycinu A (klarythromycin) vzorce lil

na odpovídající oxim. Konverze ketonu na oxim je velmi dobře známá reakce a obvykle se provádí s hydroxylaminhydrochloridem v přítomnosti vhodných anorganických nebo organických bází ve vhodném protickém nebo aprotickém rozpouštědle. Hydroxylaminhydrochlorid se použije v 1 až 15-ekvimolárním přebytku, výhodně v 10-ekvimolárním přebytku s ohledem na klarithromycin. Jako vhodné báze se použijí alkalické hydroxidy, uhličitany, hydrogenuhličitany a acetáty, jako rozpouštědla se použijí C1-C3 alkoholy. Výhodnou bází je uhličitan sodný nebo octan sodný a výhodným rozpouštědlem je methanol. Obecně se reakce provádí při teplotě od 0 do 80 °C, výhodně 65 °C, během 2 hodin až několika dnů, většinou je dokončena v průběhu 8 až 20 hodin. Zpracování se provádí obvyklým způsobem, například odpařením rozpouštědla ve vakuu, přidáním směsi vody a organického rozpouštědla a následně extrakcí v alkalickém prostředí, výhodně při pH 8,0 až 10,0.

Λ Λ • ·

• · • · • ·

Jako rozpouštědla pro extrakci meziproduktu se použije methylenchlorid, chloroform, ethylacetát, diethylether a toluen, přičemž výhodný je chloroform. Produkt se izoluje separací organické vrstvy a odpařením rozpouštědla a získá se směs 9(E)- a 9(Z)oximu 6-O-methylerythroomycinu A vzorce IV

CH₃ (IV) v poměru okolo 1:1. Je-li to nezbytné, oddělení izomerů se provede chromatografií na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanol-hydroxid amonný 90:9:1, čímž se získá chromatograficky homogenní 9(E)-oxim 6-0methylerythromycinu A s Rf 0,446 vzorce IVa

(IVa) a chromatograficky homogenní 6-O-methylerythromycin A 9(Z)-oxim s Rf 0,355 vzorce IVb.

Krok 2:

Konverze 9(E)-oximu 6-O-methylerythromycinu A vzorce IVa na 6-O-methyl-9a-aza 9a-homoerythromycin A obecného vzorce I

kde A znamená NH skupinu, B současně znamená skupinu C=O, R¹ znamená Lkladinosylovou skupinu vzorce II • · ·· · * ···

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 · · ··· • · ·· 99 9 999 9 9 • ·

R² a R³ znamenají současně vodík, se provede Beckmannovým přesmykem (viz. „Comprehensive Organic Chemistry“, I. O. Sutherland (vyd.), Pergamon Press, New York, 1979, díl 2, 398-400 a 967-968. Obecně, Beckmannův přesmyk ketoximu vede ke karboxamidu nebo, v případě cyklických systémů k laktamům. Mechanismus přesmyku zahrnuje předběžnou konverzi oximového hydroxylu na lépe se odštěpující skupinu, která se ve druhém reakčním kroku odštěpí za současné migrace atomu uhlíku v anř/-poloze s ohledem na odštěpující se skupinu. Ve vodném prostředí se tvoří jako meziprodukt nitrilium ion, který reaguje s vodou za vzniku odpovídajícího amidu.

Beckmannův přesmyk se provádí v kyselých, neutrálních nebo bázických podmínkách. Obvyklá kyselá činidla katalyzující přesmyk zahrnují kyselinou sírovou, kyselinu polyfosforečnou, thionylchlorid, chlorid fosforečný, oxid siřičitý a kyselinu mravenčí. Vzhledem k citlivosti makrolidové molekuly v kyselém prostředí a zejména s ohledem na snadné štěpení neutrální cukrové L-kladinosy, nejsou tato činidla vhodná pro přesmyk oximu vzorce IVa na 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R²a R³ mají shora uvedené významy. Výhodně se Beckmannův přesmyk oximu IVa provede počáteční O-sulfonací oximového hydroxylu s alkylsulonylhalogenidy, arylsulfonylhalogenidy nebo arylsulfonylanhydridy. Meziproduktový oximsulfonát se izoluje nebo se obvykle přesmyk na žádaný produkt provede in šitu. Obecně se sulfonace a přesmyk provedou v přítomnosti anorganické báze.

Výhodná sulfonační činidla katalyzující přesmyk oximu IVa zahrnují methansulfonylchlorid, benzensulfonylchlorid, 4-acetylamidosulfonylchlorid, ptoluensulfonylchlorid, anhydridy benzensulfonové a p-toluensulfonové kyseliny.

Φ

Reakce se provádí v přítomnosti anorganických bází, jako jsou hydrogenuhličitan sodný nebo uhličitan draselný nebo v přítomnosti organické báze, jako je pyridin, 4dimethylaminopyridin, triethylamin a N,N-diisopropylamin. Vhodná rozpouštědla zahrnují vodné směsi, jako aceton-voda a dioxan-voda a organická rozpouštědla, jako methylenchlorid, chloroform, ěthylacetát, diethylether, tetrahydrofuran, toluen, acetonitril a pyridin. Obecně se reakce provádí za použití 1-3 ekvimolárního přebytku sulfonačního činidla a se stejným nebo větším ekvimolárním množstvím báze, při teplotě od -20 °C do 50 °C. Často se použije pyridin jako rozpouštědlo a současně jako báze. Výhodně se Beckmannův přesmyk oximu IVa provede ve směsi acetonvoda s dvojnásobným ekvimolárním přebytkem p-toluensulfochloridu a hydrogenuhličitanu sodného. Je-li to nezbytné, produkt se čistí chromatografii na silikagelové koloně použitím rozpouštědlového systému methylenchlorid-methanolhydroxid amonný 90:9:1,5, za získání chromatograficky homogenního 6-O-methyl9a-aza-9a-homoerythromycinu A.

Beckmannův přesmyk 9(Z)-oximu 6-O-methylerythromycinu A vzorce IVb na 6-0methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A obecného vzorce I, kde A znamená skupinu C=O, B současně znamená NH skupinu, R¹ znamená L-kladinosylovou skupinu vzorce II a R² a R³ současně znamenají vodík se provede analogickým způsobem jako s 9(E)-oximem IVa.

Krok 3

6-0-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A nebo 6-O-methyl-8a-aza-8ahomoerythromycin A stupně 2 obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy se podrobí, je-li to vhodné, působení silných kyselin, výhodně 0,25-1,5N kyselině chlorovodíkové, při teplotě místnosti po dobu 10-30 hodin a získají se 3-O-dekladinosyl-3-oxy-deriváty 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A nebo 6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycinu A obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu a R² a R³ současně znamenají vodík.

Krok 4 • · ·· » · · 4 » · · 4 ·· ··

3-0-dekladinosyl-3-oxy-6-0-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A nebo 6-0methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A stupně 3 obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají významy uvedené shora se podrobí, je-li to vhodné, reakci selektivní acylace hydroxylové skupiny ve 2'-poloze desoasaminu. Acylace se provede za použití anhydridů karboxylových kyselin majících do 4 atomů uhlíku, výhodně s anhydridem kyseliny octové, v přítomnosti anorganické nebo organické báze v inertním organickém rozpouštědle při teplotě od O do 30 °C a získá se 3dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A 2'-0-acetát nebo 3dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A 2'-O-acetát obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu, R² znamená vodík a R³ znamená acetyl. Jako vhodné báze se používá hydrogenuhličitan sodný, uhličitan sodný, uhličitan draselný, triethylamin, pyridin, tributylamin, výhodně hydrogenuhličitan sodný. Jako výhodné rozpouštědlo se používá methylenchlorid, dichlorethan, aceton, pyridin, ethylacetát, tetrahydrofuran, výhodně methylenchlorid.

Krok 5

3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A -2'-O-acetát nebo 3- dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A -2- O-acetát stupně 4 obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy, se podrobí, je-li to vhodné, oxidaci hydroxylové skupiny v poloze C-3 aglykonového kruhu podle modifikovaného Moffat-Pfitznerova postupu s N,Ndimethylaminopyropylethylkarbodiimidem v přítomnosti dimethylsulfoxidu a pyridiniumtrifluoracetátu jako katalyzátoru v inertním organickém rozpouštědle, výhodně v methylenchloridu, při teplotě od 10 °C do teploty místnosti a získá se 3dekladinosyl-3-oxo-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A 2'-O-acetát nebo 3dekladinosyl-3-oxo-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A2'-O-acetát obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ a R² spolu znamenají keton a R³ znamená acetylovou skupinu.

Krok 6 φφ φφ φφ • φ φ φ φ φ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ · φ φ φ

φ • ·

3-dekladinosyl-3-oxo-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A 2'-O-acetát nebo 3-dekladinosyl-3-oxo-6-0-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A2'-O-acetát z kroku 5 obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy se potom zpracuje solvolýzou v nižších alkoholech, výhodně v methanolu při teplotě od teploty místnosti do teploty zpětného toku rozpouštědla a získá se 3-dekladinosyl-3-oxo-6O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A nebo 3- dekladinosyl-3-oxo-6-O-methyl-8aaza-8a-homoerythromycin A obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ a R² společně znamenají keton a R³ znamená vodík.

Farmaceuticky přijatelné adiční soli, které jsou rovněž předmětem předkládaného vynálezu se získají reakcí nových sloučenin třídy 6-O-methyl-8a-aza-8ahomoerythromycinu A a 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy, s alespoň ekvimolárním množstvím vhodné anorganické nebo organické kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, jodovodíková, sírová, fosforečná, octová, propionová, trifluoroctová, maleinové, citrónová, stearová, jantarová, ethyljantarová, methansulfonová, benzensulfonová, p-toluensulfonová a laurylsulfonová v rozpouštědle, které je inertní pro reakci. Adiční soli se izolují filtrací pokud jsou nerozpustné v rozpouštědle, které je inertní pro reakci, srážením s nerozpouštědlem nebo odpařením rozpouštědla, většinou lyofilizací.

Antibakteriální in vitro aktivita nových sloučenin obecného vzorce I, kde A, B, R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy a jejich farmaceuticky přijatelných adičních solí s anorganickými nebo organickými kyselinami byla stanovena na standardních zkušebních mikroorganismech a klinických izolátech mikroředěním podle protokolu NCCLS (The National Commitee for Clinical Laboratory standarde, Document M7-A2, díl 10, č. 8, 1990 a Dokument M11-A2, díl 10, 15, 1991). Kontrola laboratorního postupu se provedla kontrolním kmenem Staphyloccocus aureus ATTC 29213 (The American Type Culture Collection) podle protokolu NCCLS (Dokument M7-A2, tabulka 3, M100-S4).

φφ φφ φ φ φ φ φ φφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ « φ φ φ • φ φ φ φ φ φ φ • φ

Antibakteriální in vitro aktivita na série standardních mikroorganismů 6-O-methyl-8aaza-8a-homoerythromycinu A z příkladu 3 ve srovnání s azithromycinem, erythromycinem a klarithromycinem je uvedena v tabulce 1.

Tabulka 1: Antibakteriální in vitro aktivita (MIC, mg/l) 6-O-methyl-8a-aza-8ahomoerythromycinu A (příklad 3) ve srovnání s azithromycinem (Az), erythromycinem (Er) a klarithromycinem (Cl)

Testovaný mikroorganismus	Az	Er	Cl	Příklad 3
Listería monocytogenes ATCC 7644	<0,125	<0,125	0,125	0,125
Staphylococcus aureus ATCC 25923	0,5	0,25	0,5	0,5
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228	1,0	0,25	0,25	0,5
Enterococcus faecalis ATCC 35550	0,5	1,0	0,25	1,0
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305	<0,125	<0,125	<0,125	<0,125
Streptococcus pyogenes ATCC 19615	<0,125	<0,125	<0,125	<0,125
Clostridium perfringens ATCC 1324	0,125	0,5	0,125	0,25
Moraxella catarrhalis ATCC 25238	<0,125	<0,125	<0,125	<0,125
Campytobacter fetus ATCC 19438	<0,125	<0,125	<0,125	<0,125
Campylobacterjejuni ATCC 33291	<0,125	<0,125	<0,125	<0,125
Citroobacter freundii ATCC 8090	4,0	64,0	64,0	16,0
Escherichia coli ATCC 25922	2,0	32,0	32,0	8,0
Próteus mirabilis ATCC 12453	64,0	>128,0	128,0	32,0
Próteus mirabilis ATCC 43071	64,0	>128,0	>128,0	32,0
Salmonella choleraesuis ATCC 13076	2,0	64,0	32,0	8,0
Shigella flexneri ATCC 12022	1,0	32,0	32,0	4,0
Yersinia enterocolitica ATCC 9610	1,0	16,0	16,0	4,0
Haemophilus influenzae ATCC 49247	0,5	2,0	4,0	1,0
Haemophilus influenzae ATCC 49766	1,0	4,0	8,0	1,0
Pseudomonas aeruginosa ATCC 25619	64,0	>128,0	>128,0	32,0

• Φ φ · 9

ΦΦΦΦ Φ · Φ

Φ Φ ΦΦ · φ Φ φ Φ Φ *

ΦΦΦΦ ·

ΦΦ ΦΦ ΦΦΦ · • φ

ΦΦ ΦΦ • 9 · • Φ ·

Φ Φ ·

Φ Φ Φ

Φ Φ Φ Φ

Příklady provedení vynálezu

Postup je ilustrován následujícími příklady, které mají pouze ilustrativní charakter a v žádné případě neomezují rozsah vynálezu.

Příklad 1

Příprava 9(E)- a 9(Z)-oximu 6-O-methylerothromycinu A

Metoda A

6-O-methylerythromycin A (2,0 g, 0,003 mol) v methanolu (100 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku a přidá se hydroxylaminhydrochlorid (2,0 g, 0,03 mol) a uhličitan sodný (0,2 g, 0,002 mol) a směs se zahřívá při zpětném toku za míchání po dobu 3 hodin. Opakovaně se přidá stejné množství hydroxylaminhydrochloridu a uhličitanu sodného a směs se zahřívá při zpětném toku 6 hodin. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a potom se přidá voda (200 ml) a chloroform (100 ml), pH se upraví na 9,8, vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát chloroformem. Spojené organické extrakty se suší nad uhličitanem draselným, filtrují se a odpaří za sníženého tlaku a získají se 2,0 g směsi produktů uvedených v názvu.

Chromatografií na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanolkoncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5 se získá 0,63 g chromatograficky homogenního 9(E)-oximu 6-O-methylerythromycinu A, Rf 0,446 a 0,61 g chromatograficky homogenního 9(Z)-oximu 6-O-methylerythromycinu A s Rf 0,355.

9(E)-oxim:

Rf 0,418, ethylacetát-(n-hexan)-diethylamin, 100:100:20

IR (KBr) cm'¹: 3449, 2974, 2939, 2832, 2788, 1735, 1638, 1459, 1379, 1348, 1169, 1112, 1054, 1012, 957, 835, 755.

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ: 5,11 (H-13), 4,95 (H-1“), 4,45 (H-1'), 4,03 (H-5‘j, 3,77 (H-8), 3,76 (H-3), 3,75 (H-11), 3,66 (H-5), 3,48 (H-5'), 3,33 (3“-OCH₃), 3,24 (H-2 ), 3,10 (6-OCH₃), 3,03 (H-4‘j, 2,89 (H-2), 2,57 (H-10), 2,45 (H-3'), 2,37 (H-2a‘j, 2,31/3'N(CH₃)₂/, 1,93 (H-4), 1,93 (H-14a), 1,68 (H-4 a), 1,58 (H-2“b), 1,53 (H-7a), 1,48 (64» »4

4«· «

4 44

4 4 4 4 • 4 4 4

44 4 « « * 4

CH₃), 1,46(H-14b), 1,31 (5“-CH₃), 1,25 (3“-CH₃), 1,23 (5'-CH₃), 1,20(2-CH₃), 1,13 (10-CH₃), 1,13 (12-CH₃), 1,08 (4-CH₃), 1,00 (8-CH3), 0,86 (15-CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ: 175,5 (C-1), 169,2 (C-9), 102,5 (C-1'), 95,7 (C-1“), 80,2 (C-5), 78,4 (C-6), 78,0 (C-3), 77,8 (C-4“), 76,5 (C-13), 73,8 (C-12), 72,4 (C-3“), 71,1 (C-2'), 70,0 (C-11), 68,2 (C-5'), 65,2 (C-5“), 64,9 (C-3'), 50,8 (6-OCH3), 49,1 (3“OCH₃), 44,7 (C-2), 40,1 /3'-N(CH₃)₂/, 38,7 (C-4), 37,0 (C-7), 34,6 (C-2“), 32,3 (C-10),

29,4 (C-4'), 24,9 (C-8), 21,1 (5'-CH₃), 21,0 (3“-CH₃), 20,8 (C-14), 19,6 (6-CH3), 18,3 (5“-CH₃), 18,2 (8-CH3), 15,7 (12-CH₃), 15,6 (2-CH₃), 14,6 (IO-CH3), 10,2 (15-CH₃),

8,8 (4-CHs).

9(Z)-oxim:

Rf 0,300, ethylacetát-(n-hexan)-diethylamin, 100:100:20

IR (KBr) cm’¹: 3433, 2973, 2939, 2832, 1733, 1638, 1459, 1379, 1348, 1286, 1169, 1114, 1054, 1011, 958, 892, 755.

¹H NMR (300 MHz, CDCb) δ: 5,07 (H-13), 4,93 (H-1“), 4,43 (H-1'), 4,03 (H-5“), 3,98 (H-11), 3,77 (H-3), 3,62 (H-5), 3,48 (H-5'), 3,33 (3“-OCH₃), 3,21 (H-2'), 3,09 (6OCH₃), 3,06 (H-4“), 2,88 (H-2), 2,74 (H-8), 2,65 (H-10), 2,45 (H-3'), 2,36 (H-2“a), 2,30/3'-N(CH₃)₂/, 1,96 (H-4), 1,94 (H-14a), 1,76 (H-14b), 1,67 (H-4'a), 1,59 (H-2“b), 1,58 (H-7a), 1,47 (H-7b), 1,38 (6-CH3), 1,32 (IO-CH3), 1,31 (5“-CH₃), 1,25 (3“-CH₃), 1,24 (5'-CH₃), 1,19 (2-CH₃), 1,14 (12-CH₃), 1,07 (4-CH₃), 1,06 (8-CH3), 0,84 (15CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCb) δ: 176,0 (C-1), 167,4 (C-9), 102,7 (C-1'), 96,0 (C-1“), 80,4 (C-5), 78,7 (C-6), 78,5 (C-3), 77,8 (C-4“), 76,9 (C-13), 74,7 (C-12), 72,6 (C-3“), 70,9 (C-2'), 70,3 (C-11), 68,4 (C-5'), 65,5 (C-5“), 65,3 (C-3'), 50,0 (6-OCH3), 49,3 (3“OCH₃), 45,0 (C-2), 41,0 /3'-N(CH₃)₂/, 38,9 (C-4), 37,0 (C-7), 35,6 (C-8), 34,7 (C-2“),

34,1 (C-10), 28,9 (C-4'), 21,3 (3“-CH₃), 21,2 (5'-CH₃), 21,1 (C-14), 19,7 (6-CH3), 19,6 (8-CH₃), 18,5 (5“-CH₃), 16,4 (12-CH₃), 15,7 (2-CH₃), 10,7 (10-CH₃), 10,4 (15-CH₃), 9,8(15-CH₃).

Metoda B

6-O-methylerythromycin A (10,8,0,014 mol) v methanolu (800 ml) se zahřívá při teplotě zpětného toku a potom se přidá hydroxylaminhydrochlorid (27,0 g, 0,388 mol) a bezvodý octan sodný (15,0 g, 0,183 mol) ve 4 dávkách během 10 hodin a směs se • » * fe · fefefefe • fefe fefe • fefe · fefe fefe fe « fefe «fe • fe « · fe · fe fefefefe • fefe fefe · • fefefefe «•fe ·· fefe zahřívá při zpětném toku za míchání dalších 8 hodin. Methanol se odpaří za sníženého tlaku, přidá se voda (1500 ml) a methylenchlorid (200 ml) a směs se extrahuje gradientovou extrakcí při pH 5,0 a 9,8. Spojené organické extrakty při pH

9,8 se suší nad uhličitanem draselným, filtrují se a odpaří za sníženého tlaku a získá se 9,5 g směsi produktů uvedených v názvu. Chromatografií na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5 se získá chromatograficky homogenní 9(E)-oxim 6-O-methylerythromycinu A a 9(Z)-oxim 6-O-methylerythromycinu A s fyzikálně chemickými konstantami shodnými s konstantami metody A.

Příklad 2

Beckmannův přesmyk 9(E)-oximu 6-O-methylerythromycinu A

9(E)-oxim 6-O-methylerythromycinu A z příkladu 1 (4,0 g, 0,005 mol) se rozpustí v acetonu (130 ml) a roztok se ochladí na 0 až 5 °C. Potom se přidají po kapkách během 1 hodiny a za míchání roztoky p-toluensulfonylchloridu (2,6 g, 0,01 mol) v acetonu (40 ml) a hydrogenuhličitanu sodného (0,830 g, 0,01 mol) ve vodě (130 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 8 hodin, aceton se odpaří za sníženého tlaku a přidá se k vodnému roztoku chloroformu (40 ml), načež se extrahuje gradientem extrakce při pH 5,0 a 9,0. Spojené organické extrakty při pH 9,0 se odpaří a získá se 2,0 g 6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A.

Rf 0,218, ethylacetát-(n-hexan)-diethylamin, 100:100:20

IR (KBr) cm'¹: 3449, 2974, 2939, 2834, 1734, 1706, 1659, 1534, 1459, 1379, 1274, 1169, 1111, 1053, 1011, 958.

¹H NMR (300 MHz, CDCb) δ: 6,12 (9a-CONH), 4,85 (H-1“), 4,68 (H-13), 4,45 (H-1'), 4,21 (H-3), 4,16 (H-10), 4,07 (H-5“), 3,75 (H-5), 3,49 (H-5'), 3,34 (3“-OCH₃), 3,32 (6OCH₃), 3,22 (H-11), 3,20 (H-2'), 3,04 (H-4“), 2,83 (H-2), 2,43 (H-3'), 2,38 (H-2“a), 2,30/3'-N(CH₃)₂/, 2,22 (H-8), 2,07 (H-7a), 1,87 (H-4), 1,87 (H-4), 1,87 (H-14a), 1,67 (H-4 a), 1,57 (H-2“b), 1,57 (H-14b), 1,36 (6-CH₃), 1,33 (H-7b), 1,32 (5“-CH₃), 1,25 (3“-CH₃), 1,24 (H-4'b), 1,23 (5'-CH₃), 1,23 (2-CH₃), 1,18 (12-CH₃), 1,16 (10-CH₃),

1,09 (8-CH₃), 1,02 (4-CH₃), 0,89 (15-CH₃).

• · · · • · · · • ··· · · · · ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 179,5 (C-1), 177,3 (C-9), 102,5 (C-1'), 94,9 (C-1“),

79.1 (C-6), 78,5 (C-5), 77,7 (C-4“), 77,7 (C-13), 75,9 (C-3), 73,9 (C-12), 72,5 (C-3“), 72,6 (C-11), 70,7 (C-2 ), 68,2 (C-5'), 65,3 (C-5“), 65,1 (C-3'), 51,0 (6-OCH3), 49,1 (3“-OCH₃), 45,1 (C-10), 44,5 (C-2), 41,3 (C-4), 40,0 /3'-N(CH₃)₂/, 39,6 (C-7), 35,4 (C8), 34,4 (C-2“), 28,8 (C-4'), 21,1 (5'-CH₃), 21,0 (3“-CH₃), 20,3 (C-14), 20,2 (6-CH₃),

19.1 (8-CH3), 18,1 (5“-CH₃), 15,9 (12-CH₃), 14,6 (2-CH₃), 13,4 (10-CH₃), 10,7 (15CH₃), 8,7 (4-CH₃).

Příklad 3

Beckmannův přesmyk 9(Z)-oximu 6-O-methylerythromycinu A

9(Z)-oxim 6-O-methylerythromycinu A z příkladu 1 (1,4 g, 0,002 mol) se rozpustí v acetonu (50 ml) a roztok se ochladí na 0 až 5 °C. Potom se přidají po kapkách během 1 hodiny a za míchání roztoky p-toluensulfonylchloridu (1,84 g, 0,14 mol) v acetonu (56 ml) a hydrogénuhličitanu sodného (1,16 g, 0,014 mol) ve vodě (180 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 hodiny, aceton se odpaří za sníženého tlaku a přidá se k vodnému roztoku chloroformu (70 ml), načež se extrahuje gradientem extrakce při pH 5,0 a 9,0. Spojené organické extrakty při pH 9,0 se odpaří a získá se 0,80 g produktu, který, je-li to vhodné se čistí sloupcovou chromatografii na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanolkoncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5 a získá se 6-O-methyl-8a-aza-8ahomoerythromycin A s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,152, ethylacetát-(n-hexan)-diethylamin, 100:100:20

IR (KBr) cm'¹: 3442, 2974, 2938, 2833, 1736, 1648, 1535, 1459, 1379, 1284, 1169, 1110, 1055, 1013, 960, 902.

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ: 5,78 (8a-CONH), 5,02 (H-1“), 4,96 (H-13), 4,41 (H-1'), 4,19 (H-8), 4,02 (H-5“), 3,96 (H-3), 3,69 (H-5), 3,51 (H-11), 3,47 (H-5'), 3,32 (3“OCH₃), 3,18 (H-2'), 3,16 (6-OCH3), 3,02 (H-4“), 2,68 (H-2), 2,44 (H-3'), 2,35 (H-2“a), 2,29/3'-N(CH₃)₂/, 2,22 (H-10), 1,92 (H-4), 1,91 (H-14a), 1,68 (H-7a), 1,64 (H-4'a), 1,56 (H-2“b), 1,53 (H-7b), 1,47 (H-14b), 1,39 (6-CH3), 1,29 (5“-CH₃), 1,24 (3“-CH₃),

1,23 (5'-CH₃), 1,20 (2-CH₃), 1,18 (10-CH₃), 1,13 (12-CH₃), 1,13 (8-CH₃), 1,07 (4CH₃), 0,88 (15-CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 177,0 (C-1), 174,3 (C-9), 102,9(01'), 95,1 (C-1“),

80,1 (C-5), 78,6 (C-6), 77,9 (C-4“), 77,2 (C-3), 76,7 (013), 74,0 (C-12), 72,6 (C-3“),

70,4 (C-2'), 70,1 (C-11), 68,7 (C-5'), 65,4 (C-3'), 65,2 (C-5“), 51,5 (6-OCH3), 49,1 (3“-OCH₃), 45,4 (C-2), 42,6 (C-7), 42,1 (C-4), 41,8 (C-10), 40,6 (C-8), 40,0 /3'N(CH₃)₂/, 34,5 (C-2“), 28,3 (C-4'), 23,5 (6-CH3), 21,3 (C-14), 21,2 (12-CH₃), 21,1 (5' CH₃), 21,1 (3“-CH₃), 17,9 (5“-CH₃), 15,8 (8-CH₃), 14,8 (2-CH₃), 10,8 (15-CH₃), 9,2 (10-CH₃), 9,1 (4-CH₃).

Příklad 4

3-dekladinosyl-3-oxy-6-0-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A

Sloučenina z příkladu 2 (1,5 g, 0,002 mol) se rozpustí v 0,25N kyselině chlorovodíkové (40 ml) a roztok se nechá stát 24 hodin při teplotě místnosti.

K reakční směsi se přidá methylenchlorid (30 ml) (pH 1,8) a pH směsi se upraví na 9,0 koncentrovaným amoniakem, vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát větším množstvím methylenchloridu (30 ml). Spojené organické extrakty se promyjí 10% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom se odpaří a získá se 1,3 g surového produktu, který, je-li to vhodné se čistí sloupcovou chromatografii na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanolkoncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5. Z 0,9 g surového produktu se izoluje 0,65 g chromatograficky homogenního 3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9ahomoerythromycinu A s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,152, ethylacetát-(n-hexan)-diethylamin, 100:100:20

IR (KBr) cm¹: 3438, 2973, 2939, 2879, 2788, 1702, 1658, 1535, 1458, 1373, 1329, 1270, 1173, 1112, 1050, 985, 958, 937.

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ: 7,16 (9a-CONH), 4,63 (H-13), 3,81 (H-5), 4,45 (H-1'), 4,13 (H-10), 3,78 (H-3), 3,55 (H-5'), 3,30 (6-OCH₃), 3,25 (H-2'), 3,16 (H-11), 2,66 (H 2), 2,51 (H-3'), 2,39 (H-8), 2,26/3'-N(CH₃)₂/, 2,05 (H-4), 1,92 (H-14a), 1,84 (H-7a), 1,68 (H-4'a), 1,57 (H-14b), 1,43 (H-7b), 1,38 (6-CH₃), 1,33 (2-CH₃), 1,26 (5'-CH₃), • · • · · · »· ··

1,26 (H-4'b), 1,20 (10-CH₃), 1,12 (12-CH₃), 1,11 (8-CH₃), 1,01 (4-CH₃), 0,91 (15CHa).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 179,3 (C-1), 176,9 (C-9), 106,4 (C-1 j, 88,1 (C-5), 79,1 (C-6), 78,7 (C-13), 78,0 (C-3), 73,8 (C-12), 73,9 (C-11), 70,2 (C-2 j, 69,7 (C-5'), 65,4 (C-3'), 49,9 (6-OCH₃), 45,6 (C-10), 43,9 (C-2), 40,8 (C-7), 39,9 /3'-N(CH₃)₂, 35,6 (C4), 32,8 (C-8), 27,8 (C-4'), 20,9 (5'-CH₃), 20,5 (C-14), 18,3 (6-CH3), 17,4 (8-CH3),

15,8 (I2-CH3), 15,9 (2-CH₃), 14,8 (IO-CH3), 10,7 (15-CH₃), 7,5 (4-CH₃).

