CS273502B1 - Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase - Google Patents
Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase Download PDFInfo
- Publication number
- CS273502B1 CS273502B1 CS74284A CS74284A CS273502B1 CS 273502 B1 CS273502 B1 CS 273502B1 CS 74284 A CS74284 A CS 74284A CS 74284 A CS74284 A CS 74284A CS 273502 B1 CS273502 B1 CS 273502B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tissue
- cellular
- agent
- protoplast cultures
- mitotic activity
- Prior art date
Links
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 title claims abstract description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 title abstract 3
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 claims abstract description 8
- 150000001768 cations Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 17
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- MAZWDMBCPDUFDJ-UHFFFAOYSA-N trans-Traumatinsaeure Natural products OC(=O)CCCCCCCCC=CC(O)=O MAZWDMBCPDUFDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MAZWDMBCPDUFDJ-VQHVLOKHSA-N traumatic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCC\C=C\C(O)=O MAZWDMBCPDUFDJ-VQHVLOKHSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000191398 Kalanchoe blossfeldiana Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008896 Opium Substances 0.000 description 1
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 1
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000006677 Vicia faba Species 0.000 description 1
- 235000010749 Vicia faba Nutrition 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000013452 biotechnological production Methods 0.000 description 1
- 230000008472 epithelial growth Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229960001027 opium Drugs 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940072033 potash Drugs 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Vynález se týká biochemické regulace biotechnologických výrobních procesů.The invention relates to the biochemical regulation of biotechnological production processes.
Je známo, že cytokininy jsou přidávány do kultivačních médií k zajištění mitotické aktivity. Je také známo, že syntetická kyselina traumatová zvyšuje ůst a dělení rostlinných parenchymatických buněk Kalanchos, Ehaseolus a Vicia faba (Zeitschrift fítr Botanik 45, 1-38 /1957/) a ve formě 2% suspense v 2% vodném Carbamaxu 6000 urychluje růst epitelu lidské kůže o 40 % (GB 1013109),It is known that cytokinins are added to culture media to provide mitotic activity. Synthetic traumatic acid is also known to increase the growth and division of plant parenchymatic cells Kalanchos, Ehaseolus and Vicia faba (Zeitschrift Filter Botanik 45, 1-38 (1957)) and as a 2% suspension in 2% aqueous Carbamax 6000 accelerates human epithelial growth leather by 40% (GB 1013109),
Přesto však biotechnologické procesy užívající tkáňových a/nebo buněčných kultur narážejí dosud na obtíže spojené 3 pouze krátkodobým dosažením dostatečně vysokého mitotického indexu během kultivačního cyklu.Nevertheless, biotechnological processes using tissue and / or cell cultures have hitherto encountered difficulties associated only with the short-term achievement of a sufficiently high mitotic index during the culture cycle.
Jak vyplývá z následujícího příkladu, použití sloučeniny obecného vzorce XOOC-CH=CH(CH2)nC00Y, kde X, Y = H nebo alkalický kov a konfigurace sloučeniny je trans, umožňuje zvýšit produktivitu tkáňových a/nebo buněčných a/nebo protoplastových kultur pěstovaných na kultivačních médiích, obsahujících cytokininy. Toto zvýšení produktivity souvisí a naším překvapivým zjištěním její nové vlastnosti, a to schopnosti prodloužit dobu dynamicky se udržujících dostatečně vysokých hodnot mitotické aktivity, nedosažitelné samotnými cytokininy. Jde o překvapivé nové zjištění synergického účinku cytokininů a sloučeniny obecného vzorceAs follows from the following example, the use of a compound of the formula XOOC-CH = CH (CH 2 ) n COOY, where X, Y = H or alkali metal and the configuration of the compound is trans, allows to increase productivity of tissue and / or cell and / or protoplast cultures grown on culture media containing cytokinins. This increase in productivity is related to our surprising finding of its new property, namely the ability to prolong the period of dynamically maintaining sufficiently high levels of mitotic activity unattainable by the cytokinins themselves. This is a surprising new finding of the synergistic effect of cytokinins and the compound of formula
X00C-CH=CH(GH2)nC00Y, kde Χ,Υ = H nebo alkalický kov a konfigurace sloučeniny je trans.X00C-CH = CH (GH 2 ) n C00Y, where Χ, Υ = H or an alkali metal and the configuration of the compound is trans.
Tím je dosahováno také technologicky žádoucího zvýšení produkce biomasy, zvýšení poctu buněk v kultuře během kultivačního cyklu a rychlejšího dosažení potřebného poctu buněk v tkáňové, buněčné nebo protoplastové kultuře během kultivačního nebo technologického cyklu.This also achieves a technologically desirable increase in biomass production, an increase in the number of cells in culture during the culture cycle and a faster achievement of the required number of cells in tissue, cell or protoplast culture during the culture or technological cycle.
Podstatou vynálezu je prostředek ke zvýšení produktivity a/nebo k prodloužení doby dynamicky se udržujících dostatečně vysokých hodnot mitotické aktivity tkáňových a/nebo buněčných a/nebo protoplastových kultur, přidávaný do kultivačního média, obsahujícího cytokininy, vyznačující se tím, že je tvořen sloučeninou obecného vzorceSUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a means for increasing productivity and / or extending the time of dynamically maintaining sufficiently high mitotic activity values of tissue and / or cell and / or protoplast cultures to be added to a cytokinin-containing culture medium comprising a compound of formula
X00C-CH=CH(CH2)nCOOY, kde X,Y je kation a konfigurace sloučeniny je trans. Prostředek podle vynálezu se dále objasňuje v příkladu.X00C-CH = CH (CH 2 ) n COOY, wherein X, Y is a cation and the configuration of the compound is trans. The composition of the invention is further illustrated by way of example.
PříkladExample
Ke standardnímu živnému roztoku pro suspensní buněčné kultury optimalizovanému pro buňky druhu Papaver somniferum (producenta opiových alkaloidů) tak, že obsahoval 0,1 mg kinetinu na litr roztoku, byly před inokulací přidány vodné roztoky X00C-CH= =CH(CH2)q-COOK, připravené rozpuštěním kyseliny traumatová v přebytku 10% vodného roztoku potaše KgCOyTo a standard suspension cell culture solution optimized for Papaver somniferum (opium alkaloid producer) cells containing 0.1 mg kinetin per liter of solution, aqueous solutions X00C-CH = CH (CH 2 ) q- were added prior to inoculation. COOK prepared by dissolving traumatic acid in an excess of a 10% aqueous solution of KgCO 3 potash
Etapy postupné výroby použité dikarboxylové kyseliny jsou popsány v československých patentech č, 115 653, 116 309, 117 125, 117 126, 11? 416, 123 604, 126 248,The stages of the gradual production of the dicarboxylic acid used are described in the Czechoslovak patents Nos. 115,653, 116,309, 117,125, 117,126,111 and 11,152,156. 416, 123 604, 126 248,
124 689 a autorských osvědčeních SSSR č. 173 741, 183 730, 185 880, 186 452, 188 951.124 689 and USSR copyright certificates No. 173 741, 183 730, 185 880, 186 452, 188 951.
Počáteční koncentrace buněk při inokulaci činila 70 000 buněk na 1 ml suspense.The initial cell concentration upon inoculation was 70,000 cells per ml suspension.
Experimentální pasážování (délka kultivačního cyklu) trvalo 15 dnů, pro' produkční fičely postačuje 12 až 13 dnů (po 12 dnech se dosahuje nejvyššího počtu živých buněk naThe experimental passage (length of the culture cycle) lasted 15 days, for production fellas 12 to 13 days is sufficient (after 12 days the highest number of viable cells per
CS 273502 Bl jednotku objemu). V následující tabulce uvádíme počet buněk na 1 ml suspense.CS 273502 B1 unit volume). The following table shows the number of cells per ml of suspension.
Počet dnů od počátku kultivač. cykluNumber of days from the beginning of the cultivator. cycle
V kultivačním médiu dosavadním optimalizovaném s 0,1 mg kinetinu na litrIn the culture medium previously optimized with 0.1 mg kinetin per liter
V kultivačním médiu podle vynálezu (s 0,1 mg kinetinu + 0,5 mg K00C-CH»CH(CH2)QC00K na litr)In the culture medium of the invention (with 0.1 mg kinetin + 0.5 mg K00C-CH 2 CH (CH 2 ) Q C00K per liter)
7,0 . 104 5 (1,2 ± 0,08) . 105 (2,9 - 0,09) . 105 (2,8 í 0,1) . 106 (1,1 t 0,04) . 106 7.0. 10 4 5 (1.2 ± 0.08). 10 5 (2.9 - 0.09). 10 5 (2.8 ± 0.1). 10 6 (1.1 t 0.04). 10 6
7,0 . 104 (1,5 ± 0,1) . 105 (1,0 í 0,02) . 10S (3,3 í 0,1) . IQ6 (2,1 í 0,04) . IQ6 7.0. 10 4 (1.5 ± 0.1). 10 5 (1.0 0,0 0.02). 10 S (3.3 ± 0.1). IQ 6 (2.1 0,0 0.04). IQ 6
Je tedy zřejmé, že přes optimalizaci kultivačního média z hlediska obsahu cytokininů zajistil prostředek podle vynálezu další zvýšení produkce biomasy (vyjádřené v počtu buněk na 1 ml suspense), časnější nástup potřebného počtu buněk na 1 ml suspense (buněčná koncentrace 10^ buněk/ml je dosahována již od osmého dne pasáže) i prodloužení (velmi žádoucí) časového úseku pasáže, ve kterém se dosahuje vysoké koncentrace buněk v kultivačním médiu. Časnějšího nástupu potřebného počtu buněk na 1 ml lze technologicky využít ke zkrácení výrobního cyklu.Thus, it is clear that despite the optimization of the culture medium for cytokinin content, the composition of the invention provided a further increase in biomass production (expressed in cell number per ml suspension), an earlier onset of required cell number per ml suspension (cell concentration achieved from the eighth day of the passage) as well as the extension (very desirable) of the passage time, in which a high concentration of cells in the culture medium is achieved. Earlier onset of the required number of cells per ml can be used technologically to shorten the production cycle.
V následující tabulce se uvádí hodnoty mitotické aktivity (v %, tj. hodnoty mitotiokého indexu) v závislosti na době od začátku kultivačního cyklu.The following table shows the mitotic activity values (in%, i.e., the mitothiotic index values) as a function of time from the start of the culture cycle.
Počet dnů od počátku kultivač. cykluNumber of days from the beginning of the cultivator. cycle
Mitotický index (v %) při koncentraci 0,1 mg kinetinu na litr živného roztoku a při přidání K00C-CH=»CH-(CH2)8-C00K ve výsledné koncentraciMitotic index (in%) at a concentration of 0.1 mg kinetin per liter of nutrient solution and with the addition of K00C-CH = »CH- (CH 2 ) 8 -C00K at the final concentration
CS 273502 BlCS 273502 Bl
Jak je zřejmé z průběhu hodnot mitotického indexu na semilogaritmickém papíru i z předchozí tabulky, při koncentraci 0,5 mg KOOC-CH=CH-(CH^)g-COOK na 1 litr kultivačního média v časovém rozpětí od 2 do 14,8 dnů patnáctidenního kultivačního cyklu bylo dosaženo vyšších hodnot mitotického indexu ve srovnání s kontrolou (kontrolní varianta je bez přidání zmíněné sloučeniny. Při koncentraci 50 mg/1 nabýval mitotický index hodnot vyšších, než 0,8 % v časovém rozpětí od 6 do 15 dnů, zatímco v kontrole v časovém roznětí od 2 do 12 dnů. Koncentrace 50 mg/1 je tedy vhodná v případě, že je zájem o zvýšení mitotické aktivity v závěru kultivačního cyklu.As can be seen from the course of the mitotic index values on the semilogarithmic paper and the previous table, at a concentration of 0.5 mg KOOC-CH = CH- (CH 2) g-COOK per liter of culture medium over a time span of 2 to 14.8 days 15 days At the concentration of 50 mg / l, the mitotic index reached values greater than 0.8% over a time span of 6 to 15 days, whereas in the control in a time period of 2 to 12 days, a concentration of 50 mg / l is therefore appropriate when there is an interest in increasing mitotic activity at the end of the culture cycle.
Při koncentraci 0,5 mg/1 je dosahováno hodnot mitotického indexu vyšších, nežAt a concentration of 0.5 mg / l, mitotic index values greater than 100 mg / l are achieved
1,6 $5 v časovém intervalu od 2,2 do 13,5 dní patnáctidenního kultivačního cyklu, zatímco v případě kontroly - v časovém rozmezí kratším (od 4,5 do 10,5 dne patnáctidenního kultivačního cyklu). Jak již bylo zmíněno výše, v tomto časovém intervalu je navíc (ve srovnání s kontrolou) dosahováno systematicky vyššího mitotického indexu.1.6 $ 5 in the time interval from 2.2 to 13.5 days of the 15-day culture cycle, while in the case of control - shorter (from 4.5 to 10.5 days of the 15-day culture cycle). As mentioned above, in this time interval, in addition to the control, a systematically higher mitotic index is achieved.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS74284A CS273502B1 (en) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS74284A CS273502B1 (en) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS74284A1 CS74284A1 (en) | 1990-08-14 |
CS273502B1 true CS273502B1 (en) | 1991-03-12 |
Family
ID=5340119
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS74284A CS273502B1 (en) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS273502B1 (en) |
-
1984
- 1984-02-01 CS CS74284A patent/CS273502B1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS74284A1 (en) | 1990-08-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Nitsch et al. | The induction of flowering in vitro in stem segments of Plumbago indica L. I. The production of vegetative buds | |
UA41324C2 (en) | method for the improvement of plants growth (variants), composition improving plants growth (variants) | |
MY101296A (en) | Heterocyclic compounds | |
Mante et al. | Propagation of Musa textilis Nee plants from apical meristem slices in vitro | |
Gaspar et al. | Hormonal control of isoperoxidases in lentil embryonic axis | |
CS273502B1 (en) | Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase | |
GB1535957A (en) | Compositions methods and compounds for influencing plant growth | |
DE1792004B2 (en) | PROCESS FOR THE BIOTECHNICAL PRODUCTION OF CITRIC ACID AND ITS SALT | |
Orús et al. | Manganese depletion in chloroplasts of Quercus rotundifolia during chemical simulation of lichen epiphytic states | |
ATE58453T1 (en) | METHODS OF CULTURE OF WATER HYACINTHS, PLANTS OBTAINED AND THEIR USES. | |
DE3866148D1 (en) | CHINOLINE CARBONIC ACID DERIVATIVES, THE COMPOSITION CONTAINING THE SAME, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THE USE THEREOF FOR THE PRODUCTION OF MEDICATIONS. | |
ES8105984A1 (en) | O-Pyrimidinyl esters of N,N-dimethyl carbamic acid, a process for their preparation and their use as parasiticides. | |
CS258253B1 (en) | Method of increasing mitotic index | |
ATE34176T1 (en) | 2'-CHLOROPENTOSTATIN, A PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SUCH COMPOUND, AND A MICROORGANISM FOR PRODUCTION OF SUCH COMPOUND. | |
ICHIHASHI | Studies on the media for orchid seed germination IV. Influence of the characteristics of some culture media on the growth of orchid seedlings | |
Street | Roots | |
Pestchanker et al. | The sesquiterpene lactone dihydroleucodin in tissue culture from Artemisia douglasiana | |
KR100198694B1 (en) | Process for preparing l-glutamine using corynebacterium sp. | |
CS258252B1 (en) | Resource ks increase the number of cells | |
Van Schreven | On the physiology of tuber formation in potatoes: V. Influence of vitamin B1 on tuber and sprout formation of potatoes aseptically grown in the dark | |
SU1711733A1 (en) | Nutrient solution for hydroponics basma growing | |
Borgen et al. | Homogenity and plant quality of in vitro propagated Nephrolepis exaltata'Bostoniensis' | |
Matthews | On the growth of some wine yeasts in synthetic media with special reference to vitamin requirements and amino acid utilization | |
Isenberg et al. | Interference with deposition of minerals in a coccolithophorid protozoon | |
SU1609827A1 (en) | Method of producing biomass of porphyridium single-cell algae |