CS273502B1 - Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase - Google Patents

Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase Download PDF

Info

Publication number
CS273502B1
CS273502B1 CS74284A CS74284A CS273502B1 CS 273502 B1 CS273502 B1 CS 273502B1 CS 74284 A CS74284 A CS 74284A CS 74284 A CS74284 A CS 74284A CS 273502 B1 CS273502 B1 CS 273502B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
tissue
cellular
agent
protoplast cultures
mitotic activity
Prior art date
Application number
CS74284A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CS74284A1 (en
Inventor
Jiri Prom Biol Ing Drsc Ponert
Ljudmila V Csc Frolova
Stanislav Ing Csc Dolezal
Zlata B Csc Samina
Raisa G Drsc Clen Kore Butenko
Jiri Prof Ing Drsc Jary
Original Assignee
Jiri Prom Biol Ing Drsc Ponert
Ljudmila V Csc Frolova
Dolezal Stanislav
Zlata B Csc Samina
Raisa G Drsc Clen Kore Butenko
Jary Jiri
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiri Prom Biol Ing Drsc Ponert, Ljudmila V Csc Frolova, Dolezal Stanislav, Zlata B Csc Samina, Raisa G Drsc Clen Kore Butenko, Jary Jiri filed Critical Jiri Prom Biol Ing Drsc Ponert
Priority to CS74284A priority Critical patent/CS273502B1/en
Publication of CS74284A1 publication Critical patent/CS74284A1/en
Publication of CS273502B1 publication Critical patent/CS273502B1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Existing difficulties of biotechnological processes connected with only short-term achieving of satisfactorily high mitotic activity is removed by chemical agent increasing productivity and/or prolonging the period of dynamically maintained, sufficiently high mitotic activity of tissue and/or cellular and/or protoplast cultures added into cultivation medium that contains cytokinins. Its general formula isXOOC-CH=CH(CH2)nCOOY,where X, Y is cation and the compound configuration is trans. An earlier and prolonged time interval is achieved with sufficient cellular production concentration. Higher concentrations of the agent increase mitotic index in the final phase of the cultivation cycle up to tenfold.

Description

Vynález se týká biochemické regulace biotechnologických výrobních procesů.The invention relates to the biochemical regulation of biotechnological production processes.

Je známo, že cytokininy jsou přidávány do kultivačních médií k zajištění mitotické aktivity. Je také známo, že syntetická kyselina traumatová zvyšuje ůst a dělení rostlinných parenchymatických buněk Kalanchos, Ehaseolus a Vicia faba (Zeitschrift fítr Botanik 45, 1-38 /1957/) a ve formě 2% suspense v 2% vodném Carbamaxu 6000 urychluje růst epitelu lidské kůže o 40 % (GB 1013109),It is known that cytokinins are added to culture media to provide mitotic activity. Synthetic traumatic acid is also known to increase the growth and division of plant parenchymatic cells Kalanchos, Ehaseolus and Vicia faba (Zeitschrift Filter Botanik 45, 1-38 (1957)) and as a 2% suspension in 2% aqueous Carbamax 6000 accelerates human epithelial growth leather by 40% (GB 1013109),

Přesto však biotechnologické procesy užívající tkáňových a/nebo buněčných kultur narážejí dosud na obtíže spojené 3 pouze krátkodobým dosažením dostatečně vysokého mitotického indexu během kultivačního cyklu.Nevertheless, biotechnological processes using tissue and / or cell cultures have hitherto encountered difficulties associated only with the short-term achievement of a sufficiently high mitotic index during the culture cycle.

Jak vyplývá z následujícího příkladu, použití sloučeniny obecného vzorce XOOC-CH=CH(CH2)nC00Y, kde X, Y = H nebo alkalický kov a konfigurace sloučeniny je trans, umožňuje zvýšit produktivitu tkáňových a/nebo buněčných a/nebo protoplastových kultur pěstovaných na kultivačních médiích, obsahujících cytokininy. Toto zvýšení produktivity souvisí a naším překvapivým zjištěním její nové vlastnosti, a to schopnosti prodloužit dobu dynamicky se udržujících dostatečně vysokých hodnot mitotické aktivity, nedosažitelné samotnými cytokininy. Jde o překvapivé nové zjištění synergického účinku cytokininů a sloučeniny obecného vzorceAs follows from the following example, the use of a compound of the formula XOOC-CH = CH (CH 2 ) n COOY, where X, Y = H or alkali metal and the configuration of the compound is trans, allows to increase productivity of tissue and / or cell and / or protoplast cultures grown on culture media containing cytokinins. This increase in productivity is related to our surprising finding of its new property, namely the ability to prolong the period of dynamically maintaining sufficiently high levels of mitotic activity unattainable by the cytokinins themselves. This is a surprising new finding of the synergistic effect of cytokinins and the compound of formula

X00C-CH=CH(GH2)nC00Y, kde Χ,Υ = H nebo alkalický kov a konfigurace sloučeniny je trans.X00C-CH = CH (GH 2 ) n C00Y, where Χ, Υ = H or an alkali metal and the configuration of the compound is trans.

Tím je dosahováno také technologicky žádoucího zvýšení produkce biomasy, zvýšení poctu buněk v kultuře během kultivačního cyklu a rychlejšího dosažení potřebného poctu buněk v tkáňové, buněčné nebo protoplastové kultuře během kultivačního nebo technologického cyklu.This also achieves a technologically desirable increase in biomass production, an increase in the number of cells in culture during the culture cycle and a faster achievement of the required number of cells in tissue, cell or protoplast culture during the culture or technological cycle.

Podstatou vynálezu je prostředek ke zvýšení produktivity a/nebo k prodloužení doby dynamicky se udržujících dostatečně vysokých hodnot mitotické aktivity tkáňových a/nebo buněčných a/nebo protoplastových kultur, přidávaný do kultivačního média, obsahujícího cytokininy, vyznačující se tím, že je tvořen sloučeninou obecného vzorceSUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a means for increasing productivity and / or extending the time of dynamically maintaining sufficiently high mitotic activity values of tissue and / or cell and / or protoplast cultures to be added to a cytokinin-containing culture medium comprising a compound of formula

X00C-CH=CH(CH2)nCOOY, kde X,Y je kation a konfigurace sloučeniny je trans. Prostředek podle vynálezu se dále objasňuje v příkladu.X00C-CH = CH (CH 2 ) n COOY, wherein X, Y is a cation and the configuration of the compound is trans. The composition of the invention is further illustrated by way of example.

PříkladExample

Ke standardnímu živnému roztoku pro suspensní buněčné kultury optimalizovanému pro buňky druhu Papaver somniferum (producenta opiových alkaloidů) tak, že obsahoval 0,1 mg kinetinu na litr roztoku, byly před inokulací přidány vodné roztoky X00C-CH= =CH(CH2)q-COOK, připravené rozpuštěním kyseliny traumatová v přebytku 10% vodného roztoku potaše KgCOyTo a standard suspension cell culture solution optimized for Papaver somniferum (opium alkaloid producer) cells containing 0.1 mg kinetin per liter of solution, aqueous solutions X00C-CH = CH (CH 2 ) q- were added prior to inoculation. COOK prepared by dissolving traumatic acid in an excess of a 10% aqueous solution of KgCO 3 potash

Etapy postupné výroby použité dikarboxylové kyseliny jsou popsány v československých patentech č, 115 653, 116 309, 117 125, 117 126, 11? 416, 123 604, 126 248,The stages of the gradual production of the dicarboxylic acid used are described in the Czechoslovak patents Nos. 115,653, 116,309, 117,125, 117,126,111 and 11,152,156. 416, 123 604, 126 248,

124 689 a autorských osvědčeních SSSR č. 173 741, 183 730, 185 880, 186 452, 188 951.124 689 and USSR copyright certificates No. 173 741, 183 730, 185 880, 186 452, 188 951.

Počáteční koncentrace buněk při inokulaci činila 70 000 buněk na 1 ml suspense.The initial cell concentration upon inoculation was 70,000 cells per ml suspension.

Experimentální pasážování (délka kultivačního cyklu) trvalo 15 dnů, pro' produkční fičely postačuje 12 až 13 dnů (po 12 dnech se dosahuje nejvyššího počtu živých buněk naThe experimental passage (length of the culture cycle) lasted 15 days, for production fellas 12 to 13 days is sufficient (after 12 days the highest number of viable cells per

CS 273502 Bl jednotku objemu). V následující tabulce uvádíme počet buněk na 1 ml suspense.CS 273502 B1 unit volume). The following table shows the number of cells per ml of suspension.

Počet dnů od počátku kultivač. cykluNumber of days from the beginning of the cultivator. cycle

V kultivačním médiu dosavadním optimalizovaném s 0,1 mg kinetinu na litrIn the culture medium previously optimized with 0.1 mg kinetin per liter

V kultivačním médiu podle vynálezu (s 0,1 mg kinetinu + 0,5 mg K00C-CH»CH(CH2)QC00K na litr)In the culture medium of the invention (with 0.1 mg kinetin + 0.5 mg K00C-CH 2 CH (CH 2 ) Q C00K per liter)

7,0 . 104 5 (1,2 ± 0,08) . 105 (2,9 - 0,09) . 105 (2,8 í 0,1) . 106 (1,1 t 0,04) . 106 7.0. 10 4 5 (1.2 ± 0.08). 10 5 (2.9 - 0.09). 10 5 (2.8 ± 0.1). 10 6 (1.1 t 0.04). 10 6

7,0 . 104 (1,5 ± 0,1) . 105 (1,0 í 0,02) . 10S (3,3 í 0,1) . IQ6 (2,1 í 0,04) . IQ6 7.0. 10 4 (1.5 ± 0.1). 10 5 (1.0 0,0 0.02). 10 S (3.3 ± 0.1). IQ 6 (2.1 0,0 0.04). IQ 6

Je tedy zřejmé, že přes optimalizaci kultivačního média z hlediska obsahu cytokininů zajistil prostředek podle vynálezu další zvýšení produkce biomasy (vyjádřené v počtu buněk na 1 ml suspense), časnější nástup potřebného počtu buněk na 1 ml suspense (buněčná koncentrace 10^ buněk/ml je dosahována již od osmého dne pasáže) i prodloužení (velmi žádoucí) časového úseku pasáže, ve kterém se dosahuje vysoké koncentrace buněk v kultivačním médiu. Časnějšího nástupu potřebného počtu buněk na 1 ml lze technologicky využít ke zkrácení výrobního cyklu.Thus, it is clear that despite the optimization of the culture medium for cytokinin content, the composition of the invention provided a further increase in biomass production (expressed in cell number per ml suspension), an earlier onset of required cell number per ml suspension (cell concentration achieved from the eighth day of the passage) as well as the extension (very desirable) of the passage time, in which a high concentration of cells in the culture medium is achieved. Earlier onset of the required number of cells per ml can be used technologically to shorten the production cycle.

V následující tabulce se uvádí hodnoty mitotické aktivity (v %, tj. hodnoty mitotiokého indexu) v závislosti na době od začátku kultivačního cyklu.The following table shows the mitotic activity values (in%, i.e., the mitothiotic index values) as a function of time from the start of the culture cycle.

Počet dnů od počátku kultivač. cykluNumber of days from the beginning of the cultivator. cycle

Mitotický index (v %) při koncentraci 0,1 mg kinetinu na litr živného roztoku a při přidání K00C-CH=»CH-(CH2)8-C00K ve výsledné koncentraciMitotic index (in%) at a concentration of 0.1 mg kinetin per liter of nutrient solution and with the addition of K00C-CH = »CH- (CH 2 ) 8 -C00K at the final concentration

0 mg/1 (« kontrola) 0 mg / 1 («control) 0,5 mg/1 0.5 mg / l 50 mg/1 50 mg / l 0 0 0,20 0.20 0,20 0.20 0,20 0.20 1 1 0,58 0.58 0,21 0.21 0,24 0.24 3 3 1,13 1.13 2,50- 2,50- 0,01 0.01 5 5 1,84 1.84 3,23 3.23 0,38 0.38 8 8 3,44 3.44 3,32 3.32 1,90 1.90 12 12 0,93 0.93 2,84 2.84 3,00 3.00 15 15 Dec 0,17 0.17 0,12 0.12 1,65 1.65

CS 273502 BlCS 273502 Bl

Jak je zřejmé z průběhu hodnot mitotického indexu na semilogaritmickém papíru i z předchozí tabulky, při koncentraci 0,5 mg KOOC-CH=CH-(CH^)g-COOK na 1 litr kultivačního média v časovém rozpětí od 2 do 14,8 dnů patnáctidenního kultivačního cyklu bylo dosaženo vyšších hodnot mitotického indexu ve srovnání s kontrolou (kontrolní varianta je bez přidání zmíněné sloučeniny. Při koncentraci 50 mg/1 nabýval mitotický index hodnot vyšších, než 0,8 % v časovém rozpětí od 6 do 15 dnů, zatímco v kontrole v časovém roznětí od 2 do 12 dnů. Koncentrace 50 mg/1 je tedy vhodná v případě, že je zájem o zvýšení mitotické aktivity v závěru kultivačního cyklu.As can be seen from the course of the mitotic index values on the semilogarithmic paper and the previous table, at a concentration of 0.5 mg KOOC-CH = CH- (CH 2) g-COOK per liter of culture medium over a time span of 2 to 14.8 days 15 days At the concentration of 50 mg / l, the mitotic index reached values greater than 0.8% over a time span of 6 to 15 days, whereas in the control in a time period of 2 to 12 days, a concentration of 50 mg / l is therefore appropriate when there is an interest in increasing mitotic activity at the end of the culture cycle.