Příklad 5

3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A

Ze sloučeniny (1,5 g, 0,002 mol) příkladu 3 se získá, podle postupu popsaném v příkladu 4, 1,2 g surového produktu, který, je-li to vhodné se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelové koloně za použití systému methylenchlorid-methanolkoncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5 a získá se chromatograficky homogenní 3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,195, chloroform-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 6:1:0,1

IR (KBr) cm¹: 3438, 2974, 2939, 2788, 1733, 1648, 1535, 1458, 1378, 1263, 1165, 1113, 1075, 1050, 985, 958, 937.

¹H NMR (300 MHz, CDCb) δ: 5,58 (9a-CONH), 5,09 (H-13), 4,38 (H-1'), 3,76 (H-5), 3,92 (H-8), 3,80 (H-3), 2,64 (H-2), 3,54 (H-5 j, 3,47 (H-11), 3,25 (H-2'), 2,11 (H-4), 3,12 (6-OCH3), 2,48 (H-3'), 2,38 (H-10), 2,25/3'-N(CH₃)₂/, 1,94 (H-14a), 2,11 (H-7a), 1,66 (H-4 a), 1,51 (H-7b), 1,50 (H-14b), 1,31 (2-CH₃), 1,39 (6-CH3), 1,12 (4-CH₃), 1,26 (5'-CH₃), 1,26 (H-4'b), 1,20 (10-CH₃), 1,25 (8-CH₃), 1,13 (12-CH₃), 0,88 (15CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 176,0 (C-1), 174,4 (C-9), 106,1 (C-1 j, 89,6 (C-5), 77,3 (C-6), 75,8 (C-13), 78,3 (C-3), 74,3 (C-12), 70,3 (C-11), 69,9 (C-2'), 69,4 (C-5'), 64,9 (C-3 j, 49,7 (6-OCH₃), 42,1 (C-10), 43,8 (C-2), 41,7 (C-7), 39,9 /3'-N(CH₃)₂/, 35,2 (C4), 42,4 (C-8), 27,4 (C-4'), 22,3 (5'-CH₃), 20,9 (C-14), 20,4 (6-CH₃), 20,5 (8-CH₃), 15,7 (I2-CH3), 15,2 (2-CH₃), 9,5 (IO-CH3), 10,1 (15-CH₃), 7,50 (4-CH₃).

Příklad 6

3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A 2'-0-acetát

K roztoku 3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A (0,750 g, 0,0012 mol) z příkladu 4 v methylenchloridu (25 ml) se přidá hydrogenuhličitan sodný (0,440 g, 0,0052 mol) a anhydrid kyseliny octové (0,128 ml, 0,0013 mol) a směs se zahřívá 3 hodiny při teplotě místnosti. K reakční směsi se přidá nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (30 ml), vrstvy se oddělí a vodná vrstva se opět extrahuje methylenchloridem (2 x 20 ml). Spojené organické extrakty se promyjí postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu a vodou a odpaří se a získá se 0,750 g surového produktu uvedeného v názvu s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,403 chloroform-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 6:1:0,1

IR (KBr) cm'¹: 3455, 2974, 2940, 2880, 2787, 1748, 1702, 1658, 1540, 1459, 1376,

1239, 1173, 1112, 1061, 986, 958, 937, 904. .

Příklad 7

3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A2'-O-acetát

K roztoku 3-dekladinosyl-3-oxy-6-0-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycinu A (1,5 g, 0,0024 mol) z příkladu 5 v methylenchloridu (40 ml) se přidá hydrogenuhličitan sodný (0,88 g, 0,01 mol) a anhydrid kyseliny octové (0,250 ml, 0,0025 mol) a potom se podle postupu popsaném v příkladu 6 získá 1,4 g sloučeniny uvedené v názvu s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,423 chloroform-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 6:1:0,1

IR (KBr) cm'¹: 3394, 2972, 2939, 2784, 1736, 1649, 1542, 1459, 1376, 1262, 1165, 1085, 1059, 986, 958, 904.

Příklad 8 • · • · • · · tf tf· • tf tftf • · ·

3-dekladinosyl-3-oxo-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycin A

K roztoku 3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-9a-aza-9a-homoerythromycinu A 2'-Oacetátu (0,76 g, 0,0012 mol) z příkladu 6 v methylenchloridu (15 ml) se přidá dimethylsulfoxid (1,27 ml) a N,N-dimethylaminopropylethylkarbodiimid (1,335 g, 0,007 mol). Reakční směs se ochladí na 15 °C a potom se opatrně a po kapkách přidá během 30 minut za míchání a při udržování této teploty roztok pyridiniumtrifluoracetátu (1,37 g, 0,007 mol) v methylenchloridu (5 ml). Teplota reakční směsi se postupné zvýší na teplotu místnosti, míchání pokračuje další 3 hodiny a reakce se ukončí přidáním nasyceného roztoku NaCl (20 ml) a methylenchloridu (20 ml). Po alkalizaci reakční směsi na pH 9 použitím 2N NaOH se směs extrahuje CH2CI2, organické extrakty se postupně promyjí nasyceným roztokem NaCl, NaHCO3 a vodou a potom se suší nad K2CO3. Po filtraci a odpaření methylenchloridu za sníženého tlaku se získá 0,800 g olejovitého zbytku. Olejovitý zbytek se podrobí methanolýze (30 ml methanolu) v průběhu 24 hodin a při teplotě místnosti. Methanol se odpaří za sníženého tlaku a získaný zbytek (0,625 g) se čistí nízkotlakou chromatografii na silikagelové koloně za použití rozpouštědlového systému dichlormethan-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 90:9:0,5. Odpařením spojených extraktů s Rf 0,235 se získá chromatograficky homogenní produkt uvedený v názvu s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Rf 0,235, methylenchlorid-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 90:9:0,5 IR (KBr) cm'¹: 3438, 2975, 2939, 2878, 2787, 1744, 1655, 1530, 1458, 1380, 1340, 1304, 1169, 1111, 1075, 1051, 986, 959, 940.

¹H NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 6,63 (9a-CONH), 4,64 (H-13), 4,49 (H-5), 4,41 (H-1'), 4,20 (H-10), 3,90 (H-2), 3,64 (H-5'), 3,34 (H-11), 3,20 (H-2'), 3,07 (6-OCH3), 3,02 (H4), 2,51 (H-3'), 2,30 (H-8), 2,27/3'-N(CH₃)₂/, 1,94 (H-14a), 1,94 (H-7a), 1,69 (H-4'a), 1,63 (H-14b), 1,42 (H-7b), 1,40 ,(2-CH₃), 1,30 (5'-CH₃), 1,29 (4-CH₃), 1,26 (6-CH3), 1,25 (H-4'b), 1,22 (12-CH₃), 1,19 (IO-CH3), 1,10 (8-CH3), 0,91 (15-CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 206,8 (0-3),177,3 (C-1), 173,8 (C-9), 102,6 (C-1'),

79,3 (C-13), 78,4 (C-6), 74,4 (C-5), 73,9 (C-12), 73,1 (C-11), 70,0 (C-2'), 69,1 (C-5'),

65,5 (C-3'), 50,1 (6-OCH3), 49,0 (C-2), 46,2 (C-4), 45,3 (C-10), 40,3 (C-7), 40,0 /3'• · • ·

N(CH₃)₂/, 34,6 (C-8), 28,3 (C-4'), 21,0 (6-CH₃), 20,7 (C-14), 19,6 (5'-CH₃), 18,6 (8CH₃), 15,9 (12-CH₃), 14,1 (2-CH₃), 13,9 (10-CH₃), 13,9(4-CH₃), 10,7 (15-CH₃).

Příklad 9

3-dekladinosyl-3-oxo-6-0-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycin A

K roztoku 3-dekladinosyl-3-oxy-6-O-methyl-8a-aza-8a-homoerythromycinu A 2'-Oacetátu (1,4 g, 0,0022 mol) z příkladu 1 v methylenchloridu (30 ml) se přidá dimethylsulfoxid (2,5 ml) a N,N-dimethylaminopropylethylkarbodiimid (2,7 g, 0,014 mol). Reakční směs se ochladí na 15 °C a za míchání a při udržování této teploty se přidá postupně po kapkách během 30 minut roztok pyridiniumtrifluoracetátu (2,7 g, 0,014 mol) v methylenchloridu (10 ml). Podle postupu popsaném v příkladu 8 se získá 1,1 g sloučeniny uvedené v názvu s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

IR (KBr) cm'¹: 3435, 2975, 2939, 2879, 2788, 1746, 1648, 1542, 1458, 1379, 1339, 1302,1166,1111,1076,1052,989,960,918.

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ: 5,89 (9a-CONH), 5,08 (H-13), 4,42 (H-1'), 4,27 (H-5), 4,03 (H-8), 3,78 (H-2), 3,60 (H-5'), 3,58 (H-11), 3,18 (H-2'), 3,05 (H-4), 2,91 (6OCH₃), 2,49 (H-3'), 2,39 (H-10), 2,27/3'-N(CH₃)₂/, 1,96 (H-14a), 1,68 (H-7a), 1,68 (H 4 a), 1,50 (H-14b), 1,41 (2-CH₃), 1,32 (6-CH₃), 1,30 (4-CH₃), 1,25 (5'-CH₃), 1,23 (H4'b), 1,20 (10-CH₃), 1,19(8-CH₃), 1,17 (12-CH₃), 0,88 (15-CH₃).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ: 206,2 (C-3), 170,9 (C-9), 174,6 (C-1), 103,1 (C-1'),

78,2 (C-6), 77,9 (C-5), 77,5 (C-13), 74,1 (C-12), 70,6 (C-11), 70,0 (C-2'), 69,1 (C-5')

65,5 (C-3'), 50,5 (6-OCH3), 50,4 (C-2), 47,6 (C-4), 42,2 (C-10), 42,1 (C-7), 41,6 (C8), 39,9 /3'-N(CH₃)₂/, 28,0 (C-4'), 22,8 (8-CH3), 21,2 (C-14), 20,8 (5'-CH₃), 20,1 (6CH₃), 16,1 (12-CH₃), 15,4 (2-CH₃), 14,4(4-CH₃), 10,5 (15-CH₃), 10,1 (10-CH₃).

Claims (14)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů obecného vzorce I

   CH₃ (I) a jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s anorganickými a organickými kyselinami, kde

   A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo

   A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu,

   R¹ znamená OH skupinu, L-kladinosylovou skupinu vzorce II

   OH OCH₃ ^°K^°S,.^ch3 h₃c nebo společně s R² znamená keton,

   R² znamená atom vodíku nebo společně s R¹ znamená keton, R³ znamená atom vodíku nebo Ci-C4 alkanoylovou skupinu.

   (II) • 4 • ·
2. 2. Ketolid ze třídy 15-členných laktamú podle nároku 1, kde A znamená NH skupinu,

   B znamená C=0 skupinu, R¹ znamená L-kíadinosylovou skupinu vzorce II, R² a R³ jsou stejné a znamenají vodík.

   • · *4 • 44 · • 44 • 4 · · • · · • · · * · • * · ♦ • · · 4 • · · * • · 4 4

   4 · 4 4
3. 3. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená C=O skupinu, B znamená NH skupinu, R¹ znamená L-kladinosylovou skupinu vzorce II, R² a R³ jsou stejné a znamenají vodík.
4. 4. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená NH skupinu, B znamená C=O skupinu, R¹ znamená OH skupinu a R² a R³ jsou stejné a znamenají vodík.
5. 5. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená C=O skupinu, B znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu a R² a R³jsou stejné a znamenají vodík.
6. 6. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená NH skupinu, B znamená C=O skupinu, R¹ znamená OH skupinu, R² je vodík a R³ znamená CiC4 alkanoylovou skupinu.
7. 7. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 6, kde R³ znamená acetylovou skupinu.
8. 8. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená C=O skupinu, B znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu, R² je vodík a R³ znamená C1-C4 alkanoylovou skupinu.
9. 9. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 8, kde R³ znamená acylovou skupinu.
10. 10. Ketolid ze třídy 15-členných laktamů podle nároku 1, kde A znamená NH skupinu, B znamená C=O skupinu, R¹ a R² společně znamenají keton a R³ je vodík.

    • · · φ

    9 9 9 9 · • Φ Φ· • Φ Φ Φ · • Φ Φ Φ

    9 9 9 9 9
11. 11. Ketolid ze třídy 15-členných laktamú podle nároku 1, kde A znamená C=O skupinu, B znamená NH skupinu, R¹ a R² společně znamenají keton a R³ je vodík.
12. 12. Způsob přípravy ketolidu ze třídy 15-členných laktamů obecného vzorce I

    CH₃ (I) a jeho farmaceuticky přijatelné adiční soli s anorganickými a organickými kyselinami kde

    A znamená NH skupinu a B současně znamená OO skupinu, nebo

    A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu,

    R¹ znamená OH skupinu, L-kladinosylovou skupinu vzorce II (II) nebo společně s R² znamená keton,

    R² znamená atom vodíku nebo společně s R¹ znamená keton,

    R³ znamená atom vodíku nebo C1-C4 alkanoylovou skupinu, vyznačený tím, že se 6-O-methylerythromycin A vzorce III

    9 9 9

    9 9 9 • · · • · · • · ♦ · ♦ · ·· • · · · • · ·· • · ♦ · • · · · • · · · podrobí reakci s hydroxylaminhydrochloridem v přítomnosti vhodné anorganické nebo organické báze a získá se směs 9(E)- a 9(Z)-oximů 6-O-methylerythromycinu A vzorce IV

    CH₃ (IV) která, je-li to vhodné, se podrobí separaci na silikagelové koloně za použití systému methylnchlorid-methanol-koncentrovaný hydroxid amonný 90:9:1,5 a získá se

    I · · 1

    I · ♦ 1

    9 9 9 9 chromatograficky homogenní 9(E)-oxim 6-O-methylerythromycin A s Rf 0,446 vzorce

    IVa »· ··

    9 9 · ·

    9 9 99 • 9 9 9

    9 9 9 ·

    9 9 9 9

    OH ^h3c<X..,ch_{3 h} .och₃

    HO,.

    iq'-' CHq ^{3 3} (IVa) a chromatograficky homogenní 9(Z)-oxim 6-O-methylerythromycin A s Rf 0,355 vzorce IVb

    CH₃ (IVb) ··· ··« ·· 99 a potom následuje reakce Beckmanova přesmyku s arylsulfonylhalogenidy, výhodně s p-toluensulfonylchloridem v přítomnosti anorganických bází, výhodně hydrogenuhličitanu sodného, v rozpouštědle nebo rozpouštědlech inertních k reakci, výhodně ve směsi aceton-voda, za získání, v případě 9(E)-oximu 6-Omethylerythromycinu A vzorce IVa, sloučeniny obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu, B znamená C=O skupinu, R¹ znamená L-kladinosylovou skupinu vzorce II a R² a R³ současně znamenají vodík, nebo v případě 9(Z)-oximu 6-Omethylerythromycinu A vzorce IVb, sloučeniny obecného vzorce I, kde A znamená C=O skupinu, B znamená NH skupinu, R¹ znamená L-kladinosylovou skupinu a R² a R³ jsou stejné a znamenají vodík, která se potom podrobí při teplotě místnosti působení zředěné anorganické kyseliny, výhodně 0,25 N kyseliny chlorovodíkové, za získání sloučeniny obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu a R² a R³ současně znamenají vodík, která se potom podrobí reakci selektivní acylace s anhydridy karboxylových kyselin s až 4 atomy uhlíku, výhodně s anhydridy kyseliny octové v inertním rozpouštědle, výhodně v methylenchloridu, za vzniku sloučeniny obecného I kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ znamená OH skupinu, R² je vodík a R³je acetyl, která se potom podrobí oxidaci s diimidy, výhodně s N,Ndimethylaminopropylethylkarbodiimidem v přítomnosti dimethylsulfoxidu a pyridiniumtrifluoracetátu jako katalyzátoru v inertním organickém rozpouštědle, výhodně v methylenchloridu, při teplotě od 10 °C do teploty místnosti, za získání sloučeniny obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O skupinu, nebo A znamená C=O skupinu a B současně znamená NH skupinu,

    R¹ společně s R² znamená keton a R³je acetylová skupina, která se potom podrobí reakci deacetylace v 2'-poloze solvolýzou v nižších alkoholech, výhodně v methanolu při teplotě místnosti, za získání sloučeniny obecného vzorce I, kde A znamená NH skupinu a B současně znamená C=O

    ΦΦ ΦΦ * φ φφ φφ • φ φ φ φ φ φφ φ φ · φ • φ φ ·

    Μ ·· • Φ Φ

    Φ · Φ

    Φ Φ ·

    Φ Φ Φ skupinu, nebo A znamená C=0 skupinu a B současně znamená NH skupinu, R¹ společně s R² znamená keton a R³ je vodík, která, je-li to vhodné, podrobí se reakci s anorganickými nebo organickými kyselinami za vzniku jejich farmaceuticky přijatelných adičních solí.
13. 13. Farmaceutický prostředek užitečný pro léčbu bakteriálních infekcí u lidí a zvířat, vyznačený tím, že obsahuje antibakteriálně účinné množství ketolidu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelných adičních solí podle nároku 1 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem.
14. 14. Způsob léčení bakteriálních infekcí u lidí a zvířat, vyznačený tím, že zahrnuje podání člověku nebo zvířeti, v případě potřeby, antibakteriálně účinného množství ketolidu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelných adičních solí podle nároku 1 v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem.