CZ20002119A3

CZ20002119A3 - Substituované cyklopentany a cyklopenteny účinné jako inhibitory neuraminidasy

Info

Publication number: CZ20002119A3
Application number: CZ20002119A
Authority: CZ
Inventors: Babu S. Yarlagadda; Chand Pooran; John A. Montgomery
Original assignee: Biocryst Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 1998-12-17
Filing date: 1998-12-17
Publication date: 2000-10-11

Abstract

Sloučeniny obecného vzorce (I, II, III), kde substituenty mají specifický význam ajejich farmaceuticky přijatelné soli a způsob jejich přípravy. Sloučeniny jsou inhibitory neuraminidasy viru influenzy a mohou být používány při ošetření pacientů infikovaných virem influenzy.

Description

SUBSTITUOVANÉ CYKLOPENTANY A CYKLOPENTENY ÚČINNÉ JAKO

INHIBITORY NEURAMINIDASY

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových substituovaných cyklopentanů a cyklopentenů a jejich derivátů účinných jako inhibitory neuraminidasy, farmaceutických přípravků obsahujících uvedené sloučeniny účinné při prevenci, ošetření nebo zlepšení virových, bakteriálních a jiných infekcí a způsobů použití uvedených sloučenin. Předložený vynález se také týká nových meziproduktů nebo prekurzorů pro produkci nových substituovaných cyklopentanů a cyklopentenů předloženého vynálezu.

Dosavadní stav techniky

Ačkoliv existuje mnoho dostupných informací, zůstává chřipka velmi ničivým onemocnění lidstva, nižších savců a ptáků. Neexistuje účinná vakcína a jakmile infekce propukne není žádné dostupné ošetření.

Virusy chřipky se skládají z osmi částí jednořetězcové RNA, svinuté do uspořádaného tvaru uvnitř virionu. Každá z částí kóduje jeden z hlavních virových proteinů. Replikační komplex je chráněn membránou skládající, se z matrix proteinu spojeného s lipidovou dvojvrstvou. Špičky dvou povrchových glykoproteinů, hemagglutinin (HA) a enzym neuraminidasa (NA) jsou zapuštěny v lipidové dvojvrstvě. Byly nakloňovány všechny virové geny a byla stanovena 3D struktura povrchových glykoproteinů.

Virusy chřipky se kontinuálně antigenicky obměňují ve dvou povrchových antigenech, HA a NA, tak, že podávané protilátky jsou neúčinné. Z tohoto důvodu nebyly vakcíny a přirozený imunitní systém subjektů účinný. Pozornost je nyní zaměřena na nalezení jiných silných antivirových agens působících na jiných místech virionu. Předložený vynález je zaměřen na nové sloučeniny, které jsou účinné pro inhibování NA (povrchového enzymu viru).

Kromě výše uvedeného viru, má i mnoho dalších organismů také NA a některé z nich také patří mezi hlavní patogeny lidstva a/nebo savců, tzn. Vibraeo Cholerae, Clostridium perfringes, Streptococcus pneumonia, Arthrobacter sialophilas, a další virusy, takové jako virus parachřipky, virus příušnic, virus newcastlovského onemocnění, virus ptačího moru a Sendai virus. Sloučeniny předloženého vynálezu jsou také určeny pro inhibování NA těchto organismů.

• · • · · · ···· ·· · · · · ♦ • · ···· · · · · · · ·· · • · · ··· ···· •· · ·· · ·· ··

Ve virech se NA vyskytuje jako tetramer čtyř zhruba sférických podjednotek a centrálně připojený sloupek obsahující hydrofobní oblast, která je zapuštěna v membráně organismu. Předpokládá se, že NA má několik funkcí. Katalyzuje štěpení α-ketosidové vazby mezi koncovou kyselinou sialovou a přilehlým sacharidovým zbytkem. Odstranění sialové kyseliny sníží viskozitu a zpřístupní tak virus do epiteliálních buněk. NA také ničí HA receptory na hostitelských buňkách, čímž umožní vymývání virových partikulí potomstva z infikovaných buněk.

Výzkum naznačuje, že pro hlavní kmeny chřipky zůstává aktivní centrum chřipkové neuraminidasy podstatně nezměněno. Například srovnání sekvencí podtypu A a podtypu B chřipky ukazuje zachované zbytky s křížovými strukturami a funkčními úlohami. I kdyby by byla sekvenční homologie pouze asi 30%, bylo by zachováno mnoho katalytických částí. Navíc byly determinovány 3D struktury neuraminidasy chřipky A a chřipky B. Superpozice různých struktur ukazuje nápadnou strukturální podobnost aktivního centra. Poněvadž aktivní centrum aminokyselinových zbytků, které byly dosud sekvencovány, je zachováno ve všech známých neuraminidasách chřipky podtypu A, může být inhibitor neuraminidasy, který je účinný proti různým kmenům chřipky podtypu A a/nebo podtypu B, formován na základě 3D struktury neuraminidasy.

Obecně se má za to, že funkce NA spočívá v mobilitě viru do centra a z centra infekcí. Sloučeniny, které inhibují aktivitu neuraminidasy, mohou chránit subjekt proti infekcím a/nebo léčit subjekt při propuknutí infekce. Dalším záměrem předloženého vynálezu je poskytnout způsob používání sloučenin předloženého vynálezu pro ošetření a/nebo vyléčení virové infekce.

Je známo, že analoga kyseliny neuraminové, taková jako 2-deoxy-2,3-didehydro-Nacetylneuraminová kyselina (DANA) a její deriváty, inhibují HA in vitro·, nicméně tyto sloučeniny jsou inaktivní in vivo. Palese and Schulman, In Chemoprophylaxix and Virus Infections of the Upper Respirátory Tract, Vol. 1 (J. S. Oxford, Ed.), CRC Press, 1977, v patentové přihlášce PS 189-205.

Von Itzstein et al. popisuje cyklohexanové analogy α-D-neuraminové kyseliny vzorce:

kde

A je O, C nebo S ve vzorci (a)aN nebo C ve vzorci(b);

substituent R¹ je CO₂H, PO₃H₂, NO₂, SO₂H, SO₃H, tetrazolyl-, CH₂CHO, CHO nebo CH(CHO)₂;

substituent R² je H, OR⁶, F, Cl, Br, CN, NHR⁶, SR⁶ nebo CH₂X, kde Xje NHR⁶ halogen nebo OR⁶;

substituenty R³ a R³ jsou H, CN, NHR⁶, SR⁶, =NOR⁶, OR⁶, guanidino skupina , NR⁶; substituent R⁴ je NHR⁶, SR⁶, OR⁶, CO2R⁶, NO², C(R⁶)3, CH₂CO₂R⁶, CH₂NO₂ nebo CH₂NHR⁶;

substituent R⁵ je CH2YR⁶, CHYR⁶CH2YR⁶ nebo CHYR⁶CHYR⁶CH₂YR⁶;

substituent R⁶ je H, acyl, alkyl, allyl, nebo aryl;

YjeO, S, NH, nebo H;

a jejich farmaceutické soli účinné jako antivirové agens.

Kromě toho jsou určité deriváty benzenu uvedeny v patentové přihlášce US číslo 5,453,533 jako inhibitory neuraminidasy viru chřipky a různé další v patentové přihlášce US 5,602,277. Yamamoto et al. popisuje různé izomery sialové kyseliny jako aktivní inhibitory neuraminidasy v Synthesis of Sialic Acid Isomers With Inhibitory Activity Against Neuraminidase, Tertrahedron Letters, Vol. 33, No. 39, 5791-5794, 1992.

Patentová přihláška WO 96/26933 patřící Gilead Sciences, lne. popisuje určité sloučeniny s 6-členným kruhem jako možné inhibitory neuraminidasy.

Nicméně žádných z těchto odkazů nepublikuje deriváty cyklopentanu a cyklopentenu z předloženého vynálezu.

• · • ·

Podstata vynálezu

První aspekt předloženého vynálezu zahrnuje sloučeniny mající vzorce:

kde U je CH, O nebo S;

Z je-C(R²)(R³), -CH-N(R²)(R³), C(R³)[(CH2)nR²], CH-C(R³)(R⁸)(CH2)nR², C[(CH2)nR²][CH(R³)(R⁸)]-[CH(R³)(R⁸)], C[(R³)][CH[(CH2)nR²](R⁸)];

substituent R¹ je H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH2)nNR¹⁰Rⁿ, (CH2)nORⁿ, (CH2)nSRⁿ nebo (CH2)nhalogen substituent R⁹ je (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂, (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, jejich estery nebo soli;

nebo substituenty R¹ a R⁹ spojeny dohromady reprezentují

S-\ = O. nebo =< >

’ s-f substituent R² je H, NHC(O)R⁵, NHC(S)R⁵, NHSO2R⁵, C(O)NHR⁵, SO2NHR⁵, CH2S(O)R⁵nebo CH2SO₂R⁵;

substituenty R³ a R⁸ jsou individuálně H, (CH2)nC(O)R¹⁰, (CH2)nCO₂R¹⁰, (CH2)mOR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(R¹⁰)m, C(O)N(R¹⁰)m, C(O)N(OR¹⁰)R¹⁰, (CH2)nN(R¹⁰)m, CH(R¹⁰)m, (CH2)n(R¹⁰)m, CH2CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR^I0)CH2OR¹⁰, CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH2CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, C(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, NHR¹⁰, NHC(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, (CH2)m-X-W-Y, CH₂CH(X-WY)CH₂OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(OR¹⁰), CH(OR¹⁰)CH(X-WY)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2(X-W-Y), CH₂CH(X-W-Y)CH₂NHR¹⁰, CH(X-WY)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(NHR¹⁰), CH(OR¹⁰)CH(X-W-Y)CH2NHR¹⁰ nebo CH(NHR¹⁰)CH2(X-W-Y);

o 2 3 8 za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentu R , R a R je jiný než H;

··· · · · ···· • · · · · · · ···· • · ···· ·· ·· ·· · · · • · · ··· ···· substituent R⁴ je H, (CH2)nOH, (CH2)nORⁿ, (CH2)nOC(O)Rⁿ, (CH2)nNHC(NR¹¹)NHR¹¹, (CHzjnNR^R¹¹, (CH2)nNH₂, (CH₂)nC(=NH)(NH₂), (CH₂)nNHC(=NR¹¹)NH2, (CH2)nNHC(=NR⁷)NH2, (CH₂)nCN, (CH₂)nN₃, C(=NH)NH₂, C(NR⁷)NH2 nebo C(NRⁿ)NH2;

substituent R⁵ je H, nižší alkyl, cykloalkyl, alkyl substituovaný halogenem, aryl, substituovaný aryl nebo CF³;

substituent R⁷ je H, (CH₂)nOH, (CH₂)nCN, (CH₂)nNH₂ nebo (CH₂)nNO₂;

substituent R¹⁰ je H, nižší alkyl, nižší alkylen, rozvětvený alkyl, cyklický alkyl, aromatické (CH₂)n, substituované aromatické (CH₂)n nebo pokud index m je 2 mohou být obě R¹⁰skupiny také spojeny dohromady za vzniku N-substituovaného heterocyklického kruhu nebo jiného 5-členného nebo 6-členného heterocyklického kruhu;

substituent R¹¹ je nižší alkyl, rozvětvený alkyl, aromatické (CH₂)m, SO₂R¹⁰, C(O)R¹⁰ nebo C(O)OR¹⁰;

substituenty R¹² a R¹³ jsou H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH2)nNR^I0R' ’, (CH^nOR¹', (CH2)nF, (CH₂)nOC(O)R^H, (CH₂)nNHC(O)R¹¹ nebo X-W-Y;

index m je 1 nebo 2;

index n je 0 - 4;

index p je 0 nebo 1;

XjeO, S, CH₂nebo NH;

W je vložená skupina tvořená řetězcem 1 až 100 atomů a popřípadě také obsahující substituované atomy uhlíku a/nebo atomy dusíku a případně zahrnující atomy kyslíku a atomy síry; a

Y je H, OH, SH, NH₂, CH=O, CH=CH₂, CO₂H, CONHNH₂ nebo chráněná forma těchto funkčních skupin;

• · · ·· · · * · « • · · · · · · ·<··· • · ···· ·· ·· ·· · · · • · · · · · · · · · ········ ··

Předložený vynález také zahrnuje přípravky pro inhibici neuraminidasy viru chřipky obsahující farmaceuticky přijatelný nosič a účinné množství výše definované sloučeniny pro inhibování neuraminidasy viru chřipky.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká způsobu inhibice viru chřipky, který zahrnuje aplikování, při potřebě takového ošetření, výše definované sloučeniny v účinném množství pro inhibování neuraminidasy viru chřipky.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká ošetření infekce způsobené virem chřipky, který zahrnuje aplikování, při potřebě takového ošetření, výše definované sloučeniny v účinném množství pro inhibování neuraminidasy viru chřipky.

Další aspekt předloženého vynálezu zahrnuje meziprodukty reprezentované následujícími vzorci:

R₄ Rg kde substituenty R⁴ a R⁹ jsou výše definovány; a

kde substituent R¹⁴ je individuálně H, O, (CtbjnCChH, (CH₂)nSO3H, (CH₂)nPO3H₂, ^s\ (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃-, nebo jejich soli a estery a za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentů R¹⁴ je H a substituenty R³ a R⁴ jsou definovány výše.

Nej lepší a různé modifikace způsobů provedení vynálezu

Aspekt předloženého vynálezu zahrnuje sloučeniny mající vzorec:

·· ·

R₄ ^R13 kde U je CH, O nebo S;

Z je-C(R²)(R³), -CH-N(R²)(R³), C(R³)[(CH2)nR²], < [CH(R³)(R⁸)]-[CH(R³)(R⁸)], C[(R³)][CH[(CH2)nR² í-C(R³)(R⁸)(CH2)nR², C[(CH2)nR²]-⁸)1;

substituent R¹ je H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH2)nNR^l0I<¹¹, (CH2)nORⁿ, (CH2)nSRⁿ nebo (CH2)nhalogen substituent R⁹ je (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂, (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, jejich estery nebo soli;

nebo substituenty R¹ a R⁹ spojeny dohromady reprezentují

S—\ = o, nebo =<_s_/ substituent R² je H, NHC(O)R⁵, NHC(S)R⁵, NHSO2R⁵, C(O)NHR⁵, SO2NHR⁵, CH2S(O)R⁵nebo CH2SO₂R⁵;

substituenty R³ a R⁸ jsou individuálně H, (CH2)nC(O)R¹⁰, (CH2)nCO₂R¹⁰, (CH2)mOR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(R¹⁰)m, C(O)N(R¹⁰)m, C(O)N(OR¹⁰)R¹⁰, (CH2)nN(R¹⁰)m, CH(R¹⁰)m, (CH2)n(R¹⁰)m, CH2CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH2CH(OR^w)CH2NHR¹⁰? CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, C(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, NHR¹⁰, NHC(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, (CH2)m-X-W-Y, CH₂CH(X-WY)CH₂OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(OR¹⁰), CH(OR¹⁰)CH(X-WY)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2(X-W-Y), CH₂CH(X-W-Y)CH₂NHR¹⁰, CH(X-WY)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(NHR¹⁰), CH(OR¹⁰)CH(X-W-Y)CH2NHR¹⁰ nebo CH(NHR¹⁰)CH2(X-W-Y);

za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentů R², R³ a R⁸ je jiný než H;

substituent R⁴ je H, (CH2)nOH, (CH2)nOR^u, (CH2)nOC(O)Rⁿ, (CH₂)nNHC(NRⁿ)NHRⁿ, (CH₂)nNR¹⁰Rⁿ, (CH2)nNH2, (CH2)nC(=NH)(NH2), (CH2)nNHC(=NRⁿ)NH2, * · · • φ * φ φφφ φ φ φφφφ φ ♦ · φ φφ · φ» «φφφ φ φ φ φφφ φφφ φφφ • φ φ φ φ · · φ » φ φ « φ φ · • φ φ φ φ • ♦ φ φ φφ φφ (CH₂)nNHC(=NR⁷)NH2, (CH2)nCN, (CH2)nN3, C(=NH)NH2, C(NR⁷)NH2 nebo

C(NRⁿ)NH₂;

substituent R¹⁰ je H, nižší alkyl, nižší alkylen, rozvětvený alkyl, cyklický alkyl, aromatické (CH₂)n , substituované aromatické (CH₂)n nebo pokud index m je 2 mohou být obě skupiny R¹⁰ také spojeny dohromady za vzniku N-substituovaného heterocyklického kruhu nebo jiného 5-členného nebo 6-členného heterocyklického kruhu;

substituenty R¹² a R¹³ jsou H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH^nNR^R¹¹, (CH2)nOR^H, (CH2)nF, (CH2)nOC(O)R^H, (CH2)nNHC(O)R'¹ nebo X-W-Y;

index m je 1 nebo 2;

index n je 0 - 4;

index p je 0 nebo 1;

XjeO, S, CH₂, neboNH;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

• w * • φ * φ · φ » • φ ···· • · ·

9 • φ ···

9 » » « · • · · · • · · « · » • Φ ··

Φ 9 9 · * · · * » · · * Φ • · · Φ # φ r γ kde substituenty R⁴ a R⁹ jsou výše definovány; a

kde substituent R¹⁴ je individuálně H, O, (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂,

S_ (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, “V nebo jejich soli a estery a za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentů R¹⁴ je H a substituenty R³ a R⁴ jsou definovány výše.

Nižší alkylové skupiny obsahují 1 až 8 atomů uhlíku a výhodně 1 až 3 atomy uhlíku a mohou být přímé nebo rozvětvené nebo cyklické, nasycené, alifatické, uhlovodíkové skupiny.

Příklady vhodných alkylových skupin zahrnují methyl, ethyl a propyl. Příklady rozvětvených alkylových skupin zahrnují isopropyl a t-butyl. Příklady vhodných cyklických alifatických skupin typicky obsahují 3 až 8 atomů uhlíku a zahrnují cyklopentyl a cyklohexyl. Aromatické nebo arylové skupiny jsou výhodně fenylem nebo alkylem substituované aromatické skupiny(aralkyly), takové jako fenyl-Ci.₃-alkyl, takový jako benzyl nebo halogenem substituované arylové skupiny.

Příklady substituovaných cykloalkylových skupin zahrnují cyklické alifatické skupiny typicky obsahující 3 až 8 atomů uhlíku v kruhu substituované alkylovými skupinami, které typicky mají 1 až 6 atomů uhlíku a/nebo hydroxy skupinami. Běžně jsou přítomny 1 nebo 2 substituované skupiny.

Estery jsou typicky nižší alkylestery mající 1 až asi 12 atomů uhlíku a výhodně 1 až 3 atomy uhlíku a arylestery obsahující 6 až 14 atomů uhlíku. Alkylestery mohou být rozvětvené, nerozvětvené nebo cyklické nasycené uhlovodíkové řetězce.

• e · ·

Příklady některých alkylesterů zahrnují methylester, ethylester, propylester, isopropylester, t-butylester, cyklopentylester a cyklohexylester. Arylestery jsou výhodně fenylem nebo alkylem substituované aromatické estery (alkaryly) zahrnující fenyl substituovaný C 1.3-alkylem, takový jako benzyl.

Nižší alkylenová skupina může být rozvětvený, nerozvětvený nebo cyklický nenasycený uhlovodíkový řetězec obsahující 2 až 8 atomů uhlíku a výhodně 2 až 3 atomy uhlíku. Příklady alkylenových skupin zahrnují vinyl, 1-propenyl, allyl, isopropenyl, 2-methyl2-propenyl a cyklopentenyl.

N-heterocklické kruhy obsahují 3 až 7 atomů v kruhu. Heterocyklické kruhy mohou být substituované jako například nižší alkylovou skupinou. Příklady vhodných heterocyklických skupin zahrnují pyrrolidino skupinu, azetidino skupinu, piperidino skupinu,

3,4-didehydropiperidino skupinu, 2-methylpiperidino skupinu a 2-ethylpiperidino.

Vhodné vložené skupiny W zahrnují, ale není to nikterak limitováno, lineární peptidy, oligosacharidy, polyoly, polyethylenglykolové skupiny, uhlovodíkové skupiny a uhlovodíkové skupiny spojené dohromady s atomy kyslíku a síry nebo s funkční skupinou karbonylu, amido, močoviny nebo hydrazidu. Vložená skupina W může také obsahovat kombinace těchto různých skupin a může mít rozvětvený nebo nerozvětvený řetězec.

Vhodné chránící skupiny pro funkční skupinu Y zahrnují, ale není to nikterak limitováno, estery skupin OH, SH, CO₂H, karbamáty skupin NH₂ a CONHNH₂ a acetaly skupiny CH=O.

Termín „uhlovodíková skupina“, jak je používán zde, se vztahuje na nasycené a nenasycené rozvětvené nebo nerozvětvené uhlovodíkové skupiny, včetně arylových skupin a na kombinace těchto skupin.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin vzorce (I) zahrnují takové sloučeniny, které jsou odvozené od farmaceuticky přijatelných anorganických a organických kyselin a zásad.

Příklady vhodných kyselin zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, bromovodíkovou, sírovou, dusičnou, chloristou, fumarovou, maleinovou, orthofosforečnou, glykolovou, mléčnou, •···· · · • · methansulfonovou, mravenčí, benzoovou, malonovou, 2-naftalensulfonovou, trifluoroctovou a benzensulfonovou.

Soli odvozené od příslušných bází zahrnují zásady, takové jako sodné a amonné.

Je samozřejmé, že předložený vynález se také vztahuje na všechny optické izomery a prostorové izomery sloučenin předloženého vynálezu.

Příklady některých jednotlivých vzorců, které jsou v rozsahu předloženého vynálezu, zahrnují:

« · • · • · • · · • · · · • ···· · · ·· ·

^R4 ^13 »· ·· • · · • · · • · · • · · »· ♦ · • · • · · · • ···· · ·

Systém označení, který zde byl použit pro sloučeniny typu:

C-1 je následující:

V některých případech bylo použito označení a a β kvůli tomu, aby bylo jasné, že jsou tyto skupiny pozici trans. Toto jsou případy, kde jsou více než dva substituenty ns, cyklopentanovém kruhu a pouze dva jsou fixní.

V kondenzovaném cyklopent[d]isoxazolovém systému je číslování následující:

Příklady některých specifických sloučenin a meziproduktů podle předložené přihlášky jsou přesně určeny v příkladech 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,13,14, 15, 16, 17,

18. 19. 20. 21. 22. 23, 24. 25. 26, 27, 28, 29. 30, 31. 32, 33. 34, 35, 36, 37. 39. 40, 41, 42, 43.

......

44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68,

69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93,

94, 95, 96, 97; 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109,110, 111, 112, 113,

114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132,

133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151,

152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170,

171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189,

190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208 a 209.

Následující schémata ilustrují způsoby přípravy sloučenin předloženého vynálezu

SCHÉMA 1

P=c

Br

7(+)

6{t,

5(t)

ISOMER A 8(+)

ISOMER B 9 {+) ♦

.. · ·· ···· • · · · · • · · · · · ······· · · • · · · · ·· · ·· ♦

SCHÉMA 2

AcHN

13(+)

12(+) ·· ·· • · · · • · · · • · · · • ♦ · · • · «· • · · ·

SCHÉMA 3 > · · • · ·

I · · · · · » · · ·· ·

AcHN

(+) ch₂och₂ch₃ ch₂och₂ch₃

AcHNCO₂CH₃ +

NHBoc (t)

AcHN' ^2^^c°2^CH3 nh₂

15( t)

NH, (t) <t) • · · · • · · ·

»··* · ·

AcHN

CO₂Et - —CO₂Et

NHBoc 4 (t)

(t)

SCHÉMA 4

CO₂Eí

NHBoc (t)

__ SMe ACHN-^W__SM0 i /\ SMe 1—' OH

• · • · · · • *··· * * »

SCHÉMA 5

27(+)

28(+) «999 • · · • 9 9 9 · ♦···

9 9

9« 9 • 9 · · • 9 9 · * * · · · · » 9 9 9

9· ··

SCHÉMA 6

(t)

ΝΗ„ (t)

AcHN

SCHÉMA 7

37(+) • ·

SCHÉMA 8 • * « ♦ ♦ · • · · · • ···· · · • · * ·· · • · '^τ · « · * * • · « · · • · · · · · • · · · · • ·· «·

38(+)

39(+)

AcHN

(t) (+) (_t) *

► 9 9 • 9 ·

9

9999999 · • «9 9

9 9 «

9 9 9 • 9 9 · · · ·

Ο^-

SCHÉMA 9 cope co_?x o₂nch₂r

PhN=C=O

VO \ ' C

COjX

43,44 (f) (±)

46-52 (*)

AcHN-_x^R

Η0^\

N_1 CO„H

62-71 (+) i

AcHN

n₃

76-79 (+)

AcHN

CO/

AcHN-^x-^R

NH₂

80-83 (Ό

V—J CO₂H nh₂

84-87 (t) ·· · « • ♦ • tttt • ···· > tttt 1 t 9 9 <

·· ··

45,46, 53, 54, 62-64, 72, 73, 76, 77, 80, 81, 84. 85 R= /\/\ 47, 55, 56, 65, 66. 74, 78, 82, 86 R= —

49, 58, 68 R ./-o

48, 57, 67. 75, 79, 83, 87 R=

50, 59, 69 R=

51, 60, 70 R= —<

52, 61,71 R=

53, 55, 62, 65, 72, 76, 80, 84: izomer A na C-1’

54, 56-61, 64, 66-71, 73-75, 77-79, 81-83, 85-87: izomer BnaC-1* : směs izomerů A a B na C-1'

44,49, 50, 51, 52, 58, 59, 60, 61

X= CH₃ ve sloučeninách:

43,. 45, 46, 47, 48, 53,54, 55, 56, 57, 72,

73, 74. 75, 76, 77, 78, 79,80, 81, 82, 83

X= C₂H₅ve sloučeninách:

44, 49, 50, 51, 52, 58, 59, 60, 61

• · ♦ ♦

SCHÉMA 10

(±) 91 (+) 90 (±) \

(±)

88-93: izomer Β naC-Γ

• * • · ···· *

SCHÉMA 11 ·« ·# ·

• · • · «·

80-83(+)

NBoc

94-97(1)

98-100(+) /

ŇBoc 101 (1)

102-105(1)

80, 81,94, 95, 98, 99,102,103 R=

82, 96, 100, 104 R=~-£

83, 97,101,105 R=

80, 94, 98,102 : izomer AnaC-ť

81-83, 96, 97, 99-101,103-105: izomer BnaC-1’

SCHÉMA 12

AcHN- '^R ~ CO₂Me

P

NH,

NBoc 106 (+) (+)

R= /S/\

92,106-108: izomer B na C-Γ ·« · • · · • · · ♦ • · ···· • · · ·· 9

107 (t)

·« ·· ·9 · « * 9 9 9

9 9 9

99

108 (±)

9

SCHÉMA 13 «· » • « · • · · » • ♦ ·♦·♦ ♦ · · ♦ « 9 ·· ·· • ♦ · * • · 9 9 ·9 9

9 9 9 ·· 99

109-111 112-114

BocHN C

120-124

109,112:(-)

110,113:(+)

111,114: (±)

115,120:(-)X = Me 116,121 :(-)X = Et 117,122:(+) X = Et 118,123:(±)X = Me 119,124: (±)X= Et

125 :(+)X = Me,R =	131 :(±)X=Me,R=
126 : (+) X = Me, R	132: (±)X = Me, R=
127:(+)X=Et, R = “C	133:(±)X = Me, R=
128 : (+) X = Et, R =~	134 : (±) X = Et, R = -Q
129: (-)X = Et, R=	135 : (i) X = Et, R =
130 : (±) X = Me, R = —£	136 : (±) X = Et, R » —(

• · • φ

Φ Φ · ··

SCHÉMA 14

• · • · · φ Φ··Φ

160-167

149-159

137,149:(-) X = Me,R = ,R’ = H	160:{-)R = —{2
138,150: (-)X = Me, R= , R' = H	161 :(+)R=-(2
139, 151: (-) X » Et, R = , R' = H	162:(±)R=
140 : (-) X= Et, R = ,R' = H	163: (±) R =
141, 152:(+) X = Et,R = ,R- = H	164:(±)R = ^C
142,153:(±)X = Me, R= —(2.R' = H	165:(±)R=
143,154:(±)X = Me, ^{R = -}C^ ^,R=H	166:(±)R=-
144,155:WX = Me,R = _XZ ,R' = Ac	167: (±) R - -(

145,156: (±)Χ = Me, R = ,R' = Ac

146,157:(±)X = E1,R = “C ·^Η' = ^Η147,158: (*) X = Et, R = , R' = H

148, 159: (±) X = Et, R = —( ,R' = H ·· »* • · *

SCHÉMA 15

H_řN COjX

R(Boc)N_x^j.NBoc

150, 151,153,155,156

RHhk .NH

HN C0.,H ^R ^HN'Sjíř^NH

HN CO₂X

Y

R Ή

NHAc

178-183	173-177
168,173:(-) X = Et,R = —(2 ,R* = H,R=H 169,174: (±)X = Me, R = —(ý , R' = H, R” = H	178:(-) R= —(2 ,R“ = H 179:(±)R = —(2.R' = ^h 180:(±) R= ,R” = H
170,175:(±)Χ = Μθ,R= ,R' = Ac,R“ = H	181 :(±) R= ,R“ = H
171,176: (±) X = Me, Ft = -Y^ ,R' = Ac,R“ = H	182:(-) R= —(2 .R = CH₃
172,177:(-) X = Et,R = . R'= H, R = CH,	183:(-) R= —C^.R'' = H

• Φ · * « » t · ♦ φ • φ φφφφ φ · · *« <««· φ φ · φφφ

ΦΦ φφ φ · · φ ·> Φ Φ

Φ Φ Φ · ·

Φ Φ Φ ·

ΦΦ Φ·

SCHÉMA 16

137-140,142

r'

199-200 \

194-198

184,189,194: (-) Χ= Μβ, R= “C. 185,190,195: (-) Χ= Me, R= < 186,191,196: (-) X = Et, R =

187,192,197: (-) Χ= Et, R= <

188,193,198: (-) X=Me, R= ~C 199: (-)R= -<2 200: (±) R=~C

SCHÉMA 17 • · · · · • · · · · ϊ _Λ ···♦··· · · ·· «· • · · · · · · • 9 · · « · » * • tt ··

R^BocJN^^NBoc

Η₂Ν CO..X

NH CO₂X

NHAc

201-204

FTHN^NH

HN CO-X

NHAc

209-212

R”HN^ NH

201.205: (-)X = Et, R= -(2·Η” = ^Η

202,206: (-) X = Et. R = —(2^ ·^Β ^{= Η}203,207: (±) X = Me. R = -ζ\Η·«Η

204,208: (-) X = Et, R = .^R“ = CH₃

209:(-)R = ,R“ = H

210:(-)R= —(^ , R = H

211 :(*)R = —C ·^Η'^,,ιΗ

212 :<-)R=-£,R =

CH, ····

SCHÉMA 18

BocHN • · • · <

• ···· · · • · · ·· * ·· * • e « • < · • · ι • * «

Φ· ··

BocHN CO-CH,

NHAc

218 \

H,N. ^NH

T

Kromě toho mohou být důležité meziprodukty pro předložený vynález, sloučeniny 125

-136, připraveny reakcí cyklopentenu vzorce

BocHN

CO₂X

s příslušným nitriloxidem (vyrobený z fenylisokyanátu a nitroalkanu za přítomnosti triethylaminu nebo z chloroximu a triethylaminu) k získání cyklopent[d]isoxalového kruhu. Produkt se pak může hydrogenovat za přítomnosti PtO₂ v alkoholu společně s HCI k otevření kruhu a formování korespondující amino sloučeniny.

Také v patentové přihlášce US číslo 60/085,252 podané 13.5.1998 „Preparation of substituted Cyclopentane and Cyclopentene Compounds and Certain Intermediates“ na kterou uplatňuje nárok Chand a spol., lze nalézt způsob přípravy sloučenin předloženého vynálezu, veškeré údaje jsou zde uvedeny jako odkaz.

Následující nikterak nelimitující příklady jsou zde uvedeny pro ilustraci předloženého vynálezu.

Příklady provedení

Příklad 1 (±) 4-Azidocyklopent-2-en-l-on (2, schéma -1)

n₃

Do roztoku azidu sodného (2,12 g, 32,6 mmol) v DMF (15 ml) zchlazeného na teplotu 0°C se přidává po kapkách za stálého míchání po dobu 5 minut 4-bromcyklopent-2-en-l-on (1, 3,5 g, 21,7 mmol, připravený způsobem podle DePuy et. al., J. Org. Chem. 29, 3503,

1964) v DMF (5 ml). Reakční směs se míchá při teplotě 0°C po dobu 30 minut a zdředí se ethylacetátem (20 ml), pak se promyje vodou (2 x 20 ml) a solankou (2x 20 ml), suší (MgSO₄) a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu k získání olejovitého zbytku. Purifíkace zrychlenou chromatografií(„flash chromatography“) na sloupci silikagelu (10 - 15% ethylacetát v hexanech) poskytne 1,9 g (71 %) sloučeniny 2 ve formě oleje.

• · · · · ·

Td NMR (CDCI3): δ 2,35 (dd, J = 18,6 a 2,4 Hz, 1 H), 2,77 (dd, J = 18,6 a 6,6 Hz, 1 H), 4,67 (dd, J = 4,9 a 2,6 Hz, 1 H), 6,35 (dd, J = 5,6 a 1,5 Hz, 1 H), 7,54 (dd, J = 5,5 a 2,4 Hz, 1 H).

Příklad 2 (±) 3β-[ 1Acetylamino-1 '-bis(ethoxykarbonyl)]methyl-4a-azidocyklopentan-1 -on (3, schéma -1)

Do roztoku diethylacetamidomalonátu ( 1,25 g, 5,7 mmol) v ethanolu (10 ml) pod atmosférou dusíku se přidávají čerstvě nasekaný kovový sodík (0,03 g, 1,4 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě dokud se veškerý kovový sodík nerozpustí, poté se reakční směs zchladí na teplotu -40°C a přidá se po kapkách roztok sloučeniny 2 (0,7 g, 5,7 mmol) v ethanolu (5 ml). Reakční směs se míchá při teplotě -40°C po dobu 30 minut a uffvwf se trifluoroctovou kyselinou (0,1 ml, 1,4 mmol). Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu k získání surové sloučeniny 3 ve formě bílé pevné látky. Pevná látka se rozpustí v ethylacetátu a promyje vodou, suší a koncentruje ve vakuu a obdržená pevná látka se krystalizuje z ether/hexanů k získání 1,2 g (63%) sloučeniny 3 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 121 - 122°C 'Η NMR (CDCh): 6 1,26 (t, J = 7, 2 Hz, 3 H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 2,05 (s,

H), 2,27 (m, 2 H), 2,54 (dd, J - 18 a 8 Hz, 1 H), 2,78 (dd, J = 18 a 8 Hz, 1 H),

3,26 (m, 1 H), 4,30 (m, 4 H), 4,38 (m, 1 H), 6,78 (br s, 1 H); IR (KBr): 3331,2981, 2107,

1744, 1605, 1525 cm’¹; MS (ES+): 341,2 ( 100%, M+l ).

Analýza: Vypočteno pro C14H20N4O6 : C, 49,41; H, 5,92; N, 16,46 . Zjištěno: C, 49,47; H, 5,95; N, 16,48.

Příklad 3 (±) 3 β-[ 1 '-Acetylamino-1 '-bis(ethoxykarbonyl)]methyl-4a-tert-butoxykarbonylaminocyklopentan-l-on (4, schéma -1) • 0 0 • 0

NHBoc

Směs sloučeniny 3 (0,5 g, 1,5 mmol), di-tert-butyl dikarbonát (0,39 g, 1,77 mmol), a 10% Pd/C (0,14 g) v ethylacetátu (25 ml) se hydrogenuje při 45 psi (librách na čtvereční palec) po dobu 1 hodiny. Katalyzátor se odstraní filtrací a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání surové sloučeniny 4. Rekrystalizace z ethter/hexanů poskytne 0,28 g (45%) sloučeniny 4 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 135-136 °C.

'H NMR (CDCI3): δ 1,27 (m, 6 H), 1,45 (s, 9 H), 2,10 (s, 3 H), 2,33 (m, 2 H),

2,75 (m, 2 H), 3,25 (m, 1H), 4,14 (m, 1 H), 4,28 (m, 4 H), 4,83 (s, 1 H), 6,98 (s, 1 H); IR (KBr) 3365, 2980, 1739, 1689, 1519, 1394, 1275 cm¹; MS (CI-): 413 (10%, M-l).

Analýza: Vypočteno pro Ci9H₃oN₂0₈: C, 55,06; H, 7,30; N, 6,76. Zjištěno: C, 54,63; H, 7,17; N, 6,74

Příklad 4 (±) 2-{33-[l'-Acetylamino-l'-bis(ethoxykarbonyl)]methyl-4a-tert-butoxykarbonylamino-l-cyklopentyliden}-l,3-dithian (5, schéma -1)

Do směsi 2-trimethylsilyl-l,3-dithianu (7,88 g, 41,5 mmol) v THF (100 ml) při teplotě 0 °C se přidává po kapkách po dobu 45 minut pod atmosférou dusíku n-BuLi (1,6 M roztok v hexanech, 28,6 ml, 45,7 mmol) a míchá se při teplotě 0°C. Aniont se ochladí na teplotu ~40°C a přidává se po kapkách roztok sloučeniny 4 (4,3 g, 10,4 mmol) v THF (50 ml) a reakční směs se míchá při teplotě -40°C po dobu 5 hodin a ohřeje se na teplotu -20°C. Reační směs se zháší nasyceným roztokem NH4CI (50 ml) a ohřeje se na pokojovou teplotu, přidá se ether a

.......

organická vrstva se separuje. Vodná vrstva se extrahuje etherem (2 x 50 ml). Organické vrstvy se spojí, suší (MgSO₄) a koncentrují. Obdržený zbytek se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (30 - 35% ethylacetát v hexanech) k získání 3,16 g (59%) sloučeniny 5 ve formě bezbarvého oleje, stáním ztuhne. Teplota tání 66-68 °C.

NMR (CDCb): δ 1,26 (m, 6 H), 1,44 (s, 9 H), 2,05 (s, 3 H), 2,11 (m, 2 H), 2,22 (m, 2 H), 2,84 (m, 5 H), 2,98 (m, 2 H), 3,77 (m, 1 H), 4,23 (m, 4 H), 4,85 (d, 1 H), 6,95 (br s, 1 H); IR (KBr): 3388, 2979, 2934, 1743, 1690, 1512, 1368, 1242, 1169 cm'¹; MS (ES+): 517,7 (35%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro CisHseNjOySí: C, 53,47; H, 7,02; N, 5,42. Zjištěno: C, 53,50; H, 7,07; N, 5,41

Příklad 5 (±) 2- {3β-( 1 '-Acetylamino-1 '-karboxy)methyl-4a-tert-butoxykarbonylamino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (6, směs izomerů na C-Γ, schéma -1)

NHBoc

Do roztoku sloučeniny 5 (7,5 g, 14,53 mmol) v ethanolu (75 ml) a vodě (25 ml) se přidá 1 N NaOH (50,9 ml, 50,9 mmol) a zahřívá se při refluxu po dobu 2 hodin. Reakční směs se zháší kyselinou ledovou octovou (4,6 ml, 76,3 mmol) a zahřívá se při mírném refluxu po dobu 2 hodin. Obdržená pevná látka se spojí filtrací, promyje se vodou a suší ve vakuu při refluxní teplotě toluenu k získání 1,63 g (27 %) sloučeniny 6 ve formě bílé pevné látky. Filtrát se extrahuje ethylacetátem (3x 100 ml), suší (MgSO₄) a po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu k získání 3,5 g (58%) sloučeniny 6. Rekrystalizace z ethanolu poskytne sloučeninu 6 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 174-176 °C.

ll NMR (CDC1₃): δ 1,35 a 1,36 (dvě s, 9 H), 1,82 (s, 3 H), 2,08 (m, 5 H),

2,27 (m, 2 Η), 2,80 (m, 4 Η), 3,54 (m, 1 Η), 3,71 (m, 1 Η), 4,06 (m, 0,6 Η), 4,22 (m, 0,4 Η), 6,48 (d, J = 6 Hz, 0,6 H), 6,98 (m, 0,4 H) 7,65 (d, J = 8 Hz, 1 H). Poměr izomerů na atomu uhlíku NHAc (A a B) je 3:2; IR (KBr): 3371, 2977, 1689, 1530, 1172 cm'¹.

Analýza: Vypočteno pro Ci8H28N2OsS2*0,75H2O: C, 50,27; H, 6,91; N, 6,51. Zjištěno: C, 50,03; H, 6,54; N, 6,41

Příklad 6 (±) 2- {3β-[ 1 '-Acetylamino-1 '-[(N-methoxy-N-methyl)aminokarbonyl]methyl]-4a-tertbutoxykarbonylamino-l-cyklopentyliden)-l,3-dithian (7, směs izomerů na C-Γ, schéma -1)

NHBoc

Do roztoku sloučeniny 6 (5,13 g, 12,33 mmol) v THF (120 ml) při teplotě 0°C se přidává po kapkách po dobu 45 minut methylchlorformiát (1,01 ml, 13,56 mmol) a triethylamine (2,2 ml, 15,42 mmol) a míchá při teplotě 0 °C. Roztok N,Odimethylhydroxylaminhydrochloridu (3,68 g, 37 mmol) a triethylaminu (7 ml) v THF (25 ml), který se nejdříve míchá po dobu 30 minut, se přidává po kapkách do výše uvedeného roztoku. Reakční směs se dále míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Pak se koncentruje a do zbytku se přidá 0,1 N NaOH (100 ml) a ethylacetát (100 ml). Organické vrstvy se spojí. Vodná vrstva se dále extrahuje ethylacetátem (2 x 75 ml). Organické vrstvy se spojí a suší (MgSO₄). Po filtraci se filtrát koncentruje a obdržený zbytek se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (90% ethylacetát v hexanech a 25%[chloroform:methanol:hydroxid amonný (80:18:2)] v methylenchloridu k získání 4,2 g (74%) sloučeniny 7 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 122-126 °C. Analytický vzorek se připravil rekrystalizaci z ether-hexanů.

'H NMR (CDCb): δ 1,44 (s, 9 x 0,5 Η), 1,45 (s, 9 x 0,5 H), 2,02 (s, 3 x 0,5 H), 2,03 (s, 3 x 0,5 H), 2,17 (m, 4 H), 2,35 (m, 0,5 H), 2,58 (m, 2 H), 2,77 (m, 6 H), 3,19 (s, 3 x 0,5 H), 3,22 (s, 3 x 0,5 H), 3,57 (m, 0,5 H), 3,77 (s, 3 x 0,5 H), 3,78 (s, 3 x 0,5 H), 3,90 (m, 0,5 H), 4,60 (d,

9

9 • · « *····· • · · ♦ · • · · · · ·

9999 9 9 9 ·

J = 8 Hz, 0,5 H), 4,89 (br s, 0,5 H), 5,01 (br s, 0,5 H), 5,16 (m, 0,5 H) 6,34 (br s, 0,5 H), 6,89 (br s, 0,5 H). Poměr izomerů na atom uhlíku NHAc (A a B) jel. 1; IR (KBr): 3341, 3269, 2978, 2936, 1715, 1681, 1653, 1521, 1156, 1171 cm'¹.

Analýza: Vypočteno pro C20H33N3O5S2? C, 52,26; H, 7,24; N, 9,14. Zjištěno: C, 52,34; H, 7,20; N, 9,09.

Příklad 7 (±) 2-{3β-( 1 -Acetylamino-1 '-formyl)methyl-4a-/e/7-butoxykarbonylamino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (8, izomer-A na C-Γ a 9, izomer-B na C-Γ, schéma -1)

Do roztoku sloučeniny 7 (0,23 g, 0,5 mmol) v THF (5 ml) při teplotě 0 °C se přidává po kapkách tri-fórZ-butoxyaluminohydrid lithný (1 M roztok v THF, 1,1 ml, 1,1 mmol) a míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se opatrně id-luw/l N HCI (1,0 ml, pH 4) a míchá po dobu 5 hodin. Po té se do reakční směsi přidá ether (10 ml) a 1,0 M vodná Rochellova sůl (10 ml) a míchá při pokojové teplotě po dobu 30 minut. Organická vrstva se separuje a vodná vrstva se extrahuje dále etherem (2 x 10 ml). Organické vrstvy se spojí, suší (MgSOzt) a koncentrují ve vakuu k získání surového aldehydu ve formě bílé pevné látky. Surový produkt se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (50 - 80% ethylacetát v hexanech) k získání 0,08 g (40%, izomer A) sloučeniny 8 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 188-192 °C (dec).

Ή NMR (CDCI3): δ 1,41 (s, 9 H), 2,10 (m, 4 H), 2,16 (s, 3 H), 2,52 (m, 1 H), 2,69 (dd, J =

17,5 a 7,7, Hz, 1 H), 2,83 (m, 5 H), 3,73 (m, 1 H), 4,54 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 4,77 (dd, J= 9,6 a

2,1 Hz, 1 H), 7,45 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 9,49 (s, 1 H); IR (KBr): 3337,2982, 1729, 1681 1535, 1166 cm¹; MS (ES+): 401,4 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C18H28N2O4S2: C, 53,97; H, 7,05; N, 6,99. Zjištěno: C, 53,93; H,

7,09; N, 6,93.

·· ·· ♦ · · · • · · »

Další eluce poskytne sloučeninu 9(0,07g, 35%, izomer B). Teplota tání >180 °C.

^]H NMR (CDCI3): δ 1,45 (s, 9 H), 2,08 (s, 3 H), 2,13 (m, 3 H), 2,41 (m, 1 H), 2,55 (m, 1 H),

2,67 (dd, J = 17,2 a 8 Hz, 1 H), 2,84 (m, 5 H), 3,70 (m, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 4,79 (m, 1 H),

6,76 (br s, 1 H), 9,65 (s, 1 H); IR (KBr): 3335,2979, 1730, 1686, 1533, 1165 cm'¹;

MS (ES+): 401,2 (20%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C18H28N2O4S2: C, 53,97; H, 7,05; N, 6,99. Zjištěno: C, 54,03; H, 7,05; N, 6,97.

Příklad 8 (±) 2- {3 β-( 1 '-Acetylamino-1 '-ethoxykarbonyl)methyl-4a-tert-butoxykarbonylamino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (10, směs izomerů na C-Γ, schéma -2)

Do roztoku sloučeniny 5 (3,06 g, 5,94 mmol) v ethanolu (20 ml) a vodě (15 ml) se přidá IN NaOH (19,29 ml, 19,29 mmol) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se kyselinou ledovou octovou (1,74 ml, 28,94 mmol) a zahřívá při teplotě 80-90 °C po dobu 1 hodiny. Obdržená pevná látka se spojí filtrací, promyje vodou a hexany k získání 1,43 g (54%) sloučeniny 10 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 157-167 °C.

^JH NMR (CDCI3): δ 1,86 (m, 3 Η), 1 44 (s, 9 H), 2,04 (s, 1,2 H), 2,09 (s, 1,8 H), 2,14 (m, 3 H), 2,57 (m, 2 H), 2,69 (m, 1 H), 2,87 (m, 5 H), 3,67 (m, 0,4 H), 3,87 (m, 0,6 H), 4,19 (m, 2 H), 4,49 (d, J = 8,6 Hz, 0,6 H), 4,68 (m, 0,4 H), 4,77 (dd, J = 8,9 a 3,6 Hz, 1 H), 6,48 (br s, 0,4 H), 6,99 (d, J = 8,5 Hz, 0,6 H). Poměr izomerů A a B je 3:2; IR (KBr): 3338, 2982, 1740, 1681, 1545, 1530, 1170 cm’¹; MS (ES+): 445,6 (20%, M+l).

• · · · • · • ·

Analýza: Vypočteno pro C20H32N2O5S2: C, 54,02; H, 7,25; N, 6,30. Zjištěno: C, 54,15; H, 7,26; N, 6,30.

Příklad 9 (±) 2- {3 β-( 1 '-Acetylamino-2'-hydroxy)ethyl-4a-fert-butoxykarbonylamino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (11, směs izomerů na C-1', schéma -2)

Do roztoku sloučeniny 10 (0,44 g, 1 mmol) v THF ( 10 ml) při teplotě 0 °C se přidá po kapkách hydridoboritan lithný (2 M roztok v THF, 1,0 ml, 2,0 mmol) a lithium 9-BBN (IM roztok v THF, 0,1 ml, 0,1 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin a opatrně se zháší IN NaOH (3 ml) s solankou (3 ml) a míchá po dobu 5 minut. Reakční směs se okyselí kyselinou ledovou octovou a přidá se ether (10 ml). Organická vrstva se separuje a vodná vrstva se extrahuje dále etherem (2x10 ml). Organické vrstvy se spojí, suší (MgSO₄) a koncentrují ve vakuu k získání surového alkoholu ve formě bílé pevné látky, která se dále krystalizuje z ethanolu k získání 0,09 g (22%) sloučeniny 11 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 222-226 °C. Filtrát se purifikuje zrychlenou chromatografíí na sloupci silikageiu (75% ethylacetát v hexanech) k získání 0,21 g (52%) sloučeniny 11 ve formě bílé pevné látky.

‘H NMR (DMSO-de): δ 1,34 (s, 9 H), 1,81 (s, 3 H), 2,07 (m, 6 H), 2,69 (dd, J - 17,3 a 6,9 Hz, 1 H), 2,82 (m, 4 H), 3,62 (m, 2 H), 3,66 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 3,73 (m, 1 H), 4,59 (t, J = 5,2 Hz, 1 H), 6,80 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,43 (d, J = 9,0 Hz, 1 H); IR (KBr): 3350, 1685, 1535, 1173, 1050 cm’¹; MS (ES+): 403,5 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro CisH3oN20₄S2: C, 53,70; H, 7,51; N, 6,96. Zjištěno: C, 53,69; H, 7,56; N, 6,88.

.......

Příklad 10 (±) 2- {3β-( 1 '-acetylamino-2'-ethoxy)ethyl-4a-(tert-butoxykarbonyl)amino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (12, izomer-A na C-1', a 13, směs izomerů na C-Γ, schéma -2)

NHBoc

Do míchaného roztoku sloučeniny 11 (1,5 g, 3,73 mmol) v DMF (20 ml) při teplotě 0°C se přidá 95% NaH (0,125 g, 4,95 mmol). Po 1 hodině míchání se přidá po kapkách ethyljodid (0,4 ml, 6,4 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 3 hodin. Do reakční směsi se přidá voda (20 ml) a organická vrstva se separuje. Vodná vrstva se dále extrahuje EtOAc (4 x 15 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší (MgSO₄), filtrují přes Celite a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání surového produktu. Purifikace radiální PLC (SiO₂, 50% EtOAc/hexany) poskytne nejprve sloučeninu 12 (0,75 g, 47%, izomer A) ve formě bílé pevné látky a poté směs izomerů A & B, sloučenina 13 (11%).

Příklad 11 (±) Methyl-3 β-(1 '-acetylamino-2'-ethoxy)ethyl-4a-(tert-butoxykarbonyl)aminocyklopentan-1 karboxylát (14, izomer-A na C-Γ a směs na C-1, schéma -3) a (±) methyl 3β-(Γ-acetylamino2'-ethoky)ethyl-4a-aminocyklopentan-r-l-karboxylát (15, izomer-A na C-Γ a směs na C-1, schéma -3)

Do míchaného roztoku sloučeniny 12 (0,7 g, 1,63 mmol) v MeOH (48 ml) při pokojové teplotě se přidá 6 N HCI (4,0 ml, 24 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 24 hodin. Do této směsi se přidá NaOH (1,4 g, 35 mmol) a míchá se po dobu 1 hodiny. Reakční směs se okyselí kyselinou ledovou octovou, filtruje a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání surového produktu. Purifikace zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (75%

.. · .· · ··

EtOAc/hexany) poskytne 0,15 g (34%) sloučeniny 14 ve formě hnědého oleje. Další eluce mobilní fází (CHCl₃/MeOH/NH₄OH (8:1,8:0,2) poskytne 0,163 g (37%) sloučeniny 15 ve formě žlutého oleje.

¹HNMR (DMSO-dg): δ 1,11 (m, 3 H), 1,58 (m, 2 H), 1,82 (s, 3 H), 2,14-1,83 (m, 3 H), 3,282,73 (m, 3 H), 3,49-3,30 (m, 3 H), 3,58 (s, 3 H), 3,84-3,78 (m, 2 H), 4,14 (m, 1 H), 7,79-7,94 (m, 1 H); IR (NaCI): 3256, 3065, 2975, 1732, 1657, 1556, 1440, 1376, 1298 cm'¹; MS (ES+): 273,0 ( 100%, M+l ).

Analýza: Vypočteno pro C13H24N2O4: C, 57,33; H, 8,88; N, 10,29

Vypočteno pro Ci3H₂₄N₂O4.0,2CHCl₃: C, 53,52; H, 8,23; N, 9,45 . Zjištěno:

C, 53,24; H, 8,46; N, 9,04.

Příklad 12 (±) 3 3-(l'-Acetylamino-2'-ethoxy)ethyl-4a-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina (16, izomer-A na C-Γ a směs na C-l, schéma -3)

Směs sloučeniny 15 (0,124 g, 0,046 mmol), 1 N NaOH (0,2 ml, 0,2 mmol) a vody (0,2 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Reakční směs se neutralizuje kyselinou ledovou octovou a zředí vodou k získání sloučeniny 16 ve formě 29,2 mmolámího vodného roztoku.

MS (ES+): 259,0 (100%, M+l).

Příklad 13 (±) 3P-(l'-Acetylamino-2'-ethoxy)ethyl-4a-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-lkarboxylová kyselina (17, izomer-A na C-Γ a směs na C-l, schéma -3) • « • · • ♦ ♦ 9 9 • ·

Směs sloučeniny 15 (0,0166 g, 0,0611 mmol), aminoiminomethansulfonové kyseliny (0,1 g, 0,81 mmol) a uhličitanu draselného (0,1 g, 0,72 mmol) ve vodě se míchá při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Do této směsi se přidá 1 N NaOH (2 ml, 2 mmol) a směs se míchá po dobu 45 minut. Reakční směs se neutralizuje kyselinou ledovou octovou, filtruje přes ucpávku z vaty a zředí vodou k získání sloučeniny 17 ve formě 4,4 molárního vodného roztoku.

MS (ES+): 301,0 ( 100%, M+l).

Příklad 14 (±) t-3 - [ 1Acetylamino-1 '-di(ethoxykarbonyl)] methyl-c-4-ferř-butoxykarbonylamino-t-1 [(trismethylthio)methyl]cyklopentan-r-l-ol (18, schéma-4)

Do tris(methylthio)methanu (1,6 ml, 12 mmol) v THF (20 ml) při teplotě -78 °C se přidává po kapkách pod atmosférou dusíku n-BuLi (2,5 M roztok hexanu, 5,3 ml, 13,3 mmol) a míchá při teplotě -78 °C po dobu 30 minut. Do tohoto roztoku aniontu při teplotě -78°C se přidává po kapkách roztok sloučeniny 4 (1,0 g, 2,4 mmol) v THF (15 ml) a reakční směs se míchá při teplotě -78°C po dobu 3 hodin. Poté se utlumí nasyceným NH₄C1 (15 ml) a zahřeje se na pokojovou teplotu. Přidá se ether a organická vrstva se separuje. Vodná vrstva se extrahuje etherem (4x10 ml). Organické vrstvy se spojí, suší (MgSO₄) a koncentrují ve vakuu. Obdržený zbytek se purifikuje radiální PLC (50% ethylacetát v hexanech) k získání sloučeniny 18 (0,48 g, 35%) ve formě bezvarvé polotuhé látky.

0000

0· • ·

0 0

00 00 *

• 0

0

^JH NMR (CDC1₃): δ 1,28 (m, 6 Η), 1, 43 (s, 9 Η), 1,76 (d, J = 17 Hz, 1 H), 2,03 (s, 3 H), 2,13 (m, 1 H), 2,25 (s, 9 H), 2,42 (m, 1 H), 2,51 (m, 1 H), 2,98 (m, 1 H), 3,17 (s, 1 H), 3,93 (m, 1 H), 4,26 (m, 4 H), 5,40 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,57 (s, 1 H); IR (NaCl):3383,2981, 1738, 1688, 1526, 1369, 1274, 1206, 1168 cm'¹; MS (ES+): 569,3 (100%, M+l ).

Analýza: Vypočteno pro C23H40N2O8S3: C, 48,57; H, 7,09; N, 4,93. Zjištěno: C, 48,74; H, 7,00; N, 4,91.

Příklad 15 (±) t-3-[ 1 '-Acetylamino-1 '-karboxy)]methyl-c-4-ferř-butoxykarbonylamino-t-1 -[(tris methylthio)methyl]cyklopentan-r-l-ol (19, směs izomerů na C-Γ, schéma-4)

Reakce sloučeniny 18 (3,66 g, 6,4 mmol) jak je popsaná pro sloučeninu 6 poskytne 2,25 g (75%) sloučeniny 19 ve formě činící pevné látky. Teplota tání 220-223 °C (dec).

^JH NMR (CDCI3): δ 1,36 (s, 9 Η), 1, 49 (m, 1 H), 1,81 (m, 5 H), 2,16 (s, 9 H), 2,48 (m, 2 H),

2,61 (m, 1 H), 3,66 (m, 1 H), 4,03 (m, 1 H), 4,93 (m, 1 H), 6,40 (m, 1 H), 7,52 (m, 1 H); IR (KBr) 3400, 2979, 2921, 1684, 1585, 1417, 1368, 1250, 1168 cm'¹; MS (ES+): 469,3 (20%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C18H32N2O6S2.I.5H2O: C, 43,62; H, 6,71; N, 5,65 . Zjištěno: C, 43,88; H, 6,47; N, 5,28.

Příklad 16 (±) t-3-[l'-Acetylamino-r-[(N-methoxy-N-methyl)aminokarbonyl]methyl]-c-4-ter/butoxykarbonylamino-t-l-[(trismethylthio)methyl]eyklopentan-r-l-ol (20, směs izomerů na C-Γ, schéma-4) • Φ φφφφ

Φ Φ φ φφφ · φφφφ φ φ φ φφφφ · φ φφφ φ

• · · φ • φ φ · • φ φ φ · φ φ φ · φφ φφ

Reakce sloučeniny 19 (6,34 g, 13,5 mmol) jak je popsaná pro sloučeninu 7 poskytne 3,85 g (56%) sloučeniny 20 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 142-143 °C.

Ή NMR (CDCb): δ 1,41 (s, 9 H), 1,77 (m, 1 H), 2,01 (m, 5 H), 2,39 (s, 9 H), 2,49 (m, 2 H), 3,21 (s, 3 H), 3,36 (m, 1 H), 3,85 (s, 3 H), 4,34 (br s, 1 H), 5,11 (br s, 1 H), 5,51 (m, 1 H), 7,26- 7,69 (m, 1 H); IR (KBr): 3427, 3315,1681, 1637 cm'¹; MS (ES+): 512,5 (M+l).

Analýza: Vypočteno pro C20H37N3O6S3: C, 46,94; H, 7,29; N, 8,21. Zjištěno: C, 47,13; H, 7,34; N, 8,16

Příklad 17 (±) t-3-( 1 '-Acetylamino-1 '-formyl)methyl-c-4-tert-butoxykarbonylamino-t-1 [(trismethylthio)methyl]cyklopentan-r-l-ol (21, směs izomerů na C-Γ, schéma-4)

Reakce sloučeniny 20 (1,12 g, 2,18 mmol) jak je popsána pro sloučeniny 8 a 9 poskytne 0,29 g (25%) sloučeniny 21 ve formě světle žluté pevné látky. Teplota tání 78-79 °C.) ¹H NMR (CDCb): δ 1,44 (s, 9 H), 1,75-2,18 (m, 5 H), 2,08 (s, 9 H), 2,46 (m, 2 H), 2,58 (m, 1 H), 3,10 (s, 0,5 H), 3,26 (s, 0,5 H), 3,82 (m, 1 H), 4,13 (m, 0,5 H), 4,53 (m, 0,5 H), 5,37 (d, J = 8,8 Hz, 0,5 H), 5,58 (d, J = 8,5 Hz, 0,5 H), 8,03 (m, 1 H), 9,42 (s, 0,5 H), 9,61 (s, 0,5 H); IR (KBr): 3329, 2979, 2921, 1683, 1527, 1367, 1169 cm'¹;

»·*· • · · • ···»

MS (ES+): 453,4 (100%, M+l).

• · · • · · ··

Analýza: Vypočteno pro C18H32N2O5S3: C, 47,76; H, 7,13; N, 6,19. Zjištěno: C, 47,70; H, 7,17; N, 6,11.

Příklad 18 (±) t-3-[( 1 '-Acetylamino-3'-ethyl-2'-oxo)pentyl]-c-4-/er/-butoxykarbonylamino-t-1 [(trismethylthio)methyl]cyklopentan-r-l-ol (22, směs izomerů na C-Γ, schéma-4)

NHBoc

Suchý Mg ( 17,1 g, 704 mmol) a jod ( 1 krystal) se zahřívají v suché baňce s kulatým dnem dokud jod nevysublimuje. Zahřívání se zastaví a purpurové páry se nechají srážet na Mg. Do reakční směsi se přidá THF (250 ml) a několik kapek 3-brompentanu, který se pak zahřeje, aby se iniciovala reakce. Do reakce se přidá po kapkách zbylý 3-brompentan (100 ml, 805 mmol) v takové míře, aby se udržel mírný reflux. Po ochlazení na pokojovou teplotu se roztoku přemístí do čisté suché baňky. Do této směsi se přidá sloučenina 21 (4,0 g, 8,84 mmol) v suchém THF (100 ml) a směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se uPm*/vodou (100 ml) a extrahuje Et2O (3 x 50 ml). Spojené etherové vrstvy se promyjí solankou (3 x 50 ml) a suší (Na2SO4). Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu k získání surové směsi, která se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (20% EtOAc/hexany) k získání 1,44 g (33%) sloučeniny 22.

Příklad 19 (±) t-3-[(r-Acetylamino-3'-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-c-4-terZ-butoxykarbonylamino-t-l[(trismethylthio)methyl]cyklopentan-r-l-ol (23, směs izomerů na C-Γ a C-2', schéma-4) • ♦ • · · • ···· • « tttttttt ·· · · • · · · * · · • · ♦ ♦ · · ♦ tt tttt ·· · · · • tttt · · · · ·· · ·· tttt

Sloučenina 22 (1,4 g, 2,62 mmol) se spojí s NaBFL» (0,2 g, 5,29 mmol) v suchém MeOH (20 ml), míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny a neutralizuje se kyselinou ledovou octovou. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu k získání zbytku, který se vychytává v H2O a extrahuje EtOAc(3 x 50 ml). Spojené organické extrakty se suší (MgSO4) a koncentrují k získání surové reakční směsi, která se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (50% EtOAc/hexany následované 10% MeOH/EtOAc) k získání sloučeniny 23 (0,75 g, 53%).

Příklad 20 (±) Methyl-[c-3-[( 1 '-acetylamino-3'-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-t-4-fe/7-butoxykarbonyl-aminot-1-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylát] (24, směs izomerů na C-Γ a C2', schéma-4)

NHBoc

Směs sloučeniny 23 (0,74 g, 1,38 mmol) v MeOH/H₂O (12:1, 35 ml), HgCb ( 1,43 g,

5,27 mmol) a HgO (0,49 g, 2,26 mmol) se míchá při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Reakční směs se filtruje přes Celíte a Celíte poté se promyje MeOH (25 ml). Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se obdrží bílý zbytek, který se rozdělí mezi vrstvy H2O (50 ml) a EtOAc(50 ml). EtOAc vrstva se separuje a vodná vrstva se dále extrahuje EtOAc (2 x 50 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí solankou (2 x 50 ml) a suší (MgSO4). Po filtraci se filtrát koncentruje k získání surové reakční směsi. Surová reakční směs se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (60% EtOAc/hexany) k získání sloučeniny 24 (0,27 g, 43%).

·» ···· • 9 • « · • ·· ·♦ 1 9

9

111 119 li 9 ·· • » 9 · • ♦ * · • 11 · • 11 9

1·

Příklad 21 (±) Methyl-[c-3-[(r-acetylamino-3'-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-t-4-[(/er/-butoxykarbonylamino-tert-butoxykarbonylimino)methyl]amino-t-1 -hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (sloučenina 25, jeden izomer na C-Γ nebo na C-2' a směs na dalších a sloučenina 26 směs na C-Γ i na C-2', schéma-5)

Směs sloučeniny 24 (0,23 g, 0,52 mmol) v CH2CI2 (10 ml) a TFA ( 1 ml) se míchají po dobu 16 hodin při pokojové teplotě. Směs se koncentruje ve vakuu a stopy TFA se odstraní koevaporací s CH2CI2 (2x5 ml). Zbytek se suší za vysokého vakua. Do zbytku se přidá suchý DMF (5 ml), EtíN (0,5 ml, 3,6 mmol), bis-(tert-butoxykarbonyl)-2-methyl-2thiopseudomočovina (0,15 g, 0,52 mmol) a HgCE (0,15 g, 0,55 mmol). Směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 4 hodin. Směs se zředí EtOAc a filtruje přes Celite. Filtrát se promyje H2O (2 x 50 ml), solankou (2 x 50 ml) a suší (Na2SO4). Po filtraci se filtrát koncentruje k získání surového produktu, který se purifikuje radiální PLC (S1O2) použit 30 % EtOAc/hexanů jako eluentu k získání nejprve 0,06 g (20%) sloučeniny 25 a poté 0,085g (28%) sloučeniny 26.

Příklad 22 (±) c-3 -[(1'- Acetylamino-3 '-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-t-4-[aminoiminomethyl]-amino-t-1 hydroxycyklopentan-r-1-karboxylová kyselina (27, směs izomerů na C-Γ a C-2', schéma-5]

4« 4 • 4 4 • 4 · · • 4 4444 · • * 4 • 4 · • 4 ··<·

44

4 4

4 4 4

4 4

4

Směs sloučeniny 26 (0,075 g, 0,13 mmol) v CH2CI2 (3 ml) se míchá s TFA (0,5 ml) po dobu 16 hodin při pokojové teplotě. Reakční směs se koncentruje a suší za vysokého vakua k získání methyl c-3-[(r-acetylamino-3'-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-t-4[aminoiminomethyl]amino-t-l-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylátu; MS (ES+): 373 (M+ 1).

Výše uvedený produkt (0,015g, 0,04 mmol) se míchá s 1 N NaOH (0,1 ml, 0,1 mmol) a vodou (0,2 ml) po dobu 16 hodin. Roztok se neutralizuje kyselinou octovou, filtruje přes vatu a zředí H2O k získání 13,2 mmolárního roztoku sloučeniny 27.

Příklad 23 (±) c-3-[( 1 '-Acetylamino-3 '-ethyl-2'-hydroxy)pentyl]-t-4-[aminoiminomethyl]-amino-t-1 hydroxycyklopentan-r-1-karboxylová kyselina (28, jeden izomer na C-Γ nebo na C-2' a směs na dalších, schéma-5)

Reakce sloučeniny 25 (0,045 g, 0,078 mmol) jak je popsaná pro sloučeninu 27 poskytne 5,37 mmolárního roztoku sloučeniny 28.

Příklad 24 (±) 2- {3 β-( 1 '-Acetylamino-3 '-ethyl)-2'-pentenyl-4a-ter/-butoxykarbonyl amino-1 cyklopentyliden}-l,3-dithian (29, izomer-A na C-Γ, směs na C-2', schéma-6) »9 99*9 «· • *

9 9 • 99·· * · • 9 • 9 • · » • · t 9

NHBoc

99 • · 9 9 9 • ♦ 9 · · • 9 9 9 9 · • 9 9 9 9

99 99

Do suspenze propyltrifenylfosfoniumbromidu (0,5 g, 1,3 mmol) v THF (15 ml) při teplotě -78 °C se přidá po kapkách bis(trimethylsilyl)amid sodný, NaHMDS (1 M roztok v THF, 1,3 ml, 1,3 mmol). Po 30 minutovém míchání se reakční směs zahřeje na 0°C a míchá po dobu 30 minut. Do této směsi se přidá sloučenina 8 (0,21 g, 0,52 mmol) v THF ( 10 ml) a reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny. Přidá se po kapkách další množství NaHMDS (2,6 ml, 2,6 mmol), reakční směs se míchá po dobu 30 minut a přidá se po kapkách ethylbromid (0,3 ml), poté se zahřeje na pokojovou teplotu a míchá po dobu 2 hodin. Přidá se voda (20 ml) a vrstvy se separují. Vodná vrstva se extrahuje etherem (4x15 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší (MgSO₄), filtrují přes Celíte a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání surového produktu. Purifikace radiální PLC (silikagel, 50 - 75% EtOAc/hexany) poskytne sloučeninu 29 (0,045 g, 20%) ve formě bílé pevné látky.

'H NMR (CDCh): δ 0,99-0,94 (m, 3 H), 1,19-1,12 (m,3 H), 1,48 (s, 9 H), 1,74-1,52 (m, 2 H), 2,00 (s, 3 H), 2,15-2,02 (m, 6 H), 2,78-2,55 (m, 2 H), 2,99-2,82 (m, 4 H), 3,22-3,16 (m, 2 H), 5,13-4,93 (m, 1 H), 5,49-5,47 (m, 1 H), 5,58-5,57(m, 1 H), 6,96 (bs, 1 H); MS (ES+): 455,6 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C23H38N2O3S2 C, 60,75; H, 8,42; N, 6,16

Vypočteno pro CwIWfcC^O^ CH₂C1₂ C, 59,08; H, 8,21; N, 5,94 Zjištěno.C, 58,92; H, 8,21; N, 6,02.

Příklad 25 (±) Methyl-[3 β-( 1 '-Acetylamino-3 '-ethyl)-2'-pentenyl-4a-(tert-butoxykarbonyl)aminocyklopentan-l-karboxylát] (30, izomer-A na C-Γ, směs izomerů na C-1 a na C-2', schéma-6)

Φ «·

Φ · Φ

Φ Φ Φ • « Φ

Φ Φ Φ • Φ «

· · • · · · • · ΦΦΦΦ • · · ·· ·

• Φ • · • Φ • · · • Φ ΦΦ

Do míchaného roztoku sloučeniny 29 (0,019 g, 0,042 mmol) v MeOH (1 ml) při pokojové teplotě se přidá 6 N HCl (0,1 ml, 0,6 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 24 hodin. Reakční směs se koncentruje ve vakuu k získání hnědého zbytku sloučeniny 30. Takto obdržený zbytek se použije při reakci v následujícím příkladu.

Příklad 26 (±) Methyl-[3 β-( 1'- Acetylamino-3 '-ethyl)-2'-pentenyl-4a-aminocyklopentan-1 karboxylát] (31, izomer-A na C-Γ, směs izomerů na C-1 a C-2', schéma-6)

Do směsi sloučeniny 30 (0,042 mmol) v CH2CI2 (1 ml) se přidá CF3CO2H (0,1 ml, 1,3 mmol) a směs se míchá po dobu 4 hodin a koncentruje ve vakuu k získání sloučeniny 31 ve formě hnědé pevné látky Takto obdržený zbytek se použije při reakci v následujícím příkladu.

Příklad 27 (±) 3 β-( 1 '-Acetylamino-3 '-ethyl)-2'-pentenyl-4a-aminocyklopentan-1 -karboxylová kyselina (32, izomer-A na C-Γ, směs izomerů na C-1 a C-2', schéma-6)

AcHN-

• ·

......

Do roztoku sloučeniny 31 (0,042 mmol) v MeOH ( 1 ml) se přidá 1 N NaOH (0,7 ml, 0,7 mmol) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Reakční směs se neutralizuje kyselinou ledovou octovou a zředí vodou k získání 20 mmolárního roztoku sloučeniny 32.

Příklad 28 (±) Methyl-[3 β-( 1 '-acetylamino-3 '-ethyl)pentyl-4a-aminocyklopentan-1 -karboxylát] (33, izomer-A na C-Γ, směs na C-l, schéma-6)

Směs sloučeniny 31 (0,2 mmol) a PtO₂ (0,1 g) v EtOH (10 ml) se hydrogenuje za tlaku psi po dobu 16 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání sloučeniny 3^59%) ve formě žlutého oleje.

^]H NMR (360 MHz, CDC1₃): δ 8,40-8,45 (bs, 2 H), 7,73-7,70 (m, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 3,282,50 (m, 3 H), 2,10-1,87 (m, 4 H), 1,83 (s, 3 H), 1,44-1,24 (m, 3 H), 1,19-1,15 (m, 8 H), 0,850,84 (m, 3 H); IR (NaCl): 3358, 2946, 2834, 1451, 1418, 1029 cm’¹;

MS (ES+): 299,0 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro CiéH₃oN₂0₃ C, 64,39; H, 10,13; N, 9,39

Vypočteno pro Ci₆H₃₀N₂O₃»2,25 CF₃CO₂H: C, 44,37; H, 5,86; N, 5,05 Zjištěno: C, 44,25; H, 6,04; N, 5,17

Příklad 29 (±) 3 β-( 1'-Acetylamino-3'-ethyl)pentyl-4a-aminocyklopentan-1 -karboxylát (34, izomer-A na C-l', směs na C-l, schéma-6) ··· · · · ···· ···· · · · ···· • ······· · · ·· · · φ ··· ··· 9 · · · ·· · · · · ·· · ·

Směs sloučeniny 33 (0,0089 g, 0,03 mmol) a 1 N NaOH (0,2 ml, 0,2 mmol) ve vodě (0,4 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny. Reakční směs se neutralizuje AcOH a zředí vodou k získání sloučeniny 34 ve formě 12,1 mmolárního vodného roztoku.

MS (ES+): 285,1 (100%, M+l).

Příklad 30 (±) Methyl-[3 β-( 1 '-Acetylamino-3 '-ethyl)-2'-pentenyl-4a-aminocyklopentan-1 -karboxylát] (35, směs izomerů na C-1, C-Γ a C-2', schéma-7),

Připraví se ze směsi sloučenin 8 a 9 (1,74 g, 4,5 mmol) podle stejných postupů jako pro sloučeniny 29, 30 a 31. Obdrží se ve formě žlutého oleje.

Příklad 31 (±) Methyl- [3 β-( 1 '-acetylamino-3 '-ethyl)pentyl-4a-aminocyklopentan-1 -karboxylát] (3 6, směs izomerů na C-Γ a C-1, schéma-7)

Připraví se ze sloučeniny 35 podle stejných postupů jako pro sloučeninu 33.

··· ·· · ··· ···· ·· · ··· • ······· · · ·· ·· ··· ··· · · · • · · · · φ · φ *H NMR (360 MHz, CDCb): δ 0,85-0,84 (m, 3 H), 1,15-1,51 (m, 11 H), 1,83 (s, 3 H), 2,ΙΟΙ,92 (m, 4 H), 3,01-2,86 (m, 3 H), 3,61 (s, 3 H), 7,4-7,71 (m, 1 H), 8,40-8,45 (bs, 2 H); IR (NaCl) 3358, 2946,2834, 1451, 1418, 1029 cm'¹; MS (ES+): 299,0 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C16H30N2O3 C, 64,39; H, 10,13; N, 9,39

Vypočteno pro Ci6H₃oN₂03*3 CF₃CO₂H*2 H₂O: C, 39,05; H, 5,51; N, 4,41 Zjištěno: C, 38,79; H, 5,13; N, 4,34.

Příklad 32 (±) 3P-(l'-Acetylamino-3'-ethyl)pentyl-4a-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina (37, směs izomerů na C-l a C-Γ, schéma-7)

Reakce sloučeniny 36 (0,010 g, 0,034 mmol) jak je popsaná pro sloučeninu 34 poskytne 9,8 mmolámího roztoku sloučeniny 37.

MS (ES+): 285,1 (100%, M+l).

Příklad 33 (±) 2- { 3 β-( 1 '-Acetylamino)-2'-pentenyl-4a-ferí-butoxykarbony lamino-1 -cyklopentyliden} 1,3-dithian (38, izomer-A na C-Γ, směs na C-2', schéma-8)

Do suspenze propyltrifenylfosfoniumbromidu (0,28 g, 0,73 mmol) v THF (10 ml) při teplotě -78 °C se přidá po kapkách NáHMDS (1 M roztok v THF, 0,73 ml, 0,73 mmol). Po 10 minutách míchání se reakční směs zahřeje na 0°C, míchá po dobu 20 minut a ochladí na • •99 • · · «·· · · 9 ··· • 9 9 · 99 9 999

9999999 9 9 99 99

999 999 999

........

teplotu -78°C. Do této směsi se přidá sloučenina 8 (0,097 g, 0,24 mmol) v THF (6 ml) a reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny. Přidá se voda ( 10 ml) a vrstvy se separují. Vodná vrstva se extrahuje etherem (4x10 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší (MgSO₄), filtrují přes Celite. Po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu k získání 0,16 g surového produktu. Purifikace radiální PLC (silikagel, 50 - 75% EtOAc/hexany) poskytne 0,093 g (91 %) sloučeniny 38 ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 175-177 °C.

^JH NMR (360 MHz, CDCb): δ 0,95-1,0 (m, 3 H), 1,45 (s, 9 H), 1,97-2,27 (m, 10 H), 2,562,72 (m, 1 H), 2,82-2,86 (m, 5 H), 3,82-3,88 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,71 (m, 1 H), 5,33-5,44 (m, 1 H), 5,58-5,75 (m, 1 H) 6,54-6,61 (m, 1 H); ER (KBr): 3342, 2970, 2935, 1683, 1646,

1537, 1367, 1296, 1170 cm¹;

MS (ES+): 427,5 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C₂iH₃₄N₂O₃S₂:· C, 59,12; H, 8,03; N, 6,57 . Zjištěno : C, 59,21; H,

8,04; N, 6,51.

Příklad 34 (±) Methyl-[3 β-( 1 ^,-acetylamino)-2'-pentenyl-4a-ter/-butoxykarbonylaminocyklopentan-1 karboxylát] (39, izomer-A na C-Γ a směs na C-2', schéma-8)

NHBoc

Reakce sloučeniny 38 (4,0 g, 9,4 mmol) jak je popsána pro sloučeninu 30 poskytne

2,7 g (78%) sloučeniny 39 ve formě oleje.

Příklad 35 (±) Methyl-[3 β-( 1 '-acetylamino)pentyl-4a-te/7-butoxykarbonylaminocyklopentan-1 karboxylát] (40, izomer-A na C-Γ, směs na C-1, schéma-8) • · · · • · ··· ·« · ·«·· • · · · · * · · · · ♦ • · ···· ·· · · ·· ·· ·

Reakce sloučeniny 39 (0,145 g, 0,39 mmol) jak je popsána pro sloučeninu 30 poskytne 0,14 g (97%) sloučeniny 40 ve formě hustého oleje.

Příklad 36 (±) Methyl-[3P-(l'-acetylamino)pentyl-4a-aminocyklopentan-l-karboxylát] (41, izomer-A na C-Γ, směs na C-l, schéma-8)

Směs sloučeniny 40 (0,08 g, 0,22 mmol) a TFA (0,5 ml, 6,5 mmol) v CH2CI2 (8 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se koncentruje ve vakuu k získání 0,112 g sloučeniny 41.

Příklad 37 (±) 3 P-(r-Acetylamino)pentyl-4a-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina (42, izomer-A na C-Γ, směs na C-l, schéma-8)

Reakce sloučeniny 41 (0,112 g) jak je popsaná pro sloučeninu 34 poskytne 31,9 mmolárního roztoku sloučeniny 42.

• · · · · • · · · · • · · ·

MS (ES+): 257,4 (100%, M+l).

Příklad 38 (±) Methyl-[cyklopent-3-en-l-karboxylát] (43, schéma 9), a (±) Ethyl-[cyklopent-3-en-l-karboxylát] (44, schéma 9)

O₂CH₃ :O₂C₂H_s

Tyto sloučeniny se připraví z cis-l,4-dichlor-2-butenu a dimethylmalonátu podle postupu uvedeného v Depres et. al., J. Org. chem, 1984, 49, 928-931. Výsledná kyselina se esterifikuje standardními způsoby k získání sloučeniny 43 nebo 44.

Příklad 39 (±)Methyl-[3-butyl-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (45, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici cis) a (±)Methyl-[3-butyl-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát], (46, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

Do roztoku při refluxu se přidá po kapkách methyl-(3-cyklopenten-l-karboxylát) 43 (10,21 g, 80,9 mmol) a fenylisokyanát (17,5 ml, 161 mmol) v suchém benzenu (50 ml) a směs 1-nitropentanu (10,8 ml, 87,8 mmol) a Et₃N (20 kapek) v suchém benzenu (30 ml) v průběhu 1 hodiny. Směs se zahřívá při refluxu po další 1 hodinu. Pevné látky se odstraní filtrací a promyjí EtjO. Spojené filtráty se koncentrují k získání oranžového oleje, který se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (0 až 50% ethylacetát v hexanech). Frakce obsahující požadovanou sloučeninu se spojují dohromady a odpaří k získání sloučeniny 46 (8,1 g, 45%) ve formě žlutého oleje.

• · · · • · • · · ·

Ή NMR (CDCI3): δ ppm 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,24-1,38 (m, 2 H), 1,39-1,58 (m, 2 H), 1,85-2,20 (m, 4 H), 2,22-2,39 (m, 2 H), 2,62-2,73 (m, 1 H), 3,54-3,67 (m, 1 H), 3,63 (s, 3 H), 4,95-5,03 (m, 1 H); MS (ES+): 225,9 (Μ + 1).

Analýza: Vypočteno pro C12H19NO3: C, 63,97; H, 8,52; N, 6,21 . Zjištěno: C, 63,77; H, 8,46; N, 6,25.

Další eluce poskytla sloučeninu 45 (2,0 g, 11 %) ve formě žlutého oleje.

'Η NMR (CDCb): δ ppm 0,90 (t, J = 15,0 Hz, 3 H), 1,27-1,40 (m, 2 H), 1,41-1,63 (m, 2 H), 1,92-2,05 (m, 1 H), 2,13-2,45 (m, 5 H), 2,78-2,86 (m, 1 H), 3,48-3,58 (m, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 4,91-5,03 (m, 1 H); MS (ES+): 225,8 (M + 1).

Analýza: Vypočteno pro C12H19NO3? C, 63,97; H, 8,52; N, 6,21. Zjištěno: C, 63,80; H, 8,54; N, 6,16.

Příklad 40 (±) Methyl-[3-( 1 '-ethylpropyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (47, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

Připraví se podle postupu pro sloučeniny 46 použitím l-nitro-2-ethylbutanu (20,3 g, 0,156 mol) a sloučeniny 43 (20 g, 0,158 mol) v 53 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

Ή NMR (CDCb): 8 ppm 0,8 (m, 6 H), 1,5 (m, 4 H), 1,9 (m, 2 H), 2,0 (m, 1 H), 2,1 (m, 1 H),

2,2 (m, 1 H), 2,5 (m, 1 H), 3,6 (s, 3 H), 3,7 (m, 1 H), 4,8 (m,l H);

MS (ES+): 240 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro Ci₃H₂iNO₃: C, 65,28; H, 8,78; N, 5,85. Zjištěno: C, 65,26; H, 8,78; N, 5,92.

♦ · · « • · · · • · · ♦ • · · ·

Příklad 41 (±)Methyl-[3-(r-propylbutyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (48, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

Připraví se podle postupu pro sloučeninu 46 použitím l-nitro-2-propylpentanu (73,06 g, 460 mmol) a sloučeniny 43 (63 g, 515 mmol) v 45 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

Ή NMR (CDC1₃): 6 ppm 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 6 H), 1,24-1,37 (m, 4 H), 1,42-1,55 (m, 3 H), 1,63 (m, 1 H), 1,98 (m, 2 H), 2,06 (m, 1 H), 2,39 (m, 2 H), 2,79 (m, 1 H), 3,61 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 3,69 (s, 3 H), 5,01 (dd, J = 8,5 a 5,3 Hz, 1 H);

MS (ES+): 225,8 (M + 1).

Analýza: Vypočteno pro C15H25NO3: C, 67,39; H, 9,42; N, 5,24 . Zjištěno: C, 67,25; H, 9,36; N, 5,17.

Příklad 42 (±) Ethyl-[3-(cyklohexylmethyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5karboxylát] (49, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

CO.Et

Připraví se podle postupu pro sloučeninu 46 použitím l-nitro-2-cyklohexylethanu (3,3 g, 21 mmol) a sloučeniny 44 (2,68 g, 19,1 mmol) v 31 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

'H NMR (CDCh): δ ppm 0,97 (m, 2 H), 1,22 (m, 6 H), 1,63 (m, 6 H), 2,01 (m, 4 H), 2,23 (dd, J - 8,9 a 15 Hz, 1 H), 2,33 (dd, J = 6,2 a 14 Hz, 1 H), 2,74 (m, 1 H), 3,62 (t, J = 8,6 Hz, 1 H),

4,13 (m, 2 H), 5,03 (dd, J = 5,5 a 8,6 Hz);

• ·

I* · • ·

MS (ES+): 280,4 (M+l).

Analýza: Vypočteno pro C16H25NO3: C, 68,79; H, 9,02; N, 5,01. Zjištěno: C, 68,81; H, 8,96; N, 5,06.

Příklad 43 (±) Ethyl-[3-(l'-ethylpentyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (50, směs izomerů na C-Γ, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

Připraví se podle postupu pro sloučeninu 46 použitím l-nitro-2-ethylhexanu ( 5,75 g, 36 mmol) a sloučeniny 44 (4,6 g, 33 mmol) v 34 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

Příklad 44 (±) Ethyl-[3-(r-methylethyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (51, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans)

Připraví se podle postupu pro sloučeninu 46 použitím l-nitro-2-methylpropan (6,2 g, 60 mmol) a 44 (0,7 g, 50 mmol) v 41,5 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

Příklad 45 (±) Ethyl-[3-cyklohexyl-4,5,6,6a-tetrahydro-3aH-cyklopenta[d]isoxazol-5-karboxylát] (52, schéma 9, esterová skupina a isooxazolinový kruh jsou vzájemně v pozici trans) • 000 • * • 0 ·

000

0

Připraví se podle postupu pro sloučenin)j46 použitím l-nitro-2-propylpentan ( 2,86 g, 20 mmol) a 44 (2,8 g, 20 mmol) v 39,6 % výtěžku ve formě žlutého oleje.

Příklad 46 (±) Methyl-[t-3-(r-acetylaminopentyl)-t-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylát] (53, izomerA na C-Γ, schéma 9)

AcHN

HO.

Do roztoku sloučeniny 46 (3,0 g, 13,3 mmol) v THF (10 ml) se přidá anhydrid kyseliny octové (25 ml, 27 mmol) a Raneyův nikl (3 g). Směs se hydrogenuje při tlaku 35 psi po dobu 16 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes Celíte a filtrát se koncentruje ve vakuu. Surový produkt se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (40% až 100% EtOAc v hexanech). Požadované frakce se spojují dohromady a koncentrují. Zbytek se rozpustí v MeOH (10 ml) a přidají se sodné pelety (10 mg) a míchá se po dobu 4 hodin. Reakční směs se neutralizuje AcOH a koncentruje ve vakuu. Po přidání vody (20 ml) se směs extrahuje EtOAc (2 x 20 ml). Organické vrstvy se spojí, suší (MgSO₄) a koncentruje ve vakuu. Zbytek se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (50 - 80%

EtOAc v hexanech). Příslušné frakce se spojují dohromady a koncentrují k získání sloučeniny 53 v 20% výtěžku ve formě bezbarvého oleje.

'li NMR (CDCb): δ ppm 0,90 (t, J = 6,5 Hz, 3 H), 1,32 (m, 6 H), 1,90 (m, 4 H), 2,05 (s, 3 H), 2,09 (m, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,81 (m, 1 H), 4,07 (s, 1 H), 4,52 (s, 1 H,), 5,38 (d, J = 8,7 Hz, 1 H); IR (NaCl) 3285, 2952, 1733, 1626, 1549, 1436, 1202 cm'¹; MS(ES+): 272,3 (100% ,M+1).

Analýza: Vypočteno pro G4H25NO4: C; 61,97; H; 9,29; N; 5,16

Vypočteno pro Ci^mNOtO^HjO: C; 60,96; Η; 9,31; Ν; 5,08. Zjištěno: C;

60,79; Η; 9,01; Ν; 5,13.

ΦΦ · • 9 9 • Φ · Φ • · ΦΦΦΦ

Φ φ Φ

ΦΦ Φ

Φ· φφφφ • · · Φ Φ Φ

Φ Φ · • · · ·· · ·· Φ* • Φ Φ Φ • 9 · · • Φ Φ ·

Φ Φ 9 9 ·· Φ Φ

Příklad 47 (±) Methyl-[t-3-(r-acetylamínopentyl)-t-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylát] (54, izomerB na C-Γ, schéma 9)

Do roztoku sloučeniny 46 (3,5 g, 15,6 mmol) v THF (150 ml) se přidá anhydrid kyseliny octové (29 ml, 31 mmol) a oxid platiny (0,8 g). Směs se hydrogenuje při tlaku 50 psi po dobu 24 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes Celíte a filtrát se koncentruje ve vakuu. Surový produkt se rozpustí v EtOAc (50 ml), neutralizuje koncentrovaným NH₄OH a přidá se voda (25 ml). Organická vrstva se separuje, vodná vrstva se dále extrahuje EtOAc (2 x 20 ml). Organické vrstvy se spojí a suší (MgSO₄). Po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu. Zbytek se rekrystalizuje z etheru k získání sloučeniny 54 ve 24% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

’H NMR (CDCb): δ ppm 0,89 (t, J = 6,5 Hz, 3 H), 1,35 (m, 5 H), 1,97 (m, 6 H), 2,00 (s, 3 H), 2,73 (s, 1 H), 3,10 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 4,13 (m, 1 H), 4,28 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,28 (d, J =

9,2 Hz, 1 H); IR (KBr) 3537, 3286, 2951, 1700, 1640, 1559, 1219 cm’¹; MS (ES+) : 272,4 (100% ,M+1).

Analýza : Vypočteno pro CnífeNO^ C, 61,97; H, 9,29; N, 5,16. Zjištěno: C, 61,78; H, 9,09; N, 5,08.

Příklad 48 (±) Methyl-[t-3 -(1 -acetylamino-2-ethyl)butyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (55, izomer-A na C-Γ, schéma 9)

• 9 9 ♦ · • 9 9 9 9

9 · 9 9 9

9 9999 99 9

9 9 9 9

9 99 • 999

99

9 9 9 9

9 9 9 9 ·

9 9 9 9

99 99

Do roztoku sloučeniny 47 (0,5 g, 2 mmol) ve směsi ClhCRHjO (15:1, 50 ml) se přidá Mo(CO)é (0,2 g, 0,8 mmol) a NaBH₄ (91 mg, 2,4 mmol). Reakční směs se refluxuje po dobu 3 hodin, zchladí na pokojovou teplotu a odpařuje do sucha. Do reakční směs se přidá EtOAc (50 ml), anhydrid kyseliny octové (3,78 ml, 40 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při pokojové teplotě. Reakční směs se pak odpařuje do sucha a zbytek se purifikuje zrychlenou chromatografíí na sloupci silikageiu ( 0 až 100% EtOAc v hexanech). Příslušné frakce se spojují dohromady a koncentrují k získání sloučeniny 55 ve 20% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

Ή NMR (DMSO-de): δ ppm 0,8 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 0,9 (t, J = 7 Hz, 3 H), 1,0 (m, 1 H) 1,2 (m, 2 H), 1,4 (m, 2 H), 1,6 (m, 1 H), 1,7 (m, 2 H), 1,8 (m, 2 H), 1,88 (s, 3 H), 3,0 (m, 1 H), 3,6 (s, 3 H), 3,9 (m, 2 H), 4,5 (s, 1 H), 7,5 (d, J = 9,5 Hz, 1 H);

MS(ES+): 244,13 (M+l).

Příklad 49 (±) Methyl-[t-3 -[(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl]-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (56, izomer-B na C-Γ, schéma 9) ^H°<O\

CO,Me

Obdrží se v 61% výtěžku ve formě bezbarvého oleje ze sloučeniny 47 (15 g, 62,7 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.

' H NMR (DMSO-de): δ ppm 0,8 (m, 6 H), 1,0 (m, 2 H), 1,3 (tn, 2 H), 1,4 (m, 1 H), 1,7 (m, 1 H), 1,8 (s, 3 H), 1,9 (m, 3 H), 2,0 (m, 1 H), 3,0 (m, 1 H), 3,6 (s, 3 H), 4,0 (m, 1 H), 4,1 (dd, J - 1,4 a 10,4 Hz, 1 H), 4,5 (d, 1 H, J = 4,3 Hz), 7,3 (d, J = 10,2 Hz, 1 H);

MS (ES+): 286,3 (100% M+l).

♦ · • · · • ··*· ♦ · ·«♦ ·

44

4 « 4 4 4 4

4 · 4 4 4 4

44 · 4 4 4 4

4 4 4 · 4 ·

4 44 44

Analýza : Vypočteno pro Ci₅H₂₇NO₄ 0,75 H₂O: C: 60,31; H: 9,54; N: 4,69. Zjištěno: C: 60,24; H: 9,51;N: 4,59.

Příklad 50 (±) Methyl-[t-3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát ](5 7, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Do směsi sloučeniny 48 (14 g, 52 mmol) rozpuštěné v MeOH/H₂O/AcOH (120/15/15 ml) se přidá PtO₂ (1,4 g) a směs se hydrogenuje při tlaku 50 psi po dobu 16 hodin.

Katalyzátor se odstraní filtrací a filtrát se koncentruje k získání aminoderivátu. Výše uvedený surový produkt se rozpustí v CH₂C1₂ (250 ml), přidá se anhydrid kyseliny octové (55 ml, 520 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 45 minut při pokojové teplotě. Do směsi se přidá NH4OH tak, aby se hodnota pH upravila na 8. Organická vrstva se separuje, promyje solankou, suší a koncentruje ve vakuu. Reziduální olej se krystalizuje z ether/hexanů k získání sloučeniny 57 v 64% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

^]H NMR(CDC1₃): δ ppm 0,9 (m, 6 H), 1,06 (m, 1 H), 1,14 (m, 1 H), 1,32 (m, 4 H), 1,44 (m, 2 H), 1,52 (m, 1 H), 1,96 (m, 5 H), 2,00 (s, 3 H), 2,59 (d, J = 3,1 HZ, 1 H), 3,10 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 4,21 (m, 1 H), 4,27 (m 1 H), 5,29 (d, J = 10 Hz, 1 H); IR (KBr) : 3493, 3277, 2955, 2930, 2870, 1734, 1713, 1642, 1560, 1442, 1372, 1216 cm'¹;

MS (ES+) : 314,5 (20%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C17H31NO4: C: 65,14; H: 9,97; N: 4,47. Zjištěno: C: 65,19; H: 10,04; N: 4,50.

Příklad 51 (±) Ethyl-[t-3 -(1 '-acetylamino-2'-cyklohexyl)ethyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (58, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

4444 • 4

4

Obdrží se v 68,5 % 'výtěžku ve formě žlutého oleje ze sloučeniny 49 (0,5 g, 1,79 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.

^XH NMR (CDCb): δ ppm 0,82-0,99 (m, 2 H), 1,10-1,23 (m, 4 H), 1,25 (t, 3 H), 1,28-1,42 (m, 4 H), 1,58-1,70 (m, 4 H), 1,97-2,05 (m, 3 H), 2,00 (s, 3 H), 2,80 (d, IH), 3,06 (m, 1 H), 4,12 (m, 3 H), 4,26 (m, 2 H), 5,18 (d, 1 H);

MS(ES+): 326,5 (M+l).

Analýza: Vypočteno pro C18H31NO4: 0,25 H₂O: C, 65,52; H, 9,62; N, 4,25 . Zjištěno: C, 65,48; H, 9,63; N, 4,27.

Příklad 52 (±) Ethyl- [t-3 -(1 '-acetylamino-2'-ethyl)hexyi-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (59, izomer-B na C-1' a směs na C-2', schéma 9)

HO,

Obdrží se v 34% výtěžku jako olej ze sloučeniny 50(l,0g, 3,55 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.

Příklad 53 (±) Ethyl-[t-3 -(1 '-acetylamino-2'-methyl)propyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (60, izomer-B na C-1', schéma 9)

»· « • φ · · • · « · * • · ·♦·· φ · • · * · ·« 9 • · • * • ·

99

Obdrží se v 15,5 % výtěžku jako olej ze sloučeniny 51 (0,98 g, 4,1 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.

MS (ES+): 272,1 (M+l).

Příklad 54 (±) Ethyl-[t-3 -(1 '-acetylamino-1 '-cyklohexyl)methyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (61, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN ^7

Obdrží se v 17 % výtěžku jako olej ze sloučeniny 52 (1 g, 3,77 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.

MS (ES+): 312,0 (M+l).

Příklad 55 (±) t-3-(l'-Acetylaminopentyl)-t-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (62, izomer-A na C-Γ, schéma 9)

AcHN ^H°<\ —' co₂h

Do směsi sloučeniny 53 (0,1 g, 0,37 mmol) v THF (2 ml) a EtOH (2 ml) se přidá IN NaOH (0,93 ml, 0,93 mmol) a voda (2 ml). Směs se míchá po dobu 30 min. Rozpouštědlo se odstraní, zbytek se vychytává v H2O a extrahuje EtOAc ( 5 ml). Vodná vrstva se okyselí (pH 4) a extrahuje EtOAc (2x5 ml). Organické extrakty z kyselé směsi se spojí a suší (MgSO4). Po filtraci se filtrát koncentruje a trituruje ether/hexany k získání sloučeniny 62 (84%) ve formě bílé pevné látky.

» · 4 • « 0 9 9

9 9 9 9 ·

9 4409 4 4 9

9 9 9 9

9 99

9499

0 9 4 9

4 9 9 0

4 4 9 9 9

9 · 9 4

9 9 9 4 ‘H NMR (DMSO-dg): δ ppm 0,85 (t, J = 5,0 Hz, 3 H), 1,26 (m, 6 H), 1,74 (m, 5 H), 1,86 (s, 3 H), 2,92 (m, 1 H), 3,54 (m, 1 H), 3,90 (s, 1 H), 4,60 (s, 1 H), 7,87 (d, J = 8,6 Hz, 1 Η), 11,96 (s, 1 H); IR (KBr): 3259, 3112, 1727, 1607, 1200 cm'¹;

MS (ES+) 258,4 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C13H23NO4: C, 60,68; H, 9,01; N, 5,44. Zjištěno: C, 60,63; H, 9,00; N, 5,45

Příklad 56 (±) t-3-(r-Acetylaminopentyl)-t-4-hydroxycyklopentan-r-l -karboxylová kyselina (63, směs izomerů na C-Γ, schéma 9)

Do směsi sloučeniny 46 (3,0 g, 13,3 mmol) v THF (100 ml) se přidá anhydrid kyseliny octové (25 ml, 270 mmol) a Raneyův nikl (3 g). Směs se hydrogenuje při tlaku 35 psi po dobu 16 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací přes Celíte a filtrát se koncentruje ve vakuu. Surový produkt se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu (40 100% EtOAc v hexanech. Příslušné frakce se spojí dohromady a koncentrují.

Do výše obdrženého esteru (0,15 g) se přidá THF (2 ml), EtOH (2 ml) a 1 N NaOH (2 ml, 2 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 30 minut a koncentruje ve vakuu k odstranění organického rozpouštědla. Vodná vrstva se promyje EtOAc a okyselí na hodnotu pH 4 pomocí IN HCI. Vodná vrstva se nasytí chloridem sodným a extrahuje EtOAc (2x5 ml). Organické extrakty z kyselé vrstvy se spojí a suší (MgSO4). Po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu. Zbytek se trituruje ether/hexany (1:1) k získání sloučeniny 63 ve formě bílé pevné látky.

'H NMR (DMSO-dé): δ 0,83 (m, 3 H), 1,3 (m, 5 H), 1,9 (m, 6 H), 2,9 (m, 1 H), 3,35 (s, 3 H),

3,5 (m, 0,4 H), 3,85 (m, 0,6 H), 3,95 (s, 0,4 H), 4,05 (s, 0,6 H), 4,6 (s, 0,6 H), 4,7 (s, 0,4 H), φφ φφ φ φ φ φ φφφ φ φ φ φ φ « *·φ «φφ» φ · V · · φ φφφ* φ φ φ φ • φ · · · ·· · φφ · φ φ φφ

7,44 (d, J = 9,5 Hz, 0,6 Η), 8,0 (d, J = 9,5 Hz, 0,4 Η), 12,0 (s, 1 H).IR (KBr) 3303,2951, 2934, 1726, 1688, 1650, 1550, 1202 cm'¹;

MS (ES+): 258,4 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C13H23NO4: C, 60,68; H, 9,01; N, 5,44. Zjištěno: C, 60,67; H, 8,96; N, 5,42.

Příklad 57 (±) t-3-(l'-Acetylaminopentyl)-t-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (64, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Obdrží se v 61 % výtěžku ve formě hydroskopické pevné látky ze sloučeniny 54 (0,15 g, 0,48 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 62.

'Η NMR (DMSO-de): δ ppm 0,83 (t, J = 6,5 Hz, 3 H), 1,26 (m, 5 H), 1,47 (m, 2 H), 1,61 (m, 1 H), 1,71 (m, 1 H), 1,79 (s, 3 H), 1,91 (m, 1 H), 2,02 (m, 1 H), 2,56 (m, 1 H), 3,37 (m, 1 H),

3,68 (m, 1 H), 3,80 (dd, J - 13,0 a 6,6 Hz, 1 H), 7,44 (d, J = 9,5 Hz, 1 Η), 11,8 (brs, 1 H); IR (NaCl) 3303, 2957, 2934, 1708, 1628, 1556, 1376 a 1221 em’¹;

MS (ES+): 258,3 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C13H23NO4. C, 60,68; H, 9,01; N, 5,44

Vypočteno pro Ci₃H₂3NO4.0,33H2O: C, 59,30; H, 9,06; N, 5,32 Zjištěno: C, 59,08; H, 8,85; N, 5,13.

Příklad 58 (±) t-3-(r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (65, izomer-A na C-Γ, schéma 9)

Směs sloučeniny 55 (8,4 mg, 0,03 mmol), IN hydroxidu sodného (0,1 ml,0,1 mmol) a vody (0,2 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Směs se neutralizuje IN kyselinou chlorovodíkovou a zředí vodou k získání 29,4 mmolárního roztoku.

MS (ES+): 272,2 (M+l).

Příklad 59 (±) t-3-(r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-l -karboxylová kyselina (66, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

HO,

Obdrží se ve formě 44,2 mmolárního roztoku ze sloučeniny 56 (5,3 mg, 0,0177 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 65.

MS (ES+): 272,2 (M+l).

Příklad 60 (±) t-3 -(1Acetylamino-2 '-propyl)pentyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (67, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

HO.

Do roztoku sloučeniny 57 (0,15 g, 0,48 mmol) v THF (2 ml) a MeOH (2 ml) se přidá 1 N NaOH (1,9 ml, 1,9 mmol) a voda ( 1 ml). Po 1 hodině míchání při pokojové teplotě se směs okyselí na hodnotu pH 3 použitím 6N HCI. Tuhá látka se spojí filtrací a suší ve vakuu k získání sloučeniny 67 v 96% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

• · · · • · • · · • ·

Ή NMR (DMSO-ds): δ ppm 0,80 (t, J = 7,0 Hz, 3 H), 0,88 (t, J = 7,0 Hz, 3 H), 0,99 (m, 2 H), 1,11 (m, 1 H), 1,22 (m, 2 H), 1,41 (m, 3 H), 1,52 (m, 1 H), 1,66 (m, 1 H), 1,78 (s, 3 H), 1,83 (m, 3 H), 1,92 (m, 1 H), 2,86 (m, 1 H), 3,95 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 4,07 (dt, J = 10,8 a 1,4 Hz, 1 H), 4,42 (d, J = 4,2 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 10,3 Hz, 1 Η), 11,92 (s, 1 H); IR (KBr) 3369, 2962, 2934, 1695, 1596, 1548, 1217 cm'¹;

MS(ES+): 300,4 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C16H29NO4: C, 64,19; H, 9,76, N; 4,68. Zjištěno: C, 64,04; H, 9,73, N; 4,68.

Příklad 61 (±) t-3-( 1 '-Acetylamino-2'-cyklohexyl)ethyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (68, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN.

HO.

COjH

Obdrží se jako 50 mmolární roztok ze sloučeniny 58 (6,5 mg, 0,02 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 65.

MS (ES+): 320,4 (M+Na).

Příklad 62 (±) t-3-(r-Acetylamino-2'-ethyl)hexyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-l -karboxylová kyselina (69, izomer-B na C-Γ a směs na C-2', schéma 9)

AcHNHO, ϊΟ₂Η

Obdrží se jako 76 mmolární roztok ze sloučeniny 59 (10 mg, 0,0306 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 65.

MS (ES+): 300,5 (M+l).

Příklad 63 (±) t-3-( 1 '-Acetylamino-2'-methyl)propyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (70, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN.

HO,

Obdrží se jako 80 mmolární roztok ze sloučeniny 60 ( 10 mg, 0,032 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 65.

MS (ES+): 266,0 (M+Na).

Příklad 64 (±) t-3-( 1 '-Acetylamino-1 '-cyklohexyl)methyl-t-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (71, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN.

HO.

Obdrží se jako 80 mmolární roztok ze sloučeniny 61 (10 mg, 0,032 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 65.

MS (ES+): 305,9 (M+Na).

Příklad 65 (±) Methyl-[t-3 -(1 '-acetylaminopentyl)-t-4-methansulfonyloxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (72, izomer-A na C-Γ, schéma 9) • · • ·

AeHN-^X ^mso<)l

-' COjMe

Methansulfonylchlorid (0,3 ml, 3,87 mmol) a Et3N (0,75 ml, 5,38 mmol) se přidají do směsi sloučeniny 53 (0,59 g, 2,17 mmol) a DMAP (30 mg, 0,24 mmol) v suchém CH2CI2 (10 ml) zchlazeném na teplotu 4 °C. Po míchání při pokojové teplotě přes noc se reakční směs zháší H2O a extrahuje CH2CI2 (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou a suší (MgSO₄). Po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu k získání sloučeniny 72 (83%) ve formě oleje.

Příklad 66 (±) Methyl-[t-3-(l’-acetylaminopentyl)-t-4-methansulfony loxy cyklopentan-r-1 -karboxylát] (73, izomer-B na C-Γ, schéma 9).

Připraví se ve formě bílé pevné látky ve 41 % výtěžku ze sloučeniny 54 (2,13 g, 7,85 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 72. Rekrystalizuje se z ether/hexanů k získání požadované sloučeniny.

^!H NMR (CDCb): δ ppm 0,91 (m, 3 H), 1,20-1,45 (m, 4 H), 1,53-1,80 (m, 2 H), 1,98 (s, 3 H), 2,01-2,21 (m, 4 H), 2,48-2,51 (m, 1 H), 3,02 (s, 3 H), 3,04-3,10 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 4,004,15 (m, 1 H), 5,15-5,25 (m, 2 H);

MS (ES+): 350,4 (M+l).

Analýza: Vypočteno pro C15H27NO6S: C, 51,56; H, 7,79; N, 4,01. Zjištěno; C, 51,44; H,

7,75; N, 4,25.

Příklad 67 φ φ (±) Methyl-t-3 -(1'- Acetylamino-2 '-ethyl)butyl-t-4-methansulfonyloxycyklopentan-r-1 karboxylát (74, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN

MsO ,Me

Připraví se v 20 % výtěžku ve formě žlutého oleje ze sloučeniny 56 (5,18 g, 18,2 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu72.

Příklad 68 (±) Methyl-[t-3 -(1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-t-4-methansulfonyloxycyklopentan-r-1 karboxylát] (75, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se v 81% výtěžku ze sloučeniny 57 (1,92 g, 6,13 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 72.

Příklad 69 (±) Methyl-[t-3-(l'-acetylaminopentyl)-c-4-azidocyklopentan-r-l-karboxylát] (76, izomer-A na C-Γ, schéma 9)

Do směsi sloučeniny 72 (0,6 g, 1,72 mmol) v suchém DMF (6 ml) se přidá azid sodný (0,47 g, 7,2 mmol) a zahřívá se při teplotě 80 °C po dobu 3 hodin. Reakce se zháší H₂O (5 ml) a extrahuje EtOAc (2x10 ml). Spojené extrakty se promyjí H₂O (2x5 ml) a suší (MgSO₄). Po filtraci se filtrát koncentruje k získání surového oleje, který se separuje na sloupci • · silikagelu zrychlenou chromatografií použitím směsi 8 dílů dichlormethanu a 2 dílů [chlorform (80): methanol (18): hydroxid amonný (2)] jako eluentu k získání sloučeniny 0,45 g (88%) sloučeniny 76 ve formě bílé pevné látky.

Příklad 70 (±) Methyl-t-3-(r-acetylaminopentyl)-c-4-azidocyklopentan-r-l-karboxylát (77, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se v 85% výtěžku ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 73 (2,4 g, 6,87 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 76.

Ή NMR (CDC1₃): 8 ppm 0,90 (m, 3 H), 1,20-1,40 (m, 5 H), 1,58-1,69 (m, 2 H), 1,95-2,13 (m, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 2,29-2,39 (m, 1 H), 2,75-2,80 (m, 1 H), 3,50-3,61 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 4,05-4,10 (m, 1 H), 5,20 (d, 1 H, J= 6 Hz); MS (ES+): 297,4 (M+l); IR (KBr): 3200, 3085, 2091, 1737, 1645 cm'¹.

Analýza: Vypočteno pro C14H24N4O3. C, 56,74; H, 8,16; N, 18,90. Zjištěno:C, 56,83; H, 8,14; N, 18,81

Příklad 71 (±) Methyl-[t-3 -[(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-azidocyklopentan-r-1 -karboxylát] (78, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

AcHN tjjMe • · • 0 • ·

Připraví se v 74% výtěžku ze sloučeniny 74 (1 g, 2,7 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 76.

Příklad 72 (±) Methyl-[t-3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-azidocyklopentan-r-1 -karboxylát] (79, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se v 31% výtěžku ze sloučeniny 75 (0,56 g, 1,44 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 76.

Ή NMR (CDC1₃): δ ppm 0,9 (m, 6 H), 1,04 (m, 1 H), 1,17 (m, 2 H), 1,37 (m, 7 H), 1,69 (m, 1 H), 2,01 (s, 3 H), 2,02 (m, 1 H), 2,08 (m, 1 H), 2,37 (m, 1 H), 2,84 (m, 1 H), 3,52 (dd, J = 15 a

7,5 HZ, 1 H), 3,69 (s, 3 H), 4,07 (m, 1 H), 5,17 (d, J = 10 Hz, 1 H); IR (KBr): 3280, 2959, 2872, 2104, 1725, 1645, 1560, 1438, 1372 cm'¹;

MS (ES+): 339,5 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C17H3ON4O3: C, 60,33; H, 8,93; N, 16,55. Zjištěno: C, 60,60; H,

8,85; N, 16,31.

Příklad 73 (±) Methyl-[t-3-(r-acetylaminopentyl)-c-4-aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (80, izomer-A na C-Γ, schéma 9)

AcHN nh₂

OjMe « *

Do směsi sloučeniny 76 (0,45 g, 1,5 mmol) v MeOH (10 ml) se přidá PtO₂ (50 mg) a směs se hydrogenuje při tlaku 50 psi po dobu 12 hodin. Katalyzátor se odfiltruje, promyje MeOH a filtrát se koncentruje do sucha. Zbytek se purifikuje chromatografíí na sloupci silikageiu (EtOAc následovaný směsí chloroformu (80): methanolu (18): hydroxidu amonného (2)] k získání sloučeniny 78 (27 %).

MS (ES+): 257,4 (M+l).

Příklad 74 (±) Methyl-[t-3-(r-acetylaminopentyl)-c-4-aminocyklopentan-r-l -karboxylát] (81, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se v 65% výtěžku ve formě hydrochloridu ze sloučeniny 77 (95 mg, 0,32 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 80.

‘HNMR (DMSO-de): δ ppm 0,85 (t, 3 H), 1,10-1,45 (m, 5 H), 1,71-1,90 (m, 5 H), 1,91 (s, 3 H), 2,00-2,09 (m, 1 H), 2,15-2,28 (m, 1 H), 2,75-2,85 (m, 1 H), 2,92-3,05 (m, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,90-4,01 (m, 1 H), 7,95-8,15 (m, 3 H);

MS (ES+): 271,4 (M+l); IR (KBr): 3400, 3240, 1733, 1645 cm^-1.

Analýza: Vypočteno pro Ci4H₂₆N₂O₃»HCl: C, 54,80; H, 8,87; N, 9,11 . Zjištěno: C, 54,77; H, 8,80; N, 8,72.

Příklad 75 (±) Methyl-t-3 - [(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-aminocyklopentan-r-1 -karboxylát (82, izomer-B na C-Γ, schéma 9) • · • · · • 9999 • 9 • 9 • · • ·

AcHN

:Ο^Μ©

Připraví se v 35% •výtěžku ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 78 (0,5 g, 1,6 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 80.

Ή NMR (DMSO-de): δ ppm 0,75 (t, 3 H, J= 7,2 Hz), 0,8 (t, 3 H, J= 7,2 Hz), 1,2 (m, 2 H), 1,3 (m, 1 H), 1,4 (m, 2 H), 1,8 (m, 3 H), 1,9 (s, 3 H), 2,2 (m, 2 H), 2,9 (m, 2 H), 3,6 (m, 3 H), 3,8 (m, 1 H), 8,0 (m, 3 H).

Příklad 76 (±) Methyl-[t-3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-aminocyklopentan-r-1 -karboxylát] (83, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se v 90% výtěžku ve formě hydrochloridu ze sloučeniny 79 (0,7 g, 2,1 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 80.

Ή NMR (DMSO-de): δ ppm 0,85 (m, 6 H), 1,26 (m, 8 H), 1,4 (m, 1 H), 1,77 (m, 2 H), 1,84 (m, 1 H), 1,88 (s, 3 H), 2,20 (m, 2 H), 2,83 (m, 1 H), 2,92 (m, 1 H), 3,61 (s, 3 H), 3,83 (t, J =

8,5 Hz, 1 H), 7,92 (d, J = 9 Hz, 1 H), 7,98 (s, 2 H); IR (KBr): 3321, 2958, 2933, 2872, 1725, 1641, 1614, 1368, 1166 cm'¹; MS (ES+): 313,4 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro Ci₇H₃₂N₂O3.HC1: C, 58,52; H, 9,53; N, 8,03

Vypočteno pro Ci₇H₃₂N₂O3.HC1.0,75H₂O. C, 56,50; Η, 9,34; N, 7,75 Zjištěno: C, 56,33; H, 9,24; N, 7,48.

Příklad 77

.....

(±) t-3-(r-Acetylaminopentyl)-c-4-aminocyklopentan-r-l -karboxylová kyselina (84, izomerA na C-Γ, schéma 9) • 99 9

Směs sloučeniny 80 (4,6 mg, 0,0017 mmol), IN hydroxid sodný (0,1 ml, 0,1 mmol) a voda (0,2 ml) se míchají při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Směs se neutralizuje IN kyselinou chlorovodíkovou k získání požadované sloučeniny ve formě 10,6 mmolámího roztoku.

MS (ES+): 257,0 (M+l).

Příklad 78 (±) t-3-(l'-Acetylaminopentyl)-c-4-aminocyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (85, izomerB na C-Γ, schéma 9)

Připraví se ve formě 35,4 mmolárního roztoku ze sloučeniny 81 (10,9 mg, 0,036 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 84.

MS (ES+): 257,3 (M+l).

Příklad 79 (±) t-3-[(r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-aminocyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (86, izomer-B na C-Γ, schéma 9) • · • · • «

• · • « • ♦ · • · ' · · • · · · ·

Připraví se ve formě 35,9 mmolárního roztoku ze sloučeniny 82 (10 mg, 0,036 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 84.

MS (ES+): 271,4 (M+l).

Příklad 80 (±) t-3-(l'-Acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-aminocyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (87, izomer-B na C-Γ, schéma 9)

Připraví se ve formě 13,4 mmolárního roztoku ze sloučeniny 83 (10,5 mg, 0,03 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 84.

MS (ES+): 299,4 (M+l).

Příklad 81 (±) Methyl-[c-3 -(1 '-acetylaminopentyl)-c-4-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (88, izomer-B na C-Γ, schéma 10)

AcHN

CO₂Me

HO.

Připraví se ze sloučeniny 45 (2,0 g, 8,9 mmol) v 88 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 54.. Produkt se rekrystalizuje z etheru.

• ··♦· ·

Příklad 82 (±) c-3-(r-Acetylaminopentyl)-c-4-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (89, izomer-B na C-Γ, schéma 10)

Do směsi sloučenin 88 (174 mg, 0,64 mmol) v THF/MeOH (4 ml, 1:1) se přidá IN NaOH (1,6 ml, 1,6 mmol) a směs se míchá po dobu 30 min. Rozpouštědlo se odstraní, zbytek se vychytává v H2O (10 ml) a extrahuje EtOAc (2 x 10 ml). Vodná vrstva se okyselí (pH 4), extrahuje EtOAc (2 x 10 ml). Spojené organické extrakty z okyselené vrstvy se suší (MgSCU). Po filtraci se filtrát koncentruje. Zbytek se trituruje ether/hexany k získání sloučeniny 89 v 69% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

Ή NMR (DMSO-de): δ ppm 0,85 (t, 3 H), 1,13-1,28 (m, 5 H), 1,51-1,87 (m, 5 H), 1,75 (s, 3 H), 1,98-2,07 (m, 1 H), 2,52-2,68 (m, 1 H), 3,75-3,84 (m, 1 H), 3,89 (br s, 1 H), 4,39 (br s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 11,90 (s, 1 H); MS (ES+): 258,0 (M+l); IR (KBr): 3500-2850, 3529, 3318, 1700, 1601, 1565 cm’¹.

Analýza: Vypočteno pro C13H23NO4: C, 60,68; H, 9,01; N, 5,44. Zjištěno: C, 60,57; H, 8,95; N, 5,40

Příklad 83 (±) Methyl-[c-3-(r-acetylaminopentyl)-c-4-methansulfonyloxycyklopentan-r-l-karboxylát] (90, izomer-B na C-Γ, schéma 10) • · « t · · • 0 · • · « • · * • · · • · · • · · ·· ·

♦ · · · ···♦ ·♦ · ·

Připraví se ze sloučeniny 88 ( 1,4 g, 5,16 mmol) v 20 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 72.

'H NMR (CDCI3): δ 0,90 (t, 3 H, J = 6,5 Hz), 1,21-1,48 (m, 5 H), 1,61-1,75 (m, 1 H), 1,922,30 (m, 7 H), 2,50 (dd, 1 H, J = 4,0 a 1,1 Hz), 2,81-2,95 (m, 1 H), 3,09 (s, 3 H), 3,68 (s, 3 H), 4,02-4,15 (m, 1 H), 5,10 (s, 1 H), 5,45 (d, 8,7 Hz, 1 H); IR (KBr) 3327, 1725, 1648 cm’¹; MS (ES+) : 350,0 (M+l).

Analýza: Vypočteno pro C15H27NO6S C, 51,56; H, 7,79; N, 4,01 . Zjištěno C, 51,82; H, 7,84; N, 4,02.

Příklad 84 (±) Methyl-c-3-(r-acetylaminopentyl)-t-4-azidocyklopentan-r-l-karboxylát (91, izomer-B na C-Γ, schéma 10)

Připraví se ze sloučeniny 90 (0,712 g, 2,04 mmol) v 68 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 76.

Příklad 85 (±) Methyl-[c-3-(r-acetylaminopentyl)-t-4-aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (92, izomer-B na C-Γ, schéma 10) • · · · · φφφφ * * • φ φφφφ φ · · φφφ φ · »· φφφφ • Φ φφ • · φ « • φ φ <

φ φ φ φ ⁴ φ φ φ <

·» ♦·

Připraví se ve formě hydrochloridu ze sloučeniny 91 (50 mg, 0,17 mmol) v 90 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 80.

NMR(DMSO-de): δ ppm 0,85 (m, 3 H), 1,3 (m, 6 H), 1,5 (m, 1 H), 1,8 (m, 4 H), 2,1 (m, 3 H), 3,1 (m, 2 H), 3,6 (s, 3 H), 4,0 (m, 1 H), 7,9 (m, 1 H), 8,2 (m, 3 H); IR (KBr): 3249, 2955, 2933, 2871, 2361, 1732, 1645, 1548, 1437; MS (ES+): 271,0 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro Ci4H₂6N2O3.HC1.0,7H₂O.· C, 52,71; H, 8,99; N, 8,78 . Zjištěno: C, 53,09; H, 8,59; N, 8,20.

Příklad 86 (±) c-3-(r-Acetylaminopentyl)-t-4-aminocyklopentan-r-l -karboxylová kyselina (93, izomerB na C-Γ, schéma 10)

Připraví se ve formě 28,5 mmolárního roztoku ze sloučeniny 92 (9,3 mg, 0,029 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 84.

MS (ES+): 257,0 (M+l).

Příklad 87 (±) Methyl-[t-3 -(1 '-acetylaminopentyl)-c-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tertbutoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (94, izomer-A na C-Γ, schéma 11) ·· ·««·

Do směsi sloučeniny 80 (0,1 g, 0,38 mmol) v suchém DMF (4 ml) se přidá ΕίβΝ (0,19 ml, 1,32 mmol), l,3-bis(tert-butoxykarbonyl)-2-methyl-2-thiopseudomočovina (0,42 g, 0,12 mmol) a HgCh (0,11 g, 0,42 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Směs se zředí EtOAc (20 ml) a filtruje přes Celíte. Filtrát se promyje vodou, solankou a suší (MgSOU Po filtraci se filtrát koncentruje ve vakuu. Surový produkt se purifikuje zrychlenou chromatografií na sloupci silikagelu( 60-70% EtOAc v hexanech) k získání sloučeniny 94 v 34% výtěžku ve formě bezbarvého oleje.

MS (ES+): 513,6 (M+l).

Příklad 88 (±) Methyl-[t-4-( 1 '-acetylaminopentyl)-c-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tert-butoxy karbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (95, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

Připraví se ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 81 (1,3 g, 4,81 mmol) v 64 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Ή NMR (CDC1₃): δ 0,90 (m, 3 H), 1,4 (m, 6 H), 1,48 (s, 9 H), 1,50 (s, 9 H), 1,71-1,85 (m, 1 H), 1,88 (s, 3 H), 2,15-2,30 (m, 3 H), 2,75-2,85 (m, 1 H), 3,70 (s, 3 H), 3,91-4,00 (m, 1 H), 4,42-4,51 (m, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 8,25 (m, 1 H), 11,30 (m, 1 H); IR (KBr) 3323, 1721, 1716, 1612 cm’¹;

MS (ES+): 513,7 (M+l).

φφ ΦΦΦ·

• φ

ΦΦ φφ • · φ φ φ ♦ • · * φ φ φ φ • φ φφ

Analýza: Vypočteno pro C25H44H4O7: C, 58,57; Η, 8,65; Ν, 10,93. Zjištěno C, 58,30; Η, 8,57; Ν, 10,93.

Příklad 89 (±) Methyl-t-3-[(r-acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tert-butoxy karbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát (96, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

Připraví se ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 82 (0,26 g, 1 mmol) v 50 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 90 (±) Methyl-[t-3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tertbutoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (97, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

Připraví se ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 83 (0,58 g, 1,87 mmol) v 91 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Ή NMR (CDCb): δ ppm 0,88 (m, 6 H), 0,97 (m, 1 H), 1,10-1,46 (m, 7 H), 1,48 (s, 9 H), 1,49 (s, 9 H), 1,70 (m, 1 H), 1,83 (m, 2 H), 1,97 (s, 3 H), 2,06 (m, 1 H), 2,13 (m 1 H), 2,42 (m, 1

11

19 ·

11 1

11 ·

11 ·· *···

111 * * · » · • 1

9

9 1

111 111 11 ·

Η), 2,87 (m, 1 Η), 3,70 (s, 3 Η), 3,95 (m, 1 Η), 4,43 (m, 1 Η), 5,66 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 8,56 (d, J = 8,6 Hz, 1 Η), 11,44 (s, 1 H); IR (KBr): 3323, 2958, 2932, 2872, 1724, 1641, 1614, 1418, 1368, 1166, 1126, 1056 cm'¹;

MS (ES+): 555,8 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C28H50N4O7: C, 60,63; H, 9,09; N, 10,10. Zjištěno: C, 60,69; H, 9,01; N, 10,10.

Příklad 91 (±) Methyl-[t-3 -(1 '-acetylaminopentyl)-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-1 karboxylát] (98, izomer-A na C-Γ, schéma 11)

Do směsi sloučeniny 94 (66 mg, 0,13 mmol) v CH₂C1₂ (2 ml) se přidá trifluoroctová kyselina (0,1 ml, 1,3 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se pak odpařuje do sucha k získání sloučeniny 98 (63%) ve formě hygroskopické pevné látky.

MS (ES+): 313,0 (100%, M+l)

Analýza: Vypočteno pro C15H28N4O3.CF3COOH: C, 47,88; H, 6,85; N, 13,14

Vypočteno pro Cbfts^CKCFsCOOH.OJSHiO: C, 46,41; H, 6,99; N, 12,74 Zjištěno: C, 46,44; H, 6,88; N, 12,67

Příklad 92 (±) Methyl-[t-3 -(1 '-acetylaminopentyl)-c-4-[(aminoimino)methyl] aminocyklopentan-r-1 karboxylát] (99, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

·« ·*·· • · · ♦ !

• ♦ * · · i · • · ··*» ♦ · · ·

9 · · · J ·« 9 99 9

99

9 9 9

9 9 ·

9 9 9 · • 9 9 9

9 99

Připraví se ve formě bílé pevné látky ze sloučeniny 95 (0,3 g, 0,59 mmol) v 89 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 98.

*H NMR. (DMSO-dó): δ ppm 0,80 (m, 3 H), 1,2 (m, 6 H), 1,5 (m, 1 H), 1,8 (m, 6 H), 2,2 (m, 1 H), 2,7 (m, 1 H), 3,5 (m, 1 H), 3,6 (s, 3 H), 3,8 (m, 1 H), 7,0 (br s, 3 H), 7,8 (m, 2 H); IR (KBr) 3365, 3182, 2958, 2873, 1675, 1655, 1552 cm'¹;

MS(ES+): 313 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C1.5ÍI28N4O3.1,15 CF3CO2H: C, 46,84; H, 6,63; N, 12,62. Zjištěno:

C, 47,19; H, 6,83; N, 12,33

Příklad 93 (±) Methyl-[t-3-[(l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-1-karboxylát] (100, izomer-B na C-l', schéma 11)

Připraví se ve formě bílé hygroskopické pevné látky ze sloučeniny 96 (0,32 g, 0,55 mmol) v 85 % výtěžku použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 98.

« * * * · ♦ _Λ « 9 ·#·· « · ♦ · • 9 · · · · «9 9 ·· · • 9 • 9 ·

9 · • · ·

9 «

Ή NMR (DMSO-dé): δ ppm 0,80 (m, 6 H), 1,3 (m, 5 H), 1,6 (m, 1 H), 1,8 (m, 2 H), 1,9 (s, 3 H), 2,2 (m, 2 H), 2,7 (m, 1 H), 3,4 (m, 1 H), 3,6 (m, 3 H), 3,8 (m, 1 H), 7,0 (br s, 4 H), 7,8 (m, 2 H); MS (ES+): 327,5 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro Ci6H₃₀N₄O₃ 0,75 CF₃CO₂H: C, 47,40; H, 6,43; Ν, 11,34 . Zjištěno: C, 48,13; H, 6,94; N, 11,58

Příklad 94 (±) t-3-( 1 '-Acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tert-butoxy karbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (101, izomer-B na C-1', schéma 11 )

NBoc

Do směsi sloučeniny 97 (0,3 g, 0,54 mmol) v THF (5 ml) a MeOH (5 ml) se přidá 1 N NaOH (2,2 ml, 2,2 mmol). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 1 hodiny a koncentruje ve vakuu k odstranění MeOH a THF. Vodná vrstva se okyselí kyselinou ledovou octovou a obdržená tuhá látka se spojí filtrací, promyje vodou, hexany a suší ve vakuu k získání sloučeniny 101 v 87% výtěžku ve formě bílé pevné látky.

’H NMR (DMSO-de): δ ppm 0,80 (m, 6 H), 0,95 (m, 2 H), 1,06 (m, 2 H), 1,28 (m, 5 H), 1,37 (s, 9 H), 1,46 (s, 9 H), 1,58 (m, 1 H), 1,70 (tn, 1 H), 1,78 (s, 3 H), 1,93 (m, 1 H), 2,16 (m 2 H), 2,70 (tn, 1 H), 3,81 (m, 1 H), 4,19 (m, 1 H), 7,35 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 8,42 (d, J = 8,7 Hz, 1 Η), 11,48 (s, 1 H), 12,19 (s, 1 H); IR (KBr): 3317,2958,2933, 2872, 1724, 1641, 1614, 1418, 1368, 1156, 1127, 1056 cm'¹; MS (ES+): 541,7 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C^HjsN^: C, 59,97; H, 8,95; N, 10,36. Zjištěno: C, 59,54; H,

8,81; N, 10,29 • · · • · · • · • · ' • ··

Příklad 95 (±) t-3-( 1 '-Acetylaminopentyl)-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (102, izomer-A na C-Γ, schéma 11)

Směs sloučeniny 98 (4,2 mg, 0,0095 mmol), IN hydroxidu sodného (0,1 ml, 0,1 mmol) a vody (0,2 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Směs se neutralizje IN kyselinou chlorovodíkovou a zředí vodou k získání sloučeniny 102 ve formě 9,5 mmolárního roztoku.

MS (ES+): 299,2 (M+l).

Příklad 96 (±) t-3-(r~Acetylaminopentyl)-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (103, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

CO-H

Připraví se ve formě 19,5 mmolárního roztoku ze sloučeniny 99 (13 mg, 0,042 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 102.

MS (ES+): 299,2 (M+l).

Příklad 97 (±) t-3-[(l '-Acetylamino-2'-ethyl)butyl]-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-1 karboxylová kyselina (104, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

Připraví se ve formě 33,4 mmolárního roztoku ze sloučeniny 100 (10,9 mg, 0,029 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 102.

MS (ES+): 313,4 (M+l)

Příklad 98 (±) t-3-(r-Acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-lkarboxylová kyselina (105, izomer-B na C-Γ, schéma 11)

Připraví se ve formě bílé pevné látky po trituraci v etheru v 65% výtěžku ze sloučeniny 101 (0,2 g, 0,37 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 98.

*H NMR (DMSO-dg): δ ppm 0,82 (m, 6 H), 1,22 (m, 9 H), 1,62 (m, 2 H), 1,82 (m, 1 H), 1,87 (s, 3 H), 2,11 (m, 2 H), 3,38 (m, 1 H), 3,76 (m, 1 H), 7,43 (br s, 4 H), 7,67 (d, J = 9,7 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 12,5 (s, 1 H); IR (KBr): 3318, 2959, 2933, 2872, 1724, 1641, 1615, 1419, 1369,1156,1126,1056 cm'¹;

MS (ES+): 341,5 (100%, M+l ).

Analýza: Vypočteno pro Ci₇H32N4O3.0,5CF₃COOH: C, 54,39; H, 8,24; N, 14,10 • · • · • · · · • · ···· • · ·

Vypočteno pro Ci₇H3₂N₄O3.0,5CF3COOH.0,25H₂O: C, 53,78; H, 8,27;

N, 13,94

Zjištěno: C, 53,89; H, 8,00; N, 13,92.

Příklad 99 (±) Methyl-[c-3-( 1 '-acetylaminopentyl)-t-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tert-butoxy karbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (106, izomer-B na C-Γ, schéma 12)

Připraví se ve formě bílé pevné látky v 60% výtěžku ze sloučeniny 92 (0,4 g, 1,48 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 100 (±) Methyl-[c-3-(r-Acetylaminopentyl)-t-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-lkarboxylát] (107, izomer-B na C-Γ, schéma 12)

Připraví se ve formě činící pevné látky v 80% výtěžku ze sloučeniny 106 (0,35 g, 0,68 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 98.

• ·

2H);

MS (ES+): 313,1 (100%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro Ci₅H₂₈N₄O3.1,15 CF₃CO₂H : C, 46,84; H, 6,64; N, 12,62. Zjištěno:

C, 46,83; H, 6,74; N, 12,4.

Příklad 101 (±) c-3-( 1 -Acetylaminopentyl)-t-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (108, izomer-B na C-Γ, schéma 12)

NH

Připraví se ve formě 24,8 mmolárního roztoku ze sloučeniny 107 (11 mg, 0,0248 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 102.

MS (ES+): 299,5 (M+l).

Příklad 102

Hydrochlorid (lS,4R)-(-)-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylové kyseliny (112, schéma 13)

H_ZN

C°₂H

Směs (-)-(lR,4S)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (109, 15 g, 137 mmol) a IN HCI (375 ml) se zahřívají při refluxu po dobu 1 hodiny. Směs se koncentruje a zbytek se suší ve vakuu k získání sloučeniny 112 (95%), která se použije v příštím kroku.

Příklad 103

Hydrochlorid (lR,4S)-(+)-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylové kyseliny (113, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny (+)-(lS,4R)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (110, 4,9 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu 112.

Příklad 104

Hydrochlorid (±)-czs-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylové kyseliny (114, schéma 13) H₂N CO_zH

Připraví se ze sloučeniny (±)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (111, 3,2 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu 112.

Příklad 105

Hydrochlorid (lS,4R)-(-)-methyl-4-aminocyklopent-2-en-l -karboxylátu (115, schéma 13)

Směs (-)-(lR,4S)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (109, 600 g, 5,51 mol) a 1 N methanolové HCI (121) se zahřívá při refluxu po dobu 10 hodin. Rozpouštědlo se odpařuje za redukovaného tlaku a do zbytku se přidá ether (800 ml) a chladí se. Obdržená pevná látka se spojí filtrací, promyje etherem a suší k získání 956 g (98%) sloučeniny 115 ve formě bílé krystalické tuhé látky. Teplota tání 106-108 °C.

• · · · · • ······· • · · · ·· · ··

Ή NMR (DMSO-dg): δ 1,98 (m, 1 H), 2,52 (m, 1 H), 3,6 (s, 3 H), 3,68 (m, 1 H), 4,15 (m 1 H), 5,88 (d, 1 H), 6,08 (d, 1 H), 8,40 (m, 2 H); MS (ES+): 142,11 (100%, M+l); IR (KBr): 3004, 1722, 1239, 1217 cm'¹.

Analýza: Vypočteno pro C7H9NO2. C, 47,33; H, 6,81; N, 7,89. Zjištěno: C, 47,12; H, 7,12; N, 7,85.

Příklad 106

Hydrochlorid (lS,4R)-(-)-ethyl-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylátu (116, schéma 13)

Způsob A: Připraví se ze sloučeniny (-)-(lR,4S)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (109,4,9 g) a ethanolové HCI podle způsobu použitého pro sloučeninu 115.

Způsob B: Připraví se ze sloučeniny 112 a ethanolové HCI podle způsobu použitého pro sloučeninu 115.

Příklad 107

Hydrochlorid (lR,4S)-(+)-ethyl-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylátu (117, schéma 13)

CO-Et

Připraví se ze sloučeniny 113 (7,3 g) podle způsobu-B použitého pro sloučeninu 116.

Příklad 108

Hydrochlorid (±)-cN-methyl-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylátu (118, schéma 13) • · • «

H₂N CO₂Me

Připraví se ze sloučeniny (±)-2-azabicyklo[2,2,l]hept-5-en-3-onu (111,11,2 g) a methanolové HCl podle způsobu použitého pro sloučeninu 115.

Příklad 109

Hydrochlorid (±)-czs-ethyl-4-aminocyklopent-2-en-l-karboxylátu (119, schéma 13)

H₂N CO₂Et

Připraví se ze sloučeniny 114 (4,9 g) a ethanolové HCl podle způsobu-B použitého pro sloučeninu 116.

Příklad 110 (1 S,4R)-(-)-Methyl-4-tert-butoxykarbonylaminocyklopent-2-en-1 -karboxylát (120, schéma 13)

BocHN CO₂Me

Do směsi sloučeniny 115 (950 g, 5,35 mol) a di-tert-butyldikarbonátu (1226 g, 5,62 mol) v dichlormethanu (12 1) při teplotě 0 °C se přidává v průběhu 2,5 hodiny triethylamin a reakční směs se míchá po další 1 hodinu. Reakční směs se promyje vodou (2 x 8 1) a solankou (2 x 4 1) a organická směs se separuje a suší nad MgSO₄. Po filtraci se filtrát koncentruje a reziduální tuhý sirup se krystalizuje z hexanů k získání 1196 g (92%) sloučeniny 120 ve 3 dílech.

......

^JH NMR (CDC1₃): δ 1,44 (s, 9 H), 1,85 (m, 1 H), 2,51 (m 1 H), 3,47 (m, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 4,78 (m, 1 H), 4,88 (br s, 1 H), 5,86 (m, 2 H);

MS (ES+): 242,25 (80%, M+l).

Analýza: Vypočteno pro C12H19NO4: C, 59,73; H, 7,94; N, 5,80. Zjištěno: C, 59,57; H, 7,86; N, 5,79.

Příkladlll (1 S,4R)-(-)-Ethyl-4-fe/7-butoxykarbonylaminocyklopent-2-en-1 -karboxylát (121, schéma 13)

BocHN CO₂Et

Připraví se ze sloučeniny 116 (17,5 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu 120.

Příklad 112 (lR,4S)-(+)-Ethyl-4-fer/-butoxykarbonylaminocyklopent-2-en-l-karboxylát (122, schéma 13)

BocHN CO₂Et u

Připraví se ze sloučeniny 117 (8,4 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu

120.

Příklad 113 (±)-cž.s-Methyl-4-fe/7-butoxykarbonylaminocyklopent-2-en-l-karboxylát (123, schéma 13)

BocHN

CO₂Me

Připraví se ze sloučeniny 118 (17,8 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu

120.

Příklad 114 (±)-ds-Ethyl-4-fez7-butoxykarbonylaminocyklopent-2-en-l -karboxylát (124, schéma 13)

BocHN CO₂Et

Připraví se ze sloučeniny 119 (20,8 g) podle způsobu použitého pro sloučeninu

120.

Příklad 115 (3aR,4R,6S,6aA)-(+)-Methyl-4-/er/-butoxykarbonylamino-3-( T-ethylpropyl)-4,5,6,6atetrahydro-3aH-cyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (125, schéma 13)

Způsob-A: Směs sloučeniny 120 (949 g, 3,93 mol) a fenylisokyanátu (1,5 1, 13,8 mol) v benzenu ( 101) se zahřívá při refluxu. Do této směsi se přidává směs 2-ethyl-l-nitrobutanu (918 g, 5,92 mol, 85 % čištěná Ή NMR) a triethylamín (55 ml, 0,40 mol) v benzenu (21) po dobu 5 hodin. Reakční směs se dále míchá pod refluxem po dobu 24 hodin. Při chlazení se tuhá látka odstraní filtrací, filtrát se koncentruje a do zbytku se přidá ethylether (21). Směs se nechá stát přes noc, tuhá látka se znovu odstraní filtrací a filtrát se koncentruje ve vakuu k získání 1,991 Kg tmavě hnědého sirupu.

Výše obdržený produkt se rozpustí v THF (5,01) a ethanolu (7,5 1). Do této směsi se přidá NaOH (454 g v 5 1 studené vody) a směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Směs se pak koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve vodě (101), extrahuje ethyletherem • · · « · (2 χ 21) a organické vrstvy se odstraní. Vodná vrstva se okyselí kyselinou octovou a extrahuje ethylacetátem (2x71). Spojené organické extrakty se suší (MgSO4) a organická vrstva se koncentruje k získání 1,75 Kg surové kyseliny.

Do výše uvedeného produktu v methanolu (19,5 1) se přidá koncentrovaná HCI (162 ml) a směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Směs se neutralizuje hydroxidem amonným a rozpouštědlo se odpařuje ve vakuu k získání 1,422 Kg surového esteru. Surový produkt se rozpustí v ethylacetátu (5 1), promyje vodou (5 1) a solankou (5 1) a suší (MgSO₄). Po filtraci se filtrát koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu (hexan/ethylacetát (95/5 až 85/15)). Příslušné frakce se spojují dohromady a koncentrují k získání 984 g (70,5%) sloučeniny 125. Teplota tání 66 °C.

Analýza: Vypočteno pro C18H30N2O5: C, 61,00; H, 8,53; N, 7,90. Zjištěno: C, 61,13; H, 8,45;

N, 7,84.

Ή NMR (CDCh): δ ppm 0,87- 0,95 (m, 6H), 1,44 (s, 9H), 1,58-1,78 (m, 4H), 2,0-2,15 (m, 2H), 2,51 (b s, IH), 3,21 (d, J=8,l Hz, IH), 3,58 (d, >8,8 Hz, IH), 3,76 (s, 3H), 4,23 (b s,

IH), 5,21 (d, IH, >8,8 Hz), 5,59 (b s, IH); MS (ES+): 355,64 (M+l).

Způsob-B: Reakce sloučeniny cyklopentenu 120 s l-nitro-2-ethylbutanem a fenylisokyanátem se provede podle výše uvedeného způsobu-A. Po proběhnutí reakce (24 hodin, reflux) se tuhá látka odstraní filtrací a filtrát se koncentruje. Zbytek se purifikuje 2x na sloupci silikagelu (acetát: hexany)

Způsob-C: Směs sloučeniny 120 ( 1,08 Kg, 4,46 mol) a 2-ethylbutyrohydroximinoylchloridu (připravený z 2-ethylbutyraldoximu a N-chlorsuckinimidu, 614 g, 4,1 mol) v THF (8 1) se zahřívá při refluxu. Do této směsi se přidává v průběhu 1,5 hodiny triethylamin (340 ml, 2,4 mol) v THF. Přidá se v průběhu 1 hodiny další množství chloroximu (550 g, 3,7 mol) následované směsí triethylaminu (340 ml, 2,4 mol) v THF (340 ml). Toto přesně stejné přidání se opakuje ještě dvakrát. V dalších 30 minutách se opět přidá triethylamin (100 ml,

O, 7 mol). Reakční směs se dále zahřívá při refluxu po dobu 16 hodin, poté se zchladí a nerozpustná pevná látka se odstraní filtrací. Filtrát se koncentruje a zbytek se purifikuje buď chromatografií nebo acidobazickou reakcí popsanou ve způsobech A a B. výše.

« ·

Příklad 116 (3aR,4R,6S,6aS)-(+)-Methyl-4-/er/-butoxykarbonylamino-3-(r-propylbutyl)-4,5,6,6atetrahydro-3aH-cyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (126, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 120 (171 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-A).

Příklad 117 (3aR,4R,6S,6aS)-(+)-Ethyl-4-ter/-butoxykarbonylamino-3-( l'-ethylpropyl)-4,5,6,6atetrahydro-3aH-cyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (127, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 121 (5,64 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

BocHN

Příklad 118 (3aR,4R,6S,6aS)-(+)-Ethyl-4-fer/-butoxykarbonylamino-3-(r-propylbutyl)-4,5,ó,6atetrahydro-3aH-cyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (128, schéma 13)

CO₂Et • · · ·

Φ· Μ >*

Připraví se ze sloučeniny 121 (16,1 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 119 (3aS,4S,6R,6aR)-(-)-Ethyl-4-terZ-butoxykarbonylamino-3-( l'-ethylpropyl)-4,5,6,6atetrahydro-3aH-cyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (129, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 122 (5,1 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 120 (±)-Methyl-4-fer/-butoxykarbonylamino-3-(l'-ethylpropyl)-4,5,6,£a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, 130, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 123 (4,8 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 121 (±)-Methyl-4-ter/-butoxykarbonylamino-3-( l'-propylbutyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, sloučenina 131, schéma 13) • · • · « ·

100 • · · • » * · · ·»* • 4 4 ·· 4

Připraví se ze sloučeniny 123 (4,0 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 122 (±)-Methyl-4-ferZ-butoxykarbonylamino-3-(2'-ethylbutyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, 132, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 123 ( 1,18 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 123 (±)-Methyl-4-fe/7-butoxykarbonylamino-3-(n-butyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc aesterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, 133, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 123 (1,2 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

: i: ϊ • » · ^ř

101 ·· · *♦ ·· • · · * · * · · · · ί « 1 ♦ #♦· · * ♦ * · · · · ♦ »· « ·«► ·

Příklad 124 (±)-Ethyl-4-/er/-butoxykarbonylamino-3-( l'-ethylpropyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, sloučenina 134, schéma 13).

Připraví se ze sloučeniny 124 (4,8 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 125 (±)-Ethyl-4-fer/-butoxykarbonylamino-3-( r-methylpropyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (směs na C-Γ, NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, 135, schéma 13)

Připraví se ze sloučeniny 124 (3,5 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 126 (±)-Ethyl-4-tarř-butoxykarbonylamino-3 -(1 '-methylthyl)-4,5,6,6a-tetrahydro-3 aHcyklopent[d]isoxazol-6-karboxylát (NHBoc a esterové skupiny jsou vzájemně v pozici cis, ale trans k isooxazolinovému kruhu, 136, schéma 13) • tttttt tttt · ► · · • tttt • tt tttt tt · tt · « ·#····· · ·

• tt tttt • · · tttt · • · tt • · · • · tttt

Připraví se ze sloučeniny 124 (2,9 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 125 (způsob-B).

Příklad 127 (1 S,2S,3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyi)butyl-4-Zer/-butoxykarbonyl-amino2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát] (137, schéma-14)

Do směsi sloučeniny 125 (80 g, 0,226 mol) v methanolu (1,61) se přidá koncentrovaná HCI (18,8 ml, 0,226 mol) a Adamsův katalyzátor (PtCE, 8,0 g) a směs se velmi rychle míchá při tlaku vodíku 100 psi po dobu 4 hodin. Katalyzátor se odstraní filtrací a filtrát se koncentruje k získání 82,7 g (93 %) (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl 3-(r-amino-2'ethyl)butyl-4-terZ-butoxykarbonyl-amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylátu, který se takto použije pro acetylaci.

Do výše obdrženého aminhydrochloridu (66,2 g, 0,168 mol) v dichlormethanu (600 ml) se přidá při pokojové teplotě triethylamin (23,4 ml, 0,168 mol) a anhydrid kyseliny octové (17,5 ml, 0,184 mol) a míchá se po dobu 2 hodin. Reakční směs se promyje vodou (600 ml). Vodná vrstva se znovu extrahuje dichlormethanem (200 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodou (300 ml) a solankou (300 ml) a suší nad MgSO4. Po filtraci se filtrát koncentruje a zbytek se purifikuje chromatografií na sloupci silikagelu (hexan/ethylacetát (1:1). Příslušné frakce se spojují dohromady a koncentrují k získání 45 g (67%) sloučeniny 137.

103

Analýza: Vypočteno pro C₂₀H₃₆N₂O₆: C, 59,98; H, 9,06; N, 6,99. Zjištěno: C, 59,89; H, 8,91;

N, 6,94.

·· · • · · • · · * • · ♦··· • · · ·# « ·· ·*♦ • · · · • ♦ · * • 4 4 4

4 4 · • · ·· ^JH NMR. (CDC1₃). δ ppm 0,77- 0,87 (m, 6H), 1,19-1,44 (m, 15H), 1,66-1,72 (m, IH), 1,962,00 (m, IH), 2,08 (s, 3H), 2,45-2,53 (tn, IH), 2,80-2,84 (m, IH), 3,70 (s, 3H), 3,99-4,04 (m, IH), 4,11-4,15 (m, IH), 4,23 (d, J=5,2 Hz, IH), 4,78 (d, J=9,3 Hz, IH), 7,55 (d, J=10,0 Hz, IH); MS (ES+): 401,75 (M+l).

Příklad 128 (1 S,2S,3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-ferř-butoxykarbonylamino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát] (138, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 126 (77 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 129 (1 S,2S,3R,4R, l'S-(-)-Ethyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-fer/-butoxykarbonyl-amino-2hydroxycyklopentan-1-karboxylát] (139, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 127 (5 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

104

ΦΦ · • · · • φ φ » • · φφ*· • · · φφ φ* • φ · φ φ ♦ φ · • φ · · • · φ φ φφ φφ

Příklad 130 (1 S,2S,3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-fer/-butoxykarbonylamino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát] (140, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 128 ( 15 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 131 (1R,2R,3 S,4S, 1 'R)-(+)~Ethyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-/er/-butoxykarbonyl-amino2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát] (141, schéma-14)

BocHN

OH

ÍN CO,Et

U

HAc

Připraví se ze sloučeniny 129 (5,9 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 132 (±)-Methyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-fcr/-butoxykarbonylamino-t-2-hydroxy cyklopentan-r-1-karboxylát] (142, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

φφ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ · φ φ φ φ

105

Připraví se ze sloučeniny 130 (2,6 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

♦ Φ φ φφφ · • φ φ φ · • φφφφφφφ • φ φ φ φφφ

Příklad 133 (±)-Methyl-[ t-3-(r-acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-ZerZ-butoxykarbonylamino-t-2hydroxycyklopentan-r-1-karboxylát] (143, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 131 (6,2 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 134 (±)-Methyl- [ t-3 -(1 '-acetylamino-3 '-ethyl)pentyl-c-4-ferř-butoxykarbonylamino-t-2acetyloxycyklopentan-r-1-karboxylát] (144, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 132 (2,4 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 137, kromě toho, že během acetylace se použije přebytek anhydridů kyseliny octové (2,5 ekvivalentu) a triethylaminu (2,5 ekvivalentu).

Příklad 135 (±)-Methyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-n-butyl)-c-4-fér/-butoxykarbonylamino-t-2-acetyloxycyklopentan-r-1-karboxylát] (145, izomer-A na C-Γ, schéma-14) * < ·

106 • 4 4 4

4 4444

4 4

4444 44 44

4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4

4 44 44

Připraví se ze sloučeniny 133 (0,45 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 137, kromě toho, že během acetylace se použije přebytek anhydridu kyseliny octové (2,5 ekvivalentu) a triethylaminu (2,5 ekvivalentu).

Příklad 136 (±)-Ethyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-/er/-butoxykarbonylamino-t-2hydroxycyklopentan-r-1-karboxylát] (146, izomer-A na C-1', schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 134 (2,6 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 137 (±)-Ethyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-2'-methyl)butyl-c-4-fór/-butoxykarbonylamino-t-2hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (147, izomer-A na C-Γ, směs na C-2', schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 135 (1,3 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

00 • >0 0 • 0 0 ♦

0 0 « ·

0 0 *

00 • 0 ·000

107 • 0 8 • · 0 ·

0 99·♦ 0

Příklad 138 (±)-Ethyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-2'-methyl)propyl-c-4-/er/-butoxykarbonylamino-t-2hydroxycyklopentan-r-1-karboxylát] (148, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 136 (1,39 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

137.

Příklad 139 (1 S,2S,3R,4R, 1 ',S)-(-)-methyl-[ 3-(l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát]hydrochlorid (149, schéma-14)

Do směsi sloučeniny 137 (150 g, 0,375 mol) v etheru (800 ml) se přidá IN HCI v etheru (1170 ml, 1,17 mol) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 24 hodin a pak se zahřívá při reluxu po dobu 2 hodin. Po ochlazení se tuhá látka spojí filtrací, promyje etherem a suší ve vakuu k získání 126 g sloučeniny 149, která se takto použije v následujícím kroku.

Příklad 140 (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-methyl-[ 3-(r-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-amino-2hydroxycyklopentan-l-karboxylát]hydrochlorid (150, schéma-14)

4» »»·· • φ ·' · * * φ · φφφφ · φ · · φφφ φφφ φφ φ φφ ·

108

Připraví se ze sloučeniny 138 (10,4 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 149.

Příklad 141

Trifluoracetát (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-ethyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2hydroxycyklo- pentan-1-karboxylátů] (151, schéma-14)

Do směsi sloučeniny 139(1,3 g, 3,14 mmol) v dichlormethanu (20 ml) se přidá trifluoroctová kyselina (4,0 ml) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 6 hodin. Poté se koncentruje a dvakrát koevaporuje s dichlormethanem a dvakrát s etherem. Zbytek se suší ve vakuu k získání sloučeniny 151, která se takto použije v následujícím kroku.

Příklad 142

Trifluoracetát (lR,2R,3S,4S,l'R)-(+)-ethyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2hydroxy-cyklopentan-1-karboxylát] (152, schéma-14)

NHAc • Φ ΦΦ μ Φ Φ 4 » Φ Φ « » Φ Φ <

I Φ Φ 4

ΦΦ ·*

109

Připraví se ze sloučeniny 141 (0,6 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

• 4 * • · · · Φ

ΦΦΦΦ · · φ Φ ΦΦΦΦ Φ > ·

ΦΦΦ Φ · r · >

• ΦΦ Φ •

Φ · Φ

Příklad 143

Triíluoracetát (±)-methyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-amino-t-2hydroxycyklopentan-r-l-karboxylátu] (153, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 142 (0,8 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 144

Triíluoracetát (±)-methyl-[ t-3-( l'-acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-amino-t-2hydroxycyklopentan-r-l-karboxylátu] (154, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 143 (0,39 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 145

Triíluoracetát (±)-methyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-3 '-ethyl)pentyl-c-4-amino-t-2acetyloxycyklopentan-r-l-karboxylátu] (155, izomer-A na C-Γ, schéma-14) »· ·· ·· *

110 ·· • · • · · • ···· • · <>

t)C «·«· • · · • · · • · · · • · · »« ·

Připraví se ze sloučeniny 144 (0,47 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 146

Trifluoracetát (±)-methyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-n-butyl)-c-4-amino-t-2-acetyloxycyklopentanr-1-karboxylátů] (156, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

NHAc

Připraví se ze sloučeniny 145 (0,27 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 147

Trifluoracetát (±)-ethyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-amÍno-t-2hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylátů] (157, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 146 (0,8 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 148

Trifluoracetát (±)-ethyl-[ t-3-(l'-acetylamino-2'-methyl)butyl-c-4-amino-t-2hydroxycyklopentan-r-l-karboxylátu] (158, izomer-A na C-Γ, směs na C-2', schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 147 (0,74 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 149

Trifluoracetát (±)-ethyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-2'-methyl)propyl-c-4-amino-t-2hydroxycyklopentan-r-l-karboxylátu] (159, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 148 (1,0 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 150 (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-3-( r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxycyklopentan-lkarboxylová kyselina (160, schéma-14) • ·

112 • · · · • · · · · • ····· · · • · · β · · ·· · ·

Směs sloučeniny 151 (14 mg, 0,0327 mmol) v IN NaOH (0,1 ml) a vodě (0,2 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Reakční směs se neutralizuje IN HCI a zředí vodou k získání 32,7 mmolárního roztoku.

MS (ES+): 287,4 (100%, M+l).

Příklad 151 (1R,2R,3 S,4S, 1 'R)-(+)~3-( 1 '-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy cyklopentan-1-karboxylová kyselina (161, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 152 (100 mg, 0,234 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninulóO a obdrží se jako 93,6 mmolárního roztok.

MS (ES+): 287,4 ( 100%, M+l).

Příklad 152 (±)-t-3 -(1'-Acetylamino-2'-ethyI)butyl-c-4-amino-t-2-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (162, izomer-A na C-Γ, schéma-14) • 9

9 · 9 9

Připraví se ze sloučeniny 153 (12,5 mg, 0,030 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 30,0 mmolární roztok.

MS (ES+): 287,4 ( 100%, M+l).

Příklad 153 (±)-t-3 -(1Acetylamino-2'-propyl)pentyl-c-4-amino-t-2-hydroxyeyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (163, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 154 (7,5 mg, 0,017 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 7,7 mmolární roztok.

MS (ES+): 315,5 (100%, M+l).

Příklad 154 (±)-t-3 -(1 '-Acetylamino-3 '-ethyl)pentyl-c-4-amino-t-2-hydroxy cyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (164, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

114 • · · · · · • · · 9 9 ·

9 9 9 99 9

9 9 9 9 9 • 9 9 99

Připraví se ze sloučeniny 155 ( 10,6 mg, 0,0225 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 21,5 mmolární roztok.

MS (ES+): 301,4 (100%, M+l).

Příklad 155 (±)_t-3-(r-Acetylamino-n-butyl)-c-4-amino-t-2-hydroxycyklopentan-r-l-karboxylová kyselina (165, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 156 (5,0 mg, 0,011 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 11,0 mmolární roztok.

MS (ES+): 273,0 (100%, M+l).

NHAc

Příklad 156 (±)-t-3 -(1'-Acetyl amino-2' -methyl)butyl-c-4-amino-t-2-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylová kyselina (166, izomer-A na C-Γ, směs na C-2', schéma-14)

H_ZN co₂h • 444

4 • 4 4 4 4 • 4 4 4 4 • · · 4 ·

115 • 4 4 · · • 4 4 4 4 4

4444444 4 • · 4 4 4

Připraví se ze sloučeniny 158 (9,5 mg, 0,0229 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 9,36 mmolární roztok.

MS (ES+): 273,5 (100%, M+l).

Příklad 157 (±)-t-3 -(1Acetylamino-2'-methyl)propyl-c-4-amino-t-2-hydroxycyklopentan-r-1 karboxylová kyselina (167, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny 159 (9,5 mg, 0,0237 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 12,9 mmolární roztok.

MS (ES+): 259,4 (100%, M + 1).

Příklad 158 (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(terř-butoxykarbonylamino-fe/7-butoxykarbonylimino)methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-1 -karboxylát] (168, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 151 (0,65 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

94.

116 • · • tttt ♦ · · · • tt • tt • ·

Příklad 159 (±)-Methyl-[ t-3 -(1 '-acetylamino-2^l-ethyl)butyl-c-4-[(terZ-butoxykarbonylamino-ZerZbutoxykarbonylimino)methyl] amino-t-2-hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (169, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 153 (0,6 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 160 (±)-Methyl-[ t-3-(r-acetylamino-3'-ethyl)pentyl-c-4-[(fe/7-butoxykarbonylamino-fó/7butoxykarbonylimino)methyl]amino-t-2-acetyloxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (170, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

BocHN

NBoc

Připraví se ze sloučeniny 155 (0,25 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 161 (±)-Methyl-[ t-3-(l'-acetylamino-n-butyl)-c-4-[(ZerZ-butoxykarbonylamino-ZerZbutoxykarbonylimino)methyl]amino-t-2-acetyloxycyklopentan-r-l-karboxylát] (171, izomerA na C-Γ, schéma-15) • φ

117 • Φ φφ • · · · • φ φ φ φ φ φ φ • · φ ·

BocHN

Υ'

NBoc

Připraví se ze sloučeniny 156 (0,26 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 162 (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(N-terř-butoxykarbonyl-Nmethylamino-N'-fór/-butoxykarbonylimino)methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-lkarboxylát] (172, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 151 (0,46 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94. Jako reagens se použije l,3-bis(/e/7-butoxykarbonyl)-N-methyl-2-(2,4-dinitrofenyl)-2thiopseudomočovina místo l,3-bis(/er/-butoxykarbonyl)-2-methyl-2-thiopseudomočoviny a HgCl₂ není třeba.

Příklad 163 (1S,2S,3R,4R,1' S)-(-)-Ethyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(aminoimino)methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylát] (173, schéma-15) • ·

118

Připraví se ze sloučeniny 168 (0,1 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 164 (±)-Methyl-[ t-3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-[(aminoimino)methyl]amino-t-2hydroxycyklopentan-r-1 -karboxylát] (174, izomer-A na C-Γ, schéma-14)

Připraví se ze sloučeniny169 (0,38 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 151.

Příklad 165 (±)-Methyl-[ t-3-(r-acetylamino-3'-ethyl)pentyl-c-4-[(aminoÍmino)methyl]amino-t-2acetyloxycyklopentan-r-1-karboxylát] (175, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

119 • · ·· ·· • 9 9 9

9 9 9

9

Připraví se ze sloučeniny 170 (0,1 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 151.

Příklad 166 (±)-Methyl-[t-3-(r-acetylamino-n-butyl)-c-4-[(aminoimino)methyl]amino-t-2acetyloxycyklopentan-r-1-karboxylát] (176, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

NHAc

Připraví se ze sloučeninou 1 (0,08 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 167 (1 S,2S,3R,4R, 1 ’S)-(-)-Ethyl-[3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(Nmethylaminoimino)methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-1 -karboxylát] (177, schéma-15)

H₃CHN

co₂b )—\ ^0H

NHAc

91

11 1

4 1 1

11 1

11

120

Připraví se ze sloučeniny 172 (0,3 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

·· · • * · • · · · • · · · · ·

111

1 ·*· · · • 9 1

11

111 ·

Příklad 168 (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-3-( r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(aminoimino) methyl]amino-2hydroxycyklopentan-1-karboxylová kyselina (178, schéma-15)

Způsob-A: Připraví se ze sloučeniny 173 (7,8 mg, 0,0166 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 7,2 mmolámí roztok.

MS (ES+): 329,5 (M+l).

Způsob-B: Do směsi sloučeniny 149 (3,0 g, 8,9 mmol) v DMF (20 ml) se přidá pyrazolkarboxamidinhydrochlorid (1,56 g, 10,6 mmol) a diisopropylethylamin (3,9 ml, 22,4 mmol) a zahřívá se při teplotě 60 °C po dobu po 36 hodin. Přidá se další množství pyrazolkarboxamidinhydrochloridu (0,65 g) a diisopropylethylaminu ( 1 ml) a zahřívá se při teplotě 60°C po dobu dalších 12 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za redukovaného tlaku. Do zbytku se přidá IN NaOH (22 ml, 22 mmol) a míchá se při pokojové teplotě po dobu 5 hodin. Reakční směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 25 ml) a vodná vrstva se koncentruje. Obdrží se tuhá látka, která se spojí filtrací a suší k získání 1,22 g (39%) sloučeniny 178,

Ή NMR (D₂O): ΪΙ NMR (D₂O): δ ppm 0,90 (m, 3 H), 0,95 (m, 3 H), 1,05 (m, 2 H), 1,5 (m, 3 H), 1,8 (m, 1 H), 2,0 (s, 3 H), 2,3 (m, 1 H), 2,55 (m, 1 H), 2,75 (m, 1 H), 3,9 (m, 1 H), 4,4 (m, 2H).

Analýza: Vypočteno pro C15H28N4O4.H2O: C, 52,01; H, 8,73; N, 16,17. Zjištěno: C, 51,64; H, 8,57; N, 16,14.

♦ 9

121 • · 4 · * • · · · · · • · 4444 4 9 9 • 9 9 9 · · _tt

9 9 9 • 4 · · • 4 9 9

9 9 9

99

Příklad 169 (±)-t-3-( r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-[(aminoimino)methyl]amino-t-2hydroxycyklopentan-r-1-karboxylová kyselina (179, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 174 (12,0 mg, 0,0263 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 (způsob-A) a obdrží se jako 26,3 mmolární roztok.

MS (ES+): 329,5 (M+l).

Příklad 170 (±)-t-3-( r-Acetylamino-3'-ethyl)pentyl-c-4-[(aminoimino)methyl]amino-t-2hydroxycyklopentan-r-1-karboxylová kyselina (180, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 175 (9,0 mg, 0,0176 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 (způsob-A) a obdrží se jako 17,6 mmolární roztok.

MS (ES+): 343,5 (M+l).

Příklad 171 • 0 00 • 0 0 0

0 0 ·

0 0 0

00

122

0 0 • 0 0 • 0 0 0

0 · 0 0· ♦00 *· 0000 • 0 0

0 0

0 0 • 00 • 0 « (±)-t-3 -( 1Acetylamino-n-butyl)-c-4-[(aminoimino)methyl] amino-t-2-hydroxycyklopentan-r1-karboxylová kyselina (181, izomer-A na C-Γ, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 176 (4,9 mg, 0,010 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 (způsob-A) a obdrží se jako 10,0 mmolární roztok.

MS (ES+); 315,0 (M+l).

Příklad 172 (1S,2S,3R,4R,1' S)-(-)-3-( r-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(Nmethylaminoimino)methyl] amino-2-hydroxycyklopentan-1 -karboxylová kyselina (182, schéma-15)

Připraví se ze sloučeniny 177 (10,4 mg, 0,0203 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 (způsob-A) a obdrží se jako 20,3 mmolární roztok.

MS (ES+): 343,6 (M+l).

Příklad 173 (1 S,2S,3R,4R, 1 'S)-(-)-3-(1 '-Acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-[(aminoimino)methyl]amino-2hydroxycyklopentan-1-karboxylová kyselina (183, schéma-15) • · • 4

4 4 • · • 9

123

• * · ♦ * • · » · · • · · » « · • 0049409 0 · · · ·

4 4 • 4 4

4 ·

Připraví se ze sloučeniny 150 (8,7 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 178 (způsob-B).

Příklad 174 (1 S,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-fer/-butoxykarbonylamino-2-(N-imidazolyl-thiokarbonyloxy)cyklopentan-1 -karboxylát] (184, schéma-16)

Směs sloučeniny 137 (100 g, 0,25 mol) a l,l'-thiokarbonyldiimidazolu (90 g, 0,5 mol) v bezvodém THF (1,3 1) se zahřívá při refluxu po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se odstraní za redukovaného tlaku a zbytek se rozpustí v ethylacetátu (11) a promyje 0,5N HCI (3x 11). Ethylacetátová vrstva se suší nad MgSO₄ a po filtraci se filtrát koncentruje. Zbytek se rekrystalizuje z ethylacetát/hexanů k získání 76 g (59,6%) sloučeniny 184. Filtrát se koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu (ethylacetát/hexany) k získání dalších 14 g (11%) sloučeniny 184.

'H NMR (CDCfi): δ 0,75 (m, 3 H), 0,9, (m, 3 H), 1,15 (m, 3 H), 1,4 (m, 9 H), 1,9 (m, 2 H), 2,0 (s, 3 H), 2,5 (m, 2 H), 3,1 (m, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 4,25 (m, 1 H), 4,5 (m, 1 H), 5,0 (m, 1 H) 6,0 (m, 1 H), 6,4 (m, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 7,7 (s, 1 H), 8,4 (s, 1 H).

» · **

124 «« · • · * • 4 4 9

9 49 96 • 46 ·

• C • 4

6 9 4 • 4 9 6

4 4 4

6 4 4 • 6 6 4

9 66

Analýza: Vypočteno po C₂₄H₃₈N₄O₆S. C, 56,45; H, 7,50; N, 10,97. Zjištěno: C, 56,40; H, 7,50; N, 10,98

Příklad 175 (1S,2S,3R,4R,1' S)-(-)-Methyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-ter/butoxykarbonylamino-2-(N-imidazolyl-thiokarbonyloxy)cyklopentan-1 -karboxylát] (185, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 138 (17,1 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 184.

Příklad 176 (1S,2S,3R,4R,1' S)-(-)-Ethyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-Zer/-butoxykarbonyl-amino2-(N-itnidazoly 1-thiokarbonyloxy)cyklopentan-1 -karboxylát] (186, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 139 (2,8 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 184.

Příklad 177 (1 S,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-fez7-butoxykarbonylamino-2-(N-imidazolyl-thiokarbonyloxy)cyklopentan-1 -karboxylát] (187, schéma-16) ·· ftft • · · · • · · · • · · · • ftft · ft· ftft

125

• 4 4 • · 4>

• · · 4 • · * · · · · ft · ft ftft ··· * • · · • · « • * · • · · • ft ft

Připraví se ze sloučeniny 140 (3,43 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 184.

Příklad 178 (±)-Methyl-[ t-3-( 1 ’-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-Zert-butoxykarbonylamino-t-2-(Nimidazolyl-thiokarbonyloxy)cyklopentan-r-l-karboxylát] (188, izomer-A na C-Γ, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 142 (0,4 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 184.

Příklad 179 (1 R,3R,4R, l'S)-(-)-Methyl-[ 3 -(1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-fer/-butoxykarbonylaminocyklopentan-1-karboxylát] (189, schéma-16)

Do směsi sloučeniny 184 (50 g, 0,098 mol) v toluenu (1,3 1) při teplotě 70 °C se přidá tributylcínhydrid (34 ml, 0,126 mol), poté azobisisobutyronitril (AIBN, 0,1 g, 0,06 mmol) a směs se míchá při teplotě 70 °C po dobu 10 min. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozpustí v acetonitrilu (1 1) a prornyje hexany (3x1 1). Acetonitrilová vrstva se koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu (ethylacetát:hexany (0 - 50% směs)). Příslušné frakce se spojují dohromady a koncentrují k získání 36 g (95%) sloučeniny 189.

126 «Φ * • · · • · · 9 • · ···· • · · *· · • · • 9

9 β e · ·* *♦ *··· ·· • · * 9 · Φ « • 9 9 · • 9 9 9 tli ·?, 'li NMR (DMSO-dó): δ 0,8 (m, 6 H), 1,2 (m, 5 H), 1,4 (s, 9 H), 1,6 (m, 2 H), 1,85 (s, 3 H), 1,9 (m, 1 H), 2,1 (m, 2 H), 2,7 (m, 1 H), 3,55 (s, 3 H), 3,7 (m, 1 H), 3,8 (m, 1 H), 6,72 (d, J =

7,5 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 9,9 Hz, 1 H).

Analýza: Vypočteno po C2oH3óN205.0,75H20: C, 60,35; H, 9,50; N; 7,04. Zjištěno: C, 60,60; H, 9,49; N, 7,05.

Příklad 180 (lR,3R,4R,l',S)-(-)-Methyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-fé/V-butoxykarbonylaminocyklopentan-1-karboxylát] (190, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 185 (16,0 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 189.

Příklad 181 (lR,3R,4R,l',S)-(-)-Ethyl-[ 3-( l'-aeetylamino-2'-ethyl)butyl-4-fer/butoxykarbonylaminocyklopentan-1-karboxylát] (191, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 186 (1,9 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 189.

• · · · • ·

127

Příklad 182 (1R,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-ferZ-butoxykarbonylaminocyklopentan-1-karboxylát] (192, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 187 (1,2 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 189.

Příklad 183 (±)-Methyl-[ t-3-(r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-fer/-butoxykarbonylaminocyklo-pentan-lkarboxylát] (193, izomer-A na C-Γ, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 188 (0,2 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 189.

Příklad 184 (1R,3R,4R, l'S)-(-)-Methyl-[ 3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-1 karboxylát]hydrochlorid (194, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 189 (10,0 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 149.

• · • ·

128 • ···· ·

Příklad 185 (1R,3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[ 3 -(1 '-acetylamino-2’-propyl)pentyl-4-aminocyklopentan-1 karboxylát]hydrochlorid (195, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 190 (10,0 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 149.

Příklad 186

Trifluoracetát (lR,3R,4R,l'S)-(-)-ethyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4aminocyklopentan-l-karboxylátu] (196, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 191 (1,4 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 151.

Příklad 187

Trifluoracetát ( lR,3R,4R,l'S)-(-)-ethyl-3-( l'-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4aminocyklopentan-l-karboxylátu] (197, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 192 (0,84 g) podle stejného postupu jako pro sloučeninu 151.

129

Příklad 188

Tri fluor acetát (±)-methyl-[ t-3-(r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-aminocyklopentan-l karboxylátu] (198, izomer-A na C-Γ, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 193 (5,7 mg) podle stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 189 (1 R,3R,4R, 1' S)-(-)-3 -( 1Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-1 -karboxylová kyselina (199, schéma-16)

Připraví se ze sloučeniny 196 (8,3 mg, 0,0233 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 23,3 mmolární roztok.

MS (ES+): 271,4 (100%, M+l).

Příklad 190 (+)-t-3-( 1 '-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-aminocyklopentan-1 -karboxylová kyselina (200, izomer-A na C-Γ, schéma-16) • ·

Připraví se ze sloučeniny 198 (4,21 mg, 0,0148 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 14,8 mmolámí roztok.

MS (ES+): 271,4 (100%, M+l).

Příklad 191 (1 R,3R,4R, 1 'S)-(-)-Ethyl-[ 3 -( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyI-4-[(ferř-butoxykarbonyl-aminote/7-butoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylát] (201, schéma-17)

Připraví se ze sloučeniny 196 (1,52 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

Příklad 192 (lR,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-[ 3-( Γ -acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-[(fe/7-butoxykarbonylamino-terř-butoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylát] (202, schéma-17)

131

Připraví se ze sloučeniny 197 (0,87 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 193 (±)-Methyl-[ t-3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-[(/ď/7-butoxykarbonylamino-/ť/7butoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-r-l-karboxylát] (203, izomer-A na C-Γ, schéma-17)

Připraví se ze sloučeniny 198 (0,093 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94.

Příklad 194 (lR,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-[ 3-( r-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(N-/í?/V-butoxykarbonyl-Nmethylamino-N'-/e/7-butoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylát] (204, schéma-17)

132

Připraví se ze sloučeniny 196 (0,33 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 94. Jako reagens se použije l,3-bis(fer/-butoxykarbonyl)-N-methyl-2-(2,4-dinitrofenyl)-2thiopseudomočovina místo 1,3 -bis(ferř-butoxykarbonyl)-2-methyl-2-thiopseudomočoviny.

Příklad 195

Trifluoracetát (lR,3R,4R,l'S)-(-)-ethyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4[(aminoimino)methyl]-aminocyklopentan-1 -karboxylátu] (205, schéma-17)

Připraví se ze sloučeniny 201 (0,9 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 196

Trifluoracetát (lR,3R,4R,l'S)-(-)-ethyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-propyl)pentyl-4[(aminoimino)-methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylátu] (206, schéma-17) • ·

Připraví se ze sloučeniny 202 (0,8 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 197

Trifluoracetát (±)-methyl-[ t-3-( T-acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-[(aminoimino)methyl]aminocyklo-pentan-r-1 -karboxylátu] (207, izomer-A na C-Γ, schéma-17)

Připraví se ze sloučeniny 203 (0,055 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 151,

Příklad 198

Trifluoracetát (1R,3R,4R, 1 'S)-(-)-ethyí-3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(Nmethylaminoimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylátu (208, schéma-17) • · · • · · ·

134

Připraví se ze sloučeniny 204 (0,35 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu

151.

Příklad 199 (1R,3R,4R, 1' S)-(-)-3 -( 1 '-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-(aminoimino)methylaminocyklopentan-1-karboxylová kyselina (209, schéma-17)

Způsob-A: Připraví se ze sloučeniny 205 (7,6 mg, 0,0167 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 16,7 mmolámí roztok.

MS (ES+): 313,4 ( 100%, M+l ).

Způsob-B: Připraví se ze sloučeniny 194 (15,02 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 178 (Způsob-B).

Ή NMR (D₂O): δ 0,90 (m, 6 H), 1,1 (m, 2 H), 1,4 (m, 1 H), 1,5 (m, 2 H), 1,75 (m, 2 H), 2,05 (s, 3 H), 2,15 (m, 1 H), 2,35 (m, 2 H), 2,8 (m, 1 H), 3,65 (m, 1 H), 4,0 (m, 1 H).

• · · ·

135 • * v · • · • ·

Příklad 200 (1 R,3R,4R, l'S)-(-)-3-( 1Acetylamino-2'-propyl)pentyl-4[(aminoimino)methyl]aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina (210, schéma-17)

Způsob-A: Připraví se ze sloučeniny 206 (9,69 mg, 0,0197 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 14,9 mmolární roztok.

MS (ES+): 341,7 (100%, M+l ).

Způsob-B: Připraví se ze sloučeniny 153 (8,4 g) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 178 (Způsob-B).

*H NMR (D₂O): δ 0,90 (m, 6 H), 1,1 (m, 2 H), 1,4 (m, 6 H), 1,6 (m, 1 H), 1,75 (m, 2 H), 2,05 (s, 3 H), 2,15 (m, 1 H), 2,3 (m, 1 H), 2,4 (m, 1 H), 2,78 (m, 1 H), 3,6 (m, 1 H), 3,9 (m, 1 H).

Příklad 201 (±)-t-3 -(1'- Acetylamino-2'-ethyl)butyl-c-4-[(ammoimino)methyl]-aminocyklopentan-r-1 karboxylová kyselina (211, izomer-A na C-Γ, schéma-17)

Připraví se ze sloučeniny 207 (18 mg, 0,0342 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 34,2 mmolární roztok.

• · * · • ···♦ · ·

136

MS (ES+): 313,4 (100%, M+l ).

Příklad 202 (lR,3R,4R,l’S)-(-)-3-( 1' -Acetylamino-2' -ethyl)butyl-4-[(Nmethylaminoimino)methyl]aminoclopentan-l-karboxylová kyselina (212, schéma-17)

H₃CHN

Připraví se ze sloučeniny 208 ( 10,7 mg, 0,0235 mmol) použitím stejného postupu jako pro sloučeninu 160 a obdrží se jako 30,18 mmolární roztok.

MS (ES+): 327,6 (100%, M+l ).

Příklad 203 (1 S,2S,3R,4R, l'S)-(-)-Methyl-[ 3-( l'-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-tert-butoxykarbonylamino-2-methansulfonyloxycyklopentan-1 -karboxylát] (213, schéma-18)

Do směsi sloučeniny 137 (1,0 g, 2,4 mmol) v dichlormethanu (40 ml) se přidá methansulfonylchlorid (0,37 ml, 4,8 mmol) a triethylamin (1,0 ml, 7,2 mmol) při teplotě 4 °C. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě 4°C. Do směsi se přidá voda 10 (ml) extrahuje se dichlormethanem (3x 10 ml). Spojené organické extrakty se promyjí solankou (20 ml) a suší (MgSCE). Po filtraci se filtrát koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu k získání 0,8 g (68%) sloučeniny 213.

MS (ES+1): 493,8 (M+l ).

Příklad 204

137 (3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-3 -( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-tert-butoxykarbonyl-aminocyklopent-l-en-1-karboxylát] (214, schéma-18)

Do směsi sloučeniny 213 (0,4 g, 0,81 mmol) v THF (5 ml) při teplotě 4 °C se přidá čerstvě připravený ethoxid sodný (2,43 mmol) v ethanolu (1,5 ml) a míchá se po dobu 30 minut. Směs se neutralizuje kyselinou octovou a koncentruje. Zbytek se vychytává v dichlormethanu (20 ml) a prornyje vodou a solankou a suší (MgSCU). Po filtraci se filtrát koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu k získání 0,11 g (37%) sloučeniny 214.

MS (ES+): 397,8 (M+l).

Příklad 205 (3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[ 3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopent-1 -en-1 karboxylátjhydrochlorid (215, schéma-18)

Připraví se ze sloučeniny 214 (23 mg, 0,81 mmol) podle způsobu použitého pro sloučeninu 149 a takto se použije v dalším kroku.

MS (ES+): 297,5 (M+l).

Příklad 206 (3R,4R, Γ, S)-(-) 3 -(1'-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopent-1 -en-1 -karboxylová kyselina (216, schéma-18) • · tt··· • ·

138 • · • tt

Výše obdržená směs sloučeniny 216 se nechá reagovat stejným způsobem jako sloučenina 160 a obdrží se jako 58 mmolární roztok.

Příklad 207 (3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-[ 3-( 1 '-acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tertbutoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopent-1 -en-1 -karboxylát] (217, schéma-18)

BocHN. /NBoc

Směs sloučeniny 215 (4,23 g, 13,6 mmol), N-tert-butoxykarbonyl-N'-/e/7butoxykarbonyl-N-trifluormethansulfonylguanidin (5,87 g, 15 mmol) a triethylamin (4,1 ml,

29,2 mmol) v dichlormethanu (70 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 16 hodin. Reakční směs se promyje nasyceným hydrogenuhličitanem sodným, vodou a solankou a suší (MgSCb). Po filtraci se filtrát koncentruje a zbytek se purifikuje na sloupci silikagelu k získání 3,9 g (60%) sloučeniny 217.

MS (ES+): 526,08 (M+l ).

Příklad 208 (3R,4R, 1', S')-(-)-3-( 1 '-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(tert-butoxykarbonylamino-tertbutoxykarbonylimino)methyl]aminocyklopent-l-en-l-karboxylová kyselina (218, schéma-18)

139

HN

BocHN

NHAc • 9 • · 9 • Μ·

Směs sloučenin 217 ( 1,8 g, 3,4 mmol), THF (10 ml), ethanolu (10 ml), vody (10 ml) a 1 N NaOH (10 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 8 hodin. Reakční směs se koncentruje a reziduální vodná vrstva se promyje etherem (20 ml) a okyselí kyselinou octovou. Tuhá látka se spojí filtrací, promyje vodou a suší k získání 1,6 g (92%) sloučeniny 218.

MS (ES+): 512,0 (M+l ).

Příklad 209

Hydrochlorid (3R,4R, 1 ’S)-(-)-3-( 1 ’-Acetylamino-2'-ethyl)butyl-4[(aminoimino)methyl]amino-cyklopent-l-en-l-karboxylové kyseliny (219, schéma-18) .NH

HN

NHAc

Směs sloučeniny 218 (1,52 g, 2,98 mmol) a 3N HCI (20 ml, 60 mmol) se míchá po dobu 24 hodin. Reakční směs se koncentruje a suší. Zbytek krystalizací z ethanol/etheru poskytne 0,85 g (83%) sloučeniny 219.

MS (ES+): 311,4 (M+l).

Analýza: Vypočteno for C15H26N4O3.HCI: C, 51,94; H, 7,56; N, 16,15. Zjištěno: C, 51,84; H,

7,75; N, 16,03 «

• · • · ·

140

Biochemie

Testy in vitro jsou založené na způsobu publikovaném Itzsteinem a spol. (patentová přihláška EP 92309634.6). Neuraminidasa z kmene HlN9ďfi[-ky se získá způsobem popsaným Laverem a spol., Virology 1984, 137, 314- 323. Hodnoty IC50 se měřily spektrofotometricky za použití fluorogenního substrátu, 2'-(4-methylumbelliferyl)-a-Dacetylneuramová kyselina. Tento substrát se štěpí neuraminidasou k získání fluoreskujícího produktu, který se může kvantifikovat. Testovací směs obsahuje inhibitory v různých koncentrací (4 - 6) a enzym v 32,5 mM MES [(2-(N-morfolino)ethansulfonová kyselina] pufru, 4 mM CaCl₂ při pH = 6,5 (celkový objem = 80 μΐ). Reakce se nastartuje přidáním 20 μΐ substrátu na konečnou koncentraci 75 μΜ. Po 10 minutách při teplotě 37°C se přidá 150 μΐ

0,2M glycin/NaOH (pH = 10,2) do 0,1 ml reakční směsi k ukončení reakce. Slepý pokus se nechá běžet se stejným roztokem substrátu, ale bez enzymu. Fluorescence se odečítá pomocí A?

spektafluormetru (excitace: 360 nm a emise. 450 nm) a odečítání ze slepého pokusu substrátu se provádí z údajů vzorků. Hodnota IC50 se vypočte vynesením percentuální inhibice aktivity NA oproti koncentraci inhibitoru a stanovení každého bodu se provádí dvojmo.

Biologická data

Následují tabulka uvádí údaje o inhibici enzymu neuraminidasy (hodnoty IC50) + > 100 μΜ; ++ 1 - 100 μΜ; +++ < 1 μΜ.

• φ φ φ φ φ φ φ φ · φ ΦΦΦΦ· φφφ *φ φ

A • Φ ··*·

141 φ

φφ

Sloučenina č.	Flu A	FluB
65	++	++
86	++	++
160	+++	+++
162	+++	+++
163	+++	+++
165	++	++
166	+++	++
178	+++	+++
179	1 1 1 ΤΊ Γ	+++
180	+++	i r i-
181	+++	+++
182	('++	+++
183	+++	+++
199	+++	+++
200	++!	+++
209	+++	+++
210	+++	+++
211	T++	+-H-
212	+++	+++
219	+++	+++

Krystalografie

Komplexy mezi neuraminidasou a inhibičními molekulami se připravily transferováním krystalů neuraminidasy H1N9 do 2 ml pufrovacího roztoku fosfátu, ve kterém se inhibitor rozpustí. Koncentrace inhibitoru se upraví tak, aby byla 2 mM. Krystaly se ekvilibrují v pufrovacím roztoku po dobu 1 dne a pak se odstraní z roztoku a připevní se skleněné kapiláře pro pořízení difrakčních dat rentgenogramem. Všechna měření intenzity Roentgenových paprsků se zaznamenávají mnohovodičovým detektorem ploch Siemens X100 na rotujícím anodovém generátoru Rigaku RU-300 pracujícím při 100 mA a 50 KV a s měděnou anodou. Vzdálenost mezi krystalem a detektorem byla 160 mm a detektor byl ·· • · • · · • ···· ·#··

·· ·· • · « • · ⁴ • · ⁴ • · ⁴ ·· ♦· nastaven na data 2,2 A. Data intenzit se měřila po 0,1° oscilačních snímcích při expozici 240 s na snímek. Každý krystal poskytoval 600 - 700 snímků dat před tím, než se zamezí poškození ozářením krystalů pro další sběr dat.

Data intenzit se zpracovávala pomocí souboru programů XENGEN. Integrované intenzity byly uspořádány a sloučeny k vytvoření výsledného souboru dat obsahujícího pouze specifické reflexe. Všechna další dokončovací zpracování byla provedena programem

O

XPLOR. Výchozí model pro finální zpracování byla nativní struktura N9 upravená na 2,0 A.

O

Diference Fourierových zobrazení oproti 2,2 A se spočítaly pomocí vypočtených fází z upraveného modelu. Analýza zobrazení elektronových hustot se prováděla na grafické počítačové pracovní stanici Silicon Graphics Indigo Extreme 2 pomocí grafického programu QUANTA. Schématické modely pro molekuly inhibitoru se ručně přizpůsobily na diferenční elektronové hustotě. Tyto modely inhibitoru byly později zahrnuty ve finálním zpracování XPLOR.

Dávky a formulace

Antivirové sloučeniny předloženého vynálezu mohou být aplikovány jako ošetření při virových infekcích jakýmikoliv prostředky, které vytvářejí kontakt aktivního místa v agens pro reakci s virovou neuraminidasou v těle lidském, savčím, ptačím či jinéhoživočicha. Mohou být aplikovány konvenčními prostředky dostupnými pro použití v kombinaci s farmaky buď jako individuální agens nebo v kombinaci terapeutických agens. Mohou být aplikovány samostatně, ale obecně se aplikují s farmaceutickým nosičem vybraným na základě zvoleného způsobu aplikace a standardních farmaceutických postupů.

Aplikovaná dávka bude samozřejmě velmi záležet na faktorech jako je farmakodynamická charakteristika jednotlivých agens a jejich formě a způsobu aplikace ; věku, zdraví a váze recipienta; původu a rozsáhlosti příznaků, druhu probíhajícího ošetření; výskytu ošetření; a požadovaných účincích. Denní dávka aktivní složky může být od asi 0,001 do 1000 miligramů (mg) na kilogram (kg) tělesné váhy. Výhodná denní dávka je od asi 0,1 do asi 30 mg/kg.

· «0 0 00 0

0 0 0

0 0000

0 0 ·

• 0 »*

0 ·

0 0 0· *

0 · ·· ♦*

143

Formy dávky (přípravky vhodné pro aplikaci) obsahují od asi 1 mg do asi 500 mg aktivní složky na jednotku. V těchto farmaceutických přípravcích bude aktivní složka obvykle přítomna v množství asi 0,5 - 95% váhy z celkového váhy přípravku.

Aktivní složka může být aplikována perorálně v tuhé dávkovači formě, takové jako kapsle, tablety a prášky nebo v tekuté dávkovači formě, takové jako léčebné nápoje, sirupy a suspenze. Také se může aplikovat parenterálně ve sterilní tekuté dávkovači formě nebo také intranazálně (nosní kapky) nebo inhalací jako plynný stav léčiva. Další dávkovači formy jsou eventuálně možné, tak jako např. transdermálně přes náplast nebo mast.

Želatinové kapsle obsahují aktivní složku a nosiče rozetřené na prášek, takové jako laktosa, škrob, deriváty celulosy, biologicky snášenlivé polymery, stearát hořečnatý, kyselinu stearovou, apod. K vytvoření lisovaných tablet mohou být používány podobné ředící roztoky. Jak tablety tak i kapsle mohou být vyráběny jako produkty postupně se uvolňující k umožnění kontinuálního uvolňování léku po dobu několika hodin. Lisované tablety mohou být potaženy sacharidem nebo tenkou vrstvou k překrytí jakýchkoliv nepříjemných příchutí a k chránění tablety před prostředím nebo mohou být potaženy entericky kvůli selektivnímu rozpadu v gastrointestinálním traktu.

Tekuté dávkovači formy pro perorální aplikace mohou obsahovat barvicí látky nebo chuťové přísady k zatraktivnění příjmu pacientem. Mohou také obsahovat pufry, surfaktanty a ochranné látky. Tekuté perorální produkty mohou být vyvinuty tak, aby se trvale uvolňovaly. Mohou obsahovat deriváty cyklodextrinu ke zvětšení rozpustnosti aktivní složky a podpoře jejího perorálního příjmu.

Obecně jsou voda, vhodné oleje, fyziologický roztok, vodná dextrosa(glukosa) a příslušné roztoky cukrů a glykolů, takové jako propylenglykol nebo polyethylenglykol, vhodné nosiče pro parenterální roztoky. Roztoky pro parenterální aplikace obsahují výhodně ve vodě rozpustné soli aktivní složky, vhodné stabilizující agens a pokud je nezbytné i pufrující agens. Antioxidační agens, takové jako bisulfit sodný, sulfit sodný nebo kyselina askorbová jsou buď samostatně nebo v kombinaci vhodné jako stabilizující agens. Také jsou používány kyselina citrónová a její soli a sodná sůl EDTA. Navíc mohou obsahovat parenterální roztoky ochranné agens, takové jako benzalkoniumchlorid, methylparaben nebo propylparaben a chlorbutanol.

• ·> »··· φφφ • φφφφ φφ φφ • φ φ φ φ · φ ♦ • φ · φ • φ φ φ φφ φφ

144

Vhodné farmaceutické nosiče jsou popsány v Remingtonů Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company a v Handbook of Pharmaceuticals Excipients, American Pharmaceutical Association, oboje je zde citováno jako odkaz. Účinné farmaceutické dávkovači formy pro aplikaci sloučenin podle předloženého vynálezu mohou být:

Kapsle s tvdým obalem

Velké množství kapslí se připraví plněním standardních dvojdílných tvrdých želatinových kapslí. Každá se plní 100 mg aktivní složky rozetřené na prášek, 150 mg laktosy, 50 mg celulosy a 6 mg stearátu hořečnatého.

Měkké želatinové kapsle

Připraví se směs aktivní složky ve stravitelném oleji, takový jako sojový olej, bavlníkový olej nebo olivový olej, a injektuje se pomocí pozitivně výtlačného čerpadla do tekuté želatiny k vytvoření jemně naplněné kapsle obsahující 100 mg aktivní složky. Kapsle se omyjí a suší. Aktivní složka se může rozpustit ve směsi polyethylenglykolu, glycerinu a sorbitolu k vytvoření ve vodě mísitelné směsi léku.

Tablety

Velké množství tablet se připraví konvečními postupy, tak že dávkovači jednotka je 100 mg aktivní složky, 0,2 mg koloidního oxidu křemičitého, 5 mg stearátu hořečnatého, 275 mg mikrokrystalické celulosy, 11 mg škrobu a 98,8 mg laktosy. Příslušné vodné a bezvodé krycí vrstvy mohou být aplikovány ke zvýšení polykatelnosti, ke zlepšení vzhledu a stability nebo ke zpomalení absorpce.

Tablety/kapsle s okamžitým uvolňováním

Jsou to tuhé perorální dávkovači formy vyrobené konvenčními a novými postupy. Tyto formy léku jsou brány perorálně bez použití vody k okamžitému rozpuštění a působení léku. Aktivní složka se smíchá v tekutině obsahující takové složky jako sacharid, želatinu, pektin a sladidla. Tyto tekutiny jsou ztuženy do tuhých tablet nebo kapslí technikami sušení za zmrazrného stavu a extrakcí v pevné fázi. Sloučeniny léku mohou být zhuštěny viskoelastickými a termoelastickými sacharidy a polymery nebo efervescentními

145

ΦΦ Φ • * · • · φ · νφ »»·· • Φ φ» φ » · φ · φ φφφφ komponentami k produkování porézních matricí určených pro okamžité uvolňování bez potřeby použití vody.

Navíc mohou být sloučeniny předloženého vynálezu aplikovány ve formě nosních kapek nebo kalibrované dávky a nazálních nebo bukálních inhalátorů. Lék se uvolňuje z nazálního roztoku jako jemná pára nebo z prášku jako aerosol.

Nicméně odborné veřejnosti je jasné, že v předloženém vynálezu jsou možné různé modifikace. A i tyto modifikace jsou myšleny jako součást předloženého vynálezu.

Následující popis zahrnuje všechny uvažované podstatné údaje přístupné pro odbornou veřejnost k uplatnění patentových nároků předloženého vynálezu. Jelikož citované patentové přihlášky mohou poskytovat další užitečné údaje, jsou zde tyto citace uvedeny pouze jako odkaz.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

146

1. Sloučenina reprezentovaná vzorci:

kde U je CH, O nebo S;

Z je-C(R²)(R³), -CH-N(R²)(R³), C(R³)[(CH2)nR²], CH-C(R³)(R⁸)(CH2)nR², C[(CH2)nR²][CH(R³)(R⁸)]-[CH(R³)(R⁸)], C[(R³)][CH[(CH2)nR²](R⁸)];

substituent R¹ je H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH2)nNR¹⁰Rⁿ, (CH2)nORⁿ, (CH2)nSRⁿ nebo (CH2)nhalogen substituent R⁹ je (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂, (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, jejich estery nebo soli;

nebo substituenty R¹ a R⁹ spojeny dohromady reprezentují = O. nebo =<

’ s-f substituent R² je H, NHC(O)R⁵, NHC(S)R⁵, NHSO2R⁵, C(O)NHR⁵, SO2NHR⁵, CH2S(O)R⁵nebo CH2SO₂R⁵;

substituenty R³ a R⁸ jsou individuálně H, (CH2)nC(O)R¹⁰, (CH2)nCO₂R¹⁰, (CH2)mOR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(R¹⁰)m, C(O)N(R¹⁰)m, C(O)N(OR¹⁰)R¹⁰, (CH2)nN(R^l0)m, CH(R¹⁰)m, (CH2)n(R¹⁰)m, CH2CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH2CH(OR^w)CH2NHR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, C(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, NHR¹⁰, NHC(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, (CH2)m-X-W-Y, CH₂CH(X-WY)CH₂OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(OR¹⁰), CH(OR¹⁰)CH(X-WY)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2(X-W-Y), CH₂CH(X-W-Y)CH₂NHR¹⁰, CH(X-WY)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(NHR^w), CH(OR¹⁰)CH(X-W-Y)CH2NHR¹⁰ nebo CH(NHR¹⁰)CH2(X-W-Y);

za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentů R², R³ a R⁸ je jiný než H;

147 substituent R⁴ je H, (CH2)nOH, (CH^nOR¹¹, (CH2)nOC(O)R^H, (CH2)nNHC(NR¹¹)NHR¹¹, (CH2)nNR¹⁰Rⁿ, (CH2)nNH2, (CH2)nC(=NH)(NH2), (CH2)nNHC(=NRⁿ)NH2, (CH₂)nNHC(=NR⁷)NH2, (CH2)nCN, (CH2)nN3, C(=NH)NH2, C(NR⁷)NH2 nebo C(NRⁿ)NH₂;

substituent R⁵ je H, nižší alkyl, cykloalkyl, alkyl substituovaný halogenem, aryl, η

substituovaný aryl nebo CF ;

substituent R⁷ je H, (CH₂)nOH, (CH₂)nCN, (CH₂)nNH₂ nebo (CH₂)nNO₂;

substituent R¹⁰ je H, nižší alkyl, nižší alkylen, rozvětvený alkyl, cyklický alkyl, aromatické (CH₂)n, substituované aromatické (CH₂)n nebo pokud index m je 2 mohou být obě skupiny R¹⁰ také spojeny dohromady za vzniku N-substituovaného heterocyklického kruhu nebo jiného 5-členného nebo 6-členného heterocyklického kruhu;

substituent R¹¹ je nižší alkyl, rozvětvený alkyl, aromatické (CH₂)m, SO₂R¹⁰, C(O)R¹⁰ nebo C(O)OR¹⁰;

substituenty R¹² a R¹³ jsou H, (CH2)nOH, (CH2)nNH2, (CH2)nNR¹⁰Rⁿ, (CH2)nORⁿ, (CH₂)nF, (CH₂)nOC(O)Rⁿ, (CFbjnNHCťOjR¹¹ nebo X-W-Y;

index m je 1 nebo 2;

index nje 0 - 4;

index p je 0 nebo 1;

X je O, S, CH₂, nebo NH;

W je vložená skupina tvořená řetězcem 1 až 100 atomů a popřípadě také obsahující substituované atomy uhlíku a/nebo atomy dusíku a případně zahrnující atomy kyslíku a atomy síry; a

Y je H, OH, SH, NH₂, CH=O, CH=CH₂, CO₂H, CONHNH₂ nebo chráněná forma těchto funkčních skupin;

• · • · · • · · · ·

148
2. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená nižší alkylová skupina obsahuje 1 až asi 8 atomů uhlíku; a uvedená nižší alkylenová skupina obsahuje 2 až asi 8 atomů uhlíku.
3. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená nižší alkylová skupina obsahuje 1 až asi 3 atomy uhlíku; a uvedená nižší alkylenová skupina obsahuje 2 až 3 atomy uhlíku.
4. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená alkylová skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z methylu, ethylu, propylu, isopropylu, t-butylu, cyklopentylu a cyklohexylu, aromatická skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z fenylu a aromatických skupin substituovaných alkylem; substituované cykloalkylové skupiny obsahují 3-8 atomů uhlíku v kruhu a jsou substituovány 1 nebo 2 alkylovými skupinami majícími 1 - 6 atomů uhlíku, hydroxy skupinami nebo oběma; a alkylenová skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z vinylu, 1-propenylu, 2-methyl-2-propenylu a cyklopentenylu.
5. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená sůl je z kyseliny vybrané ze skupiny sestávající se z chlorovodíkové, bromovodíkové, sírové, dusičné, chloristé, fůmarové, maleinové, orthofosforečné, glykolové, mléčné, salicylové, sukcinové, p-toluensulfonové, vinné, octové, citrónové, methansulfonové, mravenčí, benzoové, malonové, 2naftalensulfonové, trifluoroctové a benzensulfonové kyseliny.
6. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená sůl je sodná nebo amonná sůl.

Sloučenina reprezentovaná vzorci:

149 kde substituent R³ je H, (CH2)nC(O)R¹⁰, (CH2)nCO₂R¹⁰, (CH2)mOR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(R¹⁰)m, C(O)N(R^,0)m, C(O)N(OR¹⁰)R¹⁰, (CH2)nN(R¹⁰)m, CH(R¹⁰)m, (CH2)n(R¹⁰)m, CH2CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH2CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, C(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, NHR¹⁰, NHC(=NR¹⁰)N(R¹⁰)m, (CH2)m-X-W-Y, CH₂CH(X-W-Y)CH₂OR¹⁰, CH(X-WY)CH(OR¹⁰)CH2OR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(OR¹⁰),CH(OR¹⁰)CH(X-W-Y)CH2OR¹⁰, CH(OR¹⁰)CH2(X-W-Y),CH₂CH(X-W-Y)CH₂NHR¹⁰,CH(X-W-Y)CH(OR¹⁰)CH2NHR¹⁰, CH(X-W-Y)CH2(NHR¹⁰), CH(OR^io)CH(X-W-Y)CH2NHR¹⁰ nebo CH(NHR¹⁰)CH2(X-W-Y);

substituent R⁴ je H, (CH2)nOH, (CH2)nOR^u, (CH2)nOC(O)Rⁿ, (CH2)nNHC(NR¹¹)NHR¹¹, (CH2)nNR^I0Rⁿ, (CH2)nNH2, (CH2)nC(=NH)(NH2), (CH2)nNHC(=NR^u)NH2, (CH₂)nNHC(=NR⁷)NH2, (CH2)nCN, (CH2)nN3, C(-NH)NH2, C(NR⁷)NH2 nebo C(NRⁿ)NH₂;

substituent R⁹ je (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂, (CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, = O, nebo -£) jejich estery nebo soli;

každý substituent R¹⁴ je individuálně H, (CH₂)nCO₂H, (CH₂)nSO₃H, (CH₂)nPO₃H₂, = O. nebo =<

(CH₂)nNO₂, CH(SCH₃)₃, ’ nebo jejich soli a estery a za předpokladu, že alespoň jeden ze substituentů R¹⁴ je H;

150 substituent R⁷ je H, (CH₂)nOH, (CH₂)nCN, (CH₂)nNH₂ nebo (CH₂)nNO₂;

substituent R^{9 10} je H, nižší alkyl, nižší alkylen, rozvětvený alkyl, cyklický alkyl, aromatické (CH₂)n, substituované aromatické (CH₂)n nebo pokud index m je 2 mohou být obě skupiny R¹⁰ také spojeny dohromady za vzniku N-substituovaného heterocyklického kruhu nebo jiného 5-členného nebo 6-členného heterocyklického kruhu;

substituent R¹¹ je nižší alkyl, rozvětvený alkyl, aromatické (CH₂)m, SO₂R¹⁰, C(O)R¹⁰ nebo C(O)OR¹⁰;

index m je 1 nebo 2;

index nje 0-4;

W je vložená skupina tvořená řetězcem 1 až 100 atomů a popřípadě také obsahující substituované atomy uhlíku a/nebo atomy dusíku a případně zahrnující atomy kyslíku a atomy síry; a

Y je H, OH, SH, NH₂, CH=O, CH=CH₂, CO₂H, CONHNH₂ nebo chráněná forma těchto funkčních skupin;
8. Sloučenina podle nároku 7, kde uvedená nižší alkylová skupina obsahuje 1 až asi 8 atomů uhlíků; a uvedená nižší alkylenová skupina obsahuje 2 až asi 8 atomů uhlíku.
9. Sloučenina podle nároku 7, kde uvedená nižší alkylová skupina obsahuje 1 až asi 3 atomy uhlíků; a uvedená nižší alkylenová skupina obsahuje 2 až 3 atomy uhlíku.
10. Sloučenina podle nároku 7, kde uvedená alkylová skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z methylu, ethylu, propylu, isopropylu, t-butylu, cyklopentylu a • ·

151 cyklohexylu, aromatická skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z fenylu a aromatických skupin substituovaných alkylem; substituované cykloalkylové skupiny obsahují 3-8 atomů uhlíku v kruhu a jsou substituovány 1 nebo 2 alkylovými skupinami majícími 1-6 atomů uhlíku, hydroxy skupinami nebo oběma; a alkylenová skupina je vybrána ze skupiny sestávající se z vinylu, 1-propenylu, 2-methyl-2-propenylu a cyklopentylu.
11. Sloučenina podle nároku 1, která je vybrána ze skupiny sestávající , podle předložené přihlášky, ze sloučenin a meziproduktů a jejich solí uvedených v příkladech 2, 3,

4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13,14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25,26, 27, 28, 29, 30,

31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56,

57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81,

82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97; 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104,

105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123,

124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142,

143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161,

162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180,

181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199,

200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208 a 209.
12. Sloučenina podle nároku 1, která je vybrána ze skupiny sestávající se, podle předložené přihlášky, ze sloučenin a meziproduktů a jejich farmaceuticky přijatelných solí uvedených v příkladech 58, 79, 150, 152, 153, 155, 156, 168, 169,170, 171, 172, 173, 189, 190, 199, 200, 201, 202, 209.
13. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl-3-(racetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-1 -karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

• * • · · ·

152 ··· · · · · · · · • · · · ·· · ···· • ······· · · · · · · · • · · ··· ···· • · · »· 1 ·· · ·
14. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1 S,2S,3R,4R, 1 'S)-(-)-Methyl-3-(l'acetylamino-2'-propyl)pentyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-l -karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
15. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,rS)-(-)-Ethyl-3-(l·acetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
16. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,2R,3S,4S,l'R)-(+)-Ethyl-3-(racetylamino-2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
17.Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,rS)-(-)-3-(r-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
18. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1R,2R,3S,4S, 1 R)-(+)-3-( 1 '-Acetylamino2'-ethyl)butyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-1 -karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
19. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,rS)-(-)-Ethyl-3-(l'acetylamino-2 '-ethyl)butyl-4-[(aminoimino)-methyl] amino-2-hydroxycyklopentan-1 karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
20. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-3-(racetylamino-2'-ethyl)butyl-4-[(N-methylaminoimino)methyl]amino-2hydroxycyklopentan-lkarboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

• · 4 4 4 4

4 4 4 4 ·· 4 · · · · • 4444444 · 4 4 4 44 4
21.Sloučenina podle nároku 1 vzorce (3R,4R,rS)-(-)-Methyl-3-(r-acetylamino-2'ethyl)butyl-4-aminocyklopent-l-en-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
22. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (3R,4R, 1 ’S)-(-)-3-( 1 '-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-aminocyklopent-l-en-l -karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
23. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (3R,4R, 1 'S)-(-)-3-( 1 -Acetylamino-2’ethyl)butyl-4-[(aminoimino)methyl]amino-cyklopent-l-en-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
24. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1S,2S,3R,4R, 1'S)-(-)-3 -(1Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-[(aminoifnino)methyl]-amino-2-hydroxycyklopentan-1 -karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
25. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,l'S)-(-)-3-(r-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-[(N-methylaminoimino)methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
26. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1 S,2S,3R,4R,rS)-(-)-3-(l'-Acetylamino-2'propyl)pentyl-4-[(aminoimino)-methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
27. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-Methyl-3-(racetylamino-2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
28. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1R,3R,4R, rS)-(-)-Ethyl-3-(l'-acetylamino2'-ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

• · · • · · φ φ ·

154 φ ·
29. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-3-(r-acetylamino2'-propyl)pentyl-4-aminocyklo-pentan-l-karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
30. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-3-(r-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
31. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-Ethyl-3-(l'-acetylamino2'-ethyl)butyl-4-[(aminoimino)-methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
32. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,rS)-(-)-Ethyl-3-(l'-acetylamino2'-ethyl)butyl-4-[(N-methylaminoimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylát; nebo jej í farmaceuticky přijatelná sůl.
33. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1R,3R,4R, 1 ’S)-(-)-3-( 1 '-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-[(aminoimino)methyl]-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
34. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,rS)-(-)-3-(r-Acetylamino-2propyl)pentyl-4-[(aminoimino)methyl]-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
35. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-3-(l'-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-[(N-methylaminoimino)methyl]aminocyklopentan-1 -karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

··· ······ · · ·· • · · ·· · · · · · ···· ·· ♦ ···· • · ···· ·· ·· ·· · · · • · · ··· · · · ·

155 ...... *’ *’
36. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,2S,3R,4R,rS)-(-)-3-(r-Acetylamino-2'propyl)pentyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
37. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,2R₅3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino2'-propyl)pentyl-4-amino-2-hydroxy-cyklopentan-1 -karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
38. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,2R,3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino2'-ethyl)butyl-4-[(aminoimino)-methyl]-amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
39. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,2R,3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino2'-propyl)pentyl-4-[(aminoimino)-methyl]amino-2-hydroxycyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
40. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lR,3R,4R,l'S)-(-)-3-(l'-Acetylamino-2'propyl)pentyl-4-aminocyklo-pentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
41. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
42. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (lS,3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino-2'ethyl)butyl-4-[(aminoimino)methyl]-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

156 • · · · • ♦ · · • · · · • · · · ·· ·♦
43. Sloučenina podle nároku 1 vzorce (1 S,3S,4S,rR)-(+)-3-(r-Acetylamino-2'propyl)pentyl-4-[(aminoimino)methyl]-aminocyklopentan-l-karboxylová kyselina; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
44. Přípravek pro inhibici neuraminidasy viru chřipky vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič a množství sloučeniny podle nároku 1 účinné pro inhibici neuraminidasy viru chřipky.
45. Způsob inhibice neuraminidasy viru chřipky vyznačující se tím, že zahrnuje aplikování, při potřebě takového ošetření, přípravku, který obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič a množství sloučeniny podle nároku 1 účinné pro inhibici neuraminidasy viru chřipky.
46. Způsob ošetření infekce virem chřipky vyznačující se tím, že zahrnuje aplikování, při potřebě takového ošetření, přípravku, který obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič a množství sloučeniny podle nároku 1 účinné pro inhibici neuraminidasy viru chřipky.