Při koncentraci 0,5 mg/1 je dosahováno hodnot mitotického indexu vyšších, nežAt a concentration of 0.5 mg / l, mitotic index values greater than 100 mg / l are achieved

1,6 $5 v časovém intervalu od 2,2 do 13,5 dní patnáctidenního kultivačního cyklu, zatímco v případě kontroly - v časovém rozmezí kratším (od 4,5 do 10,5 dne patnáctidenního kultivačního cyklu). Jak již bylo zmíněno výše, v tomto časovém intervalu je navíc (ve srovnání s kontrolou) dosahováno systematicky vyššího mitotického indexu.1.6 $ 5 in the time interval from 2.2 to 13.5 days of the 15-day culture cycle, while in the case of control - shorter (from 4.5 to 10.5 days of the 15-day culture cycle). As mentioned above, in this time interval, in addition to the control, a systematically higher mitotic index is achieved.

Claims (1)

PŘEDMĚT VYNÁLEZUSUBJECT OF THE INVENTION Prostředek ke zvýšení produktivity a/nebo k prodloužení doby dynamicky se udržujících dostatečně vysokých hodnot mitotické aktivity tkáňových a/nebo buněčných a/nebo protoplastových kultur přidávaný do kultivačního média, obsahujícího cytokininy, vyznačující se tím, že je tvořen sloučeninou obecného vzorceA means for increasing productivity and / or extending the time of dynamically maintaining sufficiently high mitotic activity values of tissue and / or cell and / or protoplast cultures added to a culture medium containing cytokinins, characterized in that it is composed of a compound of the formula X00C-CH==ch(CH2)nC00Y, kde X,Y je kation a konfigurace sloučeniny je transX00C-CH == CH (CH 2) n C00Y, wherein X, Y is a cation and configuration of the compound is trans
CS74284A 1984-02-01 1984-02-01 Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase CS273502B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS74284A CS273502B1 (en) 1984-02-01 1984-02-01 Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS74284A CS273502B1 (en) 1984-02-01 1984-02-01 Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS74284A1 CS74284A1 (en) 1990-08-14
CS273502B1 true CS273502B1 (en) 1991-03-12

Family

ID=5340119

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS74284A CS273502B1 (en) 1984-02-01 1984-02-01 Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS273502B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
CS74284A1 (en) 1990-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Nitsch et al. The induction of flowering in vitro in stem segments of Plumbago indica L. I. The production of vegetative buds
UA41324C2 (en) method for the improvement of plants growth (variants), composition improving plants growth (variants)
MY101296A (en) Heterocyclic compounds
Mante et al. Propagation of Musa textilis Nee plants from apical meristem slices in vitro
Gaspar et al. Hormonal control of isoperoxidases in lentil embryonic axis
CS273502B1 (en) Agent for tissue and/or cellular and/or protoplast cultures productivity increase
GB1535957A (en) Compositions methods and compounds for influencing plant growth
DE1792004B2 (en) PROCESS FOR THE BIOTECHNICAL PRODUCTION OF CITRIC ACID AND ITS SALT
Orús et al. Manganese depletion in chloroplasts of Quercus rotundifolia during chemical simulation of lichen epiphytic states
ATE58453T1 (en) METHODS OF CULTURE OF WATER HYACINTHS, PLANTS OBTAINED AND THEIR USES.
DE3866148D1 (en) CHINOLINE CARBONIC ACID DERIVATIVES, THE COMPOSITION CONTAINING THE SAME, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THE USE THEREOF FOR THE PRODUCTION OF MEDICATIONS.
ES8105984A1 (en) O-Pyrimidinyl esters of N,N-dimethyl carbamic acid, a process for their preparation and their use as parasiticides.
CS258253B1 (en) Method of increasing mitotic index
ATE34176T1 (en) 2'-CHLOROPENTOSTATIN, A PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SUCH COMPOUND, AND A MICROORGANISM FOR PRODUCTION OF SUCH COMPOUND.
ICHIHASHI Studies on the media for orchid seed germination IV. Influence of the characteristics of some culture media on the growth of orchid seedlings
Street Roots
Pestchanker et al. The sesquiterpene lactone dihydroleucodin in tissue culture from Artemisia douglasiana
KR100198694B1 (en) Process for preparing l-glutamine using corynebacterium sp.
CS258252B1 (en) Resource ks increase the number of cells
Van Schreven On the physiology of tuber formation in potatoes: V. Influence of vitamin B1 on tuber and sprout formation of potatoes aseptically grown in the dark
SU1711733A1 (en) Nutrient solution for hydroponics basma growing
Borgen et al. Homogenity and plant quality of in vitro propagated Nephrolepis exaltata'Bostoniensis'
Matthews On the growth of some wine yeasts in synthetic media with special reference to vitamin requirements and amino acid utilization
Isenberg et al. Interference with deposition of minerals in a coccolithophorid protozoon
SU1609827A1 (en) Method of producing biomass of porphyridium single-cell algae