CS271293B1 - Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 Download PDFInfo
- Publication number
- CS271293B1 CS271293B1 CS888157A CS815788A CS271293B1 CS 271293 B1 CS271293 B1 CS 271293B1 CS 888157 A CS888157 A CS 888157A CS 815788 A CS815788 A CS 815788A CS 271293 B1 CS271293 B1 CS 271293B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- type
- herpes simplex
- monoclonal antibody
- virus
- Prior art date
Links
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 14
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 5
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 230000003322 aneuploid effect Effects 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
1 CS 271293 B1
Vynález sa týká nového hybridómu, t.j. hybridného jednobunkového organizmu, zostro-jeného fúziou mySej myelómovej buňky Sp2/O a myšej slezinovej lymfoidnej buňky, produ-kujúcej protilátku voči virusu Herpes simplex typ 1. U virusu Herpes simplex rozoznávame dva antigénne odliSné typy Herpes simplex typ la typ 2. Ooteraz sa protilátky (antiséra) voči virusu Herpes simplex typ 1 připravova-li imunizáciou pokusných zvierat, najčastejSie králikov, purifikovaným alebo nepurifiko-vaným vírusom resp. niektorým izolovaným proteínom /Forghani B., Schmidt N., LennetteE. H.i Solid phase radioimmunoassay for Identification of herpesvirus hominis types iand 2 from clinical materiál. Appl. Microbiol. 28, /1974/ 661 - 667? Oreesman G. R.,watson D. 0., Courtney R. 3., Adam E., Melnick □ . L.: Oetection of herpesvirus type- * -specific antibody by microsolid-phase radioimmunometric assay? Intervirology 12, /1979/ 115 - 119). Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po viacerých dávkáchantigénu, slúžilo ako zdroj protilátok tzv. typovoSpecifických, ktoré sa využívali nadokaž antigénu virusu Herpes simplex typ 1 v základnom výskume a v imunodiagnostickejpraxi. Vzhladom na to, že virusy Herpes simplex typ l a 2 obsahujú nielen typovošpeci-fické, ale aj typovo spoločné antigénne determinanty, takto připravené antiséra voči vi-rusu Herpes simplex obsahujú vysoké hladiny typovospoločných protilátok, ktoré slažujúresp. úplné znemožňujú správné určenie typu infikujúceho virusu pri diagnostickom tes-tovaní. Typovospoločné protilátky sa obvykle odstraňujú zo sér vysycováním s vírusomHerpes simplex typ 2, čo je procedúra velmi náročná na materiál a naviac len v malompočte prípadov úspeSná. Výrobně Šarže konvenčných typovoSpecifických antisér sa dajúlažko Standardizovat a bývajú v Sirokom rozmedzí kvality, v poslednom čase sa s úspe-chom používájú na typizáciu virusu Herpes simplex typ 1 monoklonálne protilátky tzv.typovoSpecifické, ktoré sú schopné detegovat infekciu vírusom Herpes simplex typ 1v klinickom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz používaných postupov sa nevyskytnú, ak je k dispozíciihybridómova bankové línia produkujúca typovoSpecifickú monoklonálnu protilátku vočivirusu Herpes simplex typ 1, ktorá je uložená v zbierke hybridómov Virologického ústa-vu SAV, Mlýnská dolina l, Bratislava pod označením VÚ T51/3.
Uvedený hybridám bol získaný sposobom známým z odbornej literatúry (Kohler, G.,
Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined spe-cifity. Nátur, 256 /1975/, 495., Gerhard, W.: Fusion of cells in suspension and out-growth of hybride in conditioned medium. Monoclonal antibodies: A new dimension inBiological analyses. Kennett R. H. a spol., eds New York, Plenům Press /1980/, 37C).
Hybridně buňky získané po fúzi i myších myelámových Sp2/0 buniek a buniek získaných zosleziny myši BALB/c imunizovanej extraktom buniek infikovaných vírusom Herpes simplextyp 1, boli klonované, a po otestovaní bol vybraný klon VÚ T51/3. Výhodou hybridómu je,že produkuje homogénnu protilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá je schopná Spe-cificky reagoval s vírusom Herpes simplex typ 1. Hybridám VÚ T51/3 možno kultivovalin vitro v médiach vhodných pre živočišné buňky alebo in vivo v perritoneálnej dutiněmyši kmeňa BALB/c. z konzerv zmrazených buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možnozačal produkciu protilátky bez áalšej imunizácie zvierala antigénom. k i Příklad:
Za účelom získania váčšieho množstva monoklonálnej protilátky VÚ T51/3 kultiváciouhybridómov buniek in vivo, 5x10® buniek sa aplikovalo do peritoneálnej dutiny mySí.
Pre lepšie uchytenie buniek bola myš 15 dní před aplikáciou buniek premedikovaná para-fínovým olejom /0,5 ml antraperitoneálne na l myš/, po 10 dňoch rastu hybridómu v pe-ritoneálnej dutině, bola myš zabitá a vyprodukovaná ascitická tekutina odobrané. Týmtopostupem možno priemerne získat asi 7 ml ascitickej tekutiny obsahujúcej 8 mg/ml proti-látky. Ascitická tekutina obsahujúca produkt hybridómu νΰ T51/3 vykazovala špecifickúvazbu k virusu Herpes simplex typ i v rádioimunoanalytickom teste /ria/, v imunoenzyms-tickej analýze /ELISA/ a v imunofluorescenčnom teste /IF/.
Claims (2)
- CS 271293 B1
- 2 Buňky hybridómu VÚ T51/3 rastů in vitro ako polosuspenzná kultúra. Majů gulatýtvar a velkost charakteristická pre myelómove buňky. Obsahujú fúzované buňkové jadrá,sú aneuploidne. Buňky hybridómu VÚ T51/3 májů ultraštruktúrny obraz typických myeló-mových buniek, kde prevažujúcou orgánelou su volné a na membránu viazané polyribozó-my. základným kultivačným médiora je Dulbeccova modifikacla Eagleovho minimálnehoesenciálneho média (Dulbecco, R., Freeman, G., Virology 8/1959/, 396). Toto médium,označované ako OMEM, je pre kultiváciu hybridómu doplněné gentaraycínom a inaktivova-ným prekolostrólnym telacím sérom (10%, Bioveta, Ivanovice na Hané). Hybridóm je kul-tivovaný pri 37 °C v atmosféře 5% COz· Jeho generačně doba je přibližné 24 h. produkováná protilátka je monoklonály imunoglobín podtriedy igG 2b. Hybridóm VÚ T51/3 móže byt využívaný ako zdroj protilátky voči virusu Herpessimplex typ 1, ktorá aa da použit na kvalitatívny dókaz přítomnosti virusu Herpes siraplex typ 1 vo vyšetrovanom materiále, na kvantitativné stanovenie množstva infikujúceho virusu, pri vyhodnocovaní epidemiologickéj situácie a ako zdroj protilátky jedinejpodtriedy (igG 2b) pre přípravu antisér Specifických pre uvedená podtriedu. PREDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm VÚ T51/3, produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy igG 2b voči virusu Herpes simplex typ 1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888157A CS271293B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888157A CS271293B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815788A1 CS815788A1 (en) | 1989-11-14 |
| CS271293B1 true CS271293B1 (en) | 1990-09-12 |
Family
ID=5431777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888157A CS271293B1 (en) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS271293B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888157A patent/CS271293B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815788A1 (en) | 1989-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Russell et al. | Monoclonal antibodies against adenovirus type 5: preparation and preliminary characterization | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| CN105675873A (zh) | 一种检测试剂盒及其应用 | |
| Brocchi et al. | Development of two novel monoclonal antibody-based ELISAs for the detection of antibodies and the identification of swine isotypes against swine vesicular disease virus | |
| Osterhaus et al. | Monoclonal antibodies to polioviruses: Production of specific monoclonal antibodies to the Sabin vaccine strains | |
| Torfason et al. | Indirect and reverse radioimmunoassays and their apparent specificities in the detection of antibodies to enteroviruses in human sera | |
| EP0100955A2 (en) | Monoclonal immunoglobulin M antibodies and method of preparation | |
| Lenkei et al. | High correlations of anti-CMV titers with lymphocyte activation status and CD57 antibody-binding capacity as estimated with three-color, quantitative flow cytometry in blood donors | |
| Howes et al. | Mouse hybrid cell lines produce antibodies to herpes simplex virus type 1 | |
| CN114656552A (zh) | 抗马立克氏病毒单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及检测试剂盒应用 | |
| US5130232A (en) | Monoclonal antibody immunoassay kit for avian reticuloendotheliosis virus | |
| Flaegstad et al. | Neutralization test for BK virus: plaque reduction detected by immunoperoxidase staining | |
| CS271293B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu t51/3 | |
| CN116790509B (zh) | 一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用 | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| Haikin et al. | Determination of specific IGA antibodies to varicella zoster virus by immunoperoxidase assay. | |
| Dawson et al. | Monoclonal antibodies to hepatitis A virus | |
| CN110607282B (zh) | 牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用 | |
| US4572896A (en) | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides | |
| CS270195B1 (sk) | Myší lymfocytárny hybridóm VÚ 809/5 | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| CS271292B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridoma vu 440/2 | |
| Nielsen et al. | A biotin—avidin-amplified inhibition enzyme immunoassay for detection of CMV antibodies in human serum | |
| US20030044849A1 (en) | Methods for screening monoclonal antibodies on heterogeneous antigen substrates | |
| CS270192B1 (sk) | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |